An in depth review is given of Host Plant Resistance research on borers in general, and on B. fusca in particular. The general biology and economic importance of B. fusca are also discussed. Several aspects of the general methodology of breeding for resistance to B. fusca are discussed. These topics include collection of overwintering larvae, termination of diapause, field infestation methodology and damage assessment. Approximately 20 first instar larvae were applied to the plant whorl when plants were about 30 - 40 cm tall. The primary method of damage assessment was to evaluate leaf damage on a 1 to 5 scale. Further criteria for selection of resistant germplasm are assessment of stunting due to stem boring and yield at harvest. The effect of plant resistance on B. fusca was investigated. There were clearly defined differences in leaf damage evident between different maize genotypes. Heritability of this resistance was demonstrated, and presumed to be an additive mechanism that reduced insect feeding, indicating antibiosis. There were significant differences between the number of larvae recovered from whorl tissue of different cultivars. This was ascribed to two resistance mechanisms exerting their effects within the first few days' feeding by larvae. One mechanism was short lived, but effective, antibiosis resulting in larval death, while the other, also short lived, was repellence, resulting in larval migration. Both mechanisms resulted in fewer larva feeding in the plants. Another longer lasting resistant mechanism affected larval growth and mass gain, resulting in smaller larvae. These mechanisms were found to be heritable traits. Differences in levels of resistance affecting larval mass gain were also determined for various parts of the tassel. For all inbreds, the peduncles were more susceptible than the tassel Cultivars also differed in the levels of resistance in the stern tissue. Resistance in leaf tissue did not necessarily mean that resistance occurred in the stern of that genotype. Some cultivars had resistance mechanisms present in both leaves and sterns, some had only one resistance mechanism in either part, and some were totally susceptible. The effect of the borer on the plant was investigated. Leaf damage was found to not be of any consequence, but severe stern damage caused extensive yield losses. There was good correlation between leaf damage and stern damage. Yield loss was most pronounced in longer season hybrids than in quick maturing hybrids. Methodologies utilized in the development of inbreds, populations and hybrids are discussed. It was concluded that borer resistant hybrids do have a place in the commercial market. However their performance under conditions of low or no infestation must be similar to that of other susceptible hybrids because control measures for B. fusca are not excessively expensive. / Thesis (Ph.D.)-University of Natal, Pietermaritzburg, 1989.

Typescript (photocopy). / Digitized by Kansas Correctional Industries

Sphaeroma terebrans (Bate 1866) is an economically and ecologically important cosmopolitan species because this isopod is found burrowed in wood and marine structures of fresh to saline water. Existing literature on S. terebrans focuses on the destruction of red mangrove (Rhizophora mangle) in India, Pakistan, and Florida. This study concentrates on S. terebrans habitat and boring preferences in bald cypress (Taxodium distichum) in Lake Pontchartrain near the Bonnet Carre Spillway, Louisiana. In addition laboratory experiments for water column distribution and substrate preferences were conducted using cypress, Styrofoam, and balsa. Results indicate that this population may be parthenogenic and that wood or material hardness determines whether S. terebrans burrow when given a choice of substrates. The lake shoreline near the Bonnet Carre Spillway is retreating and the presence of S. terebrans contributes to shoreline erosion by weakening and destroying cypress. This has implications for restoration projects in coastal Louisiana.

