Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2015-12-14T21:26:35Z No. of bitstreams: 1 GeorgeAlexandreDeBarrosLucena_DISSERT.pdf: 3317276 bytes, checksum: 22082dfd410296351adf3deb96db86ff (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2015-12-15T21:24:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 GeorgeAlexandreDeBarrosLucena_DISSERT.pdf: 3317276 bytes, checksum: 22082dfd410296351adf3deb96db86ff (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-15T21:24:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GeorgeAlexandreDeBarrosLucena_DISSERT.pdf: 3317276 bytes, checksum: 22082dfd410296351adf3deb96db86ff (MD5) Previous issue date: 2014-06-04 / Introduction: Infiltration of organic fluids and microorganisms at the abutment/implant interface may result in bacterial infection of peri-implant tissues. Internal colonization of periodontal pathogens may be caused by bacteria trapped during installation or penetration of abutment/implant leakage. The aim of this study was to detect periodontal pathogens in the internal area of dental implants before loading. Materials and Methods: Seventy-eight implants in 32 partially edentulous subjects were selected for this evaluation. A bacterial biofilm sample of the internal surface of each implant was taken and analyzed for the presence of 40 microorganisms by checkerboard DNA-DNA hybridization, prior to installation of healing or any other prosthetic abutment. Discussion: Bacteria were detected in 20 patients (62.5%), distributed in 41 implants (52.6%). Forty-seven percent of implants showed no bacterial detection. Spontaneous early implant exposure to oral cavity during the healing period was not significant (P >0.05) to increase bacterial prevalence, but implants placed at mandible had higher bacterial prevalence than maxillary ones. Conclusion: The internal surface of dental implants can serve as a reservoir of periodontal pathogens for future implant/abutment interface.

O presente trabalho teve por objetivo investigar a microbiota de canais radiculares relacionadas ao insucesso do tratamento endodôntico, buscando a identificação e a quantificação destes micro-organismos. Foram selecionados 36 dentes com infecção endodôntica persistente. O material obturador foi removido do canal radicular e amostras microbiológicas foram coletadas dos canais com o auxílio de limas tipo Hedströen e cones de papel absorvente estéril. A técnica do Checkerboard DNA-DNA hybridization foi utilizada para detecção de até 79 espécies bacterianas em cada amostra, utilizando sondas de DNA específicas. Os dados microbiológicos foram expressos em percentagem média (prevalência), proporção e nível médio de cada espécie em cada amostra. Os testes t independente e de correlação de Pearson foram usados para correlacionar a contagem das bactérias testadas com os dados clínicos (p&#8804; 0,05). Foi encontrada uma média de 11 espécies por amostra. E. faecium (36%), S. epidermidis (36%), E. saburreum (28%), P. micra (28%), S. sanguis (28%), C. sputigena (28%), L. buccalis (28%), E. faecalis (28%) e S. warneri (28%) foram as espécies mais prevalentes, e as espécies encontradas em níveis médios mais altos foram E. faecium, D. pneumosintes, S. epidermidis, H. pylori e C. sputigena. T. socranskii (3%), F. periodonticum (3%), C. gingivalis (3%), S. ixodetis (3%) apresentaram prevalências mais baixas. E. faecium e S. epidermidis apresentaram os maiores valores de prevalência, níveis médios e proporção. Não houve correlação entre a microbiota detectada nas amostras com os sinais e sintomas clínicos apresentados pelos pacientes, porém nas lesões periapicais de maior área foi detectada contagem significativamente maior de bacilos e espécies Gram-negativas (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos é possível concluir que a microbiota presente em dentes com periodontite apical persistente possui perfil misto e complexo, e que uma maior área de lesão perirradicular pode estar associada a contagem elevada de bacilos e de espécies Gram-negativas. / The present study investigated the composition of the root canal microbiota in endodontic failures, aiming to identify and quantify these microorganisms. Thirty six teeth with persistent endodontic infection were selected. The root-filling materials were removed and microbiological samples were taken from the root canals with a Hedströen-type file and sterile paper points. The Checkerboard DNA-DNA hybridization technique was used for the detection of 79 bacterial species in each sample, using specific DNA probes. Microbiological data were express in mean prevalence, proportions and levels of each species in each sample. t independent test and Pearson correlation test were use to correlate bacterial counts and clinical conditions (p&#8804; 0,05). There were found a mean of 11 different species per sample. E. faecium (36%), S. epidermidis (36%), E. saburreum (28%), P. micra (28%), S. sanguis (28%), C. sputigena (28%), L. buccalis (28%), E. faecalis (28%) and S. warneri (28%) were the most prevalent species, and the species found in highest mean levels were E. faecium, D. pneumosintes, S. epidermidis, H. pylori and C. sputigena. T. socranskii (3%), F. periodonticum (3%), C. gingivalis (3%) and S. ixodetis (3%) were found in low prevalence. E. faecium and S. epidermidis presented the highest values of prevalence, means levels and proportions. No correlation was found between the detected microbiota and clinical findings; however in periapical lesions with highest areas, higher levels of rods and Gram-negative species were detected (p<0.05). Based on these results it may be concluded that the microbiota in teeth with persistent apical periodontitis presents a mixed and complex profile, and periapical lesions with larger area might be high associated with higher counts of rods and Gram-negative species.

