Existen muy pocos datos sobre la incidencia de hongos toxicogénicos en uvas cultivadas en Sudamérica. Los estudios realizados son orientados principalmente a la determinación de especies potenciales productoras de OTA, principal micotoxina regulada en vinos a nivel mundial. Así mismo, es escasa la información sobre la incidencia de otras especies toxicogénicas y sus toxinas en uvas, jugos y vinos de la región. El objetivo de la investigación consistió en aislar e identificar hongos potencialmente toxicogénicos de uvas cultivadas en la provincia de Río Negro, Argentina y determinar la capacidad toxicogénica de los mismos. Se analizaron 10 muestras de uvas de variedad Malbec de los viñedos de las localidades de Villa Azul y Maiqué en la Provincia de Río Negro. Se aislaron 441 cepas de hongos, de los cuales el 40.8% pertenece al género Penicillium y el 21.8% al género Alternaria. Se realizó la identificación a nivel grupo-especie de los aislamientos pertenecientes éstos géneros. Se obtuvieron 85 aislamientos pertenecientes al género Alternaria, de los cuales 5 pertenecían al grupo-especie A. alternata, 5 al grupo-especie A. arborescens y 75 al grupo-especie A. tenuissima. Así mismo, se determinaron los perfiles de producción (AOH, AME y AT) de los aislamientos, encontrándose que todos produjeron al menos una toxina y el 66% produjeron tres toxinas. Del mismo modo, se identificaron 43 cepas de Penicillium expansum, evaluándose la capacidad de producir patulina, resultando todos productores de la toxina en medio de cultivo. Todos los aislamientos produjeron la lesión característica al ser inoculados en manzanas y el 95% produjo patulina en este sustrato. La alta incidencia de especies toxicogénicas de Alternaria y de Penicillium expansum en uvas de la región patagónica representa un riesgo que debe ser evaluado. No se encontraron cepas del género Aspergillus, lo que permitiría inferir que esta región presenta una ventaja competitiva, ya que el riesgo toxicológico atribuible a la presencia de OTA en los vinos estaría muy disminuido y al ser esta la única micotoxina regulada a nivel global, es de interés que los productos de la región cumplan con los estándares internacionales de calidad. La metodología desarrollada en el presente trabajo podría ser aplicada para determinar el potencial riesgo de contaminación con micotoxinas de uvas y subproductos en países de Sudamérica, como el Perú, donde existen escasos datos sobre dicha contaminación.

Tesis para optar al grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias Mención Sanidad Vegetal / Botrytis cinerea produce importantes pérdidas en uva de mesa en Chile. En el control químico de este patógeno se utiliza entre otras moléculas a boscalid, carboxamida que actúa inhibiendo la enzima succinato deshidrogenasa. En aislados de Botrytis recolectados de cultivos sometidos a un uso intensivo del fungicida, se ha demostrado la asociación entre la pérdida de sensibilidad con mutaciones en el gen sdhB, en donde se han identificado las mutaciones P225F/L/T y N230I asociadas a aislados resistentes y en mayor frecuencia las mutaciones H272R/Y/L asociadas a aislados resistentes y moderadamente resistentes. Durante las últimas dos temporadas (2011-2012 y 2012- 2013), en la zona Central de Chile, se ha reportado una baja sensibilidad a boscalid. El objetivo de la presente investigación fue determinar la presencia de mutaciones en el gen sdhB en aislados chilenos de Botrytis cinerea de distinto nivel de sensibilidad a boscalid. Con este propósito, 50 aislados monoconidiales fueron caracterizados genética y fenotípicamente. Para la caracterización fenotípica se verificó la sensibilidad a boscalid mediante evaluación del comportamiento de germinación conidial, determinándose 4 categorías según valores EC50: Sensible (S) (>0,05-1,37μg.mL-1), Levemente Resistente (LR) (1,38-7,80μg.mL-1), Moderadamente Resistente (MR) (7,81-50μg.mL-1) y Resistente (R) (>50μg.mL-1). Aislados R y MR con mutaciones se compararon con sensibles, según parámetros como: crecimiento miceliar, esporulación, sensibilidad osmótica, capacidad formadora de esclerocios y virulencia. La detección de mutaciones se realizó mediante la técnica PCR-PIRA (Primer-Introduced Restriction Enzyme Analyses) y el uso de partidores específicos H272Y/R-fw y H272- rev, cuyos productos fueron