O objetivo do presente trabalho foi avaliar, em laboratório, a seletividade de produtos químicos, utilizados na citricultura, ao parasitóide de ovos Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner (Hymenoptera: Trichogrammatidae), inimigo natural com maior potencial de uso para o controle biológico de Gymnandrosoma aurantianum Lima (Lepidoptera: Tortricidae), uma das principais pragas dos citros. Os ensaios foram conduzidos seguindo as normas estabelecidas pela IOBC/WPRS para a avaliação dos efeitos nocivos de agroquímicos aos inimigos naturais de insetos. Utilizou-se água destilada como testemunha e foram selecionados cinco inseticidas (imidacloprid, deltametrina, Bacillus thuringiensis, óleo mineral e triflumuron), três acaricidas (abamectina, dicofol e espirodiclofeno) e quatro fungicidas (oxicloreto de cobre, piraclostrobina, difenoconazole e mancozebe) utilizados para o controle do bicho-furão-dos-citros e outras pragas e doenças de citros. Foram realizados ensaios relativos à exposição de adultos, forma mais suscetível do parasitóide, aos produtos; contato direto com formas imaturas (ovo-larva, pré-pupa e pupa) no interior dos ovos do hospedeiro natural G. aurantianum e do hospedeiro alternativo, Anagasta kuehniella e aceitação, pelas fêmeas do parasitóide, de ovos tratados com os produtos. Posteriormente, os produtos foram classificados, conforme a redução causada no parasitismo ou porcentagem de emergência em: 1, inócuo (<30%); 2, levemente nocivo (30 a 79%); 3, moderadamente nocivo (80 a 99%); 4, nocivo (>99%). Os inseticidas, acaricidas e fungicidas testados afetaram o parasitismo de T. atopovirilia. Não houve diferença no comportamento de T. atopovirilia fosse ele criado no hospedeiro natural ou no alternativo. Os produtos menos seletivos aos adultos do parasitóide foram deltametrina, abamectina, óleo mineral e imidacloprid. Em relação aos estágios imaturos do parasitóide, todos os produtos foram inócuos, exceto óleo mineral, que provocou redução de 100% na porcentagem de emergência; abamectina, triflumuron, imidacloprid foram levemente prejudiciais ao período ovo-larva. Abamectina e triflumuron tiveram maior efeito sobre a capacidade de parasitismo dos indivíduos emergidos quando o tratamento ocorreu durante a fase de pupa do parasitóide. Os produtos Bacillus thuringiensis, difenoconazole, oxicloreto de cobre, piraclostrobina, dicofol, espirodiclofeno, considerados inócuos ou levemente prejudiciais em todas as etapas dos ensaios em laboratório, podem ser utilizados em programas de Manejo Integrado de Pragas, em associação com o controle biológico, sem prejuízo para o parasitóide e contribuindo para a sustentabilidade da citricultura. / This study sought to evaluate in the laboratory the selectivity of chemical products used in citriculture to the egg parasitoid Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner (Hymenoptera: Trichogrammatidae), the natural enemy with the greatest potential for use in the biological control of Gymnandrosoma aurantianum Lima (Lepidoptera: Tortricidae), one of the main pests of citrus. Assays were conducted following the standards established by IOBC/WPRS to evaluate the harmful effects of agrochemicals to natural enemies of insects. Distilled water was used as a control and five insecticides (imidacloprid, deltamethrin, Bacillus thuringiensis, mineral oil, and triflumuron), three miticides (abamectin, dicofol, and spirodiclofen), and four fungicides (copper oxychloride, pyraclostrobin, difenoconazole, and mancozeb) used to control the citrus fruit borer and other pests and diseases of citrus were selected as treatments. Assays were conducted to study adult (the most susceptible stage of the parasitoid) exposure to the products; direct contact with immature forms (egg-larva, prepupa, and pupa) inside eggs of the natural host G. aurantianum and of the factitious host, Anagasta kuehniella; and acceptance, by females of the parasitoid, of eggs treated with the products. The products were then classified with regard to the reduction caused in parasitism or emergence percentage, into: 1, harmless (<30%); 2, slightly harmful (30 to 79%); 3, moderately harmful (80 to 99%); and 4, harmful (>99%). The insecticides, miticides, and fungicides tested affected T. atopovirilia parasitism. No differences were observed in T. atopovirilia behavior reared either on the natural or on the factitious host. The least selective products to parasitoid adults were deltamethrin, abamectin, mineral oil, and imidacloprid. As to the immature stages of the parasitoid, all products were harmless, except for mineral oil, which caused a 100% reduction in emergence percentage; abamectin, triflumuron, and imidacloprid were slightly harmful to the egg-larval period. Abamectin and triflumuron had the greatest effect on the parasitism capacity of individuals emerged when the treatment was applied during the parasitoid\'s pupal stage. The products Bacillus thuringiensis, difenoconazole, copper oxychloride, pyraclostrobin, dicofol, spirodiclofen, considered harmless or slightly harmful in all steps of the laboratory assays, can be used in Integrated Pest Management programs, in association with biological control, without being harmful to the parasitoid, and can contribute toward citriculture sustainability.

