Geobacillus thermodenitrificans JK1 kamieno termostabilios ksilanazės geno klonavimas, ekspresija ir fermento savybių analizė Ksilanas - pagrindinis hemiceliuliozės komponentas ir antras pagal paplitimą polisacharidas gamtoje. Šis biologinis polimeras yra chemiškai heterogeniška bei kompleksiška medžiaga, kurios efektyviam degradavimui reikalingos multifermentinės sistemos. Tokios sistemos yra plačiai paplitusios tarp įvairių prokariotinių ir eukariotinių mikroorganizmų. Pagrindinį vaidmenį ksilano degradacijoje atlieka endo-1,4-β-ksilanazės. Ksilanazės pasižyminčios termostabilumu yra plačiai taikomas popieriaus ir maisto pramonėje, pašarų gamyboje bei biokonversijoje. Darbo metu buvo atrinktas JK1 kamienas, gebantis sekretuoti ksilanolizinius fermentus į ląstelės išorę. Remiantis 16S rRNR ir spo0A genų sekų palyginimais bei filogenetine analize nustatyta, kad tiriamas kamienas buvo artimiausias G. thermodenitrificans NG80-2 kamienui, kuriame taip pat nustatytas ksilanazės genas. Pagal šią geno seką sukurti pradmenys amplifikuojantys JK1 kamieno ksilanazės geną (1224 bp). Ksilanazės genas klonuotas ir perkeltas į ekspresijos vektorių (pET-28c(+)), sukonstruojant rekombinantinę ksilanazę su His inkarine uodega (50,979 kDa), kas leido ekspresuoti baltymą E. coli ir atlikti gryninimą nikelio afininės chromatografijos metodu. Šiame darbe pirmą kartą charakterizuota G. thermodenitrificans JK1 kamieno ksilanazė. Rekombinantinio fermento optimalios veikimo sąlygos - 70 °C... [toliau žr. visą tekstą] / Cloning, expression and biochemical characterization of the thermostable xylanase from Geobacillus thermodenitrificans strain JK1 Xylan is a major structural polysaccharide in plant cells, and is the second most abundant polysaccharide in nature. Due to its heterogeneity and complexity, the complete hydrolysis of xylan requires a variety of cooperatively acting enzymes. These xylanolytic enzyme systems are quite widespread among prokariotic and eukaryotic microorganisms. Endo-1,4-β-xylanase is considered to play the most important role in xylan degradation. Thermostable xylanases have potential applications in a wide range of industrial processes, including pulp and paper industry, food and animal feeds industry and bioconvertion. In this study a thermophilic JK1 strain producing xylanolytic enzymes was isolated from compost sample. The 16S rRNR and spo0A genes sequence analysis indicated that JK1 strain had the highest similarity with G. thermodenitrificans NG80-2 strain. Based on the xylanase gene sequence from G. thermodenitrificans NG80-2 strain, degenerated primers were designed for amplification of xylanase-coding gene (1224 bp) from JK1 strain. Subsequently, the amplified gene was cloned into expression vector (pET-28c(+)) and the recombinant xylanase with a polyhistidine-tag was designed (50,979 kDa). Biochemical properties of the purified by nickel affinity chromatography recombinant xylanase from G. thermodenitrificans JK1 strain were further characterized. The... [to full text]

Tyrimo objektas ir metodai: tiriamieji antidepresantai: bušpirono hidrochloridas; sertralino hidrochloridas; amitriptilino hidrochloridas, fluvoksamino maleatas ir paroksetino hidrochloridas. Šių antidepresantų mišinio skirstymui ir komponentų identifikavimui plonasluoksnės chromatografijos metodu naudoti tirpikliai ir ryškinimo reagentai: metanolis, 25 proc. amonio hidroksidas, trichlormetanas, etanolis, etilacetatas, cikloheksanas, etano rūgštis, dimetilacetonas, acetonitrilas, propanolis, trifluoracto rūgštis, dichlormetanas, 1,4–dioksanas, benzenas, petrolio eteris, izoamilo spiritas, dietileteris, oktanas, metano rūgštis, N,N –dimetilanilinas, nitrobenzenas ir heksanas; Dragendorfo reagentas (modifikuotas pagal Munjė), ninhidrinas, Mandelino reagentas ir UV spinduliuotė (254 nm; 365 nm). Darbo tikslas: sukurti ir validuoti plonasluoksnės chromatografijos metodiką, tinkamą išskirstyti antidepresantų mišinio (amitriptilino hidrochloridas, paroksetino hidrochloridas, sertralino hidrochloridas, fluvoksamino maleatas ir bušpirono hidrochloridas) komponentus ir juos identifikuoti. Darbo uždaviniai: atlikti mokslinės literatūros šaltinių analizę įvertinant amitriptilino, paroksetino, sertralino, fluvoksamino ir bušpirono fizines, chemines, farmakologines savybes ir analizės metodus naudojamus jiems identifikuoti. Aprašyti skirtingas plonasluoksnės chromatografijos metodikas, tinkamas amitriptilino, paroksetino, sertralino, fluvoksamino ir bušpirono mišinio skirstymui ir... [toliau žr. visą tekstą] / Object and methods: research antidepressants: buspirone hydrochloride, sertraline hydrochloride, amitriptyline hydrochloride, fluvoxamine maleate and paroxetine hydrochloride. Used solvents and visualization reagents for those antidepressant mixture distribution and component identification by thin-layer chromatography: methanol, 25 percent. ammonium hydroxide, trichloromethane, ethanol, ethyl acetate, cyclohexane, ethane acid, dimethylketone, acetonitrile, propanol, trifluoroacetic acid, dichloromethane, 1,4-dioxane, benzene, petroleum ether, isoamyl alcohol, diethyl ether, octane, methane acid, N, N - dimethylaniline, nitrobenzene and hexane; Dragendorff reagent (modified by Munjė), ninhydrin, Mandelina reagent and UV radiation (254 nm; 365 nm). Aim: to develop and validate a thin-layer chromatographic method suitable for separating of antidepressants mixture components (amitriptyline hydrochloride, paroxetine hydrochloride, sertraline hydrochloride, fluvoxamine maleate and buspirone hydrochloride) and identify them. Objective: to perform analysis of scientific literature suporting amitriptyline, paroxetine, sertraline, fluvoxamine and buspirone physical, chemical, pharmacological properties, and analytical methods used to identify them. Describe the different thin-layer chromatographic techniques suitable for amitriptyline, paroxetine, sertraline, fluvoxamine and buspirone mixture distribution and component identification. Create a suitable thin-layer chromatographic... [to full text]

Kriminalistinis medžiagų ir gaminių tyrimas suprantamas kaip procesiškai reglamentuotas ekspertų ar specialistų atliekamas kriminalistinis medžiagų ir gaminių tyrimas, siekiant ištirti nusikalstamos veikos pėdsakus ir daiktinius įrodymus, ir reikalaujantis mokslo, technikos, meno ar kitų specialių žinių, ir kurio rezultatai įforminami ekspertizės akte arba specialisto išvadoje. Kriminalistinis medžiagų ir gaminių tyrimas apima platų ratą atskirų ekspertizės (tyrimų) rūšių, išskirtų pagal objekto kriterijų. Tai pluoštų, dirvožemio, naftos, alkoholinių skysčių, dažų ir kitos ekspertizės (tyrimai). Medžiagų ir gaminių tyrimui gali būti keliami įvairūs uždaviniai, kurie yra grupuojami į identifikacinius ir neidentifikacinius (klasifikacinius ir diagnostinius). Žinant kokie yra kiekvienai tyrimo rūšiai keliami uždaviniai, galima numanyti ir kokios yra ekspertinės galimybės: kokius faktus gali patvirtinti ar paneigti atliktas tyrimas. Ekspertizės (tyrimo) skyrimo teisinis pagrindas yra būtinumas atlikti specialių žinių reikalaujantį specialų tyrimą nusikalstamos veikos aplinkybėms nustatyti. Medžiagos tyrimui kokybiškas rengimas yra svarbi ekspertinio tyrimo atlikimo prielaida. Tyrimo objektai gali būti surandami tiek atliekant jų paiešką, tiek juos surandant. Suradus tyrimo objektus, itin svarbus objektų paėmimo ir pakavimo taisyklių, numatytų LTEC leistose metodinėse rekomendacijose bei kituose leidiniuose, laikymasis. Nuo to priklauso, ar bus išnaudotos visos ekspertinės... [toliau žr. visą tekstą] / The criminalistic investigation of materials and items is an investigation regulated by process rules and performed by experts or specialists seeking to examine criminal acts and material evidence which requires science, technique, art or other special knowledge and which results are formalized in an expert act or specialist opinion. Criminalistic investigation of materials and items is combined out of a wide range of independent expertise (object investigation) types which are distinguished by the object criteria. It includes fibres, soil, oil, alcoholic liquids, dies and other expertise (object investigation). There are various tasks being formulated for the investigation of materials and items, which are grouped into identificational and non-identificational tasks (the previous group includes both diagnostically and classification tasks). The awareness of what are the main tasks for every independent investigation allows perceiving what the expertise possibilities are: what facts can be approved or denied by the investigation. The legal background of the imposition of expertise (object investigation) is the necessity to perform a special investigation which requires the special knowledge being used in order to determine the circumstances of the criminal act. The qualified arrangement of the investigative material is an essential premise of the execution of the investigation. The investigative objects can be found in both ways, by performing the search of them or by... [to full text]