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Estudo fitoquímico e atividades biológicas das folhas de Pereskia aculeata Miller (Cactaceae)

Pinto, Nícolas de Castro Campos 06 July 2012 (has links)
Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-05-12T14:35:46Z No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 2099085 bytes, checksum: a830886c9d165a166c290b802c42fbfc (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-12T15:42:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 2099085 bytes, checksum: a830886c9d165a166c290b802c42fbfc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T15:42:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 2099085 bytes, checksum: a830886c9d165a166c290b802c42fbfc (MD5) Previous issue date: 2012-07-06 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Pereskia aculeata Miller, popularmente conhecida como ora-pro-nobis, é uma trepadeira arbustiva cujas folhas são empregadas na culinária tradicional de algumas regiões do Brasil. Na medicina popular, são utilizadas como cicatrizantes e no abrandamento de processos inflamatórios. Para contribuir com os estudos sobre P. aculeata, a caracterização fitoquímica de seu extrato bruto metanólico e partições, além do doseamento de fenóis e flavonoides e da pesquisa por compostos indólicos. In vitro, foi avaliada a atividades citotóxica para macrófagos normais, células HL60 e MCF-7 e parasitos do gênero Leishmania pelo método do MTT e a atividade antimicrobiana pelo método de microdiluição em caldo. Além disso, avaliou-se, in vivo, a atividade anti-inflamatória do extrato bruto pelo modelo de edema de orelha induzido pelo óleo de cróton e a atividade antinociceptiva do extrato bruto e partições pelo método de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético. Uma vez que a partição hidrometanólica demonstrou maior potencial antinociceptivo, esta também foi estudada pelos testes da formalina, tail-flick e contorções abdominais induzidas pelo ácido acético em animais pré-tratados com pclorofenilalanina (PCPA). O perfil cromatográfico da partição hidrometanólica foi determinado por CLAE. Todas as classes de constituintes químicos pesquisados foram encontrados, à exceção de triterpenos e saponinas. Alcaloides, flavonoides e compostos indólicos foram encontrados em todas as amostras estudadas. A partição em diclorometano apresentou maiores concentrações de fenóis e flavonoides. O extrato bruto e algumas partições demonstraram toxicidade diante de células HL60 e MCF-7. Nenhuma das amostras apresentou toxicidade para macrófagos normais, parasitos do gênero Leishmania e para as estirpes de bactérias testadas. No ensaio do edema de orelha, o extrato bruto apresentou atividade edematogênica via oral, e a análise histológica dos fragmentos de orelha sugeriu que o edema não deve ter sido causado por um aumento do processo inflamatório. O estudo mais aprofundado da partição hidrometanólica revelou que seu mecanismo de ação antinociceptivo se dá a nível periférico e central, não associado à ativação de receptores opióides ou à liberação e síntese de serotonina. A análise por CLAE revelou a presença de substâncias cujo espectro UV é típico de compostos indólicos. Segundo a literatura, as folhas de P. aculeata são ricas em triptofano, aminoácido precursor da serotonina, um dos mediadores inflamatórios vasodilatores e um dos neurotransmissores que atuam inibindo a nocicepção a nível central. Nas plantas, o triptofano dá origem aos alcalóides indólicos, compostos estruturalmente semelhantes à serotonina. Assim, levanta-se a hipótese de que alcalóides indólicos estejam contribuindo para os efeitos observados in vivo para o extrato bruto e a partição hidrometanólica. / Pereskia aculeata Miller, known as ora-pro-nobis, is a climbing shrub which leaves are used in tradicional cuisine in Brazil. The leaves are used in folk medicine in skin wound healing and to treat inflammation. To contribute to the studies on P. aculeata, the phytochemical characterization of its crude methanol extract and partitions, the quantification of phenols and flavonoids and the search for indoles compounds were carried out. In vitro, we tested the cytotoxic activity to normal macrophages, HL60 and MCF-7 cells and parasites of the genus Leishmania by MTT method and also antimicrobial activity by microdilution method. Furthermore, we evaluated the in vivo anti-inflammatory activity of the crude extract by the model of ear edema induced by croton oil and antinociceptive activity of crude extract and partitions by acetic acidinduced writhing test. Since hydromethanolic