Orientador: Roberto H. Moretti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T06:22:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ZazuetaMorales_JosedeJesus_M.pdf: 4403866 bytes, checksum: ea9a443ebd7ab36ecfd06eb7003e93c8 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: Visando estudar os aspectos tecnológicos da produção de uma bebida protéica, foram realizadas, a nível de laboratório, numerosas experiências de extração, utilizando girassol e soja como matérias primas e água e soro de queijo como meios líquidos de extração. Nestas experiências, foi utilizado um processo tradicional ,que consistiu de três operações básicas: maceração, moagem e centrifugação. Durante a etapa de maceração, utilizando grãos com casca e decorticados, foi estudado um sistema descontínuo sendo testadas temperaturas entre 10 e 70 °C, e observou-se que a taxa de absorção de água, a perda de sólidos, os rendimentos de extração de sólidos e o pH final do meio de maceração, foram sensivelmente afetados. Devido a um efeito microbiológico, o pH final dos líquidos de maceração e, conseqüentemente, os rendimentos de extração de sólidos, experimentaram uma queda drástica nas temperaturas de 35 e 45 °C. Em relação à operação de moagem, foram testadas diferentes relações sólido:líquido entre 1: 6 e 1: 16, com grãos de soja, de girassol e com misturas destes. Nestes ensaios, a relação 1:10 foi considerada como a mais apropriada quanto à composição e rendimentos dos extratos. A mistura girassol-soja 70-30 (%, p/p) extraída com soro numa proporção de 1:10, resultou em vantagens tanto funcionais, pelo aumento da estabilidade física do extrato, como nutricionais, pelo elevado escore químico obtido. Por outro lado, a utilização do soro de queijo apresentou grandes vantagens, tecnológicas, além de nutricionais, pelos maiores rendimentos de extração obtidos, abrindo assim, um novo potencial para seu melhor aproveitamento / Abstract: With the objetive of studying the technological aspects of producing a protein beverage, a variety of extraction experiments were carried out on a laboratory scale, using sunflower seeds and soybeans as the raw materials, and water and cheese whey as the liquid mediums for extraction. A traditional process was used in these experiments, consisting of three basic operations: maceration, grinding and centrifugation. Using grains with and without the seed coat, a discontinuous system was studied for the maceration phase, testing temperatures between 10 and 70°C. It was observed that the level of water absorption, the loss of solids, the extraction yields of solids and the final pH of the maceration medium, were noticeably affected. Due to a microbiological effect, the final pH of the maceration liquids, and consequently the extraction yields solids, suffered a drastic fall at temperatures of 35 and 45 °C. With respect to the grinding operation, solid:liquid ratios between 1:6 and 1:16 were tested, using grains of soybean, sunflower and in mixtures. It was shown that the ratio 1: 10 gave the best results with respect to the composition and yields of the extracts. A sunflower-soy mixture of 70:30 (%, w/w) together with cheese whey (1:10, grains:whey) was chosen, for these experiments, on the basis of both its functional advantages, due to the increase in the physical stability ofthe extract, and its nutritional advantages, due to the high chemical score obtained. In addition the use of cheese whey instead of water as the liquid medium for extraction, apart from these nutritional and technological advantages. resulted in greater extraction yields, thus paving the way for a new potencial use of cheese whey / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Maria Cristina Cintra Gomes Marcondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T13:25:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cruz_BreadLeandroGomesda_D.pdf: 1846989 bytes, checksum: 30a328ba2d64a0e66c6bb74d4c81d492 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O câncer é uma das principais causas de morte no mundo e o quadro de caquexia provocado por alguns tipos de tumor é um dos grandes responsáveis por isso. A caquexia instaurada em pacientes com câncer, sendo mais prevalente nos tumores gastrointestinal, pulmonar, pancreático e mamário, é caracterizada, dentre outros processos, pela perda involuntária de peso, devido a constante espoliação sobre a massa magra corporal. Estudos que tenham como objetivo a manutenção da massa magra em organismos portadores de tumor caquético são importantes para contribuir com a redução de óbitos e preservar a qualidade de vida das pessoas com câncer. Nos últimos anos, a leucina tem mostrado ser eficaz na manutenção da massa magra corpórea através do estímulo de síntese protéica muscular e inibição da degradação de proteína, principalmente da massa magra corpórea. Logo, entender como a presença da leucina estimula a síntese protéica e atua de forma protetora em organismo no estado caquético tem se mostrado uma necessidade crescente. Desse modo, a proposta deste trabalho foi avaliar, ao longo do tempo, os efeitos de dieta rica em leucina sobre a sinalização de síntese e degradação protéica, envolvendo o complexo mTOR em músculos de ratos portadores do carcinossarcoma de Walker 256. Os animais foram distribuídos em grupos de acordo com a inoculação tumoral e/ou esquema nutricional com dieta rica em leucina, sendo sacrificados em três momentos diferentes do desenvolvimento tumoral (7º, 14º e 21º dias após a implantação do tumor). No músculo gastrocnêmio foram analisadas as proteínas-chave da via mTOR, como RAG A GTPase, ERK/MAP4K3, PKB/Akt, mTOR, p70S6K1, Jnk, IRS-1, STAT3, e STAT6 e, tambem, foram avaliadas as proteínas de degradação protéica pertencentes ao sistema ubiquitina-proteossomo (11S, 19S e 20S) e citocinas IL-4, IL-6, IL-10, TNF? e INF?. Os resultados mostram que o desenvolvimento tumoral reduziu a ativação de RAG-A, associada com queda de IRS-1, aumento da PKB/Akt e Erk/MAP4K3 no 21º dia e manutenção de p70S6K1; também houve aumento dos níveis de STAT-3 e STAT-6 em ratos portadores de tumor. Entretanto, a presença de leucina na dieta modulou etapas chave da via mTOR pelo desencadeamento da ativação aumentada de RAG-A e mTOR junto com a manutenção dos níveis de JNK, STAT-3 e STAT-6 no músculo durante o desenvolvimento do tumor de Walker no organismo caquético. A análise da