Submitted by LUCIANE KATARINE BECCHI null (luciane.becchi@hotmail.com) on 2017-10-04T11:36:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final LUCIANE.pdf: 1506577 bytes, checksum: 7466cc527263feec458778405126fce6 (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-04T17:35:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 becchi_lk_me_bot.pdf: 1506577 bytes, checksum: 7466cc527263feec458778405126fce6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-04T17:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 becchi_lk_me_bot.pdf: 1506577 bytes, checksum: 7466cc527263feec458778405126fce6 (MD5) Previous issue date: 2017-07-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O percevejo-bronzeado, Thaumastocoris peregrinus Carpintero & Dellapé, 2006 (Hemiptera: Thaumastocoridae), nativo da Austrália, está presente no Brasil desde 2008. De forma agregada, a distribuição e disseminação do percevejo-bronzeado foi rápida nos estados produtores de eucalipto, sendo relatado causando danos em plantios em 14 estados brasileiros. Em 2012, o parasitoide de ovos Cleruchoides noackae Lin & Huber, 2007 (Hymenoptera: Mymaridae) foi introduzido no país, para criação massal em laboratório e liberação à campo, para o controle biológico da população do percevejo-bronzeado. No entanto, ainda há poucos estudos de biologia e comportamento de C. noackae e da dinâmica entre o parasitoide e o hospedeiro. O objetivo foi determinar as exigências térmicas e duração do desenvolvimento de C. noackae, em ovos de T. peregrinus, em diferentes temperaturas; avaliar o parasitismo de ovos de T. peregrinus, por C. noackae em diferentes temperaturas, e estudar, em condições de laboratório, o comportamento de corte, acasalamento e oviposição e o parasitismo de fêmeas virgens e acasaladas de C. noackae em ovos de T. peregrinus. A temperatura, influenciou o tempo de desenvolvimento de C. noackae, notando-se redução do período ovo-adulto com o aumento da temperatura. Fêmeas e machos do parasitoide necessitam de temperaturas acima de 7,34°C e 7,59°C e acúmulo de 298,50 e 289,85 graus-dia, respectivamente, para completar o desenvolvimento. A viabilidade de emergência foi também, afetada pela temperatura, com 20% de parasitoides retidos (não emergidos) a 30ºC. A temperatura influenciou, o parasitismo de C. noackae em ovos de T. peregrinus. Temperaturas entre 21 e 27ºC foram as melhores para o parasitismo de C. noackae em ovos de T. peregrinus, com maior taxa de parasitismo nas primeiras 24 horas. No estudo comportamental de C. noackae, não foi observado comportamento de côrte e ocorre apenas uma cópula entre o casal. Fêmeas virgens e copuladas encontraram o primeiro hospedeiro em 15,21 e 17,14 minutos e os demais em 3,85 e 0,86 minutos, respectivamente. O tempo de forrageamento e inserção do ovipositor de fêmeas virgens e copuladas C. noackae em ovos de T. peregrinus, foi de 24 e 21 segundos e de 5,13 e 3,69 minutos, respectivamente. Fêmeas virgens e copuladas inseriram o ovipositor com maior frequência nas laterais e opérculo do ovo de T. peregrinus. Em uma hora, mais de 50% dos ovos de T. peregrinus oferecidos às fêmeas de C. noackae foram parasitados, indicando alto e rápido parasitismo. A razão sexual de 0,00 (fêmeas virgens) e 0,68 (fêmeas copuladas) confirmam a partenogênse arrenótoca de C. noackae. Fêmeas virgens e copuladas de C. noackae tem capacidade semelhante de parasitismo em laboratório, 89%, porém, a viabilidade de emergência do parasitoide é menor para fêmeas copuladas. Os resultados apresentados neste trabalho podem ser utilizados para o ajuste de técnicas de criação massal em laboratório deste parasitoide e manejo do percevejo-bronzeado. / The bronze bug Thaumastocoris peregrinus Carpintero & Dellapé, 2006 (Hemiptera: Thaumastocoridae) is an eucalypt sap-sucking, native of Australia, present in Brazil since 2008. Its distribution and dissemination, in aggregate form, was fast in the producing states of eucalyptus, being reported causing damages in plantations in 14 states Brazilians. In 2012, the parasitoid of eggs Cleruchoides noackae Lin & Huber, 2007 (Hymenoptera: Mymaridae) was introduced in the country for laboratory mass-rearing and release into the field for the biological control of the population of the bronze bug. However, there are few studies on a C. noackae biology and behavior and dynamics between the parasitoid and its host. The objective was to determine the thermal requirements and the duration of C. noackae development in eggs of T. peregrinus at different temperatures; to evaluate the parasitism of C. noackae in T. peregrinus eggs at different temperatures and to study, under laboratory conditions, the parasitoid courtship, mating and oviposition behaviour and the parasitism of virgin and mated females of C. noackae on T. peregrinus eggs. The temperature, influenced the development time of C. noackae, observing reduction of the biological cycle (egg-adult) with the increase of the temperature. Females and males of the parasitoid require temperatures above 7.34°C and 7.59°C and accumulation of 298.50 and 289.85 degrees day, respectively, for their development. The viability of emergence was affected by temperature with 20% of parasitoids retained (not emerged) at 30ºC. The temperature also influenced the parasitism of C. noackae in T. peregrinus eggs. Temperatures ranging from 21 to 27ºC were better for the parasitism of C. noackae in eggs of T. peregrinus with the highest rate of parasitism occurs within the first 24h. In the behavioral study of C. noackae, no courtship behavior was observed and only one copula between the couple occurred. Virgins and copulated females found the first host in 15.21 and 17.14 minutes and the next host in 3.85 and 0.86 minutes, respectively. The foraging time and duration of ovipositor insertion into T. peregrinus eggs was 24 and 21 seconds and 5.13 and 3.69 minutes, respectively. Virgins and copulated females of C. noackae inserted the ovipositor more frequently on the sides of the egg and operculum of the T. peregrinus egg. At one hour, more than 50% of T. peregrinus eggs offered to C. noackae females were parasitized, indicating high and rapid parasitism. The sex ratio of 0.00 (virgin females) and 0.68 (females copulated) confirming the arrhenotokous parthenogenesis of C. noackae. Female virgins and copulated C. noackae have similar parasitism capacity in the laboratory, 89%, however, the viability of emergence is lower for copulated females. The results presented in this work can be used for adjustment of techniques for parasitoid mass-rearing and bronze bug management.