partition showed the greatest antinociceptive potential, it was also studied by acetic acid-induced writhing test in animals pretreated with p-chlorophenylalanine (PCPA), formalin and tail-flick tests. The chromatographic profile of the hydromethanolic partition was determined by HPLC. All classes of chemical constituents investigated were found, with the exception of triterpenes and saponins. Alkaloids, flavonoids and indoles were found in all samples. Dichloromethane partition showed higher phenols and flavonoids contents. Crude extract and some partitions showed cytotoxicity against HL60 and MCF-7 cells. None of the samples showed cytoxicity against normal macrophages, Leishmania parasites or bacteria strains. Crude extract showed edematogenic activity in croton oil test when administered orally, but the histological analysis of the ears suggested that the edema should not have been caused by an increase in inflammatory process. The study further revealed that the antinociceptive mechanism of hydromethanolic partition was peripheral and central, but not related to opioid receptors or serotonin synthesis and release. HPLC analysis revealed the presence of indoles in this partition. The leaves of P. aculeata are rich in tryptophan, a serotonin precursor. Serotonin is a vasodilator and a neurotransmitter which inhibits central nociception. In plants, tryptophan leads to indole alkaloids, structurally similar to serotonin. Thus, we hypothesize that indole alkaloids are involved in the in vivo activities observed for crude extract and hydrometanolic partition.
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Estudo das atividades anti-inflamatória e cicatrizante das folhas de Pereskia aculeata Miller (Cactaceae)

Pinto, Nícolas de Castro Campos January 2017 (has links)
Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-08-16T13:49:34Z No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 5110143 bytes, checksum: 3651bb8aceb783037e5431de43b30d28 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: on 2017-08-16T16:13:56Z (GMT) / Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-08-17T10:31:13Z No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 5110143 bytes, checksum: 3651bb8aceb783037e5431de43b30d28 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-17T11:34:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 5110143 bytes, checksum: 3651bb8aceb783037e5431de43b30d28 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T11:34:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nicolasdecastrocampospinto.pdf: 5110143 bytes, checksum: 3651bb8aceb783037e5431de43b30d28 (MD5) Previous issue date: 2017 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / As folhas de Pereskia aculeata Miller (Cactaceae) são empregadas na medicina popular como cicatrizantes e anti-inflamatórias. Para contribuir na investigação do potencial químico e farmacológico das folhas dessa espécie, este trabalho visou avaliar in vivo a atividade anti-inflamatória da partição hexânica (PHEX) obtida do extrato bruto metanólico (EBM) das folhas, sua atividade antipsoriática tópica e a atividade cicatrizante tópica in vivo de PHEX e EBM, bem como a caracterização química de PHEX por cromatografia com fase gasosa associada à espectrometria de massas. Para estudo da atividade anti-inflamatória tópica aguda de PHEX utilizou-se o teste do edema de orelha induzido por diferentes agentes flogísticos: óleo de cróton, ácido araquidônico, etilfenilpropiolato, capsaicina, fenol e histamina. Para a avaliação da atividade anti-inflamatória tópica crônica foi utilizado o teste do edema de orelha induzido por aplicações múltiplas de óleo de cróton seguido de análise histopatológica. O mecanismo de ação anti-inflamatório tópico de PHEX foi proposto com base em sua resposta diante do desafio com os diferentes estímulos inflamatórios, com o auxílio da dosagem de citocinas no tecido inflamado e por meio do teste do edema de orelha induzido por óleo de cróton após pré-tratamento com mifepristona, um antagonista dos receptores de glicocorticoides. A atividade anti-inflamatória via oral de PHEX foi também avaliada in vivo pelo modelo de edema de orelha induzido por aplicação única e múltipla de óleo de cróton. A atividade antioxidante de PHEX foi estudada in vitro com o ensaio de DPPH por bioautografia, teste do β-caroteno/ácido linoleico e método do fosfomolibdênio. A atividade antipsoriática tópica foi avaliada por meio do teste do mouse tail. A atividade cicatrizante foi estudada in vivo pelo modelo de feridas excionais em camundongos com acompanhamento