Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 438124.pdf: 1241897 bytes, checksum: 68c450ddba15c588f04067f7bd75dae9 (MD5) Previous issue date: 2012-03-02 / Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive tumor of the CNS and most deadly primary tumors. Despite the malignant gliomas are generally treated with radiotherapy, often they exhibit a significant radioresistance that limits the treatment success. It can be postulated that molecular changes commonly observed in these tumors contribute to this resistance. The nucleotide ATP is an important signaling molecule in CNS and it is a selective P2X7 purinergic receptor (P2X7R) ligand at high concentrations. Some studies have reported that P2X7R is responsible for ATP-induced cell death in various cell types, but some human glioma cells were resistant to death induced by ATP. In addition to ATP resistance, patients with GBM develop spontaneous antitumor immune responses. These studies show the requirement for an exogenous induction of the immune system to generate an antitumor response. IL-17 is a pro-inflammatory cytokine and its role in cancer is already unknown. Herein, we first aimed to characterize a radiosensitive human glioma cell line for sensitivity to ATP and to investigate whether activation of the P2X7R could be involved in the death of this cell line. Furthermore, aimed to elucidate the IL-17 receptor susceptibility to irradiation, as well as, elucidate the effect of IL-17 and a possible interaction between this cytokine and P2X7R in human glioma cells. The human glioma cell lines U-138 MG and U-251 MG were resistant to death when treated with either ATP (5 mM) or BzATP (100 μM), a selective P2X7R agonist, whereas in the radiosensitive M059J glioma cell line, the high ATP (5 mM) or BzATP (100 μM), significantly diminished the cell viability (32.4% ? 4.1 and 24.6% ? 4.0, respectively). The M059J lineage expresses significantly higher P2X7R levels when compared to the U-138 MG and U-251 cell lines (0.40 ? 0.00; 0.28 ? 0.01 and 0.31 ? 0.01, respectively) and irradiation upregulated P2X7R expression in all lineages. Additionally, the selective P2X7R antagonist A740003 (10 ?M) significantly decreased the cell death caused by irradiation. We provided novel evidence indicating that M059J human glioma cell line is ATP-P2X7R sensitive, pointing out the relevance of the purinergic P2X7R in glioma radiosensitivity. The IL-17 receptor was significantly more expressed after irradiation (2 Gy), showing a possible participation of the IL-17/R on the irradiation susceptibility. The treatment with IL-17 (10 ng/ml) diminished approximately 62% the human glioma cell lines viability. Other preliminary result showed that the P2X7R antagonist was able to partially reverse the toxicity caused by IL-17 in these cell lines. Our data show an antitumor role of this cytokine and corroborate to the idea of a possible interaction between IL-17/P2X7R. This work prospects for studies to be conducted to better understanding the action of IL-17 in gliomas and interaction IL-17/P2X7R / O glioblastoma multiforma (GBM) ? considerado o mais agressivo tumor do sistema nervoso central (SNC), e o mais letal entre os tumores prim?rios. Apesar dos gliomas malignos serem geralmente tratados com radioterapia, muitas vezes estes exibem uma significativa radioresist?ncia que limita o sucesso do tratamento. Pode-se postular que mudan?as moleculares comuns observadas nestes tumores contribuem para essa resist?ncia. O nucleot?deo ATP ? uma importante mol?cula de sinaliza??o no SNC e um ligante seletivo do receptor purin?rgico P2X7 (P2X7R) em altas concentra??es. Estudos mostram que o P2X7R ? respons?vel pela morte induzida pelo ATP em v?rios tipos de c?lulas, por?m, algumas c?lulas de glioma humano mostram-se resistentes ? morte induzida pelo ATP. Al?m da resist?ncia ao ATP, pacientes com GBM espontaneamente desenvolvem resist?ncia a respostas imunes antitumorais. Estudos levantam a necessidade de uma indu??o ex?gena do sistema imunol?gico a fim de gerar uma resposta antitumoral. A IL-17 ? um citocina pr?-inflamat?ria e seu papel no c?ncer ainda ? desconhecido. O presente trabalho primeiramente objetivou caracterizar uma linhagem de glioma humano radiossens?vel quanto ? sensibilidade ao ATP e investigar se a ativa??o do P2X7R poderia estar envolvida na morte destas c?lulas. Al?m disso, visou elucidar a susceptibilidade do receptor da IL-17 ? radioterapia, bem como, o efeito da IL-17 e uma poss?vel intera??o entre esta citocina e o P2X7R em c?lulas de glioma humano. As linhagens celulares de glioma humano U-138 MG e U-251 MG mostraram-se resistentes ? morte, quando tratadas com ATP (5 mM) ou BzATP (100 ?M), agonista seletivo do P2X7R. Na linhagem de glioma radiossens?vel M059J, o tratamento com alta concentra??o de ATP (5 mM) ou com BzATP (100 ?M), diminuiram significativamente a viabilidade celular (32,4% ? 4,1 e 24,6 ? 4,0%, respectivamente). A linhagem M059J expressou n?veis significativamente maiores do P2X7R quando comparada com as linhagens celulares U-138 MG e U-251 MG (0.40 ? 0.00; 0.28 ? 0.01 e 0.31 ? 0.01, respectivamente) e a irradia??o aumentou a express?o do P2X7R em todas linhagens. Al?m disso, o antagonista seletivo do P2X7R, A740003 (10 μM), diminuiu significativamente a morte celular causada pela irradia??o. Nesta primeira parte do trabalho, fornecemos novas evid?ncias indicando que a linhagem de glioma humano M059J ? sens?vel ao ATP-P2X7R, apontando a relev?ncia do P2X7R na radiossensibilidade do glioma. Na segunda parte deste trabalho, observou-se que o receptor da IL-17 foi significativamente mais expresso ap?s a irradia??o (2 Gy) mostrando uma poss?vel participa??o da via IL-17/R na susceptibilidade ? irradia??o. O tratamento com a IL-17 (10 ng/ml) diminuiu em aproximadamente 62% a viablidade de linhagens celulares U-138 MG e M059J de glioma humano. Outros resultados preliminares mostraram que o antagonista do P2X7R foi capaz de reverter parcialmente a toxicidade causada pela IL-17 nestas linhagens. Nossos dados demonstram um papel antitumoral desta citocina e corroboram com a id?ia de uma poss?vel intera??o entre a IL-17/P2X7R. Este trabalho deixa perspectivas de estudos a serem realizados para melhor compreender a a??o da IL-17 nos gliomas e a intera??o IL-17/P2X7R

