Programa de Pós-Graduação em Saúde e Nutrição. Escola de Nutrição, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-09-29T18:34:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_PrediçãoConcentraçõesPlasmáticas.pdf: 2463890 bytes, checksum: 6448ec742101d344b01edd2f08a0fd05 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-07T13:00:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_PrediçãoConcentraçõesPlasmáticas.pdf: 2463890 bytes, checksum: 6448ec742101d344b01edd2f08a0fd05 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-07T13:00:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_PrediçãoConcentraçõesPlasmáticas.pdf: 2463890 bytes, checksum: 6448ec742101d344b01edd2f08a0fd05 (MD5) Previous issue date: 2014 / As doenças cardiovasculares (DCV) são as principais causas de mobi-mortalidade em todo o mundo e estão bem relacionadas a diversos fatores de risco cardiovascular tradicionais (RCV), incluindo obesidade central, resistência à insulina (RI), intolerância à glicose, dislipidemias e hipertensão arterial sistêmica (HAS). A inflamação tem sido associada a muitos destes fatores de risco, apresentando considerável papel na instalação das DCV. Seus mediadores inflamatórios, incluindo as citocinas pró-inflamatórias interleucina 1β (IL-1β), interleucina 6 (IL-6) e fator de necrose tumoral α (TNF-α) desempenham importantes funções associadas ao metabolismo de carboidratos, lipídeos e processo aterosclerótico, sendo consideradas fatores de RCV emergentes. Estudos têm sido desenvolvidos a fim de investigar os agrupamentos desses fatores na fisiopatologia da DCV em crianças e adolescentes, pois sabe-se que sua instalação se inicia precocemente e leva a graves consequências na vida adulta. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi Investigar a associação entre agrupamentos de fatores de risco cardiovascular e IL-1β, IL-6 e TNF-α, em adolescentes. Foi realizado um estudo transversal com 487 adolescentes (236 meninos e 251 meninas) no qual foram obtidas medidas antropométricas e de composição corporal (peso, altura, perímetro da cintura e porcentagem de gordura corporal), calculado o índice de massa corporal (IMC), a relação cintura/estatura (RCE) e o índice de conicidade (Índice C), aferida a pressão arterial e foram determinadas as concentrações plasmáticas de IL-6, IL-1β e TNF-α, concentrações séricas de colesterol total e frações (HDL-c e LDL-c), triacilgliceróis, glicose e insulina e calculado posteriormente o índice HOMA-IR (índice de avaliação da homeostase de resistência à insulina). As variáveis de RCV clínicas e bioquímicas foram incluídas na análise de componentes principais. A associação entre os agrupamentos de fatores de risco cardiovascular e interleucina 6, interleucina 1β e fator de necrose tumoral α, foi obtida através da análise de regressão linear múltipla. As análises foram realizadas separadamente para meninos e meninas, considerando p<0,05 e com auxílio do programa estatístico PASW 18.0. A análise de componentes principais revelou cinco componentes independentes, responsáveis por 80% e 81% de explicação da variação total das 14 variáveis originais em meninos e meninas, respectivamente. Em ambos os sexos, foram encontrados componentes que foram caracterizados por adiposidade, metabolismo de glicose, pressão arterial, HDL/triacilgliceróis e colesterol/LDL. Metabolismo de glicose foi inversamente associado à interleucina 1β, em ambos os sexos (p=0,015 para meninas e p=0,039 para meninos); pressão arterial foi inversamente associada ao fator de necrose tumoral α, em meninas (p=0,003) e, por fim, o componente representado por HDL/triacilgliceróis foi positivamente associado à interleucina 6, em meninas (p=0,01), e à interleucina 1β (p<0,001) e fator de necrose tumoral α (p<0,001), em meninos. Os resultados sugerem que metabolismo de lipídeos possui forte ligação com o processo inflamatório, sendo uma das primeiras alterações presentes no desenvolvimento de doenças cardiovasculares, ainda na adolescência. Mais estudos são necessários a fim de melhor elucidar as relações encontradas entre metabolismo de glicose, pressão arterial e inflamação, em adolescentes. ______________________________________________________________________ / ABSTRACT: Cardiovascular diseases (CVD) are a major cause of mobility and mortality worldwide and are well related to several factors of traditional cardiovascular risk (CVR), including central obesity, insulin resistance (IR), glucose intolerance, dyslipidemia and systemic arterial hypertension (SAH). Inflammation has been linked to many of these risk factors, presenting considerable role in the onset of CVD. Inflammatory mediators, including proinflammatory cytokines interleukin 1β (IL-1β), interleukin 6 (IL-6) and tumor necrosis factor α (TNF- α) play important functions associated with the metabolism of carbohydrates, lipids and atherosclerosis, being considered cardiovascular risk factors emerging. Studies have been conducted to investigate the clusters of these factors in the pathophysiology of CVD in children and adolescents, since it is known that the installation begins early and leads to serious consequences in adulthood. In this sense, the aim of this study was to investigate the association between clusters of cardiovascular risk factors and IL-1β, IL-6 and TNF-α in adolescents. A cross-sectional study of 487 adolescents ( 236 boys and 251 girls ) in which anthropometric and body composition (weight, height, waist circumference and percentage of body fat) measurements were obtained, calculated body mass index (BMI) was conducted waist / height ratio (WHR) and conicity index, measured blood pressure and were determined plasma concentrations of IL-6 , IL-1β and TNF-α, serum total cholesterol and its fractions (HDL - c and LDL-c), triglycerides, glucose and insulin, and subsequently calculates the HOMA-IR index (homeostasis assessment of insulin resistance). Clinical and biochemical variable of CVR were included in the principal components analysis. The association between clusters of cardiovascular risk factors and IL-6, IL-1β and TNF-α was obtained by multiple linear regression. Analyses were performed separately for boys and girls, considering p < 0.05 with PASW 18.0 statistical program. The principal components analysis revealed five independent components, accounting for 80 % and 81 % of the explained total variance of 14 original variables in boys and girls, respectively. In both sexes, components that are characterized by adiposity, glucose metabolism, blood pressure, HDL/triglycerides and cholesterol/LDL were found. Metabolism of glucose was inversely related to IL-1β in both sexes (p = 0.015 for girls and p = 0.039 for boys), blood pressure was inversely related to tumor necrosis factor α in girls (p = 0.003) and, finally, the component represented by HDL/triglycerides was positively associated with IL-6 in girls (p=0.01 and IL-1β (p < 0.001) and TNF-α (p < 0.001) in boys. The results suggest that lipid metabolism has a strong link with the inflammatory process, being one of the first changes present in the development of CVD, in adolescence. More studies are needed to elucidate the relationships between glucose metabolism, blood pressure and inflammation in adolescents.