da perfusão por imagiologia laser Doppler (LDPI) e análise histopatológica das lesões ao final do experimento. Foi também estudada a toxidade tópica de PHEX por meio dos testes de irritação/corrosão dérmica e atrofia cutânea. PHEX apresentou notável atividade anti-inflamatória tópica crônica e aguda diante do desafio com todos os agentes flogísticos, exceto ácido araquidônico, além de ação antipsoriática no teste do mouse tail. Seu mecanismo de ação está relacionado, ao menos em parte, a um efeito glicocorticoide. Por essa razão, foi desenvolvida uma formulação farmacêutica na forma de creme contendo PHEX, cuja atividade anti-inflamatória aguda e crônica foi avaliada pelo teste do edema de orelha induzido por aplicação única e múltipla de óleo de cróton. Devido aos promissores resultados, uma patente do produto foi depositada no Instiuto Nacional da Propriedade Intelectual (INPI). A atividade anti-inflamatória aguda via oral foi apenas moderada, e não foi observada atividade diante de um processo inflamatório crônico. Os ensaios antioxidantes revelaram que PHEX é dotada de constituintes antioxidantes que podem estar contribuindo para sua ação. Ademais, tanto PHEX quanto EBM aceleraram o fechamento das feridas excisionais em camundongos, e PHEX aumentou o fluxo sanguíneo e a deposição de colágeno. A caracterização química de PHEX revelou a presença majoritária de sitosterol, estigmasterol, campesterol, taraxerol e taraxasterol, constituintes que podem ser os principais responsáveis pelas atividades farmacológicas observadas. / The leaves of Pereskia aculeata Miller (Cactaceae) are used in traditional medicine, as wound healing and to treat inflammatory process. This study aimed to evaluate the in vivo topical anti-inflammatory and antipsoriatic activities of the hexane partition (PHEX) obtained from the crude methanol extract (EBM) of the leaves, and the in vivo topical wound healing activity of PHEX and EBM, in addition to the PHEX chemical characterization by gas chromatography coupled to mass spectrometry. The PHEX acute topical anti-inflammatory activity, the mouse ear edema model induced by the following different phlogistic agents was used: croton oil, arachidonic acid, ethylphenylpropiolate, capsaicin, phenol and histamine. The PHEX topical chronic anti-inflammatory activity was studied by the multiple application cróton oil-induced ear edema test in mice, followed by the histopathological analysis. PHEX mechanism of action was proposed based on its response after the challenge with different inflammatory stimuli, tissue cytokines levels and croton oil single application test after the pretreatment with mifepristone, an glucocorticoid antagonist. The PHEX oral anti-inflammatory action was also evaluated in vivo by the single and multiple croton oil ear edema test. PHEX antioxidant potential was evaluated in vitro by DPPH bioautography, β-carotene/linoleic acid and phosphomolybdenum assays, as the presence of antioxidant constituents may be helpful to treat inflammation. The PHEX antipsoriatic potential was evaluated by the mouse tail test. The PHEX and EBM wound healing activity was evaluated by the murine excisional wound model, laser Doppler perfusion image (LDPI) technique and histophatological analysis of the tissue on the last day of experiment. The PHEX topical toxicity was also studied by the irritation/corrosion and cutaneous atrophy tests. PHEX showed remarkable acute and chronic anti-inflammatory activity against all the phlogistic agents, except for arachidonic acid. Besides, antipsoriatic potential was observed. PHEX mechanism of action is related, at least in part, to a glucocorticoid effect. For this reason, a pharmaceutical formulation contained PHEX was developed, which topical acute and chronic anti-inflammatory activity was evaluated by the single and multiple croton oil-induced ear edema test. Due to the promising results, a patent of this product was deposited in National Institute of Intellectual Property (INPI). The PHEX acute oral anti-inflammatory effect was moderate, and a chronic activity was not observed. The antioxidant assays revealed that PHEX is endowed with antioxidant compounds, which may be contributing to its action. Besides, both PHEX and EBM accelerated the wound healing in mice, and PHEX also increased the blood flow and collagen deposition. The PHEX chemical characterization revealed the marked presence of sitosterol, stigmasterol, campesterol, taraxerol and taraxasterol, chemical compounds that may be the main responsible for the pharmacological activities reported in this study.