Orientador: Odair Aparecido Fernandes / Coorientador: Cláudia Pio Ferreira / Banca: Leila Luci Dinardo Miranda / Banca: Daniel Junior de Andrade / Resumo: A broca-da-cana, Diatraea saccharalis, é considerada uma das principais pragas da cana-de-açúcar e tem causado sérios prejuízos em novas fronteiras agrícolas brasileiras que abrangem o oeste do estado de São Paulo e a região centro-oeste do país. Desta forma, este trabalho teve por objetivo avaliar a dinâmica populacional de adultos de Diatraea saccharalis em diferentes regiões canavieiras e sua relação com os fatores meteorológicos, bem como estabelecer modelo de previsão de ocorrência com base em graus-dia e equações de diferenças. Os adultos foram avaliados semanalmente durante duas safras (2013/2014 e 2014/2015) em cultivos localizados nos estados de São Paulo (Pradópolis e Valparaíso) e Goiás (Quirinópolis). Em cada localidade foram utilizados um ou dois talhões de 25 ha, próximos (< 2 km) a estações climáticas. Em uma área central (1 a 1,5 ha) de cada talhão foram instaladas quatro armadilhas delta contendo fêmeas virgens e piso colante para captura dos adultos. O número de adultos coletados e os dados climáticos foram submetidos à análise de regressão múltipla e correlação. Modelos matemáticos baseados em graus-dia e equações de diferenças foram elaborados. Verificou-se maior ocorrência de adultos no período das chuvas, principalmente, de janeiro a abril. Não houve correlação entre os fatores climáticos e a flutuação populacional; com exceção de Quirinópolis, onde a umidade foi fator abiótico limitante para o crescimento populacional desta espécie. Os modelos de graus-... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The sugarcane borer, Diatraea saccharalis, is considered one of the main pest of sugarcane and has caused serious losses in new Brazilian agricultural frontiers including the western region of São Paulo state and the Midwest region of the country. Thus, this study aimed to assess the population dynamics of D. saccharalis adults in different sugarcane regions and its relationship with meteorological factors, as well as to establish a forecasting model based on degree days and difference equations. The adults were evaluated weekly for two growing seasons (2013/2014 and 2014/2015) in areas located in the states of São Paulo (Pradópolis and Valparaiso) and Goiás (Quirinópolis). In each location we used one or two plots of 25 ha, near (<2 km) to meteorological stations. In a central area (1 to 1.5 ha) of each block, four delta traps with virgin females and sticky floor were installed to capture adults. The number of collected adults and weather data were submitted to analysis of multiple regression and correlation. Mathematical models based on degree days and difference equations were developed. A higher occurrence of adults was observed during the rainy season, mainly from January to April. There was no correlation between climatic factors and population dynamics; except for Quirinópolis where the relative humidity was a limiting abiotic factor for population growth of this species. Models of degree days and difference equations are complementary and have shown effectiveness in f... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da umidade em quatro tipos de solos sobre a emergência de adultos e duração da fase pupal das moscas-das-frutas, Ceratitis capitata (Wiedemann, 1824) e Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) e do bicho-furão dos citros, Gymnandrosoma aurantianum Lima, 1927 e na emergência do parasitóide de moscas-das-frutas, Diachasmimorpha longicaudata (Ashmed, 1905), utilizando-se diferentes potenciais mátricos de água no solo e com uma metodologia própria e desenvolvida no presente trabalho. As profundidades de pupação de G. aurantianum e A. fraterculus foram estudadas em tratamento seco e úmido (5%), com a finalidade de se determinar a profundidade adequada para cada espécie utilizada nos experimentos de avaliação da influência da umidade em quatro tipos de solo. G. aurantianum pupou na mesma profundidade em substrato úmido ou seco. A pupação de A. fraterculus é mais superficial em condições secas, com 100% de pupação entre 0 e 1,5 cm. Para C. capitata, a profundidade utilizada no experimento de influência da umidade e do tipo de solo foi a de 3,0 cm. A duração da fase pupal desta espécie foi influenciada diferentemente para machos e fêmeas. Para fêmeas, apenas o tipo de solo influenciou a duração da fase pupal, que foi maior no solo Argiloso. Nos machos, a duração da fase de pupa foi influenciada pela umidade e pelo tipo de solo, isoladamente, ocorrendo redução da fase pupal de machos de C. capitata no solo Muito Argiloso e Argilo arenoso, com maior duração no solo Argiloso. À medida que o potencial mátrico diminuiu, a duração da fase pupal de machos de C. capitata aumentou, independentemente do tipo de solo. A emergência de C. capitata foi influenciada pela umidade, independentemente do tipo de solo, sendo maior em solos mais secos. Para A. fraterculus, a interação da umidade e do tipo do solo influenciou a duração da fase pupal para machos e fêmeas de forma semelhante. As menores