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Caracterização e avaliação de metalotioneíma como biomarcador de exposição a cádmio no mexilhão Perna perna (Linné, 1758)

Müller, Isabel Cristina January 2004 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T17:19:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Metalotioneínas (MT) são proteínas de baixo peso molecular, termoresistentes e ricas em resíduos de cisteína. Devido a sua afinidade por metais-traço, tem sido sugerido que, em organismos aquáticos, estas proteínas atuem na homeostase e detoxificação de metais essenciais (Cu e Zn) e não essenciais (Cd e Hg). Além disso, as MT poderiam estar envolvidas na resistência a metais em organismos expostos a estes compostos. O objetivo deste estudo foi identificar e caracterizar a presença de MT na glândula digestiva do mexilhão Perna perna, clonar e seqüenciar o cDNA de MT a partir das brânquias e padronizar as técnicas de PCR semi-quantitativa e Slot blotting para detectar os níveis de MT em animais expostos a cádmio em laboratório. Dois grupos de mexilhões (n=3 por grupo) foram expostos a Cd (0,3 mg/L) por 7 e 15 dias. As glândulas digestivas foram retiradas, homogeneizadas e centrifugadas. Os sobrenadantes resultantes foram submetidos à cromatografia de filtração em gel (Sephadex G-75). Uma fração correspondente a proteínas de baixo peso molecular (faixa de PM = 20 -10 kDa) foi observada nos animais expostos a cádmio. Estes resultados estão de acordo com o perfil de eluição das amostras, obtido por cromatografia líquida de alta performance (HPLC), em uma coluna de exclusão molecular (DIOL - 150; Shimadzu). A presença de Cd foi determinada nesta fração de baixo peso molecular, através de análises químicas por ICP - MS. Alíquotas do sobrenadante e das frações obtidas foram analisadas através de eletroforese em um gel gradiente de poliacrilamida, em condições desnaturantes (PAGE-SDS) e, uma proteína com peso molecular aparente de 16 kDa foi detectada. Mexilhões foram expostos a Cd (0,25 e 0,5 mg/L) por 48 horas, 7 e 18 dias (n=5 por grupo). As brânquias foram retiradas e utilizadas para a extração de RNA total. A partir do cDNA obtido foi realizada a reação de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), utilizando diferentes iniciadores para a amplificação de sequências de MT e de b-actina. O fragmento correspondente à MT foi clonado e aguarda sequenciamento. Além disso, as técnicas de PCR semi-quantitativa e Slot blotting foram avaliadas como ferramentas para a quantificação dos níveis de MT nos mexilhões expostos a Cd. De acordo com os resultados preliminares obtidos, ambas as metodologias mostraram-se eficientes. O aumento nos níveis de proteínas ligantes a metais e do RNA da MT pode ser atribuído a uma resposta de defesa celular contra a exposição a metais. Sua avaliação, através de metodologias como HPLC, PCR semi-quantitativa e Slot blotting, representa uma perspectiva relevante para o biomonitoramento ambiental, utilizando o mexilhão Perna perna.
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Produção de inoculante, seleção e aplicação de fungos ectomicorrízicos em mudas de Pinus taeda L

