Erysipelothrix rhusiopathiae é um importante patógeno em suinocultura e apesar do uso freqüente de vacinas contra o mesmo na maior parte das propriedades produtoras do país, a ocorrência de quadros clínicos da infecção tem sido amplamente observada e diagnosticada. Tendo em vista o ressurgimento deste agente como causa de prejuízos econômicos para a indústria suinícola nacional e seu potencial risco à saúde pública, este estudo teve como objetivo caracterizar 151 amostras de Erysipelothrix spp. isoladas de suínos nos útlimos 30 anos por meio de sorotipagem, determinação da susceptibilidade antimicrobiana, AFLP e PFGE. Dentre os 151 isolados, 139 foram classificados em 18 sorotipos diferentes (1a, 1b, 2a, 2b, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 11, 12, 15, 17, 19, 21, 24 e 25), sendo que o sorotipo 2b foi o mais freqüente. Os perfis de susceptibilidade antimicrobiana foram muito semelhantes entre os isolados, o que impossibilitou a subtipagem dos isolados de Erysipelothrix spp. pelos testes de sensibilidade. Dentre os primers testados no AFLP, o HI-G foi o mais adequado à tipagem molecular de Erysipelothrix spp. Apesar do AFLP/HI-G e da PFGE apresentarem o mesmo índice discriminatório (0,98), a PFGE apresentou melhor relação com os dados epidemiológicos que o AFLP/HI-G, tendo em conta os agrupamentos por ela gerados. Independente da técnica molecular empregada, não foi observado a discriminação entre isolados recentes e históricos, bem como um padrão epidemiológico fixo de agrupamento dos mesmos. Contudo, o AFLP/HI-G pode ser uma alternativa interessante para diferenciar as espécies de Erysipelothrix, assim como a PFGE tem grande potencial para agrupar isolados deste gênero de acordo com os sorotipos. / Erysipelothrix rhusiopathiae is an important pathogen in swine production and even with the frequent use of vaccines against it in most of Brazilian pig farms, the occurrence of clinical manifestations of its infection has been widely observed and diagnosed. Given the resurgence of this agent as a cause of economic losses to the national pig industry and its potential risk to public health, this study aimed to characterize 151 samples of Erysipelothrix spp. isolated from swine in last 30 years by serotyping, determination of antimicrobial susceptibility, AFLP and PFGE. Among the 151 isolates, 139 were classified in 18 different serotypes (1a, 1b, 2a, 2b, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 11, 12, 15, 17, 19, 21, 24 and 25) and serotype 2b was the most frequent. The susceptibility profiles were very similar among the isolates, which precluded the subtyping of Erysipelothrix spp. isolates by sensitivity tests. Among the primers tested in AFLP, the HI-G was the most suitable for molecular typing of Erysipelothrix spp. Despite AFLP/HI-G and PFGE provided the same discriminatory index (0.98), PFGE presented better relationship with epidemiological data than AFLP/HI-G, given the types of groups generated by it. Regardless of the molecular technique employed, there was no discrimination between recent and historical isolates as well as a fixed epidemiological pattern of grouping them. Nevertheless AFLP/HI-G could be an interesting alternative for Erysipelothrix species discrimination, even as PFGE has a good potential to diferenciate this genus according to serotypes.

O uso correto de produtos químicos com ação antimicrobiana na terapêutica de feridas tem sido uma das preocupações dos profissionais da saúde. A temática em questão representa uma séria problemática agravada, principalmente, pela diversidade de opções, o que traz a insegurança sobre qual é a mais indicada, bem como, pelo uso indiscriminado o que pode resultar na seleção de cepas resistentes. Diante do exposto, foi estabelecido como objetivos: avaliar in vitro a atividade antimicrobiana do ácido acético e do vinagre por meio da Técnica de Difusão de Poço sobre as cepas de Pseudomonas aeruginosa, E. coli e Staphylococcus aureus; determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM); e revelar a citotoxicidade dos referidos produtos sobre Artemia salina Leach. Para análise estatística foi usado o teste de variância ANOVA – ONEWAY seguida do teste de comparações múltiplas; com nível de significância &#61537; = 5%. Assim sendo, pelo método de difusão de poço o vinagre branco, tinto (30,0 e 25,0%) e o ácido acético a 1,0 são mais eficazes que o ácido acético a 0,7%, vinagre branco e tinto a 10,0% (p<0.05) sobre as cepas de Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. Vale considerar que os produtos analisados não apresentaram ação antimicrobiana sobre Staphylococcus aureus. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) do ácido acético nas cepas avaliadas foi a 0,25%, e do vinagre branco a 2,0% para Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli sendo que para Staphylococcus aureus a 3,0%. As cepas de P. aeruginosa e E. coli foram todas inibidas pelo vinagre tinto a 1,5%, e sobre as de Staphylococcus aureus a 3,0%. Ainda, com relação a CIM dos produtos químicos testados, não se verificou diferença entre cepas de Staphylococcus aureus hospitalar e comunidade. O ácido acético foi citotóxica em todas as concentrações estudadas. Já, o vinagre branco e tinto em 0,25% e 0,125% não apresentaram citotoxicidade. Ainda que, não tenha sido a preocupação nesse momento de buscar correlação entre os dados desse estudo com o uso in vivo é importante atentar que tais produtos têm sido amplamente utilizados como agente antimicrobiano no tratamento de feridas, e muitas vezes em concentrações elevadas que podem causar danos aos tecidos dificultando, assim, o processo de cicatrização. A nosso ver é premente despertar nos profissionais da saúde a consciência crítica-reflexiva em relação à utilização das evidências científicas de maneira que possam analisar e aplicar com critério os resultados das pesquisas em prol da qualidade da assistência à saúde. / One of the concerns of health professionals has been the correct use of chemical products with antimicrobial action on wound therapeutics. This issue represents a serious problem, which is made even worse due to the facts that there is a diversity of options of products, which builds insecurity in regards to which product is more appropriate, and there is an uncontrolled use that may result in the selection of resistant species. In this sense, we set the following goals for this study: perform an in vitro assessment of the antimicrobial activity of acetic acid and vinegar using the Technique of Diffusion of Well on strains of Pseudomonas aeruginosa, E. coli, and Staphylococcus aureus; determine the Minimal Inhibitory Concentration (MIC); and reveal the cytoxicity of the referred products over Artemia salina Leach. ANOVA – ONEWAY test was used for statistic analysis, followed by the multiple comparison test; with a significance level &#61537; = 5%. By the well diffusion technique, the white vinegar, red vinegar (30 and 25%), and the acetic acid at 1.0 % are more effective than the acetic acid at 0.7%, white and red vinegar at 10% (p<0,05) over the strains of Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. The analyzed products did not present antimicrobial actions over Staphylococcus aureus. The Minimal Inhibitory Concentration for the acetic acid on the species was 0.25%. For white vinegar on Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli was 2.0%, and 3.0% on Staphylococcus aureus. All P. aeruginosa and E. coli were inhibited by red vinegar at 1.5%, and at 3.0% for Staphylococcus aureus. In regard to the MIC of the tested chemical products, no difference was found between the hospital and community Staphylococcus aureus. Acetic acid was cytotoxic in all studied concentrations, while white and red vinegar in 0.25% and 0.125% did not show any cytoxicity. Although this study was not concerned with finding a relation among the study’s data with the in vivo use, it is important to observe that such products have been largely used as antimicrobial agents for wound treatment, at concentrations often so high that human tissue might suffer damage; thus hindering the healing process. It is, therefore, essential to stimulate health professionals a critical-reflexive consciousness regarding the use of scientific evidence in a way to analyze and apply the research outcomes in favor of a quality health care.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-01T17:30:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Pedro Henrique Sette de Souza.pdf: 2241268 bytes, checksum: d87c15506247703a80894f65522a48b2 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-04-12T17:26:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Pedro Henrique Sette de Souza.pdf: 2241268 bytes, checksum: d87c15506247703a80894f65522a48b2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-12T17:31:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Pedro Henrique Sette de Souza.pdf: 2241268 bytes, checksum: d87c15506247703a80894f65522a48b2 (MD5) Previous issue date: 2015-05-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / BACKGROUND: The search for viable alternatives for the treatment of oral infections is important since resistance to antibiotics has become a big problem in medical science. OBJECTIVE: To evaluate the potential of extracts from bark’s Schinopsis brasiliensis Engl. to development of dental products. METHODS: The ethanol and hydroalcoholic extracts were produced by maceration and ultrasound. The liquid-liquid partition was performed with hexane, chloroform and ethyl acetate. The phytochemical screening was performed using the sample solution with standard reagents for quantification of secondary metabolites. The identification and quantification of chemical marker was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Microparticles were produced in by spray dryer. The encapsulation efficiency was measured by absorbance difference of encapsulated extract content and the content found on the surface of the microparticles. Thermal degradation was observed by thermogravimetry (TG) and differential thermal analysis (DTA) in a nitrogen atmosphere. The cytotoxic potential was analyzed based on the potential Hemolyzing and the selectivity index (SI) of the samples. In addition, the antibacterial activity was evaluated based on minimum inhibitory concentration (MIC) against ATCC standard strains of Streptococcus mutans, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus salivarius, Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis, as well as a clinical isolate of E. faecalis and testing by bioautography. The sample with better outcome in these tests was subjected to characterization by Gas Chromatography / Mass Spectrometry (G/MS) as well as the process of separation by column chromatography. RESULTS: Gallic acid was identified as a major compound in the samples analyzed. All samples were able to inhibit the growth of the microorganisms, with the exception of E. faecalis clinical isolate, in a concentration of ≤ 1.0 mg/mL and showed no cytotoxicity up to 22 SI. The ethanol extract absorbs less heat than their fractions. All samples exhibit exothermic peak compatible with the degradation of gallic acid. The fraction that showed the best antimicrobial activity was the hexane fraction (MIC = 0.125 mg / mL), subsequently used to perform the chromatography column and bioautography, resulting in 12 new subfractions. The fraction G showed a MIC lower than hexane fraction against E. faecalis, 0.063 mg/mL. GC/MS revealed the presence of β-sitosterol in the hexane fraction. The microparticle produced with a flow rate of 0.4 mL/min showed the highest encapsulation efficiency (88%) and better MIC (0.250 mg/mL and 0.500 mg/mL) to both E. faecalis, even with the lowest concentration of phytocompounds. Only the hydroalcoholic extract used for making the microparticles showed flavonoids (10.16 mg). The microparticle 4 absorbs more heat than all other samples, degrading more than the others. CONCLUSION: All tested samples from S. brasiliensis Engl. showed potential to be used as a basis for the development of dental products for combating oral infections. / INTRODUÇÃO: A busca de alternativas viáveis para o tratamento das infecções bucais é de suma importância, uma vez que a resistência aos antibióticos se tornou um grande problema para a ciência médica. OBJETIVO: Avaliar o potencial de extratos da casca da S. brasiliensis Engl. para desenvolvimento de produtos odontológicos. MÉTODOS: Os extratos etanólico e hidroalcóolico foram produzidos por maceração e ultrassom. A partição líquido-líquido foi realizada com hexano, clorofórmio e acetato de etila. A triagem fitoquímica foi feita através da solução de amostras com reagentes padrões para quantificação de metabólitos secundários. A identificação e quantificação do marcador químico foi realizado através da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC). As micropartículas foram produzidas em um aparelho de spray dryer. A eficiência de encapsulação foi aferida através da diferença de leitura em espectrofotômetro do teor do extrato encapsulado e do teor encontrado na superfície das micropartículas. A degradação térmica foi observada por termogravimetria (TG) e analise térmica diferencial (DTA), em uma atmosfera de nitrogênio. Já o potencial citotóxico foi analisado com base no potencial hemolisante e do índice de seletividade (IS) das amostras. Além disso, a ação antibacteriana foi avaliada com base na concentração inibitória