Orientadores: Maria Alice Rostom de Mello, Eduardo Kokubiun / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T16:06:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gobatto_ClaudioAlexandre_D.pdf: 5697371 bytes, checksum: d057d19e61b0337f49f20e8edd3ce01f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Mais do que a simples reposição dos estoques energéticos, a recuperação nutricional deve restaurar a funcionalidade orgânica, com a mobilização normal dos substratos energéticos. O principal objetivo desse estudo foi verificar o efeito dos ácidos graxos livres na desnutrição e do treinamento físico na recuperação nutricional no que se refere ao fluxo glicolítico de ratos. O experimento foi realizado em duas partes: na primeira, os animais foram separados em dois grupos: D, alimentados com uma dieta contendo baixo teor protéico (6%) do desmame aos 60 dias de idade e C, animais alimentados com dieta normoprotéica (17%) no mesmo período. Do 61Q ao 10_ dia de idade, os ratos foram novamente separados em dois grupos: C - ratos que foram sempre alimentados com a dieta normoprotéica e R - animais alimentados com a dieta hipoprotéica do desmame aos 60 dias, passando então a receber a dieta a 17% de proteína. C e R foram ainda subdivididos em sedentários (8) e treinados (T - natação 1 h/dia, 5 dias/semana, com carga equivalente a 5% do peso corporal). Ao final de cada uma das etapas, fatias de músculos sóleos (25-35 mg) foram incubadas em frascos contendo Krebs-Ringer bicarbonato com [3H]-2-deoxyglucose (0.5 _Ci/ml), [U_14C]glucose (25 _Ci/ml) e insulina para a determinação da captação de glicose e síntese de glicogênio. Na primeira fase, as fatias dos sóleos de ratos C e D foram ainda incubadas em meio com (P) e sem (N) oleato (0.8 mM), formando quatro grupos: CN ,CP, DN e DP. Após 60 minutos de incubação. a concentração de lactato foi determinada no meio. Todos os resultados foram expressos em /lmol.g-1.h-1. Na primeira fase, não foram observadas alterações na captação de glicose entre os grupos (CN=19.60 + 1.34; CP=21.19 + 1.15; DN=19.13 + 1.09; DP=18.45 + 1.03). Os animais desnutridos apresentaram menor síntese de glicogênio muscular, independente da presença ou não de AGL (CN=3.12 + 0.18; CP=3.42 + 0.22; N=2.29 + 0.22; DP=2.04+ 0.24). No meio N, a produção de lactato foi maior nos animais D do que nos C. Entretanto, ambos os grupos apresentaram menores concentrações no meio com AGL que os respectivos resultados das fatias musculares no meio N (CN=37.10+1.85; CP=19.36+ 1.91; DN=61.03+ 6.00; DP=25.32 + 2.24). Na segunda fase, os ratos I captaram mais glicose que os animais sedentários, com valores inferiores nos ratos R em relação aos C. (CS=29.91+1.10, CT=34.14+1.52, RS=25.88+1.28, RT=29.53+1.00). A síntese de glicogênio na incubação foi similar nos quatro grupos (CS=2.71+O.26, TC=3. 1 O:tO. 18, RS=2.42+O.14, RT=3.07+ O.26), mas os ratos CT apresentaram maior produção de lactato (15.22+O.66) em ralção aos ratos CS (12.29+O.67). Não houveram diferenças entre a produção de lactato entre os grupos RS (16.78+1.04) e RT (15.95 + 0.75), mas a concentração de lactato foi maior nos RS do que nos CS. Nossos resultados sugerem que a desnutrição leva a alterações no fluxo glicolítico, o qual não é totalmente restabelecido com a recuperação nutricional utilizada em nosso modelo. O treinamento físico parece melhorar a recuperação nutricional / Abstract: Carbohydrate metabolism in the rats isolated soleus muscle. Effects of the oleate on malnourished and the physical training on the nutritional recovery . The nutritional recovery must provide, beyond the simple reposition of the energetic fuels, also the restauration of the normal mobilization these substrates. This study was designed to verify the effects of free fatty acids on malnutrition and the physical training on the nutritional recovery in rats soleus glycolitic flux. The experiment was developed in two parts: First, the animais were separated into 2 groups: M, fed a low protein (6%) diet from weaning to 60 days of age and C, fed a normal protein (17%) diet on some period. From 61!h to 10o!h days of age, the rats were separated into 2 groups: C: rats allways fed the normal protein diet and R: rats fed the low protein diet from weaning to the 6o!h days of age and the normal diet from this day on. C and R animais were divided into 2 sub-groups: S (sedentary) and T (swimming 1 h/day, 5d/week supporting a. load equivalent to 5% of body weight). At the end of each part, soleus muscles were isolated for incubation procedures. Muscle strips (25-35 mg) were transferred to separate flasks countaining Krebs-Ringer bicarbonate solution with [3H]-2-deoxyglucose (0.5 I-ICi/ml), [U_14C]glucose (25 I-ICi/ml) and insulin for determination of glucose uptake and glycogen synthesis. Muscle slices from C and M animais (first period) were incubated in the presence (P) ar absence (N) of FFA (0.8 mM), forming four groups: CN, CP, MN and MP. After 60 minutes of incubation, the concentration of lactate in the medium was measured. Ali results were expressed as Jlmol.g-1.h-1. In the first part, no alterations in glucose uptake were observed among groups (CN=19.60+ 1.34; CP=21.19 +.15; MN=19.13 + 1.09; MP=18.45 + 1.03), although the malnourished animais presented lower glycogen synthesis than the control rats in medium with or without FFA (CN=3.12 + 0.18; CP=3.42 + 0.22; MN=2.29+ 0.22; MP=2.04 + 0.24). In medium N, lactate production was higher in M rats than C rats. However, both nutritional treatments showed lower lactate production in medium P than in medium N (CN=37.10 + 1.85; CP=19.36+1.91; MN=61.03+ 6.00; MP=25.32+ 2.24). In the second period, the T rats showed higher glucose uptake than S animais (SC=29. 91 :t1.1 O, TC=34.14+1.52, SR=25.88+1.28, TR=29.53+1.00), with lower values for R rats than C rats. The glycogen synthesis was similar for the four groups (SC=2.71+O.26, TC=3.10+O.18, SR=2.42+O.14, TR=3.07+O.26), but the TC rats showed greater lactate production (15.22:t0.66) than SC rats (12.29+O.67). There was no difference in the lactate production between SR (16. 78+1. 04) and TR (15.95+O.75) rats, but the lactate production was higher for SR than for SC rats. Our results suggest that malnutrition leads to alterations on glycolitic flux, wich do not totally disappear with the nutritional recovery, although physical training appears to improve the nutritional recovery / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Hernandes Faustino de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T02:39:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_JussaraKiyaHuaranga_M.pdf: 4864855 bytes, checksum: d12800feff0bc35bdd1697ca1f215352 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Os glicosaminoglicanos (GAGs) têm sido implicados em diversos aspectos da fisiologia celular. Uma vez que as glândulas acessórias do aparelho reprodutor masculino são dependentes de andrógenos, o presente trabalho foi realizado para examinar o efeito da privação androgênica sobre os tipos e conteúdo de GAGs na próstata ventral, glândula de coagulação e vesícu1a seminal de ratos com três meses de idade. Os animais foram castrados e sacrificados 7, 14 e 21 dias após a cirurgia. Ratos não castrados foram utilizados como controles. Os glicosaminoglicanos foram extraídos e quantificados pelo método do azul de dimetilmetileno. Os tipos de GAGs foram identificados por eletroforese, digestão enzimática e degradação com ácido nitroso. A incorporação in vivo de esS] foi acompanhada por autoradiografia de cortes histológicos. O conteúdo total de GAGs sulfatados aumenta progressivamente após castração até o 210. dia após cirurgia. Condroitim sulfato (CS), dermatan sulfato (DS) e heparam sulfato foram encontrados nas diferentes glândulas de animais controles. DS é o GAG predominante tanto nos controles como nos animais castrados, aparecendo em concentração crescente nestes últimos. Este aumento de DS é o principal responsável pelo aumento dos GAGs totais, sendo acompanhado por um ligeiro aumento de HS. Por outro lado a concentração de CS diminui após castração. A marcação com esS] mostrou aspectos semelhantes, mas revelou uma marcante alteração da expressão de CS para HS na próstata ventral de animais castrados, quando comparados com os controles. A autoradiografia demonstrou que os GAGs encontram-se difusos no estroma e concentrados na membrana basal das estruturas epiteliais e das células musculares lisas. Aspectos similares foram observados nos animais controles e castrados. Os resultados demonstram que as variações na organização tecidual que ocorrem após a castração são associadas a alterações nos GAG sulfatados, provavelmente refletindo uma reprogramação celular, não somente do estroma mas também das células epiteliais / Abstract: Glycosaminoglycans have been implicated in several aspects of cellular physiology. Since the male accessory sex glands are high1y dependent on androgens, the present study was undertaken to examine the effect of androgen deprivation on sulfated glycosaminoglycan (GAG) types and content in the ventral prostate, coagulating gland and seminal vesic1e of 3-month-old rats. The animals were castrated and sacrificed 7, 14 and 21 days after surgery. Non-castrated animals were used as controls. The sulfated GAGs were extracted and' quantified by the dimethylmethylene blue method. GAG types were identified by electrophoresis, enzymatic digestion and nitrous acid degradation. ln vivo 35S incorporation was followed by autoradiography oftissue sections. Chondroitin sulfate (CS), dermatan sulfate (DS) and heparan sulfate (HS) were found in the different glands of the control animaIs. DS is the predominant GAG in both control and castrated groups. The