A tuberculose (TB) é uma doença infecto-contagiosa causada pelo complexo Mycobacteruim tuberculosis. A melhor forma de prevenção se baseia na detecção e na cura dos casos. Um diagnóstico acurado de TB seria essencial para a identificação e tratamento dos pacientes. O diagnóstico laboratorial recomendado baseia-se na baciloscopia e na cultura de material clínico. Novos métodos, os quais empregam técnica genética baseada na amplificação e detecção do DNA bacteriano ou do RNA, visam melhorar a velocidade, sensibilidade e especificidade da detecção da bactéria. O principal teste desse grupo é o método da reação da cadeia da polimerase (PCR). Entretanto, há discordância na literatura quanto as dados de validade da PCR aplicada ao diagnóstico de tuberculose. O presente estudo realizou uma meta-análise sobre o teste da PCR no diagnóstico de TB. O método estatístico usado estimou efeitos do teste entre os estudos primários. A sensibilidade e a especificidade foram calculadas de acordo com as suas definições: Sensibilidade = TPR, taxa de verdadeiros positivos e Especificidade = 1 FPR, onde FPR = taxa de falsos positivos. Calculamos os logit de TPR e FPR a soma e suas diferenças e fizemos uma back transformação aos eixos de TPR vs. FPR com posterior construção da curva SROC (Moses & Shapiro, 1993). A curva SROC representa uma estimativa da medida de acurácia do teste índice a qual é ajustada pelo ponto de corte tanto quanto pela interdependência dos valores de sensibilidade e especificidade obtidos de cada estudo. Foram localizados 1375 artigos através de busca base de dados do Medline no período de 1988 a 2000. Considerando os critérios de elegibilidade, foram aceitos 111 artigos. A caracterização dos estudos, a validade e a sua aplicabilidade foram apreciadas. A medida combinada de todos os estudos foi de 0,86 para a sensibilidade e 0,95 para a especificidade usando-se o método de efeitos aleatórios. A PCR in-house apresentou melhor performance do que a Amplicor. O AMTD obteve os maiores valores de acurácia possivelmente devido o rRNA apresentar múltiplas cópias por célula. Diante das evidências, a PCR se constitui num teste complementar para tuberculose devendo ter critérios próprios para a sua utilização. No entanto, este teste não contempla os atributos requeridos para a substituição da baciloscopia na rotina diagnóstica.

O estudo pretendeu abordar a imunidade humoral na Tuberculose. Foi um estudo de teste diagnóstico que avaliou um antígeno específico, constituinte da parede celular da micobactéria, denominado LIPOARABINOMANNAN (LAM), proveniente de Cambridge, MA, USA da Companhia Dyna-Gen. O objetivo principal do estudo foi a detecção de anticorpos IgG anti-LAM em casos de tuberculose pulmonar, extrapulmonar e formas combinadas da doença. A casuística total compreendeu 173 pacientes portadores de tuberculose, sendo a mesma confirmada por métodos bacteriológicos e/ou anatomopatológicos de biópsias de diversos órgãos em 114 casos (65,8%). Em 46 casos (26,5%) a doença se confirmou por rigorosos critérios clínicos, radiológicos e de seguimento após tratamento adequado. Cento e quinze pacientes eram do sexo masculino (66,5%) e 58 do sexo feminino (33,5%). Cento e trinta e um eram brancos (75,7%), 24 negros (13,9%) e 18 mistos (10,4%). O total de formas pulmonares foi de 88 casos (51%), sendo 81 (46,8%) formas bacilíferas e 7 casos (4,0%) não-bacilíferas. Dos casos com baciloscopia direta negativa, 3 apresentaram culturas positivas, 2 culturas negativas e em 2 casos a mesma não foi realizada. Formas extrapulmonares compreenderam 71 casos (41%) com predomínio de forma miliar, ganglionar, pleural e do SNC. A combinação de ambas as formas ocorreu em 14 casos (8,1%). Radiologicamente, houve predomínio de lesões escavadas (30,1%), consolidação (13,9%), padrão miliar (11%) e exame radiológico normal (11%), além de outros achados. Da série, 118 pacientes eram HIV negativos (68,2%) e 55 eram HIV positivos (31,8%). As principais comorbidades associadas foram Diabetes Melittus (DM), Alcoolismo, Cardiopatia e Neoplasia, entre outras. Exames culturais foram realizados em 145 pacientes, sendo que em 72 casos a cultura foi positiva (41,6%) e foi negativa em 10 casos (5,8%). Dos 72 exames culturais positivos, o teste do MycoDot foi positivo em 47 casos (65,2%) e negativo em 25 (34,7%). Em 10 exames culturais negativos, o mesmo foi positivo em 6 casos (60%) e negativo em 4 casos (40%). Em 63 exames culturais não realizados, o teste do MycoDot foi positivo em 46 casos e negativos em 17. Os resultados do teste MycoDot na série total foram: positivos em 120 pacientes (69,4%) e negativos em 53 pacientes (30,6%). As formas pulmonares bacilíferas, não bacilíferas, extrapulmonares e combinadas apresentaram sensibilidade de 74,1%, 85,7%, 63,4% e 64,3% respectivamente. O grupo controle foi de 77 indivíduos assim distribuídos: 41 sadios, 16 portadores de lesões residuais de tuberculose, 6 sadios com BCG prévia, 6 sadios sem BCG prévia e 8 com outras comorbidades. O resultado do teste MycoDot foi negativo em 73 casos (94,8%) e positivo em 4 casos (5,2%). A sensibilidade da