O pós-tratamento de efluentes de reatores anaeróbios, tais como o Upflow Anaerobic Sludge Blanket (UASB), na maior parte de suas aplicações, faz-se necessário, já que esse tipo de tratamento biológico promove remoção de DBO na faixa de 60 a 75% e tem baixa eficiência na remoção de nitrogênio e fósforo. A remoção de nitrogênio geralmente é feita de forma convencional pela nitrificação, seguida da desnitrificação. Tanto a nitrificação, como a desnitrificação podem ser efetuadas em reatores com crescimento suspenso ou crescimento aderido, contudo é conhecido que sistemas baseados em biofilmes exercem influência direta na taxa da degradação de substrato e facilitam a retenção de bactérias nitrificantes em reatores. O principal objetivo deste trabalho é o de acompanhar o desenvolvimento de biofilmes aeróbios em reatores do tipo célula de fluxo para a nitrificação de substrato sintético simulando efluente de UASB, submetidos a diferentes velocidades superficiais (1, 4 e 8 m/h) e taxas de carregamento (0,25; 0,5 e 1,0 g N/\'M POT.2\' biofilme.dia). O desenvolvimento dos biofilmes nitrificantes foi acompanhado mediante perfis de microssensores e estimativa do número mais provável de bactérias nitrificantes (NMP). Nas células de fluxo operadas com taxa de carregamento mais baixa (0,25 g N/\'M POT.2\' biofilme.dia), foram obtidas as melhores eficiências de remoção de NTK, a qual representa valor menor que as taxas de carregamento empregadas na literatura para reatores de crescimento aderido usados na nitrificação. Considerando as células de fluxo com taxa de carregamento mais baixa, a célula que apresentou remoção de NTK próxima a 100% foi a de menor velocidade superficial de (1 m/h). Porém, esses sistemas apresentaram baixa eficiência para a nitrificação completa, obtendo maior produção de nitrito do que de nitrato; poderiam ser usados então na remoção de nitrogênio pela via curta. Os microssensores de OD foram eficientes para as análises de perfis de OD no interior dos biofilmes nitrificantes, mostrando grandes variações, à medida que o biofilme se desenvolvia, nas concentrações de OD do líquido circundante e do fundo do biofilme. / The post-treatment of anaerobic reactor effluents, such as the Upflow Anaerobic Sludge Blanket (UASB), in most applications, is necessary, since this kind of biological treatment promotes BOD removal ranging from 60 to 75% and it has low efficiency in nitrogen and phosphorous removal. Nitrogen removal is usually carried out in a conventional way through nitrification, followed by denitrification. Nitrification, as well as denitrification, can be achieved in suspended growth reactors, or in adhered growth reactors, however it is known that systems based on biofilms exert direct influence in substrate degradation rates and ease the retention of nitrifying bacteria in reactors. The main objective of this work is to follow the development of aerobic biofilms in flow cell type reactors for the nitrification of synthetic substrate simulating an UASB effluent, submitted to different superficial velocities (1, 4 and 8 m/h) and loading rates (0.25; 0.5 and 1.0 g N/\'M POT.2\' biofilm.day). The development of nitrifying biofilms was followed by microsensors profiles and an estimative of the most probable number of nitrifying bacteria (MPN). The best NTK removal efficiencies were obtained in flow cells operated with a lower loading rate (0.25 g N/\'M POT.2\' biofilm.day), which represents a lower level than the levels applied in literature for adhered growth reactors used for nitrification. Considering the flow cells with a lower loading rate, the cell that presented NTK removal close to 100% was the one with the lowest superficial velocity (1 m/h). However, these systems present low efficiency for complete nitrification, obtaining higher nitrite than nitrate production; they could then be used in nitrogen removal by short way. The DO microsensors were efficient for analyses of DO profiles inside nitrifying biofilms, showing great variations, while the biofilm developed itself, in the DO concentrations in the contiguous liquid and at the bottom of the biofilm.

