A leptospirose é uma zoonose de importância mundial, causada por leptospiras patogênicas. Aproximadamente 5 a 10% das infecções humanas cursam com a forma grave. A Doença de Weil é a forma mais comum de doença grave e pode apresentarse com duas formas de evolução, aguda progressiva monofásica ou de curso prolongado. A doença grave se caracteriza por uma combinação de hemorragia, mais comumente pulmonar, icterícia e insuficiência renal, com letalidade de 5 a 15%. O rim é um órgão muito acometido na Leptospirose. Clinicamente o envolvimento renal ocorre de 16 a 40%, com manifestações peculiares como poliúria, hipocalemia, e perda de sódio. A disfunção tubular renal, é característica da leptospirose forma grave, com envolvimento dos transportadores renais de sódio ao longo do néfron, levando às manifestações observadas. A terapêutica antimicrobiana é recomendada na Leptospirose, porém com controvérsias à sua indicação após o quarto dia de doença. Quando da instalação da lesão não haveria benefícios com a utilização de antibióticos. O tratamento pode diminuir a morbidade e letalidade, assim como interferir no envolvimento renal e na expressão dos transportadores renais de sódio. A patogênese pode estar relacionada a efeitos diretos da leptospira ou a resposta inflamatória assim como o estresse oxidativo. A utilização de antioxidantes, pode ser considerada como terapia adjuvante. Nós avaliamos a expressão no túbulo proximal do trocador Na+-H+ (NHE3) e na porção espessa da medula ascendente o cotransportador Na+-K+-2Cl- (NKCC2), no modelo de hamster com as duas formas de evolução de doença grave, mimetizando a doença de humanos realizados em dois experimentos. Os experimentos envolveram animais infectados não tratados e tratados com ampicilina associado ou não ao antioxidante, N-acetilcisteína. A presença de antígenos de Leptospira e a expressão dos transportadores foram avaliadas por imunohistoquímica, e o ácido tiobarbitúrico, marcador de estresse oxidativo, (TBARS) foi quantificado.Hamsters infectados, apresentaram altas quantidades de antígenos nos tecidos-alvo, enquanto que a expressão de ambos os transportadores apresentou-se diminuída. O tratamento com ampicilina esteve associado com mínima detecção ou ausência de antígenos, restabelecimento da expressão dos transportadores nos respectivos locais e redução dos níveis de TBARS. O tratamento precoce e tardio com ampicilina restabeleceu os defeitos tubulares na leptospirose forma grave em ambos experimentos, sem benefícios com a utilização da N-acetilcisteína. / Leptospirosis is a zoonosis of worldwide distribution. About 5-10% of all human infections presents with severe forms. Weil\'s syndrome, the most common presentation of severe forms of leptospirosis, may courses either as a single monophasic disease or as a disease with prolonged course, characterized by a combination of hemorrhage, particularly in the lung, renal failure, and jaundice, with fatality rates ranging from 5 to 15%. The kidney is an important target organ in leptospiral infection. Clinically, renal involvement in leptospirosis occurs in 16% to 40% of cases and is unique because of the atypical presentation of polyuria, hypokalemia, and sodium wasting, suggestive of a special form of tubular dysfunction related to the major renal sodium transporters expressed along the nephron. A wide range of antimicrobial therapy for leptospirosis was described and benefits have been disputed for cases with more than four days of clinical disease, because after a threshold of leptospiremia, the delayed use of antibiotics is unlikely to reduce fatality. Antimicrobial therapy is thought to interfere on fatality, renal involvement, and renal sodium transporters expression during severe disease. The pathogenesis may be related to direct effects of leptospiral compounds or inflammatory response due to oxidative stress. Antioxidant could be considered for adjunctive therapy.We evaluated the expression of proximal tubule type 3 Na+/H+ exchanger (NHE3) and thick ascending limb Na+-K+-2Cl- cotransporter (NKCC2) in infected non treated and treated hamsters reproducing the two forms of clinical human presentations of Weil\'s syndrome divided in two experiments. Animals were treated or not with ampicillin and/or N-acetyl-cysteine (NAC). Leptospiral antigen/s and expression of renal transporters were evaluated by immunohistochemistry, and serum thiobarbituric acid (TBARS) was quantified. Infected hamsters had high amounts of detectable leptospiral antigen/s in target tissues while renal expression of NHE3 and NKCC2 decreased. Ampicillin treatment was associated with minimal or no detection of leptospiral antigens, normal expression of NHE3 and NKCC2 transporters, and reduced levels of TBARS. Early and late ampicillin treatment rescued tubular defects in leptospirosis severe disease in both experiments, and there was no evidence of benefit from antioxidant therapy.