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-03-24T19:04:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoInfiltradoInflamatório.pdf: 7085848 bytes, checksum: 15cf207e1db5309e4ded96ccec0559f8 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-03-25T15:58:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoInfiltradoInflamatório.pdf: 7085848 bytes, checksum: 15cf207e1db5309e4ded96ccec0559f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-25T15:58:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoInfiltradoInflamatório.pdf: 7085848 bytes, checksum: 15cf207e1db5309e4ded96ccec0559f8 (MD5) Previous issue date: 2014 / Objetivo: Quantificar e comparar o número de células inflamatórias totais (linfócitos, neutrófilos, mastócitos, macrófagos) nas regiões de ectocérvice original, ectocérvice metaplásica (zona de transformação) e de lesão. Caracterizando a resposta imune local entre lesão benigna (LB), neoplasia intraepitelial cervical (NIC graus 1, 2 e 3) e carcinoma epidermóide invasor (CEI), pela quantificação de linfócitos T (CD3+, CD4 +, CD8 +), células natural killer (CD56 +) e a expressão de interferon gama (IFN-γ). Avaliar a presença de interferon gama receptor 1 (IFN-γ R1), comparando sua positividade entre o sistema de visualização polimérico livre de biotina (SPLB) e os sistemas baseados em streptavidina-biotina (SA-B) CSA e LSAB. Metodologia: estudo transversal realizado a partir de material obtido por biópsia e conização realizadas por cirurgia de alta frequência (CAF) entre 2006 a 2011, onde foram selecionadas 50 amostras, distribuídas em LB (n=10), NIC 1 (n=10), NIC 2 (n=10), NIC 3 (n=10) e CEI (n=10). A análise do infiltrado inflamatório total foi realizada em lamina corada por hematoxilina-eosina (HE) e a presença de linfócitos T, células NK, de IFN-γ e IFN-γ R1 foi realizada pela técnica de imunoistoquímica. A quantificação das células inflamatórias e da citocina foi feita no estroma subjacente a região da lesão. Os dados foram submetidos ao teste estatístico para comparação de médias ANOVA, seguido por pós-teste de TUKEY e o teste exato de FISHER foi utilizado para avaliação dos dados categóricos. Resultados: Não foi encontrado diferença entre o número de células inflamatórias totais nas diferentes regiões do colo do útero frente ao diagnóstico histopatológico (p>0,05). Existindo apenas o aumento do número de células na área de lesão NIC 3 em relação a sua própria região de ectocérvice original (p= 0,0141). Na quantificação das reações de IHQ, houve maior número de células CD3+, CD8+, CD56+ e IFN-γ em NIC 1 comparado a NIC 3 e CEI (p<0,05). Não encontramos diferença estatística para a presença de LT CD4+ entre as lesões. O IFN-γ R1 esteve presente em 100% dos casos de LB, NIC 1 e NIC 2, em 40% das amostras de NIC 3 e 70% em CEI. A positividade para o receptor utilizando os sistemas SPLB e CSA foi superior ao sistema LSAB (p<0,0001) e a intensidade da marcação demostrada por SPLB foi significativamente maior em relação sistema CSA (p<0,0001). Conclusão: NIC 1 possui o maior número de linfócitos T, células NK e IFN-γ, ocorrendo diminuição destes elementos com o agravamento da lesão. A perda do IFN-γ R1 em casos de NIC 3 e CEI pode justificar a falha em tratamentos com IFN-γ. O SPLB ADVANCE é o mais indicado para a detecção do receptor IFN-γ R1 em relação aos sistemas SA-B. _____________________________________________________________________ / ABSTRACT: Objective: To quantify and compare the total number of inflammatory cells (lymphocytes, neutrophils, mast cells, macrophages) in the regions of ectocervix original, ectocervixmetaplasic (transformation zone) and lesion. Featuring local immune response between benign lesion (LB), cervical intraepithelial neoplasia (CIN grades 1, 2 and 3) and invasive squamous cell carcinoma (SCC), the quantification of T lymphocytes (CD3+, CD4+, CD8+), natural killer cells (CD56+) and the expression of interferon gamma (IFN-γ).To evaluate the presence of the interferon gamma receptor 1 (IFN-γ R1), comparing the positivity of the Biotin-freepolymericvisualization systems (BFPS) and those based on biotinstreptavidin (SA-B) CSA and LSAB.Methodology: A cross sectional study from material obtained by biopsy and conization performed by high-frequency surgery (HFS) between 2006 to 2011, were selected 50 samples distributed in LB (n=10), NIC 1 (n=10), CIN 2 (n=10), CIN 3 (n=10) and CIS (n=10). The analysis of the total inflammatory infiltrate was held in lamina stained by hematoxylin-eosin (HE) and the presence of T lymphocytes, NK cells, IFN-γ and IFN-γ R1 was performed by immunohistochemistry. Quantification of inflammatory cells and the cytokine was made in the underlying stroma region of the lesion. The data were subjected to statistical test for comparison of ANOVA, followed by Tukey post-test and Fisher exact test was used to assess categorical data. Results: Not found difference between the total number of inflammatory cells in different regions of the cervix against the histopathology diagnosis (p> 0.05). With only the increased number of cells in the lesion area CIN 3 in terms of their original region of ectocervix (p=0.0141). The quantification of IHC reactions, a greater number of CD3+, CD8+, NK cells CD56+ and IFN-γ in CIN 1 compared to CIN 3 and SCC (p<0.05). We found no statistical difference for the presence of CD4+ between the lesions. The IFN-γ R1 was present in 100% of cases of LB, CIN 1 and CIN 2, in 40% of samples of CIN 3 and 70% in SCC. The receptor positivity using SPLB and CSA systems was higher than the LSAB (p<0.0001) and intensity of the labeling demonstratedby system SPLB was significantly higher than for CSAsystem (p< 0.0001). Conclusion: NIC 1 has the largest number of T lymphocytes, NK cells and IFN-γ there is a reduction of these elements with the aggravation of the lesion. The loss of IFN-γ R1 in CIN 3 and SCC can justify failure to treatment with IFN-γ. The SPLB ADVANCE is the most suitable for the detection of IFN-γ R1 compared to SA-B systems.

Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by giuliana silveira (giulianagphoto@gmail.com) on 2016-03-22T17:27:01Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_CorrelçaoCapacidadeEctonucleotidásica.pdf: 1915336 bytes, checksum: 791ba29f673a9a0f4566d6f2432bc73b (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2016-04-05T14:05:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_CorrelçaoCapacidadeEctonucleotidásica.pdf: 1915336 bytes, checksum: 791ba29f673a9a0f4566d6f2432bc73b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T14:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_CorrelçaoCapacidadeEctonucleotidásica.pdf: 1915336 bytes, checksum: 791ba29f673a9a0f4566d6f2432bc73b (MD5) Previous issue date: 2014 / Probióticos são microrganismos vivos que, quando administrados de forma adequada, agregam benefícios à saúde do hospedeiro. Várias espécies do gênero Lactobacillus apresentam efeito probiótico comprovado e são importantes moduladoras do sistema imune intestinal. Os probióticos estimulam as células dendríticas (DCs) a produzirem citocinas que diferenciam as células T em Th1, Th2, Th17 ou Treg. As ectonucleotidases são enzimas capazes de hidrolisar nucleotídeos di e trifosfatados. Essas ectoenzimas são importantes para a modulação da resposta imune intestinal devido à hidrólise de ATP, que quando aumentada no meio extracelular é considerada uma molécula inflamatória. Por outro lado o acúmulo de adenosina, através da hidrólise de ATP em AMP, pela 5’-nucleotidase, estimula a resposta anti-inflamatória. O objetivo do trabalho foi relacionar a atividade ectonucleotidásica de diferentes linhagens de Lactobacillus com a capacidade de ativação de DCs e a produção de citocinas. Os Lactobacillus foram incubados com ATP, ADP ou AMP e os níveis de hidrólise foram avaliados através da liberação de fosfato inorgânico (Pi). Demonstrouse que os lactobacilos hidrolisam ATP diferentemente, dependendo da linhagem, sendo que Lactobacillus mali L.11 e Lactobacillus acidophilus L.36 apresentaram maior capacidade de hidrólise de ATP. Não foi observado hidrólise significativa de ADP e AMP. Ao agruparmos as linhagens com e sem atividade, foi possível verificar o aumento significativo da atividade de L. mali L.11 e L. acidophilus L.36 quando comparado às linhagens que apresentaram pouca atividade ectonucleotidasica. Além disso, as DCs foram estimuladas com os lactobacilos, por 20 horas e os resultados dessa estimulação demonstrou que as linhagens não alteraram. Além disso, as DCs foram estimuladas com Lactobacillus, por 20 horas e não demonstrou alteraração na expressão de CD40, CD86 e MHCII. Por fim observou-se a produção de citocinas após a estimulação por 20 horas. Houve um aumento de IL-6, TNF- α e IL-10 em relação às DCs não estimuladas. De maneira interessante, IL-12 teve a produção aumentada quando da estimulação de DC com L. mali L.10, que também mostrou baixa capacidade de hidrolisar ATP. Curiosamente, L. mali L.11 e L. acidophilus L.36 mostraram uma diminuição significativa da produção de IL-12, o que pode está relacionado com a alta capacidade de hidrólise dessas cepas. Conclui-se então que Lactobacillus possuem capacidade ectonucleotidásica diferenciada e que a hidrólise de ATP pode ser relacionada com a produção de citocinas por DCs e, consequentemente, com a diferenciação de linfócitos T durante a resposta imune intestinal. __________________________________________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT : Probiotics are live microorganisms which, when administered properly, add health benefits to the host. Several species of the genus Lactobacillus have proven probiotic effect and are important modulators of the intestinal immune system. Probiotics stimulate dendritic cells (DCs) to produce cytokines that T cells differentiate into Th1, Th2, Treg and Th17. The ectonucleotidases are enzymes that hydrolyze nucleotide diand triphosphates. These ectoenzymes are important for the modulation of intestinal immune response due to ATP hydrolysis, which when raised in the extracellular medium is considered an inflammatory molecule. On the other hand, the accumulation of adenosine by hydrolysis of ATP to AMP by 5'-nucleotidase, stimulates antiinflammatory response. The objective was to relate the ectonucleotidásica activity of different strains of Lactobacillus with the ability of DCs activation and cytokine production. Lactobacilli were incubated with ATP, ADP or AMP and hydrolysis levels were assessed by the release of inorganic phosphate (Pi). It has been shown that lactobacilli hydrolyze ATP differently, depending on the strain, and Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus mali L.11 L.36 showed greater capacity for ATP hydrolysis. No significant hydrolysis of ADP and AMP was observed. When we group the strains with and without activity, we observed a significant increase in activity of L. acidophilus and L. mali L.11 L.36 compared to strains that showed little ectonucleotidasica activity. Furthermore, DCs were stimulated with lactobacilli for 20 hours and the results of stimulation showed that the strains do not change. Furthermore, DCs were stimulated with Lactobacillus for 20 hours and showed no alteraração expression of CD40, CD86 and MHCII. Finally the observed production of cytokines after stimulation for 20 hours. There was an increase in IL-6, TNF-α and IL- 10 compared to non-stimulated DCs. Interestingly, IL-12 production was increased when the stimulation of DC with L. mali l.10, which showed poor ability to hydrolyze ATP. Interestingly, L. acidophilus and L. mali L.11 L.36 showed a significant decrease of IL-12, which can associated with high hydrolysis capability of these strains. It is concluded that Lactobacillus ectonucleotidásica have different capabilities and the hydrolysis of ATP may be related cytokine production by DCs and therefore with the differentiation of T lymphocytes in the intestinal immune response. Keywords: Probiotics,

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:47:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 301502.pdf: 1315666 bytes, checksum: 02b304dc4e46a9fd15c36c2823dbb0f2 (MD5) / Introdução: As Glitazonas (rosiglitazona e pioglitazona) são fármacos utilizados para o tratamento do diabetes tipo II. Estes fármacos são agonistas do receptor ativados por proliferadores de peroxissomos gama (PPAR- ) e induzem à transcrição de genes relacionados ao metabolismo glicídico e lipídico e à expressão de proteínas produzidas e/ou liberadas no processo inflamatório. Objetivos: 1) Avaliar o efeito anti-inflamatório da rosiglitazona e da pioglitazona administrados por via intraperitoneal (i.p.), na primeira (4 h) e na segunda (48 h) fases da resposta inflamatória induzida pela carragenina (Cg) no modelo da pleurisia murina. 2) Avaliar o efeito antioxidante da pioglitazona utilizando-se o mesmo modelo experimental. Delineamento do estudo: Trata-se de um estudo experimental, prospectivo e controlado. Métodos: Neste estudo foram utilizados camundongos albinos Swiss de 1 mês de idade e pesando de 18-20 g. Diferentes grupos de animais foram tratados previamente com a rosiglitazona (0,5 - 10 mg/Kg) ou a pioglitazona (5 - 50 mg/Kg), em diferentes períodos de tempo (0,5 - 2 h) antes da Cg. Apenas para o grupo de animais destinado a avaliação da exsudação e a contagem total e diferencial dos leucócitos no lavado da cavidade pleural foi administrada 0,2 mL da solução de azul de Evans (25 mg/Kg, i.v.), 10 min antes da administração da Cg. Os parâmetros inflamatórios avaliados no lavado da cavidade pleural para ambos os fármacos foram: leucócitos, exsudação, atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO), adenosina-deaminase (ADA), concentrações do fator de necrose tumoral alfa (TNF- ) e da interleucina-1 beta (IL-1 ). Além disso, para a rosiglitazona avaliou-se também as concentrações dos metabólitos do óxido nítrico (NOx), interleucina-17A (IL-17A) e fator de crescimento endotelial vascular-alfa (VEGF- ), no lavado da cavidade pleural. Para a pioglitazona os parâmetros estudados para avaliar o estresse oxidativo foram: atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa S-transferase (GST), no sangue total, bem como a peroxidação lipídica (TBARS) no lavado da cavidade pleural. A análise estatística utilizada foi o teste T de Student ou ANOVA (Newman Keuls). Além disso, para avaliar as possíveis correlações utilizou-se o teste de Pearson. Valores de P < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: A rosiglitazona, em ambas as fases (4 e 48 h) da pleurisia induzida pela Cg, inibiu os leucócitos (P < 0,01), a exsudação (P < 0,01), a atividade das enzimas ADA e MPO (P < 0,05) e as concentrações de NOx, TNF- , IL-1 , IL-17A e VEGF- (P < 0,05). Já a pioglitazona, na pleurisia 4 e 48 h reduziu os leucócitos (P < 0,01), a atividade da ADA (P < 0,01) e as concentrações de TNF- e IL-1 (P < 0,01). A atividade da MPO foi inibida pela pioglitazona somente na pleurisia 4 h (P < 0,01). Na avaliação dos parâmetros relacionados ao estresse oxidativo, a pioglitazona na pleurisia 4 e 48 h reduziu a atividade das enzimas SOD, CAT, GPx e GST (P < 0,05) e as concentrações de TBARS (P < 0,05). Conclusão: A atividade anti-inflamatória da rosiglitazona e da pioglitazona parece estar relacionada com a redução do influxo de células ativadas e consequente redução da liberação e/ou produção de mediadores inflamatórios. Além disso, o efeito antioxidante observado para a pioglitazona deve-se em parte pela inibição de enzimas antioxidantes e marcadores de peroxidação lipídica. / Introduction: The glitazones (rosiglitazone and pioglitazone) are drugs used to treat type II diabetes. These drugs are receptor agonists of peroxisome proliferator-activated gamma (PPAR-) and induce the transcription of genes related to glucose and lipid metabolism and expression of inflammatory proteins produced and/or released in the inflammatory process. Objectives: 1) To evaluate the anti-inflammatory effect of rosiglitazone and pioglitazone administered intraperitoneally (i.p.) in the first (4 h) and second (48 h) phases of the inflammatory response induced by carrageenan (Cg) in the murine model of pleurisy. 2) To evaluate the antioxidant effect of pioglitazone using the same experimental model. Study desings: This is an experimental, prospective and controlled study. Methods: In this study it was used Swiss albino mice, 1 month old and weighing 18-20 g. Different groups of animals were pretrated with rosiglitazone (0.5 -10 mg/Kg) or pioglitazone (5 - 50 mg/Kg) in different periods of time (0.5 # 2 h) prior to Cg. To evaluate the exudation a group of animals received 0.2 mL of Evans blue (25 mg/Kg) 10 min before administration of Cg. The studied inflammatory parameters evaluated were: leukocytes, exudation, activities of myeloperoxidase (MPO) and adenosine deaminase (ADA), concentrations of tumor necrosis factor (TNF-) and interleukin-1 beta (IL-1). In addition for rosiglitazone it was evaluated concentrations of nitric oxide metabolites (NOx), interleukin-17A (IL-17A) and vascular endothelial growth factor-alpha (VEGF-) in the pleural fluid. For pioglitazone the following parameters of oxidative stress were evaluated: activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), gluthatione S-transferase (GST), whole blood, as well as lipid peroxidation (TBARS) in pleural fluid. The statistical analysis used was Student T test or ANOVA (Newman Keuls). In addition, to evaluate the correlations it was used Pearson. Values of P < 0.05 were considered significant. Results: Rosiglitazone in both phases (4 and 48 h) of pleurisy induced by Cg inhibited leukocytes (P < 0.01), exudation (P < 0.01), activities of ADA and MPO (P < 0.05), and concentration of NOx, TNF-, IL-1, IL-17A and VEGF- (P < 0.05). Pioglitazone in pleurisy 4 and 48 h also reduced leukocytes (P < 0.01), activity of ADA (P < 0.01), and concentration of TNF- and IL-1 (P < 0.01). The activity of MPO was inhibited by pioglitazone only in the pleurisy 4 h (P < 0.01). In the evaluation of parametes related to oxidative stress in pleurisy 4 and 48 h, pioglitazone reduced activities of SOD, CAT, GPx and GST (P < 0.05), and concentrations of TBARS (P < 0.05). Conclusion: The anti-inflamatory effects of rosiglitazone and pioglitazone appears to be related to reducing the influx of activated cells and consequent reduction of release and/or production of inflammatory mediators. The antioxidant effect observed for pioglitazone is may be due to in part by inhibiton of antioxidant enzymes and markers of lipid peroxidation.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:59:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 321218.pdf: 10314943 bytes, checksum: 212309873a422bc62579d82ce541a167 (MD5) Previous issue date: 2013 / A glicogênio sintase cinase 3 (GSK3) é uma cinase serina/treonina quefoi primeiramente isolada e purificada como uma enzima capaz defosforilar e inativar a enzima glicogênio sintase. Dentre as diversasfunções reguladas pela GSK3 a inflamação é uma das mais importantes.O presente estudo investigou o efeito do N-(4-metoxibenzil)-N0-(5-nitro-1,3-tiazol-2-il)uréia (AR-A014418), um inibidor específico daGSK3, na nocicepção aguda e crônica e os mecanismos neurobiológicosenvolvidos nesse efeito. O pré-tratamento dos animais com ARA014418(0,01-1 mg/kg, intraperitoneal, i.p., 30 minutos antes)diminuiu a nocicepção aguda induzida pelo ácido acético e ainflamatória (segunda fase) causada pela formalina, sem afetar anocicepção neurogênica (primeira fase) deste teste; e o AR-A014418(0,1-10 µg/sítio) co-injetado intraplantarmente (i.pl.) com a formalinatambém