digeridos con las enzimas de restricción EcoRV y HhaI respectivamente. Los aislados de Botrytis cinerea mostraron niveles de sensibilidad a boscalid variables entre 0,13 μg.mL-1 (S) y 1,1*109 μg.mL-1 (R). La utilización del PCR-PIRA, permitió identificar las mutaciones H272Y/R en el gen sdhB que resultaron ser inespecíficas de un determinado nivel de sensibilidad a boscalid. De acuerdo a los parámetros de adaptabilidad evaluados tales como crecimiento miceliar, capacidad formadora de esclerocios y esporulación de aislados resistentes con mutaciones H272Y/R respecto de los sensibles fueron significativamente diferentes (p<0,05), lo cual implicaría que las mutaciones detectadas y asociadas a la resistencia a boscalid generarían un costo metabólico en los aislados de Botrytis. / Botrytis cinerea produces serious losses in table grapes in Chile. In the chemical control of this pathogen is used among other molecules like boscalid, carboxamide that inhibits the succinate dehydrogenase enzyme. Botrytis isolates collected from different crops subjected to intensive fungicide application has shown an association between sensitivity loss and mutations in the sdhB gene, where P225F/L/T and N230I mutations have been identified in resistant isolates and most frequently mutations like H272R/Y/L on moderately resistant and resistant isolates. During the past two seasons (2011-2012 and 2012-2013) in the central Chile, has reported a low sensitivity to boscalid. The objective of this research was determine the mutations presence in the sdhB gene of Botrytis cinerea isolates with different sensitivity levels to boscalid. For this purpose, 50 monoconidial isolates were characterized genetically and phenotypically. For phenotypic characterization was verified the sensitivity to boscalid by conidial germination, were classified into four resistance phenotypes based on the EC50 values them: Sensitive (S) (>0.05-1.37 μg.mL-1), Low resistant (LR) (1.38-7.80 μg.mL-1), moderately resistant (MR) (7.81-50μg.mL-1) and resistant (R) (>50μg.mL-1). Isolate R and MR with mutations were compared with sensitive isolates, with parameters such as mycelial growth, sporulation, osmotic sensitivity, sclerotia production and virulence. Mutations detection was performed by PIRA-PCR (Primer- Introduced Restriction Enzyme Analyses) with specific primers H272-rev H272Y/R-fw whose products were digested with restriction enzymes EcoRV and HhaI respectively. Botrytis cinerea isolates showed different sensitivity levels between 0.13 μg.mL-1 boscalid (S) and 1.1*10-9 μg.mL-1 (R). The PIRA-PCR method has detected H272Y/R mutations, none were specific a sensitivity level to boscalid. According to adaptability parameters evaluated such as mycelial growth, sclerotia production and sporulation of resistant isolates with mutations H272Y/R compare with sensitive were significantly different (p <0.05), which imply that the mutations detected generate a metabolic cost in Botrytis cinerea isolates to boscalid.

Memoria para optar al título profesional de: Ingeniero Agrónomo Mención: Sanidad Vegetal / En el presente estudio, se evaluó la efectividad de distintos fungicidas en el control de Botrytis cinerea, aplicados antes y con posterioridad a un periodo de infección en uva de mesa cv. Thompson seedless. Para ello se realizaron ensayos durante la temporada 2006 – 2007, en época de floración y pre cosecha en dos parronales de vid, ubicados en la región de Valparaíso y región Metropolitana, donde los racimos de uva fueron asperjados con suspensiones conidiales de B. cinerea. El ensayo evaluó 9 fungicidas, en dos épocas de aplicación. En floración se utilizó: boscalid + pyraclostrobin, tebuconazole, iprodione, pyrimethanil, kresoxim-methyl, cyprodinil + fludioxonil, fenexamid, testigo inoculado y un testigo absoluto y en pre cosecha se usó: boscalid + pyraclostrobin, citrex (11% p/p) + caolín, iprodione, iprodione + azufre, cyprodinil + fludioxonil, fenhexamid, fenhexamid + azufre, un testigo inoculado y un testigo absoluto. Para ambas épocas de aplicación se consideraron 5 periodos de aplicación. Floración: 24 horas antes de la inoculación, 1, 24, 36 y 48 horas después de la inoculación. Pre cosecha: 24 horas antes de la inoculación, 1, 12, 24 y 36 horas después de la inoculación. La fruta fue almacenada en frigorífico comercial y todos los tratamientos fueron evaluados en postcosecha. En época de Floración los fungicidas cyprodinil + fludioxonil (Switch 62,5 WP), kresoxim-methyl (Stroby SC), iprodione (Rovral 4 Flo), pyrimethanil (Scala 40 SC) y tebuconazole (Horizon 25% WP) fueron los que mejor controlaron la pudrición gris respecto al testigo inoculado, no existiendo diferencias significativas entre ellos. En cuanto al periodo de aplicación no existieron diferencias significativas para ninguno de los tratamientos después de un almacenamiento a 0°C. Los fungicidas aplicados en pre cosecha que mejor controlaron la enfermedad después de ser almacenada a 0°C fueron cyprodinil + fludioxonil (Switch 62,5 WG), fenhexamid (Teldor 50 WP), fenhexamid + azufre (Teldor Dust-s) e iprodione (Rovral 4 Flo) para ambos campos. Los periodos de aplicación fueron irrelevantes en este ensayo, para ambas épocas de aplicación, ya que no existieron diferencias significativas en los porcentajes de inhibición en los tratamientos. En cuanto a la inoculación con Botrytis cinerea esta no fue efectiva en ninguna época de aplicación. / The efficiency of different fungicides in the control of gray mold of grapes, applied before or after a simulated infection period, was evaluated on Thompson Seedlees grapes. The trials were conducted in the 2006 – 2007 season, in two commercial table grape vineyards located in Valparaiso and Metropolitan regions, where the grapes were sprayed with a conidial suspension of Botrytis cinerea. The study evaluated nine fungicides applied at bloom or before harvest: In bloom the fungicides boscalid + pyraclostrobin, tebuconazole, iprodione, pyrimethanil, kresoxim-methyl, cyprodinil + fludioxonil, fenexamid, were used and compared with an inoculated control and absolute control treatments; Before harvest the fungicides boscalid + pyraclostrobin, citrex (11% w/w) + kaolin, iprodione, iprodione + sulfur, cyprodinil + fludioxonil, fenhexamid, fenhexamid + sulfur were compared with an inoculated control and an absolute control. At both phenological stages, five fungicide application times were tested. At flowering, the fungicides were sprayed 24 hours before inoculation and 1, 24, 36 and 48 hours after inoculation. Pre harvest fungicide applications were made 24 hours before inoculation and 1, 12, 24 and 36 hours after inoculation. The fruit was harvested and stored in commercial cold storage facilities and all treatments were evaluated in postharvest. At bloom the fungicides cyprodinil + fludioxonil (Switch 62.5 WP), Kresoxim-methyl (Stroby SC), iprodione (Rovral 4 Flo), pyrimethanil (Scala 40 SC) and tebuconazole (Horizon 25% WP), reduced postharvest gray rot compared to the control treatments, without differences between them. The time of application did not affect the development of gray rot after cold storage. Fungicides sprayed at pre harvest with the highest efficacy were cyprodinil + fludioxonil (Switch 62.5 WG), fenhexamid (Teldor 50 WP), fenhexamid + sulfur (Teldor Dust) and iprodione (Rovral 4 Flo) in both vineyards. Application times were irrelevant in this trial, The inoculation with a conidial suspension of Botrytis cinerea was not effective at any time of application.

Memoria para optar al título de Ingeniero en Alimentos / La uva de mesa es una de las principales especies frutales en Chile, ya que es uno de los mayores exportadores a nivel mundial y líder en el hemisferio sur. La principal enfermedad que ha afectado en Chile a la uva ha sido la Pudrición Gris, pero una nueva patología de la vid denominada "Pudrición ácida" ha aparecido progresivamente en la zona centro-norte. La etiología de esta fitopatología indica que los responsables serían hongos, levaduras y bacterias acéticas, sin haber determinado los roles y mecanismos de acción de estos microorganismos. En un estudio realizado en el INTA (Instituto de Nutrición y Tecnologia de los Alimentos), se encontró presencia de bacterias acéticas en un 52% de las uvas enfermas y se obtuvieron recuentos bajos de hongos filamentosos fitopatógenos en uvas enfermas, sugiriendo revisar las teorías sobre un origen principalmente fungoso. Luego, se investigó acerca de la asociación de las principales especies de acetobacterias, obteniéndose un predominio de Acetobacter aceti, con un 71% de presencia en uvas enfermas. Hasta el momento no se dispone de tratamientos eficaces que eviten el desarrollo de la pudrición ácida. Por eso, es que en el presente estudio se busca un método alternativo, amigable con el medio ambiente denominado “control biológico”. Para ello se seleccionaron un grupo de 42 cepas provenientes de la microbiota natural de vides, potenciales biocontroles por tener actividad inhibitoria contra BGA (Bacillus subtilis) y Escherichia coli. De estas, hubo 14 que manifestaron cierta propiedad antágonica contra sobre las bacterias acéticas. No se encontró actividad inhibitoria en el sobrenadante libre de células de los biocontroles, lo que sugiere que el principal mecanismo de acción de antagonismo, no sería la producción de metabolitos antibióticos. En las cepas potenciales biocontroles, no se halló un nivel importante de resistencia a antibióticos (solamente resistencia a la ampicilina y la eritromicina en 3 cepas); encontrándose presencia de plásmidos en 4 cepas (ninguno relacionado con el desarrollo de un cuadro de multidrogo-resistencia); y siendo todos los biocontroles pertenecientes al género Bacillus con predominio de Bacillus circulans y licheniformis / The table grape is one of the main fruit species in Chile, since it is one of the greater exporters of this fruit at world-wide level and leader in the South hemisphere. The main disease that has affected in Chile the grape has been the Grey Mold, but a new pathology denominated “Sour rot” has progressively appeared in the center-north zone. The etiology of this pathology indicates that “Sour rot” would be caused by yeasts, molds and acetic bacterias, without to have determined the roles and mechanisms of action of these microorganisms. In a study carried out in the INTA, presence of acetic bacteria in a 52% of the sick grapes was found and low recounts of filamentous molds were obtained in sick grapes, suggesting revising the theories on a mainly fungous origin. Then, thet investigated about the association of the main species of acetobacterias, being obtained that dominated Acetobacter aceti, with a 71% of presence in sick grapes. Until now there aren´t completely effective treatments that controls the development of the sour rot. For that reason, the present study looks for an alternative method, friendly with environment denominated “biological control”. Therefore, was selected a group of 42 environmental strains native of grapevines, potentials biocontrols with inhibiting activity against BGA (Bacillus subtilis) and Escherichia coli. Of these, there were 14 that showed certain antagonistic activity against the acetic bacterias. It wasn´t detected inhibiting activity in the cell-free supernadant, which suggests the main mechanism of antagonism action; it would not be the production of antibiotic metabolites. In the 14 potential biocontrols strains was not found an important presence of resistance to antibiotics (only resistance to the ampiciline and the eritromicine in 3 strains); there was presence of plasmids in 4 strains (not related to the development of a multidrug resistance); and all biocontrols belonged to the genus Bacillus with predominance of Bacillus circulans and Bacillus licheniformis

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención Fruticultura / La Producción Integrada de Fruta (PIF) es un sistema de producción que permite obtener fruta de alta calidad, asegurando una mayor protección del ambiente y la salud humana. En Europa, se ha adoptado en forma creciente este sistema de producción que considera las exigencias de los consumidores, como calidad, productos sanos y producidos bajo sistemas amigables con el medio ambiente y la salud de los trabajadores. En este trabajo, con el objetivo de determinar la factibilidad de implementar la producción integrada en uva de mesa en el Valle de Copiapó se diseñaron sistemas de Producción Integrada para dos parronales, de las variedades Flame Seedless y Thompson Seedless. Se evalúo el efecto de la aplicación de los sistemas integrados sobre la producción y calidad de la uva durante un año. Los Sitios Integrados de Prueba, que fueron manejados de acuerdo a la Producción Integrada se diferenciaron del manejo tradicional principalmente en los siguientes aspectos: se utilizó pesticidas que se encuentran aceptados en la PI y su aplicación se basó en un monitoreo del nivel de las plagas y enfermedades.