Neste trabalho foi avaliado o desempenho de liners compostos frente a soluções de \'CU\'\'CL IND.2\'.2\'H IND.2\'\'O\'. Foram utilizados um solo argiloso compactado (CCL) da Formação Corumbataí (interior do estado de São Paulo) e um geocomposto bentonítico (GCL) de fabricação nacional. Quatro corpos de prova foram preparados para a realização do ensaio de percolação em coluna, sendo dois montados com CCL sobre GCL e outros dois com GCL sobre CCL. Os corpos de prova com configurações distintas foram submetidos à percolação de duas soluções de \'CU POT.2+\': uma com concentração de 0,024M e outra com 0,012M. Após o início da percolação da solução contaminante houve aumento da condutividade hidráulica, porém os valores mantiveram-se na ordem de \'10 POT.-11\' m/s, compatíveis com as exigências requeridas em diversas legislações ambientais. O liner composto mostrou-se mais eficiente como barreira de controle de fluxo comparado com Musso (2008), que estudou ambos materiais separadamente. A configuração dos liners não influenciou os valores de Rd obtidos, ao contrário da concentração das soluções. Observou-se que os resultados de Rd são inversamente proporcionais às concentrações utilizadas. Neste trabalho, os valores de Rd obtidos foram maiores que em Musso (2008), evidenciando a vantagem de se combinar diferentes materiais para a contenção de íons. / This research evaluated composite liners performance when permeated by \'CU\'\'CL IND.2\'.2\'H IND.2\'\'O\' solution. It were used a compacted clayey soil (CCL) samples from Formação Corumbataí (state of São Paulo) and a geosynthetic clay liner (GCL) manufactured in Brazil. Four specimens were prepared to column percolation tests. A pair of them was made with CCL on top of GCL and the other two with GCL on top of CCL. Specimens with different configurations were subjected to two \'CU POT.2+\' solutions: one with a concentration of 0,024M and other with 0,012M. Just after solution percolation began, there was an increase of hydraulic conductivity, but remaining around \'10 POT.-11\' m/s, in accordance with environmental laws. The composite liners demonstrated to be more efficient as barrier when compared to Musso (2008), which has analyzed both materials separately. The configuration of the liners did not influenced Rd values, unlike solutions concentration. It was observed that Rd results are inversely proportional to used concentrations. Rd values were larger than those obtained in Musso (2008), showing the advantage of matching different materials aiming ions retention.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-08T17:29:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 946406 bytes, checksum: a2673b6e3dfec9a3841f9054f2c61721 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-08T17:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 946406 bytes, checksum: a2673b6e3dfec9a3841f9054f2c61721 (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A aplicação de um campo magnético na água para o uso em irrigação tem sido tratada com certa frequência na comunidade científica. Essa prática causaria alterações nas propriedades da água podendo favorecer a disponibilidade de alguns nutrientes e/ou reduzir perdas na agricultura. O estudo do transporte de nutrientes disponíveis na solução do solo, como o fósforo, está também relacionado a preocupação ambiental quanto a poluição que pode vir a ocorrer no solo e nas águas subterrâneas. Assim, objetivou-se neste trabalho, estudar os efeitos provocados no pH e na condutividade elétrica de águas com características diferentes ao serem submetidas a um campo magnético e avaliar a influência nos parâmetros de transporte, tais como fator de retardamento (R), coeficiente de distribuição (K d ), número de Peclet (Pe), coeficiente dispersivo-difusivo (D) e dispersividade ( ) do íon fosfato em um Latossolo Vermelho (LV) e um Neossolo Quartzarênico (NQ). O estudo foi conduzido no Laboratório de Física do Solo do Departamento de Engenharia Agrícola da Universidade Federal de Viçosa – UFV, sendo dividido em dois experimentos. O primeiro, que envolve a análise das alterações da água com relação ao pH e a condutividade elétrica, quando submetida a um campo magnético. Foram utilizadas: água destilada, deionizada, tratada convencionalmente (torneira), mineral e em solução de fósforo em três diferentes concentrações. Para a produção do campo magnético foi utilizado um magnetizador Sylocimol Doméstico, da empresa Timol Produtos Magnéticos. No segundo experimento foram utilizados o Neossolo Quartzarênico (NQ), proveniente de Mocambinho, no município de Jaíba, situada no estado de Minas Gerais e Latossolo Vermelho (LV) da cidade de Sete Lagoas, também em Minas Gerais. O solo foi acondicionado em colunas de lixiviação que foram confeccionadas em tubos de PVC. Os ensaios com soluções de fósforo foram realizados para três concentrações iniciais diferentes usando o Neossolo Quartzarênico