O presente trabalho teve por objetivo investigar a microbiota de canais radiculares relacionadas ao insucesso do tratamento endodôntico, buscando a identificação e a quantificação destes micro-organismos. Foram selecionados 36 dentes com infecção endodôntica persistente. O material obturador foi removido do canal radicular e amostras microbiológicas foram coletadas dos canais com o auxílio de limas tipo Hedströen e cones de papel absorvente estéril. A técnica do Checkerboard DNA-DNA hybridization foi utilizada para detecção de até 79 espécies bacterianas em cada amostra, utilizando sondas de DNA específicas. Os dados microbiológicos foram expressos em percentagem média (prevalência), proporção e nível médio de cada espécie em cada amostra. Os testes t independente e de correlação de Pearson foram usados para correlacionar a contagem das bactérias testadas com os dados clínicos (p&#8804; 0,05). Foi encontrada uma média de 11 espécies por amostra. E. faecium (36%), S. epidermidis (36%), E. saburreum (28%), P. micra (28%), S. sanguis (28%), C. sputigena (28%), L. buccalis (28%), E. faecalis (28%) e S. warneri (28%) foram as espécies mais prevalentes, e as espécies encontradas em níveis médios mais altos foram E. faecium, D. pneumosintes, S. epidermidis, H. pylori e C. sputigena. T. socranskii (3%), F. periodonticum (3%), C. gingivalis (3%), S. ixodetis (3%) apresentaram prevalências mais baixas. E. faecium e S. epidermidis apresentaram os maiores valores de prevalência, níveis médios e proporção. Não houve correlação entre a microbiota detectada nas amostras com os sinais e sintomas clínicos apresentados pelos pacientes, porém nas lesões periapicais de maior área foi detectada contagem significativamente maior de bacilos e espécies Gram-negativas (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos é possível concluir que a microbiota presente em dentes com periodontite apical persistente possui perfil misto e complexo, e que uma maior área de lesão perirradicular pode estar associada a contagem elevada de bacilos e de espécies Gram-negativas. / The present study investigated the composition of the root canal microbiota in endodontic failures, aiming to identify and quantify these microorganisms. Thirty six teeth with persistent endodontic infection were selected. The root-filling materials were removed and microbiological samples were taken from the root canals with a Hedströen-type file and sterile paper points. The Checkerboard DNA-DNA hybridization technique was used for the detection of 79 bacterial species in each sample, using specific DNA probes. Microbiological data were express in mean prevalence, proportions and levels of each species in each sample. t independent test and Pearson correlation test were use to correlate bacterial counts and clinical conditions (p&#8804; 0,05). There were found a mean of 11 different species per sample. E. faecium (36%), S. epidermidis (36%), E. saburreum (28%), P. micra (28%), S. sanguis (28%), C. sputigena (28%), L. buccalis (28%), E. faecalis (28%) and S. warneri (28%) were the most prevalent species, and the species found in highest mean levels were E. faecium, D. pneumosintes, S. epidermidis, H. pylori and C. sputigena. T. socranskii (3%), F. periodonticum (3%), C. gingivalis (3%) and S. ixodetis (3%) were found in low prevalence. E. faecium and S. epidermidis presented the highest values of prevalence, means levels and proportions. No correlation was found between the detected microbiota and clinical findings; however in periapical lesions with highest areas, higher levels of rods and Gram-negative species were detected (p<0.05). Based on these results it may be concluded that the microbiota in teeth with persistent apical periodontitis presents a mixed and complex profile, and periapical lesions with larger area might be high associated with higher counts of rods and Gram-negative species.

O objetivo do presente estudo clínico randomizado foi avaliar in vivo, por meio da técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization: 1) A contaminação de aparelhos ortodônticos removíveis por 40 espécies bacterianas; 2) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®) sobre microrganismos cariogênicos; e 3) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®) sobre microrganismos periodontopatogênicos dos complexos laranja e vermelho. Participaram do estudo 20 pacientes de 7 a 11 anos de idade, em tratamento com aparelhos ortodônticos removíveis. O estudo constou de 2 etapas, com intervalo de 15 dias entre cada uma, de forma que todos os pacientes participassem tanto do grupo controle, quanto do grupo experimental. Em cada etapa os pacientes receberam um novo aparelho (totalizando 2 aparelhos por indivíduo) e um frasco plástico contendo a solução a ser borrifada sobre os aparelhos, porém os indivíduos não sabiam qual solução estavam utilizando. Os aparelhos foram utilizados em período integral, inclusive à noite, sendo removidos apenas durante as refeições Os pacientes do Grupo Controle foram orientados a usar solução placebo, sob a forma de spray, 2 vezes por semana, por 7 dias. Os pacientes do Grupo Experimental foram orientados a usar solução à