total amount of GAG increased progressively after castration up to the 21th day, representing absolute increases in DS and HS. On the other hand, the CS amount decreased after castration. e5S] labeling showed similar results, but a more prominent change in the expression of CS to HS in the prostate of castrated animals as compared to controls. In situ labeling showed the GAG to be diffuse in the stroma and concentrated at the basement membrane of epithelial structures and of smooth muscle cells. SiIriilar aspects were observed in castrated and control animaIs. These results demonstrated that the variations in tissue organization following castration are associated with changes in the sulfated GAGs, most likely reflecting a reprogramming of both the stromal and epithelial cells / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Lea Rodrigues Simioni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T07:20:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DalBelo_CharistonAndre_M.pdf: 1727180 bytes, checksum: d1158c558ef761a445d61af6e05ceef1 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações induzidas pelo glicocorticóide prednisolona sobre os processos fisiológicos normais da junção neuromuscular de ratos e camundongos, através de técnica miográfica e eletrofisiológica in vitro e in vivo. Prednisolona, na concentração de 0,3 mM, antagonizou os efeitos bloqueadores produzidos pela d-Tubocurarina (1,45 ~M) tanto in vitro como in vivo. Nesta mesma concentração, produziu um aumento na força de contração muscular induzida pela ß -BuTx 1 µM em preparação nervo frênico-diafragma de camundongo e também alterou o padrão de resposta contrátil da guanidina. Além disso, Prednisolona causou efeitos pré¬ sinápticos como demonstrado pelo discreto aumento da freqüência dos potenciais de placa terminal em' miniatura (270 :t 4%) além do aparecimento de potenciais gigantes. Contudo a prednisolona', não determinou qualquer alteração sobre os valores do potencial de membrana. Assim, estes resultados confirmam os dados da literatura que apontam para uma indução por parte do glicocorticóide prednisolona, de efeitos diretos sobre a transmissão neuromuscular, possivelmente aumentando a liberação de acetilcolina no terminal nervoso motor / Abstract: The neuromuscular effects of glucocorticoids have been studied extensively since the clinical benefits of these hormones in the myasthenia gravis were reported by WARMOLTs et aI. in 1970. In this work we examined neuromuscular effects of the synthetic glucocorticoid prednisolone in isolated mammalian preparations in vitro and in vivo with supramaximal stimuli of the 0,1 Hz and 0,2 ms duration. Prednisolone (0.3 mM) antagonized the blockade produced by d¬ tubocurarine in vitro and in vivo. At this same concentration prednisolone increased in the muscle twitch tension responses to ß BuTx 1 µM in isolated phrenic nerve-diaphragm preparations but did not alter the contractile responses to 3,4-diaminopyridine; prednisolone also dimi~uished the neuromuscular effects induced by guanidine. In addition, prednisolone acted presynaptically to increase the amplitude and frequency of m.e.p.ps and generated a considerable number of giant m.e.p.ps without altering the resting membrane. These results suggest that a direct action of prednisolone on the neuromuscular transmission may increase the release of acetylcholine from the nerve terminal / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador : Ubirajara Ferreira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T16:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nardi_AguinaldoCesar_D.pdf: 4057336 bytes, checksum: 1550c28c7781e3964be23c2b91d272cb (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A litotripsia extracorpórea por ondas de choque é um método seguro e eficaz no tratamento da litíase renal, embora ainda existam dúvidas sobre os seus efeitos nos tecidos em crescimento. Com o objetivo de avaliar os efeitos das ondas de choque de alta energia nos órgãos adjacentes ao rim, no rato em crescimento, foram estudados sessenta ratos Wistar, machos. Ao completarem trinta dias de vida, realizou-se a colocação de marcador radiopaco na loja renal esquerda dos animais. Com quarenta dias de vida, após confirmação radiológica do posicionamento do marcador, os ratos foram divididos em dois grupos: grupo-controle - trinta ratos que não receberam ondas de choque; grupo experimental trinta ratos expostos a 1000 ondas de choque de 17,2 kV de intensidade. Os ratos então foram sacrificados após sete, noventa e cento e oitenta dias após a exposição às ondas de choque de alta energia. Foi avaliado o crescimento corpóreo e realizada a análise da morfologia macro e microscópica dos seguintes órgãos: figado, baço, pâncreas, pulmão direito e esquerdo, adrenal direita e esquerda. Não houve diferença estatística no crescimento