Submitted by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2018-07-13T20:05:40Z No. of bitstreams: 2 Dissertação- Fabiele Souza da Cruz.pdf: 3582249 bytes, checksum: 07ff7e3ecd924332c2e3bd350ea02f8e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-13T20:05:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação- Fabiele Souza da Cruz.pdf: 3582249 bytes, checksum: 07ff7e3ecd924332c2e3bd350ea02f8e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-05-01 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / Duroia longiflora Ducke species belongs to Rubiaceae family, it occurs spontaneously in Brazil and it is also found in the Amazon region. Studies of the genus Duroia have demonstrated important chemical and biological potentials of their species; however, there are no previous chemical and biological studies with D. longiflora. Therefore, the objective of this work was to carry out phytochemical and biological studies with the extracts of leaves of D. longiflora, as well as to perform histochemical and anatomical studies with its leaves. The extracts were evaluated for their antioxidant, cytotoxic and antimicrobial activities, analyzed by comparative thin layer chromatography, nuclear magnetic resonance and then fractionated. For the histochemical study of the leaves, the presence of alkaloids, phenolic compounds, tannins, proteins, lipids and starch in the stained tissues were histolocalized, and in the anatomical study the leaf tissue descriptions were performed. For the biological assays, it was observed that the methanolic extracts of leaves and branches showed high toxicity against Artemia salina and high antioxidant effect. The results for the antibacterial assay were not conclusive. The extracts and the phases that presented positive activity in the biological assays were fractionated until the isolation of the compouds. It was possible to identify one biflavonoid 2,3-epoxy-5,7,3’,4’- tetrahydroxyflavan-(4-8)-epicatechin and -sitosterol from the chromatographic fractionation of the dichloromethane phase from the methanolic extract of the leaves. Other three alkaloids were isolated, but until the conclusion of this dissertation, it was not possible to carry out the structural identification. / A espécie Duroia longiflora Ducke, pertencente à família Rubiaceae, ocorre espontaneamente no Brasil e é encontrada na região Amazônica. Estudos do gênero mostraram importantes potenciais químicos e biológicos em suas espécies, contudo, não existe estudos prévios químicos e biológicos com D. longiflora. O objetivo deste trabalho foi realizar estudos fitoquímicos e biológicos com os extratos de folhas de D. longiflora, bem como estudos histoquímicos e anatômicos com as folhas da mesma. Os extratos foram avaliados quanto às atividades antioxidante, citotóxica e antimicrobiana, analisados por cromatografia em camada delgada comparativa e ressonância magnética nuclear e depois foram fracionados. As presenças de alcaloides, substâncias fenólicas, taninos, proteínas, lipídios e amido nos tecidos corados foram histolocalizados nas folhas e no estudo anatômico foram realizadas as descrições dos tecidos das folhas. Para os ensaios biológicos, observou-se que os extratos metanólicos das folhas e galhos apresentaram toxicidade alta frente à Artemia salina e ação antioxidante alta. O resultado do ensaio antibacteriano não foi conclusivo. Os extratos e as fases que apresentaram atividade positiva nos ensaios biológicos foram fracionados. Do fracionamento cromatográfico da fase diclorometânica do extrato metanólico das folhas foi possível identificar o biflavonoide 2,3-epoxi-5,7,3’,4’-tetrahidroxiflavan-(4-8)- epicatequina e o -sitosterol. Outros três alcaloides foram isolados, contudo, até o momento de fechamento da dissertação, não foi possível realizar a identificação estrutural.

Submitted by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2018-10-22T12:56:14Z No. of bitstreams: 2 dissertao.genise.final.secretaria.pdf: 6101919 bytes, checksum: 9666e4046299fd62511d22b32eb3090e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-22T12:56:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertao.genise.final.secretaria.pdf: 6101919 bytes, checksum: 9666e4046299fd62511d22b32eb3090e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2013-07-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / Bignoniaceae Juss. includes ca. 110 genera and 800 species distributed in tropical and subtropical regions. It is frequently reported as one of the most important families in terms of species richness in neotropical regions. In Brazil there are 32 genera and 391 species and in the North 26 genera and 190 species. Their greatest diversity is in the habit lianescente species of plants with ascending the treetops, being an important element in the canopy of the forest, very useful as connecting between them and important to the local wildlife, but making the collection of fertile material more difficult. Although having such a large representation in the North, there are only a few studies on the morphology and anatomy of the group. Therefore one undertook the collection of data of the flower family on Sustainable Development Reserve Tupé - Manaus / AM, in order to identify and describe in detail the external and internal morphology of the species of Bignoniaceae, and present a key to identification with morphological and anatomical characters, pictorial diagrams and comments on diagnostic of, flowering and fruiting phenomenon knowledge and distribution and anatomical characters of the petiole, limbo and midrib that help to identify of sterile material and that proved to be very informative to recognize the studied species. Therefore botanical material was collected in four tracks at the Tupé Reserve in two types of environments, upland and flooded forest by monthly excursions during the period from 2002 to 2004 and biweekly from August 2011 to December 2012. Sixteen species were given the taxonomic treatment, and of these 12 were also analyzed concerning their anatomical structures. Vegetative and reproductive characters such as appearance and filling the branches, presence of glands and coverage of limbo and inter petiole regions, morphology of the pseudo stipules, apexes of tendrils, pubescence of the corolla were good characters to distinguish the species of Bignoniaceae and quite diagnostic in some cases. The most representative were Mansoa and Handroanthus, with three species each. The occurrence of H. riodocensis in Tupé Reserve is new record for the state of Amazon and in the North Brazil, there are six other new records for the Tupé Reserve. Concerning the characteristics of the leaves, the anatomy of the internal structures were more informative, such as the cross-sectional shape, the presence or not of a hollow spine the presence of the midrif vascular bundle and organization of the fibers in relation to the vascular system and proved to be satisfactory in differentiation of the species. On the other hand for the limbo it is noteworthy, the number of layers of epidermal cells and cuticle thickness, types of stomata, the number of layers of palisade parenchyma, presence of trichomes, although all observed patterns are quite common in Bignoniaceae. Furthermore, the arrangement of fibers and sclereides tissues in the subepidermal regions of the midrib were useful in the separation of species, as well as the thickness of the cuticle and epidermal ornamentation. / Bignoniaceae Juss. inclui ca. 110 gêneros e 800 espécies distribuídas nas regiões tropicais e subtropicais. Frequentemente relatada como uma das famílias mais importantes em termos de riqueza de espécies nas regiões neotropicais. No Brasil ocorrem 32 gêneros 391 espécies e na região Norte 26 gêneros e 190 espécies. Sua maior diversidade está nas espécies de hábito lianescente com plantas ascendendo às copas das árvores, compondo um importante elemento no dossel da mata, bastante útil na conexão das mesmas e importante para a fauna local, porém dificultado bastante a coleta do material fértil. Apesar de tamanha representatividade na região Norte, há poucos trabalhos relativos à morfologia e à anatomia do grupo. Dessa forma, realizou-se o levantamento florístico da família na Reserva de Desenvolvimento Sustentável do Tupé – Manaus/ Am, com o objetivo de identificar e descrever detalhadamente a morfologia externa e interna das espécies de Bignoniaceae, além de apresentar uma chave para identificação com caracteres morfológicos e anatômicos, pranchas pictóricas, comentários sobre caracteres diagnósticos, fenologia da floração, frutificação, distribuição e caracteres anatômicos do pecíolo, limbo e nervura central que auxiliam na identificação de material estéril e que se mostraram bastante informativos na reconhecimento das espécies estudadas. Para tanto foi coletado material botânico em quatro trilhas da reserva em dois tipos de ambientes, terra-firme e igapó, a partir de excursões mensais no período de 2002 a 2004 e quinzenais de agosto de 2011 a dezembro de 2012. Dezesseis espécies receberam o tratamento taxonômico, dessas, 12 foram analisadas também quanto suas estruturas anatômicas. Caracteres vegetativos e reprodutivos como: aspecto e preenchimento dos ramos, presença de glândulas e indumentos no limbo e nas regiões interpeciolares, morfologia das pseudoestípulas, ápices de gavinhas e pilosidade das corolas foram bons caracteres na distinção das espécies de Bignoniaceae e bastante diagnóstico em alguns casos. Mansoa e Handroanthus foram os gêneros mais representativos, com três espécies cada. A ocorrência de H. riodocensis na RDS Tupé é registro novo para o estado e para a região Norte e mais seis novas ocorrências foram registradas para a reserva. Quanto às características da anatomia foliar, as estruturas internas do pecíolo foram mais informativas, como: o formato em corte transversal, a presença de medula oca ou não, presença de feixe vascular medular e organização das fibras em relação ao cilindro vascular se mostraram satisfatórios na diferenciação das espécies. Já para o limbo, ressalta-se o número de camadas de células epidérmicas e espessura da cutícula, tipos de estômatos, o número de camadas de parênquima paliçádico, presença de tricomas, embora todos os padrões observados no limbo sejam bastante comuns em Bignoniaceae. Além disso, a disposição das fibras e tecidos esclerenquimáticos nas regiões subepidérmicas da nervura central foram úteis na separação das espécies, assim como a espessura da cutícula e ornamentações da epiderme.

Estudos realizados no gênero flex, família Aquifoliaceae, ordem Celastrales, mostram que embriões pertencentes a este gênero permanecem rudimentares, em estágio de coração, quando os frutos estão maduros, sendo que as sementes necessitam de um período de 6 a 8 meses para germinar, com uma taxa de germinação muito baixa. As características apresentadas fazem com que a produção de mudas de erva-mate seja lenta e a quantidade não suficiente para a demanda. A análise morfoanatômica do embrião e endosperma de flex paraguariensis, durante a embriogênese tardia, mostram a presença de suspensor, mesmo em fases mais avançadas. Apresenta também modificações nas reservas do endosperma nessas fases. Tendo por base essa análise, o presente trabalho objetiva apresentar um estudo criterioso do suspensor desta espécie, desde sua formação, até sua degradação durante a embriogênese final, bem como do embrião e endosperma, na embriogênese. As diferentes fases da embriogênese e endospermogênese foram analisadas e descritas utilizando métodos anatômicos tradicionais, para microscopia óptica, microscopia eletrônica de varredura e de transmissão. Acompanhando o desenvolvimento ontogenético desta espécie, o trabalho caracteriza o ciclo reprodutivo, as flores pistiladas, o processo de fecundação, os frutos, bem conío o embrião e o endosperma. O endosperma é classificado como celular, segundo o sistema EODP. O tipo de divisão celular, que ocorre na embriogênese inicial, permite classificar o desenvolvimento embrionário como pertencente ao tipo Cariofiláceo. Durante a embriogênese inicial, as fases analisadas vão desde a formação do zigoto, passando por proembrião bicelular até proembrião pós-octante. Durante a embriogênese final, as fases analisadas vão desde embrião piriforme até embrião em estágio de torpedo (maduro), quando ocorre a germinação. O aporte de nutrientes ao embrião esporofitico, nas fases iniciais de seu desenvolvimento, ocorre predominantemente via suspensor, pois o embrião xenofitico não está totalmente desenvolvido. Quando o embrião xenofitico apresenta as reservas estruturadas, a utilização destas é observada através das modificações de suas características morfológicas que obedecem a um gradiente, tanto no sentido micrópila-calaza como no sentido tegumento-embrião. Suas variações de síntese, absorção e translocação morfologicamente são: (1) formação de vesículas de membrana simples que se fundem formando vacúolos; (2) deposição de proteína amorfa no seu interior; (3) surgimento de adensamentos protéicos (globóides ou pró-globóides) na massa fundamental; (4) formação de lipídios ao longo de toda a margem do vacúolo protéico; (5) início da cavitação intema do vacúolo, evidenciando sinais de reutilização das reservas; (6) fragmentação do conteúdo protéico; (7) adensamento do material fragmentado com visualização óptica ou eletro-transparente do vacúolo, com início da degradação dos lipídios; (8) vacúolo com pouco material adensado no seu interior e proteína identificada no citoplasma como fragmentos ou adensamentos, sem qualquer sinal de lipídios contornando a estrutura; (9) vacúolo sem qualquer material protéico individualizado no seu interior, sendo constituído apenas por uma matriz solúvel. Em particular, o suspensor assume três distintos padrões de comportamento: (1) a lise através de Morte Celular Programada da célula basal e das células contíguas a esta, durante a embriogênese inicial, (2) alise caracterizada por rompimento das paredes das células de comunicação entre a hipófise e embrião, na embriogênese final, e (3) a permanência do suspensor íntegro, em embriões em estágio de torpedo. A manutenção do suspensor para a continuidade do desenvolvimento embrionário, tanto quanto a dinâmica das reservas lipoprotéicas e seu processo de translocação, são de fundamental importãncia para a conclusão do desenvolvimento embrionário. / Previous papers on the flex genus, Aquifoliaceae family, Celastrales arder have shown that the embryos stay rudimentary, in the heart shaped stage, even when the fruits are ripe. The seeds need a period of 6 to 8 months to germinate, with a very low germination rate. Due to these facts, the production of seeds of maté (flex paraguariensis St. Hil.) is slow and scarce. The morphoanatomical analysis of the embryo and endosperm, during late embryogeny, has shown the presence of the suspensor even in advanced stages. This analysis has also shown changes in the storage and translocation of the endosperm reserves. Based on these results, the present work aims to detail the embryo and endosperm ontogeny, and the entire suspensor development, from its origin to degradation. The different stages of embryo and endosperm development were analyzed and described using the traditional anatomical methods for optical, as well as scanning and transmission electron microscopy. Along the ontogenetic development, the work describes the reproduction cycle of this species, its pistilate flowers, fruits, fertilization process, and embryo and endosperm ontogeny. The endosperm was classified as cellular, according to the EODP system. The type of cellular division during early embryogeny leads to the classification of the embryo development as being of Caryophyllad type. During early embryogeny, differerít stages were analyzed, beginning willi zygote formation, then bicellular stage all the way to the post-octant proembryos. During late embryogeny, the analysis was performed of stages ranging from the pyriform to the ripe torpedo embryos, when germination occurs. The increase of nutrients to the sporophytic embryo during early stages of development occurs mainly through the suspensor. This is because the xenophytic embryo is not completely developed. When the xenophytic embryo contains structured reserves, their mobilization is observed through the characteristic morphological changes. These changes follow a gradient in the micropyle-chalaza direction, as well as in the integument-embryo direction. Different steps of syntheses or translocation of reserves can be classified as: (1) formation of single membrane vesicles binding into vacuoles, (2) deposition of amorphous protein into them, (3) appearance of proteinous spots (globoids or progloboids) in the ground mass, (4) formation of lipids around the proteinous vacuole, (5) beginning of the intemal cavitation of the vacuole, showing signs of reserve degradation and translocation, (6) fragmentation of the proteinous bodies, (7) adhesion of fragmented material with optically or electrotransparent visualization of the vacuole, and the beginning of lipid degradation, (8) vacuoles with little dense material and protein identified in the cytoplasm as fragmentary or adhesion masses, without any sign of lipids around them, (9) vacuoles without any sign of proteinous material, being solely constituted by a soluble matrix. The suspensor showed three distinct developmental behavior pattems: (1) the lysis by programmed cell death of the basal cell and its contiguous cells during early embryogeny, (2) the lysis by the breaking of the cell wall between hypophysis and embryo during late embryogeny, and (3) the maintenance of the intact suspensor in embryos until the torpedo stage. The suspensor is not only a characteristic structure during early embryogeny stages, but its mainten ance as well as the dynamics of lipid and protein storage, and the translocation process are essential for the conclusion of embryo development.

Orientador: Alessandra Ike Coan / Coorientador: Lívia Godinho Temponi / Banca: Lygia Dolores Ribeiro de S. Fernandes / Banca: Daniela Guimarães Sismão / Resumo: Anthurium é considerado um dos maiores gêneros de Araceae, com cerca de 130 espécies no território brasileiro. Estudos de desenvolvimento e de anatomia de órgãos reprodutivos são incipientes no gênero, sendo os dados disponíveis em tratamentos taxonômicos muitas vezes baseados apenas em análises de material herborizado. No presente trabalho, o gineceu de representantes das seções Cardiolonchium, Dactylophyllium, Pachyneurium, Tetraspermium e Urospadix foi estudado, a fim de aumentar o conhecimento dos caracteres ontogenéticos e anatômicos, indicando aqueles potenciais para a sistemática do gênero. Foram utilizadas técnicas usuais para estudos em microscopias de eletrônica de varredura, de luz e confocal por varredura a laser. Através do estudo ontogenético (Capítulo 1), verificou-se a similaridade no desenvolvimento do gineceu, independente da classificação infragenérica. Quatro estágios de desenvolvimento do gineceu foram evidenciados, de acordo com o arranjo das tépalas nas flores, esperando contribuir para estudos de anatomia e biologia florais futuros. O gineceu de Anthurium tem a porção proximal sinascidiada, correspondente ao ovário, e a porção distal simplicada, correspondente ao estilete e o estigma. Os caracteres anatômicos do gineceu maduro (Capítulo 2) foram confirmados como uniformes entre as espécies de A. sect. Urospadix. Comparando esses caracteres entre as seções, observou-se variação, podendo subsidiar estudos taxonômicos, especialmente quanto ao: o formato e conteúdo das células epidérmicas da região adjacente ao estigma, além da ornamentação da cutícula; a formação de septo apical; o tamanho da porção distal do septo ovariano e a sua espessura; o número de lóculos no ovário; o tamanho dos óvulos; e a formação de tricomas funiculares no óvulo. Quanto à... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Anthurium is one of the largest genera of Araceae and is represented by approximately 130 species in Brazil. Both developmental and anatomical studies on reproductive organs are still necessary in the genus, most due to observation based only from herbarium material. The present work studied the gynoecia of species of sections Cardiolonchium, Dactylophyllium, Pachyneurium, Tetraspermium and Urospadix to describe anatomical and ontogenetic features and indicate the potential ones for taxonomical purposes. Usual anatomical techniques for scanning electron, light, and confocal microscopies were performed. The ontogenetic study (Chapter 1) revealed the similarity during the gynoecium development with no relation to the infrageneric classification. Four stages of gynoecium development were highlighted, based on the tepal arrangement within the flowers. These stages should be valuable for reproductive studies in Anthurium. The gynoecium of Anthurium comprises a synascidiate proximal portion, which corresponds to the ovary, and a symplicate distal portion, that corresponds to the style and stigma. The anatomical characters of the mature gynoecium (Chapter 2) were confirmed as uniform for A. sect. Urospadix. Some characters varied among the sections studied and may be useful for taxonomic purposes: shape and content of the epidermal cells, as well as cuticle ornamentation, of the region adjacent to the stigma; formation of an apical septum; size of the distal portion of septum and its thickness; number of locules in the ovary; ovule size; and ovule funicular trichomes. The vascularization study (Chapter 3) showed that most of the species studied, especially those of the section Urospadix, presents gynoecium with only ventral bundles in the carpels. Anthurium affine (A. sect. Pachyneurium) and A. scandens... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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Lo studio è stato condotto su pazienti affetti da carcinoma nasale trattati con radioterapia presso il Centro Oncologico Veterinario (Sasso Marconi, BO). Lo studio, prospettico, randomizzato e in doppio cieco, ha valutato l’efficacia del trattamento radioterapico in combinazione o meno con firocoxib, un inibitore selettivo dell’enzima ciclossigenasi 2 (COX-2). Sono stati inclusi pazienti con diagnosi istologica di carcinoma nasale sottoposti a stadiazione completa. I pazienti sono stati successivamente suddivisi in due gruppi in base alla tipologia di trattamento: radioterapia associata a firocoxib (Gruppo 1) o solo radioterapia (Gruppo 2). Dopo il trattamento, i pazienti sono stati monitorati a intervalli di 3 mesi sia clinicamente che mediante esami collaterali, al fine di valutare condizioni generali del paziente, un’eventuale tossicità dovuta alla somministrazione di firocoxib e la risposta oggettiva al trattamento. Per valutare la qualità di vita dei pazienti durante la terapia, è stato richiesto ai proprietari la compilazione mensile di un questionario. La mediana del tempo libero da progressione (PFI) è stata di 228 giorni (range 73-525) nel gruppo dei pazienti trattati con radioterapia e firocoxib e di 234 giorni (range 50-475) nei pazienti trattati solo con radioterapia. La sopravvivenza mediana (OS) nel Gruppo 1 è stata di 335 giorni (range 74-620) e di 244 giorni (range 85-505) nel Gruppo 2. Non si sono riscontrate differenze significative di PFI e OS tra i due gruppi. La presenza di metastasi ai linfonodi regionali condizionava negativamente PFI e sopravvivenza (P = 0.004). I pazienti trattati con firocoxib hanno mostrato un significativo beneficio in termini di qualità di vita rispetto ai pazienti trattati con sola radioterapia (P=0.008). La radioterapia può essere considerata un’efficace opzione terapeutica per i cani affetti da neoplasie nasali. Firocoxib non sembra migliorare significativamente i tempi di sopravvivenza, ma risulta utile al fine di garantire una migliore qualità di vita. / Carcinomas represent two-thirds of canine nasosinal neoplasms. Although radiation therapy (RT) is the standard of care, the incidence of local recurrence following treatment is high. Cyclooxygenase-isoform-2 (COX-2) is expressed in 71-95% of canine nasal carcinomas and has been implicated in tumor growth and angiogenesis. Accordingly, COX-2 inhibition seems rational to improve outcome. Dogs with histologically confirmed, previously untreated nasal carcinomas were randomized to receive the combination of a selective COX-2 inhibitor (firocoxib) and palliative RT (Group 1) or RT and placebo (Group 2). Patients were regularly monitored with blood tests, urinalysis, and computed tomography. Pet owners were asked to complete monthly a quality-of-life questionnaire. Twenty-four dogs were prospectively enrolled. According to Adams modified system, there were five stage 1, five stage 2, three stage 3, and 11 stage 4 tumors. Two dogs had metastases to regional lymph nodes. Median progression-free interval and overall survival were 228 and 335 days in Group 1 (n = 12) and 234 and 244 days in Group 2 (n = 12). These differences were not statistically significant. The involvement of regional lymph nodes was significantly associated with progression-free interval and overall survival (P = 0.004). Quality of life was significantly improved in Group 1 (P = 0.008). In particular, a significant difference was observed for activity and appetite. Although not providing a significant enhancement of progression-free interval and overall survival, firocoxib in combination with RT is safe and improved life quality in dogs with nasal carcinomas.

El càncer de mama és, actualment, el tumor més freqüent en dones i correspon al 22% de tots els càncers que es produeixen en aquest sexe.En les comarques de Tarragona, es diagnostiquen uns 280 nous casos amb una taxa d'increment anual del 2,2%.Fins fa una dècada la mortalitat per aquest tipus de càncer era molt elevada, actualment ha disminuït gràcies sobretot als programes de cribatge i detecció precoç.Es coneixen múltiples factors de risc que intervenen en el desenvolupament del càncer de mama, en els quals s'hi inclouen factors dietètics i determinats estils de vida, alteracions genètiques, principalment en dos gens coneguts com són el BRCA1 i el BRCA2, i també factors hormonals.Tots ells han estat estudiats àmpliament per tal de poder evitar que es produeixi el carcinoma, però tot hi així es continua desenvolupant el tumor i encara, avui en dia moltes dones en moren per la seva causa.Un cop el càncer de mama s'ha produït cal veure'n quin en serà el seu pronòstic en funció de determinats paràmetres. Des d'aquesta vessant, s'han estudiat els diferents factors pronòstics per poder preveure quin en serà el curs i evolució de la malaltia i veure si es pot aplicar algun tipus de tractament específic en cada cas concret. En l'estudi de les relacions entre els factors pronòstics com la trobada de nous, en el què es basa la tesi.S'ha vist, tal i com moltes publicacions han confirmat, que els càncers de mama que tenen més apoptosi (mort cel·lular programada) tenen pitjor pronòstic. Això és degut a què aquests tumors presenten, concomitantment, un índex de proliferació cel·lular molt més elevat i per tant són més agressius. En el procés de l'apoptosi hi intervenen una sèrie de proteases de la cisteïna conegudes com a CASPASES que, activades de forma seqüencial, desencadenen l'apoptosi.En el treball s'han valorat dues de les més de deu caspases conegudes (la caspasa 3 i la caspasa 6) per veure si intervenen el en pronòstic de les pacients amb càncer de mama. A més a més s'han valorat d'altres factors com són l'índex de proliferació cel·lular (ki-67) i el percentatge de cèl·lules apoptòtiques, mitjançant la tècnica de TUNEL.L'estudi s'ha realitzat sobre 210 casos de Carcinoma Ductal Infiltrant (CDI) de mama en estadis operables quirúrgicament (pT1-pT2), diagnosticats en l'Hospital Universitari Joan XXIII de Tarragona en el període comprès entre 1988 i 2001.De cada cas s'han recollit dades del tumor com la mida tumoral, el grau de diferenciació histològica, la presència de metàstasis als ganglis limfàtics del buidament de l'aixella i la presència de necrosi tumoral en el component infiltrant.També s'ha realitzat de cada cas, la tècnica de TUNEL per calcular el percentatge de cèl·lules i/o cossos apoptòtics i les tincions immunohistoquímiques tant per valorar les caspases com l'índex de proliferació cel·lular. El total de cèl·lules que expressaven aquests marcadors s'han especificat en percentatges.Els resultats obtinguts en el nostre estudi mostren que, en l'anàlisi multivariat, l'estat dels ganglis limfàtics i l'atipia cel·lular són factors pronòstics independents tant per la recidiva com per la mortalitat, mentre que la mida del tumor només és factor pronòstic independent per la recidiva tumoral.A més a més, en aquest treball, l'índex apoptòtic i l'expressió immunohistoquímica tant de les caspases com de l'índex de proliferació cel·lular no han esdevingut factors pronòstics independents ni per la recidiva tumoral ni per la mortalitat de la pacient.Aquests resultats mostren que continuen essent els coneguts clàssicament com a factors pronòstics els que tenen importància en el pronòstic de les pacients.Així doncs, s'amplia la línia d'investigació de l'apoptosi i els diferents elements que intervenen en tot el procés, i seran necessaris d'altres estudis per poder conèixer completament el comportament de les caspases i veure si modificant la seva actuació podem canviar el decurs de la malaltia. / Nowadays, breast cancer is the most common cancer in women and it corresponds to 22% of all cancers in females. In the Tarragona area, nearly 280 new cases are diagnosed with an annual increase tax of 2.2%.During the last decade, mortality due to this cancer was very high, at present it has decreased specially by screening programs and an early detection.There are some risk factors involved in breast cancer development such as diet factors and some life styles, genetic alterations, mainly in two genes known as BRCA1 and BRCA2, and hormonal factors.All of them have been widely studied to avoid a cancer progression, however, new breast cancers cases continue appearing and many women died by its fault.Once the breast cancer has appeared, it is important to know which will be its prognosis which depends on some intrinsic and extrinsic tumour features. From this point of view, some different prognostic factors have been studied in order to predict the course and the evolution of this tumour and to see if we could do any special treatment in each case. In this important aspect is based the present study.Many publications have proved that breast cancers with a high apoptosis index (programmed cell death) have a better prognosis compared with the same type of cancer with less or any apoptosis. This feature seems to be related to the high proliferation index that breast cancer with high apoptosis have, so consequently, its behaviour is worst. Many elements take part in the apoptotic process, some of them are the Caspases, cisteine proteases which are activated sequentially and are the main point in the apoptotic process..In this work two from more than ten caspases have been studied (caspase 3 and caspase 6) to see if they have any paper in breast cancer prognosis. We have evaluated some other factors such as cell proliferation index (ki67) and the average of apoptotic cells done by TUNEL technique.The study includes 210 cases of Ductal breast cancer in operable stages (pT1 - pT2) which were diagnosed in Joan XXIII Hospital in Tarragona between 1988 - 2001.We have collected some information from each cases such as tumour size, histological differentiation degree, the presence or absence of lymph node metastasis and the presence or absence of tumoral necrosis in the infiltrating component.We have evaluated from each case, the number of apoptotic cells or bodies by TUNEL technique and we have done immunohistochemical studies to evaluate the caspases' expression as the proliferation index. The results have been expressed on percentage.In the multivariate analysis our results show that lymph node status and cell atipism are independent prognostic factors for recurrence and mortality. On the other hand, the tumour size is only independent prognostic factor for recurrence.Moreover, in this study, the apoptotic index and the immunohistochemical expression of caspases and cell proliferation index have not turned out to be an independent prognostic factors neither recurrence nor mortality.These results show that classic prognostic factors known until now are the most important factors to predict the evolution of the illness.More studies will be necessary more studies in this field to know completely the caspases behaviour and to see if changing its functions, the course of the breast cancer could change.

Antecedentes: La evaluación de marcadores inmunohistoquímicos se realiza con fines diagnósticos, terapéuticos e investigadores de forma manual. La utilización del análisis informatizado de imágenes digitales para evaluar estos marcadores aún no es suficientemente eficaz. Objetivos: Diseñar un nuevo procedimiento informatizado para cuantificar marcadores inmunohistoquímicos nucleares y evaluar los efectos de la compresión de imágenes. Métodos: El procedimiento desarrollado consta de diferentes etapas, donde se evalúan diferentes marcadores immunohistoquímicos utilizados en cáncer de mama y en linfoma. Resultados: El análisis estadístico demostró una gran validez del método automatizado. La redondez fue el único parámetro morfológico afectado por la compresión. Unos factores correctores fueron desarrollados para corregir esta afectación y la variabilidad en la cuantificación producida por esta afectación. Conclusiones: Este nuevo procedimiento automatizado es un método objetivo, más rápido y reproducible que tiene un excelente nivel de precisión, incluso con imágenes digitales de elevada complejidad y también en imágenes comprimidas. Background: The evaluation of immunohistochemical markers is carried out manually for diagnostic, therapeutic and research purposes. The use of a computerized digital image analysis to evaluate these markers is not sufficiently effective yet.Objectives: To design a new computerized procedure to quantify nuclear immunohistochemical markers and evaluate the effects of image compression.Methods: The procedure developed consists of several stages which evaluate different immunohistochemical markers used in breast cancer and lymphoma.Results: Statistical analysis demonstrated a high validity of the automated method. The roundness was the only morphological parameter affected by compression. Some correction factors were developed to correct this disorder and the variability in the measurement caused by this disorder.Conclusions: This new automated process is objective, faster and it has also an excellent level of accuracy, even with highly complex digital images and compressed images.

Il contributo di ricerca di questo lavoro è consistito nel rivalutare da un punto di vista diagnostico, classificativo e statistico, una casistica di neoplasie del gatto archiviate in 23 anni (1984-2006). Nei primi 20 anni sono state diagnosticate 1696 neoplasie su un totale di 3682 campioni prevenuti nello stesso periodo, con una prevalenza delle patologie di tipo neoplastico del 46,06%. Nei tre anni successivi sono state individuate 382 neoplasie su un totale di 601 campioni archiviati, con una prevalenza del 61,02%. Le neoplasie avevano per l'81,8% un comportamento maligno, e questo dato risulta coerente con il dato più recente sulla malignità (85,6%) e con quello fornito da altri autori. L'età dei soggetti affetti era simile nei due studi, compresa fra pochi mesi e 22 anni, con il maggior numero di casi fra 9 e 13 anni. Le due casistiche presentano inoltre dati simili riguardo gli organi coinvolti anche se i tumori della mammella sono notevolmente diminuiti negli ultimi anni, con un aumento corrispondente di neoplasie cutanee. I fibrosarcomi, che hanno subito un drastico aumento tra il 1993 e il 1994 si sono mantenuti costanti in tutti gli anni successivi, dato ancora oggi quasi certamente correlabile alle pratiche vaccinali. I linfomi sono risultati piuttosto infrequenti in entrambe le casistiche, comparate con i dati della letteratura in cui vengono riportate percentuali nettamente maggiori. I tumori del cavo orale e dell'intestino hanno mantenuto circa le stesse percentuali di insorgenza nel corso degli anni. Tra i tumori presenti in questo studio, sono stati approfonditi i tumori a carico delle sierose (mesoteliomi) e del polmone attraverso metodiche immunoistochimiche e ultrastrutturali. Nei 23 anni sono stati diagnosticati 10 casi di mesotelioma, di cui 8 coinvolgenti la pleura e due il peritoneo. Su questi casi è stata applicata una metodica immunoistochimica con un pannello anticorpale utilizzato di routine in patologia umana per la diagnosi di mesotelioma e per la diagnosi differenziale con i carcinomi polmonari. Tutti i casi presentavano una doppia positività per vimentina e citocheratine ad ampio spettro; anticorpi specifici come CK5/6 e HBME-1 hanno presentato una buona specificità. Anche la microscopia elettronica si è rivelata di ausilio, mettendo in evidenza la presenza di tonofilamenti citoplasmatici e di microvilli, tipici delle cellule mesoteliali. Le neoplasie polmonari, analogamente a quelle umane hanno, sono notevolmente aumentate negli ultimi anni. Dei 24 casi raccolti tra il materiale di archivio, 14 sono stati diagnosticati negli ultimi 5 anni. Si è rilevata una significativa predisposizione nei gatti di razza Persiana, e le metastasi più frequenti sono state a carico dei linfonodi, del miocardio e dei cuscinetti plantari, analogamente a quanto segnalato in letteratura. L’istotipo più rappresentato è stato il carcinoma squamoso, seguito da adenocarcinomi papillari e bronchioloalveolari. Il pannello immunoistochimico applicato, finalizzato a individuare l’origine broncogena o ghiandolare della neoplasia, è risultato utile per la diagnosi delle forme squamose poco differenziate (CK 5/6 e CK 14). Infine è stato testato l’anticorpo di elezione nella diagnosi differenziale fra le neoplasie primitive e secondarie del polmone, il TTF-1, che però non ha cross-reagito con tessuti di gatto; la diagnosi di neoplasia primitiva polmonare si è dunque basata sull’assenza, anche nei dati anamnestici, di masse in altri distretti corporei.

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