base de gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®) sob a forma de spray, da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 7 dias, os aparelhos de cada etapa foram removidos e processados para detecção de 40 espécies bacterianas, incluindo microrganismos cariogênicos e periodontopatogênicos, pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization. Os resultados obtidos foram analisados por meio do teste não-paramétrico de Wilcoxon, utilizando o software SAS (Statistical Analysis System). O nível de significância adotado foi de 5%. De acordo com os resultados obtidos observou-se que os aparelhos ortodônticos removíveis dos pacientes do grupo controle estavam densamente contaminados pelos microrganismos avaliados. A maioria das sondas utilizadas estava presente nas amostras desse grupo, sendo que S. sanguinis, S. oralis, S. gordonii e E. corrodens ocorreram em 100% dos aparelhos. Dentre os microrganismos cariogênicos, S. mutans e S. sobrinus foram encontrados em maiores quantidades que L. acidophilus e L. casei. As bactérias periodontopatogênicas pertencentes ao complexo vermelho foram evidenciadas em maiores quantidades que as pertencentes ao complexo laranja. Dentre os demais complexos não associados com patologias específicas, o complexo roxo apresentou-se em maiores quantidades, estando presente em 34% das amostras. Após o uso de spray com gluconato de clorexidina a 0,12%, observou-se uma diminuição significante dos microrganismos cariogênicos (S.mutans e S. sobrinus e L. acidophilus) nos aparelhos ortodônticos removíveis (p<0,05). Observou-se também uma diminuição significante de todos os microrganismos periodontopatogênicos dos complexos laranja e vermelho (p<0,05), em relação ao grupo controle, com exceção apenas do T. socranskii. Conclui-se que os aparelhos ortodônticos removíveis encontraram-se multicolonizados por diversas espécies bacterianas e que a clorexidina, utilizada duas vezes por semana sob a forma de spray, foi eficaz na redução dos níveis de microrganismos cariogênicos e periodontopatogênicos dos complexos laranja e vermelho, nesses aparelhos. / Using the Checkerboard DNA-DNA Hybridization biomolecular technique, this randomized clinical study evaluated: 1) the contamination of removable orthodontic appliances by 40 bacterial species; 2) the efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate (Periogard®) spray against cariogenic microorganisms;and 3) the efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate spray against periodontopathogenic microorganisms of the orange and red complexes. Twenty 7-11-year-old patients under treatment with removable orthodontic appliances were enrolled. The study had two phases, with a 15-day interval between them, in such a way that patients participated both in the control and in the experimental group. In each phase, the patients received a new appliance (total of 2 appliances per patient) and a bottle containing a solution to be sprayed onto the appliances, but they were blinded to whether it was a placebo solution or an antimicrobial agent. The patients were instructed to wear the appliances full-time, even at night, removing only at meals. The patients in the control and experimental groups were instructed to spray the placebo or the 0.12% chlorhexidine gluconate-based solution (Periogard®), respectively, onto the appliances twice a week during 7 days. After this period, the appliances of each phase were collected and processed for detection of 40 bacterial species, including cariogenic and periodontopathogenic microorganisms by the Checkerboard DNA-DNA Hybridization technique. Data were analyzed statistically by the non-parametric Wilcoxon test using the SAS software (Statistical Analysis System) at 5% significance level. The results showed that the removable orthodontic appliances of the patients in the control group were heavily contaminated by the target microorganisms. Most bacterial probes used were present in the control samples, S. sanguinis, S. oralis, S. gordonii and E. corrodens being detected in 100% of the appliances. Among the cariogenic microorganisms, S. mutans and S. sobrinus were found in larger numbers than L. acidophilus and L. casei. The number of red complex periodontopathogenic bacteria was larger than that of orange complex periodontopathogenic bacteria. Among the other bacterial complexes not associated with specific pathologies, purple complex bactéria were present in larger numbers, being detected in 34% of the samples. After use of the 0.12% chlorhexidine gluconate spray, the number of the cariogenic microorganisms (S.mutans, S. sobrinus and L. acidophilus) decreased significantly in the removable orthodontic appliances (p<0,05). There was also a significant decrease in the numbers of all periodontopathogenic microorganisms of the orange and red complexes (p<0,05), compared to the control group, except for T. socranskii. In conclusion, the removable orthodontic appliances were multicolonized by several bacterial species, and the use of chlorhexidine spray twice a week was effective in reducing the levels of cariogenic and periodontopathogenic microorganisms of the orange and red complexes.

