Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-21T20:23:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-23T18:52:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-23T18:56:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-23T18:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Copaíba ( Copaifera L. ) is one of the best known and Amazonian plants used by traditional populations in natural medicine . The oleoresin of copaiba is a source of terpene compounds. The previous fractionation of terpene acids contained copaiba oil for the isolation of metabolites of interest is a useful method in dispatch processes phytochemicals later. The use of ion exchange chromatography is an alternative that minimizes the inconvenience of the formation of emulsions difficult separation. This paper proposes the use of methodology by ion exchange chromatography silica treated with aqueous KOH in order to re-isolate constituent terpenoids acids present in oleoresin gender Copaifera L quantity that allows making various biological assays. Aspects of the anti-inflammatory activity and antitumor activity via biological assays, enzymatic assays being developed tests (inhibition of tyrosinase and lipoxygenase) of cytokine and cytotoxicity in model cell culture in order to get a new bioactive compound that can be used in the preparation of a phytochemical or phyto, such as bleaching or skin protectors. Were obtained and identified by spectroscopic and spectrometric methods six (06) diterpene acids: copalic, 3-hydroxy-copalic, 3-acetoxy-copalic, hardwíckiico, colávico-15-methyl ester and kaurenoic. The acid 3-hydroxy-copalic was capable of inhibiting tyrosinase enzyme with IC50=255.53 ±18.59 μM . The colávico-15-methyl ester showed a higher capacity to inhibit lipoxygenase enzyme (IC50=157.82 ±17.69 μM ) . The cytotoxic activity of the substances was evaluated in healthy cells by strains of human lymphocytes , fibroblasts and 3T3L1 murine J774 macrophages , which poisonous substances only at concentrations above 250 μM . Was also made of the APPRAISAL hemolytic potential of the compounds , and found that none had significant hemolytic activity at concentrations up to 50 mM . For lines AGP - 1 ( gastric cancer ) , HCT -116 (colon cancer) , MCF - 7 ( breast cancer) , NIHOVCAR ( ovarian cancer ) , SKAMELL - 4 ( melanoma ) and SF -295 ( human glioblastoma ) , tested at a single concentration of 20 μM , showed no significant changes in cell viability . The antiinflammatory activity of the compounds was evaluated as inhibition of NO production in murine J774 macrophage lineage stimulated with LPS where the copalic acid ( 98.48 ± 1.30 % ) and hardwickiico acid ( 92.73 ± 4.97% ) had activity equivalent to that of standard indomethacin ( 96.58 ± 1.7 % ) at concentration of 100 μM . Was investigated first the effect of compounds isolated diterpene acids on the production of TNF - α , IL -6 and IL-10. The compounds did not inhibit the production of TNF - α . The acid 3-acetoxy-copalic, kaurenoic , colávico-15-methyl ester and copalic inhibited the production of IL -6 23.84 ± 8.17 %, 11.21 ± 5.74 %, 17.34 ± 4 18 ± 1.86 % and 4.19 %, respectively, at a single concentration of 50 μM . The kaurenoic acid , 3- acetoxy - copalic copalic and induced the production of IL-10 at concentrations of 12.5 μM and 25 μM , but there was a decrease in this induction when tested at a concentration of 50 μM . The kolávic-15-methyl ester and hardwickiic acid no changes of IL -10. Thus, these diterpenes may be considered components responsible for contributing to combat inflammation, however it is necessary to develop a pharmaceutical probably topical, to conduct clinical trials aimed to demonstrate its application in the treatment of injuries acute and chronic skin. / A copaíba (Copaifera L.) é uma das plantas amazônicas mais conhecidas e utilizadas por populações tradicionais como medicamento natural. O óleo-resina de copaíba é fonte de compostos terpênicos. O fracionamento prévio dos ácidos terpênicos contidos óleo de copaíba para o isolamento de metabólitos de interesse é um método útil na celeridade dos processos fitoquímicos posteriores. A utilização da cromatografia de troca iônica é uma alternativa que minimiza o inconveniente da formação de emulsões de difícil separação. O presente trabalho propõe o uso de metodologia de cromatografia por troca iônica por sílica tratada com solução aquosa de KOH com o objetivo de re-isolar constituintes ácidos terpenoides presentes em óleo-resinas do gênero Copaifera L em quantidade que permita a realização de diversos ensaios biológicos. Foram abordados aspectos da atividade anti-inflamatória e antitumoral, por meio de ensaios biológicos, sendo desenvolvidos ensaios enzimáticos (testes de inibição da tirosinase e