Este estudo clínico-laboratorial identificou as espécies de Candida do palato e prótese de indivíduos desdentados totais com estomatite relacionada à prótese (ERP) e avaliou o efeito de soluções desinfetantes para higiene de próteses totais sobre Candida spp.. Sessenta participantes foram distribuídos aleatoriamente em 04 grupos paralelos (n=15); orientados a escovar as próteses e o palato 3 vezes ao dia e imergi-las nas soluções salina (C controle), Hipoclorito de sódio a 0,25% (HS0,25%), Ricinus communis a 10% (RC10%) ou Cloramina T a 0,5% (CT0,5%) por 20 minutos. Amostras de biofilme foram coletadas da prótese e palato no Baseline, após 7 e 37 dias do uso das soluções e semeadas em meio CHROMagar Candida. Após período de incubação foi realizada a identificação presuntiva, verificação da incidência e quantificação de crescimento das espécies de Candida (contagem de UFC). Cepas ATCC das espécies mais incidentes clinicamente foram avaliadas no estudo laboratorial. Biofilmes de C. albicans, C. tropicalis e C. glabrata foram formados sobre espécimes em resina acrílica termopolimerizável e imersos nas soluções por 20 minutos. Água destilada foi utilizada como controle. As variáveis de resposta foram crescimento de colônias (contagem de UFC), metabolismo celular (método de XTT), produção de enzimas hidrolíticas (kits específicos), formação de hifas (contagem de células em câmara de Newbauer) e quantificação de células vivas (microscopia de epifluorescência). A capacidade de remoção de biofilme pelas soluções também foi avaliada por meio de microscopia de epifluorescência. Para o estudo clínico, análises descritivas foram utilizadas para interpretação dos dados quanto às características sociodemográficas da amostra, identificação e incidência das Candida spp. Os resultados de crescimento celular (UFC) foram analisados pelos Testes Kruskal-Wallis e Friedman. Para o estudo laboratorial, os resultados foram analisados por teste Anova (One-way) e Tukey (capacidade de crescimento e metabolismo celular de C. albicans e C. tropicalis), teste de Kruskal-Wallis (metabolismo celular de C. glabrata; produção de enzimas hidrolíticas; formação de hifas; capacidade de remoção de biofilme) e teste de Wilcoxon (comparação entre quantidade de biofilme vivo e biofilme total). Empregou-se um nível de confiança de 95% (α= 0,05). As espécies mais incidentes foram C. albicans, seguida de C. tropicalis, C. glabrata e C. krusei. O HS 0,25% reduziu a incidência das três espécies na prótese e palato nos períodos de 7 e 37 dias; o CT 0,5% promoveu redução de Candida spp. somente nas próteses totais. O R. communis diminuiu a incidência de C. tropicalis em ambos os sítios de coleta. Para contagem de UFC, o HS 0,25% e CT 0,5% causaram redução significativa para cepas clínicas e ATCC. O R. communis, in vitro, reduziu a quantidade de UFC de C. glabrata. O HS 0,25% obteve os melhores valores contra atividade metabólica, formação de hifas, manutenção de células vivas e remoção do biofilme das espécies de Candida. As soluções de RC 10% e CT 0,5% causaram diminuição da atividade metabólica. Não houve diferença significante na produção de proteinase por C. albicans e C. tropicalis após exposição às diferentes soluções desinfetantes, com exceção da C. glabrata, em que todas as soluções causaram aumento significativo da produção desta enzima. As soluções não influenciaram a produção de fosfolipase. A CT 0,5% e RC 10% apresentaram resultados intermediários para manutenção de células vivas. A Cloramina T foi mais eficiente que o R. communis para remoção do biofilme de C. albicans e C. tropicalis e menos eficiente para remoção de biofilme de C. glabrata. As soluções de Hipoclorito de sódio a 0,25% e Cloramina T a 0,5% apresentaram os melhores resultados como solução de imersão frente às variáveis estudadas, podendo ser indicadas para uso clínico como desinfetantes para próteses totais. / This clinical-laboratory study identified the Candida species from the palate and complete dentures of edentulous individuals with prosthesis-related stomatitis (PRS) and evaluated the effect of disinfectant solutions for denture hygiene on Candida spp. Sixty participants were randomly assigned in 04 parallel groups (n = 15); They were oriented to brush their prostheses and the palate 3 times a day and immerse them in saline solution (C-control), 0.25% Sodium hypochlorite (HS0.25%), 10% Ricinus communis (RC10%) or 0.5% Chloramine T (CT 0.5%) for 20 minutes. Biofilm samples were collected from the prosthesis and palate in the baseline, after 7 and 37 days of use of the solutions and seeded in CHROMagar Candida medium. After incubation period, the presumptive identification, incidence verification and quantification of Candida species growth (CFU count) were performed. ATCC strains of the most clinically incident species were evaluated in the laboratory study. C. albicans, C. tropicalis and C. glabrata biofilms were formed on heatpolymerised acrylic resin specimens and immersed in the solutions for 20 minutes. Distilled water was used as control. The response variables were colony growth (UFC count), cell metabolism (XTT method), production of hidrolytic enzymes (specific kits), formation of hyphae (counting cells in Newbauer\'s chamber) and quantification of live cells (epifluorescence microscopy). The ability of biofilm removal by the solutions was also evaluated by means of epifluorescence microscopy. For the clinical study, descriptive analyzes were used to interpret the data regarding the sociodemographic characteristics of the sample, identification and incidence of Candida spp. The cell growth results (CFU) were analyzed by the Kruskal-Wallis and Friedman tests. For the laboratorial study, the results were analyzed by the Anova (One-way) and Tukey test (growth capacity and cellular metabolism of C. albicans and C. tropicalis), Kruskal-Wallis test (cellular metabolism of C. glabrata; hidrolytic enzymes production; formation of hyphae; ability to remove biofilm) and Wilcoxon\'s test (comparison of the amount of live biofilm and total biofilm). A confidence level of 95% (α = 0.05) was used. The most incident species were C. albicans, followed by C. tropicalis, C. glabrata and C. krusei. HS 0.25% reduced the incidence of the three species on the prosthesis and palate in the periods of 7 and 37 days; CT 0.5% promoted reduction of Candida spp. only in dentures. R. communis decreased the incidence of C. tropicalis in both collection sites. For CFU counts, HS 0.25% and CT 0.5% caused significant reduction for clinical strains and ATCC. R. communis, in vitro, reduced the amount of CFU of C. glabrata. The HS 0.25% obtained the best values compared to the metabolic activity, hyphae formation, maintenance of living cells and removal of the biofilm of Candida species. The solutions of RC 10% and CT 0.5% caused the decrease in the metabolic activity. There was no significant difference in proteinase production by C. albicans and C. tropicalis after exposure to different disinfectant solutions, except C. glabrata, in which all solutions caused a significant increase in the production of this enzyme. The solutions did not influence phospholipase production. A CT 0.5% and RC 10% presented intermediate results for the maintenance of living cells. Chloramine T was more efficient than R. communis for biofilm removal from C. albicans and C. tropicalis; and less efficient for biofilm removal from C. glabrata. The solutions of 0.25% Sodium Hypochlorite and 0.5% Chloramine T presented the best results as immersion solution compared to the studied variables and can be prescribed for clinical use as disinfectants for total dentures.