sinalização para degradação protéica mostrou que o crescimento tumoral promoveu, simultaneamente, diminuição de proteína muscular, acentuado aumento de citocinas pró-inflamatórias (TNF?, IL-6 e IFN?) e aumento progressivo das subunidades proteossômicas (19S e 20S), sendo que a suplementação com leucina atenuou essa ativação. Os resultados obtidos apoiam o efeito benéfico do uso de leucina e esclarece as vias metabólicas utilizadas por este aminoácido, contribuindo para melhor compreensão da ação in vivo desse aminoácido sobre a caquexia / Abstract: Cancer is one of the most important causes of death worldwide and the process of cachexia caused by some types of tumour is largely responsible for this. Cancer-cachexia state established in these patients is characterized, among other processes, by involuntary loss of weight due to constant spoliation of lean body mass. Many studies aim to focus in maintenance of lean body mass in cachectic tumour-bearing host, contributing to the reduction of deaths and improving the quality of life of cancer patients. In recent years, leucine has been shown to be effective in maintaining lean body mass by stimulating muscle protein synthesis and inhibiting the proteolysis. Therefore, there are increased needs in understanding how the presence of leucine stimulates protein synthesis and acts protectively in the cachectic state. The aim of this work is to evaluate the effects of leucine-rich diet in a time-course model on signalling protein synthesis and degradation involving mTOR complex in muscles of Walker 256 carcinoma-bearing rats. Animals were divided into experimental groups based on the tumour inoculation and/or fed a nutritional supplementation diet rich in leucine. Animals were sacrificed at three different times depending on the tumour development (7, 14 and 21 days after tumour implantation), and the gastrocnemius muscles were analysed as mTOR pathway and ubiquitin-proteasome via. The results showed that the tumour development has reduced the activation of RAG-A, associated with a decrease of IRS-1, increased PKB / Akt and Erk / MAP4K3 at day 21 and maintaining p70S6K1, there has also been increasing levels of STAT-3 and STAT-6 in tumour-bearing rats. Meanwhile, the presence of leucine in the diet modulated the key steps of the mTOR pathway for triggering the increased RAG-A and mTOR activation along with the maintenance of levels of JNK, STAT-3 and STAT-6 in the muscle during tumour development in cachectic host. The gastrocnemius muscle signalling of protein degradation indicated by the ubiquitin-proteasome subunits (11S, 19S and 20S) and pro- and anti-inflammatory cytokines were marked increase of pro-inflammatory cytokines (TNF?, IL-6 and IFN?) and a progressive increase in the proteasome subunits (19S and 20S) associated with simultaneously decreased muscle protein. The supplementation with leucine attenuated these parameters, suggesting the beneficial effect of the use of leucine and clarifies the metabolic pathways used by this amino acid, contributing to better understanding of the in vivo action of this amino acid on cachexia / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Luiz Roberto G. Britto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T13:15:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paez-Espinosa_EnmaVeronica_M.pdf: 23050245 bytes, checksum: 0cc0c8d17ecaa21297b9c739206fa1f9 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A utilização de marcadores celulares para mapeamento das regiões cerebrais tem resultado em importantes avanços no estudo da organização morfofuncional do sistema nervoso. No presente trabalho, foram empregadas duas técnicas de marcação, a histoquímica para NADPH-diaforase, que revela neurônios que contêm óxido nítrico (NO) e a técnica imuno-histoquímica para proteínas ligantes de cálcio (CaBPs), com o propósito de se determinar a eventual colocalização neuronal dessas substâncias no cérebro de camundongos, já que ambas parecem estar envolvidas em processos fisio-patológicos semelhantes. A metodologia foi efetuada em cortes frontais do cérebro de 14 camundongos C57BL/6) previamente anestesiados e perfundidos com salina e 4% paraformaldeído. A imuno-histoquímica para as CaBPS(calbindina, parvalbumina e calretinina) foi baseada na técnica de avidina-biotina-peroxidase (ABC) e imuno-fluorescência. Em seguida, os cortes foram processados pela técnica histoquímica para NADPH-diaforase, utilizando nitrobluetetrazolium como cromógeno. Neuropeptídeo Y, cuja co-Iocalização com NADPH-diaforasetem sido amplamente demonstrada, serviu como controle positivo, que mostrou a validade das técnicas utilizadas. Nossos resultados demonstraram, a nível de cortex, caudado-putamen, vias visuais subcorticais, amígdala e hipocampo, hipotálamo, bulbo olfatório e cerebelo, sub-populações de neurônios independentes para a reação de diaforase e CaBPS.Essesresultados indicam que, apesar de as CaBPse o NO estarem envolvidos em processos neuronais fisio-patológicos similares, eles estão presentes em diferentes sistemas neuronais nesses animais / Abstract: Both nitric oxide (NO) and calcium binding proteins (CaBPs) seem to be involved in some neuropathologicalprocesses. In this study, we sought to investigate if NO and CaBPs are colocalizated in neurons of the mouse brain. Fourteen C57BL/6J mice were deeply anesthetized and perfused with 4% paraformaldehyde and their brains were processed for NADPH-diaphorase histochemistry to detect NO and also subjected to immunohistochemistrywith antibodies against calbindin-28kD, parvalbumin and calretinin. Both fluorescence and peroxidase methods were employed. Colocalization of neuropeptide Y (NPY) with NOS was performed as intensity of staining control. NADPH-diaphorase neurons were seen in several brain regions, which include the cerebral cortex, basal amygdala, hippocampus, olfactory bulb, cerebellum and subcortical visual pathways. CaBPs were also distributed in many brain regions, some of wich contained NADPH-diaphorase. However, no double-labeled cells were seen in the mouse brain, when considering diaphorasepositivity and either one of the CaBPstested. These data suggest that despite the fact that NO and CaBPs appear to be involved in similar neuropathologies, they are present in different neuronal populations in the mouse brain and thus might participate in different neural processes / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Admar Costa de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T20:51:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jalali_VahidehRahnemayeRabbani_D.pdf: 5861725 bytes, checksum: 0bdb0691ce6169d57d18becdfc931b67 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: A presente tese teve como objetivo verificar a influência do feijão (Phaseolus vulgaris) cozido, como fonte pro- teica, na quantidade de nitrogênio endógeno fecal de ratos Wistar, como também estabelecer a origem deste material através da marcação de proteínas e ácidos nucléicos dos ra- tos, respectivamente, com 3H-aminoácidos e 3H-nucleosideos. Realizou-se três ensaios de balanço de nitrogênio em ratos Wistar, previamente jejuados e adaptados à dieta, adrede marcados em suas proteínas mediante injeção intrape- ritonial de L-[5-3H]-arginina-monocloridrato, [2-3H]-glicina ou DL-[4,5-3H]-leucina, em dose única de 42-45 uCi por rato, e colocados em dietas de feijão cv. Carioca 80, feijão cv. Aeté 3 ou caseina, com teor proteico de 10% e aprotéica. Isto permitiu comparar as excreções endógenas de nitrogênio fecal e urinário dos ratos nas diversas dietas balanceadas utilizadas. Visando uma análise mais confiável e como um monitoramento fez-se determinação da dieta consumida, variação de peso dos animais e sua correlação com o nitrogênio retido, a digestibilidade e o valor biológico das proteínas. Observou-se que o consumo do grupo em dieta de caseina era significativamente (p < 0,05) maior do que o consumo dos grupos em dieta de feijão. 0 consumo de alimento pelos grupos em dieta de feijão não chegou a ser diferente, em dois experimentos, daquele dos ratos em dieta aprotéica. As cor- relações entre variação de peso e nitrogênio retido foram expressas por regressão linear positiva (r = 0,83309, p < 0,0001). 0 nitrogênio fecal total excretado pelos grupos em dieta de feijão foi significativamente (p < 0,05) maior, chegando de 2,6 a 4,1 vezes maior do que o excretado pelos ratos em dieta de caseina. Para comparar a excreção endógena fecal dos ratos em dietas teste com aqueles em dieta controle de caseina e aprotéica, determinou-se a radioatividade nas fezes dos ratos. Observou-se que o grupo em dieta Carioca 80 excretou quantidade significativamente (p < 0,05) maior de radioatividade do que aqueles em dietas de caseina e aprotéica. Para o grupo em dieta Aeté 3, a radioatividade das fezes foi maior em relação à aprotéica, mas nem sempre diferiu daquela dos ratos em dieta de caseina. A quantificação de nitrogênio fecal endógeno era estimada a partir da proporção do nitro- gênio endógeno total e a radioatividade das fezes, com base na dieta aprotéica. As quantidades estimadas referente às dietas de cultivares de feijão, bem como as decorrentes da dieta aprotéica, demostraram que os animais alimentados com feijão excretaram 133 a 166% mais nitrogênio endógeno. A determinação da radioatividade do intestino delgado monitorado com radioautografia evidenciou uma maior incorpo- ração de arginina do que leucina e glicina. Os coeficientes das correlações lineares positivas, obtidas entre a radioa- tividade das fezes e o nitrogênio fecal, r = 0,8694, p < 0,001; r = 0,7708, p < 0,001 e r = 0,7212, p < 0,003, respectivamente para 3H-arginina, 3H-leucina e 3H-glicina, bem como o maior parâmetro B do modelo ajustado (y = Bo + Bx), demonstraram que, no caso de arginina, a radioatividade que chega às fezes ligada ao nitrogênio é maior. Sendo assim, considerou-se arginina como marcador proteico mais apropriado. Tendo em vista estabelecer se o aumento da excreção de nitrogênio era devida à descamação dos enterócitos, realizou-se ensaio de balanço de nitrogênio, no qual os ratos foram previamente marcados em seus ácidos nucléicos mediante a injeção intraperitonial de 50 uCi de [G-3H]-adenosina e co- locados em dietas de feijão Carioca 80, caseína ou aprotéica. O conteúdo de RNA das fezes do grupo em dieta Carioca 80 era significativamente maior (p < 0,05) do que o do grupo em caseína; entretanto, o valor da radioatividade das fezes não apresentou diferença significativa com o grupo em caseína. A radioatividade mostrou-se significativamente mais incorporada no intestino delgado dos ratos em dieta do feijão, após 96 horas. Por outro lado, no ensaio realizado com [5-3H]-uridina, no qual os ratos mantidos durante 15 dias nas dietas de feijão Carioca 80 ou caseína, receberam injeção intraperitonial de 120 uCi de [5-3H]-uridina, foi observado que a radioatividade do intestino delgado dos ratos em dieta de feijão, nos períodos de 2,4 e 6 horas, era maior do que a obtida para os ratos em dieta de caseína. Os resultados obtidos nos experimentos com nucleosídeos, confirmaram um metabolismo maior de nucleosídeos para ratos em dieta de feijão. O maior metabolismo de nucleosídeos no intestino delgado de ratos em dieta de feijão, foi considerado como indicativo de uma maior hipertrofia e ou hiperplasia celu- lar; entretanto, os resultados obtidos não mostraram evidência de um aumento significativo na descamação da mucosa intestinal / Abstract: The objective of this research was to investigate the influence of cooked beans as a source of protein, on the quantity of fecal endogenous nitrogen excretion and to explain the origins of this material in Wistar rats. To attain these objectives the technique of labeling protein and nucleic acid with 3H-aminoacids and 3H-nucleosides, respectively, was used. Three experiments of nitrogen balance were carried out with Wistar rats. The animals were first subjected to fasting, followed by a period of adaptation to the diet before labelling their proteins with intraperitoneal injection of a 45 uCi dose of L-[5-3H]-arginine- monohydrochloride, [2-3H]-glycine or DL-[4,5-3H]-leucine. They were then fed on diets containing either bean (cv. Carioca 80), bean (cv. Aete 3) or casein providing a total of 10% protein or a non-protein diet. These experiments permitted a comparison of the quantity of endogenous nitrogen excreted in the feces and urine of the rats on test diets and control diets. To ensure the accuracy of the analysis, a simultaneous assessment of diet intake, correlation between the weight gain and retention of nitrogen, as well as the digestibility and biological value of the protein were also undertaken. Rats fed diets containing casein showed a significantly (p < 0.05) higher ingestion