O objetivo do presente estudo clínico randomizado foi avaliar in vivo, por meio da técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization: 1) A contaminação de aparelhos ortodônticos removíveis por 40 espécies bacterianas; 2) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®) sobre microrganismos cariogênicos; e 3) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®) sobre microrganismos periodontopatogênicos dos complexos laranja e vermelho. Participaram do estudo 20 pacientes de 7 a 11 anos de idade, em tratamento com aparelhos ortodônticos removíveis. O estudo constou de 2 etapas, com intervalo de 15 dias entre cada uma, de forma que todos os pacientes participassem tanto do grupo controle, quanto do grupo experimental. Em cada etapa os pacientes receberam um novo aparelho (totalizando 2 aparelhos por indivíduo) e um frasco plástico contendo a solução a ser borrifada sobre os aparelhos, porém os indivíduos não sabiam qual solução estavam utilizando. Os aparelhos foram utilizados em período integral, inclusive à noite, sendo removidos apenas durante as refeições Os pacientes do Grupo Controle foram orientados a usar solução placebo, sob a forma de spray, 2 vezes por semana, por 7 dias. Os pacientes do Grupo Experimental foram orientados a usar solução à base de gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®) sob a forma de spray, da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 7 dias, os aparelhos de cada etapa foram removidos e processados para detecção de 40 espécies bacterianas, incluindo microrganismos cariogênicos e periodontopatogênicos, pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization. Os resultados obtidos foram analisados por meio do teste não-paramétrico de Wilcoxon, utilizando o software SAS (Statistical Analysis System). O nível de significância adotado foi de 5%. De acordo com os resultados obtidos observou-se que os aparelhos ortodônticos removíveis dos pacientes do grupo controle estavam densamente contaminados pelos microrganismos avaliados. A maioria das sondas utilizadas estava presente nas amostras desse grupo, sendo que S. sanguinis, S. oralis, S. gordonii e E. corrodens ocorreram em 100% dos aparelhos. Dentre os microrganismos cariogênicos, S. mutans e S. sobrinus foram encontrados em maiores quantidades que L. acidophilus e L. casei. As bactérias periodontopatogênicas pertencentes ao complexo vermelho foram evidenciadas em maiores quantidades que as pertencentes ao complexo laranja. Dentre os demais complexos não associados com patologias específicas, o complexo roxo apresentou-se em maiores quantidades, estando presente em 34% das amostras. Após o uso de spray com gluconato de clorexidina a 0,12%, observou-se uma diminuição significante dos microrganismos cariogênicos (S.mutans e S. sobrinus e L. acidophilus) nos aparelhos ortodônticos removíveis (p<0,05). Observou-se também uma diminuição significante de todos os microrganismos periodontopatogênicos dos complexos laranja e vermelho (p<0,05), em relação ao grupo controle, com exceção apenas do T. socranskii. Conclui-se que os aparelhos ortodônticos removíveis encontraram-se multicolonizados por diversas espécies bacterianas e que a clorexidina, utilizada duas vezes por semana sob a forma de spray, foi eficaz na redução dos níveis de microrganismos cariogênicos e periodontopatogênicos dos complexos laranja e vermelho, nesses aparelhos. / Using the Checkerboard DNA-DNA Hybridization biomolecular technique, this randomized clinical study evaluated: 1) the contamination of removable orthodontic appliances by 40 bacterial species; 2) the efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate (Periogard®) spray against cariogenic microorganisms;and 3) the efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate spray against periodontopathogenic microorganisms of the orange and red complexes. Twenty 7-11-year-old patients under treatment with removable orthodontic appliances were enrolled. The study had two phases, with a 15-day interval between them, in such a way that patients participated both in the control and in the experimental group. In each phase, the patients received a new appliance (total of 2 appliances per patient) and a bottle containing a solution to be sprayed onto the appliances, but they were blinded to whether it was a placebo solution or an antimicrobial agent. The patients were instructed to wear the appliances full-time, even at night, removing only at meals. The patients in the control and experimental groups were instructed to spray the placebo or the 0.12% chlorhexidine gluconate-based solution (Periogard®), respectively, onto the appliances twice a week during 7 days. After this period, the appliances of each phase were collected and processed for detection of 40 bacterial species, including cariogenic and periodontopathogenic microorganisms by the Checkerboard DNA-DNA Hybridization technique. Data were analyzed statistically by the non-parametric Wilcoxon test using the SAS software (Statistical Analysis System) at 5% significance level. The results showed that the removable orthodontic appliances of the patients in the control group were heavily contaminated by the target microorganisms. Most bacterial probes used were present in the control samples, S. sanguinis, S. oralis, S. gordonii and E. corrodens being detected in 100% of the appliances. Among the cariogenic microorganisms, S. mutans and S. sobrinus were found in larger numbers than L. acidophilus and L. casei. The number of red complex periodontopathogenic bacteria was larger than that of orange complex periodontopathogenic bacteria. Among the other bacterial complexes not associated with specific pathologies, purple complex bactéria were present in larger numbers, being detected in 34% of the samples. After use of the 0.12% chlorhexidine gluconate spray, the number of the cariogenic microorganisms (S.mutans, S. sobrinus and L. acidophilus) decreased significantly in the removable orthodontic appliances (p<0,05). There was also a significant decrease in the numbers of all periodontopathogenic microorganisms of the orange and red complexes (p<0,05), compared to the control group, except for T. socranskii. In conclusion, the removable orthodontic appliances were multicolonized by several bacterial species, and the use of chlorhexidine spray twice a week was effective in reducing the levels of cariogenic and periodontopathogenic microorganisms of the orange and red complexes.