Introdução: A patogenia da rinossinusite crônica com polipose nasossinusal não está completamente estabelecida e existem algumas explicações para essa doença como os superantigenos, o desequilíbrio inflamatório e, mais recentemente, o biofilme. Objetivos: Avaliar a associação entre a presença do biofilme e a presença de rinossinusite crônica com polipose nasossinusal. Avaliar o quadro clínico e radiológico pré-operatória e pós-operatória segundo a presença do biofilme. Métodos: Este é uma estudo realizado em um hospital terciário universitário. A primeira parte foi um estudo caso-controle com um grupo de 33 pacientes consecutivos com rinossinusite crônica com polipose nasossinusal submetidos a cirurgica endoscópica nasossinusal e um grupo controle de 27 pacientes submetidos a septoplastia para tratamento de obstrução nasal. As amostras da mucosa foram coletadas no intra-operatório para avaliação por microscopia eletrônica de varredura para determinar a presença do biofilme. A segunda parte foi um estudo prospectivo em que dados pré-operatórios e pós-operatórios foram registrados, incluindo avaliações padronizadas da qualidade de vida doença-específica relacionadas à obstrução nasal e à rinossinusite, da endoscopia nasal e da tomografia de cavidades paranasais. A análise estatísca foi realizada. Para todos os testes um p=0.05 foi considerado significativo. Resultados: Os biofilmes foram encontrados em 72.7% (24/33) dos pacientes com rinossinusite crônica com polipose nasossinusal e 48.1% (13/27) dos pacientes submetidos a septoplastia (Odd ratio=2.87, IC95% 0.9796-8.419, p=0.051). Este foi o primeiro estudo a analisar o efeito da presença do biofilme nos resultados pós-operatórios com medidas padronizadas de um grupo de pacientes apenas com rinossinusite crônica com polipose nasossinusal. O biofilme estava presente em 72.4% (21/29) dos pacientes que completaram o seguimento. Os pacientes com biofilmes apresentaram uma pior pontuação pré-operatória NOSE e Lund-Kennedy estatísticamente significativos, mas uma mediana semelhante na pontuação total do SNOT-20. Os pacientes com biofilme apresentaram uma melhor resultado na pontuação Lund-Kennedy (p=0.036). Estes pacientes apresentaram piores resultados no SNOT-20 e resultados similares quanto ao NOSE e o Lund-Mackay. Conclusão: Os biofilmes foram demonstrados presentes nos pacientes submetidos a cirurgia endoscópica funcional para rinossinusite crônica com polipose nasossinusal mas também nos controles. Embora a prevalência não tenha sido diferente significativamente, o intervalo de confiança extremamente amplo de 95%, que apenas cruza a unidade, sugere que uma diferença significativa pode ter sido perdida por causa do baixo poder estatístico e estudos futuros serão necessários. Os biofilmes estiveram relacionados com pior qualidade de vida doença-específica pré-operatória NOSE e avaliação endoscópica (Lund-Kennedy), e melhores resultados endoscópicos. Nossos resultados sugerem que nos pacientes com uma melhora clínica significativa após a cirurgia, o biofilme representou um papel mais predominante na fisiopatologia da doença. Neste subgrupo, a cirurgia provavelmente removeu a quantidade de biofilme necessária para restaurar o desequilíbrio inflamatório na mucosa / Introduction: The pathogenesis of chronic rhinosinusitis with nasal polyps is not completely established and there are some explanations for this disease, such as superantigens, inflammatory imbalance and, more recently, biofilms. Objective: Evaluate the association of biofilms presence and chronic rhinosinusitis with nasal polyps. Evaluate outcomes after sinus surgery for chronic rhinosinusitis with nasal polyps according to the presence of biofilms. Methods: This is a University based-tertiary care center study. The first part was a case-control study that evaluated a group of 33 consecutive patients undergoing functional endoscopic sinus surgery for chronic rhinosinusitis with nasal polyps and a control group of 27 patients undergoing septoplasty for nasal obstruction treatment. Mucosal samples were harvested intra-operatively for scanning electron microscopic examination to determine biofilms presence. The second part was a prospective study. Preoperative and follow up data were recorded, including standardized evaluations of disease-specific quality of life related to nasal obstruction and rhinosinusitis, of nasal endoscopy and sinus computer tomography scan. Statistical analysis was performed. For all statistical tests p=0.05 was considered significant. Results: Biofilms were found in 72.7% (24/33) of chronic rhinosinusitis with nasal polyps patients and in 48.1%(13/27) of septoplasty patients (Odds ratio = 2.87, CI95% from 0.9796 to 8.419, p=0.051). This was the first report to analyze the effect of biofilms in outcomes with standardized measures of a group of only chronic rhinosinusitis with nasal polyps patients. Biofilms were present in 72.4% (21/29) of these patients. Patients with biofilms had a statistically significant worst preoperative score related to nasal obstruction and nasal endoscopy, but a similar median sinusitis total score. Patients with biofilms presented better Lund-Kennedy outcome (-3[5]vs.-1[2],U=46.0,p=0.036), but the best endoscopic improvement might reflect the worst clinical preoperative status. These patients had worst outcomes in SNOT-20 (-0.75[1.15]vs.-1.30[1.32],U=69.0,p=0.21) and similar outcomes in NOSE(-55.0[50.0] vs. -60.0[50.0], U=81.0,p=0.67) and Lund-Mackay (-4[5]vs.-4[4]),U=75.5,p=0.49). Patients with biofilms presented better Lund-Kennedy outcome (p=0.036). There was a correlation among some QoL outcome scores in both groups. Conclusion: Biofilms were demonstrated to be present in patients undergoing functional endoscopic sinus surgery for chronic rhinosinusitis with nasal polyps but also in controls. Although the prevalence was not significantly different, the extremely wide 95% confidence interval, which just crosses unity, suggests that a meaningful clinical difference may have been missed because of low statistical power and that further study is necessary. Biofilms were related with worst preoperative disease-specific quality of life questionnaire (NOSE) and endoscopic evaluation (Lund-Kennedy), and better endoscopic outcome. Our findings suggest that in patients with a significant clinical improvement after surgery, the biofilm had a more predominant role in the pathophysiology of the disease. In this subgroup, the surgery probably removed the amount of biofilms needed to restore the mucosal inflammatory imbalance