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Ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Mill.) como alternativa promissora para produção de proteína: densidade de plantio e adubação nitrogenada / Ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Mill.) as a promising alternative for protein production: planting density and nitrogen fertilization

Souza, Maria Regina de Miranda 24 July 2013 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-04-17T13:14:53Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 743770 bytes, checksum: 6b920731e67aadf436ea8c92758edfc5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T13:14:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 743770 bytes, checksum: 6b920731e67aadf436ea8c92758edfc5 (MD5) Previous issue date: 2013-07-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Pereskia aculeata Mill., ora-pro-nobis ou lobrobrô, é uma espécie perene da família Cactaceae, usada, principalmente, como hortaliça folhosa não convencional. Embora apresente grande potencial produtivo e nutricional, além de propriedades medicinais e valor gastronômico regional, é ainda subexplorada e pouco conhecida pela população. Os objetivos gerais deste estudo foram identificar, analisar e gerar conhecimentos e tecnologias relacionados com o aumento da produtividade do ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Mill.) como hortaliça e alimento proteico, e com o aumento de produção e de escala, de forma a contribuir para sua melhor inserção no mercado e na rotina alimentar de populações. Buscou-se avaliar aspectos de mercado e de cultivo do ora-pro-nobis por meio de levantamento socioeconômico em Sabará, Viçosa e Belo Horizonte, MG, e ensaios experimentais em campo. Foram avaliados o perfil de produção e a comercialização, em especial as formas de agregação de valores na venda de folhas de ora-pro-nobis. Paralelamente, foram instalados experimentos no delineamento em blocos casualizados com cinco tratamentos e três repetições. Foram avaliados o efeito do adensamento de plantas, utilizando-se os tratamentos com 1, 5, 10, 25 e 50 plantas/m2 e o efeito da adubação nitrogenada, com as doses de 0, 50, 100, 200 e 400 kg de N/ha sobre o teor de proteínas e a qualidade biológica. Utilizaram-se os métodos de Nessler, Cataldo, de Kjeldahl e Bradford para análise da qualidade e quantidade da proteína das folhas de ora-pro-nobis. Espera-se obter, no primeiro ano de colheita, 21,1 t/ha a 24,4 t de folhas frescas de boa qualidade biológica; 7,3 t de proteína/ha proveniente das folhas; e 11,3 t/ha de proteína proveniente de folhas e ramos, na densidade de 10 a 50 plantas/ha e adubação nitrogenada correspondente a 200 kg N/ha. Embora a comercialização do ora-pro-nobis seja ainda incipiente, com o potencial de agregação existente para produto, o adensamento de plantas e a adubação adequada, há perspectivas promissoras para a sua inserção na diversificação de culturas e alimentar, como hortaliça e fonte de proteína, para alimentação humana e animal. / Pereskia aculeata Mill., ora-pro-nobis or lobrobrô is a perennial species of the family Cactaceae used mainly as a leafy vegetable unconventional. Although it has great productive and nutritional content with medicinal properties and regional gastronomic value, is not much explored and unknown by population. This study aimed to identify, analyze and generate knowledge and technologies related to increasing productivity of ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Mill.) as food and vegetable protein in increased production and scale in order to get inserted into market of populations feeding routine. It was assessed aspects of the market and growing of ora-pro-nobis by socioeconomic surveys in the cities of Sabará, Belo Horizonte and Viçosa, in the state of Minas Gerais, and also on some experimental field trials. The production and marketing profile and particularly forms of aggregation of values in selling sheets of ora-pro-nobis have been evaluated. In parallel, experiments were conducted in a randomized complete block design with five treatments and three replications. They were evaluated the effect of density of plants using treatments with 1, 5, 10, 25 and 50 plants/m2 , and the effect of nitrogen fertilization at doses of 0, 50, 100, 200 and 400 kg N/ha on the protein content and biological quality. They were used Nessler , Cataldo, Bradford and Kjeldahl methods to analyses the quality and quantity of the protein leaves ora-pro-nobis. In the first year of harvest it is expected 21.1 ton/ha to 24.4 ton/ha of fresh leaves of good biological quality protein, 7.3 ton/ha of the leaves and 11.3 ton/ha of protein of leaves and branches; density 10-50 plants/ha corresponding to 200 kg N/ha nitrogen fertilizer. Although for marketing ora-pro-nobis is still incipient, it can be considered the potential for existing aggregate product, the density of plants and proper fertilization, which can become promising the insertion of ora-pro-nobis in crop diversification and food as and vegetable protein source for human and animal consumption.