O objetivo do presente estudo clínico randomizado foi avaliar in vivo, por meio da técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization: 1) A contaminação de bráquetes metálicos por 4 espécies bacterianas de microrganismos cariogênicos (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei e Lactobacillus acidophilus); e 2) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard&reg;) sob a forma de bochechos, sobre esses microrganismos. Participaram do estudo 39 pacientes de 11 a 33 anos de idade, em tratamento com aparelho ortodôntico fixo, nos quais foram colados 2 bráquetes metálicos novos, nos pré-molares. Os pacientes do Grupo Controle (n=20) foram orientados a fazer 2 bochechos semanais com solução placebo, durante 30 dias. Os pacientes do Grupo Experimental (n=19) foram orientados a fazer bochechos com solução à base de gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard&reg;), da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 30 dias, os 2 bráquetes foram removidos de cada paciente e processados para detecção das 4 cepas bacterianas, pela técnica Checkerboard DNADNA Hybridization. Os resultados obtidos foram analisados por meio do teste nãoparamétrico de Kruskal-Wallis, utilizando o software SAS (Statistical Analysis System). O nível de significância adotado foi de 5%. De acordo com os resultados obtidos, observou-se que S. mutans, S. sobrinus, L. casei e L. acidophilus foram detectados em 100% das amostras dos bráquetes de ambos os grupos. No entanto, os bráquetes do grupo Controle encontravam-se mais densamente contaminados por S. mutans e S. sobrinus (p<0,01). No grupo Experimental, embora as quantidades de S. mutans, S. sobrinus, L. casei e L. acidophilus tenham sofrido redução numérica após o uso dos bochechos com solução de gluconato de clorexidina a 0,12%, a comparação com os valores observados no grupo Controle evidenciou diferença estatisticamente significante apenas para S. mutans (p=0,03). Concluiu-se que os bochechos com solução de gluconato de clorexidina a 0,12% podem ser úteis, na prática clínica, com a finalidade de reduzir os níveis de microrganismos cariogênicos, em pacientes portadores de aparelhos ortodônticos fixos. / The purpose of this randomized clinical study was to evaluate in vivo, by the checkerboard DNA-DNA hybridization biomolecular technique: 1) The contamination of metallic brackets by four cariogenic bacterial strains (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei and Lactobacillus acidophilus); and 2) The efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate mouthrinses (Periogard&reg;) against these microorganisms. Thirty-nine 11-33-year-old patients under treatment with fixed orthodontic appliances were enrolled in the study and had 2 new metallic brackets bonded to the premolars. For the patients of the control group (n=20), mouthrinses with a placebo solution were prescribed twice a week during 30 days. The patients randomized to the experimental group (n=19) were instructed to use a 0.12% chlorhexidine gluconate solution (Periogard&reg;) as an oral rinse twice a week during 30 days, in the same way as in control group. After this period, the 2 brackets were removed from each patient and processed for detection of the 4 bacterial strains by checkerboard DNA-DNA hybridization. The obtained data were analyzed statistically by the non-parametric Kruskal-Wallis test using the SAS (Statistical Analysis System) software. A level of significance of 5% was set for all analysis. S. mutans, S. sobrinus, L. casei and L. acidophilus were detected in 100% of the samples from brackets of both groups. However, the brackets of the control group were more heavily contaminated by S. mutans and S. sobrinus (p<0.01). In the experimental group, although S. mutans, S. sobrinus, L. casei and L. acidophilus counts decreased after rinsing with the 0.12% chlorhexidine gluconate solution, the comparison with the values obtained in the control group showed statistically significant difference only for S. mutans (p=0.03). In conclusion, the use of 0.12% chlorhexidine gluconate mouthrinses can be useful in clinical practice to reduce the levels of cariogenic microorganisms in patients under treatment with fixed orthodontic appliances.

Empregando a técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization e o teste Limulus Amebocyte Lysate, os objetivos do presente estudo clínico randomizado in vivo foram avaliar, em bráquetes ortodônticos metálicos: 1) A presença de 16 espécies de microrganismos periodontopatogênicos Gram-negativos pertencentes aos complexos laranja e vermelho, por meio de sondas de DNA; 2) A quantidade de endotoxina bacteriana presente; e 3) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12%, sob a forma de bochechos, na redução da contaminação pelas 16 espécies de microrganismos periodontopatogênicos Gram-negativos e na redução da quantidade de endotoxina bacteriana. Participaram do estudo 33 pacientes de 11 a 33 anos de idade, em tratamento com aparelho ortodôntico fixo, nos quais foram colocados randomicamente 3 bráquetes metálicos novos nos pré-molares. Os pacientes do Grupo Controle (n=17) fizeram 2 bochechos semanais com solução placebo, durante 30 dias. Os pacientes do Grupo Experimental (n=16) fizeram bochechos com solução à base de gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®), da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 30 dias, os 3 bráquetes foram removidos de cada paciente e processados para a detecção dos microrganismos, pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization, e para a quantificação da endotoxina bacteriana por meio do teste Limulus Amebocyte Lysate. Os resultados obtidos foram analisados por meio dos testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis, Mann-Whitney e pós-teste de Dunn, utilizando os softwares SAS e Graphpad Prism. O nível de significância adotado foi de 5%. De acordo com os resultados obtidos, observou-se que todos os bráquetes dos pacientes do Grupo Controle encontravam-se densamente contaminados pelos microrganismos avaliados. Nesse grupo, as espécies bacterianas do complexo laranja apresentaram-se em maiores quantidades, em relação às espécies do complexo vermelho (p<0,01). A mediana da quantidade de endotoxina para este grupo foi de 0,6673 EU/ml. Quando comparado ao grupo Controle, observou-se que o número total de microrganismos no grupo Experimental foi estatisticamente menor, com mediana de 29.150.000 no grupo Controle e de 13.130.000 no grupo Experimental (p=0,01). Quando os microrganismos foram avaliados por complexos, foi observada diferença estatisticamente significante entre os grupos Controle e Experimental para o complexo laranja (p=0,04), com contagens menores de bactérias após os bochechos com clorexidina. Por outro lado, observou-se que a quantidade de endotoxina no grupo Experimental foi maior, com mediana de 1,2199 EU/ml (p=0,02). Concluiu-se que os bochechos com solução de gluconato de clorexidina a 0,12% podem ser úteis, na prática clínica, com a finalidade de reduzir os níveis de microrganismos periodontopatogênicos Gram-negativos, em pacientes portadores de aparelhos ortodônticos fixos. No entanto, em função do aumento da quantidade de endotoxina