Este estudo avaliou o efeito de soluções higienizadoras de próteses totais quanto ao controle do biofilme (análise clínica) e à alteração de propriedades da resina acrílica (análise laboratorial). A análise clínica foi realizada em 32 desdentados totais que foram orientados a escovar suas próteses (escova Denture e sabonete líquido) três vezes ao dia e imergí-las (″overnight″) nas soluções: 1) Controle: Água Natural; 2) Pastilha Corega Tabs; 3) Hipoclorito de Sódio 0,5%. Cada solução foi utilizada por 21 dias (03 ciclos de 07 dias). Ao final de cada ciclo, a superfície interna da prótese superior foi evidenciada (vermelho neutro 1%) e fotografada (HX1- Sony). As áreas (total e corada com biofilme) foram medidas (Image Tool 3.00), sendo a porcentagem de biofilme calculada como a relação entre a área do biofilme multiplicado por 100 e área da superfície total da base interna da prótese. Para a análise laboratorial, foram confeccionados 140 corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550) que foram imersos por 08 horas nas soluções: 1) Controle 1 (sem imersão); 2) Controle 2 (água destilada); 2) Pastilha Corega Tabs; 3) Hipoclorito de sódio 0,5%, simulando uma higienização diária de 03 anos (1095 dias). Antes e após as imersões, os corpos de prova foram avaliados quanto à alteração de cor (Espectrocolorímetro Color Guide 45/0), rugosidade superficial (rugosímetro Surftest SJ-201P) e resistência à flexão (Máquina Universal de Ensaios DL 2000). Os dados de cor foram também calculados de acordo com a National Bureau of Standards (NBS). As análises estatísticas compreenderam o método de equações de estimação generalizadas (GEE) e comparações múltiplas (Teste de Bonferroni - α = 1,67%) para análise clínica; e Análise de Variância (ANOVA) e teste HSD de Tukey (α=0,05) para análise laboratorial. Os resultados clínicos mostraram que a imersão em hipoclorito de sódio 0,5% diminuiu a área coberta por biofilme (8,29 ± 13,26 - B), quando comparado ao controle (18,24 ± 14,91 - A) e à pastilha (18,18 ± 16,62 - A). O hipoclorito (2,75 ± 0,49 - B) e a pastilha (3,01 ± 0,35 - B) provocaram alteração de cor significativamente maior que o controle (0,66 ± 0,29 A), sendo classificadas como perceptível, segundo a NBS. As soluções não alteraram a rugosidade da resina. Houve uma diminuição na resistência à flexão dos grupos pastilha (85,61 ± 10,46 - C) e hipoclorito (82,17 ± 8,47 - C) quando comparados com o controle (sem imersão) (105,4 ± 14,93 - A). O controle (água destilada) apresentou uma redução na resistência à flexão (67,06 ± 11,89 - B). Os achados deste estudo revelaram que a solução de hipoclorito de sódio 0,5% foi a mais efetiva na remoção do biofilme das próteses totais e que ambas as soluções (hipoclorito de sódio 0,5% e peróxido alcalino) não alteraram a rugosidade superficial, porém provocaram alterações de cor classificadas como perceptíveis segundo a NBS, bem como acarretaram uma diminuição da resistência à flexão da resina acrílica termicamente ativada. / This study evaluated the effect of denture cleansers on denture biofilm removal (clinical trial) and changes the properties of acrylic resin (laboratory analysis). A randomized clinical trial was performed in 32 edentulous patients who were instructed to brush their dentures (denture-specific brush and liquid soap) three times a day and to soak them overnight in the solutions: 1) Control: Water; 2) Efervescent Tablet (Corega Tabs); 3) 0.5% Sodium Hypochlorite. Each solution was used for 21 days (03 alternate cycles of 07 days). At the end of each cycle, the inner surfaces of maxillary dentures were disclosed (1% neutral red) and photographed (HX1 Sony). Total and stained biofilm areas were measured (Image Tool 3.00), and the percentage of biofilm calculated as the ratio between the area of the biofilm multiplied by 100 and total surface area of the internal base of the denture. For laboratory analysis, 140 specimens were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and immersed for 08 hours in the solutions: 1) Control 1 (without immersion); 2) Control 2 (distilled water); 3) Efervescent Tablet Corega Tabs; 4) 0.5% Sodium Hypochlorite, simulating a daily hygiene of 03 years (1095 days). Before and after immersion, specimens were evaluated for color change (portable colorimeter Color Guide 450), surface roughness (Surface Roughness Tester SJ-201P) and flexural strength (universal testing machine DL 2000). Color data were also calculated according the National Bureau of Standards (NBS). Statistical analysis comprised the method of generalized estimating equations (GEE) and multiple comparisons (Bonferroni - α = 1.67%) for clinical analysis, and analysis of variance (ANOVA) and Tukey′s HSD test (α=0.05) for laboratory analysis. Clinical results showed that the immersion in sodium hypochlorite 0.5% reduced the area covered by biofilm (8.3 ± 13.3 - B) compared to the control (18.2 ± 14.9 - A) and tablet (18.2 ± 16.6 - A). Hypochlorite (2.8 ± 0.5 - B) and tablet (3.0 ± 0.4 - B) caused significantly higher color change than the control (0.7 ± 0.3 A); such changes were classified as noticeable, according to NBS. The solutions did not alter the roughness of the resin. There was a decrease in the flexural strength of the groups tablet (85.6 ± 10.5 - C) and hypochlorite (82.2 ± 8.5 - C) compared to control (without immersion) (105.4 ± 14.9 - A). The control (distilled water) showed a reduction in flexural strength (67.1 ± 11.9 - B). The findings revealed that the 0.5% sodium hypochlorite solution was the most effective for biofilm removal from complete dentures and that both solutions (0.5% sodium hypochlorite and alkaline peroxide) did not alter surface roughness, but caused color changes classified as noticeable according to the NBS, and resulted in a decrease of flexural strength of heat-polymerized acrylic resin.