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-04-28T16:58:10Z No. of bitstreams: 1 467673.pdf: 3861422 bytes, checksum: 17e17a32c5200320863899c206b0dbea (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-28T16:58:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 467673.pdf: 3861422 bytes, checksum: 17e17a32c5200320863899c206b0dbea (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / Head and neck cancer (HNC) has been a worldwide public health problem. Squamous cell carcinomas account for about 80% of these neoplasms and the main treatment modalities are surgery, radiotherapy (RT), chemotherapy (CT) or a combination between them. RT acts locally destroying tumor cells. However, this therapy is not selective and also affects rapid renewal cell groups such as the salivary glands, oral mucosa and skin, resulting in a wide range of deleterious effects, being oral mucositis (OM) one of these. This condition is characterized by painful ulcerations that can progress to severe conditions that compromise the course of cancer treatment. The etiology of OM is oxidative stress (OS) generated by RT, that would be able to induce the production of reactive oxygen species (ROS) responsible for cellular damage and initiation of injuries. Antioxidants (AOX) are agents produced by humans or acquired by diet and vitamin supplements that eliminate ROS and minimize OS.The objective of this study was to assess the effect of 2 types of antioxidants, vitamin E (VE) and Aloe vera (AV) in prevention and management of radioinduced OM in a murine model by clinical and histological analysis. The animals were randomly divided into 3 groups of 12 animals each (400 mg VE, 70% AV and control) and 2 time periods (5 and 7 days). They were irradiated with a single dose of 30 Gy, and after 24h, a lesion was produced on the ventral tongue of each animal. The products were applied daily in their respective group until euthanasia. On clinical evaluation, it was observed the presence of inflammatory signs, presence or absence of induced ulcer and measurement of their size. Lesions were present more frequently in the control group animals in both periods of observation.The size of the ulcers was greater in the control group compared with the groups AV and VE (5 days: p = 0.006; 7 days: p = 0.002). Under microscopic analysis, the degree of inflammation differed between the study groups and experimental periods. At 5 days, the statistical difference was not significant amongst groups. However, after 7 day period, the animals in the control group displayed intense inflammation, while those in groups VE and AV exhibited mild to moderate inflammation (p = 0.002). Given the severity of OM injuries and their implications to the patient, it urges the search of alternative therapies to prevent or reduce clinical manifestations. The results of this study suggest that VE and AV may contribute to minimize inflammatory response and improve the healing of induced tongue lesions of rats submitted to radiation. / As neoplasias malignas de cabe?a e pesco?o (NMCP) representam um problema de sa?de p?blica mundial. Os carcinomas espinocelulares constituem cerca de 80% dessas neoplasias e tem como principais modalidades de tratamento a cirurgia, a radioterapia (RT) e a quimioterapia (QT) que podem ser utilizadas de forma isolada ou associadas. A RT age localmente destruindo as c?lulas tumorais, no entanto, n?o ? seletiva, atingindo tamb?m c?lulas saud?veis de r?pida renova??o como as das gl?ndulas salivares, mucosa oral e pele. Em consequ?ncia ao dano ?s c?lulas normais esta terapia gera efeitos delet?rios importantes como, por exemplo, a mucosite oral (MO). Esta condi??o caracteriza-se pela presen?a de ulcera??es dolorosas que podem evoluir para quadros t?o graves que comprometam o curso do tratamento oncol?gico. Associada a etiologia da MO est? o estresse oxidativo (EO) gerado pela RT, que seria capaz de induzir a produ??o de esp?cies reativas de oxig?nio (ROS) respons?veis pelo dano celular e inicia??o das les?es. Para limitar o EO existem subst?ncias chamadas antioxidantes (AOX), que tem como principal fun??o eliminar as ROS.Estas podem ser produzidas naturalmente pelo organismo e tamb?m adquiridas atrav?s da dieta e suplementos vitam?nicos. O objetivo deste estudo foi testar 2 tipos de antioxidantes, vitamina E(VE) e Aloe vera(AV), na preven??o e manejo da MO induzida por radia??o em modelo murino, atrav?s da an?lise cl?nica e histol?gica Os animais foram divididos randomicamente em 2 grupos com 12 animais cada (VE 400mg; AV 70%) e 1 grupo com 11 animais (controle) e em 2 tempos experimentais (5 e 7 dias). Irradiou-se cada grupo com dose ?nica de 30Gy e ap?s 24h produziu-se uma les?o ulcerada no ventre lingual de cada animal medindo 6mm de comprimento e 3mm de largura. Os produtos estudados foram aplicados diariamente em seu respectivo grupo at? a eutan?sia programada. Durante a avalia??o cl?nica, foram observados a presen?a de sinais inflamat?rios, presen?a ou aus?ncia da ?lcera induzida e mensurado o tamanho das mesmas. Nesta fase do experimento foi poss?vel constatar que as les?es foram mais frequentes nos animais dos grupos controle em ambos os tempos. O tamanho das ?lceras foi maior nos grupos controle em compara??o com os grupos VE e AV (5 dias: p=0,006; 7 dias: p=0,002).Na an?lise microsc?pica o grau de inflama??o diferiu tanto nos grupos de estudo quanto nos tempos experimentais. Em 5 dias a diferen?a entre os grupos n?o foi estatisticamente significante. J? em 7 dias os animais do grupo controle apresentaram inflama??o intensa, enquanto os que receberam VE e AV variaram entre leve e moderada (p=0,002). Diante da gravidade das les?es de MO e suas implica??es ao paciente, ? de suma import?ncia que se encontre alternativas terap?uticas para prevenir ou amenizar suas manifesta??es cl?nicas. Os resultados deste estudo sugerem que os AOX presentes na VE e no AV podem favorecer a redu??o da intensidade do processo inflamat?rio envolvido na MO, bem como a severidade das les?es.