e três usando o Latossolo Vermelho, tanto em condições naturais quanto submetidos a campo magnético. Estas soluções foram aplicadas até que o volume percolado correspondesse a treze volumes de poros para LV e sete volumes de poros para NQ. Os parâmetros de transporte Pe, R, D foram obtidos utilizando-se o programa computacional Disp. Não foi observado diferença significativa para os valores de pH da água deionizada, destilada, tratada convencionalmente (torneira), mineral e nem para as soluções de fósforo em nenhuma das três concentrações adotadas quando as amostras foram comparadas aos tratamentos com e sem a influencia do campo magnético. Comportamento diferente foi verificado para a condutividade elétrica, em que notou-se um aumento nos seus valores para todos os tratamentos com campo magnético, em todos os tipos de águas e soluções de fósforo analisadas quando comparadas ao tratamento sem a interferência do campo magnético. Foram encontradas diferenças estatísticas no R e K d ao analisar comparativamente o uso de água não magnetizada ao da água magnetizada, quando se aplicou a maior concentração de fósforo no Latossolo Vermelho. Para os demais parâmetros, Pe, D e não foram verificadas diferenças estatísticas entre os tratamentos em nenhuma das concentrações usadas. Para o Neossolo Quartzarênico ao analisar comparativamente o uso de água comum ao da água magnetizada, para as três concentrações, encontrou-se diferenças no R e K d apenas na solução de menor concentração de fósforo. Os demais parâmetros Pe, D e não apresentaram diferenças estatísticas entre os tratamentos em nenhuma das concentrações testadas. / The application of a magnetic field in the water for use in irrigation have been treated with certain frequency in the scientific community. This practice would cause changes in the properties of water can promote the availability of certain nutrients and / or reduce losses in agriculture. The nutrient transport of study available in the soil solution, such as phosphorus, is also related to environmental concerns about pollution that may occur in soil and groundwater. Thus, the aim of this work was to study the effects of pH and electrical conductivity of water with different characteristics to be subjected to a magnetic field and to evaluate the influence on the transport parameters such as retardation factor (R), coefficient distribution (K d ), Peclet number (Pe), dispersive- diffusion coefficient (D) and dispersivity ( ) of phosphate ion in an Latossolo Vermelho (LV) and Neossolo Quartzarênico (NQ). The study was conducted at the Soil Physics Laboratory of the Department of Agricultural Engineering of the Federal University of Viçosa - UFV, divided into two experiments. The first, involves the analysis of water changes with respect to pH and electrical conductivity when subjected to a magnetic field. They were used: distilled, deionized water, treated conventionally (tap), and phosphorus mineral solution at three different concentrations. For the production of the magnetic field we used a hypnotist Sylocimol domestic, the company thymol Magnetic Products. The second experiment used the Neossolo Quartzarênico (NQ), from Mocambinho in the town of Jaíba, located in the state of Minas Gerais and Latossolo Vermelho (LV) of the city of Sete Lagoas, also in United States. The soil was packed in columns that were made of PVC pipes. The tests with phosphorus solutions were made for three different initial concentrations using Quartzipsamment and three using the Rhodic both in natural conditions as subjected to magnetic field. These solutions were applied until the percolated volume corresponded to thirteen pore volume to LV and seven volumes of pores to NQ. The transport parameters, R, D were obtained using the computer program Disp. There was no significant difference in pH values of deionized, distilled water, conventionally treated (tap) and mineral nor phosphorus solutions at all three concentrations adopted when samples were compared to treatments with and without the influence of the magnetic field. Different behavior was checked for electrical conductivity, wherein noted an increase in their values for all the treatments with magnetic fields in all types of waters and phosphorus solutions analyzed. Statistical differences were found in R and K d to comparatively analyze the use of water not magnetized to the magnetized water, when applied to higher phosphorus concentration in Latossolo Vermelho. For other parameters, Pe, D and were not observed statistical differences between treatments in any of the concentrations used. For Neossolo Quartzarênico to comparatively analyze the use of tap water to the magnetized water, for the three concentrations, we found differences in R and K d only in lower phosphorus concentration solution. The other parameters Pe, D and no statistical differences between treatments in any of the tested concentrations.