En el cultivo de la vid, se reporta a Botrytis cinerea Pers como el hongo patógeno causante de lesiones cancrosas, necrosamiento de brotes y racimos de flores, y pudrición de frutos y semillas, que ocasionan grandes pérdidas económicas a los agricultores. El control de este patógeno se realiza hasta nuestros días con sustancias de origen químico: plaguicidas; los cuales son aplicados al follaje, a las semillas y al suelo, ocasionando problemas en el ambiente. En el presente trabajo, se colectaron 56 muestras de hojas de vid, infectadas con Botrytis cinerea Pers, en un viñedo del caserío La Huaca, en el distrito de San Benito, provincia de Contumaza, departamento de Cajamarca, durante el verano del 2006; de las cuales se aislaron e identificaron 12 cepas de Trichoderma viride. En la evaluación de la actividad antagonista de las 12 cepas de T. viride sobre B. cinerea mediante el método Precolonizado de Placas a 24° C y 28° C, se seleccionó a las cinco cepas: CH-13, CH-25, CH-30, CH-38 y CH-52 que presentaron los mayores porcentajes de área ocupada sobre el patógeno. Estas cepas presentaron actividad antagonista del tipo micoparasitismo, observándose enrollamiento y penetración de las hifas de las cepas de T. viride sobre las hifas de B. cinerea. De las cinco cepas seleccionadas de T. viride, la cepa CH-30 presentó el mayor porcentaje de área ocupada sobre B. cinerea a 24° C y 28° C con un 54.67% y 98% respectivamente. Por los resultados obtenidos, las cinco cepas nativas de Trichoderma viride pueden ser consideradas como una alternativa ecológica para su evaluación como agentes potenciales de control biológico del patógeno B. cinerea. / --- In the culturing of grapevine, there is reported Botrytis cinerea Pers as the fungus pathogenic causative of canker injuries, necrotizing of outbreaks and clusters of flowers, and rotting of fruits and seeds, which cause big economic losses to the farmers. The control of this pathogenic is realized actually by substances of chemical origin: pesticides; which are applied to the foliage, to the seeds and to the soil, causing environment problems. In this present work, there were collected 56 samples of leaves of grapevine, infected with Botrytis cinerea Pers, in a vineyard of The Huaca hamlet, in San Benito district, Contumaza province, Cajamarca department, during the summer of 2006; from these ones, there were isolated and identified 12 strains of Trichoderma viride. In the evaluation of the antagonist activity of these 12 strains of T. viride on B. cinerea by the method of Plates pre-colonized in 24° C and 28 °C, was selected five strains: CH-13, CH-25, CH-30, CH-38 and CH-52 that presented the major percentages of occupied area over the fungus pathogenic. These strains showed antagonist activity of mycoparasitism kind, being observed rolling and penetration of mycelium of T. viride strains on the mycelium of B. cinerea. From 5 T. viride strains selected, the CH-30 one showed the major percentage of occupied area on B. cinerea in 24° C and 28 °C with 54.67% and 98% respectively. For the results obtained, five native strains of Trichoderma viride can be considered as an ecological alternative for its evaluation as potential agents of biological control of the pathogenic B. cinerea.

En el cultivo de la vid, se reporta a Botrytis cinerea Pers como el hongo patógeno causante de lesiones cancrosas, necrosamiento de brotes y racimos de flores, y pudrición de frutos y semillas, que ocasionan grandes pérdidas económicas a los agricultores. El control de este patógeno se realiza hasta nuestros días con sustancias de origen químico: plaguicidas; los cuales son aplicados al follaje, a las semillas y al suelo, ocasionando problemas en el ambiente. En el presente trabajo, se colectaron 56 muestras de hojas de vid, infectadas con Botrytis cinerea Pers, en un viñedo del caserío La Huaca, en el distrito de San Benito, provincia de Contumaza, departamento de Cajamarca, durante el verano del 2006; de las cuales se aislaron e identificaron 12 cepas de Trichoderma viride. En la evaluación de la actividad antagonista de las 12 cepas de T. viride sobre B. cinerea mediante el método Precolonizado de Placas a 24° C y 28° C, se seleccionó a las cinco cepas: CH-13, CH-25, CH-30, CH-38 y CH-52 que presentaron los mayores porcentajes de área ocupada sobre el patógeno. Estas cepas presentaron actividad antagonista del tipo micoparasitismo, observándose enrollamiento y penetración de las hifas de las cepas de T. viride sobre las hifas de B. cinerea. De las cinco cepas seleccionadas de T. viride, la cepa CH-30 presentó el mayor porcentaje de área ocupada sobre B. cinerea a 24° C y 28° C con un 54.67% y 98% respectivamente. Por los resultados obtenidos, las cinco cepas nativas de Trichoderma viride pueden ser consideradas como una alternativa ecológica para su evaluación como agentes