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-21T20:48:49Z No. of bitstreams: 1 469173 - Texto Completo.pdf: 1264302 bytes, checksum: e68c7c79947a5c2f21eab8eb8bfce80d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-21T20:48:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 469173 - Texto Completo.pdf: 1264302 bytes, checksum: e68c7c79947a5c2f21eab8eb8bfce80d (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Head and neck radiotherapy often involves major salivary glands and causes morphologic and functional alterations, resulting in hyposalivation and xerostomia. Literature was reviewed in the first manuscript, addressing the structural changes observed in the salivary glands resulting from oxidative stress caused by radiotherapy and pathogenic mechanisms involved. Preventive and regenerative therapies for altered acinar morphology and glandular function were also discussed. Among the acute and late microscopic alterations observed in glandular tissue, there are particularly changes indicative of cell death, hypovascularization, formation of fibrous tissue and edema. Considering the evidences before mentioned, the aim of this study was to evaluate the effect of low level laser therapy (LLLT) on radiotherapy-induced morphological changes and immunodetection of caspase-3 protein in parotids of mice. Forty-one Swiss mice were divided into a control group and three experimental groups: radiotherapy, 2 J laser and 4 J laser. The experimental groups were exposed to ionizing radiation in a single session of 10 Gy. In the laser groups, a GaAlAs laser (830 nm, 100 mW, 0.028 cm2, 3.57 W/cm2) was used on the region corresponding to the parotid glands, with 2 J energy (20 sec, 71 J/cm2) or 4 J (40 sec, 135 J/cm2) per point. The animals were euthanized 48 hours or seven days after radiotherapy and parotid glands were dissected for morphological analysis and immunodetection of caspase-3. There was no significant difference between groups in the immunodetection of caspase-3, but the laser groups had a lower percentage compared to the radiotherapy group. Furthermore, the results indicated that LLLT promoted the preservation of acinar structure, reduced the occurrence of cytoplasmic vacuolation and stimulated parotid gland vascularization. Of the two LLLT protocols, the one using 4 J of energy showed better results. Given the methodological limitations of this study, further researches should be conducted in irradiated animals, using different LLLT protocols and observing glandular response, not only in the short term but also long term, when the occurrence of late changes in the salivary glands can be analyzed. / A radioterapia direcionada ? regi?o de cabe?a e pesco?o frequentemente envolve as gl?ndulas salivares maiores, as quais sofrem altera??es morfol?gicas e funcionais, resultando em hipossaliva??o e xerostomia. No primeiro artigo desta disserta??o foi realizada uma revis?o da literatura com o objetivo de abordar as altera??es estruturais observadas nas gl?ndulas salivares e os poss?veis mecanismos patog?nicos pelos quais o estresse oxidativo, decorrente da radioterapia, causa disfun??es salivares. Al?m disso, foram revisados os m?todos de preven??o e regenera??o da morfologia acinar e da fun??o glandular. Entre as altera??es microsc?picas agudas e tardias observadas no tecido glandular irradiado, podem-se citar altera??es indicativas de morte celular como a apoptose, hipovasculariza??o, forma??o de tecido fibroso e edema. Considerando as evid?ncias anteriormente mencionadas, o objetivo deste estudo foi avaliar, em gl?ndulas par?tidas de camundongos, o efeito da terapia laser de baixa pot?ncia (TLBP) sobre altera??es morfol?gicas causadas pela radioterapia e na imunodetec??o da prote?na caspase-3. Quarenta e um camundongos Swiss foram distribu?dos em um grupo controle e tr?s grupos experimentais: radioterapia, laser 2 J e laser 4 J. Os grupos experimentais foram submetidos ? radia??o ionizante em sess?o ?nica de 10 Gy. Nos grupos laser, um laser de diodo, GaAlAs (830 nm, 100 mW, 0,028 cm2, 3,57 W/cm2) foi utilizado de forma pontual sobre a regi?o correspondente ?s gl?ndulas par?tidas, com energia de 2 J (20 seg, 71 J/cm2) ou 4 J (40 seg, 135 J/cm2) por ponto. Os animais foram eutanasiados 48 h ou sete dias ap?s a radioterapia e as gl?ndulas par?tidas dissecadas para an?lise morfol?gica e imunodetec??o da caspase-3. N?o houve diferen?a significativa entre os grupos na imunodetec??o da caspase-3, entretanto, os grupos laser apresentaram percentuais inferiores aos do grupo radioterapia. Al?m disso, os resultados indicaram que a TLBP promoveu preserva??o da estrutura acinar, reduziu a ocorr?ncia de vacuoliza??o citoplasm?tica e estimulou a vasculariza??o glandular. Entre os protocolos de TLBP, o que utilizou a energia de 4 J apresentou os melhores resultados. Tendo em vista as limita??es metodol?gicas desta pesquisa, mais estudos devem ser conduzidos em animais irradiados, utilizando diferentes protocolos de TLPB e observando a resposta glandular, n?o apenas em curto prazo, como tamb?m em longo prazo, quando a ocorr?ncia de altera??es tardias nas gl?ndulas salivares pode ser analisada.