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Silenciamento epigenético dos genes CRABP2 e MX1 em tumores de cabeça e pescoço

Calmon, Marilia de Freitas [UNESP] 18 December 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-18Bitstream added on 2014-06-13T19:21:43Z : No. of bitstreams: 1 calmon_mf_dr_sjrp.pdf: 7036402 bytes, checksum: b702ff2267d57efa64885bfa0453276c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço (HNSCC) é uma doença heterogênea que afeta o epitélio da cavidade oral, laringe e faringe. A maioria dos pacientes é diagnosticada em estágios avançados da doença e ainda não existe nenhum marcador sensível e específico para o comportamento agressivo deste tumor. Portanto, uma detecção precoce e biomarcadores de prognóstico são altamente necessárias para uma administração mais racional da doença. A hipermetilação de ilhas CpGs é um dos mecanismos epigenéticos mais importantes que levam a um silenciamento gênico em tumores e tem sido extensivamente utilizados para a identificação de biomarcadores. Neste estudo foram combinados as análises de Rapid Substractive Hybridization (RaSH) e microarray de uma maneira hierárquica para selecionar genes que, supostamente, são reativados pelo agente desmetilante 5`'Aza'2`'deoxicitidina (5Aza'dC) em linhagens celulares derivados de carcinoma de cabeça e pescoço (FaDu, UM' SCC'14A, UM'SCC'17A e UM'SCC'38). Esta análise combinada identificou 78 genes dos quais 35 foram reativados em, pelo menos, 2 linhagens celulares e apresentavam ilha CpG nas suas regiões 5`. A reativação de três destes 35 genes (CRABP2, MX1 e SLC15A3) foi confirmada por PCR em tempo real (Fold change ≥ 3). O seqüenciamento de bissulfito de sódio das suas ilhas CpGs revelou que eles estão, de fato, diferencialmente metilados em linhagens celulares derivadas de carcinoma de cabeça e pescoço. Foram detectadas uma maior freqüência de hipermetilação dos genes CRABP2 (58.1% para a região 1) e MX1 (46.3%) em amostras primárias de câncer de cabeça e pescoço quando comparados a linfócitos de indivíduos saudáveis utilizando o PCR de metilação específica (MSP). Finalmente a ausência da proteína CRABP2 foi associada com... / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a heterogeneous disease affecting the epithelium of the oral cavity, pharynx and larynx. Most patients are diagnosed at late stages of the disease and no sensitive and specific predictors of aggressive behavior have been identified yet. Therefore, early detection and prognostic biomarkers are highly desirable for a more rational management of the disease. Hypermethylation of CpG islands is one of the most important epigenetic mechanisms that leads to gene silencing in tumors and has been extensively used for the identification of biomarkers. In this study, we combined Rapid Subtractive Hybridization (RaSH) and microarray analysis in a hierarchical manner to select genes that are putatively reactivated by the demethylating agent 5'aza'2’'deoxycytidine (5Aza'dC) in HNSCC cell lines (FaDu, UM'SCC'14A, UMSCC'17A, UM'SCC'38A). This combined analysis identified 78 genes of which 35 were reactivated in at least 2 cell lines and harbored a CpG island at their 5’ region. Reactivation of three out of these 35 genes (CRABP2, MX1 and SLC15A3) was confirmed by qRT'PCR (fold change ≥ 3). Bisulfite sequencing of their CpG islands revealed that they are indeed differentially methylated in the HNSCC cell lines. Using Methylation Specific PCR (MSP), we detected a higher frequency of CRABP2 (58.1% for region 1) and MX1 (46.3%) hypermethylation in primary HNSCC, when compared to lymphocytes from healthy individuals. Finally, absence of the CRABP2 protein was associated with decreased disease'free survival rates, supporting a potential use of CRABP2 expression as a prognostic biomarker for HNSCC patients
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Influência da radioterapia para tratamento de lesões malignas de cabeça e pescoço sobre a ocorrência de microrganismos bucais