of diet, as compared with those on the bean diet. The correlations between the weight gain and the retention of nitrogen were expressed by positive and moderate linear regression (r = 0.83309, p < 0.0001). The total fecal nitrogen excreted by the groups fed the bean diet were between 2.6 and 4.1 times more than that excreted by animals fed the casein diet. In order to compare the quantity of endogenous nitrogen excreted in the feces and urine of rats on test diets and control diets, the radioactivity of the feces of rats fed on test diets and on control diets were determined. The rats fed on the diet containing Carioca 80 excreted significantly (p < 0.05) more radioactivity than animals on the casein diet. For those fed a diet containing Aete 3 the excretion of radioactivity was signficantly (p < 0.05) higher than for the groups fed a non-protein diet but not always higher than those fed a casein diet. The quantification of endogenous fecal nitrogen in both cultivars of bean and of non-protein diet demonstrated that the animals fed the bean diet excreted higher levels (133 to 166%). Endogenous nitrogen exretion of rats was estimmated by the ratio of total endogenous nitrogen to marker nitrogen, based on the protein-free diet. The determination of radioactivity in the small intestine monitored with adioautography indicated a larger incorporation of arginine than leucine. The coefficients of the positive and moderated linear regression obtained between radioactivity of feces and fecal nitrogen r = 0.8694, p < 0.001; r = 0.7708, p < 0.001 and r = 0.7212, p < 0.003, respectively for 3H-arginine, 3H-leucine and 3H-glycine, together with the larger B parameter of the adjusted model (y = Bo + Bx) demonstrated that the levels of radioactivity appearing in the feces combined with nitrogen were higher in the case of arginine, as compared to leucine and glycine, thus indicating arginine as the most appropriate protein labeller. In order to establish if the increased fecal secretion of nitrogen by rats fed on a diet containing bean was due to an enhancement of proliferation and loss of enterocytes, a nitrogen balance was carried out in which the rats were labelled with intraperitoneal injection of 50 uCi doses of [G-3H]-adenosine and then put on the Carioca 80 diet, casein diet or non-protein diet. Comparing the group on the Carioca 80 diet to the casein group, the quantity of RNA in the feces was significantly (p < 0.05) larger, but the radioactivity level of the feces, although somewhat higher, was not shown to be statistically significant (p < 0.05). The radioactivity was significantly more incorporated in the small intestine of rats fed on a bean diet after 96 hours. Another experiment was carried out with [3H-5]-uridine in which the rats were kept for a period of 15 days on bean (cv. Carioca 80) or casein diet and immediately after received an intraperitoneal injection of 120 uCi [5-3H]- uridine. This demonstrated that the radioactivity was higher in the small intestines of the bean-fed rats than in the casein-fed rats, over periods of 2, 4 and 6 hours. The results obtained from the nucleoside experiments indicated elevated metabolism of the nucleosides by the small intestines of bean-fed rats. This increase in metabolism provided evidence of increased cellular proliferation. However the results provide no evidence of increased loss of intestinal mucosal cells / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Emilio Segundo Contreras Guzman / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-17T08:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Battisti_CremildaRosaDe_D.PDF: 8379964 bytes, checksum: 2d0284735b5ae4a5ba2cb21ac3c60945 (MD5) Previous issue date: 1992 / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

Orientador : Felix Guillermo Reyes Reyes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-20T02:39:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bagnis_CristinaGaribay_M.pdf: 5562923 bytes, checksum: eb53e173e138c6b8c3fa64cae245b68e (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: Neste trabalho foram estudadas as características físicas e químicas de oito variedades de sementes de girassol de maior importância no Brasil. Dentre todas as variedades estudadas, o novo cultivar IAC-Anhandy foi o que apresentou os maiores teores de óleo e amêndoa. A concentração de proteína nas sementes das diversas variedades variou entre 15,38 e 25,28%. As proteínas de girassol mostraram deficiência em lisina (3,5g/l00g de proteína) e um alto conteúdo de aminoácidos sulfurados (5,2g/l00g de proteína) em relação ao padrão da FAO, 1973. Verificou-se que o óleo das oito variedades de girassol conteve urna elevada porcentagem de ácidos graxos insaturados (86,3 a 91,1%), principalmente ácidos linoleico (37,4 a 69,0%) e oleico (19,9a 53,7%). O conteúdo de ácido clorogênico na farinha desengordurada das variedades de girassol variou entre 3,60' e 5,51% na base seca. Também foram determinadas as condições ótimas para a extração das proteínas d~.girassol, a partir da farinha desengordurada obtida de sementes do cultivar IAC-Anhandy. O maior rendimento na extração das proteínas,94%,foi obtido utilizando-se as seguintes condições: relação farinha:água, 1:10 (p/v); pH, 10,0; temperatura, 309C; tempo de agitação, 30 mino. Para evitar o desenvolvimento da cor verde, indesejável, durante o'processo de obtenção do isolado proteico de girassol, devido à oxidação do ácido clorogênico presente naturalmente nas sementes, a extração das proteínas foi feita na presença de diferentes concentrações de tetraborato, ascorbato e metabissulfito de sódio. Estes reagentes exerceram um efeito inibidor da formação de cor, sendo que a maior eficiência na inibição do desenvolvimento da cor, em combinação com um alto rendimento na extração das proteínas, foram conseguidos pelos tratamentos com ascorbato de sódio O,OlM ou com metabissulfito de sódio O,OlM. Posteriormente, foram avaliadas algumas propriedades funcionais da farinha desengordurada e dos isolados proteicos de girassol obtidos a partir dos diferentes tratamentos. Para fins de comparação, foi estudado o isolado proteico de soja proteimax 90 HG. Os isolados proteicos de girassol apresentaram solubilidade máxima de 7 e solubilidade mínima na faixa proteico de soja teve maior capacidade aos produtos proteicos de girassol. Entretanto, os isolados protéico so de