casuística total foi de 69,4%, a especificidade foi de 94,8%, o valor preditivo positivo (VPP) foi de 96,8% e o valor preditivo negativo (VPN) foi de 57,9%. Dos pacientes HIV positivos a sensibilidade foi de 61,8% e a especificidade foi de 100%. Nos pacientes HIV negativos a sensibilidade foi de 72,9% e a especificidade foi de 94,7%. Concluiu-se que o Teste MycoDot é de fácil realização, baixo custo, podendo ser útil como uma ferramenta adicional para o diagnóstico da tuberculose. / This study evaluated the humoral immunity in tuberculosis. It was a study of diagnostic test using a specific antigen, designed Lipoarabinomannan (LAM) provenient of Cambridge, MA, USA, Dyna-Gen Company. This antigen is a cell wall component of mycobacteria. The major objective was to study anti-LAM IgG antibodies in cases of pulmonary, extrapulmonary and associated forms of tuberculosis. The casuistic was 173 patients with tuberculosis, confirmed by bacteriologic and/or anatomopathologic methods in 114 cases (68,8%). In the other cases, the tuberculosis was confirmed by clinical, radiological features and follow up of the patients after chemoterapy. The series presented 115 males, 58 females; 131 was caucasian, 24 black and 18 was non-caucasian. The total pulmonary forms was 88 cases (51%), 81 with positive AFB in sputum and 7 with negative AFB in sputum. Three have positive culture, two with negative cultures. Extrapulmonary tuberculosis was found in 71 cases (41%). The predominant forms of X-ray of the thorax was miliar and necrositing lesions. HIV-positive patients were 118 and negative 55. The MycoDot test results were: positive in 120 patients (69,4%) and negative in 53 patients (30,6%). In control group, MycoDot was negative in 73 cases (94,8%) and positive in 4 cases (5,2%). The final results were: sensitivity of 69,4%, specificity of 94,8%, the positive predictive value was 96,8% and the negative predictive value was 57,9%. In HIV-positive patients, the sensibility was 61,8% and the specificity was 100%. The conclusions were the MycoDot test is easy and ideal for use in the diagnosis of active tuberculosis in conjunction with the other methods.

Orientadora: Profª. Drª. Cristina de Oliveira Rodrifgues / Co-orientador: Prof. Dr. Antônio Ruffino Netto / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente. Defesa: Curitiba, 13/04/2015 / Inclui referências / Resumo: A inexistência de testes diagnósticos acurados para a tuberculose pulmonar em crianças dificulta este diagnóstico. Teste diagnóstico é a nomenclatura atualmente utilizada para denominar toda ferramenta que contribui para o diagnóstico de uma doença ou sua evolução, podendo ser constituído de dados da história clínica, exame físico ou exames complementares. Desta forma, foi realizado este estudo com o objetivo de avaliar qual teste apresentava a melhor acurácia para diagnóstico da tuberculose pulmonar em crianças. Foi um estudo do tipo teste diagnóstico, com coleta de dados retrospectiva e prospectiva. A população do estudo constituiu-se de crianças até 14 anos de idade, com suspeita de tuberculose pulmonar, atendidas no ambulatório de referência para tuberculose infantil do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná, entre janeiro de 2005 a julho de 2010. Foram avaliados: história clínica e epidemiológica, exames complementares e escores diagnósticos. O diagnóstico final, considerado como padrão ouro, foi definido por um painel de experts (avaliadores externos). Foi realizada uma análise descritiva e comparativa dos dados e o nível de significância considerado foi de 5%. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa em Seres Humanos da instituição. A amostra final foi de 186 crianças: 21 (11,3%) doentes (grupo TB) e 165 (88,7%) não doentes (grupo NTB). Quanto as características sociodemográficas, os grupos foram homogêneos. O grupo TB apresentou 85% de história de contato com caso tuberculoso (principalmente os pais), com uma frequência maior de múltiplos contatos (p=0,02); 85,7% apresentavam algum sinal ou sintoma e, estes quando presentes foram estatisticamente mais frequentes neste grupo. Os testes com melhor sensibilidade para o diagnóstico foram: tosse (76,2%); presença de pelo menos um sinal ou sintoma (85,7%); história epidemiológica presente (85,7%); radiografia de tórax (RxT) alterada (85,7%); associação de sinais ou sintomas com epidemiologia (71,4%) e os diversos escores testados (71,4 - 95,2%). Para acurácia foram: RxT alterada (91,4%); escores testados (90,3 - 94,1%); associação de sinais e/ou sintomas, epidemiologia, RxT e prova tuberculínica (PT) (91,4%) e essa mesma associação independente da PT (95,1%). Os valores preditivos positivos (VPP) que melhor prediziam o diagnóstico foram: a baciloscopia, a cultura ou a associação de sinais e/ou sintomas, epidemiologia, RxT e PT. Dentre os escores, o VPP variou de 58,1 a 74,5%. Para as variáveis analisadas todas apresentaram valores preditivos negativos adequados. Na análise multivariada, a associação de tosse, sudorese e anorexia foi a que apresentou a melhor precisão diagnóstica (88,7%). A concordância entre a PT e a história epidemiológica foi substancial, enquanto entre a RxT e a clínica foi moderada. Concluiu-se que o escore preconizado pelo Ministério da Saúde, assim como as associações que envolviam presença de sinais ou sintomas, RxT alterada e vínculo epidemiológico (preferencialmente com PT reatora) foram os que apresentaram uma melhor performance, devendo estes testes diagnósticos serem incluídos pelos programas de saúde, adequados para a realidade epidemiológica local e validados na região de sua utilização. Palavras-chave: Diagnóstico. Tuberculose. Criança. / Abstract: The lack of accurate diagnostic tests in pulmonary tuberculosis in children delays the diagnosis. Diagnostic test is the nomenclature currently used to name any tool that contributes to the diagnosis of a disease or its evolution, and may include data from clinical history, physical examination or tests. This study was conducted in order to evaluate the diagnostic accuracy for better diagnostic test for definition, due to the difficulty in the diagnosis of pulmonary tuberculosis in childhood. It was a study for a diagnostic test that collected retrospective and prospective data. The study population consisted of children under 14 years of age with suspected pulmonary tuberculosis, treated at the outpatient clinic reference for childhood tuberculosis of the Clinical Hospital of the Federal University of Parana, from January 2005 to July 2010. It was evaluated: clinical and epidemiological history, complementary tests and diagnostic scores. The final diagnosis, considered the gold standard, was defined by a panel of experts (external evaluators). A descriptive and comparative analysis was performed and the significance level was 5%. The Research Ethics Committee in Human Beings of the hospital approved this study. The final sample of 186 children: 21 (11.3%) patients considered illness (TB group) and 165 (88.7%) patients did not (NTB group). Among the sociodemographic characteristics, the groups were homogeneous. The TB group also showed 85% of history of contact with tuberculosis case (especially parents), with a higher frequency of multiple contacts (p = 0.02); 85.7% had signs or symptoms and, when present, all of them were statistically more frequent in this group. The tests with better sensitivity for the diagnosis were: cough (76.2%); presence of at least one sign or symptom (85.7%); this epidemiological history (85.7%); abnormal chest X-ray (CXR) (85.7%); signs or symptoms associated with the epidemiology (71.4%) and the various scores tested (from 71.4 to 95.2%). For accuracy were the abnormal CXR (91.4%); tested scores (90.3 to 94.1%); signs association of and symptoms, epidemiology, CXR and tuberculin skin test (TST) (91.4%) and the same tests without the TST (95.1%). The positive predictive values (PPV) that best predicted the diagnosis were: sputum smear microscopy, culture or association of signs and symptoms, epidemiology, CXR and TST. Among the scores, the PPV ranged from 58.1 to 74.5%. For variables all had adequate negative predictive values. In multivariate analysis, the association of cough, sweating and anorexia presented the best diagnostic accuracy (88.7%). The agreement between the TST and the epidemiological history was substantial, but between the CXR and the clinic was moderate. It was concluded that the recommended score by the Ministry of Health as well as the associations involving the presence of signs or symptoms, CXR abnormal and epidemiological link (mainly with TST positive) presented the best performance, and these diagnostic tests should be included by health programs, suitable to the local epidemiological reality and validated in the region of use. Keyword: Diagnosis. Tuberculosis. Child.

Esta dissertação debate a efetividade epidemiológica dos programas de controle da tuberculose que, baseados na descoberta de casos e seu tratamento, tem como objetivo reduzir a transmissão do bacilo e, por conseguinte, a morbidade. Os indicadores epidemiológicos utilizados no campo da tuberculose são analisados avaliando-se suas aplicações, limitações e as relações entre eles. É descrita a dinâmica de transmissão do bacilo com base em modelos matemáticos compartimentais, assim como os efeitos esperados do diagnóstico-tratamento de casos de acordo com essa abordagem. Dados frequentemente citados na literatura, como evidências empíricas da efetividade do programa de controle, são revistos criticamente. Por outro lado, o trabalho questiona premissas dos modelos de compreensão da dinâmica de transmissão, sobretudo a proporcionalidade entre coeficiente de prevalência de casos bacilíferos e risco de infecção, cotejando-as com resultados de estudos empíricos. Discutindo a relevância de outros elementos na determinação do comportamento epidemiológico da tuberculose, conclui-se que o impacto dos programas de controle baseados em diagnóstico e tratamento de casos na transmissão do bacilo é apenas marginal, e que o comportamento epidemiológico da tuberculose é determinado primariamente pela resistência ao adoecimento, resultado de fatores biológicos e sociais.

A tuberculose (TB) é uma doença infecto-contagiosa causada pelo complexo Mycobacteruim tuberculosis. A melhor forma de prevenção se baseia na detecção e na cura dos casos. Um diagnóstico acurado de TB seria essencial para a identificação e tratamento dos pacientes. O diagnóstico laboratorial recomendado baseia-se na baciloscopia e na cultura de material clínico. Novos métodos, os quais empregam técnica genética baseada na amplificação e detecção do DNA bacteriano ou do RNA, visam melhorar a velocidade, sensibilidade e especificidade da detecção da bactéria. O principal teste desse grupo é o método da reação da cadeia da polimerase (PCR). Entretanto, há discordância na literatura quanto as dados de validade da PCR aplicada ao diagnóstico de tuberculose. O presente estudo realizou uma meta-análise sobre o teste da PCR no diagnóstico de TB. O método estatístico usado estimou efeitos do teste entre os estudos primários. A sensibilidade e a especificidade foram calculadas de acordo com as suas definições: Sensibilidade = TPR, taxa de verdadeiros positivos e Especificidade = 1 FPR, onde FPR = taxa de falsos positivos. Calculamos os logit de TPR e FPR a soma e suas diferenças e fizemos uma back transformação aos eixos de TPR vs. FPR com posterior construção da curva SROC (Moses & Shapiro, 1993). A curva SROC representa uma estimativa da medida de acurácia do teste índice a qual é ajustada pelo ponto de corte tanto quanto pela interdependência dos valores de sensibilidade e especificidade obtidos de cada estudo. Foram localizados 1375 artigos através de busca base de dados do Medline no período de 1988 a 2000. Considerando os critérios de elegibilidade, foram aceitos 111 artigos. A caracterização dos estudos, a validade e a sua aplicabilidade foram apreciadas. A medida combinada de todos os estudos foi de 0,86 para a sensibilidade e 0,95 para a especificidade usando-se o método de efeitos aleatórios. A PCR in-house apresentou melhor performance do que a Amplicor. O AMTD obteve os maiores valores de acurácia possivelmente devido o rRNA apresentar múltiplas cópias por célula. Diante das evidências, a PCR se constitui num teste complementar para tuberculose devendo ter critérios próprios para a sua utilização. No entanto, este teste não contempla os atributos requeridos para a substituição da baciloscopia na rotina diagnóstica.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-02T13:40:56Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-03T20:20:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-04T13:04:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-04T13:04:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) Previous issue date: 2010-04-27 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Tuberculosis (Tb) is an infectious disease of international distribution. Problems in the diagnosis, as time requirement and high costs for implementation in public health care, increases the number of the disease cases. Specifically about the most important antibiogram assays, the “nitrate reduction assay” (MRN) provides faster results (7 to 14 days) than the “proportion method (MP)” (28 days), however this last one is considered as “gold standard” by the World Health Organization. The aim of this work was to evaluate modification in the method of nitrate reduction (MRN), used to check the sensitivity of M. tuberculosis strains to primary drugs administered for the treatment of TB, as an alternative to reduce costs and to simplify this methodology, in order carry out it in the primary health care to verify the resistance of TB. It was evaluated the accuracy (2X2 table) and agreement (observed agreement and Kappa) between the MP and six variations of NRM: two sources of nitrate (NaNO3 and KNO3); and three different media for solid cultivation (Middlebrook 7H10, Löwenstein-Jensen and Ogawa). The drugs evaluated were: isoniazid (INH), rifampicin (RIF), streptomycin (STR) and ethambutol (EMB); and the tests were conducted with: a strain of Mycobacterium tuberculosis H37Rv (standard sensitivity), four resistant strains (different patterns of resistance to each drug) and twenty-four clinical isolates with unknown antibiotic susceptibility results. Under the studied conditions, excellent reproducibility and agreement was obtained between the original NRM and the MP, confirming that the original NRM is an alternative to antibiogram assays. In the assays carried out with modified MRN (potassium nitrate was substituted by sodium nitrate) it was obtained faster results and full agreement comparing with the results of the MP and the original MRN, indicating that this modified medium could be used in antibiogram assays in the basic care health, since sodium nitrate is a nitrogen source cheaper and more easily obtained. The result of the assays using STR, in all variations of the MRN, indicates that are necessary further evaluation, especially using OG medium. The Middlebrook medium presented recurrent contamination making impossible to carry out analysis. / A Tuberculose (Tb) é uma doença infecto-contagiosa de caráter mundial, sendo que a demora no seu diagnóstico é um dos fatores que intensificam o número de casos da doença. Os métodos de diagnóstico convencionais demandam tempo e possuem custo elevados, dificultando sua implantação nos laboratórios da rede básica de saúde. Entre os métodos de antibiograma se destaca o método de redução de nitrato (MRN), que propicia um resultado mais rápidos (de 7 a 14 dias) que o método das proporções (MP-28 dias), considerado padrão ouro pela Organização Mundial de Saúde. O presente trabalho tem como objetivo, avaliar modificações no método de redução de nitrato (MRN), utilizado para verificação da sensibilidade de cepas de M. tuberculosis aos principais fármacos administrados na terapêutica da Tb, como alternativa de baixo custo e de fácil realização pela rede básica de saúde na verificação da resistência de Tb. No presente estudo, foi avaliada a acuidade (tabela 2X2) e concordância (concordância observada e índice Kappa) entre o MP, e seis variações de MRN, nas quais foram utilizadas duas fontes de nitrato (KNO3 e NaNO3), acrescido a três diferentes meios sólidos de cultivo, Middlebrook 7H10, Lowenstein-Jensen (LJ) e Ogawa (OG). Os fármacos testados foram isoniazida (INH), rifampicina (RIF), estreptomicina (STR) e etambutol (EMB) e os testes foram realizados com cepa de Mycobacterium tuberculosis H37Rv (padrão de sensibilidade), quatro cepas (padrões de resistência diferentes a cada fármaco) e vinte e quatro isolados clínicos com resultado de antibiograma desconhecido. Devido a excelente reprodutibilidade e concordância do MRN original com o MP para os quatro fármacos testados pode-se confirmar que o MRN é uma metodologia alternativa na detecção de isolados de M. tuberculosis resistente aos principais fármacos utilizados na terapêutica da Tb. O resultado de total concordância do MRN modificado pela substituição do nitrato de potássio pelo nitrato de sódio com o MP e com o MRN original para os fármacos RIF, INH e EMB, indica que a modificação é uma ótima alternativa para a rede básica de saúde, visto que a fonte de nitrogênio é de fácil aquisição pelos serviços de saúde. Além disso, mostrou ser mais rápido na liberação dos resultados. Os resultados do fármaco STR, executado em todas as modificações do MRN, indicam a necessidade de avaliações futuras em suas concentrações, principalmente quando utilizado no meio de OG. O meio Middlebrook apresentou freqüentes contaminações em todos os ensaios realizados, não sendo possível realizar sua análise.

O estudo pretendeu abordar a imunidade humoral na Tuberculose. Foi um estudo de teste diagnóstico que avaliou um antígeno específico, constituinte da parede celular da micobactéria, denominado LIPOARABINOMANNAN (LAM), proveniente de Cambridge, MA, USA da Companhia Dyna-Gen. O objetivo principal do estudo foi a detecção de anticorpos IgG anti-LAM em casos de tuberculose pulmonar, extrapulmonar e formas combinadas da doença. A casuística total compreendeu 173 pacientes portadores de tuberculose, sendo a mesma confirmada por métodos bacteriológicos e/ou anatomopatológicos de biópsias de diversos órgãos em 114 casos (65,8%). Em 46 casos (26,5%) a doença se confirmou por rigorosos critérios clínicos, radiológicos e de seguimento após tratamento adequado. Cento e quinze pacientes eram do sexo masculino (66,5%) e 58 do sexo feminino (33,5%). Cento e trinta e um eram brancos (75,7%), 24 negros (13,9%) e 18 mistos (10,4%). O total de formas pulmonares foi de 88 casos (51%), sendo 81 (46,8%) formas bacilíferas e 7 casos (4,0%) não-bacilíferas. Dos casos com baciloscopia direta negativa, 3 apresentaram culturas positivas, 2 culturas negativas e em 2 casos a mesma não foi realizada. Formas extrapulmonares compreenderam 71 casos (41%) com predomínio de forma miliar, ganglionar, pleural e do SNC. A combinação de ambas as formas ocorreu em 14 casos (8,1%). Radiologicamente, houve predomínio de lesões escavadas (30,1%), consolidação (13,9%), padrão miliar (11%) e exame radiológico normal (11%), além de outros achados. Da série, 118 pacientes eram HIV negativos (68,2%) e 55 eram HIV positivos (31,8%). As principais comorbidades associadas foram Diabetes Melittus (DM), Alcoolismo, Cardiopatia e Neoplasia, entre outras. Exames culturais foram realizados em 145 pacientes, sendo que em 72 casos a cultura foi positiva (41,6%) e foi negativa em 10 casos (5,8%). Dos 72 exames culturais positivos, o teste do MycoDot foi positivo em 47 casos (65,2%) e negativo em 25 (34,7%). Em 10 exames culturais negativos, o mesmo foi positivo em 6 casos (60%) e negativo em 4 casos (40%). Em 63 exames culturais não realizados, o teste do MycoDot foi positivo em 46 casos e negativos em 17. Os resultados do teste MycoDot na série total foram: positivos em 120 pacientes (69,4%) e negativos em 53 pacientes (30,6%). As formas pulmonares bacilíferas, não bacilíferas, extrapulmonares e combinadas apresentaram sensibilidade de 74,1%, 85,7%, 63,4% e 64,3% respectivamente. O grupo controle foi de 77 indivíduos assim distribuídos: 41 sadios, 16 portadores de lesões residuais de tuberculose, 6 sadios com BCG prévia, 6 sadios sem BCG prévia e 8 com outras comorbidades. O resultado do teste MycoDot foi negativo em 73 casos (94,8%) e positivo em 4 casos (5,2%). A sensibilidade da casuística total foi de 69,4%, a especificidade foi de 94,8%, o valor preditivo positivo (VPP) foi de 96,8% e o valor preditivo negativo (VPN) foi de 57,9%. Dos pacientes HIV positivos a sensibilidade foi de 61,8% e a especificidade foi de 100%. Nos pacientes HIV negativos a sensibilidade foi de 72,9% e a especificidade foi de 94,7%. Concluiu-se que o Teste MycoDot é de fácil realização, baixo custo, podendo ser útil como uma ferramenta adicional para o diagnóstico da tuberculose. / This study evaluated the humoral immunity in tuberculosis. It was a study of diagnostic test using a specific antigen, designed Lipoarabinomannan (LAM) provenient of Cambridge, MA, USA, Dyna-Gen Company. This antigen is a cell wall component of mycobacteria. The major objective was to study anti-LAM IgG antibodies in cases of pulmonary, extrapulmonary and associated forms of tuberculosis. The casuistic was 173 patients with tuberculosis, confirmed by bacteriologic and/or anatomopathologic methods in 114 cases (68,8%). In the other cases, the tuberculosis was confirmed by clinical, radiological features and follow up of the patients after chemoterapy. The series presented 115 males, 58 females; 131 was caucasian, 24 black and 18 was non-caucasian. The total pulmonary forms was 88 cases (51%), 81 with positive AFB in sputum and 7 with negative AFB in sputum. Three have positive culture, two with negative cultures. Extrapulmonary tuberculosis was found in 71 cases (41%). The predominant forms of X-ray of the thorax was miliar and necrositing lesions. HIV-positive patients were 118 and negative 55. The MycoDot test results were: positive in 120 patients (69,4%) and negative in 53 patients (30,6%). In control group, MycoDot was negative in 73 cases (94,8%) and positive in 4 cases (5,2%). The final results were: sensitivity of 69,4%, specificity of 94,8%, the positive predictive value was 96,8% and the negative predictive value was 57,9%. In HIV-positive patients, the sensibility was 61,8% and the specificity was 100%. The conclusions were the MycoDot test is easy and ideal for use in the diagnosis of active tuberculosis in conjunction with the other methods.

INTRODUÇÃO: A tuberculose é um problema grave de saúde pública, acometendo indivíduos em todas as faixas etárias e em todos os estratos socioeconômicos. Apesar de estarem sob grande risco de adoecimento, as crianças carecem de meios diagnósticos sensíveis e específicos. Neste estudo avaliou-se em crianças a acurácia de um teste baseado na dosagem de interferon-gama liberado por linfócitos após estímulo com antígenos específicos do Mycobacterium tuberculosis (QuantiFERON-TB Gold In Tube® [Cellestis, Carnegie, Austrália] ).MÉTODO: Foram incluídas no estudo 184 crianças não infectadas e 11 crianças com infecção pelo Mycobacterium tuberculosis. Todas as crianças receberam previamente o BCG. Foram excluídas crianças com comprometimento do sistema imunológico. Obteve-se amostra de sangue de cada criança, e o material foi processado conforme as instruções do laboratório fabricante. O desempenho do teste foi avaliado pela construção de uma curva de características operacionais (ROC). RESULTADOS: Do total de 184 crianças sem infecção pela micobatéria, 74 (40,2%) eram do sexo feminino, e 130 (70,6%) tinham menos de quatro anos de idade. A idade média neste grupo foi de 35 meses. Seis (3,2%) crianças apresentaram resultado indeterminado do teste, uma criança (0,5%) apresentou um resultado positivo e 177 (96,2%) apresentaram resultado negativo. No grupo de 11 crianças infectadas, sete (63,0%) eram meninas, e a idade média era de 58,5 meses. Duas (18,0%) crianças neste grupo apresentaram resultado negativo do teste. A curva ROC obtida evidenciou uma área sob a curva de 0,876 (I. C 95% - 0,82 a 0,92; p<0,001), refletindo o desempenho preditivo elevado do teste. A sensibilidade do teste foi de 81,8% (IC 95% - 48,2% a 97,2%) e a especificidade de 98,8% (IC 95% - 96,0 a 99,8%), o valor preditivo positivo foi de 81,8% (IC 95%: 46,3% a 97,4%) e o valor preditivo negativo foi de 98,9% (IC 95%: 96,0% a 99,8%). CONCLUSÕES: Neste estudo o teste mostrou ter uma boa acurácia no diagnóstico da infecção pelo Mycobaterium tuberculosis em crianças previamente vacinadas com o BCG, e sua utilização rotineira pode contribuir para a melhor avaliação de crianças expostas a um doente bacilífero e na tomada de decisões sobre a introdução de quimioprofilaxia ou tratamento. / BACKGROUND: Tuberculosis is a major public health problem, affecting people from all ages and diverse socioeconomic incomes. Despite the high risk that children have to develop the disease, accurate methods for diagnosis are not yet available. In this study the accuracy of an interferon-gamma release assay (QuantiFERON-TB Gold In Tube® [Cellestis, Carnegie, Australia]) was evaluated for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in children. METHODS: 195 children were evaluated, 184 children without mycobacterial infection, and 11 children infected by the Mycobacterium tuberculosis. All the children had been previously vaccinated with BCG. Immunocompromised children were excluded from the study. A blood sample was obtained from each child, and it was processed according the manufacturer´s instructions. The performance of the assay was evaluated by a receiver operating characteristic (ROC) curve. RESULTS: In the group of 184 noninfected children, 74 (40.2%) were female and 130 (70.6%) were younger than four years old. The mean age in this group was 35 months. Six children (3.2%) had indeterminate test result, one child (0.5%) had a positive test result, and 177 (96.2%) children had negative test results. In the group of 11 infected children, seven (63.0%) were female, and the mean age in this group was 58.5 months. Two children (18.0%) in this group had a negative test result. The ROC curve determined an area under the curve of 0.876 (95% CI 0.82 to 0.92; p< 0.001), disclosing a high positive predictive value for the test. The assay sensibility was 81.8% (95% CI, 48.2% to 97.2%) and the assay specificity was 98.8% (95% CI, 96.0% to 99.8%), the positive predictive value was 81.8% (95% CI: 46.3% to 97.4%) and the negative predictive value was 98.9% (95% CI: 96.0% to 99.8%). CONCLUSIONS: In this study, the accuracy of the assay was high for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in children previously vaccinated with BCG. The use of this assay for the routine evaluation of children exposed to the disease may help physicians to decide on whether to start chemoprophylaxis or tuberculosis treatment.

INTRODUÇÃO: A tuberculose é um problema grave de saúde pública, acometendo indivíduos em todas as faixas etárias e em todos os estratos socioeconômicos. Apesar de estarem sob grande risco de adoecimento, as crianças carecem de meios diagnósticos sensíveis e específicos. Neste estudo avaliou-se em crianças a acurácia de um teste baseado na dosagem de interferon-gama liberado por linfócitos após estímulo com antígenos específicos do Mycobacterium tuberculosis (QuantiFERON-TB Gold In Tube® [Cellestis, Carnegie, Austrália] ).MÉTODO: Foram incluídas no estudo 184 crianças não infectadas e 11 crianças com infecção pelo Mycobacterium tuberculosis. Todas as crianças receberam previamente o BCG. Foram excluídas crianças com comprometimento do sistema imunológico. Obteve-se amostra de sangue de cada criança, e o material foi processado conforme as instruções do laboratório fabricante. O desempenho do teste foi avaliado pela construção de uma curva de características operacionais (ROC). RESULTADOS: Do total de 184 crianças sem infecção pela micobatéria, 74 (40,2%) eram do sexo feminino, e 130 (70,6%) tinham menos de quatro anos de idade. A idade média neste grupo foi de 35 meses. Seis (3,2%) crianças apresentaram resultado indeterminado do teste, uma criança (0,5%) apresentou um resultado positivo e 177 (96,2%) apresentaram resultado negativo. No grupo de 11 crianças infectadas, sete (63,0%) eram meninas, e a idade média era de 58,5 meses. Duas (18,0%) crianças neste grupo apresentaram resultado negativo do teste. A curva ROC obtida evidenciou uma área sob a curva de 0,876 (I. C 95% - 0,82 a 0,92; p<0,001), refletindo o desempenho preditivo elevado do teste. A sensibilidade do teste foi de 81,8% (IC 95% - 48,2% a 97,2%) e a especificidade de 98,8% (IC 95% - 96,0 a 99,8%), o valor preditivo positivo foi de 81,8% (IC 95%: 46,3% a 97,4%) e o valor preditivo negativo foi de 98,9% (IC 95%: 96,0% a 99,8%). CONCLUSÕES: Neste estudo o teste mostrou ter uma boa acurácia no diagnóstico da infecção pelo Mycobaterium tuberculosis em crianças previamente vacinadas com o BCG, e sua utilização rotineira pode contribuir para a melhor avaliação de crianças expostas a um doente bacilífero e na tomada de decisões sobre a introdução de quimioprofilaxia ou tratamento. / BACKGROUND: Tuberculosis is a major public health problem, affecting people from all ages and diverse socioeconomic incomes. Despite the high risk that children have to develop the disease, accurate methods for diagnosis are not yet available. In this study the accuracy of an interferon-gamma release assay (QuantiFERON-TB Gold In Tube® [Cellestis, Carnegie, Australia]) was evaluated for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in children. METHODS: 195 children were evaluated, 184 children without mycobacterial infection, and 11 children infected by the Mycobacterium tuberculosis. All the children had been previously vaccinated with BCG. Immunocompromised children were excluded from the study. A blood sample was obtained from each child, and it was processed according the manufacturer´s instructions. The performance of the assay was evaluated by a receiver operating characteristic (ROC) curve. RESULTS: In the group of 184 noninfected children, 74 (40.2%) were female and 130 (70.6%) were younger than four years old. The mean age in this group was 35 months. Six children (3.2%) had indeterminate test result, one child (0.5%) had a positive test result, and 177 (96.2%) children had negative test results. In the group of 11 infected children, seven (63.0%) were female, and the mean age in this group was 58.5 months. Two children (18.0%) in this group had a negative test result. The ROC curve determined an area under the curve of 0.876 (95% CI 0.82 to 0.92; p< 0.001), disclosing a high positive predictive value for the test. The assay sensibility was 81.8% (95% CI, 48.2% to 97.2%) and the assay specificity was 98.8% (95% CI, 96.0% to 99.8%), the positive predictive value was 81.8% (95% CI: 46.3% to 97.4%) and the negative predictive value was 98.9% (95% CI: 96.0% to 99.8%). CONCLUSIONS: In this study, the accuracy of the assay was high for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in children previously vaccinated with BCG. The use of this assay for the routine evaluation of children exposed to the disease may help physicians to decide on whether to start chemoprophylaxis or tuberculosis treatment.

Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010 / A tuberculose é uma doença infecciosa grave causada pelo Mycobacterium tuberculosis, podendo acometer todos os órgãos, mas em especial os pulmões. Apresenta grande incidência no mundo e ocorre em maior proporção em populações de baixas condições socioeconômicas. A tuberculose continua sendo uma das doenças crônicas mais importantes da história da humanidade, sobretudo nas áreas mais carentes do mundo com grandes repercussões sociais, pois acomete, predominantemente, a população adulta e produtiva. As estratégias de vigilância e controle da tuberculose incluem fundamentalmente o diagnóstico extemporâneo da doença, o tratamento e acompanhamento dos casos confirmados. O diagnóstico precoce constitui um dos principais problemas, pois, atualmente não há disponíveis testes rápidos, adequados e confiáveis para o diagnóstico em condições de campo e ambulatoriais. Diante disto, este trabalho realizou uma análise comparativa entre os testes sorológicos ELISA com antígenos brutos de PPD e de BCG e o teste imunocromatográfico Hexagon TB com o antígeno determinado A60 para o diagnóstico da tuberculose. Devido a características imunogênicas dos antígenos e da composição da prevalência da doença, a reprodutibilidade do ELISA-BCG foi baixa, bem como os parametros sorológicos de sensibilidade (33 por cento) e especificidade (61 por cento), comprometendo assim, a identificação entre pacientes clinicamente sadios e doentes. Os resultados também mostraram que o kit comercial Hexagon TB possui elevada acurácia (87,5 por cento) e é o mais indicado ao diagnóstico da tuberculose, pois identificou melhor os indivíduos com tuberculose e os indivíduos sadios. / Tuberculosis is a serious infectious disease caused by Mycobacterium tuberculosis, it can affect all organs, especially the lungs. It shows a higher incidence in the world and occurs more often in populations of low socioeconomic conditions. Tuberculosis remains one of the most important chronic diseases in human history, especially in more deprived areas of the world with great social impact, since it affects predominantly adult and productive population. Strategies for surveillance and control of tuberculosis include primarily the belated diagnosis of the disease, the treatment and monitoring the confirmed cases. Early diagnosis is a major problem, since there are no rapid, suitable or reliable tests available for diagnosis in field conditions and outpatients. Thus, this study conducted a comparative analysis of the serological ELISA with crude antigens PPD and BCG and Hexagon TB immunochromatographic test with antigen A60 specific for the diagnosis of tuberculosis. Due to the characteristics of immunogenic antigens and the composition of the desease's prevalence of the, the reproducibility of the ELISA, was low, as well as serological parameters of sensitivity (33%) and specificity (61%), thus compromising the identification between healthy and sick patients. The results also showed that the commercial kit TB Hexagon has high accuracy (87,5%) and is better suited for the diagnosis of tuberculosis, because it identified better the healthy and the sick individuals.