Oliveira, Leyza Paloschi de January 2004 (has links)
Dissertação (mestrado) - UNiversidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Bioctecnologia / Made available in DSpace on 2012-10-21T22:46:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 208797.pdf: 909423 bytes, checksum: 797d00cf9a611b69121017553bcd996b (MD5) / A silvicultura catarinense está aumentando sua participação no mercado de produtos florestais no Brasil e no mundo. Para atender a demanda do mercado é necessário encontrar novas tecnologias que aumentem a produtividade e a sustentabilidade das plantações florestais. Dentre essas novas tecnologias, a melhoria da qualidade das mudas poderá contribuir para o estabelecimento das florestas em regiões menos favoráveis. Para atingir esse objetivo, alguns países já recomendam, ou mesmo exigem, a inoculação de mudas de essências florestais com fungos ectomicorrízicos (fECM). A simbiose mutualística entre raízes e fungos, denominada micorriza, beneficia a produção florestal, uma vez que aumenta a absorção de nutrientes e protege as plantas contra condições adversas. Assim, é necessário selecionar fECM eficientes para que se possa estabelecer as melhores combinações hospedeiro-fungos a ser aplicadas em programas florestais. Com esse propósito, 13 isolados de fungos ectomicorrízicos, obtidos de plantações de pínus em Santa Catarina, foram estudados em relação à infectividade e à eficiência em promover o crescimento de mudas de Pinus taeda. Inicialmente, a produção de inoculante desses isolados foi estudada em duas condições de aeração: natural e forçada. Nenhuma diferença foi detectada em relação a esses dois tratamentos em termos de crescimento dos fungos. Isto indica que o inoculante fúngico pode ser produzido com aeração natural, o que representa maior ganho de tempo e outros custos. Como o nível de fósforo pode ser um fator importante para a infectividade e eficiência dos fECM, um segundo estudo foi realizado para testar o efeito de cinco diferentes níveis de P (0, 0,5, 1,0, 2,0 e 4,0 mg P por planta) na colonização, produção de matéria seca e absorção de P de mudas de P. taeda inoculadas separadamente com os 13 isolados de fECM. O substrato de plantio, à base de uma mistura turfa-vermiculita, foi inoculado com inoculante proveniente do estudo de aeração, sendo distribuído em tubetes plásticos (60 mL) e semeado com cinco sementes de P. taeda por tubete. Após duas semanas foi realizado o desbaste, deixando-se somente uma planta por tubete. As plantas foram mantidas em casa de vegetação durante 120 dias e irrigadas diariamente com água destilada. Após esse período, foram colhidas e avaliadas quanto à colonização micorrízica, altura, diâmetro, matéria seca e conteúdo de P na parte aérea. Os maiores níveis de P no substrato inibiram a colonização pelos isolados. A dose de 1 mg P por planta foi a que mais favoreceu a colonização. Os isolados Marx 270 (Pisolithus tinctorius), UFSC-Am75 (Amanita muscaria), UFSC-Sc42 (Scleroderma sp.) e UFSC-Su118 (Suillus cothurnatus) foram aqueles que apresentaram maior potencial para programas de inoculação em viveiros de Pinus taeda. Finalmente, inoculante com oito meses de idade de um dos isolados UFSC-Rh90 (Rhizopogon nigrescens), produzido em bioreator airlift e imobilizado em alginato de cálcio, foi testado em relação a mudas de P. taeda em casa de vegetação, mostrando alta infectividade e indicando que a fermentação líquida, seguida pela imobilização em gel, pode ser um método eficiente para a produção de inoculante de fungos ectomicorrízicos.
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Validação da mensuração da explosão respiratória em granulócitos humanos normais e leucêmicos induzida por zymosan e éster de forbol pela técnica de citometria de fluxo

Lunardi, Fabiane January 2004 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T05:28:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 208366.pdf: 815423 bytes, checksum: ec812f1ce0f5b909e707ec36b6207424 (MD5)
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A proteção legal do embrião humano e sua relação com a engenharia genética na união européia e no Brasil

Ghisolfi, Reginaldo da Luz January 2002 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Jurídicas. Programa de Pós-Graduação em Direito / Made available in DSpace on 2012-10-20T02:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T01:37:39Z : No. of bitstreams: 1 182956.pdf: 10038383 bytes, checksum: fea5a803cb9c039f1c1c2138717b2bdc (MD5) / Pesquisa a proteção legal ao embrião humano na União Européia e no Brasil, como decorrência dos avanços da engenharia genética, a partir das considerações históricas e das ligações entre a Moral, a Religião e o Direito. Considera os sistemas jurídicos da common law e os dos países que tiveram suas raízes no Direito Romano-Germânico com a função integrativa do Direito Canônico a partir da Idade Média. Pesquisa algumas das tecnologias em uso, relativamente à reprodução assistida, bem como outras que se acham em desenvolvimento, como a clonagem. Aborda o Projeto Genoma Humano, a terapia gênica, o mapeamento genético e questões como a discriminação genética. Conclui pela necessidade da elaboração de um Estatuto do Embrião Humano no âmbito do Direito Internacional, pelos procedimentos éticos nas pesquisas científicas e pela harmonização da necessária liberdade de investigação científica, fundamental para o progresso da Ciência com o não menos necessário respeito à dignidade humana, fundamental para a segurança jurídica.
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Seleção de fungos ectomicorrízicos eficientes para promoção do crescimento de Eucalyptus dunnii Maiden