girassol mostraram excelentes propriedades de aeração em comparação com o Proteimax 90 HG.Em geral, a presença de ascorbato de sódio O,OlM ou de .rneta-bissulfito de sodio O,OlM durante a extração das prote1nas de g1rassol, não afetou as suas propriedades emulsificantes e de aeração, enquanto que observou-se um aumento na sua capacidade de absorção de água e de gordura. A possível utilização dos isolados proteicos de girassol em produtos de panificação foi avaliada pela incorporação dos mesmos em farinha de trigo (na proporção de 1:9) utilizada no preparo de biscoitos. Obtiveram-se produtos com características aceitáveis de cor e sabor quando foram utilizados os isolados proteicos preparados na presença de ascorbato de sódio O,OlM. em pH acima de pH de 4 a 6. O isolado presença de ascorbuto de sódio 0,01M / Abstract: The physical and chemical characteristics of eight varieties of sunflower seeds of commercia1 importance in Brazil were studied.The IAC-Anhandy, a new cultivar devéloped at the Instituto Agronômico in Campinas, SP, presented the highest levels of oil and ] ernel. The protein content of the several varieties of sunflower seeds ranged from 15.38% to 25.28%. In relation to the FAO standard for protein, 1973,sun-f10wer proteins exhibited lysine deficiency (3.5g/100g of protein) and a high content of sU1fur-contain!ng amino acids (5.2g/100g of protein). AlI eight varieties had a high leveI of unsaturated fatty acids (86.3-91.1%), main1y lin01eic (37.4-69.0%) and oleic acids (19.9-53.7%). The chlrogenic acid content in the defatted sunf10wer f10ur varied b~ 3.60% and 5.51%, ín the dry basis.The optimum conditions for protein extraction were determinedusing defatted f10ur of the IAC-Anhandy variety.ThelÜghestyield,of 94t, was. obtained using the following conditions: flour: water ratio, 1:10 .(w/v) i stirring time, 30 mini temperature, 30QCi pH, 10.0. n order to avoid the deve10pment of.an undesirab1e green color, due to chlorogenic acid oxidation, the protein extraction was pe! formed in the presence of different concentrations of sodiurn tetrabora te, ascorbate or metabisulfite. These reagents showed a inhibitory effect on the green color formation. Thebest efficiency in color inhibition and the highest yield in protein extraction were obtained using O.OlM sódiurn ascorbate or O.OlM sodiurn metabisulfite. Some functional properties of the defatted sunflower flour and isolates (extracted in the absence and presence of 0.01M sodium ascor-bate or O.OlM sodium metabisulfite) were determined. proteimax 90 HG, a commercial soy protein isolate, was used for comparison purposes.The sunflower isolates exhibited maximurn and minimum solubility at pH abor ve 7.0 and between 4.0 and 6.0, respectively. Thesunflower p~otein isolates showed a higher whipping capacity and lower water and fat absorption than Proteimax 90 HG. The emulsifying and whipping properties of sunflower isolates Here not affected by the presence of O.OlM sodium ascorbate or O.OlM sodium metabisulfite. However,. an increase in the water and fat absoq~ tion was observed. Cookies were prepared with wheat flour containing 10% sun flower protein isolates, in order to evaluate the feasibility of their use in the baking industry. Cookies with desirable characteristics af taste and color were made employing the isolate obtained in the pre-sence of O.OlM sodium ascorbate / Mestrado / Tecnologia de Alimentos / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Valdemiro C. Sgarbieri / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T06:51:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CruzValenzuela_ManuelReynaldo_M.pdf: 3924007 bytes, checksum: 8ab1ee21ed2d58831a9d9496e93f0ce7 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: O feijão é uma boa fonte de proteínas vegetais, porém, qualitativamente as proteínas do feijão são inferiores às de muitas outras proteínas por conterem: inibidores de enzimas proteoliticas, lectinas, quantidades limitantes de aminoácidos sulfurados, baixa disponibilidade biológica de aminoácidos e baixa digestibilidade. A importância das substâncias de ação anti nutricional presente no feijão ainda não foi esclarecida por causa da ação simultânea dos vários fatores, alguns dos quais não identificados. Neste trabalho o feijão Carioca 80, após remoção do Casca) tegumento foi fracionado por extrações sucessivas com água e solução salina, com o objetivo de se estudar a distribuição e, tanto quanto possível, a natureza dos componentes antinutricionais dos grãos através da interferência das várias frações no quociente de eficiência da dieta (QED) e na utilização da proteína por ratos da linhagem Wistar, em crescimento. Foram feitas determinações da composição centesimal do feijão integral, aminoácidos totais e livres, taninos, atividade hemaglutinante, atividade do inibidor de tripsina e digestibilidade da proteína in vitro para cada uma das frações. A interferência das frações isoladas, na digestão e na utilização biológica das proteínas da dieta pelo rato, foi determinada usando-se dietas de caseína em combinação com cada uma das frações em diferentes proporções. Em um 1º ensaio contendo 3% das frações isoladas e 20% de proteína caseica, o efeito das frações sobre a utilização protéica e o QED foi mascarado pelo elevado teor de caseína. Mesmo assim, a dieta que continha uma das frações globulínicas foi a menos consumida e a digestibilidade aparente C Da) foi menor na fração com albuminas. As dietas com as frações casca e o resíduo final insolúvel apresentaram as menores diferenças com relação à dieta padrão. Em ensaios posteriores o nível de proteína foi reduzido para 10% e as frações de feijão elevadas para 5 e 8% (p/p). Ao nível de 5% as frações casca e o residuo final solúvel não afetaram significativamente na causaram um decréscimo significativo no QED e na absorção e utilização protéica; uma das frações globulina apresentou os menores índices a despeito do fato da fração albumina ter apresentado a maior concentração de fatores anti-nutricionais A fração casca continha 2,93% de taninos e quando adicionada à dieta com 10% de proteína, na proporção de 8% produziu uma diminuição no ganho de peso e no QED de 40,3 e 44,2%, respectiva- mente. Mesmo quando autoclavada o ganho de peso foi 38,7% e o QED 42,3%, inferior ao da caseína. A fração que continha sólidos solúveis da água de maceração e da água de diálise era relativamente alta em fenólicos e atividade hemaglutinante. A presença na dieta de 8% desta fração reduziu a ingestão em 42%, e o ganho de peso em 78,2%. O QED a Da o valor biológico CN/BaD» e a utilização liquida da proteína (NPUa) diminuiram significativamente. A autoclavagem destas fraç3es diminuiu as diferenças com a dieta controle, porém não as eliminou. As frações proteicas, tanto albuminas quanto globulinas quando entraram na composição da dieta na proporção de 8% mesmo com a adição dos aminoácidos limitantes ao nível da caseína, interferiram pronunciadamente com a ingestão da dieta, crescimento dos ratos e com o QED. Os índices de utilização da proteína também foram insatisfatórios quando comparados aos da dieta com caseína. A autoclavagem destas frações eliminou o problema de consumo porem o ganho de peso e o QED continuaram baixos. A dieta com resíduo insolúvel não teve diferença significativa com o controle enquanto a consumo de dieta e a índices medidos. Os dados obtidos neste trabalho, em confronto com os da literatura permitiram as seguintes conclusses: (A) que as maiores concentrações de substâncias antinutricionais localizam-se nas frações protéicas, albuminas e globulinas. (B) que o efeito anti-nutritivo das várias frações estudadas é devido à presença de compostos ter mol abei s e também termoestáveis que interferem com a ingestão de alimentos e com a utilização eficiente da proteína e da dieta como um todo. (C) O tratamento térmico não elimina o efeito antinutricional das frações de feijão por não eliminar os fatores antinutricionais termoestáveis e por causar interações que diminuem a biodisponibilidade de aminoácidos e de outros nutrientes essenciais / Abstract: Nutritive value of beans is limited by various factors, such as: natural occurrence of lectins, inhibitors of digestive enzymes, tannins, phytic acid, saponins, flatulence producing oligossacharides, low sulfur-containing amino acids, low bioavailability of essential amino acids, and low protein digestibility. Some of these factors are heat labile while other are heat stable. The chemical nature and the mode of action of these antinutritive compounds have not been thoroughly studied in beans. In this work, beans of the cultivar Carioca 80 were fractionated into tegument (FRO), soluble solids in the maceration and dialysis water CFR13, protein fractions globulins, albumins, globulins C FR2, FR3, FR53 and remaining insoluble solids after extraction of the cotyledons with water and then with sodium chloride solution (FR45). The proximate percent composition, the tannin content and the activity of trypsin-chymotrypsin and the lectin (hemagglutination) were determined in the whole beans and in all fractions. Tannin content was higher (2.93%) in FRO than in the whole bean (0.85%). FR1 was also higher (0.85%) in tannin and equaled the whole bean hemagglutination (128 x 102 HU/g sample); FR2 and FR5 were higher in hemagglutination but slightly lower in trypsin inhibitor than whole beans; FR3 (water soluble proteins) had trypsin inhibitory activity and hemagglutination much higher than whole beans; FR4 presented low antinutritiv6 factors. These fractions were introduced in rat diets at three different levels C 3,5 and 85-0. The 8% level was tested under two different conditions: unheated and supplemented with the two most limiting amino acids Cmethionine and tryptophane; heated and supplemented with the two limiting amino acids to the level of the casein diet controlFor the first biological assay diets were prepared with 20% casein and 3% of each fraction, on the top of the diet already prepared. Consumption and protein digestibility decreased for the diets containing the protein fractions. For subsequent assays dietary protein was lowered to 1 0% and the concentration of bean fraction raised either to 5% or &%. In all diets dietary protein was maintained at 10%, at expenses of casein. With B% addition of each fraction, all fractions (except FRO and FR4) decreased food intake, diet efficiency ratio and protein utilization. The most pronounced effect was measured in the diet containing FR5 followed by FR2 and FR3, in spite of the higher antitrypsin and hemagglutination activity in FR3. The undesirable effects were increased by addition of 8% of each fraction, even after supplementation of the fractions with methionine and tryptophan, to the level of the casein C control) diet. At this level all fractions (except FRO and FR4) interfered drastically with diet efficiency ratio and protein utilization. FR4 did not interfer significantly with food intake and protein utilization (Vba and NPUa) but decreased significantly diet efficiency ratio, and interfered slightly with protein digestibility and growth. FR4 decreased growth and diet efficiency ratio but did not interfere with protein digestibility and utilization. Data from this work permited the following conclusions: (a) larger concentrations of antinutritional factors are found in the protein fractions, albumins and globulins. (b) the antinutritive effect of the various fractions can be attributed to the presence of heat labile and heat stable substances which interfere with food intake, growth, and protein digestibility and utilization. (c) heat treatment did not eliminate completly the antinutritive effect of the bean fractions by virtue of the presence of heat resistant antinutritive factors and by causing interactions which decrease bioavailability of amino acids and other essential nutrients / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

O presente experimento foi conduzido com o objetivo de comparar a eficiência de três formas de proteína de soja na alimentação de cordeiros confinados. Utilizaram-se 21 cordeiros machos que foram distribuídos em blocos ao acaso em três grupos de tratamentos: T1 = farelo de soja (n = 7); 12 = soja integral tostado (n = 7); T3 = proteína protegida de soja ("Soy Pass II") (n = 7). As três rações experimentais foram balanceadas de acordo com o NRC (1985) e continham os mesmos teores de proteína bruta (18% da MS), energia metabolizável (2370 kcal/kg da MS) e fibra em detergente neutro (38% da MS), diferindo apenas quanto à fonte principal de proteína. As rações, contendo 70% de concentrado, foram oferecidas para consumo voluntário duas vezes ao dia. O delineamento em blocos ao acaso foi utilizado para controlar a variabilidade de peso inicial e grau de sangue. Os resultados médios obtidos para ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar não diferiram significativamente entre os tratamentos (P>0,05). Quanto às características de carcaça, não foram observadas diferenças significativas por efeito dos tratamentos (P>0,05) para o peso de carcaça quente e para a área de olho de lombo. A taxa de rendimento de carcaça foi significativamente menor (P=0,055) para o T3 em comparação com o T1 e o T2, que assemelharam-se entre si. A porcentagem de gordura perirrenal em relação ao peso de carcaça foi significativamente menor (P=0,073) para o T3 em comparação com o T1 e o T2, que não diferiram entre si. Quanto aos níveis plasmáticos de glicose e uréia, não foram observadas diferenças significativas dos níveis de glicose plasmática entre os tratamentos (P>0,05), os quais se mantiveram estáveis durante todo o período experimental. Porém, os níveis plasmáticos de uréia aumentaram consideravelmente entre a segunda e a terceira semana após o início dos tratamentos, sendo que a elevação da concentração de uréia no plasma foi significativamente menor (P<0,05) para o T1 em comparação com o T2 e o T3, que não diferiram entre si. A proteína protegida de soja parece ter comprometido o rendimento da atividade microbiana ruminal e reduzido o valor biológico da proteína que alcança o intestino delgado do ruminante nas condições do presente experimento. A dieta com o Soy Pass II (T3) mostrou-se aparentemente menos eficiente para o crescimento de cordeiros, tanto pela menor deposição de tecido muscular, conforme evidenciado pelo menor rendimento de carcaça, quanto pela menor eficiência do metabolismo energético e protéico, conforme evidenciado pela menor deposição de gordura perirrenal e pelo maior desperdício de nitrogênio e energia na forma de uréia

Orientador: Alessandra Alves de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T18:36:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caserta_Raquel_M.pdf: 8932792 bytes, checksum: 642a7e654340f17e79b37b6fa4a560cc (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: É inquestionável a importância da participação da citricultura na economia brasileira. O Brasil é o maior exportador de suco concentrado do mundo. Em 2007 as exportações brasileiras quase alcançaram 400 milhões de caixas de laranja, retrato de uma cultura que gera uma diversidade enorme de empregos diretos e indiretos, movimentando também a indústria de insumos. O estado de São Paulo tem maior destaque nessa produção e no final dos anos 80 foi severamente prejudicado pela Clorose Variegada dos Citros (CVC), uma doença que acarreta danos da ordem de milhões de dólares por diminuir o tamanho dos frutos e, por conseqüência, a quantidade de suco produzido. Foi comprovado que a bactéria causadora da CVC é a Xylella fastidiosa, um fitopatógeno de crescimento limitado ao xilema. Devido a importância da citricultura para o estado de São Paulo, a X. fastidiosa teve seu genoma completo seqüenciado e foram encontrados diversos genes relacionados a adesão, muitos deles similares a patógenos de humanos e animais. Isso sugeriu que a adesão e a formação do biofilme fossem fatores essenciais para a sobrevivência da bactéria na planta. Essa hipótese é reforçada pelo fato de plantas sintomáticas apresentarem colônias de bactérias aderidas nas paredes dos vasos do xilema. Trabalhos posteriores comprovaram que sua colonização se dá pela formação de um biofilme que ocasiona o bloqueio dos vasos, dificultando a eficiência do transporte de água e seiva pela planta. Nesse contexto, o estudo da participação de proteínas de adesão, sejam elas fimbriais ou afimbriais, é fundamental para o entendimento da formação e estrutura do biofilme. Por apresentarem funções distintas, adesinas fimbriais e afimbriais são expressas em momentos diferentes durante a formação do biofilme. Diante do exposto acima, o objetivo desse trabalho foi monitorar a expressão de duas adesinas fimbriais e duas adesinas afimbriais de X. fastidiosa envolvidas com a formação do biofilme in vitro. Para tal, foram realizados Western blot e microscopia de fluorescência utilizando anticorpos desenvolvidos contra as proteínas alvo. Os resultados revelaram que adesinas fimbriais se expressam preferencialmente nas fases iniciais do bioflme, enquanto que adesinas afimbriais estão expressas nas fases mais tardias, quando o biofilme já apresenta traços de agregação celular. Esse padrão de expressão sugere que a adesão inicial da bactéria ao substrato seja mediada por proteínas fimbriais e a adesão célula a célula seja função de proteínas afimbriais. Além disso, uma maior ou menor quantidade de cada proteína se encontra expressa em todas as fases o biofilme, sugerindo haver uma regulação de expressão que resulta em interação biológica entre elas, a fim de manter a estabilidade e estruturação do biofilme. Com o objetivo de monitorar a expressão dessas adesinas in vivo, foram analisadas também secções ultrafinas de pecíolos de vinca, hibisco e citros infectados e apresentando sintomas da doença. Em todas as análises foi possível detectar a presença das proteínas alvo, comprovando que elas são necessárias para o processo de infecção da planta pela bactéria. Os resultados aqui apresentados demonstram que proteínas fimbriais e afimbriais, assim como em patógenos de humanos, são necessárias para a formação do biofilme de X. fastidiosa. Este é o único fitopatógeno cujo mecanismo de patogenicidade é a formação de um biofilme. Neste sentido, os resultados aqui apresentados são importantes no auxílio de possíveis controles de doenças formadas por biofilmes, uma vez que o tempo de expressão de cada adesina foi determinado, elas poderiam ser neutralizadas antes de desempenharem suas funções, quebrando a estabilidade do biofilme através da interrupção da interação entre as proteínas / Abstract: The importance of citriculture in Brazilian's economy is unquestionable. Brazil is the major exporter of concentrate juice in the world. In 2007, Brazilian exportations of orange almost reached 400 million boxes, reflecting the importance of a product that generates an enormous diversity of direct and indirect jobs, even helping the insums industry. In Brazil, São Paulo state has a great prominence in orange production. In the 80's, the citrus fields were severely harmed by Citrus Variegated Chlorosis (CVC), a disease that causes