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-05-10T11:19:25Z No. of bitstreams: 1 TES_MARINA_PETERSEN_GEHRING_COMPLETO.pdf: 5818535 bytes, checksum: 5b089589ca820b17117fd0c8e9d1cc90 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-10T11:19:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_MARINA_PETERSEN_GEHRING_COMPLETO.pdf: 5818535 bytes, checksum: 5b089589ca820b17117fd0c8e9d1cc90 (MD5) Previous issue date: 2016-01-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Gliomas represent the most common class of malignant tumors of the central nervous system being the most aggressive, and lethal brain tumors in primary brain tumors. Among the treatments, radiation is one of the most used therapies, but the intrinsic radioresistance of these tumors remains a critical problem in the management of these patients. Currently it is known that the effect of radiation extends beyond the directly cytotoxicity caused in tumor cells. Radiation therapy appears to induce an immunogenic cell death that among the features is ATP release. The ATP can cause cytotoxicity via P2X7 receptor and also acts as a sign of damage activating the immune system. The ATP can be hydrolyzed by enzymes of the purinergic system, among them the ectonucleotidase CD39, to adenosine, which has an opposite effect to ATP, causing immunosuppression. The radiation-induced ATP release and the ability of this nucleotide in modulate immune responses raised the hypothesis about the purinergic signaling participation in the tumor and immune cells response to radiation. Therefore, this study investigated: i) the role of ectonucleotidase CD39/NTPDase1 in the radiation-induced immune response in gliomas, ii) the importance of ATP-P2X7 receptor in the gliomas response to radiotherapy. Using knockout mice for CD39/NTPDase1, we observed that the deletion of this enzyme combined with radiotherapy significantly reduced the immunosuppressive cells Tregs in the tumor and spleen, attenuated the infiltration of myeloid derived suppressor cells caused by radiation and increased CCR7 expression in splenic dendritic cells and macrophages, indicating the presence of freshly mobilized antigen presenting cells available to differentiate in immune-effector cells that sustain a more prolonged antigen-specific T-cell?mediated immune response. Thereby, showing that blocking the activity of CD39/NTPDase1 can control immunosuppressive mechanisms generated by the tumor and promises to improve the radiotherapy response. Furthermore, in this study we observed that radiation actives the P2X7 receptor and by silencing this receptor on the GL261 glioma cell line, we have shown that radiotherapy is less efficient in vivo when compared with mice injected with GL261 WT cells, which constitutively express the P2X7 receptor. We also showed that patients with glioma that overexpress the P2X7 receptor, showed a better response to radiotherapy, revealing the importance of the expression of this receptor on glioma cells as a useful marker to analyze the tumor sensitivity to radiation and a successful radiotherapy response. In summary, our data shed light on the purinergic signaling for modulating the radiotherapy response in gliomas. / Os gliomas representam a classe mais comum de tumores malignos do sistema nervoso central, sendo o tumor cerebral mais agressivo e letal entre os tumores cerebrais prim?rios. Dentre os tratamentos, a radia??o ? uma das terapias mais utilizadas, por?m a radiorresist?ncia intr?nseca destes tumores continua a ser um problema cr?tico na gest?o de destes pacientes. Atualmente, sabe-se que o efeito da radia??o se estende al?m da citotoxicidade direta causada nas c?lulas tumorais. A radioterapia parece induzir uma morte celular imunog?nica, que entre as caracter?sticas est? a libera??o de ATP. O ATP pode causar citotoxicidade atrav?s do receptor P2X7 e tamb?m atua como um sinal de dano celular ativando o sistema imune. O ATP pode ser hidrolisado por enzimas do sistema purin?rgico, dentre elas a ectonucleotidase CD39/NTPDase1, ? adenosina, que tem um efeito aposto ao ATP, causando imunossupress?o. A secre??o de ATP induzida pela radioterapia e a capacidade deste nucleot?deo em modular a resposta imune, levantou a hip?tese da participa??o da sinaliza??o purin?rgica na resposta de c?lulas tumorais ? radia??o e na resposta imune induzida pela radioterapia. Portanto, neste estudo visou-se investigar: i) o papel da ectonucleotidase CD39/NTPDase1 na resposta imune induzida pela radioterapia em gliomas, ii) a import?ncia da via ATP-receptor P2X7 na resposta de gliomas ? radioterapia. Atrav?s de camundongos knockout para a enzima CD39/NTPDase1, observamos que a dele??o desta enzima combinada com a radioterapia reduziu significativamente as c?lulas imunossupressoras Tregs no tumor e no ba?o, atenuou a infiltra??o de c?lulas mieloides supressoras causada pela radia??o, e aumentou a express?o de CCR7 em c?lulas dentr?ticas e macr?fagos localizados no ba?o, indicando a presen?a c?lulas apresentadoras de ant?geno rec?mmobilizadas e dispon?veis para se diferenciarem em c?lulas imunes efetoras que sustentam uma resposta imune mais prolongada mediada por c?lulas T ant?geno espec?ficas. Deste modo, mostrou-se que o bloqueio da atividade da CD39/NTPDase1 pode controlar mecanismos imunossupressores gerados pelo tumor e promete melhorar a resposta ? radioterapia. Al?m disso, neste estudo observou-se que a radioterapia ativa o receptor P2X7 e atrav?s do silenciamento deste receptor na linhagem de glioma GL261, demonstramos que a radioterapia foi pouco eficiente in vivo, quando comparado com camundongos injetados com a GL261 WT, que expressa constitutivamente o receptor P2X7. Tamb?m demonstramos que pacientes com glioma que expressaram mais o receptor P2X7, apresentaram uma melhor resposta a radioterapia, revelando a import?ncia da express?o deste receptor em c?lulas de glioma como um marcador ?til para analisar a sensibilidade tumoral ? radioterapia e para uma resposta bem-sucedida ? radioterapia. Em suma, nossos dados lan?am luz sobre a sinaliza??o purin?rgica para a modula??o da resposta ? radioterapia em gliomas.

JUSTIFICATIVA E OBJETIVO: Muitos estudos reportaram o benefício dos métodos avançados de ressonância magnética (RM) para a avaliação da resposta ao tratamento do tumor cerebral, a fim de distinguir entre recidiva tumoral e radionecrose. No entanto, o tamanho da amostra em cada estudo é relativamente pequeno, o que torna difícil avaliar a validade externa. Nós realizamos uma revisão sistemática e metanálise de dados publicados afim de avaliar a acurácia dos métodos avançados de RM para diferenciação entre a recidiva e a radionecrose. Nosso objetivo foi determinar o valor diagnóstico da difusão (DWI), da perfusão Dynamic Susceptibility Contrast (PWI DSC), perfusão Dynamic Contrast Enhancement (PWI DCE) e espectroscopia (MRS). MATERIAL E MÉTODOS: A revisão sistemática incluiu todos os estudos que usaram métodos avançados de RM para detectar recidiva ou radionecrose em pacientes em segmento por tratamento radioterápico para tumor cerebral. A pequisa foi realizada nas bases de dados MEDLINE e Embase, das publicações até 31 de Julho de 2015. As sensibilidades e especificidades de cada estudo foram calculadas e a acurácia diagnóstica foi metanalisada, com um intervalo de confiança (IC) de 95%, em um modelo de efeito randômico. Foram realizados testes de heterogeneidade, sobre o efeito dos pontos de corte e modelos de metarregressão. Análises de subgrupos foram feitas com base em conjuntos de estudos com características homogêneas. RESULTADOS: 49 artigos foram incluídos na análise quantitativa, englobando um total de 1.508 pacientes. Cinco estudos avaliaram DWI, 32 avaliaram PWI e 21 avaliaram MRS. A sensibilidade (SEN) e especificidade (ESP) geral da DWI foi 81,0% (IC 95%: 71,0 a 89,0%) e 68,0% (IC 95%: 52,0 a 82,0%), respectivamente. A SEN e ESP da PWI DSC foi de 83,0% (IC 95%: 80,0 a 86,0%) e 81,0% (IC 95%: 76,0 a 85,0%) e da PWI DCE foi 76,0% (IC 95%: 66,0 a 85,0%) e 85,0% (IC 95%: 74,0 a 93,0%), respectivamente. A SEN e ESP da MRS foi de 76,0% (IC 95%: 71,0 a 80,0%) e 83,0% (IC 95%: 77,0 a 88,0%), respectivamente. O odds ratio diagnóstico (DOR) da DWI, PWI DSC, PWI DCE e MRS foi 14,83; 25,81; 14,45 e 27,39; respectivamente. O maior valor do DOR nos estudos com PWI DSC foi quando o ponto de corte do Volume Sanguíneo Cerebral relativo (rCBV) foi maior ou igual a 1,8 e o maior valor do DOR nos estudos com MRS foi quando o ponto de corte da relação Cho/Cr foi maior ou igual a 1,3. O valor do DOR nos estudos com MRS foi muito maior nos trabalhos realizados com equipamento de 3T (DOR = 40,07; IC 95%: 15,44 a 104,03) quando comparado aos trabalhos realizados em equipamento com 1,5T (18,69; IC95%: 8,32 a 42,02). CONCLUSÃO: Esta metanálise demonstrou que os métodos avançados de RM tem uma moderada e alta acurácia na diferenciação da recidiva tumoral da radionecrose usando os métodos de DWI, PWI DSC, PWI DCE e MRS. Algumas análises de subgrupos e testes de efeito do ponto de corte mostraram que alguns cenários têm uma tendência de melhor acurácia. / BACKGROUND AND PURPOSE: Several studies reported the benefit of magnetic resonance (MR) advanced methods for the treatment response of brain tumor assessment, for distinguishing tumor recurrence from radionecrosis in gliomas and other brain tumors. However, the sample size in each study is relatively small, which becomes difficult to draw conclusions about external validity. We performed a systematic review and meta-analysis of published data to evaluate the accuracy of the advanced MR methods for differentiating recurrence from radionecrosis. Our objective was to determine the diagnostic value of Diffusion (DWI), Dynamic Susceptibility Contrast Perfusion (PWI DSC), Dynamic Contrast Enhancement Perfusion (PWI DCE) and Spectroscopy (MRS), and compare the results between the methods MATERIALS AND METHODS: The systematic review included all studies that used MR advanced methods to detect recurrence or radionecrosis in patients followed by brain tumor radiotherapy. The databases selected were MEDLINE and Embase, for published data prior to July 31, 2015. The sensitivities and specificities of individual studies were calculated and the pooled diagnostic accuracies, with 95% confidence intervals (CI), were assessed under a random-effects model. It was also performed heterogeneity test, threshold effect test and meta-regression models for each MR method. A subgroup analysis was performed based on homogeneous subsets of the studies. RESULTS: 49 articles were included in the quantitative analysis, compromising 1,508 patients (919 with recurrence and 589 with radionecrosis). Five studies assessed DWI, 32 assessed PWI, and 21 assessed MRS. Overall sensitivity (SEN) and specificity (SPE) of DWI were 81.0% (95% CI: 71.0 to 89.0%) and 68.0% (95% CI: 52.0 to 82.0%), respectively. The SEN and SPE of PWI DSC were 83.0% (95% CI: 80.0 to 86.0%) and 81.0% (95% CI: 76.0 to 85.0%) and PWI DCE were 76.0% (95% CI: 66.0 to 85.0%) and 85.0% (95% CI: 74.0 to 93.0%), respectively. The SEN and SPE of MRS were 76.0% (95% CI: 71.0 to 80.0%) and 83.0% (95% CI: 77.0 to 88.0%), respectively. The overall diagnostic odds ratio (DOR) of DWI, PWI DSC, PWI DCE, and MRS were 14.83, 25.81, 14.45, and 27.39, respectively. The point with the highest DOR in the PWI DSC studies was when the relative Cerebral Blood Volume (rCBV) threshold was equal or higher than 1.8, and the point with the highest DOR in the MRS studies was when the Cho/Cr threshold was equal or higher than 1.3. The MRS DOR value is much higher in the 3T subgroup (40.07, 95% IC: 15.44 to 104.03), compared to the 1.5T subgroup (18.69, 95% CI: 8.32 to 42.02). CONCLUSIONS: This meta-analysis showed that MR advanced methods have moderate to high accuracy in differentiating tumor recurrence from radiation necrosis using DWI, PWI DSC, PWI DCE and MRS. Some subgroup analysis and threshold effect tests demonstrated subsets that have a better accuracy trend.