Sousa, Fátima Regina Nunes de [UNESP] 08 February 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-08Bitstream added on 2014-06-13T20:27:30Z : No. of bitstreams: 1 sousa_frn_me_araca.pdf: 925551 bytes, checksum: d43bed03ff5fb87a2ce849d7d16ee53c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A radioterapia é uma das terapias mais empregadas em lesões malignas de cabeça e pescoço, podendo está associada ou não a outras modalidades terapêuticas cirurgia e quimioterapia. Entretanto esta terapia pode interferir na qualidade de vida dos pacientes, podendo alterar a evolução do tratamento devido a efeitos colaterais indesejáveis como mucosite, xerostomia, disgeusia, dermatite, candidose. O presente estudo objetiva avaliar a microbiota bucal de pacientes submetidos à radioterapia para tratamento de lesões malignas de cabeça e pescoço. A amostra constituiu de 51 pacientes numa instituição privada de radioterapia de São José do Rio Preto-SP. Os pacientes foram avaliados em três momentos, antes de iniciar a radioterapia, preenchendo a ficha clínica que incluía dados sócio demográficos, avaliação dentária e periodontal; no segundo momento avaliava as alterações bucais e peribucais decorrentes da radioterapia entre 15 e 22 dias; e terceiro momento, no qual esses pacientes foram avaliados imediatamente após a conclusão da terapia. Em todas essas fases os espécimes coletados foram biofilme supragengival, biofilme subgengival, mucosa lisa, dorso de língua, além de amostras de saliva, os quais foram detectados por PCR. Os microrganismos avaliados foram A. actinomycetemcomitans, F. nucleatum, P. micra, P. gingivalis, P. intermedia, P. nigrescens, T. forsythia, T. denticola e leveduras do gênero Candida. A ocorrência de complicações agudas, como xerostomia e mucosite em decorrência da radioterapia alterou significativamente os microrganismos anaeróbios Gram-negativos estudados e leveduras do gênero Candida, exceto P. nigrescens e A. actinomyctemcomitans. A higiene bucal regular dos pacientes irradiados contribuíram com a proliferação dos microrganismos facilitando a adesão microbiana... / Radiotherapy is one of the most widely used therapies in malignant head and neck can is not associated with other treatment modalities surgery and chemotherapy. However, this therapy can interfere with quality of life of patients and may alter the course of treatment due to side effects such mucositis, xerostomia, dysgeusia, dermatitis, candidiasis. This study aims to evaluate the oral microbiota of patients undergoing radiotherapy for treatment of malignant head and neck. The sample consisted of 51 patients in a private institute of radiotherapy, Sao Jose do Rio Preto-SP. Patients were evaluated three times, before starting radiotherapy, filling the medical records that included socio demographic data, dental and periodontal evaluation, in the second moment evaluated the oral and perioral changes caused by radiotherapy between 15 and 22 days and third time in which these patients were assessed immediately after the completion of therapy. In all these stages the specimens were collected supragingival biofilm, subgingival biofilm, flat mucosa, tongue, and saliva samples, which were detected using PCR. The microorganisms evaluated were A. actinomycetemcomitans, F. nucleatum, P. microns, P. gingivalis, P. intermedia, P. nigrescens, T. forsythia, T. denticola, and Candida spp. The occurrence of acute complications such as xerostomia and mucositis due to radiotherapy significantly alter the anaerobic microorganisms studied Gram-negative and Candida species, except P. nigrescens and A. actinomyctemcomitans. Regular oral hygiene of patients irradiated contributed to the growth of microorganisms to facilitate microbial adhesion in saliva and mucous. Conclude that the participation of the dentist is essential for chemical control of biofilm, diet, oral hygiene by providing better quality of life of these patients reducing opportunistic infections that arise during radiotherapy
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Influência da radioterapia para tratamento de lesões malignas de cabeça e pescoço sobre a ocorrência de microrganismos bucais /

Sousa, Fátima Regina Nunes de. January 2010 (has links)
Orientador: Elerson Gaetti Jardim Júnior / Banca: Alvimar Lima de Castro / Banca: Luis Fernando Landucci / Resumo: A radioterapia é uma das terapias mais empregadas em lesões malignas de cabeça e pescoço, podendo está associada ou não a outras modalidades terapêuticas cirurgia e quimioterapia. Entretanto esta terapia pode interferir na qualidade de vida dos pacientes, podendo alterar a evolução do tratamento devido a efeitos colaterais indesejáveis como mucosite, xerostomia, disgeusia, dermatite, candidose. O presente estudo objetiva avaliar a microbiota bucal de pacientes submetidos à radioterapia para tratamento de lesões malignas de cabeça e pescoço. A amostra constituiu de 51 pacientes numa instituição privada de radioterapia