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-23T13:41:55Z No. of bitstreams: 1 Andre Malacarne Milanez.pdf: 1324658 bytes, checksum: adee6c780c08c674412b2e646d09b54f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-23T13:41:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andre Malacarne Milanez.pdf: 1324658 bytes, checksum: adee6c780c08c674412b2e646d09b54f (MD5) Previous issue date: 2009-02-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Trichoplusia ni (Hübner) (Lep.: Noctuidae) is a pest of great importance in horticulture, because of the use of wide range of hosts. The control of this pest is basically done with chemical insecticides. The use of egg parasitoids of the genus Trichogramma is an alternative for biological control of lepidopteran-pest. However, for the efficiency of these parasitoids are needed studies regarding selection of species and/or strains considering the environment and hosts. Thus, the performance of two strains of Trichogramma exiguum Pinto & Platner, six strains of Trichogramma pretiosum Riley, Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, Trichogramma acacioi Brun, Moraes & Soares, Trichogramma marandobai Brun, Moraes & Soares and Trichogramma demoraesi Nagaraja (Hym.: Trichogrammatidae) parasitizing eggs of T. ni were studied. The biological parameters evaluated were: percentage of parasitism and viability, sex ratio and number of individuals emerging per egg of the host. T. pretiosum strain (Tpsd) obtained the best performance in the parameters of the percentage of parasitism and viability. Based on these results, the influence of the host densities and age of the host was investigated for T.pretiosum strain (Tspd) at 20, 25 and 30 ºC. The proportion of eggs of T. ni offered, at the threetemperatures, influence number of eggs parasitized, percentage of parasitism and individuals emerged per egg. In addition, the best ratio of host egg per Trichogramma, regardless of temperature studied, was 15:1. Eggs up to 24 hours in any temperature allowed the best performance in the biological parameters measured, except in the number of individuals per egg. Thus, T. pretiosum exhibited better performance parasitizing eggs up to 24 hours of age and with host ratio of 15 eggs per female. / Trichoplusia ni (Hübner) (Lep.: Noctuidae) é uma praga de grande importância na olericultura, e seu controle é feito basicamente com produtos químicos. A utilização de parasitóides de ovos do gênero Trichogramma é uma alternativa no controle biológico de lepidópteros-praga. No entanto, para que haja eficiência no uso destes parasitóides são necessários à realização de estudos básicos visando à seleção de espécies e/ou linhagens em relação ao ambiente e seus hospedeiros. Desta forma, comparou-se o desempenho de duas linhagens de Trichogramma exiguum Pinto & Platner, seis linhagens de Trichogramma pretiosum Riley, Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, Trichogramma acacioi Brun, Moraes & Soares, Trichogramma marandobai Brun, Moraes & Soares e Trichogramma demoraesi Nagaraja (Hym.: Trichogrammatidae) parasitando ovos de T. ni. Os parâmetros biológicos avaliados foram: porcentagem de parasitismo e viabilidade; razão sexual e número de indivíduos por ovo. T. pretiosum linhagem (Tpsd) obteve o melhor desempenho nos parâmetros de porcentagem de parasitismo e viabilidade. Com base nesses resultados, estudos visando esclarecer a influência do número e idade dos ovos da praga sobre os parâmetros biológicos de T. pretiosum linhagem(Tspd) nas temperaturas de 20, 25 e 30 ºC foram realizados. A proporção de ovos de T. ni, nas três temperaturas, influênciou o número de ovos parasitados, a porcentagem de parasitismo e o número de individuo por ovos, sendo que a relação ideal de ovos da praga por Trichogramma, independente da temperatura estudada, é de 15:1. Ovos com até 24 horas, em qualquer temperatura, proporcionam os melhores desempenhos nos parâmetros biológicos avaliados. Desta forma, T. pretiosum tem melhor desempenho em ovos com até 24 horas de desenvolvimento embrionário e que esteje em proporção próximos a 15 ovos por fêmea.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar, em laboratório, a seletividade de produtos químicos, utilizados na citricultura, ao parasitóide de ovos Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner (Hymenoptera: Trichogrammatidae), inimigo natural com maior potencial de uso para o controle biológico de Gymnandrosoma aurantianum Lima (Lepidoptera: Tortricidae), uma das principais pragas dos citros. Os ensaios foram conduzidos seguindo as normas estabelecidas pela IOBC/WPRS para a avaliação dos efeitos nocivos de agroquímicos aos inimigos naturais de insetos. Utilizou-se água destilada como testemunha e foram selecionados cinco inseticidas (imidacloprid, deltametrina, Bacillus thuringiensis, óleo mineral e triflumuron), três acaricidas (abamectina, dicofol e espirodiclofeno) e quatro fungicidas (oxicloreto de cobre, piraclostrobina, difenoconazole e mancozebe) utilizados para o controle do bicho-furão-dos-citros e outras pragas e doenças de citros. Foram realizados ensaios relativos à exposição de adultos, forma mais suscetível do parasitóide, aos produtos; contato direto com formas imaturas (ovo-larva, pré-pupa e pupa) no interior dos ovos do hospedeiro natural G. aurantianum e do hospedeiro alternativo, Anagasta kuehniella e aceitação, pelas fêmeas do parasitóide, de ovos tratados com os produtos. Posteriormente, os produtos foram classificados, conforme a redução causada no parasitismo ou porcentagem de emergência em: 1, inócuo (<30%); 2, levemente nocivo (30 a 79%); 3, moderadamente nocivo (80 a 99%); 4, nocivo (>99%). Os inseticidas, acaricidas e fungicidas testados afetaram o parasitismo de T. atopovirilia. Não houve diferença no comportamento de T. atopovirilia fosse ele criado no hospedeiro natural ou no alternativo. Os produtos menos seletivos aos adultos do parasitóide foram deltametrina, abamectina, óleo mineral e imidacloprid. Em relação aos estágios imaturos do parasitóide, todos os produtos foram inócuos, exceto óleo mineral, que provocou redução de 100% na porcentagem de emergência; abamectina, triflumuron, imidacloprid foram levemente prejudiciais ao período ovo-larva. Abamectina e triflumuron tiveram maior efeito sobre a capacidade de parasitismo dos indivíduos