Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-06-22T19:59:08Z No. of bitstreams: 1 CLARICE_MARTINS_FEYH_BIRNFELD.pdf: 3318155 bytes, checksum: aa5476b4fe73fb5e7e0b2678aef02e4b (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-06-29T12:31:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CLARICE_MARTINS_FEYH_BIRNFELD.pdf: 3318155 bytes, checksum: aa5476b4fe73fb5e7e0b2678aef02e4b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-29T12:38:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CLARICE_MARTINS_FEYH_BIRNFELD.pdf: 3318155 bytes, checksum: aa5476b4fe73fb5e7e0b2678aef02e4b (MD5) Previous issue date: 2014-10-31 / Objectives: To evaluate the expression of Hsp27 by immunohistochemistry in tissue samples of invasive ductal carcinoma in women with and without the presence of metastasis in sentinel axillary lymph node compared to samples from patients diagnosed with fibrocystic changes in breast tissue. In addition, to study the relationship between the rate of cell proliferation and apoptosis by evaluating the expression of Ki-67 protein and caspase-3 by immunohistochemistry. Material and Methods: A cross- sectional study was designed to select patients treated at Hospital S?o Lucas of PUCRS between September 2001 and October 2009. The patients were divided in three groups: 25 patients diagnosed with invasive ductal carcinoma of breast with axillary lymph node metastasis, 25 patients with invasive ductal carcinoma of breast without axillary lymph node metastasis and a control group composed by tissue samples of 25 patients diagnosed with fibrocystic change of the breast. The expression of Hsp27, Ki-67 and caspase 3 expression was evaluated by image analysis and the rate of proliferation (Ki-67) and apoptosis (caspase 3) was calculated for the three groups. Results: The present study showed an increased expression of Hsp27 in the group of invasive ductal carcinomas without metastasis as compared to the control group. There was no significant difference of expression of Hsp27 between the group of ductal carcinoma with axillary metastasis and the control group. The expression of Hsp27 was significantly higher in the group without axillary metastasis as compared to the group with metastasis in both the primary tumor (<0.001) and the respective lymph node tissue samples (=0.003). The expression of Ki-67 and the rate of proliferation (ki-67) and apoptosis (caspase 3) were significantly higher in the groups with invasive ductal carcinoma as compared to the control group. There was no difference in the expression of Ki-67 and the rate of proliferation and apoptosis between the two groups of invasive ductal carcinoma. There was no significant difference in the expression of caspase 3 among the three groups. Conclusion: The quantitative analysis of Hsp27 demonstrated increased expression of this protein in carcinomas without axillary metastases, with a significantly higher expression in the primary tumor and lymph node tissue samples of this group as compared to the group without axillary metastasis. Although the methodology employed and the number of cases evaluated in this work do not allow one to conclude that such behavior in metastatic ductal carcinomas of breast is constant, such finding warrants further investigation. / Objetivos: Avaliar a express?o de Hsp27 (HspB1) em amostras teciduais de carcinomas ductais invasores em mulheres com e sem presen?a de met?stase em linfonodo sentinela axilar e estudar a rela??o da taxa de prolifera??o celular e apoptose, atrav?s da avalia??o imunoistoqu?mica da express?o das prote?nas Hsp27, Ki-67 e caspase 3 em carcinomas ductais invasores de mulheres com e sem presen?a de met?stase linfonodal, tratadas em um hospital de ensino, comparado com amostras de pacientes diagnosticadas com altera??o fibroc?stica no tecido mam?rio. Material e M?todos: Foi realizado um estudo do tipo transversal, sendo selecionadas para este trabalho pacientes tratadas no Hospital S?o Lucas da PUCRS no per?odo entre setembro de 2001 e outubro de 2009 cujas bi?psias foram divididas em tr?s grupos: 25 pacientes com diagn?stico de carcinoma ductal invasor de mama com presen?a de met?stase linfonodal; e 25 pacientes com carcinoma ductal invasor de mama sem presen?a de met?stase linfonodal. Para constitui??o do grupo controle foi realizada a sele??o aleat?ria de 25 pacientes com diagn?stico de altera??o fibroc?stica da mama. Atrav?s da t?cnica de imunoistoqu?mica, tamb?m foram avaliadas as express?es de Hsp27, caspase 3 e Ki67 por an?lise de imagem digital e calculada a raz?o entre a taxa de prolifera??o (Ki-67) e apoptose (caspase 3) dos grupos estudados. Resultados: O presente estudo evidenciou a express?o aumentada da Hsp27 em carcinomas ductais invasores sem met?stase axilar, quando comparados ao grupo dos carcinomas ductais invasores com met?tase axilar e grupo controle. A express?o de Hsp 27 foi maior no grupo com carcinoma invasor sem met?stase axilar tanto no tecido da neoplasia prim?ria (p<0,001) quanto no respectivo tecido linfonodal comparado ao grupo com carcinoma com met?stase axilar (=0,003). Houve diferen?a na express?o da prote?na Ki-67 e raz?o entre prolifera??o celular e apoptose entre os grupos de pacientes com carcinoma ductal invasor com e sem met?stases quando comparados ao grupo controle, por?m n?o houve diferen?a significativa da express?o de Ki-67 e da raz?o entre prolifera??o e apoptose entre os grupos com carcinoma invasor com e sem met?stase, ou entre a express?o de caspase 3 nos tr?s grupos quando comparados entre si. Conclus?o: A an?lise quantitativa da Hsp27 demonstrou maior express?o da prote?na nos tecidos da neoplasia prim?ria e nos linfonodos em carcinomas sem met?stase em linfonodo sentinela axilar. Embora a metodologia empregada e o n?mero de casos estudados nesse trabalho n?o permitam concluir que esse comportamento na doen?a metast?tica seja um achado constante, esse resultado justifica a necessidade de avaliar esse achado em estudos futuros.

Introdução: Os lasers fracionados não ablativos são efetivamente utilizados no rejuvenescimento da pele. As novas tecnologias a laser permitem uma remodelação dérmica seletiva, sem ablação da epiderme. Objetivo: Avaliar a eficácia do laser Erbium Glass (Sellas Evo) fracionado não ablativo 1550nm no rejuvenescimento facial através do estudo da quantificação histomorfométrica de fibras colágenas e elásticas, a expressão da molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1) por imuno-histoquímica , a análise das fases do ciclo celular, o potencial elétrico da membrana mitocondrial, a expressão de interleucina-1 (IL-1), o marcador celular endotelial CD34, o receptor do fator transformador de crescimento beta (TGF-beta), atividade da caspase-3 por citometria de fluxo e as alterações ultraestruturais na pele por microscopia eletrônica de varredura, 4 meses após o tratamento com laser. Materiais e Métodos: Quinze indivíduos (média de 56,4 anos, fototipo II-IV), com fotoenvelhecimento cutâneo na face fizeram 3 tratamentos com laser Erbium Glass fracionado não ablativo 1550nm usando uma fluência de 70 mJ e uma densidade de 100 cm2. Foram avaliados biópsias na região pré-auricular em 15 pacientes no início e 4 semanas após o tratamento final. Os níveis de expressão dos receptores e a atividade do potencial elétrico mitocondrial foram analisados na suspensão de células da derme obtida a partir da digestão por colagenase. A avaliação clínica e fotográfica foi analisada quatro semanas após o final do tratamento. Resultados: Após 4 meses do início do tratamento foi observada melhora clínica moderada, com uma média de satisfação de 8,8, as fibras de colágeno aumentaram em 6,68%, as fibras elásticas mostraram uma diminuição de 12,85%, o ICAM-1 aumentou 4,47% significativamente na área dos vasos. Houve aumento significativo dos níveis de expressão do receptor de IL-1 e TGF-beta após o tratamento com laser Erbium Glass. As respostas proliferativas e a ausência de apoptose dependente da caspase-3 foram observadas nas suspensões de células após o tratamento. Conclusão: Rejuvenescimento facial com laser Erbium Glass fracionado não ablativo 1550nm demonstrou melhora visível no fotoenvelhecimento, assim como, aumento significativo da expressão de IL-1 e receptores de TGF-beta, que estão envolvidos na remodelação e indução da proliferação de componentes da matriz extracelular da pele. O grau de satisfação foi alto especialmente em relação à textura, rugas e discromias / Background: Non-ablative fractional lasers have been effectively used in skin rejuvenation. The new laser technologies allow selective dermal remodeling without ablation of the epidermal surface. Objectives: to evaluate the efficacy of the 1550nm Erbium Glass Laser (Sellas Evo) for facial rejuvenation through study of the histomorphometric quantification of colagen and elastic fibers; the expression of intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) by immnohistochemistry; and analysis of the cell cycle phases, the electrical potential of the mitochondrial membrane and the expression of interleukin 1 (IL-1), the endothelial cell marker CD34 and transforming growth factor beta (TGF-beta) receptors, caspase-3 activity by flow cytometry and the ultrastructural changes in the skin by scanning electron microscopy 4 months after the laser treatment. Materials and methods: fifteen subjects (mean age 56,4 skin typoes II-IV) with photodamage on the face and wrinkles had 3 treatments with the 1550 nm Erbium Glass Laser using a fluence of 70 mJ and a density of 100 cm2. Pre-auricular biopsies from 15 subjects were evaluated at baseline and 4 weeks after the final treatment. Receptor expression levels and the presence of potentially functional mitochondria were analyzed in a cell suspension obtained from collagenase digestion of the skin. Data from the photo assessments and the subjects\' self-assessed improvements were analyzed 4 weeks after the final treatment.Results: Four months after the last treatmenbt application, clinical improvement was observed, with an average satgisfation score of 8.8, corresponding to moderate improvement. After 4 months of treatment, collagen fibers had increased up to 6.68%, while the average proportion of collagen fibers in the dermis, the elastic fibers, showed a 12.85% decrease of ICAM-1 and a mean increase in vessel area of 4.47%.Significantly enhanced IL-1 and TGF-beta receptor expression levels were identified after Erbium Glass Laser treatment. Proliferative responses and non-apoptosis-dependent caspase-3 activity were both observed in the cell suspensions after dermal treatment. Conclusion: Non-ablative rejuvenation with the 1550 mn Erbium Glass Laser was of the IL-1 and TGF-beta receptors, that are involved in remodeling and induced proliferation components in the extracellular matrix of skin fibers. The subjects were highly satisfied, especially regarding texture, rhytids and dyschromia

Introdução: Os lasers fracionados não ablativos são efetivamente utilizados no rejuvenescimento da pele. As novas tecnologias a laser permitem uma remodelação dérmica seletiva, sem ablação da epiderme. Objetivo: Avaliar a eficácia do laser Erbium Glass (Sellas Evo) fracionado não ablativo 1550nm no rejuvenescimento facial através do estudo da quantificação histomorfométrica de fibras colágenas e elásticas, a expressão da molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1) por imuno-histoquímica , a análise das fases do ciclo celular, o potencial elétrico da membrana mitocondrial, a expressão de interleucina-1 (IL-1), o marcador celular endotelial CD34, o receptor do fator transformador de crescimento beta (TGF-beta), atividade da caspase-3 por citometria de fluxo e as alterações ultraestruturais na pele por microscopia eletrônica de varredura, 4 meses após o tratamento com laser. Materiais e Métodos: Quinze indivíduos (média de 56,4 anos, fototipo II-IV), com fotoenvelhecimento cutâneo na face fizeram 3 tratamentos com laser Erbium Glass fracionado não ablativo 1550nm usando uma fluência de 70 mJ e uma densidade de 100 cm2. Foram avaliados biópsias na região pré-auricular em 15 pacientes no início e 4 semanas após o tratamento final. Os níveis de expressão dos receptores e a atividade do potencial elétrico mitocondrial foram analisados na suspensão de células da derme obtida a partir da digestão por colagenase. A avaliação clínica e fotográfica foi analisada quatro semanas após o final do tratamento. Resultados: Após 4 meses do início do tratamento foi observada melhora clínica moderada, com uma média de satisfação de 8,8, as fibras de colágeno aumentaram em 6,68%, as fibras elásticas mostraram uma diminuição de 12,85%, o ICAM-1 aumentou 4,47% significativamente na área dos vasos. Houve aumento significativo dos níveis de expressão do receptor de IL-1 e TGF-beta após o tratamento com laser Erbium Glass. As respostas proliferativas e a ausência de apoptose dependente da caspase-3 foram observadas nas suspensões de células após o tratamento. Conclusão: Rejuvenescimento facial com laser Erbium Glass fracionado não ablativo 1550nm demonstrou melhora visível no fotoenvelhecimento, assim como, aumento significativo da expressão de IL-1 e receptores de TGF-beta, que estão envolvidos na remodelação e indução da proliferação de componentes da matriz extracelular da pele. O grau de satisfação foi alto especialmente em relação à textura, rugas e discromias / Background: Non-ablative fractional lasers have been effectively used in skin rejuvenation. The new laser technologies allow selective dermal remodeling without ablation of the epidermal surface. Objectives: to evaluate the efficacy of the 1550nm Erbium Glass Laser (Sellas Evo) for facial rejuvenation through study of the histomorphometric quantification of colagen and elastic fibers; the expression of intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) by immnohistochemistry; and analysis of the cell cycle phases, the electrical potential of the mitochondrial membrane and the expression of interleukin 1 (IL-1), the endothelial cell marker CD34 and transforming growth factor beta (TGF-beta) receptors, caspase-3 activity by flow cytometry and the ultrastructural changes in the skin by scanning electron microscopy 4 months after the laser treatment. Materials and methods: fifteen subjects (mean age 56,4 skin typoes II-IV) with photodamage on the face and wrinkles had 3 treatments with the 1550 nm Erbium Glass Laser using a fluence of 70 mJ and a density of 100 cm2. Pre-auricular biopsies from 15 subjects were evaluated at baseline and 4 weeks after the final treatment. Receptor expression levels and the presence of potentially functional mitochondria were analyzed in a cell suspension obtained from collagenase digestion of the skin. Data from the photo assessments and the subjects\' self-assessed improvements were analyzed 4 weeks after the final treatment.Results: Four months after the last treatmenbt application, clinical improvement was observed, with an average satgisfation score of 8.8, corresponding to moderate improvement. After 4 months of treatment, collagen fibers had increased up to 6.68%, while the average proportion of collagen fibers in the dermis, the elastic fibers, showed a 12.85% decrease of ICAM-1 and a mean increase in vessel area of 4.47%.Significantly enhanced IL-1 and TGF-beta receptor expression levels were identified after Erbium Glass Laser treatment. Proliferative responses and non-apoptosis-dependent caspase-3 activity were both observed in the cell suspensions after dermal treatment. Conclusion: Non-ablative rejuvenation with the 1550 mn Erbium Glass Laser was of the IL-1 and TGF-beta receptors, that are involved in remodeling and induced proliferation components in the extracellular matrix of skin fibers. The subjects were highly satisfied, especially regarding texture, rhytids and dyschromia