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Perfil de compostos fenólicos extraídos de folhas de ora-pro-nóbis (Pereskia Aculeata Miller) / Phenolic compouds extracted from leaves of ora-pro-nóbis (Pereskia Aculeata Miller)

Souza, Thaís Cristina Lima de, 1989- 25 August 2018 (has links)
Orientador: Helena Teixeira Godoy / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-25T00:05:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_ThaisCristinaLimade_M.pdf: 979807 bytes, checksum: dc7c129a05318e6db72f5cdfcf42e98a (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O ora-pro-nóbis (OPN) (Pereskia aculeata Miller) é uma trepadeira arbustiva, pertencente à família Cactaceae. Suas folhas são muito utilizadas na culinária mineira, mas pouco usada e quase desconhecida pela população no resto do país. Dados referentes ao perfil de compostos fenólicos dessa planta são inexistem na literatura. Por esse motivo, o presente trabalho teve como objetivo otimizar um método de extração para os compostos fenólicos presentes nas folhas de OPN. Bem como, desenvolver e validar um método de cromatografia de ultra eficiência (CLUE), para separação e identificação do perfil desses fenólicos. A partir dos resultados obtidos para o planejamento fatorial empregado, as condições escolhidas de extração foram: água como solução extratora, com 1 Mol.L-1 de HCl, temperatura igual a 80 ºC e tempo de 90 minutos. O método cromatográfico desenvolvido apresentou resultados satisfatórios, em relação aos critérios de validação, mostrando-se adequado para a separação e quantificação dos cinco compostos fenólicos estudados. Para as amostras de OPN analisadas, os teores de compostos fenólicos encontrados, variaram entre 4051,05 e 5892,19 mg.Kg-1 para o ácido clorogênico, 353,48 e 1139,91 mg.Kg-1 para o ácido caféico, 327,52 e 469,35 mg.Kg-1 para o ácido p-coumárico entre 347,47 e 458,84 mg.Kg-1 para o ácido ferúlico. A presença desses derivados de ácidos hidroxicinâmicos nas amostras indica que as mesmas possuem uma alta atividade antioxidante, embora seja necessária a realização de análises adequadas para tal afirmação. Além disso, as concentrações encontradas para esse ácidos fazem do OPN uma importante fonte de fenólicos, e seu consumo pode contribuir para uma dieta mais saudável / Abstract: The ora-pro-nobis (OPN) (Pereskia aculeata Miller) is a climbing shrub belonging to the Cactaceae family. The leaves of this vegetable are widely used in the popular cuisine of the estate of Minas Gerais, Brasil, but little its almost unknown by the population in the rest of the country. There is no studies were found regarding the profile of phenolic compounds presented by the leaves of OPN, as far as we concerned. Therefore, this study aimed to optimize a method for extracting of phenolic compounds present in the leaves of OPN. As well as develop and validate a method of ultra performance liquid chromatography (UPLC) for separation and identification of these phenolic compounds. The results obtained for the factorial design employed, allowed to chose the extraction conditions: water as extraction solution, with 1 mol.L-1 HCl, temperature of 80 º C and a time of 90 minutes. The results acquired for the method validation showed good results for repeatability and intermediate precision, indicating that the method is suitable for the separation and quantification of the five phenolic compounds studied. For the OPN samples analyzed, the content of phenolic compounds found ranged from 4051.05 and 5892.19 mg.Kg-1 for chlorogenic acid; 353.48 and 1139.91 mg.Kg-1 for caffeic acid; 327.52 and 469.35 mg.Kg-1 for p-coumaric acid; 347.47 and 458.84 mg.Kg-1 for ferulic acid. The presence of these derivatives of hydroxycinnamic acids indicates that they possess a high antioxidant activity, while appropriate analyzes must be conducting for such a claim. Furthermore, the concentrations found for these acids make OPN an important source of phenolic and its consumption can contribute to a healthier diet / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestra em Ciência de Alimentos

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