Souza, Luiz Afonso Borges de January 2003 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-20T13:18:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A crescente demanda de produtos do setor florestal tem gerado um déficit no mercado mundial que exige o desenvolvimento e a aplicação de tecnologias alternativas para o aumento da produtividade das essências florestais. Os solos destinados ao reflorestamento no Brasil são, na sua maioria, de baixa fertilidade, utilizando-se grandes quantidades de fertilizantes químicos. Essas práticas oneram a produção e contribuem para a poluição do ambiente através da hipoxia e eutroficação dos mananciais aqüíferos. O eucalipto, a essência florestal mais utilizada em reflorestamentos no país, apresenta crescimento rápido e tem a seu
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Produção de inoculante de fungo ectomicorrízico utilizando fermentação no estado líquido em biorreator tipo airlift

Rossi, Márcio José January 2001 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. / Made available in DSpace on 2012-10-18T10:27:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T23:05:45Z : No. of bitstreams: 1 177253.pdf: 25762417 bytes, checksum: 08ff918d80f18b8d7fa947c864df47ec (MD5) / Este estudo inicia uma nova geração de bioprocessos para a produção de inoculantes de fungos ectomicorrízicos (fECM). Foi estudada a produção de inoculante do fECM Pisolithus microcarpus (isolado UFSC-Pt 116), em biorreator tipo airlift com circulação externa. Inicialmente, estudou-se o efeito da composição do meio de cultura sobre a produção de biomassa fúngica, utilizando-se como base os meios Melin-Norkrans Modificado (MNM) e meio Litchfield e Arthur (L&A). Uma das variações do meio L&A, que promoveu maior produtividade, foi estudada por meio de planejamento fatorial, tendo-se como variáveis os componentes: peptona, extrato de levedura e glicose (g.L-1). A concentração de glicose pôde ser aumentada em até 40%, permitindo um melhor rendimento do biorreator. A peptona (de carne ou soja) apresentou fatores de crescimento importantes, enquanto que o extrato de levedura apresentou fatores deletérios. Em biorreator airlift o fungo cresceu principalmente na forma de pellets densos e esféricos, havendo grande produção de pigmentos. Os valores de velocidade específica máxima de crescimento foram 0,391 dia-1, para o cultivo em frascos, e 0,576 dia-1, para o cultivo no airlift. Os valores de conversão foram 0,42 g.g-1, e de produtividade de 0,49 g.L-1.dia-1, para os dois processos. O biorreator airlift forneceu velocidade específica de formação de biomassa superior a outros processos citados na literatura, com relação ao gênero Pisolithus, mostrando-se promissor para produção de biomassa de fECM. São necessários, no entanto, estudos visando controlar a fisiologia de crescimento do fungo e a adequação do processo ao cultivo de outros isolados/espécies de fECM.
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Indução e controle da embriogênese somática em Pinus taeda L.

Silveira, Vanildo January 2001 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-18T12:09:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A embriogênese somática (ES) é a principal técnica de cultura in vitro empregada para a micropropagação das coníferas. O presente trabalho teve como objetivo principal o estudo dos fatores determinantes da indução e controle da ES em Pinus taeda. Para tal foram determinados os fatores que afetam a indução, a multiplicação e a maturação de culturas embriogênicas (CE) assim como, os aspectos bioquímicos e fisiológicos da embriogênese zigótica (EZ). Foi estabelecido um protocolo de indução de CE de P. taeda, com coletas sendo realizadas no mês de dezembro, com megagametófitos como explantes e utilizando o meio de cultura BM suplementado com 2,4-D (10 mmol/L), BAP (4 mmol/L) e Kin (4 mmol/L). Foi possível o estabelecimento de suspensões celulares em meio de cultura BM isento de fitorreguladores e em meio de cultura líquido BM suplementado com 2,4-D (2 mmol/L), BAP (0,5 mmol/L) e Kin (0,5 mmol/L). Na maturação foram obtidos embriões somáticos no estágio globular e torpedo em meio de cultura BM com PEG (6%) e maltose (6%). Nas CE foram observados níveis inferiores de proteína e níveis superiores de amido quando comparados com os níveis observados nos estágios da EZ. O estudo comparativo entre a ES e EZ, deverá ser o próximo passo para a compreensão e controle dos eventos ocorridos durante a ES de P. taeda.
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Supressão temporária do crescimento folicular ovariano em ovelha pela administraçao continuada de deslorelina na forma injetável ou implante de liberação controlada / Temporary suppression of ovarian follicular growth in ewe by continued administration of deslorelin in injectable form or controlled release implant