inibiu a segunda fase deste modelo. Além disso, o ARA014418(0,1-100 ng/sítio) injetado intratecalmente (i.t.) foi capaz dediminuir a nocicepção aguda nas duas fases do teste da formalina. A coadministraçãode AR-A014418 intratecalmente (10 ng/sítio) reduziu anocicepção induzida pelo glutamato, N-metil-D-aspartato (NMDA); (±)-1-aminociclopentano-trans-1,3-ácido dicarboxílico (trans-ACPD), fatorde necrose tumoral alfa (TNF-a) e interleucina-1 beta (IL-1ß). Em outrogrupo experimental, o AR-A014418 (0,3 mg/kg, i.p.) também diminuiua nocicepção crônica, caracterizada pela hiperalgesia ao estímulomecânico (filamento de von Frey) e térmico ao frio (placa fria) causadapela ligação parcial do nervo isquiático (PSNL), um modelo de dorneuropática. O efeito antinociceptivo do AR-A014418 foi!!significativamente reduzido pelo pré-tratamento dos animais com PCPA(100 mg/kg, i.p., um inibidor da síntese de serotonina) e AMPT (100mg/ kg, i.p., um inibidor da tirosina hidroxilase), mas não pelaadministração de L-arginina (600 mg/kg, i.p., um precursor do óxidonítrico). Além disso, o AR-A014418 (0,3 mg/kg, i.p.) preveniu oaumento dos níveis das citocinas TNF-a e IL-1ß na medula espinal decamundongos submetidos à PSNL. Finalmente, a administração de ARA014418(0,1-1 mg/kg, i.p.) não afetou a atividade locomotora dosanimais. Coletivamente, estes resultados fornecem evidências de que oAR-A014418, administrado pelas vias sistêmica, periférica e central;diminuiu a nocicepção aguda e crônica em camundongos. O mecanismoda ação antinociceptiva do AR-A014418 está relacionado, direta ouindiretamente, com a inibição dos receptores glutamatérgicosionotrópicos e metabotrópicos e/ou pela inibição de citocinas próinflamatórias(TNF-a e IL-1ß), bem como pela ativação de vias decontrole inibitório descendentes da dor (serotoninérgicas ecatecolaminérgicas). Assim, o presente trabalho demonstra que ainibição da GSK3 pode ser um novo e interessante alvo farmacológicono tratamento da dor aguda e crônica.<br> / Abstract : Glycogen synthase kinase 3 (GSK-3) is a serine/threonine kinase thatwas first isolated and purified as an enzyme capable of phosphorylatingand inactivating the enzyme glycogen synthase. Among the diversefunctions that are regulated by GSK3, inflammation has recentlyemerged as one of the most important. The present study investigatedthe antinociceptive effects of N-(4-methoxybenzyl)-N0 -(5-nitro-1,3-thiazol-2-yl)urea (AR-A014418), a specific inhibitor of GSK3 in acuteand chronic nociception and the neurobiological mechanisms involved.A 30-minute pretreatment with AR-A014418 (0.01-1 mg/kg,intraperitoneal, i.p.) inhibited the nociception induced by an i.p.injection of acetic acid and also decreased the late (inflammatory) phaseof formalin-induced licking, without affecting the responses of the first(neurogenic) phase. In a different set of experiments, AR-A014418 (0.1-10 µg/site) coinjected intraplantarly (i.pl.) with formalin inhibited thelate phase of formalin-induced nociception. Furthermore, AR-A014418intrathecal (i.t.) administration (0.1-100 ng/site) inhibited both phases offormalin-induced licking. In addition, AR-A014418 coinjection (i.t.)inhibited the nociception induced by glutamate, NMDA, (±)-1-aminocyclopentane-trans-1,3-dicarboxylic acid (trans-ACPD), tumornecrosis factor-alpha (TNF-a), and interleukin-1beta (IL-1ß). ARA014418also presented an antihyperalgesic effect on the partial ligationof the sciatic nerve (PSNL), a neuropathic pain model. AR-A014418administered i.p. (0.3 mg/kg) inhibited mechanical (von Frey filament)and cold hyperalgesia (cold plate) induced by PSNL. Pre-administrationof PCPA (100 mg/kg, i.p., inhibitor of serotonin synthesis) and AMPT!!(100 mg/ kg, i.p., inhibitor of tyrosine hydroxylase), but not L-arginine(600 mg/kg, i.p., a nitric oxide precursor), significantly reduced themechanical anti-hyperalgesia elicited by AR-A014418 (0.3 mg/kg, i.p.).Furthermore, the administration of AR-A014418 (0,3 mg/kg)significantly prevented the increase of TNF-a and IL-1ß levels. Finally,intraperitoneal administration of AR-A014418 (0.1-1 mg/kg, i.p.) didnot affect locomotor activity in the open-field test. Collectively, theseresults provide convincing evidence that AR-A014418, given byperipheral, systemic, and central routes, produces antinociception inacute and chronic pain models. The AR-A014418-dependentantinociceptive effects were induced by modulation of the glutamatergicsystem through metabotropic and ionotropic receptors and the inhibitionof the proinflammatory cytokines (TNF-a and IL-1ß), as well asincreases in serotonergic and catecholaminergic pathways. The presentstudy suggests that the inhibition of GSK3 may be a novelpharmacological target for the treatment of acute and chronic pain.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:46:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341078.pdf: 2463228 bytes, checksum: 1e4341868ecc0794afd3283d35f6268e (MD5) Previous issue date: 2016 / Introdução: O gênero Calea pertence à família Asteraceae e contém cerca de 125 espécies, distribuídas mundialmente em áreas tropicais e subtropicais, sendo que o maior número dessas espécies é registrado no Brasil. Espécies do gênero Calea são popularmente utilizadas para o tratamento de reumatismo, doenças respiratórias e, problemas digestivos. A Calea pinnatifida (C. pinnatifida), popularmente conhecida como ?aruca? e ?cipó-cruz?, é uma planta perene e subarbustiva encontrada principalmente nos estados do sul e sudeste do Brasil, utilizada na medicina popular para o tratamento de dores estomacais, giardíase e amebíase. Embora já existam trabalhos que demonstrem a atividade antiproliferatica e leishmanicida da C. pinnatifida, ainda não existem estudos farmacológicos descritos que tenham avaliado sua atividade anti-inflamatória. Objetivos: Investigar a atividade anti-inflamatória do extrato bruto, frações e compostos isolados das folhas da C. pinnatifida, utilizando um modelo murino de pleurisia induzida pela carragenina. Metodologia: As folhas da C. pinnatifida foram submetidas a um processo de maceração com etanol 92%, para obtenção do extrato bruto etanólico (EB). O EB foi submetido a uma partição líquido/líquido sob agitação manual de forma exaustiva e sucessiva, utilizando os solventes: hexano, clorofórmio e acetato de etila, respectivamente, para obter as frações hexano (Hex), diclorometano (DCM), e acetato de etila (AcOEt), bem como a fração aquosa remanescente, pelo qual foi obtido a fração metanólica (MeOH), a partir de uma cromatografia em coluna, utilizando da resina Amberlite XAD-4 como fase estacionária e metanol como fase móvel. Os compostos foram isolados a partir da fração acetato por métodos cromatográficos e identificados por meio de dados espectroscópicos de infra-vermelho (IV) e ressonância magnética nuclear de hidrogênio e