O teste da diferença de potencial nasal (DPN) é um exame que mede a diferença bioelétrica através do epitélio nasal, a qual resulta do transporte iônico transepitelial dos íons sódio (Na+), pelo canal ENaC (Epitelial Na+ Channel), e cloro (Cl-), pelo canal CFTR(Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator). DPN tem sido utilizada como teste de auxilio diagnóstico em doenças associadas à disfunção do CFTR, como a Fibrose Cística (FC). FC é uma doença genética autossômica recessiva causada por mutações que afetam o funcionamento do canal CFTR (e secundariamente do ENaC) e levam a manifestações em diversos órgãos. Normalmente a dosagem de cloro no suor acima de 60 mEq/L ou a identificação de mutações nos dois alelos confirmam diagnóstico de FC. Porém, existem casos atípicos com exames considerados inconclusivos onde as características eletrofisiológicas decorrentes da disfunção do CFTR devem ser demonstradas para estabelecimento do diagnóstico. A identificação correta destes casos é importante para instituição do tratamento adequado e definição do prognóstico. O objetivo principal deste trabalho foi padronizar a técnica da DPN para sua futura aplicação como ferramenta diagnóstica através da determinação dos seus valores de referência, de sensibilidade, de especificidade e de concordância entre os resultados das duas narinas. Secundariamente, objetivamos analisar as relações entre a presença de função residual do CFTRe a concentração de cloro no suor, fenótipo pancreático, presença de Pseudomonas aeruginosa, função pulmonar e genótipo na amostra de pacientes comFC. Foi realizado um estudo transversal com realização da DPN em um grupo de pacientes com FC (n=29, idade:15±6 anos) e dois grupos controle: não=FC (n=19, idade: 15 ± 10 anos) e sadios (n=19, idade: 17 ± 8 anos). Os resultados demonstraram que os valores da DPN são significativamente diferentes no grupo FC (FC: DPNmax: -34 ± 9mV, Δamil: -20 ± 9mV, ΔCl: 4 ± 5mV, Δamilo-iso: -19 ± 9 mV e indiceDPN: 0.85 ± 0.23; não-FC:DPNmax: -14 ± 5mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 17 ± 9mV, Δamilo-iso: -1 ± 4 mV e indiceDPN: 0.11 ± 0.11) e sadios: DPNmax: -15 ± 4mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 11 ± 7mV, Δamilo-iso: -2 ± 4 mV e indiceDPN: 0.20±0.14),com sensibilidade e especificidade de 95-96% e concordância de resultado entre as duas narinas maior para a DPNmax (r=0,934). A função residual da CFTR não mostrou relação com nenhum dos parâmetros fenotípicos avaliados. Somente mostrou relação com a gravidade do genótipo. Entretanto, foi observada relação entre os parâmetros que avaliam a hiperfunção do ENaC existente na FC e o fenótipo. Concluímos com este trabalho que foi possível reproduzir e padronizar esta técnica da DPN e demonstrar que o fenótipo da FC está mais relacionado à alteração do transporte do íon sódio através do ENaC do que à presença de função residual da CFTR. / Nasal potential difference test (NPD) is a test that measures the bioelectrical difference across the nasal epithelium, which results from transepithelial ion transport of sodium (Na+), by ENaC channels (Epitelial Na+ Channel) and chloride (Cl-), by CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator).NPD has been used as a diagnostic tool in CFTR related disorders, such as Cystic Fibrosis (CF). CF is an autosomal recessive genetic disease caused by mutations that affect the function of the CFTR channel (andsecondarily of the EnaC)and lead to manifestations in various organs. Normally sweat chloride concentration > 60 mEq / L and identification of two CFTR mutations confirm the CF diagnosis. However there are atypical cases with inconclusive sweat chloride or genetic where the electrophysiological characteristics induced by CFTR dysfunction has to be demonstrated for diagnosis. The correct identification of these cases is important for institution of appropriate treatment and definition of prognosis. The objective of this study was to standardize the NPD for its future application as a diagnostic tool through the determination of reference values, sensibility and specificity and agreement of the results between both examined nostrils. Secondarily, we analyzed the relations between residual CFTR function and sweat chloride concentration, pancreatic phenotype, Pseudomonas aeruginosa positivity, pulmonary function and genotype in the sample of CF patients. It was a transversal study where the NPD was measured in a group of CF patients (n = 29, age: 15 ± 6 years) and two control groups: non-CF (n = 19, age: 15 ± 10 years) and healthy (n = 19, age: 17 ± 8 years). The results showed that NPD was significantly different in CF (NPDmax: -34 ± 9mV, Δamil: -20 ± 9mV, ΔCl: 4 ± 5mV, Δamilo-iso: -19 ± 9 mV e NPDindex: 0.85 ± 0.23; non-CF: NPDmax: -14 ± 5mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 17 ± 9mV, Δamilo-iso: -1 ± 4 mV and NPDindex: 0.11 ± 0.11) and healthy: NPDmax: -15 ± 4mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 11 ± 7mV, Δamilo-iso: -2 ± 4 mV and NPDindex: 0.20±0.14) with sensibility and specificity of 95-96% and agreement between both nostrils greater for NPDmax (r=0.934). The residual CFTR function did not show relation with all phenotypic parameters evaluated. It just showed relation with genotype severity. Indeed it was observed a relation between the parameters that assess the ENaC hyperfunction that occurs in CF and the phenotype. We concluded with this study that was possible to reproduce and to standardize the NPD and to demonstrate that the phenotype is more related to sodium transport alterations through ENaC than to the presence of residual CFTR function.