Scagion, Luiz Fernando Salgado [UNESP] 19 June 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-19. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:30:03Z : No. of bitstreams: 1 000850429.pdf: 596545 bytes, checksum: 6e5f34f97334f6e8b44f850f7ebd38bb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivou-se estudar comparativamente os efeitos da administração seriada de 100μg de deslorelina por via intramuscular frente ao implante de liberação continuada de deslorelina (4,7mg), sobre a supressão temporária do crescimento folicular ovariano em ovelhas Bergamácia, visando a aplicação em biotecnologias do controle da ovulação. Após um período de adaptação e monitoramento da ciclicidade, as ovelhas tiveram o estro sincronizado pelo emprego de dispositivo intravaginal Eazi-Breed CIDR®, (0,33g de progesterona) de segundo uso, por 12 dias e administração única, pela via intramuscular, de 350UI de eCG concomitantemente à retirada do dispositivo. Foram coletadas amostras de sangue para confirmação da ovulação e ciclicidade através da quantificação de progesterona no plasma sendo considerados animais com atividade lútea aqueles que apresentaram valores igual ou superior a 1ng/mL. Decorridos seis dias da ovulação, as fêmeas foram então divididas em quatro grupos: G0 (Controle): animais sem tratamento; G1 (DES 48h); animais submetidos a aplicações intramusculares de 100μg de deslorelina a cada 48 horas durante sete dias; G2 (DES 72h): animais submetidos a aplicações intramusculares de 100μg de deslorelina a cada 72 horas durante sete dias; e G3 (Implante): animais com implante subcutâneo contendo 4,7mg de deslorelina que permaneceu por sete dias. Durante o período de tratamento específico de cada um dos grupos (sete dias), os animais tiveram os ovários monitorados ultrassonograficamente uma vez ao dia para a constatação da supressão do crescimento folicular, sendo os folículos presentes nos ovários classificados em pequenos, com diâmetro de 2 a 2,9mm, médios, com diâmetro de 3 a 4,4mm e grandes, com diâmetro ≥4,5mm. O monitoramento ultrassonográfico ovariano foi mantido após o término dos tratamentos, até que 100% das ovelhas retomasse a atividade de crescimento folicular. A população... / The objective is to comparatively study the 100μg deslorelin serial administration effects front implantation of sustained release deslorelin (4.7 mg) on the temporary suppression of ovarian follicular growth in Bergamacia ewe aiming the application in biotechnology for the control of ovulation. After an adaptation period and monitoring of cyclicity, they had estrus synchronized with the second use intravaginal device Eazi-Breed CIDR® (0.33g progesterone) for 12 days and a single intramuscular injection, of eCG 350UI concurrently with the removal of the device. Blood samples were collected for confirmation of ovulation and cyclicality by measuring plasma progesterone being considered with luteal activity those animals with values equal or higher than 1 ng / mL. Elapsed six days of ovulation females was then be randomly divided into four groups: G0 (Control): untreated animals; G1 (DES 48h); animals subjected to intramuscular injections of 100μg deslorelin every 48 hours for seven days; G2 (DES 72h) animals subjected to intramuscular injections of 100μg deslorelin every 72 hours for seven days; and G3 (implant): animals with subcutaneous implant containing 4.7 mg deslorelin that remained for seven days. During the specific treatment period of each group (seven days), the animals ovaries was monitored by ultrasound to establish the suppression of follicular growth. And the follicles present in the ovaries classified into small, with a diameter of 2 to 2.9 mm, medium, with a diameter of 3 to 4.4 mm and large diameter ≥4.5mm. Ovarian ultrasound monitoring was maintained after completion of treatment, until 100% of the sheep retake the follicular activity. The follicular population was compared in the groups and between the groups during the treatment period. The G0 (Control) did not differ (p> 0.05) between the follicles classes wherein the post-synchronization elapsed time did not allow to characterize the typical pattern in ...
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Estudo comparativo de gel de palquetas home made versus hidrocolóide no processo de cicatrização de úlcera crônicas de etiologia venosa