losses of million dollars since it affects the fruit size and, consequently, juice production. It was proved that the Xylella fastidiosa, a phytopathogen that grows limited to the xylem vessels, is the causal agent of CVC. Due to the importance of citriculture in the São Paulo state, the genome of X. fastidiosa was sequenced and there were found many genes related to adhesion, some of them similar to human and animal pathogens. This fact suggested that adhesion and biofilm formation were essential for the survey of the bacteria within the plant. This hypothesis is supported by the fact that symptomatic plants have colonies of bacteria adhered to the walls in xylem vessels. Subsequent works demonstrated that the colonization occurs through the formation of a biofilm that blocks the vessels, reducing the efficiency of water and sap transportation. In this context, the study of the role of the fimbrial or afimbrial adhesion proteins is fundamental to the elucidation of the biofilm structure and formation. These adhesins show different functions, and because of that they are not expressed at the same time during biofilm formation. In face of what was shown above, the aim of this work was to monitor the expression of two fimbrial and two non fimbrial adhesins involved in biofilm formation in vitro. Western blot and fluorescence microscopy using polyclonal antibodies developed against the target proteins were performed, and the results revealed that fimbrial adhesins are expressed preferentially at the initial phases of biofilm formation, while non fimbrial adhesins are expressed at the late phases, when the biofilm already presents cellular aggregation traits. This expression pattern suggests that the initial adhesion of the bacteria to the substrate is mediated by fimbrial adhesins and that the function of cell to cell adhesion is performed by non fimbrial adhesins. Besides, each protein studied is found more or less to be expressed during all stages of biofilm development, suggesting the existence of a regulatory mechanism that results in a biological interaction between these proteins, in order to keep the stability and structure of the biofilm. In order to accompany the expression of these adhesins in vivo, ultra thin sections of petioles of periwinkle, hibiscus and citrus infected by X. fastidiosa and presenting symptoms were prepared. All the sections showed the presence of the target proteins, suggesting that they are necessary to the infectious process of the plants. The results demonstrated that fimbrial and non fimbrial proteins, as well as in human pathogens, are necessary for the biofilm formation by X. fastidiosa. This is the only phytopathogen which requires the formation of a biofilm to cause the disease. In this way, the results obtained in this work may contribute with the development of possible approaches to control diseases caused by biofilm formation, once the expression profile of each adhesin was determined. In a possible attempt to prevent the symptoms, the interaction between these adhesins could be blocked, breaking the stability of biofilm / Mestrado / Genetica de Microorganismos / Mestre em Genética e Biologia Molecular

[pt] O problema da predição das estruturas de proteínas (Protein Structure Prediction (PSP)) é um dos desafios mais importantes na biologia molecular. Pelo fato deste problema ser muito difícil, têm sido propostos diferentes modelos simplificados para resolvê-lo. Um dos mais estudados é o modelo, Hidrofóbico-Polar (HP), o modelo HP fornece uma estimativa da energia da proteína com base na soma de interações entre pares de aminoácidos hidrofóbicos (contatos H-H). Entretanto, apesar das simplificações feitas no modelo HP, o problema permanece complexo, pertencendo à classe NP-Difícil. Muitas técnicas têm sido propostas para resolver este problema entre elas, técnicas baseadas em algoritmos genéticos. Em muitos casos, as técnicas baseadas em AG foram usadas com sucesso, mas, no entanto, abordagens utilizando AG muitas vezes não tratam adequadamente as soluções geradas, prejudicando o desempenho da busca. Além disso, mesmo que eles, em alguns casos, consigam atingir o mínimo de energia conhecido para uma conformação, estes modelos não levam em conta a forma da proteína um fator muito importante na hora de obter proteínas mais compactas. Foi desenvolvido um algoritmo genético multiobjetivo para PSP no modelo HP, de modo de avaliar de forma mais eficiente, as conformações produzidas. O modelo utiliza como avaliação uma combinação baseada no número de colisões, número de contatos hidrofóbicos, compactação dos aminoácidos hidrofóbicos e hidrofílicos, obtendo, desta forma estruturas mais naturais e de mínima energia. Os resultados obtidos demonstram a eficiência desse algoritmo na obtenção de estruturas proteicas compactas providenciando indicadores da compactação dos aminoácidos hidrofóbicos e hidrofílicos da proteína. / [en] The problem of protein structured prediction (PSP) is one of the most important challenges in molecular biology. Because this problem is very difficult, different simplified models have been proposed to solve it. One of the most studied is the Hydrophobic-Polar model HP this model provides an estimate of the protein energy based on the sum of hydrophobic contacts. However, despite the simplifications made in the HP model, the problem remains complex, belonging to the class of NP-Hard problems. Many techniques have been proposed to solve this problem as genetic algorithms. In many cases the GA techniques have been used successfully, but, however, with GA approaches often do not adequately address the generated solutions, impairing the performance of the search. Furthermore, in some cases would attain the minimum energy for a known conformation, these models do not take care the protein shape, a very important factor to obtain more compact proteins. This work developed a multiobjective genetic algorithm to PSP in HP model evaluating more efficiently, the conformations produced. This model is a combination of assessment based on the collisions numbers, hydrophobic contacts, hydrophobic and hydrophilic core compression, obtaining thus more natural structures with minimum energy. The results demonstrate the efficiency of this algorithm to obtain protein structures indicators providing compact compression of the hydrophobic and hydrophilic core protein.