corpóreo dos animais. A análise morfológica microscópica demonstrou alterações significativas no baço (alterações proliferativas da polpa vermelha) e figado (inchação turva) dos animais submetidos às OCAE e sacrificados no sétimo dia. Essas lesões desapareceram completamente nos estudos posteriores / Abstract: The extracorporeal shock wave lithotripsy (ESWL) is a safe and efficÍent method in the treatment of renallithiasis. However, there are still questions about its effects in growing tissues. Searching to evaluate the effects of shock waves in organs adjacent to the kidney in growing rats, 60 male wistar white rats were studied. At 30 days of age, a radiopaque marker was introduced in the lefi renal region ofthe animals. Ten days afier, the rats were divided in two groups. The control group - thirty rats did not receive the shock waves; experimental group - thirty rats exposed to 1000 shock waves of 17,2 k V of intensity. The rats were then sacrificed afier 7, 90 and 180 days afier the exposition to the shock waves, and the liver, spleen, pancreas, lungs and adrenals were studied grossly dand histologically. We found no significant changes in overall growth between the two groups. However, in the spleen of the rats exposed to ESWL and sacrificed in the seventh day, we observed red pulp with increase cellularity and numerous megacariocytes and large lymphoid cells, that disappeared afierwards. Regarding the liver, we observed ballooning degeneration ofthe hepàtocytes in the same group. We conclude that ESWL does not affect overall animal growth but cause transitory lesions in the spleen and in the liver ofthe rats / Doutorado / Doutor em Cirurgia

Orientador : Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-29T02:13:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yano_ClaudiaLumy_M.pdf: 13412783 bytes, checksum: d37a8f5cf9fa1ba8f636b7a5cf52a7fe (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador : Liana Maria Cardoso Verinaud / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T20:52:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souto_PaulaCristinadeSouza_M.pdf: 3995762 bytes, checksum: 7f9e4f34b6614515ca9fa1179150d942 (MD5) Previous issue date: 2002 / Mestrado

Orientadores : Mario Jose Abdalla Saad, Kleber Gomes Franchini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T02:03:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ueno_Mirian_D.pdf: 20363732 bytes, checksum: 328908d192d887aa94bc1cd29fde51d2 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A resistência à insulina, definida como uma resposta biológica subnormal a uma determinada concentração de insulina, é componente essencial da fisiopatologia ou etiopatogenia de importantes doenças como diabetes tipo 2, obesidade e hipertensão arterial. Em humanos e em modelos animais, a hiperinsulinemia produzida por "clamp" normoglicêmico por 3 a 5 dias é capaz de induzir resistência à insulina A insulina, ao se ligar à subunidade a de seu receptor heterotetramérico, dá inicio a uma série de ações imediatas e tardias, metabólicas e promotoras de crescimento. Tais eventos ocorrem através da estimulação da subunidade f3transmembrana do receptor, que se autofosforila e ativa a fosforilação de substratos endógenos intracelulares, conhecidos como substratos do receptor de insulina ou IRSs. Os principais substratos do receptor de insulina são o IRS-1 e IRS-2, que quando fosforilados em tirosina se ligam e ativam proteínas com porção SH2, como a PI 3-quinase. A ativação destas proteínas desencadeia a ativação de duas serina-quinases importantes que são a AKT e as ERKs (112), que são essenciais, respectivamente, para os efeitos metabólicos e de controle gênico do hormônio. Neste estudo investigamoso nível protéico e grau de fosforilação em tirosina do receptor de insulina, dos substratos 1 e 2 do receptor (IRS-1 e IRS-2), a associação deles com a enzima PI 3-quinase, o grau de fosforilação em serinaftreonina da AKT e a fosforilação das ERKs (112)em tecido hepático, muscular, cardíaco, adiposo, e em ilhotas de Langerhans isoladas de ratos submetidos ao clamp hiperinsulinêmico normoglicêmico por cinco dias (Ri5). A infusão de insulina por cinco dias induziu aumento dos níveis séricos de insulina de jejum e reduziu em cerca de 40% a utilização de glicose mediada pela insulina. No tecido hepático, a hiperinsulinemia crônica induziu, após estímulo agudo com insulina, redução do grau de fosforilação do receptor de insulina, do IRS-2, da associação deste substrato com a PI 3-quinase e da fosforilação da AKT. Não observamos diferença nos níveis protéicos do IR e de seus substatos (1 e 2), da fosforilação do IRS-1 e sua associação com a PI 3-quinase, e da fosforilação das ERKs (112), em ratos Ri5 comparado aos controles. Quando estudamos o tecido muscular, após estímulo agudo com insulina, observamos uma diminuição