Orientador: José Francisco Lopes Filho / Coorientador: Ana Lúcia Barretto Penna / Banca: Vânia Regina Nicoletti Telis / Banca: Elisa Helena Giglio Ponsano / Banca: Maria Aparecida Mauro / Banca: Crislene Barbosa de Almeida / Resumo: Devido à sua composição química, os alimentos podem sofrer alteração da qualidade e do seu conteúdo nutricional como consequência de fatores tais como a contaminação microbiológica, a contaminação com outros alimentos ou compostos químicos, a ação de agentes ambientais como radiação (UV), ar (oxigênio), câmbios de temperatura, entre outros. Por essa razão, a indústria dos alimentos, a fim de proteger e garantir a qualidade, a segurança e o conteúdo nutricional dos produtos alimentícios, é a indústria que mais usa embalagens não biodegradáveis. No entanto, a preocupação mundial devido ao excessivo aumento da contaminação ambiental e acumulação de embalagens plásticas não biodegradáveis têm gerado a necessidade de desenvolver embalagens biodegradáveis que permitam garantir a qualidade do produto além de diminuir o impacto negativo ao ambiente. Dessa forma, nos últimos tempos, as indústrias de alimentos e de embalagens, assim como as instituições de pesquisa, têm focado os seus estudos no desenvolvimento de embalagens biodegradáveis produzidas a partir de resíduos agrícolas e subprodutos da agroindústria que podem ser rapidamente degradados pela ação de microrganismos do solo. Essas embalagens, principalmente na forma de filmes e coberturas, são baseadas em biopolímeros como proteínas (zeína, colágeno, gelatina, entre outras), carboidratos (amido, quitosana, alginato, entre outras) e lipídeos (ceras e ácidos graxos). A zeína, principal proteína do milho, tem sido usada em algumas aplicações na indústria de alimentos e farmacêutica, porém, o seu uso como embalagem ainda é um grande obstáculo visto que as suas propriedades físicas, mecânicas e estruturais são inferiores quando comparadas com as embalagens plásticas tradicionais. Baseado nisso, vários estudos têm demonstrado que a combinação de duas ou mais biomoléculas, além de agentes plastificantes, permite melhorar as... / Abstract: Due to their chemical composition, foodstuffs may undergo quality and nutritional content deterioration as a consequence of factors such as microbiological contamination, contact with other foodstuffs or chemical compounds, the action of environmental agents as radiation (UV), air (oxygen), temperature variations, among others. Based on that, the food industry, aiming to protect and assure the quality and nutritional content of foodstuffs, is the greatest user of non-biodegradable packaging. In spite of that, the world's environmental concern due to the increase of the contamination and the accumulation of non-biodegradable packaging has promoted the development of biodegradable materials that allows for reducing the negative environmental impact as well as assures the food quality and nutritional content of foodstuffs. Thereby, food and packaging industries as well as several research institutions have focused their studies on the development of biodegradable packaging from sources such as agricultural residues and agroindustry by-products that are quickly degraded by soil microorganisms due to their natural origin. These packaging, mainly films and coatings, are based on biopolymers such as proteins (zein, collagen, gelatin, among others), carbohydrates (starch, chitosan, alginate, among others) and lipids (waxes and fatty acids). Zein, the main corn protein, has been used for industrial food and pharmaceutical applications; nonetheless, its use as an industrial packaging is limited due to its inferior physical, mechanical and structural properties compared to traditional plastic packaging. Based on that, several studies have demonstrated that combining two or more biopolymers as well as including plasticizer agents into the matrix of the biodegradable materials allows for improving the functional properties of the zeinbased films. Thus, in the first part of this study, different concentrations of ethanol (zein solvent) and glycerol... / Doutor

Orientador: Aimée Maria Guiotti / Coorientadora: Cristiane Duque / Banca: Douglas Roberto Monteiro / Banca: Natália Leal Vizoto / Resumo: A estomatite protética é associada à colonização microbiana da base acrílica das próteses, favorecida pela higiene deficiente das mesmas e pelo alto nível de Candida spp. na cavidade oral. A Candida albicans é a espécie fúngica mais comumente associada à esta patologia oral, geralmente tratada com antifúngicos. O uso indiscriminado destas drogas pode promover resistência destas espécies e efeitos colaterais aos indivíduos. Assim, é desejável promover a saúde por meio de terapias naturais ou alternativas, tais como a utilização de microrganismos probióticos. O objetivo desta pesquisa foi avaliar in vitro, a influência de diferentes probióticos isolados e dois probióticos comerciais na inibição do crescimento do biofilme de C. albicans em resina acrílica ativada termicamente (RAAT) para base protética e verificar se os subprodutos dos biofilmes teriam um potencial de alteração da superfície das amostras de RAAT (Ra). 