mínima (CIM) frente a cepas padrões ATCC de Streptococcus mutans, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus salivarius, Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis, bem como um isolado clínico de E. faecalis e do ensaio por bioautografia. A amostra com melhor resultado nesses ensaios foi submetida a caracterização por Cromatografia Gasosa/Espectrometria de Massa (GC/MS) bem como ao processo de separação por Cromatografia em Coluna. RESULTADOS: O ácido gálico foi identificado como composto majoritário nas amostras analisadas. Todas as amostras foram capazes de inibir o crescimento dos microrganismos testados, com exceção do isolado clínico de E. faecalis, em uma concentração ≤ 1,0 mg/mL e não apresentaram citotoxicidade com IS superior a 22. O extrato etanólico absorve menos calor do que as suas frações. Todas as amostras apresentam pico exotérmico compatível com a degradação do ácido gálico. A fração que apresentou melhor atividade antimicrobiana foi a fração hexano (CIM = 0,125 mg/mL), posteriormente utilizada para realização da Cromatografia em Coluna e bioautografia, resultando em 12 novas subfrações. A fração G apresentou CIM inferior à da fração hexano frente aos E. faecalis, 0,063 mg/mL. A GC/MS revelou a presença βSitosterol na fração hexano. A micropartícula produzida com vazão de 0.4 mL/min apresentou a maior eficiência de encapsulação (88%) e melhor CIM (0,250 mg/mL e 0,500 mg/mL) frente aos E. faecalis, mesmo apresentando a menor concentração de fitocompostos. Apenas o extrato hidroalcóolico utilizado para confecção das micropartículas apresentou flavonoides (10,16 mg). A micropartícula 4 absorve mais calor do que todas as outras amostras, se degradando mais que as demais. CONCLUSÃO: Todas as amostras testadas provenientes de S. brasiliensis Engl. apresentam potencial para serem utilizados como base para o desenvolvimento de produtos odontológicos para combater as infecções bucais.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-02T18:19:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Deysiane Oliveira Brandão.pdf: 3147875 bytes, checksum: 4e032a8ddfe55546168a4cf23c724b4c (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-06-13T20:33:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 PDF - Deysiane Oliveira Brandão.pdf: 3147875 bytes, checksum: 4e032a8ddfe55546168a4cf23c724b4c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-13T20:37:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 PDF - Deysiane Oliveira Brandão.pdf: 3147875 bytes, checksum: 4e032a8ddfe55546168a4cf23c724b4c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Due to the absence of a fully effective intracanal formulation, the search for new drugs from medicinal plants is necessary.In this case the Ximenia americana L., stink plant widely used in traditional medicine as antibacterial, may be used develop new formulations intracanal. However, there is no standardization of their extract by the pharmaceutical industry, with regard to studies of pre-formulation and standardization of analytical techniques to determine its safety, efficacy and quality. In this context, this study aimed to develop from X. americana L. one intracanal paste , with antimicrobial activity, applying parameters validation process for testing and microbiological potency determination of major chemical component, toxicological studies and drug excipient compatibility. Two types of extracts were obtained from the bark of X. American L, hydroalcoholic which was subsequently sprayed in spray dryer and that ethanol extract was concentrated on a rotary evaporator. For determination of antimicrobial activity, used the hidroalcólicos extracts applying the technique of agar / cylinder diffusion. Toxicological tests consisted in acute toxicity and cytotoxicity. Phytochemical analysis was based on quantitative determination of total polyphenols, total flavonoids, tannins condensed and total saponins. The major chemical compound was identified as gallic acid by high performance liquid chromatography efficiency as well as its determination, which was validated according to the official compendia. The validation of microbiological assay was performed X. American compared to standard (gallic acid). The study drug / excipient compatibility was accomplished by applying analytical techniques and term spectroscopy in the infrared region. X. American, showed activity against Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus oralis and Klebsiella pneumoniae. As biosecurity, this plant showed no toxicity in the assays analyzed. Phytochemical analysis showed good concentrations of secondary metabolites. The marker was identified and quantified in the concentration of 12μg/mL. Regarding the microbiological assay, this presented, linearity, accuracy, precision, limits of detection and quantification and robustness. As for the compatibility study excipients that were incompatible in thermoanalytical techniques, spectroscopy, these incompatibilities were not as intense, with respect to removal of functional groups of excipients and the dry extract. Thus studies that show the development of a herbal medicine, as well as the characterization and standardization of the extract of X. American L are important because lack of official methodology that proves the quality, safety and efficacy of these products. / Devido a ausência de uma formulação intracanal totalmente eficaz, é necessária a pesquisa de novas medicações a partir de plantas medicinais. Nesse caso a Ximenia americana L., planta da catinga, amplamente utilizada pela medicina tradicional como antibacteriano, pode ser indicada para desenvolvimento de formulações intracanais. Todavia, não existe uma padronização do seu extrato pela indústria farmacêutica, no que diz respeito a estudos de préformulação e padronização de técnicas analíticas para determinação de sua segurança, eficácia e qualidade. Nesse contexto, com esse estudo pretendeu desenvolver a partir de X. americana L. uma pasta intracanal, com atividade antimicrobiana, aplicando parâmetros de validação de processo para os ensaios de potencia microbiológica, doseamento do componente químico majoritário, estudos toxicológicos e de compatibilidade fármaco excipiente. Foram obtidos dois tipos de extratos a partir da casca de X. americana L, hidroalcóolicos que posteriormente foi selecionado nebulizado em spray dryer e extrato etánolico que foi concentrado em evaporador rotativo. Para determinação, da atividade antimicrobiana, utilizou os extratos hidroalcólicos aplicando a técnica de difusão ágar/cilindros. Os ensaios toxicológicos consistiram na determinação da toxicidade aguda e citotoxicidade. A análise fitoquímica foi baseada na determinação quantitativa de polifenóis