bacteriana após o uso dos bochechos com clorexidina, estudos adicionais são necessários com a finalidade de desenvolver procedimentos clínicos ou agentes antimicrobianos que tenham ação sobre a endotoxina presente nos bráquetes metálicos. / Using the biomolecular technique Checkerboard DNA-DNA Hybridization and the Limulus Amebocyte Lysate (LAL) assay, the purposes of the present randomized clinical study were to evaluate in orthodontic metallic brackets: 1) The presence of 16 Gram-negative periodontopathogenic microbial species of the orange and red complexes by using DNA probes; 2) The amount of bacterial endotoxin; and 3) The efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate mouthwashes in reducing the contamination by the evaluated microbial species and the amount of bacterial endotoxin. Thirty-three 11-33-year-old patients undergoing orthodontic treatment with fixed appliances were enrolled in the study and all subjects had 3 new metallic brackets bonded to different premolars in a randomized manner. The patients in the Control group (n=17) were instructed to use a placebo mouthwash twice a week, while those in the Experimental group (n=16) were instructed to use a 0.12% chlorhexidine gluconate mouthwash (Periogard®) in the same way. After 30 days, the 3 brackets were removed from each patient and processed for detection of the microorganisms by the Checkerboard DNADNA hybridization technique, and for quantification of bacterial endotoxin by the LAL assay. The data were analyzed statistically by the non-parametric Mann-Whitney, Kruskal-Wallis and Dunn\'s post tests using SAS and GraphPad Prism softwares. A significance level of 5% was set for all analyses. The brackets of the patients in the Control group were densely contaminated by the evaluated microbial species. In this group, the number of bacterial species of the orange complex was larger compared to the number of bacterial species of the red complex (p<0.01). The median of the amount of bacterial endotoxin for this group was 0.6673 EU/ml. The Experimental group had a significantly smaller number of microorganisms than the Control group (median 13,130,000 versus 29,150,000; p=0.01). When the microorganisms were analyzed by complex, there was statistically significant difference between the Control and Experimental groups for the orange complex (p=0.04) with smaller counts of bacteria after use of chlorhexidine oral rinses. On the other hand, there was a greater amount of bacterial endotoxin in the Experimental (median of 1,2199 EU/ml; p=0.02). In conclusion, 0.12% chlorhexidine oral rinse can be useful in the clinical practice to reduce the levels of Gram-negative periodontopathogenic microorganisms in patients with fixed orthodontic appliances. Considering the increase in the amount of bacterial endotoxin after use of chlorhexidine oral rinses, further research is necessary to develop clinical procedures or antimicrobial agents with action against the endotoxin in the metallic brackets

O objetivo do presente estudo clínico randomizado foi avaliar in vivo, por meio da técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization: 1) A contaminação de bráquetes metálicos por 4 espécies bacterianas de microrganismos cariogênicos (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei e Lactobacillus acidophilus); e 2) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard&reg;) sob a forma de bochechos, sobre esses microrganismos. Participaram do estudo 39 pacientes de 11 a 33 anos de idade, em tratamento com aparelho ortodôntico fixo, nos quais foram colados 2 bráquetes metálicos novos, nos pré-molares. Os pacientes do Grupo Controle (n=20) foram orientados a fazer 2 bochechos semanais com solução placebo, durante 30 dias. Os pacientes do Grupo Experimental (n=19) foram orientados a fazer bochechos com solução à base de gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard&reg;), da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 30 dias, os 2 bráquetes foram removidos de cada paciente e processados para detecção das 4 cepas bacterianas, pela técnica Checkerboard DNADNA Hybridization. Os resultados obtidos foram analisados por meio do teste nãoparamétrico de Kruskal-Wallis, utilizando o software SAS (Statistical Analysis System). O nível de significância adotado foi de 5%. De acordo com os resultados obtidos, observou-se que S. mutans, S. sobrinus, L. casei e L. acidophilus foram detectados em 100% das amostras dos bráquetes de ambos os grupos. No entanto, os bráquetes do grupo Controle encontravam-se mais densamente contaminados por S. mutans e S. sobrinus (p<0,01). No grupo Experimental, embora as quantidades de S. mutans, S. sobrinus, L. casei e L. acidophilus tenham sofrido redução numérica após o uso dos bochechos com solução de gluconato de clorexidina a 0,12%, a comparação com os valores observados no grupo Controle evidenciou diferença estatisticamente significante apenas para S. mutans (p=0,03). Concluiu-se que os bochechos com solução de gluconato de clorexidina a 0,12% podem ser úteis, na prática clínica, com a finalidade de reduzir os níveis de microrganismos cariogênicos, em pacientes portadores de aparelhos ortodônticos fixos. / The purpose of this randomized clinical study was to evaluate in vivo, by the checkerboard DNA-DNA hybridization biomolecular technique: 1) The contamination of metallic brackets by four cariogenic bacterial strains (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei and Lactobacillus acidophilus); and 2) The efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate mouthrinses (Periogard&reg;) against these microorganisms. Thirty-nine 11-33-year-old patients under treatment with fixed orthodontic appliances were enrolled in the study and had 2 new metallic brackets bonded to the premolars. For the patients of the control group (n=20), mouthrinses with a placebo solution were prescribed twice a week during 30 days. The patients randomized to the experimental group (n=19) were instructed to use a 0.12% chlorhexidine gluconate solution (Periogard&reg;) as an oral rinse twice a week during 30 days, in the same way as in control group. After this period, the 2 brackets were removed from each patient and processed for detection of the 4 bacterial strains by checkerboard DNA-DNA hybridization. The obtained data were analyzed statistically by the non-parametric Kruskal-Wallis test using the SAS (Statistical Analysis System) software. A level of significance of 5% was set for all analysis. S. mutans, S. sobrinus, L. casei and L. acidophilus were detected in 100% of the samples from brackets of both groups. However, the brackets of the control group were more heavily contaminated by S. mutans and S. sobrinus (p<0.01). In the experimental group, although S. mutans, S. sobrinus, L. casei and L. acidophilus counts decreased after rinsing with the 0.12% chlorhexidine gluconate solution, the comparison with the values obtained in the control group showed statistically significant difference only for S. mutans (p=0.03). In conclusion, the use of 0.12% chlorhexidine gluconate mouthrinses can be useful in clinical practice to reduce the levels of cariogenic microorganisms in patients under treatment with fixed orthodontic appliances.

Empregando a técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization e o teste Limulus Amebocyte Lysate, os objetivos do presente estudo clínico randomizado in vivo foram avaliar, em bráquetes ortodônticos metálicos: 1) A presença de 16 espécies de microrganismos periodontopatogênicos Gram-negativos pertencentes aos complexos laranja e vermelho, por meio de sondas de DNA; 2) A quantidade de endotoxina bacteriana presente; e 3) A eficácia da utilização do gluconato de clorexidina a 0,12%, sob a forma de bochechos, na redução da contaminação pelas 16 espécies de microrganismos periodontopatogênicos Gram-negativos e na redução da quantidade de endotoxina bacteriana. Participaram do estudo 33 pacientes de 11 a 33 anos de idade, em tratamento com aparelho ortodôntico fixo, nos quais foram colocados randomicamente 3 bráquetes metálicos novos nos pré-molares. Os pacientes do Grupo Controle (n=17) fizeram 2 bochechos semanais com solução placebo, durante 30 dias. Os pacientes do Grupo Experimental (n=16) fizeram bochechos com solução à base de gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®), da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 30 dias, os 3 bráquetes foram removidos de cada paciente e processados para a detecção dos microrganismos, pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization, e para a quantificação da endotoxina bacteriana por meio do teste Limulus Amebocyte Lysate. Os resultados obtidos foram analisados por meio dos testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis, Mann-Whitney e pós-teste de Dunn, utilizando os softwares SAS e Graphpad Prism. O nível de significância adotado foi de 5%. De acordo com os resultados obtidos, observou-se que todos os bráquetes dos pacientes do Grupo Controle encontravam-se densamente contaminados pelos microrganismos avaliados. Nesse grupo, as espécies bacterianas do complexo laranja apresentaram-se em maiores quantidades, em relação às espécies do complexo vermelho (p<0,01). A mediana da quantidade de endotoxina para este grupo foi de 0,6673 EU/ml. Quando comparado ao grupo Controle, observou-se que o número total de microrganismos no grupo Experimental foi estatisticamente menor, com mediana de 29.150.000 no grupo Controle e de 13.130.000 no grupo Experimental (p=0,01). Quando os microrganismos foram avaliados por complexos, foi observada diferença estatisticamente significante entre os grupos Controle e Experimental para o complexo laranja (p=0,04), com contagens menores de bactérias após os bochechos com clorexidina. Por outro lado, observou-se que a quantidade de endotoxina no grupo Experimental foi maior, com mediana de 1,2199 EU/ml (p=0,02). Concluiu-se que os bochechos com solução de gluconato de clorexidina a 0,12% podem ser úteis, na prática clínica, com a finalidade de reduzir os níveis de microrganismos periodontopatogênicos Gram-negativos, em pacientes portadores de aparelhos ortodônticos fixos. No entanto, em função do aumento da quantidade de endotoxina bacteriana após o uso dos bochechos com clorexidina, estudos adicionais são necessários com a finalidade de desenvolver procedimentos clínicos ou agentes antimicrobianos que tenham ação sobre a endotoxina presente nos bráquetes metálicos. / Using the biomolecular technique Checkerboard DNA-DNA Hybridization and the Limulus Amebocyte Lysate (LAL) assay, the purposes of the present randomized clinical study were to evaluate in orthodontic metallic brackets: 1) The presence of 16 Gram-negative periodontopathogenic microbial species of the orange and red complexes by using DNA probes; 2) The amount of bacterial endotoxin; and 3) The efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate mouthwashes in reducing the contamination by the evaluated microbial species and the amount of bacterial endotoxin. Thirty-three 11-33-year-old patients undergoing orthodontic treatment with fixed appliances were enrolled in the study and all subjects had 3 new metallic brackets bonded to different premolars in a randomized manner. The patients in the Control group (n=17) were instructed to use a placebo mouthwash twice a week, while those in the Experimental group (n=16) were instructed to use a 0.12% chlorhexidine gluconate mouthwash (Periogard®) in the same way. After 30 days, the 3 brackets were removed from each patient and processed for detection of the microorganisms by the Checkerboard DNADNA hybridization technique, and for quantification of bacterial endotoxin by the LAL assay. The data were analyzed statistically by the non-parametric Mann-Whitney, Kruskal-Wallis and Dunn\'s post tests using SAS and GraphPad Prism softwares. A significance level of 5% was set for all analyses. The brackets of the patients in the Control group were densely contaminated by the evaluated microbial species. In this group, the number of bacterial species of the orange complex was larger compared to the number of bacterial species of the red complex (p<0.01). The median of the amount of bacterial endotoxin for this group was 0.6673 EU/ml. The Experimental group had a significantly smaller number of microorganisms than the Control