lipoxigenase), de dosagem de citocinas e de modelo de citotoxicidade em cultura de células, a fim de obter-se um novo composto bioativo que poderá ser utilizado na elaboração de um fitofármaco ou fitocosmético, tais como clareadores ou protetores de pele. Foram obtidos e identificados por métodos de espectroscopia e espectrometria, seis (06) ácidos diterpênicos: os ácidos copálico, 3-hidróxi-copálico, 3-acetóxi-copálico, hardwíckiico, colávico-15-metil éster e o caurenóico. Apenas o ácido 3-OH-copálico apresentou capacidade de inibição da enzima tirosinase com CI50 de 255,53 ±18,59 μM. O colávico-15-metil éster apresentou maior capacidade de inibição da enzima lipoxigenase (CI50 = 157,82 ±17,69 μM). As atividades citotoxicas das substâncias foram avaliadas em células saudáveis por linhagens de linfócitos humanos, fibroblastos murinos 3T3L1 e macrófagos J774, sendo as substancias tóxicas apenas em concentrações acima de 250 μM. Foi feita também a avalição do potencial hemolítico dos compostos, sendo verificado que nenhum apresentou atividade hemolítica significativa em concentrações de até 50 mM. Para as linhagens AGP-1 (câncer gástrico), HCT-116 (cólon retal), MCF-7 (câncer de mama), NIHOVCAR (câncer de ovário), SKAMELL-4 (melanona) e SF-295 (glioblastoma humano), testadas em concentração única de 20 μM, não apresentaram alterações significativas da viabilidade celular. A atividade antiinflamatoria dos compostos foi avaliada quanto à inibição da produção de NO na linhagem de macrófagos murinos J774 estimulados com LPS, onde o ácido copálico (98,48±1,30%) e o ácido hardwickiico (92,73±4,97%) tiveram atividade equivalente ao do padrão indometacina (96,58±1,7%), todos na concentração de 100 μM. Foi investigada pela primeira vez a influência de compostos ácidos diterpênicos isolados sobre a produção de citocina TNF-α, IL-6 e IL-10. Os compostos não inibiram a produção de TNF-α. Os ácidos 3-acetóxi-copálico, caurenóico, colávico-15-metil éster e o copálico inibiram a produção de IL-6 em 23,84±8,17%; 11,21±5,74%; 17,34±4,18% e 4,19±1,86%, respectivamente, na concentração única de 50 μM. Os ácidos caurenóico, 3-acetóxi-copálico e copálico induziram a produção de IL-10 em concentrações entre 12,5 μM e 25 μM, porém houve uma diminuição nessa indução quando testados na concentração de 50 μM. Para os ácidos colávico-15-metil éster e o hardwickiico não houve alterações da produção de IL-10. Com isso, esses diterpenos podem ser considerados componentes responsáveis por contribuir no combate ao processo inflamatório, no entanto faz-se necessário o desenvolvimento de uma formulação farmacêutica, provavelmente de uso tópico, para realização de ensaios clínicos visando comprovar a sua aplicação no tratamento de lesões de pele agudas e crônicas.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-12-12T18:02:42Z No. of bitstreams: 1 DenisePorfirioEmerenciano_TESE.pdf: 5967121 bytes, checksum: 6c15d6a4ccd96bffd068397c96e41a2b (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-12-13T18:22:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DenisePorfirioEmerenciano_TESE.pdf: 5967121 bytes, checksum: 6c15d6a4ccd96bffd068397c96e41a2b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T18:22:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DenisePorfirioEmerenciano_TESE.pdf: 5967121 bytes, checksum: 6c15d6a4ccd96bffd068397c96e41a2b (MD5) Previous issue date: 2017-04-19 / A efici?ncia de inibi??o ? corros?o de sistemas coloidais preparados a base de ?leos vegetais provenientes das esp?cies Azadirachta indica A. Juss (SMEOAI) e Copaifera L. (SMECO) foi avaliada via t?cnicas eletroqu?micas. Os formulados coloidais SMEOAI e SMECO foram analisados em diferentes concentra??es (5 ppm - 150 ppm) na corros?o do a?o AISI 1018, em meio salino (3,5% de solu??o NaCl). O extrato hidroalco?lico obtido das folhas de A. indica (EAI) veiculado no sistema SMEOAI, forneceu o formulado SMEOAI-EAI que foi avaliado como inibidor verde de corros?o. O sistema SMEOAI foi preparado com Tween? 80 (fase tensoativo), ?leo isolado de A. indica (OAI, fase ?leo) e de ?gua bidestilada (fase aquosa neutra). Este sistema veiculou, satisfatoriamente, o extrato EAI, resultando na microemuls?o SMEOAI-EAI. Similarmente, o sistema coloidal SMECO foi preparado com Tween? 