potenciales de control biológico del patógeno B. cinerea. / In the culturing of grapevine, there is reported Botrytis cinerea Pers as the fungus pathogenic causative of canker injuries, necrotizing of outbreaks and clusters of flowers, and rotting of fruits and seeds, which cause big economic losses to the farmers. The control of this pathogenic is realized actually by substances of chemical origin: pesticides; which are applied to the foliage, to the seeds and to the soil, causing environment problems. In this present work, there were collected 56 samples of leaves of grapevine, infected with Botrytis cinerea Pers, in a vineyard of The Huaca hamlet, in San Benito district, Contumaza province, Cajamarca department, during the summer of 2006; from these ones, there were isolated and identified 12 strains of Trichoderma viride. In the evaluation of the antagonist activity of these 12 strains of T. viride on B. cinerea by the method of Plates pre-colonized in 24° C and 28 °C, was selected five strains: CH-13, CH-25, CH-30, CH-38 and CH-52 that presented the major percentages of occupied area over the fungus pathogenic. These strains showed antagonist activity of mycoparasitism kind, being observed rolling and penetration of mycelium of T. viride strains on the mycelium of B. cinerea. From 5 T. viride strains selected, the CH-30 one showed the major percentage of occupied area on B. cinerea in 24° C and 28 °C with 54.67% and 98% respectively. For the results obtained, five native strains of Trichoderma viride can be considered as an ecological alternative for its evaluation as potential agents of biological control of the pathogenic B. cinerea.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / El control de enfermedades de poscosecha es una problemática constante en la producción de uva de mesa, siendo Botrytis cinerea y Penicillium expansum, dos de los patógenos más importantes. El cuestionamiento a la cantidad máxima de residuos de agroquímicos permitidos en la fruta en los mercados de destino y la acotada cantidad de fungicidas disponibles en el mercado, han llevado a la búsqueda de alternativas a los fungicidas sintéticos, la cual se ha enfocado a productos naturales, amigables con el medio ambiente y libres de residuos. El principal objetivo de este estudio fue evaluar la actividad de 15 extractos de macrohongos en el control de ambos patógenos. Los macrohongos fueron colectados desde su ambiente natural, posteriormente secados, triturados y macerados en alcohol al 95%, y los extractos resultantes fueron utilizados en bioensayos de inhibición in vitro e in vivo. Para el control in vitro se enmendó agar papa dextrosa con cada extracto en etanol al 1% donde se sembró micelio y conidias de los patógenos. El control in vivo se realizó sobre bayas de uva de mesa del cv. Red Globe sometidas o no a desinfección previa con NaClO (0,5%). A las bayas se les realizó una herida y luego se aplicaron los extractos 1 y 24 horas antes de la inoculación con conidias de los patógenos. Los extractos con mayor efectividad inhibitoria in vitro del crecimiento miceliar de B. cinerea fueron Suillus luteus, Agarical sp. y Amanita sp. los que inhibieron en un 92,9, 71,0 y 69,4%, respectivamente. Para el control in vitro de P. expansum los dos extractos que tuvieron un mayor efecto fueron los de Agarical sp. y Agaricus arvensis con un 35,3 y 34,6% de inhibición del crecimiento miceliar, respectivamente. Los extractos con mayor efectividad en la inhibición de la germinación de conidias fueron: Agarical sp. y Macrolepiota rhacodes, para B. cinerea, y Agaricus arvensis y Laetiporus sulphureus para P. expansum. En el control in vivo solo el extracto de Amanita sp. tuvo un efecto en la inhibición de la pudrición causada por B. cinerea sobre las bayas, aplicado 24 horas antes de la inoculación, e igualmente en bayas sin desinfectar inoculadas con P. expansum. / Postharvest rots of table grapes are a constant problem for the industry with Botrytis cinerea and Penicillium expansum as the most important pathogens. Restrictions on the maximum amount of pesticide residues allowed on the fruit, and the limited number of fungicides registered in the markets have prompted the look for alternatives to the traditional chemical fungicides, focusing mainly on natural products environmentally friendly and free from residue restrictions. This study was aimed to evaluate the activity of 15 extracts of mushrooms in the control of both pathogens. The mushrooms were collected from their natural sources, dried, grounded and macerated in ethanol 95%, and the extracts obtained were evaluated in vitro and in vivo. Potato dextrose agar media was amended with the ethanol extracts at a rate of 1%, for the in vitro tests with mycelia or conidia of the pathogens. In vivo assays were conducted on Red Globe berries that were surface disinfected with NaOCl (0,5 %) or not disinfected at all. The berries were wound inoculated with a spore suspension of each pathogen 1 or 24 hours after the extracts treatments. The extracts that gave the greatest inhibition of the mycelial growth of B. cinerea were those of Suillus luteus, Agarical sp. and Amanita sp, which gave a 92.9, 71.0 and 69.4 % inhibition, respectively. While the extracts with the higher inhibition of the mycelial growth of P. expansum were those of Agarical sp. and Agaricus arvensis with 35.3 and 34.6 % inhibition, respectively. The extracts with the higher inhibition of the conidia germination were those of Agarical sp. and Macrolepiota rhacodes, for B. cinerea, and Agaricus arvensis and Laetiporus sulphureus for P. expansum. Only the extract of Amanita sp. reduced the rot caused by B. cinerea when applied 24 hours before berry inoculation and the rot caused by P. expansum on berries that were not disinfected.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / En los últimos años, la enfermedad descrita como “Botryosphaeria dieback”, se ha transformado en un grave problema al no existir un método de control químico efectivo, potenciando la búsqueda de alternativas de control biológico eficaces en limitar el daño provocado por patógenos de la madera de la vid. Por lo anterior, el objetivo de esta investigación fue evaluar la acción de distintos biocontroladores sobre Diplodia seriata, que es el principal agente asociado en Chile al decaimiento y muerte del brazo de la vid. Se evaluaron distintos biocontroladores, fungosos (Trizian 1, Trizian 2, Closea 1, Producto comercial a base de Trichoderma spp. (Trichoderma harzianum cepa Queule, T. virens cepa Sherwood, T. parceramosum cepa Traile)) y bacterianos (Ballus 1, Ballus 2 y Producto comercial a base de Streptomyces lydicus WYEC 108). Estos tratamientos se compararon con un control químico a base de benomilo más mancozeb y controles inoculados y no inoculados con el patógeno. La evaluación se realizó mediante la determinación del índice de inhibición de la lesión en cada uno de los tratamientos. Se utilizaron sarmientos no enraizados de uva de mesa cv. Thompson Seedless, en los cuales se realizó una herida de 0,5 cm de diámetro. Una vez aplicados los tratamientos con los diferentes biocontroladores, se inocularon los sarmientos con un disco de micelio de D. seriata, cubriendo la zona de infección con parafilm. Los tratamientos fueron incubados por 30 días a una temperatura promedio de 20,3°C y una humedad relativa sobre el 98%. La inoculación con el patógeno se realizó en dos tiempos: 1 (tiempo 1) y 96 horas (tiempo 2) después de efectuados los tratamientos correspondientes. Los resultados mostraron que el mejor tratamiento fue el fungicida comercial con un 76,7% y 30,6% de eficacia tanto para el tiempo 1 como para el tiempo 2 respectivamente. Los mejores resultados de biocontrol con antagonistas bacterianos, se obtuvieron con el producto comercial a base de Streptomyces lydicus WYEC 108 y Ballus 2 con un índice de inhibición de 40,9% y 39,7%; menor porcentaje es el que obtuvo Ballus 1 alcanzando un índice de inhibición de 20%, en el tiempo 1. Los tratamientos en base a biocontroladores fúngicos que incluían Trichoderma spp.: producto comercial, Trizian 2 y Trizian 1, presentaron un índice de inhibición de 30,4%; 29% y 3,9% respectivamente en el tiempo 1, reduciendo a 0% la inhibición de D. seriata en el tiempo 2. A su vez Closea 1 logró un 20,3% de inhibición en el tiempo 1, siendo el único tratamiento que mejora su acción de biocontrol al aumentar el tiempo de inoculación del patógeno, alcanzando un 25,8% de inhibición en el tiempo 2. / In last years, the disease named "Botryosphaeria dieback", has been a serious problem due to ineffective chemical control methods. This has enhanced the search of effective biological control alternatives to limit the damage caused by trunk pathogens in grapevines. Therefore, the aim of this study was to evaluate the action of different biocontrollers on Diplodia seriata, which is the main agent of shoots decay and death in the vineyards of Chile. Several biocontrollers were evaluated, fungal (Trizian 1, Trizian 2, Closea 1, commercial product based on Trichoderma spp. (Trichoderma harzianum strain Queule, T. virens strain Sherwood, T. parceramosum strain Traile)) and bacterial (Ballus 1, Ballus 2 and commercial product based Streptomyces lydicus WYEC 108). These treatments were compared with a chemical control based on benomilo more mancozed and inoculated and uninoculated controls with the pathogen. The evaluation was made establishing the inhibition index of the lesion for each of the treatments. Unrooted canes of Thompson Seedless grapevines were used, in which a wound diameter of 0.5 cm was made. After applying the different biocontrollers treatments, the canes were inoculated with a mycelium disc of D. seriata, covering the area of infection with parafilm. Treatments were incubated for 30 days at 20.3°C on average and in a relative humidity above 98%. Inoculation with the pathogen was performed in two occasions: 1 (time 1) and 96 hours (time 2) after the corresponding treatments. The results showed that the best treatment was the commercial fungicide with 76.7% and 30.6% efficiency in time 1 and time 2, respectively. The best results of biocontrollers with bacterial antagonists were obtained with the commercial product based on Streptomyces lydicus WYEC 108 and Ballus 2 with an inhibition percentage of 40.9% and 39.7% respectively; the lowest percentage was the one managed with Ballus 1, reaching an inhibition index of 20% in time 1. Treatments based on fungal biocontrollers, as Trichoderma spp.: commercial product, Trizian 2 and Trizian 1 showed an inhibition percentage of 30.4%; 29% and 3.9% respectively at time 1, reducing to 0% inhibition of D. seriata in time 2. Closea 1 achieved a 20.3% inhibition at time 1, being the only treatment that enhanced the action as a biocontroller with increasing time of pathogen inoculation, reaching a 25.8% inhibition at time 2.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / Durante la temporada 2013-2014 se estudió el efecto de la aplicación de aceite mineral (Purespray 15E) y aceite vegetal (Protek) sobre la incidencia de la mancha anular marrón producida por el Trips de California, Frankliniella occidentalis Pergande, en uva de mesa variedad Thompson seedless durante el periodo de cierre de racimo. Se realizó un ensayo en un huerto comercial ubicado en la comuna de Buin, Región Metropolitana, en el que se evaluó tratamientos de aceites mineral y vegetal con diferentes concentraciones y número de inmersiones. Para el ensayo se seleccionaron racimos sanos y homogéneos de 150 bayas aproximadamente, los que se sumergieron en cada tratamiento durante 5 segundos. Posteriormente se infestaron con 50 adultos de Trips de California y fueron encerrados en bolsas de tul; transcurrida una semana se realizó una segunda inmersión en los tratamientos que correspondía y se repitió la infestación en las unidades experimentales. Los racimos se encerraron nuevamente en bolsas de tul hasta la evaluación. La evaluación se realizó en periodo de cosecha, considerando el porcentaje de bayas que presentaban daño por Trips de California, caracterizado como mancha anular marrón. Se empleó un diseño de bloques completamente aleatorizados con 10 tratamientos y 8 repeticiones, siendo la unidad experimental un racimo. Se consideró cada planta como un bloque independiente. Los resultados se normalizaron mediante la transformación angular de Bliss. Posteriormente se sometieron a un análisis de varianza y prueba de comparaciones múltiples DGC. Los tratamientos de Aceite Mineral (Purespray 15E) al 0.5% y al 0.75% reducen efectivamente el daño causado por F. occidentalis durante el periodo de cierre de racimo. Los tratamientos con Aceite Vegetal (Protek) al 0.5% y al 0,75% reducen parcialmente el daño causado por F. occidentalis durante el periodo de cierre de racimo. / During the 2013-2014 season, the effect of the application of mineral oil (Purespray 15E) and vegetable oil (Protek) on the incidence of brown ringspot caused by the Western Flower Thrips (Frankliniella occidentalis Pergande) on table grape was studied, focusing on the Thompson seedless variety during cluster closing time. Trials were conducted in a commercial orchard located in the commune of Buin, Metropolitan Region, treatments mineral and vegetable oils with different concentrations and number of dives were evaluated. For the test, healthy and homogeneous clusters of approximately 150 berries were selected, and immersed in each treatment for 5 seconds. Then, they were infested with 50 adults of Western Flower Thrips and locked in tulle bags; after a week, a second application was performed of the corresponding treatments and the infestation was repeated in all experimental units. The clusters were again locked in tulle bags until evaluation. The evaluation was conducted in harvest period, considering the percentage of berries that showed damage from Western Flower Thrips, characterized as brown ringspot. Design of completely randomized blocks of 10 treatments and 8 repetitions were used. The experimental unit being a cluster. Each plant is considered as a separate block. The results were normalized by Bliss' angular transformation. Subsequently, they were subjected to a variance analysis and DGC multiple comparisons tests. Treatments with Mineral Oil (Pure Spray 15E) at 0.5% and 0.75% effectively reduce the damage caused by F. occidentalis during cluster closing time. Vegetable oil treatments (Protek) at 0.5% and 0.75% only partially reduced the damage caused by F. occidentalis during the cluster closing.