90 amostras de RAAT foram divididas em 9 grupos: GI- controle negativo (Candida albicans sem probiótico); GII- Candida albicans + Lactobacillus casei; GIII- Candida albicans + Lactobacillus rhamnosus; GIV- Candida albicans + Lactobacillus helveticus; GV- Candida albicans + Bifidobacterium lactis; GVI- Candida albicans + Bifidobacterium longum; GVII- Candida albicans + Lactobacillus fermentum; GVIII- Candida albicans + Microbiome e GIX- Candida albicans + Prolive. Biofilmes de C. albicans foram formados sobre as superfícies das amostras de RAAT na presença dos probi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Prosthetic stomatitis is associated with microbial colonization of the prosthesis base, favored by poor hygiene of the species and the high level of Candida spp. in the oral cavity. Candida albicans is a fungal species most commonly associated with oral pathology, usually treated with antifungal. Indiscriminate use can cause damage to species and side effects to individuals. Thus, it is desirable to promote health through natural or alternative therapies, such as the use of probiotic microorganisms. The objective of this research was to evaluate in vitro, the influence of different probiotics and two commercial probiotics on the inhibition of C. albicans biofilm growth in thermally activated acrylic resin (RAAT) for prosthetic base and to verify if biofilm byproducts would have potential alteration of the surface of RAAT (Ra) samples. 90 RAAT samples were divided into 9 groups: GI- negative control (Candida albicans without probiotic); GII- Candida albicans + Lactobacillus casei; GIII- Candida albicans + Lactobacillus rhamnosus; GIV- Candida albicans + Lactobacillus helveticus; GV- Candida albicans + Bifidobacterium lactis; GVI- Candida albicans + Bifidobacterium longum; GVII- Candida albicans + Lactobacillus fermentum; GVIII- Candida albicans + Microbiome and GIX- Candida albicans + Prolive. Biofilms of C. albicans were formed on the surfaces of RAAT samples in the presence of probiotics, except for GI group. For biofilm quantification, the number of cultured cells in the RA... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Carlos Eduardo Vergani / Banca: Fernanda Lourenção Brighenti / Banca: Ewerton Garcia de Oliveira Mima / Banca: Karin Hermaa Neppelonbroek / Banca: Cláudia Helena Lovato da Silva / Resumo: O objetivo do presente estudo "in vitro" foi avaliar a interação entre os microorganismos C. albicans, S. aureus sensível (MSSA) e resistente (MRSA) à meticilina com relação a alguns dos seus principais fatores de virulência. Estes fatores foram analisados considerando os micro-organismos isoladamente e em culturas mistas. Foi verificada a interação entre esses micro-organismos através da contagem do número de colônias viáveis (UFC/mL), análise da atividade metabólica por meio do ensaio XTT e quantificação da biomassa total por meio do corante cristal violeta nos tempos de 90 minutos, 12, 24 e 48 horas. Para análise da produção de proteinase (SAP) e fosfolipase (PL-C), kits fluorimétricos foram utilizados. A estrutura dos biofilmes foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Culturas simples e mistas dos micro-organismos também foram utilizadas para infectar um epitélio oral humano reconstituído (EOHR). A capacidade de colonização e invasão foi avaliada após 24 horas utilizando a técnica de hibridização "in situ" (PNA-FISH). A avaliação do dano causado pelos micro-organismos ao tecido foi realizada por quantificação da liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH). Técnicas moleculares (RT-qPCR) foram empregadas para quantificação do número de micro-organismos colonizando o epitélio e também para avaliação da expressão de genes de virulência. A expressão gênica foi avaliada em superfície biótica (EOHR) e abiótica (placa de poliestireno de 24 poços) para culturas simples e mistas dos micro-organismos. Os resultados dos ensaios de quantificação foram analisados utilizando ANOVA a dois critérios com teste "post-hoc" de Tukey (α = 0,05), enquanto os dados de atividade enzimática foram analisados por ANOVA a um critério com correção de Welch seguido pelo teste de Games-Howell. Os resultados da expressão gênica foram... (Resumo completo clicar acesso eletrônico) / Abstract: The aim of this study was to evaluate, "in vitro", the interaction between C. albicans and methicillinsusceptible (MSSA) and resistant (MRSA) S. aureus in relation to some of their major virulence factors. These factors were analyzed considering the three microorganisms in single and dual cultures. The interaction between these microorganisms was evaluated by counting colony-forming units (CFU/mL), analysis of metabolic activity by the XTT assay and quantification of the total biomass by crystal violet dye at 90 minutes, 12, 24, and 48 hours. To analyze the production of proteinase (SAP) and phospholipase (PL-C), fluorometric kits were used. The structure of the biofilms was acessed by scanning electron microscopy (SEM). Further, single and dual cultures of microorganisms were used to infect a reconstituted human oral epithelium (RHOE). The pattern of colonization and invasion of the RHOE was evaluated after 24 hours using the in situ hybridization technique (PNA-FISH). The damage caused by microorganisms in the tissue was evaluated by quantification of the lactate dehydrogenase enzyme (LDH) released. Molecular techniques (RT-qPCR) were also used to quantify the number of microorganisms colonizing the epithelium and to evaluate the expression of virulence genes. Gene expression was evaluated in biotic (RHOE) and abiotic (24-well polystyrene microplate) surfaces for single and dual cultures. The results from quantification assays were compared using two-way ANOVA with Tukey post-hoc test, while data from enzymatic activities were analyzed by one-way Welch-ANOVA followed by Games-Howell post hoc test. The results of gene expression were analyzed by one-way ANOVA with Tukey for data satisfying the assumptions of normality and homoscedasticity or one-way Welch-ANOVA followed by Games-Howell for heteroscedastic data. LDH results were also...(Complete abstract electronic access below) / Doutor