80, ?leo de copaiba (CO) e ?gua bidestilada. Diagramas de fases tern?rios foram obtidos para SMEOAI e SMECO, tendo sido comprovada a forma??o de microemuls?o com regi?o caracter?stica de Winsor IV (WIV). As caracteriza??es destes sistemas foram realizadas pelas seguintes an?lises: determina??o do ?ndice de refra??o, comportamento reol?gico, tens?o superficial e di?metro de got?cula. O efeito de inibi??o dass microemuls?es obtidas a base de A. indica (SMEOAI e (SMEOAI-EAI) foram analisadas pelas t?cnicas de resist?ncia a polariza??o linear (LPR) e imped?ncia (EIS). A microemuls?o obtida a base de Copaifera (SMECO) foi avaliada via m?todo LPR. Comparativamente, SMECO (100 ppm) apresentou a menor efici?ncia de inibi??o ? corros?o (77,15%), seguido de SMEOAI (25 ppm) com inibi??o mediana (79,28%). A presen?a do extrato EAI no formulado SMEOAI, otimizou a efici?ncia de inibi??o, tendo sido comprovado que o sistema SMEOAI-EAI (50 ppm) apresentou a efici?ncia m?xima (91,79%) de inibi??o. Para estes inibidores, comprovou-se tamb?m, efeitos antioxidantes realizados em experimentos in vitro. De forma abrangente, o efeito antioxidante mais eficaz foi observado para a microemuls?o SMEOAI-EAI. Estes formulados coloidias foram avaliados pelas an?lises de capacidade antioxidante total: 18,74% (SMEOAI) e 36,14% (SMEOAI-EAI); poder redutor: 56,34% (SMEOAI) e 290,49% (SMEOAI-EAI); quela??o de ?ons ferro: 58,97% (SMEOAI) e 51,29% (SMEOAI-EAI); bem como sequestro dos radicais hidroxila: 60,16% (SMEOAI) e 87,33% (SMEOAI-EAI). As diverg?ncias percentuais observadas encontram-se relacionadas aos diferentes mecanismos antioxidativos de cada modelo, bem como pela presen?a do extrato EAI no formulado SMEOAI. O sistema a base de ?leo de copa?ba (SNECO), apresentou 47,89% de efeito antioxidante na an?lise do poder redutor e valor mais elevado (72,92%), para o sequestro de radicais hidroxila. Os inibidores verde de corros?o SMEOAI, SMEOAI-EAI e SMECO s?o biodegrad?veis e em fun??o do amplo uso destes vegetais, poder?o despertar o interesse do setor industrial com diferentes possibilidades de aplica??es, tais como: bioinseticida, purificador de ?guas residuais, agente efluente, agente de recupera??o de petr?leo, dentre outros. / The corrosion inhibition efficiency of colloidal systems based on vegetable oils such as Azadirachta indica A. Juss (SMEOAI) and Copaifera L. (SMECO) were evaluated by electrochemical techniques. The colloidal formulations SMEOAI and SMECO were analyzed in different concentrations (5 ppm - 150 ppm) in the corrosion of AISI 1018 steel in corrosive saline medium (3.5% NaCl solution). The hydroalcoholic extract obtained from the leaves of A. indica (EAI) was loaded in the colloidal system SMEOAI and then applied as a green corrosion inhibitor. The SMEOAI system was prepared by using Tween? 80 as surfactant, A. indica oil (OAI) as the oil phase and bidistilled water (as a neutral aqueous phase). The SMEOAI system satisfactorily loaded the EAI extract providing a derivative formulation so called SMEOAI-EAI. Similarly, the SMECO system was prepared by using Tween? 80, copaiba oil (CO), and bidistilled water. The formation of Winsor IV microemulsion region (WIV) on both systems (SMEOAI and SMECO) was evidenced through the construction of the ternary phase diagrams. The colloidal systems characterizations were performed by using the following analyzes: determination of the refractive index, rheological behavior, surface tension and droplet diameter. The coloidal formulations SMEOAI and SMEOAI-EAI were analyzed by using electrochemical techniques of linear polarization resistance (LPR) and impedance spectroscopy (EIS). Meanwhile, SMECO system was only analyzed by using the LPR method. Comparatively, the SMECO system (100 ppm) showed the lowest corrosion inhibition efficiency (77.15%), followed by SMEOAI (25 ppm) which showed median inhibition (79.28%) and the maximum inhibition efficiency (91.79%) was found to the SMEOAI-EAI (50 ppm) system, justified by the presence of the EAI extract in the loading system SMEOAI. For all of those green inhibitors systems the antioxidant effect was analyzed by using in vitro experiments and the best result was found to SMEOAI-EAI system. For that analysis it was applied: total antioxidant capacity, 18.74% (SMEOAI) and 36.14% (SMEOAI-EAI); reducing power, 56.34% (SMEOAI) and 290.49% (SMEOAI-EAI); iron ion chelation, 58.97% (SMEOAI) and 51.29% (SMEOAI-EAI); sequestration of hydroxyl radicals, 60.16% (SMEOAI) and 87.33% (SMEOAI-EAI). The observed percentage divergences were related to the different antioxidative mechanisms of each applied model, as well as the presence of the A. indica extract (EAI) in the SMEOAI-EAI system. The colloidal system prepared with copaiba oil (SNECO) showed the lower effect 47.89% in the analysis of reducing power. Meanwhile, for this system a higher result (72.92%) was evidenced in the sequestration of hydroxyl radicals analysis. The green corrosion inhibitors SMEOAI, SMEOAI-EAI and SMECO are biodegradable and due to the wide use of these plants, may arouse the interest of the industrial sector focusing some different possible applications such as: bio-insecticides, biological drug carriers, waste water purifiers, effluents, oil recovery agents, among other applications.