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Contribuição ao estudo da utilização da enzima dextrana-sacarase na modificação de polissacarideos

Rodrigues, Maria Isabel, 1957- 03 February 1989 (has links)
Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-17T05:47:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_MariaIsabel_M.pdf: 3965357 bytes, checksum: c3f88019d9a555d7ba0b8aa51d2eb272 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: Neste trabalho realizou-se o estudo de glicosilação de maltodextrina e pulularia, utilizando a enzima dextrana-sacarase de Leuconostoc mesenteroídes de NRLL B 512 F. Empregou-se, no acompanhamento das reações bioquímicas, a metodologia de radioatividade através de sacarose marcada com carbono 14, assim como cromatografia de permeação em gel. No estudo realizado com maltodextrina verificou-se que a enzima dextrana-sacarase é incapaz de transferir a glicose contida na molécula de sacarose para o polissacarídeo. No caso de puIulana, apesar de também não ter sido observado a glicosilação nas moléculas de peso molecular elevado (ao redor de 300.000 daltons), houve indícios de que a glicosilação ocorreu em moléculas de pululana de peso molecular abaixo de 10.000 daltons. Observou-se igualmente neste caso, a formação de dextrana de peso molecular abaixo de 10.000 daltons / Abstract: In this work a study of the addition of glucose molecules, in both polysaccharides, maltadextrin and pullulan was performed. The ensyme dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides NRRL B512 F was utilized. The biochemical reactions were analysed by means of radioactivity techniques, using sucrose labed with C14 as well as gel permeation chromatography. It was observed that the enzyme dextransucrase was unable to transfer units of glucose from sucrose molecules to the polyssaccharides both maltoclextrin and pullulan. On the other hand, it was observed that smaller molecules of pullulan with less than 10.000 daltons, were possibly glucosilated. It was also noticed that dextran with less than 10.000 daltons was produced / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Estudo do isolamento da xilana da casca de arroz e de seu desdobramento por xilanases fungicas

Martins, Licia Vasconcelos 17 July 2018 (has links)
Orientador : Valdemiro C. Sgarbieri / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Tecnologia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-17T21:38:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_LiciaVasconcelos_M.pdf: 3344611 bytes, checksum: c8a6cc9c7e59df464332167970cc1e80 (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: A xilana foi extraída da casca de arroz em meio alcalino após a eliminação das substâncias solúveis em água e em solventes orgânicos, e a redução do teor de lignina. Foi precipitada em meio ácido, centrifugada, lavada, liofilizada e pesada. O material obtido foi caracterizado quanto ao poder redutor e pelo cromatograma de seu hidrolisado, comparando-se com padrão . Sua purificação parcial foi feita por reprecipitações e diálise,de terminando-se o resíduo mineral fixo na xilana bruta. Obteve-se 7,4g% de xilana bruta e 6,6 g% apos a purificação. Usou-se também um método simplificado de extração, obtendo- se 20,0g% de xilana bruta. A enzima (xilanase) foi obtida de preparações fúngicas mantidas em meio sólido adequado e cultivadas em meio líquido. Apos obtenção do extrato bruto (solução enzimática) , as enzimas foram fracionadas por precipitação com sulfato de amônio, dialisadas e liofilizadas. A atividade específica das frações precipitadas com 40, 60 e 801 de saturação foram 35,53; 4,04 e 2,97 respectivamente , para o Geotrichum sp e 14,65 ; 25,54 e 19,09 respectivamente, para o precipitado do extrato de Aspergillus sp (cor verde clara). As porcentagens da atividade total de enzimas precipitadas foram 40,86 ;2,89 e 1,55 para o Geotrichum sp e 18,22 ; 13,76 e 5,96 para o Aspergillus sp, respectivamente. 0 precipitado total, a 80% de saturação com sulfato de amônio, apresentou uma atividade específica de 93,36. A porcentagem da atividade total das enzimas, precipitada com 80% de saturação de sulfato de amônio foi de 42,15. O estudo das propriedades eletroforéticas das enzimas produzidas pelo Aspergillus sp precipitadas com sulfato de amônio a 40, 60 e 80% de saturação mostrou que elas possuíam 3 componentes sendo que as enzimas produzidas pelo Geotrichum sp precipitadas com sulfato de amônio a 40 e 60% de saturação possuíam 5 componentes e o material proveniente da precipitação cora sulfato de amônio a 80% de saturação possuía 4 componentes. A produção de xilanase foi maior apôs o 16°, 20° e 27° dia de incubação para o Geotrichum sp; IS9, 19° e 27° dia para o Aspergillus sp (cor verde clara); 13° , 19° e 28° dia para o Aspergillus sp (cor verde escura). Usou-se a xilana semi-purificada extraída da casca de arroz como substrato e a xilanase produzida pelo fungo Aspergillus sp (cor verde clara), precipitada com 80% de saturação de sulfato de amônio e com 93,36 de atividade específica, para estudo das reações e propriedades enzimáticas. As melhores condições encontradas para a atividade da enzima sobre a xilana extraída foram: pH 7,8; temperatura entre 50 e 55°C; concentração de substrato 0,8gl. O estudo de caracterização do produto da reação enzimática mostrou que a enzima estudada não produz xilose a partir da xilana e sim, oligossacarídeos. Portanto, a hidrólise completa da xilana, necessitaria também de um outro sistema enzimático específico para a hidrolise de oligossacarídeos / Abstract: Xylan was extracted from rice husk in alkaline solution after the elimination of substances soluble in water and in organic solvents and the reduction of lignin content. It was precipitated in acid solution, centrifuged, washed, lyophylized and weighed. The substance obtained was characterized according to the reducing power and chromatogram of its hydrolisate, comparing them with the standard product. Its partial purification was accomplished through reprecipitation and dialysis, determining the mineral residue contained in the raw xylan. By this procedure were obtained 7,4g% of raw xylan and 6.6 g% after a partial purification. A simplified method was also used and 20.0 g% of xylan was extracted. The enzyme (xylanase) was obtained from fungal preparations maintained in an adequate solid medium and cultivated in a liquid medium. After obtaining the raw extract (enzymatic solution) the en zyiues were fractionated by precipitation with ammonium sulphate dialysed and lyophylized. The specific activity of the fractions precipitated with a solution of ammonium sulphate of 40, 60 and 80% saturation were 35.53; 4.04 and 2.97 respectively for the Geotrichum sp, and 14.65; 25.54 and 19.09 respectively for the precipitate from Aspergillus sp (of light green color) extract. The percentages of total activity of the precipitated enzyme were 40.86 ; 2.89 and 1.55 for the Geotrichum sp and 18.22; 13.76 and 5.96 for the Aspergillus sp respectively. The total precipitate of 80% ammonium sulphate saturation had a specific activity of 93.36 and accounted for 42.15 % of the original total activity in the