significativa no grau de fosforilação do receptor de insulina, do IRS-l, na associação deste substrato com a PI 3-quinase e na fosforilação da AKT em ratos Hi5, em relação aos controles. Entretanto, a hiperinsulinemia crônica não alterou os níveis protéicos do IR, IRS-I, IRS-2, a fosforilação do IRS-2, a associação IRS-2/PI 3-quinase e a fosforilação das ERKs. o tecido cardíaco de ratos Hi5 apresentou resultados similares ao músculo esquelético, com redução do nível protéico e fosforilação do IRS-I, da associação deste substrato com a PI 3-quinase e da fosforilação da AKT, após estímulo agudo com insulina. Não houve diferença no nível protéico e grau de fosforilação do receptor de insulina e do IRS-2, na associação IRS-2/PI 3-quinase, e na fosforilação das ERKs, entre os grupos controle e Ri5. A hiperinsulinemiacrônica por cinco dias não alterou o nível protéico e grau de fosforilação do receptor de insulina no tecido adiposo, comparado aos controles, mas induziu aumento do nível protéico, grau de fosforilação e associação com a PI 3-quinase dos substratos 1 e 2 do receptor de insulina. No estudo da AKT, observamos aumento da fosforilação no estado basal dos ratos do grupo Hi5. Também não foi observada alteração do grau de fosforilação das ERKs. As ilhotas de Langerhans isoladas de ratos Ri5 apresentaram, como no tecido adiposo, aumento do nível protéico, grau de fosforilação e associação com a PI 3-quinase dos IRS-l e -2, sem alterar o nível protéico e grau de fosforilação do receptor de insulina e das ERKs. Em resumo, os resultados do nosso estudo demonstraram que a infusão crônica de insulina por 5 dias induziu resistência a esse hormônio, com diminuição de transmissão do sinal de insulina em fígado, músculo e coração, e incremento dessas vias em tecido adiposo e ilhotas. No fígado, a menor fosforilação/ativação da AKT foi conseqüente à menor fosforilação do IRS-2, e em músculo esquelético e cardíaco à menor fosforilação do IRS-l. Em tecido adiposo e ilhotas, os dois substratos do receptor de insulina, IRS-l e IRS- 2 aumentaram seus níveis e grau de fosforilação. A hiperinsulinemia crônica por 5 dias modulou especificamente os efeitos metabólicos do hormônio, através da AKT, sendo que a via mitogênica, através das ERKs (112)não sofreu regulação em nenhum tecido estudado dos animaisRiS. A regulação tecido-específica das vias de transmissão do sinal de insulina em ratos que receberam infusão desse hormônio por 5 dias, contribui para explicar os mecanismos moleculares de resistência à insulina nestes animais, e sugere também modelos de regulação que podem estar presentes na instalação de obesidade, hiperinsulinemia e resistência à insulina / Abstract: Insulin resistance, defined as subnormal response to a given concentration of insulin, is an important component in the pathophysiology of diseases with high prevalence in the population as obesity, diabetes mellitus type 2 and hypertension. The chronic euglycemic hyperinsulinemiafor as 3-5 days can induce insulinresistance. Insulin initiates its growth and metabolic promoting effects by binding to its receptor at the plasma membrane, which has tyrosine-kinase activity, and is able to autophosphorylates and phosphorylates cytoplasmatic proteins called insulin receptor substrates (IRSs). The main substrates ofinsulin receptor are IRS-l and IRS-2, which when phosphorylated in tyrosine bind and activate several proteins, including phosphatidylinositol (PI) 3-kinase. These initial steps lead to the activation of two serineltreonina kinases - AKT and the ERK family(1/2) ofMAPK. In this study we investigated the levels and phosphorylation of the insulin receptor, IRS-l and IRS-2, their association with PI 3-quinase, and the phosphorylation of AKT and ERKs (1/2) in liver, muscle, heart, adipose tissue and in isolated pancreatic islets ofrats with chronic euglycemichyperinsulinemia for 5 days (Ri5). The 5 days of euglycemic hyperinsulinemia increased the fasting plasma insulin concentration and decreased the whole-body insulin-mediated glucose disposal. Rowever, the insulin secretion in response to glucose in isolated islets was increased in hiperinsulinemicrats compared to controls. In liver of Ri5 rats there was a decrease of insulin-stimulated receptor autophosphorylation, without change in the insulin receptor protein levels. The chronic hyperinsulinemia did not change the protein leveI, the phosphorylation status of IRS-l and its association with PI 3-kinase, although there was a decrease in the phosphorylation of IRS-2, its association with PI 3-kinase and the phosphorylation of AKT in this tissue. The IRS-2 protein leveI and the phosphorylation of ERKs (1/2) were similar in Ri5 and control rats. Chronic insulin infusion for 5 days did not significantly change the levei of IR, IRS-l and IRS-2 protein in musc1e.Afier stimulation with