durações da fase pupal, para machos e fêmeas de A. fraterculus, foram proporcionadas nos solos com maiores teores de areia (Franco arenoso e Argilo arenoso) e no solo com alto teor de argila (Muito argiloso), neste caso, na maior umidade do solo. Porém, verificou-se, para fêmeas de A. fraterculus, redução da fase pupal à medida que a umidade dos solos Franco arenoso e Argilo arenoso diminuiu; para machos, esta redução foi observada em todas as umidades estudadas nestes solos. A emergência de A. fraterculus foi influenciada pela interação da umidade e do tipo do solo, sendo maior nos solos que apresentaram maior retenção de água nos diferentes potenciais mátricos aplicados aos solos Argilo arenoso e Muito argiloso. A emergência de D. longicaudata foi influenciada pelos fatores tipo de solo e umidade, isoladamente, sendo o número de adultos emergidos de D. longicaudata maior no solo Franco arenoso e menor no Muito argiloso; sempre, o número de adultos emergidos foi maior em altas umidades. A duração da fase de pupa de machos e fêmeas de G. aurantianum foi influenciada pela interação da umidade e do tipo de solo, porém de forma irregular e que não permitiu a construção de um modelo lógico que explique a relação entre maiores ou menores durações com teores de umidade e tipos de solo. A emergência de G. aurantianum foi influenciada pela interação umidade e tipo de solo, sendo maior em solos com maiores teores de areia. O presente trabalho poderá elucidar como alguns fatores do solo afetam o desenvolvimento destas pragas e do inimigo natural, auxiliando na adoção de novas estratégias de manejo, além de fornecer subsídios para a amostragem e para o entendimento da ocorrência destas pragas em ambientes agrícolas. / The goal of this work was to evaluate moisture effect on four soil types in the emergence of adults and duration of the pupal stage of fruit flies, Ceratitis capitata (Wiedemann, 1824) and Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) and citrus fruit borer, Gymnandrosoma aurantianum Lima, 1927, and in the emergence of the fruit fly parasitoid, Diachasmimorpha longicaudata (Ashmed, 1905), using different soil water matric potential and a particular methodology, developed in this work. The pupation depths of G. aurantianum and A. fraterculus were studied through a dry and moist (5%) treatment, in order to determine the adequate depth for each species for further use in the investigation of the influence of moisture on four soil types. G. aurantianum pupated at the same depth either under moist or dry medium. A. fraterculus pupation was more superficial under dry conditions, with 100% pupation between 0 and 1.5 cm. For C. capitata, one used a 3.0 cm depth to verify the influence of moisture and soil type. The pupal stage duration of the species was affected differently for males and females. For females, only the soil type influenced the pupal stage duration, which was higher under Clay soil (42,8% clay). In males, the pupal stage duration was influenced by moisture and soil type separately, and the pupal stage of C. capitata was low in Clay (68% clay) and Sandy Clay soil, with higher duration in Clay soil (42,8% clay). As the matric potential decreased, the duration of the pupal stage of C. capitata males increased, regardless of the soil type. The emergence of C. capitata was influenced by the moisture, regardless of the soil type, and was higher in drier soils. For A. fraterculus, the moisture-soil type interaction influenced the pupal stage duration for both males and females similarly. The lower pupal stage durations for A. fraterculus males and females were provided by higher sand content soils (Sandy Loam and Sandy Clay soils) and in high clay content soil (Clay soil, 68% clay), in the higher soil moisture. For A. fraterculus females, however, the pupal stage decreased as the moisture of Sandy Loam and Sandy Clay soils decreased; for the males, such reduction was observed in all moisture degrees studied on these soils. The emergence of A. fraterculus was influenced by the moisture-soil type interaction, higher in higher water retention soils at different matric potentials applied to Sandy Clay and Clay (68% clay) soils. The emergence of D. longicaudata was influenced by the soil type and moisture factors separately, and the number of adults emerging from D. longicaudata was higher in Sandy Loam and lower in Clay (68% clay) soil; the number of emerged adults was always higher under high moisture. The duration of the pupal stage of G. aurantianum males and females was influenced by the moisturesoil type interaction; however, it was irregular and failed to allow the construction of a logical model to explain the relationship between higher or lower durations with moisture contents and soil types. The emergence of G. aurantianum was influenced by the moisture-soil type interaction, higher at higher sand content soils. This work may clarify how some soil factors affect the development of these pests and relating natural enemies, a path to new management strategies, providing subsidies for the sampling and understanding of the occurrence of these pests in agricultural environments.