extract of the Aspergillus sp (of light green color).The study of eletrophoretic properties of the enzyme produced by Aspergillus sp precipitated with a solution of ammonium sulphate of 40, 60 and 80% saturation showed that this precipitate had 3 components whereas that produced by Geotrichum sp had 5 components in the precipitate and 4 components in the material precipitated with ammonium sulphate of 80% saturation. The production of xylanase was greatest, on the 16th, 20th and 27 day following the incubation, for the Geotrichum sp ;15 , 19tth and 27 th day for the Aspergillus sp (of light green color) ;13 th 19 th and 28 th day for the Aspergillus sp (of dark green color). For the study of the xylanase properties of Aspergillus sp (light green color) it was used partial purified xylan from rice husk as substrate and, the precipitate of 80% saturation of ammonium sul phate, with a specific activity of 93.36 as source of enzyme. The best conditions for the activity of the enzyme in relation to the xylan extracted were: pH 7.8; temperature between 50 and 55°C; concentration of substrate 0.8 g%. Chromatographic study of the product of the reaction showed that this Aspergillus preparation does not produce xylose, but instead, oligosaccharides as end product. For complete hydrolysis of the xylan to xylose, some enzyme specific for the hydrolysis of oligosaccharides should be added to the system / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Avaliação do efeito dos leites materno, de vaca e de cabra sobre a fermentação e síntese de polissacarídeos extracelulares na placa dentária humana. Estudo "in vitro" / “Evaluation of the effects of human, cow and goat milk on the fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides in human dental plaque – in vitro study”

Prestes, Marcelo Pires 07 April 2003 (has links)
Na espécie humana, são usados vários leites, além daquele que lhe é próprio, tais como o leite de vaca e o leite de cabra dentre outros. Em meio a seus diversos componentes encontramos a lactose que é um dissacarídeo que se desdobra em glicose e galactose. A cárie dentária como uma doença multifatorial, necessita de um substrato cariogênico para o seu desenvolvimento além das bactérias presentes na placa dentária, que utilizam carboidratos da dieta para seu metabolismo. Tendo em vista a característica de alto consumo e os relatos clínicos nos quais é sugerida a participação do leite no desenvolvimento da cárie, este trabalho avaliou o efeito “in vitro" de três tipos de leite “in natura"; materno, de vaca e de cabra, sobre o metabolismo da placa dentária humana, com relação à capacidade de fermentação e síntese de polissacarídeos extracelulares. Por meio da coleta de placa dentária de 50 crianças e adolescentes entre 10 e 15 anos de idade, procedente de uma Instituição da cidade de Bauru, um “pool" de placa foi tratado em laboratório, e submetido a estudos bioquímicos específicos para fermentação e síntese de polissacarídeos extracelulares. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste de Análise de Variância (ANOVA) a um e dois critérios com nível de significância de 5% e utilizou-se o teste de Tukey-Kramer para comparação entre os diferentes tipos de substratos. Concluiu-se com este estudo que, quando utilizados os leites testados, ocorre, “in vitro", a fermentação e a síntese de polissacarídeos extracelulares. O leite de cabra apresentou a menor fermentação seguido pelo leite bovino e depois o leite materno. Para a síntese de polissacarídeos o maior resultado foi obtido pelo leite de cabra, seguido pelo leite de vaca e pelo leite materno. / Several types of milk are consumed by human beings besides human milk, such as cow milk, goat milk, and others. Among several other components, the milk contains lactose, which is a disaccharide composed of glucose and galactose. Dental caries, as a multifactorial disease, requires a cariogenic substrate on which to develop, in addition to the bacteria present in dental plaque, which employ the dietary carbohydrates in their metabolism. Considering the high intake of milk by mankind and the clinical reports that suggest its participation in caries development, the present in vitro study evaluated the influence of three types of whole milk, namely human, cow and goat milk, on human dental plaque metabolism as to the capacity of fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides. A “pool" of dental plaque obtained from 50 children aged 10 to 15 years old attending an institution in the city of Bauru was laboratory treated and submitted to biochemical studies specifically for the fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides. The obtained results were submitted to one and two-way variance analysis (ANOVA) at a significance level of 5% and the Tukey-Kramer test was employed to compare the different types of substrates. It was conc luded that all three types of milk demonstrated in vitro fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides. Goat milk presented the smallest level of fermentation, followed by cow milk and human milk. Concerning the synthesis of polysaccharides, the highest outcome was achieved for goat milk, followed by cow milk and human milk.
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Efeitos da galactomanana de Cyamopsis tetragonolobus na osteoartrite induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratos / Effects of the galactomannan of Cyamopsis tetragonolobus in the osteoarthritis induced by anterior cruciate ligament transection in rats

Castro, Rondinelle Ribeiro January 2008 (has links)
CASTRO, Rondinelle Ribeiro. Efeitos da galactomanana de Cyamopsis tetragonolobus na osteoartrite induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratos. 2008. 115 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-10-17T13:25:25Z No. of bitstreams: 1 2008_tese_rrcastro.pdf: 1140635 bytes, checksum: a6f5a88fce53ef8b178c61b2081f2695 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-10-18T12:04:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_tese_rrcastro.pdf: 1140635 bytes, checksum: a6f5a88fce53ef8b178c61b2081f2695 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-18T12:04:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_tese_rrcastro.pdf: 1140635 bytes, checksum: a6f5a88fce53ef8b178c61b2081f2695 (MD5) Previous issue date: 2008 / Using the osteoarthritis (OA) model induced by anterior cruciate ligament transection (ACLT) in rats, we have demonstred that guar gum (GG), a galactomannan extracted from Cyamopsis tetragonolobus seeds, displays analgesic activity similar to Hylan G-F 20, a hyaluronate derivate used as local therapy in human OA. In the same model, we objective to develop a parametric biochemical method for joint lesion evaluation, and to investigate the mechanism for analgesia and the chondroprotective effect of GG. Wistar rats subjected to ACLT (OA group) were sacrificed at different endpoints. Joint pain was daily measured using the test for articular incapacitation in rats, until 70 days. Joint lavage was used for NO determination. Articular cartilage was evaluated by the chondroitin-sulfate (CS) content and determination of its molar weight. Histophatologic analysis using the OARSI score system was also performed. Sham-operated groups were used for comparison. In the studies of joint pain, OA groups received indomethacin (2mg/kg/d s.c.), meloxicam (6mg/kg/d i.p.), tadalafil (0.5mg/kg/d p.o.) between days 4 and 7.Morphine (200µg i.art.) was given at day 4 only, 30 min before the pain evaluation. Naloxone (500µg i. art.) was given 15 min prior morphine. Sodium alendronate (30 or 240µg i. art.) was given prophilactically, starting 3 days prior ACLT, and repeated at each 3 days, until day 6. Original or chemically modified GG (100μg/50μl i. art.) was given as a single dose at day 4. Galactose or mannose was co-administred (500μg/50μl i. art.) with original GG. In the study of chondroprotection, GG (100μg/50μl i. art.) was given once weekly, starting at day 14, during 8 weeks. Non-treated animals (NT) received vehicle (saline). OA animals presented maximal joint pain and NO release in the first week. Both CS content and molar weight were higher at day 70 (p<0.05). At this endpoint, important histopathologic changes were found in the OA group. Indomethacin, meloxican, tadalafil and morphine significantly reduced joint pain (p<0.05). Naloxone reverted the effect of morphine. Alendronate prevented the joint pain development. Modified GG structures were unable to promote analgesia. The analgesic effect of unmodified GG could be reverted by galactose (p<0.01), but not by mannose. GG treatment prevented the CS changes, and it reduced the histopatologic lesion (p<0.05). CS changes seem to reflect the tecidual damage, and may be used as an index for the joint lesion. The analgesic efficacy of GG is due to galactose residues. In addition, the chondroprotective effect by GG was demonstrated. This is an important contribution to propose GG as an antiarthrosic drug. / No modelo de osteoartrite (OA) induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratos (TLCA), havíamos demonstrado que a goma guar (GG), uma galactomanana extraída das sementes de Cyamopsis tetragonolobus goma guar, apresenta atividade analgésica em magnitude semelhante à exibida pelo Hilano G-F 20, um derivado do ácido hialurônico utilizado em terapia intra-articular da OA humana. Utilizando o referido modelo, objetivamos desenvolver um métido bioquímico paramétrico para avaliação da lesão articular no referido modelo, e investigar o mecanismo para a analgesia e a eficácia condroprotetora da GG. Ratos Wistar submetidos à TLCA (grupo OA) foram sacrificados em diferentes períodos. A dor articular foi avaliada diariamente pelo teste de incapacitação para ratos, por até 70 dias. O lavado articular foi usado para determinação da liberação de NO. A cartilagem foi avaliada pela determinação do teor de condrotin-sulfato (CS) na matriz, além da avaliação da massa molar do mesmo. A lesão articular foi avaliada também por análise histopatológica, segundo os escores OARSI. Grupos falso-operados (sham) foram utilizados para comparação. Para estudos sobre a dor articular, animais do grupo OA receberam terapeuticamente indometacina (2mg/kg/d s.c.), meloxicam (6mg/kg/d i.p.), ou tadalafila (0,5mg/kg/d p.o.), do quarto ao sétimo dias. Morfina (200µg i. art.) foi administrada apenas no quarto dia, 30 min antes da avaliação da dor. Naloxona (500µg i. art.) foi administrada 15 min antes de morfina. Alendronato sódico (30 ou 240µg/kg s.c.) foi administrado profilaticamente três dias antes da indução, e repetido a cada três dias, até o sexto dia. GG original ou quimicamente modificada foi administrada em dose única no quarto dia (100μg/50μl i. art.). Galactose ou manose (500μg/50μl i. art.) foram co-administrados à GG original. Para avaliação sobre a lesão da cartilagem, GG (100μg/50μl i. art) foi administrada como dose única semanal, do 14º ao 63º dias. Animais não tratados (NT) receberam veículo (salina) nas respectivas vias. O grupo OA apresentou dor articular máxima durante a primeira semana, período no qual houve a maior liberação de NO. 70 dias após TLCA, o teor e a massa molar do CS da matriz da cartilagem mostraram-se ambos aumentados (p<0,05). Importantes alterações histopatológicas foram encontradas no grupo OA nesse período. Indometacina, meloxicam, tadalafila e morfina reduziram significantemente a dor (p<0,05), sendo o efeito desta última revertido por naloxona. Alendronato sódico preveniu a ocorrência da dor. As estruturas modificadas de GG não exibiram eficácia analgésica. Galactose, mas não manose, reverteu significativamente o efeito analgésico da GG não-modificada (p<0,01). GG preveniu as alterações do CS da cartilagem, e reduziu significativamente a lesão histopatológica (p<0,05). As alterações sofridas pelo CS parecem refletir o dano tecidual, validando tal metodologia para avaliação da lesão estrutural. A eficácia analgésica da GG decorre de um efeito farmacológico dependente de galactose. Mais ainda, demonstramos a eficácia condroprotetora in vivo para a GG, indispendável para sua validação como droga anti-artrósica.
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Blendas e filmes de galactomanana e xiloglucana: caracterização físico-química / Blends and Films of Galactomannan and Xyloglucan: Physicochemical Characterization

Mendes, Francisco Rogênio da Silva January 2015 (has links)
MENDES, Francisco Rogênio da Silva. Blendas e filmes de galactomanana e xiloglucana: caracterização físico-química. 2015. 92 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Anderson Silva Pereira (anderson.pereiraaa@gmail.com) on 2017-01-04T20:47:58Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_frsmendes.pdf: 4536625 bytes, checksum: 0bccbc297a617df8cede4d29292c8d24 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-04T22:33:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_frsmendes.pdf: 4536625 bytes, checksum: 0bccbc297a617df8cede4d29292c8d24 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-04T22:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_frsmendes.pdf: 4536625 bytes, checksum: 0bccbc297a617df8cede4d29292c8d24 (MD5) Previous issue date: 2015 / Plant hemicelluloses have been widely used in the industry due to their ability to form edible and biodegradable films with glycerol as plasticiser. This work aimed to obtain hemicellulose-based films using Caesalpina pulcherrima and Tamarindus indica seeds as sources, also to evaluate the physicochemical properties of these blends. Both hemicelluloses were obtained by aqueous extraction followed by ethanol precipitation. T. indica and C. pulcherrima seeds showed yields of 25% and 20% galactomannan (GalCp) and xyloglucan (XilTi), respectively. The XilTi showed the lowest content of nitrogen related to proteins, as those are the most contaminant in these extractions. On the other hand, xyloglucans showed the highest ash content when compared to galactomannans. Through GPC the estimated molecular weight was 4.35 x 106 g / mol and 2.03 x 106 g / mol for GalCp and XilTi, respectively. The mannose / galactose ratio for GalCp was determined by 1H NMR 2.52: 1. Glucose / xylose / galactose ratio for XilTi was obtained by 13C NMR (2.6: 2.4: 1). All blends solutions showed a nonlinear relationship between the shear stress and the strain rate at 25 °C, presenting a non-Newtonian behaviour. FTIR revealed absorptions in the range 3000-3500 cm-1 typical for carbohydrates, concerning to the vibrational stretch (OH) bands in the range of 2926-2899 cm-1 attributed to symmetric and asymmetric vibrations of the grouping CH. Also, the bands at 815 cm-1 and 872 cm-1 were detected which refer to the stretch of the anomeric conformations of polysaccharides, α-D-galactopironose and β-D-mannopyranose, respectively. The FTIR spectrum for xyloglucan apart from the bands at 3000-3500 cm-1 and 2926-2899 cm-1, showed bands at 820 cm-1 and 870 cm-1 which are attributed to stretching of the links in α-D-xylose and β-D-galactose monosaccharides. Moreover, it was detected absorptions around 800-1200 cm-1 which are specific for xyloglucan polysaccharides. The obtained films by casting method showed no significant difference between their thicknesses and showed water vapour permeability ranging from 1,604 to 2,474 (g.mm/h.KPa.m). Through atomic force microscopy over the surface of the films, parameters such as texture, waviness and roughness were estimated. All blend-based films presented low irregular surfaces. In sum, the films and blends based on plant cell wall polysaccharides reserve is promising due to its biodegradability and come from renewable sources. / As hemiceluloses têm sido bastante utilizadas na indústria por, possuirem a capacidade de formar filmes comestíveis e biodegradáveis juntamente com plastificante geralmente glicerol. O objetivo desta pesquisa foi formular blendas e filmes à base de hemiceluloses de Caesalpina pulcherrima (Cp) e Tamarindus indica (Ti) e avaliar suas propriedades físico-químicas. As hemiceluloses foram obtidas por extração aquosa seguida de precipitação com etanol 96 %. As blendas e filmes foram preparados pelo método de casting. As sementes apresentaram rendimentos de 25% e 20% de galactomanana (GalCp) e xiloglucana (XilTi) respectivamente. Na composição centesimal, a XilTi apresentou menor teor de proteínas como contaminante, quando comparado com a GalCp. No entanto, a xiloglucana mostrou maior teor de cinza em relação à galactomanana. A massa molar aparente foi obtida por GPC foi de 4,35 x 106 g/mol e 2,03 x 106 g/mol para GalCp e XilTi, respectivamente. A razão de manose/galactose da GalCp determinada por RMN 1H foi de (2,52:1). Enquanto que a razão de glucose/xilose/galactose para a XilTi obtida por RMN 13C foi de (2,6:2,4:1). As soluções filmogênicas apresentaram uma relação não linear entre a tensão de cisalhamento e a taxa de deformação a 25°C, caracterizando-se como fluídos não newtonianos. A espectroscopia na região do infravermelho revelou absorções na região 3000-3500 cm-1 característica de carboidratos cíclicos, atribuída ao estiramento vibracional (O-H) e bandas de absorção entre 2926-2899 cm-1 atribuída às vibrações simétricas e assimétricas do grupamento C-H e as bandas em 815 cm-1 e 872 cm-1 referem-se ao estiramento das conformações anoméricas das unidades α-D-galactopironose e β-D-manopiranose, respectivamente. O espectro de FTIR para a xiloglucana foi identificado além das bandas em 3000-3500 cm-1 e 2926-2899 cm-1, mostrou absorções em 820 cm-1 e 870 cm-1 que é atribuída ao estiramento das ligações das unidades α-D-xilose e β-D-galactose, revelou também absorções entre 800-1200 cm-1 que representa a região de identidade para xiloglucana. As blendas e filmes não apresentaram permeabilidade ao vapor de água variando entre 1,604 e 2,474 (g.mm/h. kPa.m). A microscopia de força atômica permitiu determinar os parâmetros de superfície, onde se verificou pequenas irregularidades de superfícies. Em suma, filmes e blendas a base de polissacarídeos de reserva de parede celular de plantas é promissor devido a sua biodegradabilidade e por serem provenientes de fontes renováveis.
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Elaboração de filmes de emulsão a partir de galactomanano de algaroba e xiloglucano de tamarindo / Elaboration of emulsion films from galactomanan of algaroba and xyloglucano de tamarindo

Rodrigues, Delane da Costa January 2016 (has links)
RODRIGUES, Delane da Costa. Elaboração de filmes de emulsão a partir de galactomanano de algaroba e xiloglucano de tamarindo. 2016. 131 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2017-01-12T22:27:23Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_dcrodrigues.pdf: 4283494 bytes, checksum: f02b8fcde738e8644e8140710fccc60a (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-19T13:02:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_dcrodrigues.pdf: 4283494 bytes, checksum: f02b8fcde738e8644e8140710fccc60a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-19T13:02:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_dcrodrigues.pdf: 4283494 bytes, checksum: f02b8fcde738e8644e8140710fccc60a (MD5) Previous issue date: 2016 / There has been an increasing interest in using biomaterials extracted from renewable agricultural resources or industrial by-products because of their high availability, and as a way to add value to those by-products. This need has motivated the search for new materials with film forming abilities. A great variety of materials such as polysaccharides, proteins, and lipids have been used for development of biodegradable (or even edible) films and coatings. Natural polysaccharides such as galactomannan and xyloglucans, extracted from mesquite (Prosopis juliflora) and tamarind (Tamarindus indica) seeds, respectively, may be used for production of edible films and coatings, due to their biodegradability, ability to form cohesive polymeric networks, and safety for food applications. Through the signs of the anomeric carbons, identified by NMR (Nuclear Magnetic Resonance), it was possible to confirm the presence of galactomannan (GM) and xyloglucan (XG) the extracted materials. Polysaccharides such as GM and XG extracted, respectively, mesquite (Prosopis juliflora) and tamarind (Tamarindus indica), may be such alternative materials for the production of films and coatings, with the basis of their biodegradability, ability of forming polymer networks cohesive and safety for use in food. The extraction yields of galactomannan and xyloglucan were 6.6 and 10.1% (w/w), respectively. The polysaccharides were confirmed by NMR (Nuclear Magnetic Resonance) as GM and XG. The bands attributed to polysaccharides in the sample were identified by FTIR (Fourier Transform Infrared Spectroscopy) in the region around 750-1300 cm-1 for the two biopolymers. The monosaccharide weigth ratios (%) were; for GM (by HPLC - High Performance Liquid Chromatography), mannose: galactose, 20.35:15.40, and for XG (by GC-MS), glucose: xylose: galactose, 46.47:24.87:17.52. Film forming galactomannan and palm fruit oil (PFO) emulsions were prepared by mixing PFO nanoemulsions with GM and glycerol in order to obtain films by casting. Similarly, film forming emulsions from XG and sesame oil (SO) were prepared. Increased vegetable oil contents (PFO or SO) resulted in increased hydrophobicity reflected as increased water contact angle, and decreased water solubility and water vapor permeability. However, transparency and mechanical properties of films (except elongation at break) were impaired by high lipid concentrations. Sonication provided a more uniform dispersion of lipid droplets, as indicated by the Scanning Electronic Microscopy (SEM) images. The presence of lipids in the films was noticeable due to the appearance of relatively uniform and well dispersed oil droplets within the polysaccharide matrix. / Existe, atualmente, um interesse crescente no uso de materiais extraídos de recursos agrícolas renováveis ou subprodutos industriais, devido a sua maior disponibilidade e como uma alternativa para fornecer maior valor agregado a estes subprodutos. Essa necessidade tem motivado a busca por novos materiais com habilidades de formação de películas. Os polissacarídeos, tais como os galactomananos (GM) e os xiloglucanos (XG) extraídos da algaroba (Prosopis juliflora) e do tamarindo (Tamarindus indica), respectivamente, podem ser estes materiais alternativos utilizados para a produção de filmes e revestimentos, tendo como base a sua biodegradabilidade, capacidade de formação de redes poliméricas coesas e segurança para o uso em alimentos. O objetivo desta pesquisa foi elaborar e analisar as propriedades físicas de filmes obtidos a partir de GM de algaroba e XG de tamarindo, emulsionados com óleos vegetais, óleo de palma (OP) e óleo de gergelim (OG), respectivamente. Os rendimentos de extração de GM e XG foram 6,6 e 10,1% (m/m), respectivamente. Por meio dos sinais dos carbonos anoméricos identificados por RMN (Ressonância Magnética Nuclear), foi possível confirmar a presença de GM e XG nos materiais extraídos. As bandas características de polissacarídeos, na amostra, foram identificadas por FTIR (Fourier Transform Infrared Spectroscopy) na região em torno de 750 - 1300 cm-1 para os dois biopolímeros. As proporções mássicas de monossacarídeos (%) foram: para o GM (por HPLC - High Performance Liquid Chromatography): manose: galactose, 20,35: 15,40; e para o XG (por CG-MS), glicose: xilose: galactose, 46,47: 24,87: 17,52. Emulsões filmogênicas de GM e OP foram preparadas através da mistura de nanoemulsões de OP com GM e glicerol, a fim de se obter filmes por casting. E assim, da mesma forma, as emulsões filmogênicas de XG e OG foram preparadas. O aumento no teor do óleo vegetal (OP ou OG) resultou no aumento da hidrofobicidade, refletida pela aumento dos ângulos de contato da água e pela dimuição da solubilidade em água e permeabilidade ao vapor de água. Entretanto, a transparência e as propriedades mecânicas dos filmes (exceto elongação na ruptura) foram prejudicadas com a concentração elevada de lipídios. A utilização da sonicação proporcionou uma dispersão mais uniforme das gotículas lipídicas, visualizadas por meio das imagens obtidas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). A presença de lipídio nos filmes emulsionados foi notória devido ao aparecimento das gotículas de óleo, que foram relativamente uniformes e bem dispersas dentro da matriz polissacarídica.
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Meio condicionado de macrófagos ativados por polissacarídeos sulfatados da alga parda Dictyota caribaea inibe a proliferação de melanoma metastático In vitro / Conditioned medium of macrophages activated by sulfated polysaccharides from brown algae Dictyota caribaea inhibits proliferation of metastastic melanoma In vitro

Assef, Alexia Nathália Brígido 24 July 2017 (has links)
ASSEF, A. N. B. Meio condicionado de macrófagos ativados por polissacarídeos sulfatados da alga parda Dictyota caribaea inibe a proliferação de melanoma metastático In vitro. 2017. 87 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceara, Fortaleza, 2017. / Submitted by Farmacologia Pós-Graduação (posgfarmacologia@gmail.com) on 2017-08-07T22:02:56Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_anbassef.pdf: 2693690 bytes, checksum: 383c9eb9c2aeb8aaa7466ce9c480c742 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-08T12:55:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_anbassef.pdf: 2693690 bytes, checksum: 383c9eb9c2aeb8aaa7466ce9c480c742 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-08T12:55:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_anbassef.pdf: 2693690 bytes, checksum: 383c9eb9c2aeb8aaa7466ce9c480c742 (MD5) Previous issue date: 2017-07-24 / Cancer refers to a set of diseases related to uncontrolled proliferation and invasion of neoplastic cells into distant tissues. The tumoral tissue is complex and consists of several non-tumor cells that contribute, together with the tumor cells, to the formation of the tumor microenvironment (MIT). MIT favors the growth and development of the tumor and increase the aggressiveness of the disease. Among the non-tumor cells present in MIT, macrophages (MΦ) have prominent role. MΦ have high phenotypic plasticity, and may show anti-tumor action when activated classically (M1 phenotype) or pro-tumor, when tumor-associated MΦ undergo alternative activation (M2-like phenotype). TAMs are often related to a worse prognosis for the patient. Modulation from M0 MΦ (unstimulated) to M1 or re-education from TAM to M1 are strategies aimed at assisting in the treatment of malignant tumors. Sulfated polysaccharides (SP) from algae can act as modifiers of the biological response by regulating the activation of MΦ and potentiate the immune response against tumor cells. The objective of this work was to evaluate the immunostimulatory and antitumor potential of sulfated polysaccharides extracted from brown algae Dictyota caribaea (DCA) in vitro. Samples of DCA and conditioned medium of macrophage stimulated with DCA (CM) were initially evaluated for cytotoxicity in murine metastatic melanoma (B16-F10 cell line) by the SRB assay and activation of murine macrophages (RAW264.7 cell line) by the Griess assay. Although samples, including crude extract and fractions, were not cytotoxic, all of them activated the MΦ. Additionally, the supernatants of macrophages treated with DCA (CM DCA) were able to inhibit B16-F10 cells growth approximately 25%. The DCA F9 fraction was chosen for additional studies using CM DCA F9 due to their high yield (~40%) and better antiproliferative effect among the other fractions. In addition to increasing nitric oxide production, treatment of macrophages with DCA F9 also increased the release of TNF-α and IL-10 cytokines as measured by ELISA. Treatment of melanoma with CM DCA F9 caused a reduction on cell counting and induced morphological changes without compromising membrane integrity. In relation to the morphology, it was observed an increasing of the population percentage of shrink cells (~10%) and granularity cells (~15%). CM DCA F9 treatment also changed B16-F10 cell cycle profile. It decreased the G2/M phase. Since nitrite did not inhibit the growth of B16 F10, the antiproliferative effects observed are due to other cytotoxic substances produced by RAW264.7, e.g. TNF-α. When associated with the chemotherapeutic doxorubicin (DOX), DCA F9 but not CM DCA F9, potentiated tumor cell inhibition in vitro. In conclusion PS of D. caribaea activated MΦ for anti-tumor phenotype. Further studies are needed to improve phenotypic characterization of MΦ, as well as the antitumor effect and respective pathways related to these effects. / O câncer se refere a um conjunto de doenças relacionadas à proliferação descontrolada e invasão células neoplásicas para tecidos distantes. O câncer faz parte de um sistema complexo, constituído por diversas células não tumorais que contribuem, junto com as células tumorais, para a formação do microambiente tumoral (MIT). Por sua vez, o MIT favorece o crescimento e desenvolvimento do tumor e aumento da agressividade da doença. Dentre as células não-tumorais presentes no MIT, os macrófagos (MΦ) possuem papel destacado. Os MΦ possuem alta plasticidade fenotípica, podendo exibir ação anti-tumoral quando ativados classicamente (fenótipo M1) ou pró-tumoral, quando sofrem ativação alternativa (fenópito M2). Os MΦ associados ao tumor (TAM) apresentam fenótipo M2 peculiar e a sua presença está frequentemente relacionada a um pior prognóstico para o paciente. A modulação de MΦ M0 (não estimulados) para M1 ou reeducação de TAM para M1 são estratégias que visam auxiliar no tratamento de tumores malignos. Polissacarídeos sulfatados (PS) de algas podem atuar como modificadores da resposta biológica regulando a ativação de MΦ e potencializar a resposta destes últimos contra células tumorais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antitumoral in vitro de macrófagos ativados por PS extraídos da alga parda Dictyota caribaea (DCA). DCA e o meio condicionado de macrófagos estimulados (MC) pela DCA foram avaliadas inicialmente quanto sua citotoxicidade em melanoma metastático (linhagem murina B16-F10) in vitro pelo ensaio do SRB. Para avaliação do efeito imunoestimulante de macrófagos (linhagem murina RAW264.7) ativados pela DCA foi realizadoo ensaio de Griess. Embora nenhum PS, incluindo extrato bruto e frações, tenha sido citotóxico, todos ativaram MΦ. Os MC com DCA (MC DCA) 100 e 250 µg/mL foram capazes de inibir aproximadamente 25% do crescimento tumoral in vitro. A fração DCA F9 foi escolhida para estudos adicionais com MC DCA F9 devido ao seu alto rendimento (~40%) e destacado efeito antiproliferativo em relação as demais. Além de aumentar a produção de óxido nítrico, o tratamento de macrófagos com DCA F9 também provocou aumento da liberação das citocinas TNF-α e IL-10 medidas por ELISA. O tratamento de melanoma com MC DCA F9 nas concentrações de 100 e 250 µg/mL causou redução da contagem de células e alterações na morfologia, mas a membrana plasmática permaneceu íntegra. Em relação à morfologia, observou-se aumento das populações de células com tamanho reduzido (~10%) e com granulosidade aumentada (~15%). Além disso, MC DCA F9 alterou o perfil do ciclo celular da B16-F10. Observou-se diminuição de células em G2/M. Uma vez que o nitrito não inibiu o crescimento da B16-F10, os efeitos antiproliferativos observados se devem a outras substâncias citotóxicas produzidas pela RAW264.7, como p.ex. TNF-α. Quando associados com o quimioterápico doxorrubicina (DOX), DCA F9, mas não MC DCA F9, foi capaz de potencializar a inibição tumoral da DOX in vitro. Desta forma, concluímos que os PS de D. caribaea ativaram MΦ para perfil antitumoral. Mais estudos são necessários para complementar a caracterização fenotípica de MΦ, bem como do efeito antitumoral e respectivas vias relacionadas a estes efeitos.
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Síntese e caracterização de géis de galactomanana de fava danta (Dimorphandra gardneriana) para aplicação biológica / Synthesis and characterization of géis of galactomanana of broadbean danta (gardneriana Dimorphandra) for biological application

Monteiro, Aliny Abreu de Sousa January 2009 (has links)
MONTEIRO, A. A. S.; Síntese e caracterização de géis de galactomanana de fava danta (Dimorphandra gardneriana) para aplicação biológica. 2009. Dissertação (Mestrado em Química) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-10-15T18:53:44Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_aasmonteiro.pdf: 1183574 bytes, checksum: c0355ed84101fd59a3ea32c43d03b204 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-10-30T23:40:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_aasmonteiro.pdf: 1183574 bytes, checksum: c0355ed84101fd59a3ea32c43d03b204 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-30T23:40:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_aasmonteiro.pdf: 1183574 bytes, checksum: c0355ed84101fd59a3ea32c43d03b204 (MD5) Previous issue date: 2009 / Seeds of Dimorphandra gardineriana Tul. (“fava danta”) were used to obtain galactomannan and the effectiveness of the process was determined based on polysaccharide yield. The “fava danta” galactomannan was purified by Fehling method in order to reduce protein content. This treatment results in 36% of protein reduction and a decrease in the gum solution viscosity due to the molar mass reduction. “Fava danta” galactomannan without purification (GFDNP) and purified one (GFDP) were crosslinked with glutaraldehyde to produced fluid hydrogels. The crosslinking reaction was followed using rheological measurement. The increase of polysaccharide solution viscosity with increasing reaction time is gradual and can be interrupted at the moment that a fluid hydrogel is obtained through dialysis against water. Fluid hydrogel from “fava danta” galactomannan without purification (GelGFDNP) and purified (GelGFNDP) were obtained after 15 and 17 days respectively. For GelGFDNP an increase of viscosity of nine times was observed while for the GelGFDNP sample, the increase was of one hundred thirty times. At the end of crosslinking reaction, in the health knees frequency, the G´was greater than G” and the G´/G” ratio was higher than 3, showing that a true and strong gel was obtained. Fava-danta galactomannan gels and Hilano G-F 20, commercial gel used in the osteoarthritis treatment, shows a characteristic of pseudoplastic fluid. This behavior is the same observed in sinovial fluid present in healthy knees. The viscosity values of “fava danta” galactomannan gels (GelGFDNP and GelGFDP) are in the same order of values found for Hilano G-F 20. The rheological characteristic of “fava danta” galactomannan gels indicate that these gels have potential as a viscosuplement agent / As sementes da espécie Dimorphandra gardneriana foram utilizadas como matéria-prima para a obtenção de galactomananas e a eficiência do processo foi determinada pelo rendimento em polissacarídeo obtido. A goma de fava danta foi purificada pelo método de Fehling com a finalidade de reduzir, principalmente, proteínas. Esse tratamento propiciou uma redução de 36% de proteína e uma considerável redução na viscosidade, o que está condizente com a redução da massa molar dessa amostra. A goma de fava danta não-purificada (GFDNP) e a purificada (GFDP) foram reticuladas com glutaraldeído para produzir hidrogéis fluidos. A reação de reticulação foi acompanhada por medidas reológicas. O aumento da viscosidade do polissacarídeo com o tempo de reação de reticulação é gradativo e pode ser interrompido no momento em que se obtém um hidrogel fluido, por diálise contra água. Hidrogéis fluidos de goma de fava danta não purificada (GelGFDNP) e purificada (GelGFDP) foram obtidos após 15 a 17 dias de reticulação. Para o GelGFDNP o aumento da viscosidade foi de nove vezes em relação à viscosidade da solução inicial de goma, enquanto para o GelGFDP foi de cento e trinta vezes. Para esses géis, ao final da reação, na faixa de freqüência do joelho normal, o G’ > G” e G’/G”  3, sendo considerados géis fortes e verdadeiros. Os géis de fava danta bem como o Hilano G-F 20, medicamento utilizado no tratamento de osteoartrose, são fluidos pseudoplásticos, do mesmo modo que o líquido sinovial presente em joelhos saudáveis. As viscosidades dos géis de fava danta (GelGFDNP e GelGFDP) são da mesma ordem de grandeza que o Hilano G-F 20. As características reológicas dos géis de galactomanana de fava danta indicam que estes géis possuem potencial como agente viscossuplementador
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Efeitos renais promovidos por polissacarídeos sulfatados da alga marinha Gracilaria cornea / Renal effects promoted by sulfated polysaccharides from seaweed Gracilaria cornea

Norões, Terentia Batista Sá de January 2014 (has links)
NORÕES, Terentia Batista Sá de. Efeitos renais promovidos por polissacarídeos sulfatados da alga marinha Gracilaria cornea. 2014. 90 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-04-17T12:53:29Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_tbsnnorões.pdf: 2331132 bytes, checksum: b0cce8e8531471fd37f587fb45d92159 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-04-17T12:56:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_tbsnnorões.pdf: 2331132 bytes, checksum: b0cce8e8531471fd37f587fb45d92159 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T12:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_tbsnnorões.pdf: 2331132 bytes, checksum: b0cce8e8531471fd37f587fb45d92159 (MD5) Previous issue date: 2014 / The red marine algae are a group of sea live beings able to produce sulfated polysaccharides. These polysaccharides are found in great amount in algae of Gracilaria cornea species and they also have several commercial uses, mainly in industrial fields. They are also used for scientific pourposes because of its biologic activities. This work`s goal is to evaluate the effects of sulfated polysaccharides total (SPTs) from the seaweed Gracilaria cornea contributing to a better understanding about its effects. First, we have studied SPTs effects in three concentrations (1μg/mL, 3μg/mL e 4,5μg/mL), in the renal perfusion system aiming to evaluate the possible changes in kidney parameters. In this experimental model we used male Wistar rats (280-300 g). After the perfusion, the kidneys were subjects of histological analysis. The parameters were analised using ANOVA and Student t-test (p<0,005). The results we have found proved that SPTs promoted a significant increase in perfusion pressure (PP) and in renal vascular resistance (RVR) in concentrations 3,0 and 4,5 µg/mL. The urinary flow (UF) decreased with the 1 µg/mL SPTs concentration, but increased with the 3,0 and 4,5 µg/mL concentrations. The glomerular filtration rate (GFR) significantly dicreased with all the three concentrations. We noticed a decrease in sodium, potassium and chloride transport. The Osmotic Clearance (COSM) decreased with 1,0 μg/mL concentration and increased with 4,5 μg/mL concentration. The histological changes were mild and included tubular and glomerular damages. We also investigated the side effects caused by SPTs in cultured renal tubular cells of the type MDCK (Madin-Darby canine kidney). MDCK cells were grown in plastic flasks at 37 °C in umidified atmosphere of 5% CO2 – air with RPMI 1640 medium supplemented with 10% fetal calf serum. The SPTs caused decrease in cell viability in all studied concentrations (200, 100, 50, 25, 12,5, 6,25 and 3,12 µg/mL) and this effect did not depend on concentration. To evaluate the type of cell death caused by SPTs in MDCK cells, we performed anexin V-FITC and propidium iodide assays, respectively apoptosis and necrosis indicators. This analysis was made in a flow cytometry system with a 50 µg/mL SPTs concentration. We found a significant cell death amount, with apoptotic signs, and also late apoptotic cell death. These findings can improve the understanding about this algae biologic activities and help to find new farmacologic antitumoral weapons. / As algas marinhas são um grupo de seres vivos aquáticos com capacidade de produzir polissacarídeos sulfatados. Esses polissacarídeos são encontrados em grandes concentrações nas algas da espécie Gracilaria cornea e possuem diversas finalidades comerciais, sendo utilizados nos principais setores industriais. Possuem também relevância científica por apresentarem diversas atividades biológicas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a citotoxicidade renal dos polissacarídeos sulfatados totais (PSTs) da alga marinha Gracilaria cornea. Primeiramente, estudaram-se os efeitos dos PSTs, em três concentrações (1μg/mL, 3μg/mL e 4,5μg/mL), no sistema de perfusão de rim de rato isolado com a finalidade de avaliar as possíveis alterações dos parâmetros renais. Neste modelo experimental foram utilizados ratos Wistar machos (280-300 g). Após a perfusão renal, os rins foram submetidos à análise histológica. Os parâmetros avaliados foram analisados pela ANOVA e Student t-test, com p<0,05. Investigaram-se os efeitos causados pelos PSTs em cultura de células tubulares renais do tipo MDCK (Madin-Darby canine kidney). Essas células foram cultivadas em garrafas plásticas a 37 °C em atmosfera de 5% de CO2, com meio RPMI 1640 suplementado com soro bovino fetal a 10%. Para avaliar o tipo de morte celular causada pelos PSTs em cultura de células MDCK, foram realizados ensaios com anexina V-FITC e iodeto de propídio, marcadores de apoptose e necrose, respectivamente, no citômetro de fluxo com a concentração de 50 µg/mL dos PSTs. Os resultados encontrados demonstraram que os PSTs promoveram aumento significativo na pressão de perfusão (PP) e na resistência vascular renal (RVR) nas concentrações de 3,0 e 4,5 µg/mL. O fluxo urinário (FU) diminuiu com a concentração de 1 µg/mL dos PSTs, porém sofreu aumento nas demais concentrações. O ritmo de filtração glomerular (RFG) diminuiu significativamente nas três concentrações. Foi observada diminuição do percentual de transporte dos eletrólitos cloreto, sódio e potássio. O Clearance Osmótico (COSM) foi diminuído e aumentado com as concentrações de 1,0 e 4,5 μg/mL, respectivamente. As alterações histológicas nos rins indicaram alterações tubular e glomerular. O tratamento de cultura de células com os PSTs causou redução da viabilidade celular em todas as concentrações estudadas (200, 100, 50, 25, 12,5, 6,25 e 3,12 µg/mL) não sendo concentração-dependente. Observou-se morte celular significativa, com evidências de um processo apoptótico, além de morte celular por apoptose tardia. Esses achados tentam colaborar para um melhor conhecimento acerca dos efeitos citotóxicos renais dessa alga e pode ainda propiciar a descoberta de novas ferramentas farmacológicas antitumorais.
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Avaliação de atividades biológicas de membrana e gel da galactomanana extraída das sementes de Cassia grandis com biomoléculas imobilizadas

ALBUQUERQUE, Priscilla Barbosa Sales de 20 February 2017 (has links)
Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-25T20:22:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque.pdf: 13218533 bytes, checksum: 43992e138765cd76cde7b95b6cbb44e8 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-27T22:24:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque.pdf: 13218533 bytes, checksum: 43992e138765cd76cde7b95b6cbb44e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T22:24:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque.pdf: 13218533 bytes, checksum: 43992e138765cd76cde7b95b6cbb44e8 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / FACEPE / A galactomanana extraída das sementes de C. grandis representa uma fonte alternativa para galactomananas principalmente devido à sua capacidade de atuar como líquido ou como gel. O presente trabalho teve por objetivo a caracterização de géis e membranas obtidas a partir da galactomanana extraída das sementes de C. grandis, com ou sem biomoléculas imobilizadas (lectina extraída das sementes de Cratylia mollis – Cramoll, lactoferrina, peptídeos bioativos, fitoesteróis e nanopartículas de lecitina com quercetina incorporada), através de análises reológicas, físico-químicas e mecânicas, além da avaliação das ações citotóxica e cicatrizante destes produtos. A galactomanana foi extraída por precipitação com etanol, enquanto a Cramoll foi obtida por precipitação salina seguida por cromatografia de afinidade em Sephadex G-75. As nanopartículas de lecitina contendo quercetina foram caracterizadas através da medição de diâmetro das partículas, grau de polidispersão, estabilidade e potencial zeta. Os géis de galactomanana (1,7 % p/v), sem e com Cramoll imobilizada por enclausuramento, tiveram sua estabilidade avaliada ao longo do tempo por reometria, pH, cor, avaliação microbiana e atividade hemaglutinante. O efeito da concentração de diferentes biomoléculas imobilizadas nas propriedades físico-químicas das membranas de galactomanana (0,8 % p/v) foi avaliado através de MEV, FTIR, propriedades mecânicas e térmicas, cor, conteúdo de água, solubilidade, permeabilidade ao vapor de água e ângulo de contato. As atividades citotóxica e cicatrizante das membranas com Cramoll imobilizada foram avaliadas em cultura de fibroblastos e em ratos machos, respectivamente. Os resultados revelaram que ambos os géis, sem e com Cramoll imobilizada, demonstraram transparência, estabilidade até 30 dias, não apresentaram contaminação microbiana e mantiveram o pH próximo da neutralidade, no entanto, as análises reológicas mostraram que o gel com Cramoll imobilizada perdeu substancialmente o seu módulo elástico após 60 dias. Todas as nanopartículas de lecitina contendo quercetina (25-150 μg/mL) apresentaram potencial zeta semelhante (-47,14). Nanopartículas de lecitina contendo até 50 μg/mL de quercetina apresentaram estabilidade e tamanho de partícula menores quando comparadas àquelas com 75 a 150 μg/mL de quercetina incorporada; estas apresentaram sinais de precipitação após 48 horas. Lactoferrina, peptídeos bioativos, fitoesteróis e nanopartículas de lecitina contendo quercetina, quando imobilizadas em membranas de galactomanana, levaram à produção de membranas com alta luminosidade e tendência ao amarelo, além de apresentarem maior rigidez, rugosidade e características físicas mais hidrofílicas que as membranas sem biomoléculas. A avaliação in vivo da atividade cicatrizante das membranas de galactomanana sem e com Cramoll imobilizada revelou uma efetiva regeneração tecidual em feridas tópicas produzidas em ratos machos, no entanto, as membranas com Cramoll imobilizada foram significativamente mais eficientes, promovendo a completa contração das feridas em apenas 11 dias. Em conclusão, os resultados obtidos sugerem que a galactomanana extraída das sementes de C. grandis é uma promissora matriz para a imobilização de biomoléculas, principalmente no que se refere à utilização de suas suspensões em membranas e géis úteis para as indústrias farmacêutica, cosmética e alimentícia. / The galactomannan extracted from the seeds of C. grandis represents an alternative source for galactomannans mainly due to its ability to act as a liquid or as a gel, suggesting that, due to its rheological properties, it can be used in different biotechnological applications, such as an effective support for immobilization of biomolecules. The present study aimed the characterization of gels and membranes prepared from the galactomannan extracted from C. grandis seeds with and without immobilized biomolecules (lectin extracted from the seeds of Cratylia mollis - Cramoll, lactoferrin, bioactive peptides, phytosterols and nanoparticles of lecithin with incorporated quercetin) through rheological, physicochemical and mechanical analysis, as well as the evaluation of cytotoxic and healing activities of the above mentioned matrices. The galactomannan was extracted by ethanol precipitation, while Cramoll was obtained by salt precipitation followed by affinity chromatography on Sephadex G-75. Lecithin nanoparticles containing quercetin were characterized by measurement the diameter of the particles, degree of polydispersity, stability and zeta potential. Galactomannan gels (1.7 %, w/v), with and without immobilized Cramoll, were evaluated along time by rheometry, pH, colour, microbial contamination and lectin hemagglutinating activity. MEV, FTIR, mechanical and thermal properties, colour, water content, solubility, water vapour permeability and contact angle were performed to evaluate the effect of the concentration of different on the physicochemical properties of galactomannan membranes (0.8 %, w/v). In addition, the cytotoxic and healing activities of membranes with immobilized Cramoll were evaluated in culture of fibroblasts and in male rats, respectively. The results showed that both gels, with and without immobilized lectin, demonstrated transparency, were stable up to 30 days, presented no microbial contamination as well as a pH close to neutral, however, rheological data showed that the gel with immobilized lectin loses its elastic modulus substantially after 60 days. All of the lecithin nanoparticles containing quercetin (25-150 μg/mL) showed similar zeta potential (-47.14). Lecithin nanoparticles containing up to 50 μg/mL of quercetin showed stability and particles size smaller when compared to those with 75 to 150 μg/mL of incorporated quercetin; the last one concentrations showed signs of precipitation after 48 hours of analysis. Lactoferrin, bioactive peptides, phytosterols and lecithin nanoparticles with incorporated quercetin, when immobilized on galactomannan membranes, lead to membranes with a strong whiteness tendency as well as a yellowish appearance, roughness on their surface and physical characteristics more hydrophilic than membranes without biomolecules (control). In vivo healing activity evaluation of the galactomannan membranes with and without immobilized Cramoll improved tissue regeneration on topical wounds of male rats; however, membranes with immobilized lectin were significantly better, promoting complete wounds´ contraction only in 11 days. In conclusion, the obtained results suggest the galactomannan extracted from C. grandis as a promising matrix for immobilization of biomolecules, mainly due to the use of their suspensions in membranes and gels useful for pharmaceutical, cosmetic and food industries.

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