Orientador: Hélio Langoni / Coorientador: Virgínia Bodelão Richini-Pereira / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: Vera Lucia Mores Rall / Resumo: Staphylococcus aureus é comum em infecções intramamárias, que frequentemente se tornam crônicas, entre outros fatores, pela capacidade dessa bactéria em produzir biofilme. Objetivou-se verificar a capacidade produtora de biofilme em estirpes de S. aureus e Staphylococcus coagulase negativa (SCN), oriundas de mastite bovina clínica e subclínica. Um total de 100 cepas de S. aureus e 100 cepas de SCN foram isoladas de casos de mastites subclínicas e clínicas em duas propriedades do Estado de São Paulo. O teste de triagem da mastite subclínica foi o California Mastitis Test (CMT). Foi realizada Contagem de Células Somáticas (CCS) e cultivo microbiológico das amostras de leite. Pesquisou-se a presença de genes icaA, icaD e bap pela Reação em Cadeia pela Polimerase (Polimerase Chain Reaction - PCR) e caracterização fenotípica no ágar Vermelho Congo (VC) e teste de produção de biofilme em placas. Não houve relação entre a intensidade da reação ao CMT e a CCS. A média de CCS foi de 2,88±0,59 para S. aureus e 2,71±0,35 para SCN. Não houve significância estatísticas entre os valores de CCS para estirpes que continham a presença dos genes pesquisados. Porém as médias dos valores de CCS foram maiores nos isolados que continham tais genes. As frequências de icaA, icaD e bap em S. aureus foram de 82%, 83% e 58%, respectivamente. Observou-se que dos 83 isolados de S. aureus que apresentaram icaD, 82 (98,8%) também apresentaram icaA, com significância estatística no Teste Exato de Fischer (p<0,001). Na associação entre os genes icaA e bap, também foi observada associação significante pois das 82 estirpes que apresentaram icaA, foi possível observar a presença de bap em 56 (68,3%). Das 83 linhagens que continham o gene icaD em 56 (67,5%) delas, também foi detectada presença do gene bap. Não houve concordância entre os testes fenotípicos (K<0,2). A positividade no vermelho congo revelou que 25% das... / Abstract: Staphylococcus aureus is common in intramammary infections, which often become chronic, among other factors, by the ability of this bacteria to produce biofilm. The objective was to verify the production of biofilm capacity in strains of S. aureus and coagulase negative Staphylococcus (CNS), derived from clinical and subclinical bovine mastitis. A total of 100 strains of S. aureus and 100 strains of CNS were isolated from cases of subclinical and clinical mastitis in two properties of São Paulo State. The screening test of subclinical mastitis was the California Mastitis Test (CMT). Somatic Cell Count (SCC) and microbiological culture of milk samples was performed. We researched the presence of icaA, icaD and bap genes by the Polymerase Chain Reaction (PCR) and phenotypic characterization on congo red agar (CRA) and biofilm production on plates. There was no observed relationship between the intensity of the reaction to the CMT and SCC. The mean of SCC was 2.88 ± 0.59 for S. aureus and 2.71 ± 0.35 for CNS. There was no significant statistical between SCC values for strains containing the presence of those researched genes. But the means of the CCS values were higher in isolates that containing such genes. The frequency icaA, icaD and bap in S. aureus were 82%, 83% and 58%, respectively. It was observed that the 83% of S. aureus isolates that had icaD, 82 (98.8%) also had icaA, with statistical significance in the Fischer's exact test (p <0.001). In association between icaA and bap genes, was also observed significant association, for the 82 strains that showed icaA, we observed the presence of bap in 56 (68.3%). Of the 83 strains that containing the icaD gene, 56 (67.5%) of them was also detected the presence of bap gene. There was no agreement between the phenotypic tests (K<0.2). The positivity on congo red agar revealed that 25% of S. aureus strains produced in vitro biofilm. In the adhesion test plates, this number was lower, with ... / Mestre

Orientador: Ana Paula Rosifini Alves Claro / Coorientador: Cristiane Aparecida de Assis Claro / Coorientador: Celestino José Prudente Nóbrega / Banca: Rosana Vilela Chagas / Banca: Cristiane Aparecida Pereira Correia / Resumo: A evolução dos acessórios utilizados em Ortodontia, especialmente no desenho e nos materiais empregados na confecção dos braquetes, tem apresentado grandes avanços tecnológicos. A presença dos aparelhos dentários aumenta a possibilidade de adesão bacteriana sobre estas superfícies e assim, o risco à cárie nos pacientes ortodônticos. Modificações na superfície dos braquetes, como o aumento da hidrofobicidade, redução da rugosidade superficial e deposição de filmes, tem sido empregadas como opção para redução da adesão bacteriana. Neste estudo in vitro, filmes de polímero de hexametildisiloxano foram depositados sobre braquetes metálicos convencionais e autoligantes, empregando a técnica PECVD (Deposição Química por Plasma de Rádio Frequência).As amostras foram divididas emquatrogrupos, dois com e dois sem tratamentode superfície. Foram avaliadas a variação da molhabilidade, rugosidade superficial e adesão de biofilme de Streptococos mutans.Os valores obtidos paraadesão de biofilmeforam analisados usando o teste de Kruskal-Wallis e SNK.Os resultados mostraram diferença estatística significante (p ≤0.05) entre os braquetes convencionais com e sem filme e, entre os braquetes convencionais e braquetes autoligantes. Portanto se conclui, que o tratamento de superfície foi efetivo na redução da adesão bacteriana nos braquetes convencionais, se observou também, que os braquetes convencionais apresentaram menor adesão de biofilme que os braquetes autoligantes / Abstract: The evolution of the accessories in Orthodontics,especially in the design and materials used in the brackets manufacture, has exhibited major technological advances.The presence of dental appliances increases the possibility of bacterial adhesionon these surfaces and thus the risk of caries in orthodontic patients. Changes on the brackets surface, asthe increased hydrophobicity, reduced surface roughness and film deposition have been employed asan option for reducing bacterial adhesion. In this in vitro study, hexamethyldisiloxane polymer films were deposited on conventional and self-ligating stainless steel brackets, using the Radio Frequency PECVD technique (Plasma- Enhanced Chemical Vapor Deposition). The samples were divided into four groups according to the surface treatment, two treated and two untreated. The changes in wettability, surface roughness and adhesion of the Streptococcus mutans biofilm were evaluated. The values obtained for biofilm adhesion were analyzed using the Kruskal-Wallis and SNK test. The results showed statistically significant difference (p ≤ 0.05)between conventional brackets before and after surface treatment and between conventional and self-ligating brackets. Therefore it was concluded that surface treatment was effective in reducing bacterial adhesion inconventional brackets, it was also noted that the conventional brackets showed lower biofilm adhesion than self-ligating brackets / Mestre

Orientador: Katia Cristina Kupper / Banca: Sérgio Florentino Pascholati / Banca: João Martins Pizauro Junior / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Sandra Regina Ceccato Antonini / Resumo: The biocontrol efficiency of Aureobasidium pullulans strain ACBL-77 was evaluated against Geotrichum citri-aurantii, the causal agent of sour rot in citrus, and their interactions were studied in vitro and in vivo. For this purpuse, were evaluated (i) the biocontrol efficiency of A. pullulans ACBL-77 against the pathogen; (ii) the effect of different culture media on the production of yeast cells; (iii) the incorporation of nutritional sources in optimizing the antagonistic activity; (iv) the competition for nutrients between the microorganisms; (v) the effect of nutrients on yeast cell and biofilm production and their relation in the biocontrol of disease; (vi) the survival of yeast in citrus fruits; (vii) the interaction between the microorganisms by scanning electron microscopy; (viii) the effect of A. pullulans applications in the citrus fruits quality; (ix) the effect of ACBL-77 in the activity of the enzymes possibly involved with resistance induction. In the results this study, were verified that in the fruits treated with A. pullulans ACBL-77, preventively, the control percentage was higher than the curative treatment. The potato-dextrose-agar medium promoted the highest amount of yeast cells. The incorporation of micronutrients, such as boric acid, cobalt chloride and ammonium molybdate (1 mM), favoured the antagonistic action of A. pullulans in vitro. Ammonium sulphate 1mM and sucrose 0.5% favoured the yeast during the competition between the microorganisms. However... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The biocontrol efficiency of Aureobasidium pullulans strain ACBL-77 was evaluated against Geotrichum citri-aurantii, the causal agent of sour rot in citrus, and their interactions were studied in vitro and in vivo. For this purpuse, were evaluated (i) the biocontrol efficiency of A. pullulans ACBL-77 against the pathogen; (ii) the effect of different culture media on the production of yeast cells; (iii) the incorporation of nutritional sources in optimizing the antagonistic activity; (iv) the competition for nutrients between the microorganisms; (v) the effect of nutrients on yeast cell and biofilm production and their relation in the biocontrol of disease; (vi) the survival of yeast in citrus fruits; (vii) the interaction between the microorganisms by scanning electron microscopy; (viii) the effect of A. pullulans applications in the citrus fruits quality; (ix) the effect of ACBL-77 in the activity of the enzymes possibly involved with resistance induction. In the results this study, were verified that in the fruits treated with A. pullulans ACBL-77, preventively, the control percentage was higher than the curative treatment. The potato-dextrose-agar medium promoted the highest amount of yeast cells. The incorporation of micronutrients, such as boric acid, cobalt chloride and ammonium molybdate (1 mM), favoured the antagonistic action of A. pullulans in vitro. Ammonium sulphate 1mM and sucrose 0.5% favoured the yeast during the competition between the microorganisms. However, the addition of ammonium sulphate at 1% in the yeast culture stimulated biofilm production and consequently increased the antagonistic activity against the pathogen in vivo. The application of A. pullulans to fruits allowed the better survival of yeast in wounded sites of citrus fruit. The yeast was found to be able to form biofilm on citrus, deforming the ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor