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Micropropagação e avaliação da potencialidade genotóxica de Petiveria alliacea L. / Micropropagation and evalvation of the genotoxic potential of petiveria alliacea L.Bianka de Oliveira Soares 28 February 2013 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Petiveria alliacea L. é uma planta pertencente à família Phytolaccaceae, conhecida
popularmente no país como guiné, erva-de-alho, erva-tipi ou amansa-senhor. Nativa da
Região Amazônica tem sido cultivada em muitas áreas tropicais com propósito medicinal ou
ritualístico. O objetivo desse trabalho foi (i) o desenvolvimento e a multiplicação de plantas
de P. alliacea L. através de métodos de cultura de tecidos, e monitoramento fitoquímico das
culturas, e (ii) avaliação comparativa das potencialidades genotóxica e antigenotóxica entre
plantas coletadas no campo e produzidas in vitro. Exemplares de diferentes populações
ocorrentes no estado do Rio de Janeiro foram utilizados como matrizes para a cultura. Foi
estabelecido um protocolo para multiplicação das plantas em meio MS suplementado com
BAP e ANA em diferentes concentrações e combinações, que forneceu como melhor
resultado em média 8 plantas por explante na concentração de BAP 4,4 μM + ANA 0,54 μM.
A análise fitoquímica foi baseada em métodos cromatográficos de diferentes extratos de
plantas de campo e plantas in vitro das populações estudadas resultando em diferentes
substâncias identificadas nas amostras analisadas por cromatografia em camada delgada. Os
extratos foram também avaliados por cromatografia gasosa acoplada á espectrometria de
massas, sendo identificadas diferentes substâncias, entre as quais o dibenzil dissulfeto, um
produto de degradação de tiosulfinatos com importantes atividades biológicas na defesa das
plantas. Os extratos aquosos das plantas de campo e daquelas estabelecidas in vitro foram
submetidos à avaliação da potencialidade genotóxica e antigenotóxica, usando-se como
modelo o DNA plasmidial pUC 9.1. Os resultados demonstraram que as concentrações
utilizadas do extrato aquoso foram capazes de induzir alterações na conformação estrutural do
DNA, indicando a ocorrência de quebras simples e duplas nesta molécula. Observou-se
também que as lesões aumentaram, proporcionalmente ao aumento da concentração dos
extratos, caracterizando-se, assim, um efeito dose-resposta. Os dados também apontaram para
um efeito protetor do extrato aquoso, em relação aos danos oxidativos causados pelo cloreto
estanoso, indicando, também, uma potencialidade antigenotóxica do extrato aquoso. / Petiveria alliacea L. popularly known in Brazil as Guiné, Amansa-senhor or
Tipi belongs to the Phytolaccaceae family. Native from the Amazon region, it has been
cultivated in many tropical areas for medicinal or ritualistic purposes. The aim of this study
was: i) the development and multiplication of plants of P. alliacea L. through tissue culture
methods as well as monitoring phytochemical cultures; ii) comparative assessment of
genotoxic and antigenotoxic potentialities between field collected and in vitro grown plants.
Specimens from different populations occurring in the state of Rio de Janeiro were used as
matrices for the culture. It was established a protocol for propagation in MS medium
supplemented with different BAP + ANA concentrations and combinations whose best result
(BAP 4,4 μM + ANA 0,54 μM) provided 8 plants per explant in average. The phytochemical
analysis was based on chromatographic methods of different extracts both of field and in vitro
plant populations resulting in different substances identified through the Thin-layer
chromatography analyzing samples. The extracts were also assayed by cromatografia gasosa
acoplada á espectrometria de massas having identified various substances, including the
dibenzyl disulfide, a degradation tiosulfinatos product with important function in plant
defense and increasing use by the pharmaceutical industry. Field and in vitro plant aqueous
extracts were evaluated for genotoxic and antigenotoxic potentialities using PUC 9.1 plasmid
DNA. These results showed changes in the DNA structural conformation indicating the
occurrence of single and double strand breaks induced by the extracts in a dose-response way.
Finally, data also pointed to a protective effect of aqueous extract against stannous chloride
oxidative damage, characterizing an antigenotoxic potentiality of aqueous extract.