O estudo da distribuição de pragas em espaço e tempo em sistemas agrícolas fornece informação importante sobre os mecanismos de dispersão das espécies e sua interação com fatores ambientais. Esse tipo de estudos também é de muita ajuda no desenvolvimento de planos de amostragem, na otimização de programas de manejo integrado de pragas e no planejamento de experimentos. O objetivo deste trabalho foi comparar vários modelos hierárquicos na modelagem da variação espaço-temporal da infestação da broca do café visando produzir mapas de risco da infestação que descrevam adequadamente o processo de infestação. Foram usadas diferentes combinações de efeitos aleatórios representando variabilidade não estruturada, com diferentes escolhas de distribuições a priori para os parâmetros e os hiperparâmetros dos modelos. Foram também usados diferentes esquemas de vizinhança para representar a correlação espacial dos dados. O ajuste dos modelos foi feito usando métodos MCMC. A estatística deviance e funções de perda quadrática foram usadas para a comparação entre modelos. Os resultados são apresentados como uma seqüência de mapas de risco de infestação. / Study of agricultural pests distribution in space and time provides important information about the species dispersion mechanisms and its interaction with environmental factors. It also helps the development of sampling plans, the integrated pest management and planning of experiments. The aim of this work was to compare several hierarchical models in modelling the spatio-temporal variation of the coffee berry borer infestation in order to produce risk maps. Different combinations of random effects representing spatially structured and unstructured variability were used, with different prior distributions for the parameters and hyperparameters. Also different neighbourhood schemes were used to represent the spatial correlation of the data. The model fitting was done using MCMC methods and deviance and squared loss function were used for the comparison between models. The results are presented as a sequence of risk maps.

A região espaçadora ITS rDNA tem sido utilizada como uma importante ferramenta molecular para a identificação de fungos. Neste estudo a região ITS1 - 5.8S - ITS2 foi analisada em diferentes espécies do fungo entomopatogênico Metarhizium incluindo M. anisopliae, M. album e M. flavoviride com o objetivo de se construir primers específicos para a detecção e identificação do fungo no interior de larvas infectadas de Diatraea saccharalis. A amplificação desta região produziu um fragmento único de aproximadamente 540 pb para as linhagens E9, B/Vi e C, e de 600 pb para a linhagem 14 de M. anisopliae var. anisopliae; de 650 bp para M. album e 600 pb para M. flavoviride. Os produtos de PCR obtidos foram digeridos com diferentes enzimas de restrição Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II e Sau 3A I; e os perfis de PCR-RFLP mostraram nítidas diferenças entre as espécies analisadas. O sequenciamento da região ITS1 - 5.8S - ITS2 permitiu o desenho de primers específicos para as linhagens de M.a. var. anisopliae do Brasil e da Austrália. A amplificação não ocorreu em linhagens de M. álbum, M. flavoviride e Beauveria bassiana. Os DNAs extraídos de larvas infectadas pelas linhagens E9, B/Vi e C do Brasil e linhagem 14, da Austrália, foram testados utilizando-se os primers desenvolvidos. Em todos os experimentos o fungo M.a. var. anisopliae foi detectado 48 horas após a inoculação. A técnica molecular empregada neste estudo permite a rápida e segura detecção e identificação de M.a. var. anisopliae em bioensaios de laboratório e de campo, programas de manejo de pragas e estudos de epizootiologia. / The ITS rDNA have been used as an important molecular tool for fungi identification. In this study the ITS1 - 5.8S - ITS2 rDNA regions were analyzed in different species of the entomopathogenic fungus Metarhizium including M. anisopliae, M. album and M. flavoviride, in order to construct specific primers for their detection and identification within infected Diatraea saccharalis larvae. The amplification of this region yielded a unique fragment of approximately 540 bp for E9, B/Vi and C, and 600 bp for strain 14 of M. anisopliae var. anisopliae; of 650 bp for M. album and 600 bp for M. flavoviride. The PCR products were digested with the different restriction endonucleases Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II and Sau 3A I; and the PCR-RFLP profiles showed clear differences amongst the species. The sequencing of the ITS-5.8S rDNA regions allowed for the design of specific primers for M. anisopliae var. anisopliae. The amplification was not observed with M. album, M flavoviride and Beauveria bassiana strains. DNAs extracted from infected larvae by E9 and C strains from Brazil and the strain 14 from Australia in individual bioassays were tested using previously designed specific primers. In all experiments, the fungus was detected after 48 hours of post-inoculation. This molecular technique allows a fast and secure detection and identification of the entomopathogen in bioassays, in pest management programs and epizootiology.

O objetivo do trabalho foi determinar as doses letais e esterilizantes de radiação gama para todas as fases do ciclo evolutivo de Ecdytolopha aurantiana (Lima, 1927) (Lepidóptera: Tortricidae) bicho-furão-dos-citros, visando o seu controle. O trabalho foi conduzido no Laboratório de Raiobiologia e Ambiente/Radioentomologia do Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA), Piracicaba, da Universidade de São Paulo (USP). Para irradiação de todas as fases do inseto foi utilizado uma fonte de Cobalto-60, tipo Gammabeam - 650, as doses utilizadas foram: 0 (controle), 50, 100, 200, 300, 400 e 500 Gy, foram irradiados sob uma taxa de dose de 1,112 kGy/hora. Os ensaios foram realizados em câmara climatizada com temperatura de 25 ? 2?C e umidade relativa de 70 ? 10%. O experimento foi realizado em blocos ao acaso, variando de cinco a oito tratamentos e com três e cinco repetições cada tratamento, com 10 insetos por repetição. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05). Pelos resultados obtidos conclui-se que as doses letais e esterilizantes para todas as fases do ciclo evolutivo do E. aurantinana, foram: ovos a dose letal foi 100Gy a esterilizante 50 Gy; larva de segundo instar a dose letal foi150 Gy a esterilizante 100 Gy; larva de ultimo instar a dose letal foi de 200 Gy a esterilizante 150 Gy; pupa a dose letal foi de 400 Gy, a esterilizante de 300 Gy; já para adultos a dose esterilizante também foi de 300 Gy. Portanto uma dose de 400 Gy pode ser utilizada para o tratamento quarentenário de todas as fases do ciclo evolutivo do bicho-furão-dos-citros / The objective was to determine the lethal and sterilizing doses of gamma radiation for all phases of the life cycle of Ecdytolopha aurantiana (Lima, 1927) (Lepidoptera: Tortricidae) borer of the citrus, aiming its control. The work was conducted in Radiobiology Laboratory and Environment / Radioentomology of the Center for Nuclear Energy in Agriculture (CENA) in Piracicaba city, University of São Paulo (USP). For irradiation of all insect stages was used a source of cobalt-60, type Gammabeam - 650 doses were used: 0 (control), 50, 100, 200, 300, 400 and 500 Gy was irradiated in a dose rate of 1,112 kGy/hour. The assays were performed in a climatic chamber with 25 ? 2?C temperature and humidity on 70 ? 10%. The experiment was conducted in randomized blocks, ranging from five and eight treatments and three and five replicates per treatments, with 10 insects per repetition. The data were submitted to analysis of variance and means were compared by Tukey test (p <0.05). From the results obtained it is concluded that the lethal doses and for sterilizing all stages of the life cycle of E. aurantinana were: egg lethal dose was 100 Gy and 50 Gy the sterilizing; second instar larvae lethal dose was 150 Gy and 100 Gy the sterilizing; last instar larvae of the lethal dose was 200 Gy and 150 Gy the sterilizing; pupae lethal dose was 400 Gy and 300 Gy the sterilizing; the sterilizing dose for adults it was also 300 Gy. Therefore a dose of 400 Gy can be used for quarantine treatment of all stages of the life cycle of the borer of the citrus

Baseando-se em estudos de seleção de linhagens, comportamento, liberação e avaliação de parasitismo, incluindo-se técnicas de marcação com radioisótopos 32P, objetivou-se, nesta pesquisa, verificar em laboratório e no campo, a espécie de Trichogramma mais eficiente para o controle de Ecdytolopha aurantiana (Lima, 1927). Assim, verificou-se em laboratório que Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, 1983, quando comparada com T. pretiosum Riley, 1879, foi a espécie com maior potencial para o controle desta praga. Foi observado que T. atopovirilia apresentou um maior parasitismo na faixa de 20 a 30°C quando comparado às temperaturas de 10, 15 e 35°C, sendo que nesta faixa (15 a 35°C) o parasitismo aumentou a partir de 2 horas de exposição. Houve aumento no parasitismo e na longevidade dos parasitóides, quando foi oferecida uma fonte de alimento (mel puro) aos adultos, logo após a emergência. O parasitismo foi também superior nos ovos mais novos, especialmente, aqueles com 24 horas de desenvolvimento embrionário, comparados aos de 48 e 72 horas, respectivamente, o que pode auxiliar na definição do momento de liberação dos parasitóides no campo. A dosagem do radioisótopo 32P, utilizada para a marcação de espécimens de Trichogramma não interferiu na aceitação e parasitismo de ovos de E. aurantiana e no desenvolvimento dos parasitóides na geração subseqüente. Em condições de campo, o número de parasitóides a serem liberados foi variável dependendo da época do ano. Assim, foram necessários 72 e 288 parasitóides por ovo, nos períodos de abril a junho e de julho a setembro, respectivamente. O grande número de aerópilas presente nos ovos de E. aurantiana facilita o seu ressecamento quando mantidos em substratos artificiais, afetando o comportamento do parasitóide e a sua capacidade de parasitismo em campo. O raio de dispersão e a eficiência de parasitismo em função da distância percorrida por T. atopovirilia foram determinados usando-se o marcador 32P na dosagem determinada. Houve diminuição do parasitismo com o aumento da distância do ponto inicial de liberação dos parasitóides. Observou-se, que nas primeiras 24 horas, as maiores taxas de parasitismo de T. atopovirilia ocorreram entre 8 e 10 m do ponto central de liberação, correspondendo a uma área de 171 m2 de dispersão para os pomares cítricos. Baseando-se nestes resultados, serão necessários 60 pontos de liberação por unidade de área (ha), para viabilizar o uso de T. atopovirilia como uma estratégia de controle biológico de E. aurantiana. / Based on strain selection, behavior, release and parasitism evaluation studies including 32P radioisotope marking, one aimed at verifying in laboratory and field the more efficient Trichogramma species to control Ecdytolopha aurantiana (Lima, 1927). Thus, the comparison between Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, 1983 and T. pretiosum Riley, 1879 in laboratory indicated the first one as the species with higher potential to control the pest. The parasitism in T. atopovirilia was observed to be higher in the 20-30°C range in comparison with temperatures of 10, 15 and 35ºC, and at the studied range (15 to 35°C), the parasitism increased starting in 2 hours of exposure. Parasitism and parasitoid longevity increased when a food source (pure honey) was offered to adults right after emergence. The parasitism was also higher in newer eggs, especially those with 24 hours of embrionary development, compared to those of 48 and 72 hours, respectively, which can help define the moment of parasitoid release in the field. The 32P radioisotope dosage used to mark Trichogramma specimens did not interfere in the acceptance and parasitism of E. aurantiana eggs and in the parasitoid development in the following generation. Under field conditions, the number of parasitoids to be released was variable, depending on the time of the year. Thus, 72 and 288 parasitoids were required per egg in the periods of April-June and July-September, respectively. The large number of aeropiles found in E. aurantiana eggs makes them dry out more easily when kept in artificial mediums, affecting the parasitoid behavior and its parasitism capacity in the field. The dispersion range and parasitism efficiency in function of the distance run by T. atopovirilia were determined through the 32P marker at the given dosage. Parasitism decreased as the distance from the initial point of parasitoid released increased. In the first 24 hours the higher T. atopovirilia parasitism rates were observed to occur between 8 and 10 m from the central release point, corresponding to an area of 171 m2 of dispersion towards the citrus groves. Based on these results, 60 release points will be necessary per area unit (ha) to make the use of T. atopovirilia viable as a biological control strategy for E. aurantiana.

A região espaçadora ITS rDNA tem sido utilizada como uma importante ferramenta molecular para a identificação de fungos. Neste estudo a região ITS1 - 5.8S - ITS2 foi analisada em diferentes espécies do fungo entomopatogênico Metarhizium incluindo M. anisopliae, M. album e M. flavoviride com o objetivo de se construir primers específicos para a detecção e identificação do fungo no interior de larvas infectadas de Diatraea saccharalis. A amplificação desta região produziu um fragmento único de aproximadamente 540 pb para as linhagens E9, B/Vi e C, e de 600 pb para a linhagem 14 de M. anisopliae var. anisopliae; de 650 bp para M. album e 600 pb para M. flavoviride. Os produtos de PCR obtidos foram digeridos com diferentes enzimas de restrição Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II e Sau 3A I; e os perfis de PCR-RFLP mostraram nítidas diferenças entre as espécies analisadas. O sequenciamento da região ITS1 – 5.8S – ITS2 permitiu o desenho de primers específicos para as linhagens de M.a. var. anisopliae do Brasil e da Austrália. A amplificação não ocorreu em linhagens de M. álbum, M. flavoviride e Beauveria bassiana. Os DNAs extraídos de larvas infectadas pelas linhagens E9, B/Vi e C do Brasil e linhagem 14, da Austrália, foram testados utilizando-se os primers desenvolvidos. Em todos os experimentos o fungo M.a. var. anisopliae foi detectado 48 horas após a inoculação. A técnica molecular empregada neste estudo permite a rápida e segura detecção e identificação de M.a. var. anisopliae em bioensaios de laboratório e de campo, programas de manejo de pragas e estudos de epizootiologia. / The ITS rDNA have been used as an important molecular tool for fungi identification. In this study the ITS1 - 5.8S – ITS2 rDNA regions were analyzed in different species of the entomopathogenic fungus Metarhizium including M. anisopliae, M. album and M. flavoviride, in order to construct specific primers for their detection and identification within infected Diatraea saccharalis larvae. The amplification of this region yielded a unique fragment of approximately 540 bp for E9, B/Vi and C, and 600 bp for strain 14 of M. anisopliae var. anisopliae; of 650 bp for M. album and 600 bp for M. flavoviride. The PCR products were digested with the different restriction endonucleases Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II and Sau 3A I; and the PCR-RFLP profiles showed clear differences amongst the species. The sequencing of the ITS-5.8S rDNA regions allowed for the design of specific primers for M. anisopliae var. anisopliae. The amplification was not observed with M. album, M flavoviride and Beauveria bassiana strains. DNAs extracted from infected larvae by E9 and C strains from Brazil and the strain 14 from Australia in individual bioassays were tested using previously designed specific primers. In all experiments, the fungus was detected after 48 hours of post-inoculation. This molecular technique allows a fast and secure detection and identification of the entomopathogen in bioassays, in pest management programs and epizootiology.