Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2772_1.pdf: 1233578 bytes, checksum: c5d72353d4447caaefbfcfee0bbe95be (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os derivados acridínicos têm despertado a atenção de vários pesquisadores por apresentarem um amplo espectro de atividades biológicas, como atividade antibacteriana, antimalárica, antitripanossômica, leishmanicida, antiviral e mais recentemente por sua atividade antitumoral. O LPSF/AC-04 é um derivado tiazacridínico e caracteriza-se por ser um pó amorfo, amarelo-esverdeado, de peso molecular 410 g/mol, com ponto de fusão igual a 199°C e uma baixa solubilidade em água, característica essa que dificulta sua utilização terapêutica. Sendo assim, a incorporação deste fármaco em sistemas de liberação controlada, tais como, os lipossomas, torna-se uma alternativa viável para sua utilização. O controle de qualidade de fármacos puros e em formas farmacêuticas é realizado por métodos oficiais ou validado. A espectrofotometria é uma técnica analítica bastante conveniente, muito utilizada em laboratórios de controle de qualidade, devido à sua simplicidade, baixo custo e larga disponibilidade. Assim, o presente estudo visou o desenvolvimento de um método analítico, para a quantificação do LPSF/AC-04 por espectrofotometria-UV, aplicado ao fármaco e dele nanoencapsulado em lipossomas. Inicialmente, um método espectrofotométrico UV para o doseamento do LPSF/AC-04 em lipossomas foi desenvolvido avaliando os seguintes parâmetros preconizados pelo ICH: linearidade, precisão, exatidão, robustez e limites de detecção e quantificação. O LPSF/AC-04 foi determinado em metanol a 250 nm, onde o coeficiente de absortividade (ε) encontrado foi 7,60 × 104 L.mol−1.cm−1. O método espectrofotométrico para determinação do LPSF/AC-04 em lipossomas foi linear na faixa de concentração de 0,3 a 2 μg/mL Absorbância = 0,18068 x [LPSF/AC-04] (μg/mL) + 0,00348 e o coeficiente de regressão encontrado foi (r2 = 0,9995). O método proposto foi sensível para os limites de detecção e quantificação foram de 0,047 e 0,143 μg/mL, respectivamente. O método se mostrou preciso, já que todas as amostras analisadas apresentaram coeficiente de variação menor que 5 % e estatisticamente não houve diferença entre as concentrações teóricas e práticas. O método se apresentou robusto, sem diferenças estatisticamente significativas frente à variação do fabricante do solvente e da temperatura. Na exatidão foi possível observar a recuperação do fármaco que variou entre 99,4 ± 0,67 % a 100,5 ± 1,91% estando dentro dos limites recomendados. O teor e a eficiência de encapsulação do LPSF/AC-04 em lipossomas foi de 104,44 ± 1,56% e de 99,68 ± 0,24%, respectivamente. O método analítico proposto mostrou-se, portanto, simples, rápido, exato, preciso e de baixo custo podendo ser utilizado para análises de rotina do LPSF/AC-04 matéria prima e em formulações farmacêuticas, como por exemplo, os lipossomas

Submitted by Cristhiane Guerra (cristhiane.guerra@gmail.com) on 2017-02-03T14:26:05Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1920368 bytes, checksum: a0cab7d082218cd820a2d1c4f4b184f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-03T14:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1920368 bytes, checksum: a0cab7d082218cd820a2d1c4f4b184f7 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cancer is a major public health problem worldwide and is considered a group of diseases characterized by uncontrolled growth and multiplication of abnormal cells that can invade various tissues. Treatment has been benefited from research that seek to reduce toxicity and increase the effectiveness of different anticancer drugs. Acridine derivatives have a number of proven biological activities, and amsacrine, an antineoplastic used for the treatment of leukemias and lymphomas, is the main representative of the group. This study aimed to evaluate the toxicity and antitumor activity of acridine- derived N’-(2-chloro-6-methoxy-acridin-9-yl)-2-cyano-3-(4-dimethylaminophenyl)-acrilohydrazide (ACS-AZ10). In the assessment of cytotoxicity in mouse erythrocytes it was observed that ACS-AZ10 did not cause hemolysis at the concentrations tested (up to 1250 μg / ml), suggesting low toxicity in erythrocytes. After acute administration of ACS-AZ10 (2000 mg / kg) in mice intraperitoneally (ip), characteristic effects of changes in the central nervous system among them, writhing and abduction of the legs of the rear train, were observed. The estimated LD50 (dose that produces death in 50% of experimental animals) was around 2500 mg / kg. The ACS-AZ10 (15 or 30 mg / kg), after a nine days treatment (ip) showed significant antitumor activity in vivo in Ehrlich ascites carcinoma model (EAC), considering the volume parameters, mass, viability and total cell count. Treatment at the dose 7.5 mg/kg induced an increase in sub-G1 peak, with a consequent reduction in the percentage of cells in G0/G1 and S phases of cell cycle, suggesting death by apoptosis. However, treatment with 15 mg/kg induced cell cycle arrest in G2/M phase and a reduction of the fraction G0/G1 and S, suggesting a pre-mitotic blockade. The treatment with different doses of ACS-AZ10 significantly reduced the angiogenic capacity of the EAC, thus it can be inferred that the ACS-AZ10´s antitumor mechanism of action involves, at least in part, an anti-angiogenic effect. The toxicological analysis indicated that after nine days of treatment with ACS-AZ10, low haematological and biochemical toxicity were observed. Histopathological analysis indicated liver damage following treatment with ACS-AZ10, however, the damage was considered mild and reversible. ACS-AZ10 induced no increase in the quantity of micronucleated erythrocyte in micronucleus test, indicating the absence of genotoxic under the conditions evaluated. Therefore, it is possible to infer that the ACS-AZ10 has potent antitumor activity in vivo with low toxicity. / O câncer é um importante problema de saúde pública em nível mundial, sendo considerado um grupo de doenças caracterizadas pelo crescimento descontrolado e multiplicação de células modificadas que podem invadir diversos tecidos. Seu tratamento tem se beneficiado das pesquisas que buscam reduzir a toxicidade e aumentar a eficácia de diferentes fármacos antineoplásicos. Os derivados da acridina possuem diversas atividades biológicas comprovadas, sendo a amsacrina, um antineoplásico usado para o tratamento de leucemias e linfomas, o principal representante do grupo. Esse trabalho teve como objetivo avaliar a toxicidade e atividade antitumoral do derivado acridínico N’-(2-cloro-6-metoxi-acridin-9-yl)-2-ciano-3-(4-dimetilaminofenil)-acrilohidrazida (ACS-AZ10). Na avaliação da citotoxicidade em eritrócitos de camundongos foi possível observar que o ACS-AZ10 em concentração de até 1250 g/mL não causou dano direto a membrana de eritrócitos de camundongos, sugerindo atividade intracelular em hemácias. Após administração aguda do ACS-AZ10 (2000 mg/kg) em camundongos por via intraperitoneal (i.p.), foram observados efeitos característicos de alterações no Sistema Nervoso Central dentre estes, contorções abdominais e abdução das patas do trem posterior. O valor estimado da DL50 (dose que produz morte de 50% dos animais experimentais) foi em torno de 2500 mg/kg. O ACS-AZ10 (15 ou 30 mg/kg), após nove dias de tratamento (i.p.), mostrou significante atividade antitumoral in vivo em modelo de Carcinoma Ascítico de Ehrlich (CAE), considerando os parâmetros volume, massa, viabilidade e total celular. O tratamento na dose 7,5 mg/kg induziu um aumento do pico sub-G1, com consequente redução da percentagem de células nas fases G0/G1 e S do ciclo celular, o que sugere morte por apoptose. No entanto, o tratamento com a dose de 15 mg/kg induziu parada do ciclo celular na fase G2/M e diminuição da fração G0/G1 e S, o que sugere um bloqueio pré-mitótico. O tratamento com as diferentes doses de ACS-AZ10 diminuiu significativamente a capacidade angiogênica do CAE, desta forma, pode-se inferir que o mecanismo de ação antitumoral do ACS-AZ10 envolve, pelo menos parcialmente, um efeito antiangiogênico. As análises toxicológicas indicaram que, após nove dias de tratamento com ACS-AZ10 foi observada baixa toxicidade hematológica e bioquímica. A análise histopatológica indicou danos hepáticos após o tratamento com ACS-AZ10, entretanto, os danos foram considerados leves e reversíveis. O ACS-AZ10 não induziu aumento na quantidade de eritrócitos micronucleados no ensaio do micronúcleo, o que indica ausência de genotoxicidade, nas condições avaliadas. Portanto, é possível inferir que o ACS-AZ10 apresenta potente atividade antitumoral in vivo com baixa toxicidade.