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Micropropagação e avaliação da potencialidade genotóxica de Petiveria alliacea L. / Micropropagation and evalvation of the genotoxic potential of petiveria alliacea L.Bianka de Oliveira Soares 28 February 2013 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Petiveria alliacea L. é uma planta pertencente à família Phytolaccaceae, conhecida
popularmente no país como guiné, erva-de-alho, erva-tipi ou amansa-senhor. Nativa da
Região Amazônica tem sido cultivada em muitas áreas tropicais com propósito medicinal ou
ritualístico. O objetivo desse trabalho foi (i) o desenvolvimento e a multiplicação de plantas
de P. alliacea L. através de métodos de cultura de tecidos, e monitoramento fitoquímico das
culturas, e (ii) avaliação comparativa das potencialidades genotóxica e antigenotóxica entre
plantas coletadas no campo e produzidas in vitro. Exemplares de diferentes populações
ocorrentes no estado do Rio de Janeiro foram utilizados como matrizes para a cultura. Foi
estabelecido um protocolo para multiplicação das plantas em meio MS suplementado com
BAP e ANA em diferentes concentrações e combinações, que forneceu como melhor
resultado em média 8 plantas por explante na concentração de BAP 4,4 μM + ANA 0,54 μM.
A análise fitoquímica foi baseada em métodos cromatográficos de diferentes extratos de
plantas de campo e plantas in vitro das populações estudadas resultando em diferentes
substâncias identificadas nas amostras analisadas por cromatografia em camada delgada. Os
extratos foram também avaliados por cromatografia gasosa acoplada á espectrometria de
massas, sendo identificadas diferentes substâncias, entre as quais o dibenzil dissulfeto, um
produto de degradação de tiosulfinatos com importantes atividades biológicas na defesa das
plantas. Os extratos aquosos das plantas de campo e daquelas estabelecidas in vitro foram
submetidos à avaliação da potencialidade genotóxica e antigenotóxica, usando-se como
modelo o DNA plasmidial pUC 9.1. Os resultados demonstraram que as concentrações
utilizadas do extrato aquoso foram capazes de induzir alterações na conformação estrutural do
DNA, indicando a ocorrência de quebras simples e duplas nesta molécula. Observou-se
também que as lesões aumentaram, proporcionalmente ao aumento da concentração dos
extratos, caracterizando-se, assim, um efeito dose-resposta. Os dados também apontaram para
um efeito protetor do extrato aquoso, em relação aos danos oxidativos causados pelo cloreto
estanoso, indicando, também, uma potencialidade antigenotóxica do extrato aquoso. / Petiveria alliacea L. popularly known in Brazil as Guiné, Amansa-senhor or
Tipi belongs to the Phytolaccaceae family. Native from the Amazon region, it has been
cultivated in many tropical areas for medicinal or ritualistic purposes. The aim of this study
was: i) the development and multiplication of plants of P. alliacea L. through tissue culture
methods as well as monitoring phytochemical cultures; ii) comparative assessment of
genotoxic and antigenotoxic potentialities between field collected and in vitro grown plants.
Specimens from different populations occurring in the state of Rio de Janeiro were used as
matrices for the culture. It was established a protocol for propagation in MS medium
supplemented with different BAP + ANA concentrations and combinations whose best result
(BAP 4,4 μM + ANA 0,54 μM) provided 8 plants per explant in average. The phytochemical
analysis was based on chromatographic methods of different extracts both of field and in vitro
plant populations resulting in different substances identified through the Thin-layer
chromatography analyzing samples. The extracts were also assayed by cromatografia gasosa
acoplada á espectrometria de massas having identified various substances, including the
dibenzyl disulfide, a degradation tiosulfinatos product with important function in plant
defense and increasing use by the pharmaceutical industry. Field and in vitro plant aqueous
extracts were evaluated for genotoxic and antigenotoxic potentialities using PUC 9.1 plasmid
DNA. These results showed changes in the DNA structural conformation indicating the
occurrence of single and double strand breaks induced by the extracts in a dose-response way.
Finally, data also pointed to a protective effect of aqueous extract against stannous chloride
oxidative damage, characterizing an antigenotoxic potentiality of aqueous extract.
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