totais, flavonoides totais, taninos condensados e saponinas totais. O composto químico majoritário foi identificado como ácido gálico através da cromatografia líquida de alta eficiência, assim como seu doseamento, o qual foi validado de acordo com os compêndios oficiais. Foi realizado o processo de validação do doseamento microbiológico da X. americana em relação ao padrão (ácido gálico). O estudo de compatibilidade fármaco/excipiente foi realizado aplicando técnicas termo analíticas e espectroscopia na região do infravermelho. X. americana L, apresentou atividade contra Staphilococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus oralis e Klebsiella pneumoniae. Quanto a segurança biológica, essa planta não apresentou toxicidade nos ensaios analisados. A análise fitoquímica demonstrou níveis aceitáveis de concentrações de metábólitos secundários. O marcador foi identificado e quantificado na concentração de 12µg/mL. Quanto ao doseamento microbiológico, esse apresentou linearidade, precisão exatidão, limites de detecção e quantificação e robustez dentro das especificações. Quanto ao estudo de compatibilidade os excipientes que foram incompatíveis nas técnicas termoanalíticas, na espectroscopia essas incompatibilidades não foram tão intensas, no que respeito a supressão de grupos funcionais dos excipientes e do extrato seco. Assim estudos que mostrem o desenvolvimento de um medicamento fitoterápico, bem como a caracterização e padronização do extrato de X. americana L\ são importantes, devido falta de metodologia oficial que comprove a qualidade, segurança e eficácia de destes produtos.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudia Comandolli.pdf: 4289017 bytes, checksum: 2bef35ae167e04ceccfedeedc54fbb31 (MD5) Previous issue date: 2010-12-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of the present study was to evaluate the antimicrobial, antioxidant and cytotoxicity potentials of extracts of leaves and branches of Casearia javitensis, and to purify and identify their secondary metabolites. Leaves and branches were collected in Reserva Adolpho Ducke, Manaus, AM. The plant material was dried, grinded and the extracts were prepared with DCM, MeOH and water using ultrasound for 20 minutes each. The extracts were concentrated and tested for antibacterial, cytotoxicity and antioxidant activity. Antibacterial activity assays were done using the agar diffusion method by well technique, against Aeromonas hydrophila, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. Minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) were measured for the most active extracts. The cytotoxicity assay employed brine shrimp Artemia salina and the evaluation of antioxidant activity used a method with DPPH and ascorbic acid. DCM branches extract was fractioned in chromatographic column (CC), and recrystallization. Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) and Nuclear Magnetic Resonance (NMR) analyses afforded steroids, as β-sitosterol. DCM extracts of leaves and branches were analyzed by GC-MS in appropriated conditions to steroids and triterpenes analyses, and triterpene friedelin was detected in branches extracts. Antimicrobial assay showed high activity for branches MeOH extract and leaves MeOH extract against A. hydrophila, MIC value < 2 mg/mL and showed no cytotoxicity in Artemia salina. These MeOH extracts were dissolved in water and partitioned between dichloromethane (DCM), ethyl acetate (AcOEt) and n-buthanol (n-BuOH), and these phases were tested for antibacterial activity. The AcOEt phases were the most active, and showed high antimicrobial activity. The DCM phase from branches MeOH extract was fractioned by CC and afforded β-friedelanol. The AcOEt fraction of branches MeOH extract was fractioned by CC and some fractions were purified by HPLC, and afforded five phenolic glycosides, which structures are not yet determined. 1D and 2D-NMR and mass spectrometry analyses are still on progress. The n BuOH phase from branches MeOH extract was fractioned by exclusion chromatography (Sephadex LH-20) and subjected to CC over a Poliamide-6 column, and NMR analyses of one fraction suggest the presence of a phenolic glycoside. / O presente trabalho teve por objetivo isolar e identificar os metabólitos secundários presentes nos extratos de Casearia javitensis, assim como avaliar o potencial antimicrobiano, citotóxico e antioxidante destes extratos. Para o trabalho, foram realizadas quatro coletas na Reserva Adolpho Ducke, Manaus-AM. Os materiais coletados foram secos, moídos e extraídos em ultrassom com diclorometano (DCM), metanol (MeOH) e H2O. Para os testes antimicrobianos, utilizou-se o método de difusão em ágar, pela técnica de poço, contra Aeromonas hydrophila, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Mínima Bactericida (CMB) foram determinadas para os extratos mais ativos. O ensaio citotóxico utilizou Artemia salina como organismo-teste e o ensaio de atividade antioxidante empregou o método quantitativo utilizando o radical DPPH e equivalência com o ácido ascórbico. O extrato DCM dos galhos foi fracionado por coluna cromatográfica (CC) e uma fração foi purificada através de recristalização. Frações analisadas por Cromatográfo à Gas acoplado à Espectrometria de Massas (CG-EM) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN) mostraram presença de esteroides, possuindo o β-sitosterol como majoritário nas frações. Os demais extratos DCM foram analisados por CG-EM em uma condição para análise de esteroides e triterpenos, e o triterpeno friedelina foi detectado nos extratos dos galhos. O extrato metanólico dos galhos da primeira coleta e o extrato metanólico das folhas da terceira coleta apresentaram halos de inibição superiores a 10 mm no teste contra Aeromonas hydrophila, CIM abaixo de 2 mg/mL e ausência de atividade citotóxica em Artemia salina. Estes extratos foram submetido à partição com diclorometano (DCM), acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-BuOH), e as fases obtidas foram avaliadas para atividade antimicrobiana. As fases AcOEt destes extratos mostraram-se como as mais ativas, concentrando a atividade antimicrobiana. A fase DCM do extrato MeOH dos galhos foi fracionada por sucessivas CCs e uma fração mostrou a presença de β-friedelanol por análise em CG-EM. A fase AcOEt foi fracionada por CC e algumas frações foram purificadas por CLAE, fornecendo cinco fenólicos glicosilados, os quais a determinação estrutural ainda não está concluída, pois espectros de RMN mono e bidimensionais são necessários para a conclusão desta etapa. A fase n -BuOH foi fracionada em CC utilizando Sephadex LH-20 e CC de Poliamida-6, e o espectro de RMN de uma fração semipurificada sugere a presença também de fenólicos glicosilados.