de São José do Rio Preto-SP. Os pacientes foram avaliados em três momentos, antes de iniciar a radioterapia, preenchendo a ficha clínica que incluía dados sócio demográficos, avaliação dentária e periodontal; no segundo momento avaliava as alterações bucais e peribucais decorrentes da radioterapia entre 15 e 22 dias; e terceiro momento, no qual esses pacientes foram avaliados imediatamente após a conclusão da terapia. Em todas essas fases os espécimes coletados foram biofilme supragengival, biofilme subgengival, mucosa lisa, dorso de língua, além de amostras de saliva, os quais foram detectados por PCR. Os microrganismos avaliados foram A. actinomycetemcomitans, F. nucleatum, P. micra, P. gingivalis, P. intermedia, P. nigrescens, T. forsythia, T. denticola e leveduras do gênero Candida. A ocorrência de complicações agudas, como xerostomia e mucosite em decorrência da radioterapia alterou significativamente os microrganismos anaeróbios Gram-negativos estudados e leveduras do gênero Candida, exceto P. nigrescens e A. actinomyctemcomitans. A higiene bucal regular dos pacientes irradiados contribuíram com a proliferação dos microrganismos facilitando a adesão microbiana... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Radiotherapy is one of the most widely used therapies in malignant head and neck can is not associated with other treatment modalities surgery and chemotherapy. However, this therapy can interfere with quality of life of patients and may alter the course of treatment due to side effects such mucositis, xerostomia, dysgeusia, dermatitis, candidiasis. This study aims to evaluate the oral microbiota of patients undergoing radiotherapy for treatment of malignant head and neck. The sample consisted of 51 patients in a private institute of radiotherapy, Sao Jose do Rio Preto-SP. Patients were evaluated three times, before starting radiotherapy, filling the medical records that included socio demographic data, dental and periodontal evaluation, in the second moment evaluated the oral and perioral changes caused by radiotherapy between 15 and 22 days and third time in which these patients were assessed immediately after the completion of therapy. In all these stages the specimens were collected supragingival biofilm, subgingival biofilm, flat mucosa, tongue, and saliva samples, which were detected using PCR. The microorganisms evaluated were A. actinomycetemcomitans, F. nucleatum, P. microns, P. gingivalis, P. intermedia, P. nigrescens, T. forsythia, T. denticola, and Candida spp. The occurrence of acute complications such as xerostomia and mucositis due to radiotherapy significantly alter the anaerobic microorganisms studied Gram-negative and Candida species, except P. nigrescens and A. actinomyctemcomitans. Regular oral hygiene of patients irradiated contributed to the growth of microorganisms to facilitate microbial adhesion in saliva and mucous. Conclude that the participation of the dentist is essential for chemical control of biofilm, diet, oral hygiene by providing better quality of life of these patients reducing opportunistic infections that arise during radiotherapy / Mestre
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Ocorrência de candidíase bucal em pacientes com câncer na região de cabeça e pescoço

Florentino, Ana Carolina Andrade 30 August 2016 (has links)
Introdução: A candidíase bucal é uma infecção fúngica comum em pacientes irradiados em região de cabeça e pescoço. No período de tratamento antineoplásico eles passam por um quadro de imunodepressão transitória, no qual há predisposição à proliferação de fungos oportunistas. Na cavidade oral as formas clínicas de candidíase podem estar associadas à alteração de mucosa, manifestando-se nas formas pseudomembranosa aguda, atrófica aguda, crônica hiperplásica, atrófica crônica, glossite rombóide e queilite angular. A infecção fúngica proporciona na cavidade bucal, orofaringe e hipofaringe sintomas de ardência, o que dificulta a ingestão de alimentos, reduzindo a qualidade de vida do paciente, além de dificultar o tratamento antineoplásico. Dessa forma, tratamentos eficazes são importantes para que sejam sanadas estas intercorrências. Objetivos: Investigar a ocorrência de candidíase bucal diagnosticada em pacientes com câncer de cabeça e pescoço atendidos no ambulatório odontológico no período de janeiro de 2013 a junho de 2014; avaliar a terapêutica antifúngica e fatores predisponentes relacionados à candidíase bucal, em pacientes submetidos