insulin, phosphorylation of the insulin receptor, IRS-l, the association IRS-l/PI 3-kinase and the phosphorylation AKT were reduced in Ri5 rats compared to the controls. Rowever, there was no change in the insulin-stimulated IRS-2 phosphorylation, IRS-2/PI 3-kinase association and phosphorylation ofERKs (1/2). The protein leveI and the insulin-stimulated autophosphorylation of the insulin receptor were similar in the heart in both the Ri5 and control rats. Following stimulation with insulin, the chronic hyperinsulinemia induced a decrease in the IRS-l protein leveI, and as in muscle, also decreased the IRS-l phosphorylation, the IRS-l/PI 3-kinase association and phosphorylation of AKT, without changing the leveI, the phosphorylation of IRS-2, its association with PI 3-kinase, and the phosphorylation of ERKs (112), compared to the controls. In the adipose tissue, the chronic hyperinsulinemia did not change the protein leveI and the phosphorylation status of insulin receptor, before and afier stimulation with insulin. In contrast, there was an increase in the IRSs protein levels, phospholylation and association with PI 3-kinase before and afier stimulation with insulin, in the Ri5 rats compared to the controls. Basal AKT phosphorylation was higher in Ri5 rats compared to control group. There was no change in ERKs (112)phosphorylation in the adipose tissue of Ri5 rats compared to the controls. Similarly, no significant change occurred in the protein levei and phosphorylation of the insulin receptor in isolated islets ttom Ri5 rats when compared tothe controls. Rowever, the chronic hyperinsulinemia increased the protein levels, phospholylation and associations with PI 3-kinase of the IRS-l and 2, after stimulation with insulin, compared to the controls. The insulin-stimulated phosphorylation of ERK was similar in isolated islets in both the Ri5 and control rats. In summary, our results demonstrated that 5 days of euglycemic hyperinsulinemia induced insulin resistance, with a decrease in insulin signal transductional in tiver, muscle and heart, and an increase in these pathways in adipose tissue and isolated islets. In tiver, the reduced phosphorylation/ativation of AKT was consequence of reduced IRS-2 phosphorylation, and in muscle and heart due to reduced IRS-I phosphorylation. In adipose tissue and islets, the protein levels and phosphorylation status of the two insulin receptor substrates, IRS-I and IRS-2, were increased. The chronic hyperinsulinemia modulated specifically the metabotic pathway through AKT. However, the mitogenic pathway, through ERKs (112) did not undergo regulation in neither of tissues studied ITomanimalsHi5. The tissue-specific regulation of insulin signal transductional pathways in rats with chronic insulin infusion during 5 days, contribute to explain the molecular mechanisms of insulin resistance in these animals, and also suggest models of regulation which can be present in the early stages of obesity, hyperinsulinemiaand insulinresistance / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientador : Sebastião Roberto Taboga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T09:11:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scarano_WellersonRodrigo_M.pdf: 8417585 bytes, checksum: 9e46d54895502b0d6728fde58595a7ec (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A próstata é uma glândula anexa do sistema reprodutor masculino que tem despertado grande interesse na área biomédica devido às inúmeras patologias que a acometem. Frente ao desbalanço hormonal, ocasionado principalmente pelo processo de senescência, o tecido prostático desenvolve dentre outras doenças, a hiperplasia benígna prostática (BPH), metaplasias do epitélio, prostatites e o câncer prostático. O estrógeno parece ter papel fundamental na gênese da hiperplasia benígna prostática e do câncer da próstata, porém, os aspectos que envolvem a relação estroma-epitélio não são completamente esclarecidos. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da administração crônica do estradiol sobre os componentes epitelial e estromal da próstata de cobaias machos Cavia porceUus ao longo do desenvolvimento pós-natal, utilizando técnicas histológicas, histoquímicas e ultra-estruturais. Foram utilizados 10 animais de cada idade: pré-púbere, púbere, pós-púbere e adultos, sendo que 5 foram destinados ao grupo controle e 5 ao grupo tratado, que recebeu injeção subcutânea semanal de Benzoato de Estradiol durante 4 semanas. Após o tratamento as próstatas foram fixadas e incluídas para a microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Foram feitos testes histoquímicos para fibras colágenas (Tricrômico de Masson, Picrossírius-Hematoxilina), fibras elásticas (Resorcina Fucsina de Weigert) e fibras reticulares (Reticulina de Gõmõn), além das colorações usuais pela Hematoxilina-eosina e pelo Azul de