emergidos quando o tratamento ocorreu durante a fase de pupa do parasitóide. Os produtos Bacillus thuringiensis, difenoconazole, oxicloreto de cobre, piraclostrobina, dicofol, espirodiclofeno, considerados inócuos ou levemente prejudiciais em todas as etapas dos ensaios em laboratório, podem ser utilizados em programas de Manejo Integrado de Pragas, em associação com o controle biológico, sem prejuízo para o parasitóide e contribuindo para a sustentabilidade da citricultura. / This study sought to evaluate in the laboratory the selectivity of chemical products used in citriculture to the egg parasitoid Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner (Hymenoptera: Trichogrammatidae), the natural enemy with the greatest potential for use in the biological control of Gymnandrosoma aurantianum Lima (Lepidoptera: Tortricidae), one of the main pests of citrus. Assays were conducted following the standards established by IOBC/WPRS to evaluate the harmful effects of agrochemicals to natural enemies of insects. Distilled water was used as a control and five insecticides (imidacloprid, deltamethrin, Bacillus thuringiensis, mineral oil, and triflumuron), three miticides (abamectin, dicofol, and spirodiclofen), and four fungicides (copper oxychloride, pyraclostrobin, difenoconazole, and mancozeb) used to control the citrus fruit borer and other pests and diseases of citrus were selected as treatments. Assays were conducted to study adult (the most susceptible stage of the parasitoid) exposure to the products; direct contact with immature forms (egg-larva, prepupa, and pupa) inside eggs of the natural host G. aurantianum and of the factitious host, Anagasta kuehniella; and acceptance, by females of the parasitoid, of eggs treated with the products. The products were then classified with regard to the reduction caused in parasitism or emergence percentage, into: 1, harmless (<30%); 2, slightly harmful (30 to 79%); 3, moderately harmful (80 to 99%); and 4, harmful (>99%). The insecticides, miticides, and fungicides tested affected T. atopovirilia parasitism. No differences were observed in T. atopovirilia behavior reared either on the natural or on the factitious host. The least selective products to parasitoid adults were deltamethrin, abamectin, mineral oil, and imidacloprid. As to the immature stages of the parasitoid, all products were harmless, except for mineral oil, which caused a 100% reduction in emergence percentage; abamectin, triflumuron, and imidacloprid were slightly harmful to the egg-larval period. Abamectin and triflumuron had the greatest effect on the parasitism capacity of individuals emerged when the treatment was applied during the parasitoid\'s pupal stage. The products Bacillus thuringiensis, difenoconazole, copper oxychloride, pyraclostrobin, dicofol, spirodiclofen, considered harmless or slightly harmful in all steps of the laboratory assays, can be used in Integrated Pest Management programs, in association with biological control, without being harmful to the parasitoid, and can contribute toward citriculture sustainability.

The African bollworm, Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae), is a polyphagous pest that attacks many crops in sub-Saharan Africa. The pest is currently managed through chemical control, and by planting Bt-transgenic cotton. Trichogrammatoidea lutea Girault (Hymenoptera: Trichogrammatidae) is an indigenous egg parasitoid of H. armigera in southern Africa. The study was undertaken to determine the potential of T. lutea as a biological control agent for augmentative releases as an alternative to chemical control, and to pave the way for the development of a mass-rearing method. The biology of T. lutea was examined in the laboratory on H. armigera, Chilo partellus (Swinhoe), and Cadra (formerly Ephestia) cautella (Walker) (Lepidoptera: Pyralidae). The objectives of the study were to determine (i) the exposure time of UV-irradiation required for killing the embryos of the hosts and the effect of UV-irradiated eggs on life history parameters of T. lutea, (ii) which host(s) and temperature(s) (18, 21, 24, 27, 30 and 35 °C) are suitable for mass-rearing of T. lutea, and (iii) the longevity and age-related reproductive biology of T. lutea on H. armigera. Findings of this study showed that 13 minutes of UV-irradiation were sufficient to kill embryos of all three host species. Life history parameters were not influenced by UV-irradiation but by host species. Parasitism, number of progeny per parasitized egg, proportion of females, and developmental time of T. lutea aried on different host species at temperatures ranging from 18 to 30 °C. Trichogrammatoidea lutea did not develop at 35 °C. Overall parasitism by T. lutea was higher on H. armigera and Cadra cautella compared to Chilo partellus. The number of progeny per parasitized egg was highest on H. armigera compared to Cadra cautella and Chilo partellus. The proportion of females was highest on Chilo partellus, intermediate on Cadra cautella, and lowest on H. armigera. For all species and temperatures tested, parasitism and number of progeny per parasitized egg by T. lutea was highest on H. armigera at 27 °C. The lower threshold for development of T. lutea on all hosts was approximately 12 °C. Female T. lutea parasitized eggs of H. armigera soon after eclosion, with the highest parasitism achieved on the day of eclosion. Though T. lutea parasitized eggs for up to 14 days, it may not be economically viable to keep them in cultures for more than three days since progeny became male biased three days after eclosion. The average longevity of female and male T. lutea was 9 and 6 days, respectively. The life table parameters of T. lutea, the net replacement rate (Ro), mean generation time (T), and instantaneous rate of population increase (rm) were 25.5, 9.79, and 0.33, respectively. The timing of inundative releases of T. lutea must be synchronised with the time that eggs of H. armigera are abundant in the field. The results of this study indicate that T. lutea is a good candidate for further testing for augmentative biological control of H. armigera in the field. If successful, T. lutea may provide opportunities for expanding tactics in the management of H. armigera in southern Africa. Copyright / Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2011. / Zoology and Entomology / unrestricted

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Made available in DSpace on 2015-04-17T14:55:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 1356123 bytes, checksum: 7115ed47a5956fbd95bdffd700b48424 (MD5) Previous issue date: 2012-11-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Trichogramma species are identified by the morphology of the male genitalia, making the identification difficult due to the small size of the individual (0.25 mm) and/or the presence of cryptic species. Therefore molecular biology constitutes a good alternative for the identification of Trichogramma species and is also used in the identification of Proteobacteria of the genus Wolbachia, known to induce parthenogenesis in Trichogramma species. The purpose of this thesis was to use molecular methods to identify Trichogramma species, verify the diversity of Trichogramma pretiosum populations in 11 cities in Brazil and its association with bacteria of the genus Wolbachia. The samples of Trichogramma pretiosum species and Trichogramma populations were submitted to extraction of genomic DNA for PCR using the forward primer ITS-2- 5 TGTGAACTGCAGGACACATG-3 and the reverse primer IT2-5 GTCTTGCCTGCTCTGCTCTGAG.-3`. The DNA products obtained from Trichogramma species and populations of T. pretiosum were purified and sequenced. To detect the presence of bacteria of the Wolbachia genus in T. pretiosum populations, the amplifications were done using wsp specific primers, with a final reaction volume of 25 μl. The size of PCR products was determined using a molecular weight marker 100 bp using a negative control without DNA, the remaining components and a positive control containing Wolbachia. It can be verified that it was possible to extract DNA from all the Trichogramma species with quantities and qualities sufficient for electrophoretic profiles with genomic DNA concentrations ranging from 15.3 to 50ng/μl. Using PCR, the fragments of the ITS2 region of ribosomal DNA were amplified and one can identify the species of Trichogramma with the sequencing by using the similarity search of the BLAST program in the GenBank database (NCBI - National Center for Biotechnology Information) and dendrogram analysis performed according to the genetic distance matrix, from which three groups were formed, the first by T. exigum, the second by T. pretiosum and the third by T. galloi. With the results of the query by similarity using the BLAST program in the GenBank database a maximum identification average of 92,2% was obtained regarding the species of Trichogramma pretiosum, confirming the correct sequencing. The size of the sequences ranged from 355 to 503 bp. The average G + C content (guanine + cytosine) was 53,2%. After aligning the 11 sequences of T. pretiosum, 391 sites were found conserved, reflecting 73% of the total of 536 sites found, confirming the similarity between samples, as well as confidence in the sequences obtained. The average found for this distance matrix was 0.30. According to the dendrogram obtained from the genetic distance matrix using the neighbor-joining method one can verify the presence of four groups, the first formed by the TPAES, TPPARS, TPRMT TPCVMT populations and the second by the TPSPMT population, the third group by the TPPPE, TPMVCE, TPPPB, TPPPMT, TPJSP populations, and the fourth by the TPPLMT population, being the most genetically distant population. The geographical distance did not affect the genetic similarity or dissimilarity between parasitoids having no significant difference between geographic distance and genetic similarity of the T. pretiosum samples in the locations collected. Of the T. pretiosum populations analyzed, the presence of viii endobacterias occurred in the population from the state of Espírito Santo, the first local record of the presence of this α proteobacteria for the species. / As espécies de Trichogramma são identificadas por meio da morfologia da genitália do macho, sendo dificultada pelo tamanho reduzido do indivíduo (0,25 mm) e/ou a presença de espécies crípticas. Por esta razão, a biologia molecular se constituí em uma boa alternativa para a identificação de espécies de Trichogramma, sendo também utilizada na identificação de proteobactéria do gênero Wolbachia, conhecida por induzir partenogênese em espécies de Trichogramma. O objetivo desta tese foi utilizar métodos moleculares para identificação de espécies de Trichogramma, verificar a diversidade de populações de Trichogramma pretiosum em 11 municípios no Brasil e sua associação com a bactéria do gênero Wolbachia. As amostras de espécies do gênero Trichogramma e de populações de Trichogramma pretiosum foram submetidas à extração de DNA genômico para a realização de PCR utilizando o primer direto ITS-2- 5 TGTGAACTGCAGGACACATG-3 e o reverso IT2-5 GTCTTGCCTGCTCTGCTCTGAG.-3`. Os produtos de DNA obtidos das espécies de Trichogramma e das populações de T. pretiosum foram purificados e submetidos ao seqüenciamento. Para detectar a presença de bactérias do gênero Wolbachia em populações de T. pretiosum, as amplificações foram realizadas com primers específicos wsp, com um volume final da reação de 25 μl. O tamanho dos produtos de PCR foi determinado utilizando um marcador de peso molecular de 100 pb, sendo utilizado um controle negativo sem DNA e o restante dos componentes e um controle positivo com a presença de Wolbachia. Pode-se verificar que foi possível extrair DNA de todas as espécies de Trichogramma estudadas com quantidades e qualidades suficientes para obter perfis eletroforéticos, com concentrações do DNA genômico variando entre 15,3 e 50 ng/μl. Por meio da técnica de PCR, os fragmentos da região ITS2 do DNA ribossomal foram amplificados, sendo possível identificar as espécies de Trichogramma pelo sequenciamento, sendo realizada a busca por similaridade utilizando o programa BLAST, no banco de dados do GenBank (NCBI National Center for Biotechnology Information) e feita a análise de dendrograma de acordo com a matriz de distância genética, onde foi obtido três grupos, o primeiro formado pela espécie T. exigum, o segundo pela espécie T. pretiosum e o terceiro pela espécie T. galloi. Com o resultado da busca por similaridade utilizando o programa BLAST, no banco de dados do GenBank, obteve-se uma média de 92,2% de máxima identificação referente à espécie de Trichogramma pretiosum, confirmando o correto sequenciamento. O tamanho das sequências variaram de 355 a 503 pb. A média do conteúdo G + C (Guanina + Citosina) foi de 53,2%. Após o alinhamento das 11 sequências de T. pretiosum, foram encontrados 391 sítios conservados, que refletem 73 % do total de 536 sítios encontrados, confirmando a semelhança entre as amostras, bem como a confiança nas sequências obtidas. A média encontrada para essa matriz de distância foi de 0,30. De acordo com o dendrograma obtido a partir da matriz de distância genética pelo método do vizinho próximo (Neighbor-Joining), pode-se verificar a presença de quatro grupos: o primeiro, formado pelas populações TPAES, TPPARS, TPRMT e TPCVMT; o segundo, pela população de TPSPMT; o terceiro grupo, pelas populações de TPPPE, TPMVCE, TPPPB, TPPPMT, TPJSP e o quarto pela população de TPPLMT, sendo a população mais distante geneticamente. A distância geográfica não afetou a similaridade ouvi dissimilaridade genética entre os parasitóides, não existindo, diferenças significativas entre distância geográfica e a similaridade genética das amostras de T. pretiosum nas localidades coletadas. Das populações de T.pretiosum analisadas, a presença da endobactérias ocorreu na população proveniente do Estado do Espírito Santo, sendo o primeiro registro local da presença dessa α proteobactéria para a espécie.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T15:25:09Z No. of bitstreams: 1 Hugo Bolsoni Zago.pdf: 898683 bytes, checksum: a6a8ab8ddd71419162e9faad7a47b971 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T15:25:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hugo Bolsoni Zago.pdf: 898683 bytes, checksum: a6a8ab8ddd71419162e9faad7a47b971 (MD5) Previous issue date: 2008-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The diamondback moth (DBM), Plutella xylostella (L.) is a key pest of cabbage in the Agreste area of Pernambuco state. Despite of being a key pest, the DBM is attacked by several natural enemies including the egg parasitoid, Trichogramma. In addition, formulated insecticides with different strains of Bacillus thuringiensis Berliner are widely used to control the larval stages. Thus, this research aimed to search for a local species or population of Trichogramma; to study its biological characteristics and parasitism on DBM eggs; to investigated the oviposition site preference of DBM and its parasitism by Trichogramma on cabbage plants at pre- and post-head formation in the field and; to investigate the susceptibility of 10 Brazilian populations of DBM relative to the commercial formulations of B. thuringiensis var. kurstaki (Dipel®WP) (Btk) and B. thuringiensis var. aizawai (Xentari®WG). Trichogramma survey was conducted in areas with organic-growing vegetables, Chã-Grande County, PE. The collected species wasTrichogramma pretiosum Riley. The biological characteristics and parasitism were similar for this population parasitizing DBM eggs and eggs of the laboratory standard host, Anagasta kuehniella (Zeller). In the field, the parasitism of DBM eggs by T. pretiosum was associated with the moth oviposition site preference and exhibited a positive relationship with egg availability; but, the eggparasitism rate was density independent across both plant ages. The oviposition of DBM on cabbage plants at pre-head formation and its parasitism was equally distributed across the plant leaves. At this plant age, the basal part of the leaf and the upper leaf surface were the preferred places for oviposition and parasitism. Plants at post-head formation stage had higher oviposition and parasitism on the central leaf wrapping the head and in the upper leaf surface. The susceptibility of DBM to the insecticides Btk and Bta resulted in significant levels of resistance. The resistance ratio was 180 and 999 times to the recommended rates of Bta and Btk, respectively. Furthermore, variation of larvae and adults regarding walking and oviposition behavior were observed among the populations using treated and untreated cabbage leaf discswith Bta and Btk. / traça-das-crucíferas, Plutella xylostella (L.) é praga-chave do repolho no Agreste de Pernambuco. Apesar da condição de praga-chave, ela possui vários inimigos naturais incluindo o parasitóide de ovos Trichogramma. Além de que seu controle é feito com inseticidas à base de Bacillus thuringiensis Berliner. Deste modo, esta pesquisa teve como objetivos realizar a coleta de uma população Trichogramma spp. associado a cultivo orgânico de brássicas no Agreste de Pernambuco; estudar a biologia e o parasitismo da espécie coletada, no hospedeiro P. xylostella, comparado ao hospedeiro de criação Anagasta kuehniella (Zeller) (Lep.: Pyralidae); investigar a distribuição da oviposição de P. xylostella e seu parasitismo por Trichogramma em repolho antes e após formação da cabeça e; investigar a susceptibilidade de populações de P. xylostella as formulações comerciais de B. thuringiensis var. kurstaki (Dipel® WP) (Btk) e B. thuringiensis var. aizawai (Xentari® WG) (Bta). Foram realizadas coletas de Trichogramma em cultivo orgânico nomunicípio de Chã-Grande, PE. A coleta resultou na espécie Trichogramma pretiosum Riley (Hym.: Trichogrammatidae). As características biológicas e o parasitismo desta população em ovos de P. xylostella e no hospedeiro alternativo, Anagasta kuehniella (Zeller), foram similares. O parasitismo de ovos de P. xylostella por T. pretiosum, em campo, foi associado ao local de maioroviposição da praga e mostrou-se positivamente correlacionado com a quantidade de ovos depositados pela praga em diferentes estruturas da planta, porém com taxas de parasitismo independentes da densidade. A oviposição de P. xylostella e seu parasitismo por T. pretiosum em plantas de repolho antes da formação da cabeça foram igualmente distribuídas entre as folhas. A parte basal e a epiderme superior das folhas foram às localidades preferidas para oviposição e parasitismo, respectivamente. Plantas após a formação de cabeça tiveram maior oviposição e parasitismo na folha central envolvendo a cabeça e na epiderme superior desta folha. Com relação à susceptibilidade de P. xylostella aos inseticidas Dipel e Xentari, foram constatados consideráveis níveis de resistência. A razão de resistência de até 180 e 999 vezes a concentração recomendada de Dipel e Xentari, bem como foram observadas variações no comportamento de caminhamento das larvas e preferência de oviposicão em discos foliares tratados e não tratadoscom Dipel e Xentari entre as populações estudadas. Assim, neste estudo foi identificado populações da traça-das-crucíferas com significativos níveis de resistência a formulações comercias de B. thuringiensis.

Elasmopalpus lignosellus (Zeller, 1848) (Lepidoptera: Pyralidae), ou broca-do-colo, é uma importante praga polífaga, poucas informações estão disponíveis sobre seu controle biológico. O objetivo desse trabalho foi estudar a biologia de E. lignosellus criada em dieta artificial em diferentes temperaturas, visando obter informações a respeito da praga para estratégias de manejo integrado e selecionar uma linhagem de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae), em laboratório, para possível utilização desse parasitoide em programas de controle biológico do elasmo em campo, visando à fase inicial (ovo) de desenvolvimento da praga. Foram desenvolvidas as seguintes etapas para atingir os objetivos propostos: 1. Efeito da temperatura no período de incubação e no período lagarta-adulto de E. lignosellus; 2. Tabela de vida de fertilidade de E. lignosellus; 3. Estudos comportamentais e de local de oviposição de E. lignosellus; 4. Seleção de linhagens de T. pretiosum, visando ao controle de E. lignosellus. Com base nos resultados obtidos na presente pesquisa, pode-se concluir: a faixa térmica de desenvolvimento de Elasmopalpus lignosellus (Zeller, 1848) situou-se entre 10°C e 37 e 38°C, suportado, portanto, altas temperaturas; as maiores viabilidades do período lagarta-adulto a 30 e 32°C confirmaram a adaptação do inseto às altas temperaturas; a 32°C, o inseto tem elevada taxa líquida de reprodução, ou seja, aumentou 18,30 vezes a cada geração; o período de oviposição de E. lignosellus se concentrou entre 20 e 22 horas, sempre na escotofase; a grande maioria dos ovos de E. lignosellus foi colocada de forma exposta, facilitando o parasitismo por parasitoides de ovos, no caso Trichogramma pretiosum Riley, 1879; a linhagem T. pretiosum selecionada para o controle de ovos de E. lignosellus é da região do cerrado, indicando a especificidade do parasitoide por determinadas condições de clima. / Elasmopalpus lignosellus (Zeller, 1848) (Lepidoptera: Pyralidae), or cornstalk borer, is an important polyphagous pest and there is little knowledge regarding its biological control. The aim of this research was to study the biology of E. lignosellus reared on artificial diet under different temperatures in order to gather information to (i) develop integrated management strategies and (ii) select strains of the egg parasitoid Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) for biological control programs. The following steps were performed to achieve the proposed goals: 1. Temperature effect on incubation period and E. lignosellus immature-adult period; 2. Table life of E. lignosellus fertility; 3. E. lignosellus behavior studies and oviposition preference; 4. T. pretiosum strain selection aiming E. lignosellus control. Based on the results, it\'s possible to conclude that: the ideal development temperature threshold of E. lignosellus is between 10°C and 37-38°C, therefore, it tolerates high temperatures; the higher immature-adult period viability at 30 and 32°C supports E. lignosellus\'adaptation to high temperatures; at 32ºC, E. lignosellus show elevated the net reproductive rate, since it increased 18.30 times for each genaration; E. lignosellus\' oviposition period was concentrated between 20 and 22 hours, always at the scotophase; most of E. lignosellus eggs was laid exposed, allowing parasitism by the egg parasitoidTrichogramma pretiosum; the selected T. pretiosum strain for E. lignosellus egg control is originated in the brazilian savannah, pointing out the parasitoid\'s specificity to certain climate conditions.

Plutella xylostella (L., 1758) (Lepidoptera: Plutellidae), também conhecida por traça-das-crucíferas, é uma praga importante de Brassicaceae, que pode ser encontrada em todos os continentes. A relação entre P. xylostella e as brassicáceas tem sido muito estudada uma vez que essa praga provoca grandes prejuízos em praticamente todas as regiões produtoras, no Brasil e no mundo. Também tem despertado grande interesse entre os pesquisadores o fato das brassicáceas utilizarem metabólicos secundários como defesa ao ataque de insetos generalistas, sendo que para especialistas, como P. xylostella, alguns desses metabólicos são incitantes de alimentação e oviposição. Na interação inseto-planta existem questões não compreendidas e que devem ser estudas, pois são diversas condições bióticas e abióticas que interagem nestes organismos, podendo promover alterações fisiológicas e nutricionais nas plantas, no desenvolvimento dos insetos e nas interações planta x herbívoro x parasitoide/predador. Assim, este trabalho objetivou estudar a influência de estresses hídricos em variedades de brássicas e seus reflexos nas plantas, no herbívoro especialista P. xylostella e no parasitoide Trichogramma pretiosum (Riley, 1879) (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Foram efetuadas análises da composição química em folhas e da emissão de voláteis em três variedades (couve - Brassica oleracea var. acephala; brócolis - B. oleracea var. italica e repolho - B. oleracea var. capitata), em diferentes níveis de água no solo (50%, 70% e 100% da capacidade de campo), procurando-se determinar plantas comprovadamente com estresse hídrico. Também foi estudada a influência daquelas condições hídridas em parâmetros biológicos de desenvolvimento, de reprodução e de comportamento de P. xylostella, além da influência dos estresses hídricos na atratividade/repelência de T. pretiosum, parasitoide de ovos de P. xylostella. Com as variedades desenvolvidas nas três condições hídricas foram determinados: (a) nas plantas/folhas: taxa de peroxidação lipídica (MDA), porcentagem de proteína bruta na matéria seca, fibra em detergente neutro, fibra em detergente ácido, hemicelulose, lipídeos, teor de cera, proteínas insolúveis em detergente neutro, proteínas insolúveis em detergente ácido, proteínas disponíveis, matéria mineral, carboidratos totais e a emissão de voláteis; (b) com P. xylostella: consumo foliar, período larval, viabilidade larval, período pupal, viabilidade pupal, peso de pupas, razão sexual, ovos por fêmea, viabilidade de ovos, longevidade de fêmeas, longevidade de machos e tabela de vida de fertilidade, em laboratório e casa de vegetação, além da preferência para oviposição em testes com e sem chance de escolha; e (c) com T. pretiosum: teste de olfatometria com plantas nas três condições hídricas. Os resultados obtidos permitem concluir que: o déficit hídrico provoca estresse em couve, brócolis e repolho e em maior intensidade nas plantas cultivadas com menor quantidade de água disponível no solo; quantitativamente, a composição química das plantas (couve, brócolis e repolho) é alterada em função do estresse hídrico, principalmente quanto à proteína bruta e disponível, hemicelulose, lipídeos, proteínas ligadas à fibra em detergente ácido e neutro, matéria mineral e carboidratos totais; os parâmetros de desenvolvimento de P. xylostella são alterados, tanto em laboratório como em casa de vegetação, com as lagartas alimentando-se das plantas cultivadas nas diferentes condições hídricas de solo, refletindo significativamente na capacidade reprodutiva e na sobrevivência dos insetos; o estresse hídrico altera a emissão de voláteis em plantas de couve, em brócolis e repolho; a preferência de P. xylostella para oviposição, em testes com chance e sem chance, é influenciada pelo estresse hídrico em couve, brócolis e repolho; os testes de olfatometria mostram que o estresse hídrico influencia na escolha de T. pretiosum para oviposição, mais expressivamente em plantas com maiores índices de estresse hídrico / Plutella xylostella (L., 1758) (Lepidoptera: Plutellidae), also known as cruciferous moth, is an important pest of Brassicaceae, which can be found on all continents. The relationship between P. xylostella and brassicaceae has been much studied since this pest causes great damages in practically all the producing regions, in Brazil and in the world. It has also aroused great interest among researchers that brassicaceae use secondary metabolites as a defense against the attack of generalist insects, and for specialists, such as P. xylostella, some of these metabolites are prompting feeding and oviposition. In the interaction insect-plant there are questions not understood and that must be studied, because several biotic and abiotic conditions interact in these organisms, being able to promote physiological and nutritional changes in plants, in the development of insects and in the interactions plant x herbivore x parasitoid / predator. The objective of this work was to study the influence of water stresses on brassic varieties and their reflexes on plants, the P. xylostella herbivore and the Trichogramma pretiosum (Riley, 1879) (Hymenoptera: Trichogrammatidae) parasitoid. The chemical composition of leaves and the volatile emission were evaluated in three different varieties (kale - Brassica oleracea var. acephala; broccoli - B. oleracea var. italica and cabbage - B. oleracea var. capitata) in different soil water levels (50%, 70% and 100% of the field capacity), aiming to determine plants with water stress. The influence of these water conditions on biological development, reproduction and behavioral of P. xylostella, as well as the influence of water stress on the attractiveness / repellency of T. pretiosum parasitoid on P. xylostella eggs. The three varieties grown in the three water conditions and were determined: (a) in the plants / leaves: lipid peroxidation rate (MDA), percentage of crude protein in dry matter, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, hemicellulose, lipids, wax, neutral detergent insoluble proteins, acid detergent insoluble proteins, available proteins, mineral matter, total carbohydrates and the emission of volatiles; (b) with P. xylostella: leaf consumption, larval period, larval viability, pupal period, pupal viability, pupal weight, sex ratio, eggs per female, egg viability, female longevity, male longevity and life table of fertility, laboratory and greenhouse, in addition to the preference for oviposition in tests with and without a choice; and (c) with T. pretiosum: tests of olfactometry with plants in the three water conditions. The results obtained allow us to conclude that: the water deficit causes stress in kale, broccoli and cabbage and in higher intensity in the plants cultivated with less amount of water available in the soil; quantitatively, the chemical composition of the plants (kale, broccoli and cabbage) is altered as a function of water stress, mainly as regards crude and available protein, hemicellulose, lipids, acid and neutral detergent fiber binding proteins, mineral matter and total carbohydrates; the development parameters of P. xylostella are altered, both in the laboratory and in the greenhouse, with caterpillars feeding on plants grown under different soil water conditions, significantly reflecting the reproductive capacity and survival of the insects; water stress changes the emission of volatiles in kale, broccoli and cabbage plants; the preference of P. xylostella for oviposition, in tests with chance and without chance, is influenced by water stress in kale, broccoli and cabbage; olfactometry tests show that water stress influences the choice of T. pretiosum for oviposition, more expressively in plants with higher rates of water stress