group (median 13,130,000 versus 29,150,000; p=0.01). When the microorganisms were analyzed by complex, there was statistically significant difference between the Control and Experimental groups for the orange complex (p=0.04) with smaller counts of bacteria after use of chlorhexidine oral rinses. On the other hand, there was a greater amount of bacterial endotoxin in the Experimental (median of 1,2199 EU/ml; p=0.02). In conclusion, 0.12% chlorhexidine oral rinse can be useful in the clinical practice to reduce the levels of Gram-negative periodontopathogenic microorganisms in patients with fixed orthodontic appliances. Considering the increase in the amount of bacterial endotoxin after use of chlorhexidine oral rinses, further research is necessary to develop clinical procedures or antimicrobial agents with action against the endotoxin in the metallic brackets

A substituição clínica de dentes naturais perdidos por implantes osteointegrados tem representado uma das primeiras opções terapêuticas para a reabilitação de pacientes total ou parcialmente edêntulos. Apesar dos excelentes índices de sucesso demonstrados pelas restaurações implanto-suportadas, alguns fatores permanecem não esclarecidos, principalmente no que diz respeito à remodelação óssea ao redor dos implantes osteointegrados. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a relação do nível de instalação dos implantes dentários com os parâmetros clínicos, com a remodelação óssea peri-implantar e com a colonização bacteriana, em implantes de plataforma regular, submetidos à carga imediata. Implantes de plataforma regular foram instalados em dois diferentes níveis em relação à crista óssea ao nível ósseo e supra ósseo (1 mm). No total, trinta e cinco implantes em 9 pacientes (idade média de 62,4 11,2 anos) foram avaliados radiograficamente no momento da instalação dos implantes (T1) e 6 meses após (T2), momento no qual também foram feitas análises clínicas e coleta de amostras para o teste microbiológico. Nos exames radiográficos foram analisadas a perda óssea, a partir de mensurações lineares da distância entre um ponto fixo do componente protético e o ponto mais coronário do contato osso-implante, e a densidade óptica alveolar obtida a partir de regiões ósseas de interesse (ROIs). As análises clínicas consistiram na avaliação da profundidade de sondagem e na mensuração do volume do fluido gengival peri-implantar. O perfil bacteriano dos sítios avaliados foi caracterizado por meio do método de análise de checkerboard DNA-DNA hybridization. Os testes estatísticos realizados mostraram não haver relação entre o nível de instalação dos implantes em relação à crista óssea e a remodelação óssea alveolar, tanto com relação à perda óssea (p = 0,725), como com relação à densidade óptica alveolar (p = 0,975). Também não foi possível estabelecer uma correlação entre a remodelação óssea e parâmetros clínicos como profundidade de sondagem e volume do fluido gengival peri-implantar. Com relação ao perfil bacteriano, não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre os grupos avaliados para nenhuma das 40 bactérias analisadas. / The replacement of missing teeth with osteointegrated dental implants represents one of the first therapeutic options for the rehabilitation of totally or partially edentulous patients. In spite of clinical success rates for implant-supported restorations, some factors remain nuclear, especially those related to alveolar bone remodeling around osteointegrated implants. Thus, the aim of this study was to evaluate the relation between the installation level of dental implants with bone remodeling and bacterial colonization, in regular platform implants, under an immediate loading protocol. Dental implants with regular platform were inserted in different levels related to the bone crest on the level of bone crest and above the bone crest. In total, thirty-five implants in 9 patients (mean age 62,4 11,2 years) were radiographically evaluated in the moment of implant installation (T1) and 6 months after (T2), when clinical analysis and sample collecting for microbiologic test were performed. In radiographic exams were analyzed the marginal bone loss, from linear measurements of the distance between a fixed point of prosthetic components and the most coronal point of bone-implant contact, and optical alveolar density, from bone regions of interest (ROIs). Clinical analysis consisted of probing depth evaluation and peri-implant crevicular fluid volume mensuration. The bacterial profile of selected sites was characterized by checkerboard DNA-DNA hybridization method. Statistic tests showed no relation between implant insertion levels and alveolar bone remodeling, with relation to marginal bone loss (p = 0,725) and optical alveolar density (p = 0,975). It was not also possible to establish a correlation among alveolar bone remodeling and clinical parameters as probing depth and peri-implant crevicular fluid volume. With respect to the bacterial profile, no statistically significant differences were found between the study groups, for none of the 40 bacterial specimens analyzed.