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 459313.pdf: 1355539 bytes, checksum: 3f86f9475d13797bdaa6dc5fdc2f3210 (MD5) Previous issue date: 2014-04-25 / Xerostomia and hyposalivation are important sequelae of head and neck radiotherapy and may have a negative impact on quality of life. The present study aimed to evaluate the effects of low level laser therapy (LLLT) on hyposalivation, xerostomia and quality of life related to oral health (QLROH) in irradiated patients. Were selected 23 patients with a history of head and neck malignancy, treated with fractioned teletherapy, whose therapeutic site had involved at least 50% of the major salivary glands. Patients should have completed radiotherapy for at least six months and present hyposalivation and xerostomia. The sample was randomly distributed in laser group (n=12) and control (n=11). A GaAlAs laser, at 830 nm (infrared) wavelength, 100 mW power, 2 J energy per point was used. Patients underwent twelve sessions of LLLT, applied in parotid, submandibular and sublingual glands. In the control group, the laser tool received a plastic tip that blocked radiation emission. Stimulated and unstimulated salivary flow rate was assessed at baseline, after the 6th and 12th session. Xerostomia was assessed by Visual Analogue Scale (VAS) and QLROH, through the Oral Health Impact Profile (OHIP - 14). The results showed no significant difference between the laser and control groups regarding the salivary flow rate, xerostomia or quality of life. However, at the end of the treatment, the xerostomia and the QLROH showed significant improvement in both groups compared to assessments carried out in baseline. Based on the results, we conclude that, in the parameters used, LLLT was not able to increase salivary flow rate or decrease xerostomia. The results may be associated to the late effects of radiotherapy on glandular structure such as fibrosis and acinar atrophy. The improvement in xerostomia and quality of life highlights the importance of advice given to the irradiated patients and their follow-up. / A xerostomia e a hipossaliva??o s?o importantes sequelas da radioterapia de cabe?a e pesco?o e podem ter impacto negativo na qualidade de vida dos pacientes. O presente estudo teve como objetivo realizar uma revis?o de literatura destas sequelas e avaliar o efeito da terapia laser de baixa pot?ncia (TLBP) na hipossaliva??o, xerostomia e qualidade de vida relacionada ? sa?de bucal de pacientes submetidos ? radioterapia em cabe?a e pesco?o. Foram selecionados 23 pacientes com hist?rico de neoplasia maligna em regi?o de cabe?a e pesco?o, tratados por meio de teleterapia fracionada, cujo portal tenha envolvido ao menos 50% das gl?ndulas salivares maiores. Todos deveriam ter finalizado a radioterapia h? pelo menos seis meses e apresentar hipossaliva??o e xerostomia. A amostra foi aleatoriamente distribu?da em grupos laser (n=12) e controle (n=11). Foi empregado laser de AsGaAl no comprimento de onda de 830 nm (infravermelho), pot?ncia de 100 mW e energia de 2 J por ponto. Os pacientes foram submetidos a doze sess?es de TLBP, aplicada pontualmente em ambas as gl?ndulas par?tidas, submandibulares e sublinguais. No grupo-controle foi adaptado ao aparelho de laser um dispositivo que impedia a emiss?o de radia??o. O fluxo salivar em repouso e sob est?mulo foi avaliado em baseline, ap?s a 6? e a 12? sess?o de TLBP. A xerostomia foi avaliada por meio de Escala Visual Anal?gica (EVA) e a qualidade de vida relacionada ? sa?de bucal, por meio do instrumento Oral Health Impact Profile (OHIP-14). Os resultados demonstraram n?o haver diferen?a significativa entre os grupos laser e controle quanto ? velocidade do fluxo salivar, xerostomia ou qualidade de vida. Por outro lado, em ambos os grupos ao final do tratamento, houve redu??o significativa da xerostomia e melhora da qualidade de vida relacionada ? sa?de oral. Com base nos resultados, pode-se concluir que a TLBP, nos par?metros utilizados, n?o foi capaz de promover eleva??o clinicamente detect?vel do fluxo salivar ou redu??o da xerostomia. Os resultados podem estar associados aos efeitos tardios da radioterapia na estrutura glandular tais como fibrose e atrofia acinar. A melhora dos ?ndices subjetivos xerostomia e qualidade de vida em ambos os grupos ressalta a import?ncia da orienta??o e acompanhamento dos pacientes irradiados.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 439149.pdf: 1490829 bytes, checksum: bd616615ee5265db0a960d6f77c8581d (MD5) Previous issue date: 2012-05-29 / Glioblastoma multiforme (GMB) is the most malignant and common type of all astrocytic tumours. Current standard treatment for GBM patients involves maximum surgical resection of the tumour, followed by radiotherapy and chemotherapy, usually containing the alkylating agent Temozolomide (TMZ). Despite this aggressive combination therapy, the survival rate of GBM patients is still low. This work consisted in investigating the cytotoxic effects of Akt-inhibition by MK-2206 with irradiation (RT) and TMZ on in vitro human malignant glioma. Seven malignant glioma cell lines were cultured and tested for clonogenic survival, invasion inhibition, tumour spheroid growth and proliferation. The Akt-inhibitor MK-2206 and TMZ were added at different time treatments and in varying doses. Cultures were irradiated with single dose and with fractionated γ-irradiation. Cellular modulation of Akt and p-Akt were assessed by Western blot analysis. MK-2206 reduced the levels of phospho- Akt key protein in the PI3Kinase-Akt pathway, decreased cell survival, and inhibited invasion, proliferation and cell growth. The combination of MK-2206 and RT lead to enhanced inhibition of cell proliferation and invasion, which is not observed with RT alone. The radioenhancing effect of MK-2206 was most striking in inhibition of spheroid volume growth by fractionated RT; the radiosensitizing effect of MK-2206 was stronger than that of TMZ. MK-2206 enhanced the in vitro effects of RT and TMZ in terms of decreased cell survival, invasion, proliferation and growth in malignant glioma. Effects could be ascribed to inhibition of PI3K-Akt pathway / O Glioblastoma multiforme (GBM) ? o tipo mais maligno e mais comum de todos tumores astroc?ticos. O tratamento atual para pacientes de GBM envolve m?xima remo??o cir?rgica, seguida de radio e quimioterapia, normalmente com o agente alquilante Temozolamida (TMZ). Apesar da agressividade da terapia combinada, o tempo de sobreviv?ncia dos pacientes ainda ? baixo. Este trabalho procurou investigar os efeitos citot?xicos do inibidor de Akt MK-2206 em combina??o com irradia??o (RT) e TMZ em um painel de c?lulas de gliomas humanos. Sete linhagens de glioma foram cultivadas e testadas em ensaio de sobreviv?ncia clonog?nica, inibi??o de invas?o, e modelos de prolifera??o e crescimento de volume em esfer?ides. O inibidor MK-2206 e TMZ foram adicionados em diferentes tempos de tratamento e diferentes doses. As culturas foram irradiadas com doses ?nicas ou em terapias fracionadas com irradia??o γ. A modula??o celular de Akt e fosfo-Akt foi checada via Western Blot. O composto MK-2206 reduziu a fosforila??o da prote?na chave Akt na via PI3K, diminuindo a sobreviv?ncia celular e inibindo invas?o, prolifera??o e crescimento celular. A combina??o de MK-2206 com RT levou a uma maior inibi??o de invas?o e prolifera??o, o que n?o ? observado somente com a RT. O efeito radiosens?vel de MK-2206 foi ainda maior na inibi??o do volume dos esfer?ides em terapia combinada com RT fracionada, sendo ainda maior do que o efeito combinado com TMZ. MK-2206 aumentou os efeitos in vitro de RT e TMZ em termos de redu??o de sobreviv?ncia celular, invas?o, prolifera??o e crescimento celular em gliomas malignos. Os efeitos podem ser atribu?dos a inibi??o da via PI3KAkt

INTRODUÇÃO: A combinação de radioterapia e altas doses de cisplatina no tratamento do meduloblastoma tem se mostrado causa de importante ototoxicidade. Com a introdução da técnica de intensidade modulada do feixe (IMRT), tornou-se possível diminuir a dose média de radiação no aparelho auditivo. OBJETIVOS: O objetivo é determinar se com a radioterapia com reforço de dose com IMRT, é possível atingir índices menores de perda auditiva e se há um limite de dose no ouvido para a mesma. Analisar também se o volume de ouvido contornado durante o planejamento inverso influencia o resultado. MÉTODO: Quarenta e um pacientes com meduloblastoma (idade mediana, 10 anos) com audição normal ao início da radioterapia com IMRT foram avaliados retrospectivamente. O último seguimento e a última audiometria realizada após o término da radioterapia foram considerados. A função auditiva foi graduada em uma escala de 0 a 4 de acordo com os critérios de toxicidade do Pediatric Oncology Group (POG). As doses mínima, máxima, média e mediana recebidas pelo aparelho auditivo, bem como o volume contornado no planejamento do IMRT foram correlacionados com o grau de função auditiva. Foi realizada análise univariada e multivariada dos dados. RESULTADOS: O seguimento mediano foi de 41 meses (12,8 a 71) para avaliação audiométrica e 44 meses (14-72) para a sobrevida global. As doses medianas mínima, máxima, média e mediana recebidas pelo aparelho auditivo foram respectivamente de: 3785 (589,4 a 4758,2), 4832,5 (3724 a 5447,9), 4366,5 (2808,5 a 5097,3) e 4360,5 (2878 a 5031,1). Sete pacientes (17%) apresentaram perda auditiva graus 3 e 4. A análise univariada entre as variáveis não mostrou diferença com significância estatística, exceto para a dose de cisplatina (P < 0,03). Na análise multivariada com regressão logística, a dose mediana no aparelho auditivo foi um fator significativo para a perda auditiva graus 3 e 4 (P < 0,01), ao passo que a dose cumulativa de cisplatina apresentou tendência à perda graus 3 e 4 (P = 0,075). Não houve correlação entre o volume contornado no planejamento a perda auditiva. Perda auditiva graus 3 e 4 foi incomum com dose mediana no aparelho auditivo menor que 42 Gy (P = 0,063) e dose cumulativa de cisplatina abaixo de 375 mg/m² (P < 0,01). Nenhum paciente que recebeu carboplatina em substituição à cisplatina apresentou perda auditiva grave. Não houve associação, com significância estatística, entre as variáveis analisadas e a ototoxicidade, quando estes pacientes foram excluídos da análise. Quatro pacientes morreram e dois apresentaram recidiva no momento do estudo, levando a uma sobrevida global de 90% e uma sobrevida livre de doença de 85% em 44 meses. CONCLUSÕES: Os resultados mostram que o tratamento com IMRT leva a uma baixa taxa de perda auditiva grave, mesmo com um seguimento maior, o que é consistente com outros estudos. Acreditamos ser seguro contornar somente a cóclea e que uma dose mediana para a mesma deve ser mantida abaixo de 42 Gy. A quimioterapia com cisplatina continua a ter um papel importante no tratamento, no entanto a dose cumulativa não deve exceder 375 mg/m². A sobrevida foi impressionante neste estudo, uma vez que 21 (51,2%) foram classificados como alto risco / INTRODUCTION: The combination of radiation therapy and cisplatin chemotherapy for the treatment of medulloblastoma is a known cause of important ototoxicity. With the introduction of intensity-modulated radiation therapy (IMRT), it became possible to deliver less radiation to the auditory apparatus. PURPOSE: To determine if boost radiotherapy with IMRT can achieve a lower rate of hearing loss and if theres a cutoff dose for it. Also, to analyze whether the auditory apparatus volume contoured in inverse planning influences the outcome. METHODS: Forty-one pediatric medulloblastoma patients (median age, 10 years) with normal hearing at the time of radiation with IMRT were retrospectively evaluated. The last audiogram and follow-up from the completion of radiation were considered. Hearing function was graded on a scale 0 to 4 according to Pediatric Oncology groups toxicity criteria. Minimum, maximum, mean and median doses to the inner ear and its volume contoured in IMRT planning, as well the cisplatin dose were recorded and correlated with hearing function. Univariate and multivariate data analysis were performed. RESULTS: The median follow-up was 41 months (range 12.8-71.0 months) for audiometric evaluation and 44 months (range 14-72 months) for survival. Median doses for minimum, maximum, mean and median in the inner ear were respectively: 3785 (range, 589.4 to 4758.2), 4832.5 (range 3724 to 5447.9), 4366.5 (range 2808.5 to 5097,3) and 4360,5 (range 2878 to 5031,1). Seven patients (17%) have experienced Grade 3 or 4 hearing loss. Univariate analysis showed no difference among the variables with statistical significance, except for cisplatin dose (P < 0.03). In multivariate analysis with logistic regression, median dose in inner ear was a significant factor for hearing loss grade 3 or 4 (P < 0,01), meanwhile cisplatin dose had a trend to hearing loss grade 3 or 4 (P = 0.075). There was no relationship between the auditory apparatus volume contoured in planning and hearing loss. Grade 3 or 4 hearing loss were uncommon with median dose to the inner ear bellow 42 Gy (P = 0.063) and cisplatin dose less than 375 mg/m² (P < 0.01). None of the patients who received carboplatin in lieu of cisplatin had severe hearing loss. There was no statistically significant association between ototoxicity and the variables, when these patients were excluded from the analysis. Four patients died and two have recurred at the time of the study with a 90% overall survival rate and 85% disease free survival in 44 months. CONCLUSIONS: Our findings shows that IMRT treatment leads to a low rate of serious hearing loss even with a longer follow-up, which is consistent with others trials. We believe that is safe to contour only the cochlea and that a median dose to it should be kept below 42Gy. Cisplatin chemotherapy continues to have an important role in treatment, however doses should not exceed 375 mg/m². Survival rates were impressing in this trial given the fact that 21 (51.2%) patients were classified as high risk

