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Obtenção de eventos transgênicos de cana-de-açúcar portando os genes bar e vip3Aa e identificação e análise da atividade inseticida de Burkholderia sp. contra Spodoptera frugiperda /

Farinacio, Renato January 2019 (has links)
Orientador: Eliana Gertrudes de Macedo Lemos / Resumo: O ataque de insetos-praga e a competição com plantas daninhas em cultivos agrícolas estão entre as principais causas de perdas de rendimento. Entre as alternativas disponíveis para a redução destas perdas, são preferíveis as que apresentem menores custos, sejam eficazes e seguras. Adicionalmente, estão ocorrendo sucessivos casos de evolução da resistência em populações de pragas e plantas daninhas, isso torna necessária a avaliação dos meios de controle disponíveis para este fim, além da prospecção de novos métodos e moléculas. Neste sentido, a tese foi dividida em três capítulos, o Capítulo 1 abrange as considerações gerais a respeito do tema e os Capítulos 2 e 3 relatam os experimentos científicos desenvolvidos, que tiveram os seguintes objetivos: Capítulo 2, obtenção e avaliação de plantas transgênicas de cana-de-açúcar, variedade SP80-3280, resistentes a Diatraea saccharalis e ao herbicida glufosinato de amônio, por meio, respectivamente, da inserção dos genes vip3Aa e bar, via Agrobacterium tumefaciens; e, Capítulo 3, prospecção e caracterização de novos isolados bacterianos pertencentes aos gêneros Pseudomonas e Burkholderia com atividade inseticida contra Spodoptera frugiperda e início da caracterização de suas moléculas ativas. No Capítulo 2, obteve-se por meio da transformação genética de cana-de-açúcar 48 eventos PCR positivos, estes foram submetidos a avaliação de resistência à Diatraea saccharalis, principal praga da cultura da cana-de-açúcar no Brasil, que result... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Pest insect attack and competition with weeds in agricultural crops are among the main causes of yield losses. Among the alternatives available to reduce these losses, those with lower costs, effective and safe, are preferable. In addition, successive cases of resistance evolution are occurring in pest and weed populations, which makes it necessary to evaluate the means of control available for this purpose, as well as the prospection of new methods and molecules. In this sense, the thesis was divided into three chapters, Chapter 1 covers the general considerations on the theme and Chapters 2 and 3 report the scientific experiments developed, which had the following objectives: Chapter 2, obtaining and evaluation of transgenic sugarcane plants, variety SP80-3280, resistant to Diatraea saccharalis and ammonium glufosinate herbicide, by respectively, inserting the vip3Aa and bar genes via Agrobacterium tumefaciens; and, Chapter 3, prospecting and characterization of new bacterial isolates belonging to the genera Pseudomonas and Burkholderia with insecticidal activity against Spodoptera frugiperda and beginning of the characterization of their active molecules. In Chapter 2, 48 positive PCR events were obtained through the genetic transformation of sugarcane. They were submitted to control evaluation of the Diatraea saccharalis, the main pest of sugarcane crop in Brazil, which resulted in no detection of resistant events. While in the evaluation of resistance to ammonium glufosi... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Capacidad de diferentes especies hortícolas de atraer nemátodos entomopatógenos del género Steinernema al ser atacadas por el gusano cortador de la papa (Agrotis bilitura Guenée) / Capacity of different horticultural species of attracting entomopathogenic nematodes of the gender Steinernema when attacked by the potato cut worm (Agrotis bilitura Guenée)

Quezada Cepeda, María de los Ángeles January 2018 (has links)
Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo / Varios estudios señalan que las plantas han desarrollado un mecanismo de defensa llamado “respuesta guardaespaldas”, la cual se activa cuando son atacadas por algún insecto herbívoro, liberando compuestos volátiles y atrayendo a enemigos naturales, entre los que destacan los nematodos entomopatógenos (NEP), como defensa indirecta al ataque. Se ha demostrado que la respuesta guardaespaldas actúa de forma específica en el sistema planta-plaga-enemigo natural. Este estudio comparó el nivel de atracción de 6 especies vegetales, cuando son atacadas por el gusano cortador de la papa Agrotis bilitura Guenée (Lepidoptera: Noctuidae), hacia el NEP Steinernema sp. aislamiento Licán Ray en condiciones de laboratorio. Para ello, las 6 especies vegetales fueron comparadas en grupos de a 3: Betarraga, repollo y trébol rosado en el grupo 1 y lechuga, acelga y tomate en el grupo 2. Para esto, se utilizó un olfactómetro de PVC de seis brazos para cada grupo, estructura compuesta por una maceta central a la cual están conectados de manera equidistante, 6 brazos de igual longitud. Además, cada brazo está conectado a una maceta más pequeña en su extremo distal por medio de un tubo conector que posee una malla de 75 μm para colectar los nemátodos. Esta estructura se encontraba llena de suelo franco a capacidad de campo, tratado con calor húmedo para eliminar la presencia de otros organismos. Se trasplantaron 4 plantas con 4-6 hojas de cada especie a comparar, en las macetas distales de forma alternada en el olfactómetro, dejando una maceta sin plantas entre cada tratamiento como control. Se colocaron dos larvas de A. bilitura en estadío L6 en cada maceta, para que se alimentara libremente de las plantas. Al cabo de tres días, se aplicó 3mL con 2000 J3 del NEP aprox. en la maceta central. 48 horas después, el suelo contenido en el tubo conector con la malla de 75 μm se procesó con el método de tamizado, contabilizando los nematodos colectados en una lupa a 50X. Los resultados arrojaron que, en términos relativos, el repollo fue el más atractivo para los NEP y la lechuga, la menos atractiva. En un segundo experimento, se colectó el agua de riego que se utilizó para plantas de repollo atacadas por A. bilitura, y al igual que en la descripción anterior, se utilizó un olfactómetro para comparar la atracción de repollos atacados por A. bilitura, lechugas atacadas por A. bilitura y lechuga regada con el agua colectada desde macetas con repollo. En este caso, no hubo diferencias significativas entre el repollo y la lechuga atacadas por el herbívoro. La lechuga regada con exudados de repollo mostró un menor nivel de atracción hacia el NEP. Del experimento 1, se infiere que el repollo, cuando es atacado por A. bilitura, libera compuestos volátiles que son más atractivos para el NEP frente a las otras especies vegetales estudiadas. Con respecto al experimento 2, se deduce que podría utilizarse un método más preciso para colectar exudados y que disminuya la probabilidad de difusión de activos para evaluar este efecto.
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Hongos patógenos asociados a “moscas de la fruta” (Diptera: Tephritidae) en el sector austral de Las Yungas del noroeste argentino

Albornoz Medina, Patricia 24 April 2014 (has links)
La presencia en Argentina de Anastrepha fraterculus (Diptera: Tephritidae) (especie nativa) y Ceratitis capitata (especie exótica) limitan la exportación de frutas y hortalizas al estado fresco, ya que estas plagas son de importancia cuarentenaria. A nivel mundial existe una tendencia a disminuir el empleo de plaguicidas de sintesis contra “moscas de la fruta”, debido fundamentalmente a los efectos nocivos de estos sobre el ambiente y la salud humana, sumado a la necesidad de la conservación de la biodiversidad en los agro-ecosistemas. Por tal motivo, los programas para su control se basan en la utilización de un sistema integrado de técnicas bio-racionales o no contaminantes. Como medio bio-rracional de control de estas especies, en Argentina se emplean la técnica del insecto estéril y un himenóptero parasitoide exótico. El uso de microorganismos patógenos como agentes de control biológico es de gran importancia, debido a las enfermedades epizoóticas sobre poblaciones de insectos plaga. Entre ellos, los hongos constituyen un importante grupo de