a tratamento antineoplásico; relacionar tempo de tratamento, evolução clínica da candidíase e sintomatologia; relacionar sítio anatômico da neoplasia, presença de candidíase, tempo de radioterapia e/ou quimioterapia e estágio da neoplasia. Material e Métodos: Foi realizado um estudo retrospectivo, descritivo, transversal, de análise de prontuários provenientes do Aplicativo de Gestão para Hospitais Universitários (AGHU) e arquivos do Hospital do Câncer do Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia. Resultados: Do total de prontuários avaliados (de 83 pacientes), 48 (57,8%) pacientes apresentaram pelo menos um episódio de candidíase bucal. Os antifúngicos utilizados foram nistatina, fluconazol e miconazol gel oral, por até três meses. Os sintomas mais frequentes foram xerostomia (p = 0,006) e disgeusia (p = 0,031). As terapias antifúngicas foram eficazes em 95,8% dos pacientes. A quimioterapia antineoplásica teve relevância estatística (p = 0,021) no acometimento por candidíase bucal e 26,5% dos pacientes tiveram a primeira infecção fúngica com dose acumulativa de 1800 cGy de radioterapia. Conclusão: A maioria dos pacientes apresentou pelo menos um episódio de candidíase bucal durante o tratamento antineoplásico. O aparecimento de candidíase bucal esteve relacionado aos seguintes fatores: dose acumulada de radioterapia, hipossalivação e sítios anatômicos tumorais.Após o tratamento antifúngico a maioria dos pacientes evoluiu para a cura. Os sintomas da infecção mais relatados em prontuários foram ardência, odinofagia, trismo, xerostomia, disfagia e disgeusia. A maioria 13 dos pacientes foi acometida pela candidíase bucal em dose cumulativa de radioterapia de 1800 cGy. / Introduction: Oral candidiasis is a common fungal infection in patients irradiated in the head and neck region. In antineoplastic treatment period they undergo a transient immunosuppression framework in which there is a predisposition to the proliferation of opportunistic fungi. In the oral cavity clinical forms of candidiasis may be associated with mucosal changes, manifesting in acute pseudomembranous forms, acute atrophic, chronic hyperplastic, chronic atrophic, glossitis rhomboid and angular cheilitis. The fungal infection provides the oral cavity, oropharynx and hypopharynx symptoms of burning, which difficult, reducing the quality of life of the patient, as well as hamper the antineoplastic treatment. Thus, effective treatments are important, to avoid these complications. Objectives: To investigate the occurrence of oral candidiasis diagnosed in patients with head and neck cancer treated at the dental clinic from January 2013 to June 2014; evaluate the antifungal therapy and predisposing factors related to oral candidiasis; relate time of treatment, clinical course of candidiasis and symptoms; relate anatomical site of the tumor, presence of candidiasis, radiation time and / or chemotherapy and stage of cancer. Material and Methods: A retrospective, descriptive, cross-sectional, chart analysis from the “Aplicativo de Gestão para Hospitais Universitários” (AGHU) (Management Application for University Hospitals) and Hospital files of the Clinical Cancer Hospital, Federal University of Uberlândia. Results: Of the total assessed medical records (83 patients), 48 patients (57.8%) had at least one episode of oral candidiasis. The antifungal agents used were nystatin, miconazole and fluconazole oral gel for up to three months. The most frequent symptoms were dry mouth (p = 0.006) and dysgeusia (p = 0.031). Antifungal therapies have been effective in 95.8% of patients. Chemotherapy in this study had statistically significant (p = 0.021) in involvement by oral candidiasis, but it was not possible to evaluate the periods between chemotherapy, and 26.5% of patients had the first fungal infection with cumulative dose 1800 cGy radiotherapy. Conclusion: The majority of patients experienced at least one episode of oral candidiasis during antineoplastic treatment. The appearance of oral candidiasis was related to the following items: the cumulative dose of radiotherapy, tumor hyposalivation and anatomical sites. The most patients evolved to cure after antifungal treatment. Symptoms most frequently reported were burning, odynophagia, trismus, xerostomia, dysphagia, and dysgeusia. Most of the patients were affected by oral candidiasis in a cumulative dose of 1800 cGy radiotherapy. / Dissertação (Mestrado)

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