Orientador: Marco Antonio Rodrigues Fernandes / Resumo: Neste trabalho foi estudado a implementação de um sistema de planejamento radioterápico empregado na rotina da medicina humana para adequação e uso na oncologia veterinária de animais selvagens. Foram ilustrados os conceitos básicos sobre radioterapia, suas indicações clínicas, técnicas de tratamento, características dos equipamentos e fontes de radiação empregados. O avanço tecnológico, principalmente na área da ciência da computação, proporcionou o desenvolvimento de software com linguagem exequível, mais eficiente e dedicado para as diversas áreas das atividades humanas. A medicina tem se beneficiado destas tecnologias, sendo a radioterapia a modalidade médica que tem se revolucionado constantemente com a oferta de sistemas computacionais tri-dimensionais para planejamentos de tratamento (TPS), proporcionando maior segurança na liberação da dose de radiação no volume alvo, melhorando a resposta terapêutica e minimizando os efeitos radiobiológicos indesejados da técnica. Foi utilizado um TPS aplicado em clínica de radioterapia humana e adequado os parâmetros radiométricos, clínicos e anatômicos para a viabilidade do uso deste TPS na radioterapia veterinária. Para a realização dos planejamentos radioterápicos dos animais estudados foram usadas imagens tomográficas da região pélvica de animais selvagens assistidos pela FMVZ. Foram propostos protocolos para a implantação dos planejamentos computacionais em veterinária mediante a análise da homogeneidade da distribuição de dose... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The research focus was to test the viability of applying radiotherapeutic planning commonly used in human medical science in veterinary oncology for wild animals. The basic concepts of radiotherapy as well as clinical indications, treatment techniques, tools features and radiation sources were evidenced in the study. Technological development, especially in computer science, has provided a more sophisticated software, with viable language resources and oriented for various areas of human activities. Such technologies have been excellent for medicine and radiology has been provided with modern systems, such as 3D computers for treatment planning (TPS). This type of equipment provides higher security when releasing radiation doses, improving the therapeutic response and reducing unwanted radiobiological effects. A human radiotherapy TPS was adapted to be viable on using it in veterinary radiotherapy, adjusting clinical and anatomical parameters. For the radiotherapy planning, wild animals assisted by FMVZ were analyzed and tomographic images of the animal’s pelvis were examined. Using the images, the suggested protocol was the implement of computational plans in veterinary through the radiation dose analysis for the planning treatment volume, securing organs surrounding the PTV. / Mestre

A radioterapia utiliza a radiação ionizante para a destruição de células tumorais. O controle da dose absorvida de um tipo específico de radiação aplicada a um volume alvo (tumor) é feito através da dosimetria, (uso de sensores de radiação), que neste trabalho foram utilizados os dosímetros químicos Fricke e filme. Dentre os diversos tipos de câncer, indicados para tratamento, utilizando a radiação ionizante, têm-se também a neoplasia Micose Fungóide (MF), linfoma que se alastra na superfície e em profundidade na pele para o qual elétrons com alta energia são utilizados para seu tratamento, devido aos seus alcances. Neste trabalho o Fricke Xilenol Gel (FXG) foi utilizado para o planejamento do tratamento da MF, para averiguar a distribuição da dose absorvida proveniente das interações dos elétrons com os tecidos. Para tal, foram construídas cubetas especiais em acrílico (tomos) conformacionadas aos contornos do crânio e do abdômen, que uma vez preenchidas com o FXG serviram para avaliar as doses absorvidas num objeto simulador antropomórfico, o Rando Phantom. O simulador, completado com cubetas e filmes radiocrômicos, este último também conformacionado aos dois contornos de interesse, foi submetido à técnica de Stanford para irradiação do corpo total com elétrons de 6 MeV. Imagens CCD e de densidade radiográfica foram feitas e posteriormente avaliadas, através de perfis horizontais e verticais passando por seus centros. Estes a seguir foram analisados por programas computacionais: um desenvolvido no Matlab para as imagens do FXG e o outro pelo programa já conhecido, ImageJ, para as imagens do filme. Das medidas, pode-se inferir que o dosímetro FXG se presta, similarmente ao filme, para as avaliações da dose absorvida devida aos elétrons na superfície do paciente e no seu interior, devida à contaminação por raios-X. / Radioterapy uses ionizing radiation to destroy tumor cells. The absorbed dose control in a target volume is done through dosimetry, using radiation sensors, being the Fricke and film used in this study. Among several types of cancer indicated for treatment using ionizing radiation, there is also the Mycosis Fungoides (MF), lymphom that spreads on surface and depth in the skin, for which high-energy electrons are used for its treatment. In this work the Fricke Xylenol Gel (FXG) was used for MF treatment control, to obtain the absorbed dose distribution from electrons interaction with the tissues. For this scope cuvettes were manufactured of acrylic (slices), with the same contours of the skull and abdomen anthropomorphic simulator tomos. Once filled with the FXG, these cuvettes were used to infer the absorbed dose by the anthropomorphic simulator Rando Phantom. This simulator, completed with the cuvettes and radiochromic films, this last one also with the same contours similar to skull and abdomen were submitted to the Stanford technique, for 6 MeV electrons total body irradiation. CCD and radiographic density images were acquired and evaluated by horizontal and vertical profiles through theirs centers. These profiles were analyzed through a computer programs: one developed in Matlab for FXG images and the other by an already known program, ImageJ, for film images. From the results one can infer that the FXG dosimeter presents similarity with that of film, in the evaluation of the absorbed dose distribution on surface and also inside of the patient.