O teste da diferença de potencial nasal (DPN) é um exame que mede a diferença bioelétrica através do epitélio nasal, a qual resulta do transporte iônico transepitelial dos íons sódio (Na+), pelo canal ENaC (Epitelial Na+ Channel), e cloro (Cl-), pelo canal CFTR(Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator). DPN tem sido utilizada como teste de auxilio diagnóstico em doenças associadas à disfunção do CFTR, como a Fibrose Cística (FC). FC é uma doença genética autossômica recessiva causada por mutações que afetam o funcionamento do canal CFTR (e secundariamente do ENaC) e levam a manifestações em diversos órgãos. Normalmente a dosagem de cloro no suor acima de 60 mEq/L ou a identificação de mutações nos dois alelos confirmam diagnóstico de FC. Porém, existem casos atípicos com exames considerados inconclusivos onde as características eletrofisiológicas decorrentes da disfunção do CFTR devem ser demonstradas para estabelecimento do diagnóstico. A identificação correta destes casos é importante para instituição do tratamento adequado e definição do prognóstico. O objetivo principal deste trabalho foi padronizar a técnica da DPN para sua futura aplicação como ferramenta diagnóstica através da determinação dos seus valores de referência, de sensibilidade, de especificidade e de concordância entre os resultados das duas narinas. Secundariamente, objetivamos analisar as relações entre a presença de função residual do CFTRe a concentração de cloro no suor, fenótipo pancreático, presença de Pseudomonas aeruginosa, função pulmonar e genótipo na amostra de pacientes comFC. Foi realizado um estudo transversal com realização da DPN em um grupo de pacientes com FC (n=29, idade:15±6 anos) e dois grupos controle: não=FC (n=19, idade: 15 ± 10 anos) e sadios (n=19, idade: 17 ± 8 anos). Os resultados demonstraram que os valores da DPN são significativamente diferentes no grupo FC (FC: DPNmax: -34 ± 9mV, Δamil: -20 ± 9mV, ΔCl: 4 ± 5mV, Δamilo-iso: -19 ± 9 mV e indiceDPN: 0.85 ± 0.23; não-FC:DPNmax: -14 ± 5mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 17 ± 9mV, Δamilo-iso: -1 ± 4 mV e indiceDPN: 0.11 ± 0.11) e sadios: DPNmax: -15 ± 4mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 11 ± 7mV, Δamilo-iso: -2 ± 4 mV e indiceDPN: 0.20±0.14),com sensibilidade e especificidade de 95-96% e concordância de resultado entre as duas narinas maior para a DPNmax (r=0,934). A função residual da CFTR não mostrou relação com nenhum dos parâmetros fenotípicos avaliados. Somente mostrou relação com a gravidade do genótipo. Entretanto, foi observada relação entre os parâmetros que avaliam a hiperfunção do ENaC existente na FC e o fenótipo. Concluímos com este trabalho que foi possível reproduzir e padronizar esta técnica da DPN e demonstrar que o fenótipo da FC está mais relacionado à alteração do transporte do íon sódio através do ENaC do que à presença de função residual da CFTR. / Nasal potential difference test (NPD) is a test that measures the bioelectrical difference across the nasal epithelium, which results from transepithelial ion transport of sodium (Na+), by ENaC channels (Epitelial Na+ Channel) and chloride (Cl-), by CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator).NPD has been used as a diagnostic tool in CFTR related disorders, such as Cystic Fibrosis (CF). CF is an autosomal recessive genetic disease caused by mutations that affect the function of the CFTR channel (andsecondarily of the EnaC)and lead to manifestations in various organs. Normally sweat chloride concentration > 60 mEq / L and identification of two CFTR mutations confirm the CF diagnosis. However there are atypical cases with inconclusive sweat chloride or genetic where the electrophysiological characteristics induced by CFTR dysfunction has to be demonstrated for diagnosis. The correct identification of these cases is important for institution of appropriate treatment and definition of prognosis. The objective of this study was to standardize the NPD for its future application as a diagnostic tool through the determination of reference values, sensibility and specificity and agreement of the results between both examined nostrils. Secondarily, we analyzed the relations between residual CFTR function and sweat chloride concentration, pancreatic phenotype, Pseudomonas aeruginosa positivity, pulmonary function and genotype in the sample of CF patients. It was a transversal study where the NPD was measured in a group of CF patients (n = 29, age: 15 ± 6 years) and two control groups: non-CF (n = 19, age: 15 ± 10 years) and healthy (n = 19, age: 17 ± 8 years). The