Atualmente, um dos tópicos mais relevantes da Química Ambiental é a qualidade da água. A preocupação com micropoluentes, poluentes que estão presentes no meio ambiente em con-centrações de &mu;g L-1 a ng L-1, tem aumentado recentemente. O objetivo deste trabalho foi estudar a degradação de antibióticos de duas classes: norfloxacina (fluoroquinolona), sulfati-azol e sulfametazina (sulfonamidas) e o anti-inflamatório não esteroide diclofenaco de sódio pelo acoplamento do Processo Ferro Zero, com nanopartículas de Fe0 ou lã de aço comercial, ao Processo Fenton. Teve-se como metas a identificação de produtos de degradação, a avali-ação da ecotoxicidade (Lactuca sativa) e da atividade antimicrobiana (Escherichia coli). Os experimentos de degradação foram realizados via planejamento fatorial 22 com a finalidade de se determinar os efeitos dos parâmetros reacionais (pH e vazão) sobre o desempenho do Processo Ferro Zero. As partículas de Fe0 sintetizadas foram nanométricas (&lt; 100 nm), verificou-se a sua morfologia esférica e constatou-se a presença de Fe0, óxidos de ferro e hidróxidos de ferro. O Processo Ferro Zero em meio óxico, utilizando as NPFe0 ou a lã de aço comercial, obteve remoções de 31,5 ± 1,5% ou 51,9 ± 3,9%, respectivamente. Ao se realizar o Processo Ferro Zero em meio anóxico, observou-se que a degradação redutiva foi mais eficiente que a oxidativa, removendo-se aproximadamente 51,4 ± 2,3% ou 59,6 ± 1,9% com nanopartículas de Fe0 ou lã de aço comercial, respectivamente. Para o sulfatiazol obtiveram-se remoções de 77,7 ± 1,9% ou 73,4 ± 3,2%, para a sulfametazina remoções de 54,8 ± 2,7% ou 50,6 ± 2,8% e, para a norfloxacina, 68,9 ± 2,2% ou 67,2 ± 2,0%, quando se utilizaram as nanopartículas de ferro metálico ou a lã de aço comercial, respectivamente. Todos os processos não geraram ecotoxicidade ao organismo-teste (Lactuva sativa). Entretanto, as nanopartículas de Fe0 foram mais eficientes na remoção da atividade antimicrobiana (Escherichia coli) e produziram menores concentrações de ferro dissolvido ao final do tratamento, sendo mais indicadas para a degradação da norfloxacina. O uso das nanopartículas de ferro foi capaz de, praticamente, remover a atividade antimicrobiana da norfloxacina. / Presently, one of the most relevant topics in environmental chemistry is water quality. The concern with micropollutants, which are pollutants present in the environment in concentra-tions ranging from &mu;g L-1 to ng L-1, has recently increased. The objective of this work was to study the degradation of the antibiotics: norfloxacin (fluoroquinolone), sulfathiazole, and sulfamethazine (sulfonamides) and the nonsteroidal anti-inflammatory sodium diclofenac by coupling Zero-Valent Iron (with Fe0 nanoparticles or commercial steel wool) and Fenton pro-cesses. The study aimed at identifying degradation products and assessing ecotoxicity (Lactuca sativa) and antimicrobial activity (Escherichia coli). The degradation experiments followed a factorial design 22 in order to determine the effects of the reaction parameters (pH and flow rate) on the performance of the Zero-Valent Iron process. Iron nanoparticles were synthesized (&lt; 100 nm), their spherical morphology checked, and the presence of Fe0, iron oxides, and iron hydroxide confirmed. The Zero-Valent Iron process in oxic media, using NPFe0 or commercial steel wool, obtained removals of 31.5 ± 1.5% or 51.9 ± 3.9%, respec-tively. Using the Zero-Valent Iron process in anoxic medium, it was observed that the reduc-tive degradation was more efficient than the oxidative one, removing approximately 51.4 ± 2.3% and 59.6 ± 1.9% when using Fe0 nanoparticles and commercial steel wool, respectively. For sulfathiazole, sulfamethazine, and norfloxacin, removals of 77.7 ± 1.9% or 73.4 ± 3.2%, 54.8 ± 2.7% or 50.6 ± 2.8%, and 68.9 ± 2.2% or 67.2 ± 2.0% were obtained when Fe0 nano-particles or commercial steel wool trade were used, respectively. All of the processes did not generate ecotoxicity towards the test-organism (Lactuva sativa). However, the Fe0 nanoparti-cles were more effective in removing the antimicrobial activity (Escherichia coli) and pro-duced lower concentrations of dissolved iron at the end of the treatment, being more suitable for degrading norfloxacin. The use of the iron nanoparticles was able to virtually remove the antimicrobial activity of norfloxacin.