carbono treze. A pleurisia foi induzida segundo metodologia descrita por SALEH et al., 1996 e os parâmetros inflamatórios como: migração de leucócitos, exsudação, atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO) e adenosina-desaminase (ADA), concentrações dos metabólitos do óxido nítrico (NOx) e das citocinas pró-inflamatórias, fator de necrose tumoral alpha (TNF-a), interleucina- 1 beta (IL-1ß) e interleucina- 17A (IL-17A), foram avaliados 4 h após a indução da inflamação. Além disso, também avaliou-se a capacidade dos compostos isolados, ácido 3,5-di-O-E-cafeoil quínico (3,5-diACQ) e ácido 4,5-di-O-E-cafeoil quínico (4,5-diACQ), em inibir a fosforilação da subunidade p65 do NF-?B e p38 MAPK. Para isso, diferentes grupos deanimais foram tratados com EB (25-100 mg/kg), Hex (5-25 mg/kg), DCM (5-25 mg/kg), MeOH (5-25 mg/kg), AcOEt (2,5-25 mg/kg), 3,5-diACQ (1-5 mg/kg) ou 4,5-diACQ (1-5 mg/kg) administrados por via intraperitoneal (i.p.) 0,5 h antes da carragenina (1%) administrada por via intrapleural (i.pl.). Para avaliar a exsudação, os animais foram tratados previamente com solução de Azul de Evans (25 mg/kg) por via intra-venosa (i.v.), 10 min antes da administração de EB, frações e compostos isolados da C. pinnatifida. Ensaios colorimétricos foram utilizados para analisar a atividade das enzimas MPO e ADA, bem como NOx. Testes imunoenzimaticos (ELISA) foram realizados, para determinar as concentrações das citocinas TNF-a, IL-1ß e IL-17A e também para avaliar a fosforilação de p65 (NF-?B) e p38 MAPK. Diferenças estatísticas entre os grupos foram determinados utilizando análise de variância (ANOVA), complementados pelo teste post-hoc de Newman-Keuls, valores de p < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: EB (50-100 mg/kg), Hex (10-25 mg/kg), MeOH (10-25 mg/kg), AcOEt (5-25 mg/kg), 3,5-diACQ (2,5-5 mg/kg) e 4,5-diACQ (5 mg/kg) inibiram: leucócitos, neutrófilos e exsudação (p < 0,05). EB (50 mg/kg), Hex (10 mg/kg), MeOH (10 mg/kg), AcOEt (5 mg/kg), 3,5-diACQ (2,5 mg/kg) e 4,5-diACQ (5 mg/kg) inibiram as atividades das enzimas MPO e ADA, as concentrações de NOx e as citocinas IL-1ß e IL-17A (p < 0,05). EB, AcOEt, 3,5-diACQ e 4,5-diACQ, nas doses citadas acima, diminuiram as concentrações de TNF-a (p < 0,05). Os compostos 3,5-diACQ e 4,5-diACQ, também inibiram a fosforilação da p65 e p38 (p < 0,05). Conclusão: Este estudo demonstrou que a C. pinnatifida possui importante atividade anti-inflamatória, inibindo a migração de leucócitos do tipo neutrófilos, bem como a diminuição da exsudação. Esse efeito provavelmente foi devido a diminuição da concentração de mediadores pró-inflamatórios (TNF-a, IL-1ß e IL-17A e NOx) no lavado pleural e esses efeitos parecem estar relacionados em parte, pela capacidade dos compostos isolados em inibir vias intracelulares importantes envolvidas no processo inflamatório, como o NF-?B e p38 MAPK.<br> / Abstract : Introduction: Calea genus belongs to the Asteraceae family and contains about 125 species, distributed worldwide in tropical and subtropical areas, with the largest number of these species is registered in Brazil. Calea species of the genus are commonly used to treat rheumatism, respiratory diseases, and digestive problems. The Calea pinnatifida (C. pinnatifida), popularly known as "aruca" and "cipó-cruz", is a perennial and subshrub plant found mainly in the southern and southeastern Brazil states, used in folk medicine to treat stomach aches, giardiasis and amebiasis. Although there are studies that demonstrate the antiproliferative and leishmanicidal activities of C. pinnatifida, there are no pharmacological studies to describe its anti-inflammatory activity. Objectives: To evaluate the anti-inflammatory activity of crude extract, fractions and isolated compounds from C. pinnatifida leaves using a murine model of pleurisy induced by carrageenan. Methodology: C. pinnatifida leaves were subjected to a maceration process with ethanol 92% to obtain a crude hydroalcoholic extract (CE). CE was subjected to a liquid/liquid partition under manual exhaustive and successively stirring using hexane, chloroform and ethyl acetate eluents, respectively, to obtain the hexane fractions (Hex), dichloromethane (DCM) and ethyl acetate (EtOAc) as well as the remaining aqueous fraction from which was obtained the methanolic fraction (MeOH), from the use of XAD-4 resin. The compounds were isolated from the EtOAc fraction by chromatographic methods and identified by spectroscopic data of infrared (IR) and nuclear magnetic resonance of hydrogen and carbon thirteen. Pleurisy was induced according to the methodology described by Saleh et al, 1996 and inflammatory parameters such as: Leukocyte migration, exudation, activity of myeloperoxidase (MPO) and adenosine-deaminase (ADA), concentrations of nitric oxide metabolites (NOx) and pro-inflammatory cytokines, tumor necrosis factor-alpha (TNF-a), interleukin-1 beta (IL-1ß) and interleukin-17A (IL-17A) were evaluated 4 hours after inflammation induction. In addition, we also evaluated the ability of the isolated compounds, 3,5-di-O-E-caffeoylquinic acid (3,5-diCQA) and 4,5-di-O-E-caffeoylquinic (4,5-diCQA) acid to inhibit the phosphorylation of the NF-?B p65 subunit and p38 MAPK. For this, different groups of animals were treated with CE (25-100 mg/kg) Hex (5-25 mg/kg), DCM (5-25 mg/kg), MeOH (5-25 mg/kg), EtOAc (2.5-25 mg/kg), 3,5-diCQA (1-5 mg/kg) and 4,5-diCQA (1-5 mg/kg) administered by intraperitoneally route (i.p.) 0.5 h before carrageenan (1%) administered by intrapleural route (i.pl.). To evaluate the exudation, the animals were pretreated with Evans blue solution (25 mg/kg) administred by intravenous (i.v.) route. Colorimetric assays were used to analyze the MPO and ADA activities, as well as NOx and immunoenzymatic assays (ELISA) to determine the TNF-a, IL-1ß and IL-17A concentrations and also to evaluate the phosphorylation of p65 (NF-?B) and p38 MAPK. The significant differences between groups were determined using analysis of variance (ANOVA) followed by Newman?Keuls post hoc test and the values of p < 0.05 were considered significant. Results: CE (50-100 mg/kg), Hex (10-25 mg/kg), MeOH (10-25 mg/kg), EtOAc (5-25 mg/kg), 3,5-diCQA (2,5- 5 mg/kg) and 4,5-diCQA (5 mg/kg) inhibited: leukocytes, neutrophils, and exudation (p < 0.05). CE (50 mg/kg), Hex (10 mg/kg), MeOH (10 mg/kg), EtOAc (5 mg/kg), 3,5-diCQA (2.5 mg/kg) and 4,5-diCQA (5 mg/kg) inhibited the MPO and ADA activities, NOx, IL-1ß and IL-17A concentrations (p < 0.05). At the same dose, only CE, EtOAc, 3,5-diCQA and 4,5-diCQA were able to decrease TNF-a concentrations (p < 0.05). The compounds 3,5-diCQA and 4,5-diACQ also inhibited phosphorylation of p65 and p38 (p < 0.05). Conclusion: This study demonstrated that C. pinnatifida has an important anti-inflammatory activity by inhibiting leukocyte migration, neutrophils and decreased exudation. This effect may be occurred by decrease of the concentration of pro-inflammatory mediators (NOx, TNF-a, IL-1ß and IL-17A) in pleural leakage and these effects appear to be related in part to the ability of the isolated compounds to inhibit important cellular pathways involved in inflammatory process, such NF-?B and p38 MAPK.