Toluidina. Para a caracterização quantitativa dos componentes prostáticos foi realizada uma análise morfométrica-estereológica, sendo que os dados obtidos foram comparados aplicandose o Teste T (p::;;O.OS). Na microscopia eletrônica de transmissão foram feitos procedimentos rotineiros para a caracterização ultra-estrutural de elementos epiteliais e do estroma prostático. A análise histopatológica do material revelou regiões onde há ocorrência da Neoplasia Intraepitelial Prostática (PIN) característica do padrão epitelial denominado cribriforme. Além disso, nota-se nos animais experimentais, um estreitamento da região clara supranuclear, descrita como sendo a região do complexo de Golgi. Observa-se perda da polaridade celular, núcleos de diversas formas e tamanhos, em diferentes alturas e com padrões de distribuição cromatínica irregular. Tais alterações foram encontradas, principalmente, nos animais púberes, pós-púberes e adultos. A análise histoquímica , juntamente com a análise morfométrica estereológica, revelaram nos animais tratados hiperplasia estromal com aumento da camada fibromuscular que circunda os ácinos glandulares nas idades pré-púbere, pós-púbere e adulta. Além disso, observou-se um aumento na quantidade dos elementos fibrilares da matriz estromal, como o colágeno, as fibras reticulares e as fibras do sistema elástico, entremeando células musculares lisas que se arranjam, às vezes, de forma não concêntrica. A ultta-estrutura mostrou que nos animais tratados ocorre um certo desarranjo no sistema de membranas internas nas células epiteliais que assumem fenótipos variados, hipertrofia de células basais, presença de feixes fibrilares colagênicos espessos e de fibras do sistema elástico em maior quantidade quando comparado aos animais do grupo controle, além de reforçar os achados histológicos como o padrão epitelial cribriforme e a hiperplasia estromal. Estes dados sugerem que o estrógeno pode provocar modificações celulares e teciduais em qualquer etapa do desenvolvimento, principalmente nas fases em que os níveis de testosterona estão aumentados (após a puberdade), e com isso provocar alterações fisiopatológicas relevantes para o funcionamento da glândula prostática / Abstract: The prostate is an attached gland of the male reproductive system that has developed great interest in the biomedical area because to the innumerable pathologies that attacks it. Front to hormonal disorder, caused mainly for the aging, the prostatic tis sue develops amongst other diseases, the benign prostatic hyperplasia (BPH), metaplasias of the epithelium, prostatitis and the prostate cancer. The estrogen hormone seems to have essential role in genesis of the benign prostatic hyperplasia and prostate cancer however the aspects that involve the stroma-epithelium relation completely are not clarified. The objective of the present study was to evaluate the effect of the chronic administration of estrogen on epithelial and stromal components of the male Guinea pig prostate to long of developmen_ being used the hystological and structural techniques. For this experiment were utilized 10 animals of each age: pre-puberal age, puberal age, post-puberal age and adult age, which 5 animaIs were destined to control group whereas 5 animals were destined to treated group that received weekly subcutaneous injections of Benzoate of estradiol during 4 weeks. After the treatment the prostates were fixed and embedded for light and transmission electron microscopy. Histochemical tests were carried out for collagen fibers (Masson's trichrome, Picrossirius Hematoxylin), elastic fibers (Weigert's Resorcin Fucsin) and reticular fibers (Gõmõri's reticulin), as well as the usual staining methods with Hematoxilin-eosin and Toluidine blue. To quantitative characterization of the prostatic components were carried out using the morphometric-stereological analyze, where the data were compared using statistical test T (p_0.05). At the transmission electron microscopy the routine procedures were followed for the ultrastructural characterization of the epithelium and prostatic stroma elements. The hystopatological analysis of the material disclosed regions where it has occurrence of Prostatic Intraepithelial Neoplasia (pIN), characteristic of the cribriform epithelial pattem. Moreover, it is noticed in the experimental animaIs, a narrowing of the clear up-nuclear region, described as being the region of the Golgi complexo One observes loss of the cellular polarity, nuclei of diverse forms, sizes, in different heights and with pattem of irregular chromatin distribution. Such alterations had been found, mainly, in the puberal , post-puberal and adult animals. The hystochemical analysis, together with the morphometric-stereological analysis, had disclosed in the treated animals stromal hyperplasia with increased to the layer to fibromuscular that surrounds the glandular acini in the pre-puberal, post-puberal and adult ages. Moreover, there were an increased in the amount of the fibrilar elements from the stromal matrix, as the collagen and reticular fibers and the elastic system fibers, intermixing smooth muscular cells that if they arrange, sometimes, of disorganized formo The structural analysis showed that in the treated animals occurs a certain disarrangement in the system of internal membranes in the epithelial cells that assume varied phenotypes, hypertrophy of basal cells, presence of thick collagen fibers and the elastic system fibers in bigger amount than control group, besides strengthening the hysthologic findings as the cribriform epithelial pattem and the stromal hyperplasia. These data suggest that estrogen can provoke cellular and tecidual modifications in any stage of the development, mainly in the phases where the testosterone levels are increased (after the puberty), and with this to cause important physiopathological alterations for the functioning of the prostate gland / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Maria Apparecida Pouchet, Sergio Miguel Zucas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T10:36:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peters_ClotildesFernandes_D.pdf: 791186 bytes, checksum: 28e306912e1e10cb44d306556eb22d4d (MD5) Previous issue date: 1969 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed / Doutorado / Odontopediatria / Doutor em Ciências

Orientadores : Carla Beatriz Collares-Buzato, Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T12:06:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leite_AdrianaRibeiro_M.pdf: 8822503 bytes, checksum: 3e64b2ae27c71f15b7a6adbac9bf6fa3 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: As junções comunicantes (JCs) ou gap junctions são canais intercelulares formados pela união de dois hemicanais ou conexons, os quais são formados por proteínas integrais pertencentes à família das conexinas (Cx). Estudos em ilhotas pancreáticas têm demonstrado que a comunicação intercelular, via junções comunicantes, é fundamental para adequada biossíntese, estoque e liberação de insulina pelas células b pancreáticas. Condições que promovem a formação de JCs aumentam a secreção e biossíntese deste hormônio. Por outro lado, o bloqueio dos canais ou ruptura das JCs na célula 13 resultam em comprometimento do processo secretório. Ilhotas pancreáticas de fetos e recém-nascidos de ratos exibem uma resposta secretória de insulina reduzida em comparação às ilhotas de animais adultos. Cultivo prolongado de ilhotas pancreáticas, bem como o tratamento in vitro com hormônios somatotróficos, como a prolactina, induzem maturação deste processo de acoplamento estímulo-secreção. Esta tese teve como objetivo investigar os possíveis mecanismos intracelulares de regulação das JCs pela cultura prolongada e pelo tratamento in vitro com prolactina em ilhotas pancreáticas de ratos recém-nascidos. Para tal, foi avaliada a localização, o grau de expressão gênica e o conteúdo celular das proteínas integrantes das JCs, as conexinas 43 e 36, bem como o grau de adesão celular pela expressão da b -catenina nas ilhotas nestas condições experimentais. Foram executados os seguintes protocolos: 1) tratamento in vitro com prolactina (2mg/mL/dia) durante 7 dias, 2) cultivo das ilhotas por períodos variando de 1 a 7 dias e 3) cultivo por 3 dias em concentrações variáveis de glicose no meio de cultura. Foi detectado um aumento significativo da secreção de insulina após o tratamento com prolactina, tempo prolongado de cultivo e concentração crescente de glicose no meio. Este resultado indica que tais condições experimentais induzem maturação do processo de secreção de insulina em ilhotas pancreáticas de ratos recém-nascidos. O tratamento crônico com prolactina também induziu um aumento na expressão de Cx43 e b -catenina, como demonstrado por Westem Blot. Ambas proteínas juncionais foram detectadas por imunocitoquímica na região de contato intercelular nas células das ilhotas. Quanto ao efeito da cultura per se, foi observada uma correlação entre o tempo de cultivo e o aumento na expressão celular de Cx43, Cx36 e b -catenina. No caso das conexinas, a cultura prolongada também resultou em aumento da transcrição gênica, como detectado pelo método de RT-PCR. Quando foram analisadas as variações de expressão das conexinas em resposta à glicose, somente a Cx36 pareceu ser regulada por concentrações crescentes deste secretagogo no meio de cultura. Esses resultados, tomados em conjunto, sugerem que a regulação das conexinas nas ilhotas pancreáticas pela prolactina, glicose e outros fatores contidos no meio de cultura podem ser importantes no processo de maturação das células 13 em condições de cultivo / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular