Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseTAC.pdf: 758340 bytes, checksum: 75f2768e3c1fcebb7f4cfe61b0b5aade (MD5) Previous issue date: 2005-12-19 / The present study anlyzed the in vivo and in vitro responses of the myocardium obtained from Prochilodus lineatus acclimated at 25 ºC and tested at 25 and 35 ºC. The in vivo heart rate (fH bpm) was measured during acute transitions in temperature and subsequent return to 25º C. ECG recordings (lead DI of the electrocardiography) were obtained of electrodes at cardiac region. Recordings of the isometric contraction force (Fc %) and time-dependent parameters (TPT time to peak tension; THR time to half relaxation) were obtainded in vitro from ventricle rings electrically paced in response to stimulation frequency, temperature, extracelular Ca2+, adrenaline and ryanodine (blocker of the sarcoplasmic reticulum SR). The species showed a significant increase in the fH during the transition from 25 to 35º C, showing the importance of the chronotropic adjustments in response to thermal alterations and a great tolerance and adaptation to different thermal conditions. The species did show significant decreases in the twitch force (Fc) development by the ventricular strips during the increases of temperature. The addition of crescent Ca2+ concentrations to the medium evidenced the importance of the extracellular Ca2+ as showed by the Fc increases at both 25 and 35º C. Concomitant increases in in TPT and THR here recorded at 25 ºC while at 35º C, such increases were observed only in TPT. Adrenaline caused positive inotropism only at 35º C, without effect on time-dependent parameters. The post rest tension was conducted with and without 10 µM ryanodine in the medium. A significant post rest potentiation was recorded for at 25 and 35o C These post rest potentiations were inhibited by ryanodine. The impact of increases in the imposed contraction frequency caused a decline of the force and an increase in resting tension (RT) at both temperatures. In conclusion, an important fraction of the activator Ca2+ in P. lineatus seems to derive from intracellular stores (RS). However, this species also depends on extracellular sources of Ca2+, which provide more flexibility to modulate the contraction force. / O presente estudo teve por objetivo analisar as respostas in vivo (freqüência cardíaca) e in vitro (Força Fc) do miocárdio ventricular de curimbatá, Prochilodus lineatus, aclimatados a 25º C e testados a 25 e 35º C. Os registros de freqüência cardíaca (fH bpm) após elevação gradual da temperatura, e seu retorno subseqüente a 25º C, foram feitos através de implantes de eletrodos de ECG na região cardíaca. Adicionalmente foram feitos registros das respostas inotrópicas (Fc %) e dos parâmetros tempo-dependentes (TPT tempo para o pico de força e THR tempo para 50% do relaxamento) de anéis ventriculares estimulados eletricamente a diferentes freqüências em função da temperatura, concentração extracelular de Ca2+, adrenalina e rianodina (bloqueadora da função do reticulo sacoplasmático RS). In vivo, o aumento da temperatura elevou a fH de 49 bpm a 25º C para 115 bpm a 35º C, recuperando os valores iniciais com o retorno a 25º C. A elevação da temperatura desencadeou inotropismo negativo, sendo que o TPT e o THR variaram de maneira inversa a temperatura. A adição de concentrações crescentes Ca2+ (de 1,25 até 11,25 mM) ao banho causou aumento da Fc, demonstrando a importância do Ca2+ extracelular. A 25 ºC, tanto o TPT quanto o THR foram prolongados em função das elevações nas concentrações de Ca2+ enquanto que a 35º C, apenas o TPT aumentou. A adição de adrenalina só causou efeito inotrópico positivo a 35º C, sendo que os parâmetros tempodependentes não sofreram alterações em nenhuma das temperaturas experimentais. A análise da tensão pós-pausa, com e sem 10 µM de rianodina, revelou uma significante potenciação da força tanto a 25 quanto a 35º C, sendo esta abolida pela rianodina. Com o aumento da freqüência de estimulação, observou-se redução progressiva na Fc e significativo aumento da tensão de repouso (RT). O tratamento com rianodina provocou uma diminuição na Fc independente da temperatura. Os resultados revelaram que o Ca2+ responsável pela ativação dos miofilamentos deve derivar de pelo menos duas fontes: os espaços extracelulares (evidenciado pelo aumento de Fc durante incrementos na concentração de Ca2+ extracelular) e uma fração significativa fornecida por fontes internas, ou seja, o RS.