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-10-04T04:01:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339609.pdf: 1783603 bytes, checksum: 4416040eddb1fc6194217905bf5f3584 (MD5) Previous issue date: 2016 / Introdução: A ativação do sistema inflamatório está presente desde as fases iniciais da cirrose e está associada a níveis elevados de citocinas. Entretanto, ainda faltam dados sobre o significado prognóstico das citocinas circulantes no cirrose hepática. Buscamos investigar o significado prognóstico da IL-6, IL-10 e IL-17 em pacientes com cirrose estável e em indivíduos internados por descompensação aguda (DA) da cirrose. Métodos: Este estudo prospectivo incluiu duas coortes: (1) cirrose estável atendidos no ambulatório (n = 118), e (2) indivíduos internados por DA (n = 130). Trinta indivíduos saudáveis serviram como grupo de controle. Os critérios de acute-on-chronic liver failure (ACLF) foram aplicados de acordo com o Consórcio EASL-CLIF. Resultados: Níveis de IL-6 e IL-10 se mostraram mais elevados em ambos os grupos de pacientes com cirrose, em comparação com o grupo controle, e também em doentes com DA em relação à cirrose estável (P <0,05). Na cirrose estável, durante um período de acompanhamento médio de 17 meses, um evento (hospitalização, morte ou transplante hepático) ocorreu em 26 pacientes e foi associado com maior nível de IL-6 (3,56 pg / mL vs. 2,13 pg / mL, P = 0,013) e IL-10 (0,54 pg / ml vs. 0,22 pg / mL, p = 0,021), mas não de IL-17. Na coorte de pacientes hospitalizados, 39 pacientes faleceram após 90 dias de seguimento. A análise de regressão logística mostrou que a morte na coorte de DA foi independentemente associada com ascite (OR 6,286, 95% CI 1.826 - 21.635; P = 0,004), MELD (OR 1,300, 95% CI 1,175-1,439; P <0,001) e IL-6 (OR 1,002, IC de 95% 1.000 - 1,004, P = 0,029). A AUROC de IL-6 para predizer a mortalidade em 90 dias foi de 0,779 ± 0,046 e a probabilidade de sobrevida na Kaplan-Meier foi de 90,0% para o IL-6 < 21 pg / mL e 46,7% para o IL-6 = 21 pg / ml (P < 0,001). Os níveis de citocinas foram avaliados na predição de infecção bacteriana. A análise de regressão mostrou que a infecção bacteriana diagnosticada durante as primeiras 48 horas após a admissão estava associada com IL-6, proteína C reativa (PCR) e ascite. IL-6 exibiu maior AUROC do que a PCR para prever a infecção bacteriana (0,831 ± 0,043 0,763 ± 0,048 vs, respectivamente). Níveis mais elevados de IL-6 foram observados em pacientes com ACLF mesmo na ausência de infecção bacteriana, enquanto que a IL-10 foi mais elevada apenas em indivíduos com infecção relacionada a ACLF. Os níveis de citocinas foram reavaliados no terceiro dia de internação em 74 indivíduos. Não houve diferenças entre os níveis da admissão e do terceiro dia para a IL-6. Níveis mais baixos de IL-10 foram observados no terceiro dia, independentemente da presença de ACLF ou morte durante o seguimento. No entanto, os níveis de IL-17 cairam significativamente apenas naqueles que morreram durante o acompanhamento. Conclusão: Níveis circulantes de IL-6, IL-10 e IL-17 são de valor prognóstico em pacientes com cirrose.<br> / Abstract : Introduction: Activation of inflammatory system is present from the early stages of cirrhosis and it is associated with elevated levels of cytokines. However, data about the prognostic significance of circulating cytokines in liver cirrhosis is still lacking. We sought to investigate the prognostic significance of IL-6, IL-10 and IL-17 in patients with stable cirrhosis and in subjects admitted for acute decompensation (AD) of cirrhosis. Methods: This prospective study included two cohorts: (1) stable cirrhosis attended in the Outpatient Clinic (n = 118), and (2) subjects hospitalized for AD (n = 130). Thirty healthy subjects served as control group. The acute-on-chronic liver failure (ACLF) criteria were applied according to the EASL-CLIF Consortium. Results: IL-6 and IL-10 levels were higher in both groups of patients with cirrhosis as compared to control group and also in patients with AD in relation to stable cirrhosis (P < 0.05). In stable cirrhosis, during a median follow-up of 17 months, an event (hospitalization, death or liver transplantation) occurred in 26 patients and was associated with higher IL-6 (3.56 pg/mL vs. 2.13 pg/mL, P = 0.013) and IL-10 (0.54 pg/mL vs. 0.22 pg/mL, P = 0.021), but not IL-17 levels. In the hospitalized cohort, 39 patients died after 90 days of follow-up. Logistic regression analysis showed that death in AD cohort was independently associated with ascites (OR 6.286, 95% CI 1.826 ? 21.635; P = 0.004), MELD (OR 1.300, 95% CI 1.175 ? 1.439; P < 0.001) e IL-6 (OR 1.002, 95% CI 1.000 ? 1.004, P = 0.029). The AUROC of IL-6 to predict 90-day mortality was 0.779 ± 0.046 and the Kaplan?Meier survival probability was 90.0% for IL-6 < 21 pg/mL and 46.7% for IL-6 = 21 pg/mL (P < 0.001). Cytokine levels were evaluated in the prediction of bacterial infection. Regression analysis showed that bacterial infection diagnosed during the first 48 hours after admission was associated with IL-6, CRP and ascites. IL-6 exhibited higher AUROC than CRP for predicting bacterial infection (0.831 ± 0.043 vs. 0.763 ± 0.048, respectively). Higher IL-6 levels were observed in ACLF patients even in the absence of bacterial infection whereas IL-10 was higher only in subjects with infection-related ACLF. Cytokines levels were reassessed at the third day of hospitalization in 74 subjects. No differences between admission and third-day levels were noted for IL-6. Lower IL-10 levels were observed at third day regardless of the presence of ACLF or death during follow-up. However, IL-17 levels dropped significantly only in those who died during follow-up. Conclusion: Circulating IL-6, IL-10 and IL-17 are of prognostic value in patients with cirrhosis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina , Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas. / Made available in DSpace on 2012-10-20T18:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Objetivo: Este estudo comparou os resultados de marcadores inflamatórios como colesterol total (CT), lipoproteínas de alta (HDL-C) e baixa (LDL-C) densidades, triglicerídeos, proteína-C reativa ultra sensível (PCR-US; mg/dL), fator de necrose tumoral (TNF-a; pg/mL), receptor solúvel da interleucina-2 (sIL-2R; pmol/mL) e metabólitos do óxido nítrico (NOX; µmol/L) em dois grupos (diabéticos tipo 2-DM2 e controle-C).