results showed that NPD was significantly different in CF (NPDmax: -34 ± 9mV, Δamil: -20 ± 9mV, ΔCl: 4 ± 5mV, Δamilo-iso: -19 ± 9 mV e NPDindex: 0.85 ± 0.23; non-CF: NPDmax: -14 ± 5mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 17 ± 9mV, Δamilo-iso: -1 ± 4 mV and NPDindex: 0.11 ± 0.11) and healthy: NPDmax: -15 ± 4mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 11 ± 7mV, Δamilo-iso: -2 ± 4 mV and NPDindex: 0.20±0.14) with sensibility and specificity of 95-96% and agreement between both nostrils greater for NPDmax (r=0.934). The residual CFTR function did not show relation with all phenotypic parameters evaluated. It just showed relation with genotype severity. Indeed it was observed a relation between the parameters that assess the ENaC hyperfunction that occurs in CF and the phenotype. We concluded with this study that was possible to reproduce and to standardize the NPD and to demonstrate that the phenotype is more related to sodium transport alterations through ENaC than to the presence of residual CFTR function.

O teste da diferença de potencial nasal (DPN) é um exame que mede a diferença bioelétrica através do epitélio nasal, a qual resulta do transporte iônico transepitelial dos íons sódio (Na+), pelo canal ENaC (Epitelial Na+ Channel), e cloro (Cl-), pelo canal CFTR(Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator). DPN tem sido utilizada como teste de auxilio diagnóstico em doenças associadas à disfunção do CFTR, como a Fibrose Cística (FC). FC é uma doença genética autossômica recessiva causada por mutações que afetam o funcionamento do canal CFTR (e secundariamente do ENaC) e levam a manifestações em diversos órgãos. Normalmente a dosagem de cloro no suor acima de 60 mEq/L ou a identificação de mutações nos dois alelos confirmam diagnóstico de FC. Porém, existem casos atípicos com exames considerados inconclusivos onde as características eletrofisiológicas decorrentes da disfunção do CFTR devem ser demonstradas para estabelecimento do diagnóstico. A identificação correta destes casos é importante para instituição do tratamento adequado e definição do prognóstico. O objetivo principal deste trabalho foi padronizar a técnica da DPN para sua futura aplicação como ferramenta diagnóstica através da determinação dos seus valores de referência, de sensibilidade, de especificidade e de concordância entre os resultados das duas narinas. Secundariamente, objetivamos analisar as relações entre a presença de função residual do CFTRe a concentração de cloro no suor, fenótipo pancreático, presença de Pseudomonas aeruginosa, função pulmonar e genótipo na amostra de pacientes comFC. Foi realizado um estudo transversal com realização da DPN em um grupo de pacientes com FC (n=29, idade:15±6 anos) e dois grupos controle: não=FC (n=19, idade: 15 ± 10 anos) e sadios (n=19, idade: 17 ± 8 anos). Os resultados demonstraram que os valores da DPN são significativamente diferentes no grupo FC (FC: DPNmax: -34 ± 9mV, Δamil: -20 ± 9mV, ΔCl: 4 ± 5mV, Δamilo-iso: -19 ± 9 mV e indiceDPN: 0.85 ± 0.23; não-FC:DPNmax: -14 ± 5mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 17 ± 9mV, Δamilo-iso: -1 ± 4 mV e indiceDPN: 0.11 ± 0.11) e sadios: DPNmax: -15 ± 4mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 11 ± 7mV, Δamilo-iso: -2 ± 4 mV e indiceDPN: 0.20±0.14),com sensibilidade e especificidade de 95-96% e concordância de resultado entre as duas narinas maior para a DPNmax (r=0,934). A função residual da CFTR não mostrou relação com nenhum dos parâmetros fenotípicos avaliados. Somente mostrou relação com a gravidade do genótipo. Entretanto, foi observada relação entre os parâmetros que avaliam a hiperfunção do ENaC existente na FC e o fenótipo. Concluímos com este trabalho que foi possível reproduzir e padronizar esta técnica da DPN e demonstrar que o fenótipo da FC está mais relacionado à alteração do transporte do íon sódio através do ENaC do que à presença de função residual da CFTR. / Nasal potential difference test (NPD) is a test that measures the bioelectrical difference across the nasal epithelium, which results from transepithelial ion transport of sodium (Na+), by ENaC channels (Epitelial Na+ Channel) and chloride (Cl-), by CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator).NPD has been used as a diagnostic tool in CFTR related disorders, such as Cystic Fibrosis (CF). CF is an autosomal recessive genetic disease caused by mutations that affect the function of the CFTR channel (andsecondarily of the EnaC)and lead to manifestations in various organs. Normally sweat chloride concentration > 60 mEq / L and identification