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissMLR.pdf: 1002473 bytes, checksum: c330be61ec2cd9249c4558e2530910e9 (MD5) Previous issue date: 2004-07-08 / Financiadora de Estudos e Projetos / The present study anlyzed the in vivo and in vitro responses of the myocardium obtained from Synbranchus marmoratus acclimated at 25 ºC and tested at 15, 25 and 35 ºC. The in vivo heart rate (fH bpm) was measured during acute transitions in temperature and subsequent return to 25 ºC. ECG recordings (lead DI of the electrocardiography) were obtained of electrodes at cardiac region. Recordings of the isometric contraction force (Fc mN.mm-2) and time-dependent parameters (TPT time to peak tension; THR time to half relaxation) were obtainded in vitro from ventricle strips electrically paced in response to stimulation frequency, temperature, extracelular Ca2+, adrenaline and ryanodine (blocker of the sarcoplasmic reticulum SR). The species showed a significant increase in the fH during the transition from 25 to 35 ºC, and a significant decrease from 25 to 15 ºC, showing the importance of the chronotropic adjustments in response to thermal alterations and a great tolerance and adaptation to different thermal conditions. The species did show significant changes in the twitch force (Fc) development by the ventricular strips during the increases and decreases of temperature. The addition of crescent Ca2+ concentrations to the medium evidenced the importance of the extracellular Ca2+ for the heart contraction mainly at 35 ºC. Significant changes in the time-dependent parameters after increments in the Ca2+ extracellular concentration were not recorded. The post rest tension was conducted with and without 10 µM ryanodine in the medium. A significant post rest potentiation was recorded for the control preparations at 25 oC (100 to 119.8 ± 4.1 %) and 15 ºC (100 to 118.4 ± 2,8 %). However, this post rest potentiation was inhibited by ryanodine only at 25 oC (100 to 97.6 ± 1.5%), and, at 35 oC, force remained unchanged in the control preparations, but a significant post rest decay was recorded in the presence of ryanodine (100 to 76.6 ± 4.6%). The impact of increases in the imposed contraction frequency caused a decline of the force only at high frequencies in all the experimental temperatures. The maximal stimulation frequency sustained by the species is superior at high temperatures. The addition of a tonic level of adrenaline (10-8 M) did not cause any significant alteration in force or time-dependent parameters, when compared to control values. However, in presence of the 10 µM ryanodine, the Fc decreased significantly, without alteration in the TPT and THR. Additionally, the adrenaline concentration was incresed to 10-5 M. The adrenergic stimulation with high level of adrenaline caused positive inotropy with a magnitude that ameliorated the negative inotropic effect of ryanodine, with the exception of high pacing frequencies. In conclusion, S. marmoratus seems to possess large stores of intracellular activator Ca2+, resembling mammals rather than terrestrial ectothermic vertebrates. As a difference, this species also depends on extracellular sources of Ca2+ at high temperatures which provide more flexibility to modulate the contraction force. / O presente estudo teve por objetivo analisar as respostas in vivo e in vitro do miocárdio de muçum, Synbranchus marmoratus, aclimatados a 25 ºC e testados a 15, 25 e 35 ºC. Os registros de freqüência cardíaca in vivo (fH bpm) após elevação e redução gradual da temperatura, e seu retorno subseqüente a 25 ºC, foram feitos através de implantes de eletrodos na região cardíaca do animal e registros eletrocardiográficos. Adicionalmente foram feitos registros in vitro das respostas inotrópicas (Fc mN.mm-2) e dos parâmetros tempo-dependentes (TPT tempo para o pico de força e THR tempo para 50% do relaxamento) das tiras ventriculares estimuladas eletricamente a diferentes freqüências em função da temperatura, concentração extracelular de Ca2+, adrenalina e rianodina (bloqueadora da função do reticulo sacoplasmático RS). In vivo, a redução da temperatura diminuiu gradualmente a fH, atingindo valores mínimos de 12 ± 0,6 bpm a 15 ºC, enquanto o aumento da temperatura elevou a fH até 51 ± 2 bpm a 35 ºC. Em ambos os casos, a fH inicialmente observada (~31 bpm) foi recuperada com o retorno à temperatura inicial (25 ºC). Um inotropismo negativo foi observado tanto durante aumentos quanto durante reduções da temperatura do banho, sendo que o TPT e o THR variaram de maneira inversa a temperatura, aumentando quando a temperatura era reduzida e vice-versa. A adição de concentrações crescentes Ca2+ (de 1,25 até 11,25 mM) ao banho causou aumento da Fc somente a 35 ºC, a partir de 3,25 mM, mostrando que a tomada de Ca2+ extracelular parece ter maior importância em temperaturas elevadas. O TPT diminuiu somente em 25ºC, em concentrações de Ca2+ acima de 7,25 mM. Porém o THR não se alterou a 15 e 25ºC, enquanto que a 35ºC ocorreu um aumento a partir de 7,25 mM. A analise da tensão póspausa, com e sem 10 µM de rianodina, revelou uma significante potenciação da força nas preparações controle a 25 ºC (100 para 119,8 ± 4.1 % ) e 15 ºC (100 para 118,4 ± 2,8 %), sendo inibida pela rianodina somente em 25 ºC (100 para 97,6 ± 1,5%). Em 35ºC, a força permaneceu inalterada em preparações controle, e houve uma significante queda no desenvolvimento de força após a pausa na presença rianodina (100 para 76,6 ± 4,6%). Com o aumento da freqüência de estimulação, observou-se que as tiras ventriculares alcançam freqüências elevadas quanto maior for a temperatura experimental. Quedas na Fc em preparações controle foram observadas somente em altas freqüências (a partir de 1,2 Hz). O TPT e o THR sofreram reduções significativas quando comparados aos valores obtidos inicialmente. A adição de concentração tônica de adrenalina (10-8 M) não alterou significativamente a Fc, o TPT e o THR, quando comparados com preparações controle. A 25ºC, o tratamento com rianodina provocou uma diminuição na Fc nas freqüências entre 0,2 até 0,8 Hz (42,5 e 32 %, respectivamente). Já à 35ºC, a adição de rianodina causou diminuição da Fc nas freqüências de 0,2 Hz até 1,2 Hz (44 e 25 %, respectivamente). O TPT e THR não sofreram alterações significantes após adição de rianodina. A combinação entre rianodina e elevada concentração de adrenalina (10-5 M) mostrou que nesta situação, os cardiomiócitos são capazes de recuperarem o inotropismo negativo causado pela rianodina, indicando uma potencial participação do influxo de Ca2+ através da sarcolema. Neste caso, o aumento da Fc foi acompanhado por aumentos no TPT e no THR. Os dados revelaram que o Ca2+ responsável pela ativação dos miofilamentos deve derivar de pelo menos duas fontes: os espaços extracelulares (evidenciado pelo aumento de Fc durante incrementos na concentração de Ca2+ extracelular) e uma fração significativa fornecida por fontes internas, ou seja, o RS.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5274.pdf: 984660 bytes, checksum: be57989a598b10b572f7a8db0e3cfc54 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Universidade Federal de Sao Carlos / Despite all the knowledge about the excitation-contraction coupling (E-C) in mammals, there are still large gaps in the knowledge of the cardiac myocytes physiology in other vertebrates. Thus, the study of groups underexplored such as reptiles is very important. Python snakes are of great interest regarding to the studies of the postprandial metabolism because the physiological responses are exacerbated when digesting large preys. Studies with these snakes showed hypertrophy of the cardiac tissue 2 to 3 days after feeding, coinciding with the peak of the specific dynamic action (SDA), but the consequences of this remodeling in myocardial contractility have not been studied, which was the purpose of this work. Specimens of Python molurus of both sexes, provided by the Jacarezário of UNESP / Rio Claro were brought to the Laboratory of Comparative Biochemistry and Zoofisiologia, UFSCar, where they remained for at least 15 days for acclimatization (30 °C). The snakes were divided into two groups: 28 days (sacrificed 28 days after feeding) and 2 days (sacrificed 2 days after feeding, in the peak of the SDA). Each snake (n = 10) was fed (Wistar rats with a 30% weight of the snake) and the sacrifice (decapitation) occurred according to the experimental feeding regime. After sacrifice, the hearts were removed, weighed to calculate the relative ventricular mass (MVR) and ventricular strips were prepared to analyse the following parameters: peak force (Fc), times to peak force (TPT) and to 50% relaxation (THR), the effect of experimental time (40 min), elevation of the stimulation frequency and post-rest tension, being the latter two protocols performed in the presence and absence of ryanodine. Differences were considered significant at p <0.05 (Student's t test). When compared to group 28 days, animals of group 2 days showed a significant increase in MVR. The Fc values in the protocols of effect of time and increasing frequency of electrical stimulation were higher in group 2 days when compared to the group 28 days. The rates of contraction and relaxation were lower in group 2 days, and the derivatives of the maximum contraction and relaxation showed higher values for this group compared to the group 28 days, indicating greater efficiency in the processes of contraction and relaxation during E-C coupling. In the post-rest tension protocol, there was no significant difference in force developed before and after the pause in control preparations, but the ryanodine reduced Fc of the first contraction after the pause in both groups. The increasing frequency of stimulation in the presence of ryanodine abolished the difference between the values of all analyzed parameters presented by the two experimental groups. The increase in the MRV of group 2 days associated with a greater efficiency of Ca2+ transport in cardiac tissue was responsible for the increase in Fc, important for maintaining cardiac output and blood flow at the high metabolism during digestion. The RS appears to contribute significantly to the calcium dynamics during E-C coupling of P. molurus, but further studies are necessary to fully understand this process. / Apesar de todo o conhecimento acerca do acoplamento excitação-contração (E-C) de mamíferos, restam ainda grandes lacunas no conhecimento da fisiologia dos miócitos cardíacos dos demais vertebrados. Desta forma, o estudo da fisiologia de grupos ainda pouco explorados como os répteis, é de fundamental importância. As pítons são serpentes de grande interesse no estudo do metabolismo pós-prandial por apresentar respostas exacerbadas quando da digestão de grandes presas. Estudos com estas serpentes mostraram hipertrofia do tecido cardíaco de 2 a 3 dias após a alimentação, no pico da chamada ação dinâmica específica (SDA), mas as conseqüências desta remodelação na contratilidade miocárdica não foram estudadas, o que se constituiu na meta do presente trabalho. Exemplares de Python molurus de ambos os sexos, cedidas pelo Jacarezário da UNESP/Rio Claro, foram trazidas para o Laboratório de Zoofisiologia e Bioquímica Comparativa da UFSCar, onde permaneceram por pelo menos 15 dias para aclimatação (30 ºC). As serpentes foram dividas em dois grupos: 28 dias (sacrificadas 28 dias após a alimentação) e 2 dias (sacrificadas 2 dias após alimentação, no pico da SDA). Cada serpente (n = 10) foi alimentada (1 rato Wistar com 30% peso da serpente) e o sacrifício (decaptação) ocorreu de acordo com o regime de alimentação do experimental. Após sacrifício, os corações foram retirados, pesados para o cálculo da massa ventricular relativa (MVR) e tiras ventriculares foram preparadas para avaliação dos seguintes parâmetros: pico de força (Fc), tempos para o pico de força (TPT) e para 50% de relaxamento (THR), efeito do tempo experimental (40 min), da elevação da freqüência de estimulação e da tensão pós-pausa, sendo os dois últimos protocolos realizados na presença e ausência de rianodina. Diferenças significativas foram consideradas quando p < 0,05 (teste t de Student). Os animais do grupo 2 dias apresentaram aumento da MVR em relação ao grupo 28 dias. Os valores de Fc, nos protocolos de efeito do tempo e do incremento da frequência de estimulação elétrica, foram maiores no grupo 2 dias quando comparados aos do grupo 28 dias. As taxas de contração e relaxamento foram menores no grupo 2 dias, e as derivadas máximas da contração e relaxamento apresentaram valores maiores para tal grupo comparando-se ao grupo 28 dias, indicando maior eficiência nos processos de contração e relaxamento durante o acoplamento E-C. No protocolo de tensão pós-pausa, não observou-se diferença significativa no desenvolvimento de força antes e após a pausa nas preparações controle, mas a rianodina reduziu a Fc na primeira contração após a pausa em ambos os grupos. O incremento da frequência de estimulação em presença de rianodina aboliu as diferenças entre os valores dos parâmetros estudados nos dois grupos experimentais. O aumento na MRV do grupo 2 dias associado a maior eficiência no transporte de Ca2+ no tecido cardíaco foi responsável pelo aumento da Fc, importante para a manutenção de um débito cardíaco e fluxo sanguíneo para a condição de elevado metabolismo durante a digestão. O RS parece contribuir significativamente na dinâmica de cálcio durante o acoplamento E-C das serpentes, no entanto mais estudos se fazem necessários para compreender plenamente seu papel.

Orientador: Regina Buffon / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-11T02:19:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sato_CintiaAkemi_M.pdf: 2497710 bytes, checksum: ed234ce28b62278b8777a943791d0170 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Neste trabalho, foram sintetizados complexos de paládio em que os ligantes fosforados estão ¿ancorados¿ em ciclofosfazenos. Estes complexos, em solução ou imobilizados em matrizes inorgânicas, foram testados nas reações de acoplamento de Suzuki (entre o ácido fenilborônico e o bromobenzeno, por exemplo), de Stille (entre o tributilvinilestanho e o bromotolueno) e de Heck (entre o estireno e o bromobenzeno). O resultado catalítico obtido com o catalisador sintetizado, em fase homogênea, na reação de Heck (TON = 3900, em 6 horas), foi muito bom, sendo superior a um catalisador análogo descrito na literatura. Na reação de Stille, o complexo, em fase homogênea, apresentou um ótimo resultado (TON = 4340, em 4 horas). Na reação de Suzuki, em fase homogênea, o TON obtido (123, em 24 horas) foi bom e comparável à literatura. Já em fase heterogênea, com o complexo encapsulado em matriz de sílica via processo solgel, os resultados obtidos, tanto na primeira reação quanto na primeira e segunda reciclagens, são superiores aos apresentados na literatura e apresentam o TON próximo ao obtido em fase homogênea, no mesmo tempo (92, 94 e 92 respectivamente), sem perda de desempenho. Estudos prospectivos para a imobilização do complexo em sílica foram realizados. O catalisador foi sintetizado com ligantes contendo grupos hidrolisáveis e ancorado em sílica. Este sistema foi testado nas reações de acoplamento de Stille e Suzuki, apresentando um bom desempenho nas duas reações (TON = 1400, em 4 horas, e 49, em 24 horas, respectivamente) sem constatação visual de lixiviação de paládio / Abstract: In this work, palladium complexes, in which phosphored ligands are ¿anchored¿ to cyclophosphazenes were synthesized. These complexes, in solution or immobilized in inorganic matrices, were tested in the Suzuki cross-coupling reaction (between phenylboronic acid and bromobenzene, for example), the Stille cross-coupling reaction (between tributylvinyltin and 3-bromotoluene) and the Heck reaction (between styrene and bromobenzene). The catalytic results obtained with the synthesized catalyst, in homogeneous phase, in the Heck reaction (TON = 3900, in 6 hours), was very good, better than those reported for a similar catalyst described in literature. In the Stille reaction, the complex, in homogeneous phase, presented an excellent result (TON = 4340, in 4 hours). In the Suzuki reaction, in homogeneous phase, the obtained TON (123, in 24 hours) was good and comparable to literature. In heterogeneous phase, with the complex encapsulated in silica matrix via the sol-gel process, the obtained results, in the first reaction as well as in the first and second recycling, are higher than those presented in literature and presented the TON close to that obtained in homogeneous phase, in the same reaction time (92, 94 and 92 respectively), without loss of performance. Prospective studies for the immobilization of the complex in silica were done. The catalyst was synthesized with ligands containing hydrolysable groups and anchored in silica. This system was tested in Stille and Suzuki cross-coupling reactions, showing a good performance in both reactions (TON = 1400, in 4 hours, and 49, in 24 hours, respectively) without visual evidence of palladium leaching / Mestrado / Quimica Inorganica / Mestre em Química