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-15. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:05Z : No. of bitstreams: 1 000851662_20160515.pdf: 427931 bytes, checksum: 4ef8d142c5c5234191158ab7c2efea52 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-05-16T14:18:42Z: 000851662_20160515.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-16T14:19:23Z : No. of bitstreams: 1 000851662.pdf: 1696866 bytes, checksum: d81719395199b25212968ab82e23a88e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A fagocitose de células apoptóticas é um processo dinâmico importante para a homeostase dos tecidos após injúria. Os macrófagos além de atuarem na remoção de células apoptóticas, também colaboram na defesa contra microrganismos. Existem ao menos duas populações de macrófagos classificadas como macrófagos M1 (pró-inflamatórios) e macrófagos M2 (anti-inflamatórios). Estes leucócitos diferem quanto ao fenótipo e funções efetoras dependendo, primordialmente, do microambiente e dos microrganismos com que interagem no tecido. Em uma situação de injúria pulmonar estéril (inalação de agentes tóxicos), há acúmulo de células apoptóticas sem a presença de agente microbiano. Por outro lado, durante uma infecção pulmonar bacteriana, ocorre intensa migração de células para o local da infecção na tentativa de conter a proliferação bacteriana, resultando em intenso acúmulo de células apoptóticas infectadas neste tecido. Portanto, nesse trabalho foi avaliado, in vitro e in vivo, o efeito da fagocitose de células apoptóticas infectadas (AC-Sp) ou estéreis (AC) na polarização de macrófagos M1/M2, bem como suas funções efetoras, e o efeito da PGE2 nesse contexto de eferocitose. Macrófagos M0 co-cultivados com AC ou AC-Sp apresentam um fenótipo intermediário entre M1 e M2, com secreção de altos níveis de IL-6, TNF-α, PGE2, TGF-β e NO e a expressão de genes relacionados ao perfil M1, iNOS, e ao perfil M2, Arginase 1. Além disso, macrófagos M0 cultivados com AC ou AC-Sp, apresentam supressão da função microbicida quando desafiados com S. pneumoniae. A presença de PGE2 dirige a polarização de macrófagos M0 a um perfil M2 e a presença de inibidores de COX promove a reversão do fenótipo de polarização destes macrófagos. Os resultados in vivo demonstram que a instilação de AC ou AC-Sp promove distintos microambientes no pulmão destes animais, que influenciam na resolução da infecção..... / The phagocytosis of apoptotic cells is dynamic and crucial for homeostasis after injury. Macrophages act on the clearance of apoptotic cells and collaborate with defense against microorganisms. There are at least two distinct macrophage populations classified as M1 macrophages (pro-inflammatory) and M2 macrophages (anti-inflammatory). Both cells differ on the state of polarization and effectors function depending primarily on the microenvironment and microorganisms that interact into the tissue. In a situation of sterile lung injury (inhalation of toxic agents), there are accumulation of apoptotic cells without the presence of pathogen. On the other hand, during a bacterial pulmonary infection there is intense cell migration to the infection site in an attempt to impair bacterial growth, resulting in a large accumulation of infected-apoptotic cells in the tissue. Therefore, this study has evaluated in vitro and in vivo, the effect of the phagocytosis of infected-apoptotic cells (AC-Sp) or sterile cells (AC) on the polarization of M1/M2 macrophages, as well as in their effector functions and the effect of PGE2 in the context of efferocytosis. M0 macrophages co-cultured with AC or AC-Sp show an intermediate phenotype between M1 and M2 with high secretion levels of IL-6, TNF-α, PGE2, NO and TGF-β, and gene expression profile related to M1, iNOS, and M2, arginase 1. Furthermore, M0 macrophages cultured with AC or AC-Sp show strong suppression of the macrophage microbicidal function when challenged with S. pneumonia. The presence of PGE2 drives the polarization of M0 macrophages to a M2 profile, and in the presence of COX inhibitors, it reverses the polarization of this macrophage phenotype. The in vivo results demonstrate that the instillation of AC or AC-Sp promotes distinct microenvironments in the lungs of these animals, which influence the resolution of the infection. All these results suggest that the presence of AC or AC-Sp promotes, ...

Made available in DSpace on 2016-04-01T17:55:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-01. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:01:07Z : No. of bitstreams: 1 000860846.pdf: 837516 bytes, checksum: 02cdd507d97224a5f320a426addd6cc9 (MD5) / Hamamelis virginiana L. é uma planta nativa dos Estados Unidos da América que foi inserida no Brasil por conta de suas vastas atividades biológicas, como ação antimicrobiana e anti-inflamatória. As pesquisas com extratos desse vegetal são vastas, embora não haja estudos com extrato glicólico da mesma. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana e anti-inflamatória do extrato glicólico de Hamamelis virginiana L. sobre cepas padrão de leveduras do gênero Candida (Candida albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei e C. tropicalis), espécies de bactérias Gram-positivas (Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans) e Gram-negativas (Acinetobacter baumanii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae), nas fases planctônica e biofilme; além de avaliar a citotoxicidade e atividade anti-inflamatória. A atividade antimicrobiana foi realizada por teste de microdiluição em caldo para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Microbicida Mínima (CMM), sendo os resultados utilizados como parâmetro para análise em biofilmes monotípicos. A atividade citotóxica foi analisada pelo teste MTT e quantificação da produção das citocinas interleucina-1β (IL-1β) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) por ELISA, sendo a avaliação da atividade anti-inflamatória realizada por meio de exposição da cultura de macrófagos de camundongo (RAW 264.7) a lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli seguido por tratamento com o extrato de H. virginiana L. Os resultados que apresentaram distribuição normal foram analisados por ANOVA e teste Tukey (p≤ 0,05); já os sem distribuição normal foram analisados por Kruskal-Wallis e pós teste Dunns. Os resultados obtidos revelam que o extrato glicólico de Hamamelis virginiana L. proporcionou atividade antimicrobiana sobre os micro-organismos testados no presente estudo e o teste de citoxicidade.... / Hamamelis virginiana L. is a North American plant that was insert in Brasil because their biological activities, like antimicrobial and anti-inflamatory activities. Large researchs are development with H. virginiana L. extracts, although there are no studies with glycolic extract from it. The objective of this work was to evaluate the antimicrobial and anti-inflammatory activity of glycolic extract of Hamamelis virginiana L. over standard strains of genus Candida yeast (C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei e C. tropicalis), species of Gram-positive bacteria (Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans) and Gram-negative (Acinetobacter baumanii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae), in plankton communities and biofilm; besides the cytotoxicity and anti-inflammatory. The antimicrobial activity was performed by microdiluition test in broth for determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) e Minimum Microbicide Concentration (MMC), and the results used for antimicrobial analysis in biofilms monotypic. The cytotoxic activity was analyzed by the MTT test and quantification of production of the cytokines IL-β 1 and TNF-α by ELISA., being that the anti-inflamatory activity was performed with exposition of macrophages mouse culture to E. coli lipopolissacaride (LPS) and extract post-treatment. The results were analyzed by ANOVA and Tukey Test (p ≤ 0.05) if the results present normal distribuition; and Kruskal Wallis and post-test Dunn if the results don't presente normal distribuition (p ≤ 0.05). Results shows that the H. virginiana L. glycolic extract have antimicrobial activity about test micro-organisms and the cytotoxicity test shows high cellular viability or equal the control, except for the 100 mg/mL for 24 h contact time. Cytokines weren't produced by macrophages. Nitric oxide was produced by cells in a con...