Oliveira, Mariele Gobo de [UNESP] 28 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:13:52Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_mg_me_botfm.pdf: 765631 bytes, checksum: 770d8b935d3cfcc2b0617ece4f83fe51 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As úlceras venosas são impactantes e representam um grande desafio médico devido ao entrelaçamento de comorbidades e causas multifatoriais, sendo de suma importância o surgimento de inovações tecnológicas na abordagem terapêutica que sejam acessíveis aos seus portadores. Diante dessa realidade, este trabalho se propôs a abordar as úlceras venosas comparando um produto existente no mercado, Hidrocolóide (HC), com uma proposta in house, o Gel de Plaquetas (GP), através da diminuição da área, avaliação descritiva da vascularização e queixas referidas. Participaram do estudo 17 pacientes, perfazendo um total de 22 úlceras venosas que foram acompanhados durante 90 dias, utilizando um dos produtos citados, de acordo com o randomização, em associação com o uso de faixas elásticas. A distribuição do grupo, segundo a randomização foi de 13 lesões no grupo de hidrocolóide e 9 no grupo de gel de plaquetas. A média percentual de redução das áreas das feridas foi de 57,78% para hidrocolóide e de 53,45% para gel de plaquetas, não apresentando diferenças estatisticamente significativas. O desempenho dos produtos estudados apresentaram grande similaridade no percentual de redução de área, o que indica que é preciso um estudo amostral maior para evidenciar superioridade de um produto sobre o outro. Porém quando comparados, quanto ao menor tempo de acompanhamento (D15), o gel de plaquetas apresentou melhor desempenho, com redução maior do que o hidrocolóide em tempo reduzido semelhante. A análise histológica no momento pré e pós tratamento sugere que o GP atua de forma a estimular a regeneração dos tecidos (estroma coeso) e de forma mais definitiva (distribuição dos vasos difusa na derme reticular). O aspecto do fechamento da lesão é mais consistente quando comparado com os pacientes que usaram HC onde se observou a formação de uma fina epiderme frágil... / Venous ulcers are striking and represent a major challenge due to the commingling of medical comorbidities and multifactorial causes, with the emergence of great importance to technological innovations in therapeutic approaches that are accessible to their patients. Given this reality, this study proposes to address venous ulcers comparing a product on the market, hydrocolloid (HC) with a proposed in-house, the Platelet Gel (GP), by decreasing the area and descriptive evaluation of vascularization complaints referred. The study included 17 patients, a total of 22 venous ulcers who were followed for 90 days, using one of the products listed, according to the randomization, in association with the use of compression elastic. The distribution of the group, according to randomization was 13 injuries in the hydrocolloid group and 9 in the group of platelet gel. The average percentage reduction of wound areas was 57.78% for hydrocolloid and 53.45% for platelet gel, showing no statistically significant differences. The performance of the products studied showed great similarity in the percentage of area reduction, which indicates that it is necessary to study a larger sample to demonstrate the superiority of one product over another. But when compared, for the shortest time of follow-up (D15), the platelet gel performed better, with greater reductions than the hydrocolloid in a short time like that. Histological analysis in the D0 and D90 of the treatment suggests that the GP acts to stimulate the regeneration of tissues (stroma together) and more definite form (diffuse distribution of vessels in the reticular dermis). The appearance of the closure of the injury is more consistent when compared with patients who used HC we observed the formation of a thin skin, fragile, observed in histological sections showed that a distribution of vessels in the papillary dermis. Histological sections confirmed... (Complete abstract click electronic access below)
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Seqüenciamento e expressão da trombopoietina canina

Bulla, Camilo [UNESP] 10 1900 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-10Bitstream added on 2014-06-13T21:05:04Z : No. of bitstreams: 1 bulla_c_dr_botfmvz.pdf: 626020 bytes, checksum: d96c8e4feb7120d23a1c75d9cd2666f7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Clicar acesso eletrônico abaixo. / Click electronic access below.

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