O objetivo desta pesquisa foi estudar a degradação,pelo processo foto-Fenton, de um poluente-modelo (um antibiótico da classe dos nitrufuranos:a nitrofurantoína), utilizando-seLEDs-UV no lugar das lâmpadas tradicionalmente utilizadas, ou seja, das lâmpadas fluorescentes negras.Foram comparadas duas câmaras de irradiação, cada uma com um tipo de fonte, em termos de: porcentagem de remoção, ecotoxicidade (Lactuca sativa), atividade antimicrobiana (Escherichia coli), custos de capital (equipamentos), de operação (consumo energético) e das fontes luminosas, além do espaço ocupado. Os experimentos de degradação foramrealizados e otimizados via planejamento experimental, utilizando-se a Metodologia de Superfície de Resposta, obtendo-se as concentrações ótimas denitrofurantoína, de íons férricoe de peróxido de nitrogênio para cada caso.As câmaras estudadas apresentaram desempenhos semelhantes na remoção de nitrofurantoína (mais de 95% em 15 min), além de não ter havido a geração de produtos ecotóxicos (Lactuca sativa) e de ter sido alcançada a inativação biológica (Escherichia coli) do fármaco.A câmara de irradiação com LEDs é compacta, custa duas vezes menos que a outra e é quatro vezes mais eficiente em termos de consumo elétrico. A única desvantagem encontrada foi o custo dos LEDs-UV. Levando-se em conta o número de LEDs e de lâmpadas fluorescentes negras nas câmaras, o custo é trinta vezes maior. No entanto, o custo adicional dos LEDs-UV em relação às lâmpadas fluorescentes negras é facilmente compensado pela economia realizada nos custos de capital (aquisição do equipamento) e de operação (consumo energético).Em suma, pelo menos no caso da degradação da nitrofurantoína pelo processo foto-Fenton, os LEDs-UV mostraram-se substitutos vantajosos das lâmpadas fluorescentes negras, tradicionalmente utilizadas. / The goal of this research was to study the degradation, by the photo-Fenton process, of a model-pollutant (an antibiotic fromthe nitrofurans group: nitrofurantoin), using UV-LEDs instead of the lamps traditionally used, i.e. black fluorescent lamps. Two irradiation chambers were compared, each one of them with a type of light source, regarding: removal percentage, ecotoxicity (Lactuca sativa), antimicrobial activity (Escherichia coli), capital costs (equipment), operating costs (energy consumption), and light sources costs, as well as the space the chambers occupy.The degradation experiments were performed and optimized by experimental design, using the Response Surface Methodology, and obtaining the optimum concentrations of nitrofurantoin, ferric ions, and hydrogen peroxide, for each of the chambers. The studied chambers showed similar performances regarding nitrofurantoin removal (more than 95% in 15 min), besides the generation of no ecotoxic products (Lactuca sativa) and the biological inactivation (Escherichia coli) of the drug. The irradiation chamber with UV-LEDs is compact,cheaper (it is half of the price of the other one), and it is four times more efficient in terms of electric consumption. The sole disadvantage found was the cost of the UV-LEDs. Taking into consideration the number of LEDs and black fluorescent lamps used in the chambers, thiscost is 30 times greater. However, the additional cost of the UV-LEDsin comparison to black fluorescent lamps is easily compensated by the savings in capital costs (equipment acquisition) and operating costs (electric consumption). In summary, at least regarding the nitrofurantoin degradation by the photo-Fenton process, the UV-LEDs proved to beworthwhile alternatives for black fluorescent lamps, which are traditionally used.

A Bordetella avium é o agente etiológico da bordetelose aviária, uma doença altamente contagiosa que afeta o trato respiratório superior das aves. B. avium adere-se preferencialmente às células do epitélio ciliado traqueal, promovendo inflamação e deformação da mucosa respiratória. As infecções do trato respiratório das aves resultam em grandes prejuízos para toda indústria avícola, desta forma, o presente estudo teve como objetivo a caracterização genotípica e de sensibilidade a antimicrobianos de isolados de B. avium provenientes de perus com histórico de aerossaculite. Dentre os 300 animais examinados, isolou-se B. avium de 13 aves e foram selecionadas 20 cepas do agente para os estudos posteriores. Através do antibiograma realizado pela técnica de disco difusão observou-se um alto número de cepas resistentes aos antimicrobianos beta lactâmicos (amoxacilina, ampicilina, penicilina e ceftiofur), assim como para lincomicina, sulfonamidas e combinação sulfonamidas/trimetoprima (cotrimoxazol) e uma grande heterogeneidade resultando em 15 perfis distintos. Os antimicrobianos com maiores níveis de sensibilidade foram o florfenicol, seguidos pelas quinolonas, doxiciclina e pelas tetraciclinas. Todas as cepas foram caracterizadas através da PFGE e do AFLP, apresentando 15 pulsotipos e 16 perfis genotípicos respectivamente. Os métodos fenotípicos e genotípicos apresentaram capacidade discriminatória semelhante e revelaram uma grande diversidade dentre os isolados analisados. / Bordetella avium is the etiologic agent of avian bordetellosis, a highly contagious disease that affects the upper respiratory tract of birds. B. avium adheres preferentially to ciliated tracheal epithelial cells, promoting inflammation and deformation of the respiratory mucosa. Infections of the respiratory tract of birds resulting in large losses for the entire poultry industry in this way, this study aimed to characterize genotypic and antimicrobial susceptibility of isolates of B. avium from turkeys with a history of Airsacculitis. Among the 300 animals examined, B. avium was isolated from 13 turkeys and 20 strains were selected for further studies. Through the antibiogram performed by disk diffusion technique was observed a high number of strains resistant to beta-lactamic antibiotics (amoxicillin, ampicillin, penicillin and ceftiofur), as well as, lincomycin, sulfonamides and sulfonamide combination/ trimethoprim (cotrimoxazole) and a high level of heterogeneity resulting in 15 different profiles. The antimicrobials with higher levels of sensitivity were florfenicol, followed by quinolones, doxycycline and tetracycline. All strains were characterized through to PFGE and AFLP, presenting 15 pulsotypes and 16 genetic profiles, respectively. Phenotypic and genotypic methods showed similar discriminatory capacity and presented a high diversity among isolates examined.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-09-04T18:02:51Z No. of bitstreams: 2 DISSERTACAO GUIZELLE APARECIDA DE ALCANTARA.pdf: 1371653 bytes, checksum: 070d1cec9c50cbd69f05e517fa87fd77 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-04T18:02:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTACAO GUIZELLE APARECIDA DE ALCANTARA.pdf: 1371653 bytes, checksum: 070d1cec9c50cbd69f05e517fa87fd77 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-02-17 / The family Myrtaceae in Brazil is one of the most important families, comprising about 23 genera and 130 species. The specie Myrcia rostrata DC. popularly known as "folha miúda" or "guamirim chorão" is commonly found in South American forests and in some units that are part of the Federation Cerrado, as in Goias, Distrito Federal, Mato Grosso and other states. The aim of this study was to establish parameters pharmacognostic for quality control of M. rostrata and analyze the antimicrobial activity of the leaves and stem bark of this species. For this, the macroscopic description and implementation of the sections for microscopic analysis, the plant material was used fresh. As for the post microscopy, determination of volatile substances, total ash and acid insoluble, research and quantification of constituent phytochemicals, obtaining of crude ethanol extract and fractions and essential oil extraction, the shells were dried in an oven with forced circulation at 40 ° C and leaves outdoors. The gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC / MS) was used to characterize the chemistry composition of essential oils, the test of serial broth microdilution for antimicrobial activity and Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) to obtain the chromatograms of the aqueous fractions (FAqC) and dichloromethane (FDC) from the stem bark of M. rostrata. The leaves of this species are simple menbranacea consistency, with shiny dark green on the adaxial surface dark green and opaque in the abaxial. Microscopically hypostomaticare present numerous unicellular trichomes have secretory cavities and idioblasts with prismatic crystals. The shells are curved stem and appearance of the outer surface is characterized as thick, fissured and striatum of which have dark-brown color. When examined microscopically is possible to visualize the periderm, sclereids and crystal series. Were detect in the phytochemistry essential oil, tannins, flavonoids and terpenes both the leaves and the bark of the stem. The total phenols content, tannins that precipitate proteins, hydrolysable tannins and flavonoids in the leaves were 7,53% ± 0,14, 4,65% ± 0, 65,39% ± 1,70 and 2,83% ± 0, for the stem bark were 10,06% ± 0,06, 9,60% ± 0,60, 29,53% ± 0,52 and 0,38% ± 0,009. In the analysis of essential oils from six constituencies identified spathulenol (51.39%) and globulol (6.88%) were the major components in the shell, together with the -Caryophyllene these compounds also predominated in the leaves, which were identified 32 constituents. Therefore, the sesquiterpene hydrocarbons and oxygenated sesquiterpenes predominated in the essential oils from leaves and bark of M. rostrata. In the analysis of the antimicrobial activity of essential oil extracted from leaves of M. rostrata showed moderate antibacterial activity with minimum inhibitory concentration (MIC) of 250 mg / mL for Gram (-) Enterobacter aerogenes ATCC 13048 and for all Gram (+) tested, the crude extract of leaves inhibited fungi with MIC 31.25 mg / mL for the species Candida parapsilosis ATCC 22019, Candida parapsilosis 11-a, 02 Candida albicans and Cryptococcus gattii L1, Cryptococcus neoformans ATCC 28957 and Cryptococcus neoformans L2 CIM was 15.62 mg / mL. Fractions of the leaves and stem bark tested showed the lowest minimum inhibitory concentration was FAqC against Cryptococcus neoformans ATCC 28957 (7.81 mg / mL) and Cryptococcus gattii L1 (15.62 mg / mL) and the FDC against Gram (-) Enterobacter aerogenes ATCC 13 048 (23.43 mg / mL) and against Gram (+) Bacillus subtilis ATCC 6633 (93.75 mg / mL).The results contribute to the identification of the species M. rostrata and demonstrate its potential for treating diseases caused by micro-organisms. / A família Myrtaceae no Brasil é uma das famílias mais importantes, compreendendo 23 gêneros e aproximadamente 130 espécies. A espécie Myrcia rostrata DC. popularmente conhecida como “folha miúda” ou “guamirim-chorão” é comumente encontrada em florestas sul-americanas e em algumas Unidades de Federação que possuem parte do Cerrado, como em Goiás, Distrito Federal, Mato Grosso entre outros Estados. O objetivo geral deste trabalho foi estabelecer parâmetros farmacognósticos para o controle de qualidade da M. rostrata e analisar a atividade antimicrobiana das folhas e cascas do caule desta espécie. Para isso, na descrição macroscópica e na realização dos cortes para a análise microscópica, o material botânico foi utilizado fresco. Já para a microscopia de pós, determinação do teor de substâncias voláteis, determinação de cinzas totais e insolúveis em ácido, pesquisa e quantificação de constituintes fitoquímicos, obtenção do extrato bruto etanólico e frações e na extração do óleo essencial, as cascas foram dessecadas em estufa com circulação forçada a 40ºC e as folhas ao ar livre. A Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG/EM) foi utilizada para a caracterização química dos óleos essenciais, o teste de microdiluição seriada em caldo para a avaliação da atividade antimicrobiana e determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) para a obtenção dos cromatogramas das frações aquosa (FAqC) e diclorometano (FDC) das cascas do caule de M. rostrata. As folhas desta espécie são simples de consistência menbranacea, com coloração verde-escura brilhante na superfície adaxial e verde-escuro opaco na abaxial. Microscopicamente são hipoestomáticas, apresentam numerosos tricomas tectores unicelulares, têm cavidades secretoras e idioblastos com cristais prismáticos. As cascas do caule são encurvadas e o aspecto da superfície externa é caracterizado como espesso, fissurado e estriado sendo que possuem coloração marrom-escura. Quando analisadas microscopicamente é possível visualizar a periderme, esclereides e séries cristalíferas. Na prospecção fitoquímica foram detectados óleo essencial, taninos e flavonóides, tanto nas folhas como na casca do caule. O teor de fenóis totais, taninos que precipitam proteína, taninos hidrolisáveis e flavonóides nas folhas foram de 7,53% ± 0,14, 4,65% ± 0, 65,39% ± 1,70 e 2,83% ± 0, para as cascas do caule foram de 10,06% ± 0,06, 9,60% ± 0,60, 29,53% ± 0,52 e 0,38% ± 0,009. Na análise dos óleos essenciais de seis constituintes identificados o espatulenol (51,39%) e globulol (6,88%) foram os componentes majoritários na casca e juntamente com o -Cariofileno estes compostos também predominaram nas folhas, onde foram identificados 32 constituintes. Portanto, os hidrocarbonetos sesquiterpenos e os sesquiterpenos oxigenados predominaram nos óleos essenciais das folhas e cascas de M. rostrata. Na análise da atividade antimicrobiana o óleo essencial extraído das folhas de M. rostrata apresentou atividade antibacteriana moderada com Concentração Inibitória Mínima (CIM) de 250 μg/mL para a bactéria Gram (-) Enterobacter aerogenes ATCC 13048 e paratodas as bactérias Gram (+) testadas, o extrato bruto das folhas inibiu bem os fungos com CIM de 31,25 μg/mL para as espécies Candida parapsilosis ATCC 22019, Candida parapsilosis 11-A, Candida albicans 02 e Cryptococcus gatti L1, para o Cryptococcus neoformans ATCC 28957 e Cryptococcus neoformans L2 a CIM foi de 15,62 μg/mL. Das frações das folhas e cascas do caule testadas as que apresentaram menores Concentração Inibitória Mínima foi a FAqC contra Cryptococcus neoformans ATCC 28957 (7,81 μg/mL) e Cryptococcus gatti L1(15,62 μg/mL) e a FDC contra as bactérias Gram (-) Enterobacter aerogenes ATCC 13048 (23,43 μg/mL ) e contra a bactéria Gram (+) Bacillus subtilis ATCC 6633 (93,75 μg/mL). Os resultados obtidos contribuem para a identificação da espécie M. rostrata além de demonstrarem o seu potencial antimicrobiano.

Os prejuízos causados por Escherichia coli patogênica para aves (APEC) na produção de aves é justificativa de pesquisas realizadas no mundo todo há décadas. Recentemente, o potencial zoonótico e a multirresistência das cepas desse patotipo têm sido alvo frequente dos trabalhos realizados com APEC. O objetivo desse trabalho foi caracterizar 225 cepas APEC isoladas de perus condenados por aerossaculite em abatedouros em relação à resistência a 14 antimicrobianos, perfil de virulência e grupos filogenéticos. 92% das amostras apresentaram perfil de multirresistência (MDR) e os índices mais altos de resistência foram a sulfonamidas (94%), tetraciclina (83%), eritromicina (82%), estreptomicina (60%), amoxicilina (53%) e ácido nalidíxico (48%). Metade das cepas foram classificadas no grupo filogenético B2 (50%), seguido por B1 (28,6%), grupo A (17,1%) e grupo D (4,8%). Os genes de virulência pesquisados tiveram prevalência de iroN (95%), iss (93%), cvi/cva (67%), iucD (67%), tsh (56%), irp2 (51%), ibeA (31%), vat (24%), neuS (19%), astA (17%) e papC (15%). Considerando o potencial zoonótico e a associação a um maior número de genes de virulência quando comparadas aos outros grupos filogenéticos, as cepas B2 foram selecionadas para pesquisa de integrons de classe 1 e clonalidade. As 112 amostras B2 eram pertencentes a 83 diferentes perfis ERIC, sendo classificadas como multiclonais. Os integrons de classe 1 estiveram presentes em 107 isolados (95,5%). Esses resultados demonstram que a maioria das cepas pesquisadas pertencia ao grupo mais virulento (B2) e relacionado a cepas ExPEC humanas. Aliado ao alto índice de multirresistência encontrado, esses dados sugerem que as aves podem servir como reservatório de cepas patogênicas e multirresistentes, tanto para humanos como para animais, reforçando a ideia de que as aves representem importante papel na cadeia epidemiológica das ExPEC. / Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) has been studied for decades because of its economic impact on the poultry industry. Recently, the zoonotic potential of APEC and multidrug-resistant strains have emerged. The aim of this study was to investigate the virulence profile, phylogenetic background and antimicrobial resistance in 225 strains of Escherichia coli isolated from turkeys presenting airsacculitis. The results showed that 92% of strains presented a multidrug-resistance (MDR) profile, and the highest levels of resistance were to sulfamethazine (94%), tetracycline (83%). Half of these strains (112/225) were classified in phylogenetic group B2, followed by groups B1 (28.6%), A (17.1%) and D (4.8%). The prevalence of virulence genes was as follows: iroN (95%), iss (93%), cvi/cva (67%), iucD (67%), tsh (56%), irp2 (51%), ibeA (31%), vat (24%) neuS (19%), astA (17%) and papC (15%). Considering the zoonotic potential and association to a greater number of virulence genes when compared to other phylogenetic groups, B2 strains were selected for screening of class 1 integrons and clonality. The 112 samples belonging to 83 ERIC profiles and classified as multiclonal. Class 1 integrons were present in 107 isolates (95.5%).These results demonstrate that the majority of the investigated strains belonged to group B2, which is more virulent and is related to human ExPEC strains. Coupled with the high rate of multidrug-resistance found, these data suggest that turkeys may serve as a reservoir for pathogenic and multidrug-resistance strains, for humans and animals, reinforcing the idea that poultry plays an important role in the epidemiological chain of ExPEC.