patógenos de insectos y otros artrópodos plaga y son considerados excelentes candidatos como agentes de control biológico, ya que pueden infectar a los insectos directamente a través de la penetración de la cutícula, presentan dispersión activa y pasiva, persistencia en el medio, tolerancia a factores adversos debido al desarrollo de esporas de resistencia, y su manipulación in vitro es relativamente fácil. En Argentina existen varias referencias sobre la presencia y el uso de hongos patógenos sobre insectos plaga, sin embargo, aún no han sido utilizados contra “moscas de la fruta”. Por tal motivo la finalidad de la investigación fue seleccionar especies de hongos patógenos que puedan ser utilizados como agentes de control de A. fraterculus y C. capitata. Se realizó la prospección semanal de larvas y pupas de A. fraterculus y C. capitata que se encontraban en fruta de nogal, durazno y guayaba y en suelo, en la selva de Las Yungas durante los veranos de 2007-2008, 2008-2009 y 2009-2010. Como resultado se obtuvieron 59 aislamiento fúngicos, de los cuales 4 correspondieron al hongo entomopatógeno Beauveria bassiana (Hypocreales: Cordycipitaceae) aislados de larvas de A. fraterculus, 31 al género Fusarium Link, 12 al género Aspergillus Link, 6 a los géneros Penicillium Link y Mucor Micheli. Se evaluó la patogenicidad de los 4 aislamientos nativos de B. bassiana sobre larvas de A. fraterculus, mediante el método de inmersión y de larvas de A. fraterculus y C. capitata, mediante el método de espolvoreo. Y se siguió la mortalidad diferida en pupas y adultos. La mortalidad de larvas y pupas de las dos especies de tefritidos fue mayor al 55% cuando fueron tratadas por el método de espolvoreo. Valores menores al 27% fueron registrados para larvas y pupas de A. fraterculus inoculadas por el método de inmersión. En el caso de los adultos de ambas especies los porcentajes de mortalidad fueron menores al 1% y 22%, mediante la aplicación del inoculo por inmersión y espolvoreo, respectivamente. Se observó que el método de espolvoreo fue más efectivo para el control de los estados inmaduros y que causo un control de la plaga del 80%. También se evaluó la mortalidad de 3 aislamientos de B. bassiana y 1 de Isaria fumosorosea Wizw (Eurotiales: Trichocomaceae) aislados de hospederos no tefritidos, contra larvas y adultos de A. fraterculus, inoculados mediante los métodos de aspersión en tierra e inmersión y aspersión, respectivamente. Se registró una mortalidad entre 12 y 16% para larvas y pupas. Los adultos inoculados por inmersión registraron mortalidades de 44% y 86%, mientras que los inoculados por aspersión menor al 12%. Se realizó un ensayo para evaluar la acción conjunta de B. bassiana aislado a partir de Myzus sp (Hemiptera: Aphididae) y del parasitoide de pupas Coptera haywardi Loiácono (Hymenoptera: Diapriidae) para el control de C. capitata, tanto cuando actuaron juntos como separados, en condiciones de semicampo. Las larvas de la plaga fueron inoculadas mediante la aspersión del inóculo en suelo y se hizo un seguimiento en los estados de pupa y adulto. La acción conjunta de ambos enemigos naturales produjo un control del 95% (eficacia), siendo los adultos el estado más susceptible, mientras que B. bassiana y C. haywardi produjeron un control de 65% y 45%, respectivamente, cuando actuaron independientemente. La mortalidad del hongo sobre el parasitoide fue del 15,6 ± 1,8%. De estos estudios podemos concluir que para lograr un efectivo control de las “moscas de la fruta” es preferible el empleo de cepas aisladas a partir de ellas mismas. Por otra parte se observó que el método de aplicación más efectivo sería la inoculación del hongo en suelo, de este modo las larvas se infectarían al momento de enterrarse y al permanecer en el suelo junto con las pupas muertas y esporuladas, serían una fuente de inoculo para la infección de los adultos emergentes. En cuanto a las cepas nativas de B. bassiana aisladas de larvas de A. fraterculus, se deberían realizar evaluaciones a campo y pruebas de patogenicidad sobre adulto, debido a que no fue evaluado en el presente trabajo.
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Diversidad y patogenicidad de especies de hongos entomopatógenos en insectos plaga de la yerba mate Ilex paraguariensis en la provincia de Misiones

Schapovaloff, María Elena 06 March 2013 (has links)
Las especies de hongos entomopatógenos nativos presentan en general mayor especificidad para los hospedadores de los cuales fueron aislados originalmente y además se adaptan mejor a las condiciones ambientales del lugar de origen, que los hongos patógenos procedentes de hospedantes y lugares diferentes. El objetivo general de esta tesis es estudiar la diversidad y patogenicidad de hongos patógenos de insectos plaga de la yerba mate en la región del Noreste Argentino. Los objetivos específicos son: 1) Relevar, aislar e identificar los hongos entomopatógenos de insectos plaga en cultivos de yerba mate y suelos de importancia en la región del NEA (Misiones). 2) Estimar la patogenicidad de los hongos entomopatógenos aislados e identificados en condiciones controladas de laboratorio. 3) Preservar los cultivos fúngicos obtenidos en una colección de cultivos de referencia. 4) Caracterizar los hongos entomopatógenos mediante técnicas de biología molecular
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PROSPECÇÃO DE FUNGOS PARA O CONTROLE DE Anticarsia gemmatalis HÜBNER, 1818 (LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE) / PROSPECTING OF FUNGI FOR CONTROL OF Anticarsia gemmatalis HÜBNER, 1818 (LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE)

Oliveira, Fábio Rodrigo de 15 March 2013 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The velvetbean caterpillar, Anticarsia gemmatalis, is considered a major insect pest of soybean. For its control, an alternative to chemical methods is the microbial control, inserted into the pest biological control. Thus, the objective of this study was to isolate fungi from contaminated A. gemmatalis caterpillars and evaluate the pathogenic potential of isolated fungal cultures. For the fungus that caused the greatest mortality percentage of larvae exposed, enzymatic production capacity and production feasibility were found. Still, pathogenicity was evaluated and LC50 and LC90 from the best formulation obtained were established. The fungi isolation occurred from caterpillars on mummification stage, obtained in the central region of Rio Grande do Sul. Larvae mortality, allied to observation of mummification stage, lead to identify the species as Aspergillus nomius presenting the best results (about 95% mortality) among the 20 isolated-fungi. There was no growth of this fungus in culture media rich in chitin and lipids. However, there was growth in a media containing protein, which might suggest that the fungus is a good protease type enzyme producer. Testing to evaluate A. nomius production feasibility, the average spore s concentration (conidia mL-1) in all treatments were similar, with the majority stayed with 1010 conidia.mL-1. Visually, the treatment with 25% water volume per rice volume (50mL), addition of casein in the medium and adding of 6 mL of spore suspension of the fungus A. nomius, which resulted in 2.88 x1010 conidia mL-1, the rice was looser and, therefore, more aired, which may have resulted in a trend toward to a better fungus development. It was evaluated the pathogenicity of this formulated, yielding a high level of mortality among A. gemmatalis larvae, similar to results obtained when spore suspensions originated were applied directly from the fungus growth plates. Yet, at the same conidia concentration mentioned, but testing various dosages, values around 2,23x107 and 1,46x1010 mL.lagarta-1 were obtained, corresponding to LC50 and LC90, respectively, estimated by probit method. Finally, it is concluded that A. nomius presents a high potential regarding to a possible use as A. gemmatalis biological control agent in soybean crops. However, because it is a fungus with pathogenic potential for humans and other native fauna animals, it is necessary further studies related to aflatoxin production by this pathogen and its effects on the environment. / A lagarta-da-soja, Anticarsia gemmatalis, é considerada o principal inseto-praga dessa cultura. Para o seu controle, uma alternativa aos métodos químicos é o controle microbiano, inserido dentro do controle biológico de pragas. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento de fungos de lagartas de A. gemmatalis contaminadas e avaliar o potencial patogênico das culturas fúngicas isoladas. Para o fungo que ocasionou a maior porcentagem de mortalidade das lagartas expostas, foi verificada a capacidade de produção enzimática e a viabilidade de produção. Ainda, foi avaliada a patogenicidade e foram estabelecidas a DL50 e a DL90 da melhor formulação obtida. O isolamento dos fungos se deu partir de lagartas, em estágio de mumificação, obtidas na região central do Estado do Rio Grande do Sul. A mortalidade das lagartas, aliada à observação de estágio de mumificação nas mesmas, serviu para identificar a espécie Aspergillus nomius como apresentando o melhor resultado (cerca de 95% de mortalidade) dentre os 20 fungos isolados. Não se observou o crescimento desse fungo em meios de cultura ricos em quitina e lipídios. Porém, houve crescimento em meio contendo proteína, podendo-se sugerir que o fungo é um bom produtor de enzimas do tipo proteases. No teste visando avaliar a viabilidade de produção de A. nomius, a concentração média (conídios.mL-1) de esporos em todos os tratamentos foi semelhante, sendo que a maioria ficou na casa de 1010 conídios.mL-1. Visualmente, no tratamento com 25% de volume de água por volume de arroz (50mL), adição de caseína no meio e adição de 6 mL de suspensão de esporos do fungo A. nomius, e que resultou em 2,88x1010 conídios.mL-1, o arroz ficou mais solto e, com isso, mais aerado, o que pode ter resultado numa tendência de melhor desenvolvimento do fungo. Foi avaliada a patogenicidade desse formulado, obtendo-se um alto nível de mortalidade em lagartas de A. gemmatalis, semelhante aos resultados obtidos quando foram aplicadas suspensões de esporos originadas diretamente das placas de crescimento do fungo. Ainda, na mesma concentração de conídios mencionada, porém testando-se várias dosagens, foram obtidos valores em torno de 2,23x107 e 1,46x1010 mL.lagarta-1, correspondentes à CL50 e CL90, respectivamente, estimadas utilizando-se o método de Probit. Por fim, conclui-se que A. nomius apresenta um alto potencial com vistas a uma possível utilização como agente de controle biológico de A. gemmatalis em cultivos da soja. Porém, por se tratar de um fungo com potencial patogênico para o homem e para outros animais da fauna nativa, é necessário aprofundar estudos relacionados à produção de aflatoxinas por esse entomopatógeno e seus efeitos no ambiente.
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Efeitos de inseticidas biológicos (óleo de nim, Azadirachta indica, e entomopatógenos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana) sobre a cigarrinha-das-raízes, Mahanarva fimbriolata (Stål) (Hemiptera: Cercopidae), em cana-de-açúcar sob cultivo orgânico, em relação à mortalidade natural / Effects of biological insecticides (neem oil, Azadirachtina indica and entomopathogenic Metharizium anisopliae and Beauveria bassiana) about spittlebug Mahanarva fimbriolata (Hemiptera:cercopidae) in organic sugarcane in relation to natural mortality

Baptistussi, Roberta Carrara 12 November 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T18:57:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3367.pdf: 2685500 bytes, checksum: 1145f361da493228758e656f7ae215a0 (MD5) Previous issue date: 2010-11-12 / The neem oil obtained from the Azadirachta indica plant, plus formulations containing the fungus Beauveria bassiana and Metharizium anisopliae, were used to control the spittlebug Mahanarva fimbriolata in organic cultivation of sugarcane. The action of these products was compared with natural mortality of the insect, through parcels without use of any products. The experiment was conducted at Santo Antônio Plant in Sertãozinho-SP, in variety RB 85 5536 in the period from March to May 2008. It was employed the statistical design of subdivided parcels, with seven treatments, three repetitions and four periods. It wasn t observed significant statistical differences between the treatments studied either generally or in different periods evaluated. The natural mortality ranged from 55,5% to 80,81% suggesting that the action of environmental agents was sufficient, it laid off any kind of products, even the alternative. / O óleo de nim obtido da planta Azadirachta indica, mais as formulações contendo os fungos Metharizium anisoplae e Beauveria bassiana, foram empregados para o controle da cigarrinha das raízes Mahanarva fimbriolata em cultivo orgânico de cana-de-açúcar. A ação desses produtos foi comparada com a mortalidade natural do inseto, através de parcelas sem o emprego de qualquer tipo de produto. O experimento foi conduzido na Usina Santo Antônio em Sertãozinho-SP, em variedade RB 85 5536 no período de março a maio de 2008. Empregou-se o delineamento estatístico de parcelas subdivididas, com 7 tratamentos, 3 repetições e 4 épocas. Não foram observadas diferenças estatísticas significativas entre os tratamentos estudados de forma geral ou nas diferentes épocas avaliadas. A mortalidade natural variou de 55,5% a 80,81% sugerindo que a ação dos agentes ambientais seja suficiente, dispensando o emprego de qualquer tipo de produto, mesmo os alternativos.
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Seleção de Bacillus thuringiensis Berliner e Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera:trichogrammatidae) para Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) e suas interações

Ferreira, Lígia Souza 12 February 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ligia Souza Ferreira.pdf: 683596 bytes, checksum: 0080bb12afd7439bd439dec01200ff65 (MD5) Previous issue date: 2010-02-12 / A expansão da área de cultivo e o consequentemente uso de algumas técnicas de manejo tem propiciado o aumento de problemas fitossanitários. Dentre essas técnicas, o monocultivo, o plantio escalonado, e a utilização desordenada de agrotóxicos favorecem o ataque de diversos insetos-praga. Entre os insetos-praga, destaca-se, a lagarta-do-cartucho (Spodoptera frugiperda) (J.E.Smith), devido ao difícil controle e aos prejuízos ocasionados que variam entre 20 a 40%. Visando ao controle da praga e a redução da utilização de inseticidas, o controle biológico se destaca como o método mais promissor e adequado. Entre os agentes de controle biológico, a bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis (Berliner) (Bt) e o parasitoide de ovos do gênero Trichogramma (Westwood) são considerados promissores visando ao manejo de diversos insetos-praga. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi selecionar uma ou mais linhagens e isolados de Bt, bem como a interação entre esses dois agentes de controle biológico, no controle de S. frugiperda. Foram utilizadas 11 linhagens de Trichogramma pretiosum (Riley), sendo que a linhagem Tp 16 apresentou melhor desempenho para o controle dessa praga, com 60,66% de parasitismo. Foram testados 50 isolados de Bt para o controle de S. frugiperda. Os isolados 676 e 984 mostraram-se mais promissores para o controle dessa praga, causando mortalidade acima de 50%. Para verificar a interação entre os agentes de controle, utilizou-se os isolados de Bt selecionados misturados ao mel e oferecidos a linhagem Tp 16 para sua alimentação. Em outro experimento, as cartelas contendo os ovos da praga foram imersas nos isolados de Bt e oferecidas para a linhagem Tp 16 do parasitoide. Houve interação positiva no experimento em que as cartelas foram imersas no Bt, apresentando um total de 32,85 ovos parasitados para o isolado 676, 30,35 para o isolado 984 e 31,20 para a testemunha. Porém, observou-se uma redução no número total de ovos parasitados quando o Bt foi oferecido como alimento. A testemunha apresentou um total de 55,30 ovos parasitados, enquanto que os isolados 676 e 984, apresentaram 35,15 e 18,70 ovos parasitados, respectivamente. / The increasing number of corn production areas and the different amount of working strategies used to grow it have increased the number of pests. The monoculture strategy and the frequent use of insecticides expose this culture to severe attacks of several pests. The most common corn pest is the fall armyworm (Spodoptera frugiperda) (J.E.Smith), it has caused around 20 to 40% of losses of corn culture, because it is not easy to be controlled. Aiming the pest control and use less insecticides, the biological control is considered the most promising and suitable method to be used. Among the biological control agents the entomopathogenic bacteria Bacillus thuringiensis (Bt) and Trichogramma parasite id eggs are considered the most promising ones. This project aimed to analyze the effects isolated B. thuringiensis and Trichogramma eggs have on S. frugiperda control. Eleven Trichogramma pretiosum strains were analyzed, Tp 16 presented the best performance , with 60,66% of parasitism. Isolated 676 and 984 showed to be the most promising in this pest control, the rates of mortality caused by them were over 50%. Two experiments were carried out to test such controlling process, in one of them the selected isolated were mixed with honey and they were used to feed Tp 16. In the second one, cards with the pest eggs were immersed in the isolated Bt and offered to Tp 16. It was observed that where the cards were immersed in Bt there was a positive interaction, resulting in 32,85 parasitized eggs when the isolated 676 were used, 30,35 eggs when the isolated 984 were used and 31,20 for the other. However, when the isolated were offered as food, it was observed that the number of parasitized eggs decreased compared to when they were used to control the pest. The controlling experiment resulted in 55,30 parasitized eggs , the isolated 676 and 984, resulted in 35,15 and 18,70 parasitized eggs, respectively
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Bacillus thuringiensis: diversidade gênica, estrutura genética de populações e eficiência no controle de Plutella xylostella (L., 1758) (Lepidoptera: Plutellidae)

Thuler, Ana Maria Guidelli [UNESP] 21 September 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-09-21Bitstream added on 2014-06-13T20:24:20Z : No. of bitstreams: 1 thuler_amg_dr_jabo.pdf: 1407432 bytes, checksum: d7e6ed286b2d4a2ad8e9b2120b24b7ca (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada (LGBBA) da FCAV-UNESP. Foram caracterizados geneticamente, por PCR, isolados de Bacillus thuringiensis, provenientes de três coleções brasileiras, quanto aos tipos de genes cry1, avaliando-se o efeito dos mesmos sobre uma população de Plutella xylostella caracterizando-se também os isolados de B. thuringiensis quanto à presença de enterotoxinas HBL, NHE e o regulador pleitrópico PLC, por verificação biomolecular, avaliando a variabilidade, bem como a estruturação genética de populações de B. thuringiensis, por PCR-RFLP. Verificou-se que existe uma distribuição homogênea das subclasses cry1 dentro do banco de isolados de B. thuringiensis, com maior porcentagem de isolados portadores dos genes cry1Ab (42,12%) e com menor porcentagem de representantes da subclasse cry1Db (0,6%). Nos bioensaios observou-se 100% de mortalidade para lagartas de P. xylostella com os isolados utilizados, indicando que combinações de tipos diferentes de genes cry1 apresentam ação tóxica para larvas de P. xylostella. Analisando a estrutura populacional de B. thuringiensis foram obtidos 78 haplótipos, definidos para as populações das diferentes coleções, e 76 haplótipos, definidos para as populações de diferentes regiões brasileiras, retratando a variabilidade genética para os loci hblA, plcR, nheBC e cry1 analisados. Segundo valores FSTs, de comparação duas a duas, diferenças significativas entre coleções e populações de B. thuringiensis provenientes das regiões brasileiras foram verificadas. Mesmo assim, alguns grupos formados são constituídos por uma população clonal de isolados da bactéria. / The work was developed in the Laboratory of Bacterias’ Genetics and Applied Biotechnology (LGBBA) at UNESP/ Jaboticabal Campus. There were genetically characterized, by PCR, isolates of B. thuringiensis, belonging to three Brazilian collections basead on cry1 gene content, evaluating their effects on Plutella xylostella. They were also characterized concerning their enterotoxins production such as HBL, NHE and the PLC virulence factor, using molecular techniques, so as to evaluate their gene diversities, as well as their population genetic, using the PCR-RFLP approach. It was observed a homogeneous distribution of the cry1 subclasses within B. thuringiensis strain collections studied, with bigger percentage of isolates showing the cry1Ab genes (42.12%) and with lower percentage of isolates for subclass cry1Db (0.6%). The bioassays have revealed 100% mortality to P. xylostella larvae meaning that the effectiveness of B. thuringiensis as a biological control agent does not depend at the cry genes content. When the B. thuringiensis population structure was considered, 78 haplotypes were defined for the strains contents of different collections and 76 haplotypes were defined for strains of different Brazilian regions, exhibiting the great genetic variability for hblA, plcR, nheBC and cry1 loci. According to the FSTs values for establish pair comparisons, significant differences among the B. thuringiensis collections and populations, were observed. Nevertheless some of the formed groups were considered as bacterial clonal population.

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