of two CFTR mutations confirm the CF diagnosis. However there are atypical cases with inconclusive sweat chloride or genetic where the electrophysiological characteristics induced by CFTR dysfunction has to be demonstrated for diagnosis. The correct identification of these cases is important for institution of appropriate treatment and definition of prognosis. The objective of this study was to standardize the NPD for its future application as a diagnostic tool through the determination of reference values, sensibility and specificity and agreement of the results between both examined nostrils. Secondarily, we analyzed the relations between residual CFTR function and sweat chloride concentration, pancreatic phenotype, Pseudomonas aeruginosa positivity, pulmonary function and genotype in the sample of CF patients. It was a transversal study where the NPD was measured in a group of CF patients (n = 29, age: 15 ± 6 years) and two control groups: non-CF (n = 19, age: 15 ± 10 years) and healthy (n = 19, age: 17 ± 8 years). The results showed that NPD was significantly different in CF (NPDmax: -34 ± 9mV, Δamil: -20 ± 9mV, ΔCl: 4 ± 5mV, Δamilo-iso: -19 ± 9 mV e NPDindex: 0.85 ± 0.23; non-CF: NPDmax: -14 ± 5mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 17 ± 9mV, Δamilo-iso: -1 ± 4 mV and NPDindex: 0.11 ± 0.11) and healthy: NPDmax: -15 ± 4mV, Δamil: -6 ± 3mV, ΔCl: 11 ± 7mV, Δamilo-iso: -2 ± 4 mV and NPDindex: 0.20±0.14) with sensibility and specificity of 95-96% and agreement between both nostrils greater for NPDmax (r=0.934). The residual CFTR function did not show relation with all phenotypic parameters evaluated. It just showed relation with genotype severity. Indeed it was observed a relation between the parameters that assess the ENaC hyperfunction that occurs in CF and the phenotype. We concluded with this study that was possible to reproduce and to standardize the NPD and to demonstrate that the phenotype is more related to sodium transport alterations through ENaC than to the presence of residual CFTR function.

Neste trabalho foi avaliado o desempenho de liners compostos frente a soluções de \'CU\'\'CL IND.2\'.2\'H IND.2\'\'O\'. Foram utilizados um solo argiloso compactado (CCL) da Formação Corumbataí (interior do estado de São Paulo) e um geocomposto bentonítico (GCL) de fabricação nacional. Quatro corpos de prova foram preparados para a realização do ensaio de percolação em coluna, sendo dois montados com CCL sobre GCL e outros dois com GCL sobre CCL. Os corpos de prova com configurações distintas foram submetidos à percolação de duas soluções de \'CU POT.2+\': uma com concentração de 0,024M e outra com 0,012M. Após o início da percolação da solução contaminante houve aumento da condutividade hidráulica, porém os valores mantiveram-se na ordem de \'10 POT.-11\' m/s, compatíveis com as exigências requeridas em diversas legislações ambientais. O liner composto mostrou-se mais eficiente como barreira de controle de fluxo comparado com Musso (2008), que estudou ambos materiais separadamente. A configuração dos liners não influenciou os valores de Rd obtidos, ao contrário da concentração das soluções. Observou-se que os resultados de Rd são inversamente proporcionais às concentrações utilizadas. Neste trabalho, os valores de Rd obtidos foram maiores que em Musso (2008), evidenciando a vantagem de se combinar diferentes materiais para a contenção de íons. / This research evaluated composite liners performance when permeated by \'CU\'\'CL IND.2\'.2\'H IND.2\'\'O\' solution. It were used a compacted clayey soil (CCL) samples from Formação Corumbataí (state of São Paulo) and a geosynthetic clay liner (GCL) manufactured in Brazil. Four specimens were prepared to column percolation tests. A pair of them was made with CCL on top of GCL and the other two with GCL on top of CCL. Specimens with different configurations were subjected to two \'CU POT.2+\' solutions: one with a concentration of 0,024M and other with 0,012M. Just after solution percolation began, there was an increase of hydraulic conductivity, but remaining around \'10 POT.-11\' m/s, in accordance with environmental laws. The composite liners demonstrated to be more efficient as barrier when compared to Musso (2008), which has analyzed both materials separately. The configuration of the liners did not influenced Rd values, unlike solutions concentration. It was observed that Rd results are inversely proportional to used concentrations. Rd values were larger than those obtained in Musso (2008), showing the advantage of matching different materials aiming ions retention.

No estudo da dinâmica de solutos num meio poroso é de suma importância o conhecimento das propriedades do meio e dos líquidos percolantes, bem como de fatores externos. Um fator externo relevante é a temperatura e, nesse sentido, objetivou-se com o presente trabalho a determinação de parâmetros de transporte dos íons potássio e nitrato para diferentes valores de temperatura em experimentos de deslocamento miscível. Os parâmetros avaliados foram o fator de retardamento (R), o coeficiente de difusão/dispersão (D) e a dispersividade (λ) e as temperaturas utilizadas foram a ambiente (25°C a 28°C), 40°C e 50°C. Os sais utilizados foram nitrato de potássio e cloreto de potássio, preparados em uma solução composta de 50ppm de nitrato e 2000ppm de potássio e o meio poroso um Latossolo Vermelho Amarelo, textura média. Os resultados obtidos permitiram concluir que a temperatura apresentou influência na velocidade da solução no meio poroso e no coeficiente de dispersão. / In the study of solute dynamics in porous media, it is of extreme importance the knowledge of the medium and transporting liquid properties as well as of external factors as temperature. In this sense, the objective of this work was the determination of parameters for potassium and nitrate ions under different temperatures in miscible displacement experiments, in a sandy loam Oxisol. The evaluated parameters were retardation factor (R) difusion/dispersion coefficient (D) and dispersivity (λ), whereas the used temperatures were the prevailing temperature (25°C to 28°C), 40°C and 50°C. The used salts were potassium nitrate and potassium chloride, prepared in a composed solution of 50 ppm of nitrate and 2000 ppm of potassium. From the results, it could be concluded that the temperature showed high influence on soil solution velocity and dispersion coefficient

No estudo da dinâmica de solutos num meio poroso é de suma importância o conhecimento das propriedades do meio e dos líquidos percolantes, bem como de fatores externos. Um fator externo relevante é a temperatura e, nesse sentido, objetivou-se com o presente trabalho a determinação de parâmetros de transporte dos íons potássio e nitrato para diferentes valores de temperatura em experimentos de deslocamento miscível. Os parâmetros avaliados foram o fator de retardamento (R), o coeficiente de difusão/dispersão (D) e a dispersividade (λ) e as temperaturas utilizadas foram a ambiente (25°C a 28°C), 40°C e 50°C. Os sais utilizados foram nitrato de potássio e cloreto de potássio, preparados em uma solução composta de 50ppm de nitrato e 2000ppm de potássio e o meio poroso um Latossolo Vermelho Amarelo, textura média. Os resultados obtidos permitiram concluir que a temperatura apresentou influência na velocidade da solução no meio poroso e no coeficiente de dispersão. / In the study of solute dynamics in porous media, it is of extreme importance the knowledge of the medium and transporting liquid properties as well as of external factors as temperature. In this sense, the objective of this work was the determination of parameters for potassium and nitrate ions under different temperatures in miscible displacement experiments, in a sandy loam Oxisol. The evaluated parameters were retardation factor (R) difusion/dispersion coefficient (D) and dispersivity (λ), whereas the used temperatures were the prevailing temperature (25°C to 28°C), 40°C and 50°C. The used salts were potassium nitrate and potassium chloride, prepared in a composed solution of 50 ppm of nitrate and 2000 ppm of potassium. From the results, it could be concluded that the temperature showed high influence on soil solution velocity and dispersion coefficient