O risco de transmissão placentária para o feto, associados à susceptibilidade de neuroinvasão pelo vírus 17D levaram à recomendação de que a vacina contra febre amarela (FA) não fosse administrada durante a gravidez. Pretendeu-se avaliar o efeito desta no desempenho gestacional de camundongos prenhes. Os resultados mostraram decréscimo na viabilidade fetal causado pela vacinação. Reatividade ao antígeno da FA foi observada nos tecidos hepáticos maternos e de fetos vivos. Na placenta, o antígeno viral não foi observado na barreira materno-fetal. Nos fetos natimortos e em reabsorção, esta passagem pareceu mais acentuada; reatividade foi observada em diversos órgãos. O antígeno viral foi detectado em todas as regiões placentárias. A detecção de RNA viral nas amostras indica que há atividade viral nos tecidos fetais. Nossos achados indicam que há fases gestacionais mais susceptíveis à infecção viral vacinal e que podem determinar perdas fetais. A presença do antígeno e de atividade viral no fígado fetal sugere que o vírus vacinal é transmitido da mãe para o feto. / The risk of placental transmission to the fetus, associated with susceptibility to neuroinvasion of the 17D virus led to the recommendation that the vaccine against yellow fever (YF) was not administered during pregnancy. Intended to evaluate the effect of the vaccine in gestational performance of pregnant mice. The results showed a decrease in fetal viability caused by vaccination. Antigen reactivity of YF was observed in maternal and live fetuses liver tissue. In the placenta, the viral antigen was not observed in maternal-fetal barrier. In the stillborn fetuses and resorption, this passage seemed more pronounced; reactivity was observed in several organs. The viral antigen was detected in all placental regions. The detection of viral RNA in the samples indicates that there is viral activity in fetal tissues. Our findings indicate that there are stages of pregnancy more susceptible to viral vaccine infection that could determine fetal loss. The presence of the antigen and viral activity in fetal liver suggests that the vaccine virus is transmitted from mother to fetus.

Neste projeto, objetivou-se o diagnóstico de riquétsias, utilizando metodologia molecular, em material de humanos, carrapatos, pulgas, cães e equinos de áreas endêmicas dos estados de São Paulo (SP) e Rio de Janeiro (RJ). Diagnosticou-se Rickettsia rickettsii infectando Amblyomma cajennense e humanos no estado de SP, indicando ser esta a única espécie responsável pela doença. Rickettsia conorii foi diagnosticada em um paciente procedente de Portugal. No estado do RJ, Rickettsia felis foi detectada Ctenocephalides felis e em Am. cajennense enquanto que R. rickettsii em Amblyomma aureolatum, Am. cajennense, Anocentor nitens, Boophilus microplus, Ct. felis e Rhipicephalus sanguineus. As frequências mínimas de vetores infectados do estado do RJ apresentaram valores superiores àqueles registrados em outras regiões do país. Demonstrou-se, de forma inédita, o envolvimento de algumas destas espécies no ciclo da bactéria. R. rickettsii foi diagnosticada em cães e equinos indicando a importância dos animais domésticos na manutenção do ciclo da riquetsiose. / This project aimed to diagnose rickettsial diseases using molecular analysis methods on human, tick, flea, dog and horse samples from endemic areas in the States of São Paulo (SP) and Rio de Janeiro (RJ). A diagnosis of Rickettsia rickettsii infecting Amblyomma cajennense and humans in the State of SP was made, indicating that this is the only species responsible for the disease. Rickettsia conorii was diagnosed in a patient from Portugal. In RJ, Rickettsia felis was detected in Ctenocephalides felis and Am. cajennense, while R. rickettsii was detected in Amblyomma aureolatum, Am. cajennense, Anocentor nitens, Boophilus microplus, Ct. felis and Rhipicephalus sanguineus. In the State of RJ the minimum frequency of infected vectors presented higher values than those recorded in other regions of the country. The involvement of some of these species in the bacterium cycle has been demonstrated for the first time. R. rickettsii was diagnosed in dogs and horses indicating the importance of livestock in the maintenance cycle of rickettsial infection.

O atual projeto propôs elaborar e validar uma Tecnologia Educacional sobre Febre Maculosa, com o intuito de oferecer um método inovador de ensino para promover/facilitar a aprendizagem sobre Febre Maculosa. Trata-se de um estudo metodológico, que percorreu as seguintes etapas: análise e diagnóstico; planejamento instrucional, desenho didático, revisão e validação e produção da tecnologia. A análise e diagnóstico foi realizada a partir das experiências vivenciadas em atividades de extensão em educação e saúde para Febre Maculosa no Campus-USP de Ribeirão Preto (2014- 2015). No planejamento instrucional definiu-se que a Tecnologia Educacional sobre Febre Maculosa, seria apresentada em forma de Laboratório Interativo, com estações de aprendizagem. Para a produção do Laboratório contamos com a colaboração de uma equipe multidisciplinar que envolveu pesquisadores enfermeiros, eletricista, marceneiro, artista plástico, alfaiate e designer. O processo de revisão e validação foi dividido em dois momentos: validação de aparência e conteúdo e validação semântica. A validação de aparência e conteúdo foi realizado por 9 (nove) juízes, com experiência na área de biologia e educação; já a validação semântica foi realizada por 8 (oito) alunos do curso de enfermagem e pedagogia. Os resultados da validação de aparência e conteúdo mostraram um IVC superior a 0,8 para a grande maioria das variáveis. Na validação semântica, o Laboratório também teve boa aceitação e compreensão pelos participantes, assim se manteve a mesma organização e conteúdo. Considera-se que a trajetória percorrida para a elaboração do Laboratório Interativo sobre Febre Maculosa confere sustentação acadêmica e científica ao produto construído e ainda contribui para seu potencial pedagógico enquanto um recurso que pode favorecer a aprendizagem significativa, além de contribuir para a transformação das práticas de educação em saúde / The objective of this research was to elaborate and validate an Educational Technology about Rocky Mountain Spotted Fever (RMSF) in order to offer an innovative method of teaching to promote and facilitate learning about RMSF. This methodological study used diagnosis, instructional planning, didactic design, revision, validation, and production of the technology. The analysis and diagnosis were carried out based on an extension activity in education and health related to RMSF at the Campus-USP, Ribeirão Preto (2014-2015). In the instructional planning, we defined that the Educational Technology would be presented in the form of an Interactive Laboratory, with learning stations. The Laboratory production counted with a multidisciplinary team collaboration involving researchers, nurses, electrician, carpenter, plastic artist, tailor and designer. The revision and validation process was divided in appearance and content validation and semantic validation. The appearance and content validation was carried out by 9 (nine) judges, with experience in biology and education areas. The semantic validation was performed by 8 (eight) undergraduates from nursing and pedagogy courses. The results of the appearance and content validation showed a CVI greater than 0.8 to the majority of the variables. In the semantic validation, the Laboratory presented a good acceptance and understanding by the participants, thus maintaining the same organization and content. We considered that the trajectory used for the elaboration of the Interactive Laboratory on RMSF confers academic and scientific support to the constructed product and contributes with its pedagogical potential as a resource that can provide significant learning; furthermore, it contributes with health practices transformation

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-12T18:43:04Z No. of bitstreams: 1 ricardo-de-carvalho.pdf: 1945198 bytes, checksum: 8586b33e6fabb5d0036c0443e9c26caa (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-12T18:43:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ricardo-de-carvalho.pdf: 1945198 bytes, checksum: 8586b33e6fabb5d0036c0443e9c26caa (MD5) Previous issue date: 2005 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Esta dissertação investiga a aplicação do Controle Estatístico de Processo (CEP) nas principais fases da produção da suspensão viral (SV) da vacina contra febre amarela produzida em Bio-Manguinhos/FIOCRUZ, Brasil. Empregada na formulação do produto final, a SV é preparada em várias etapas, utilizando a tecnologia aperfeiçoada no Brasil (egg passage), desde 1937. O sistema de CEP implantado está baseado em recursos computacionais, perfeitamente adaptados à realidadeda Instituição. Os gráficos de controle foram a principal ferramenta estatística empregada.Sete variáveis relativas às etapas da produção da SV foram estudadas: perdas de ovos no transporte; ovos não embrionados; embriões mortos na primeira incubação; perdas na inoculação; embriões mortos na segunda incubação; perdas na coleta de embriões e rendimento na coleta de embriões. Dentre as variáveis investigadas, perdas por transporte e fertilidade dos ovos não sofrem interferência direta da produção, porém são de fundamental importância para as fases seguintes e, por esse motivo, foram estudadas. Os resultados mostraram que seis variáveis, das sete analisadas, apresentaram resultados sob controle, ainda que duas delas não tenham atendido a uma das regras sensibilizantes estabelecidas: ovos não embrionados e perdas na coleta. A variável rendimento ficou caracterizada como não controlada.Em relação à capacidade, os processos de transporte de ovos e ovos não embrionados foram classificados como processos incapazes (Cpk< 1,00). Os processos com as variáveis embriões mortos na primeira incubação e perdas na inoculação foram considerados como relativamentecapazes (1,00 ≤Cpk < 1,33) e, finalmente, os processos com variáveis embriões mortos na segunda incubação e perdas na coleta foram considerados capazes (Cpk ≥1,33). Pela análise do conjunto, os resultados indicam a necessidade de ajustes, intensificação e controle contínuo dos processos que estão sendo praticados. / This work deals with the application of Statistical Control Process (SCP) to the main parts of the production of Viral Suspension (VS) ofthe yellow fever vaccine manufactured by Bio-Manguinhos/FIOCRUZ, Brazil. The VS is used in the formulation of the final product and is prepared in several steps, using a technology (egg passage), which has been being improved in Brazil since 1937. The SCP system used is based on computational resources that are well adapted to the Institution reality. Control graphs were the main statistical tools employed. Seven variables related to the productionof the VS were investigated: transporting losses of eggs; non-germinated eggs; dead embryos during the first incubation; losses during inoculation; dead embryos during the second incubation; losses during embryo collect and efficiency in collecting embryo. Among the studied variables, transporting losses and fertility of eggs do not relate directly to the production, but are of fundamental importance for the subsequent steps, and were also studied for this reason. The results showed that six out of seven analyzed variables were under control, although two of them did not attend one of the established sensitivity rules: non germinated eggs and losses in collecting. Efficiency ended up characterized as a non-controlled variable. As far as capacity is concerned, transporting of eggs and non-germinated eggs were classified as uncapable processes (Cpk < 1,00). Dead embryos during the first incubation and losses during inoculation were considered as relatively capable processes (1,00 ≤Cpk < 1,33). Finally, dead embryos during the second incubation and losses in collecting embryo were considered capable processes (Cpk ≥1,33). The results, thus, show a necessity of adjustments,intensification and continuous control of the currently used processes.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-12-10T13:43:12Z No. of bitstreams: 1 marisol-simoes.pdf: 2202112 bytes, checksum: 3f9f53685909ddd3fdd381f8f3692f14 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-10T13:43:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marisol-simoes.pdf: 2202112 bytes, checksum: 3f9f53685909ddd3fdd381f8f3692f14 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A febre amarela é causada pelo vírus protótipo do gênero Flavivirus e é transmitida ao homem através da picada de mosquitos hematófagos infectados com o agente viral. A doença permanece endêmica em regiões das florestas tropicais da África e América do Sul, apesar da disponibilidade de vacinas eficazes contra o vírus da FA – 17D-204 e 17DD – consideradas seguras e altamente imunogênicas, capazes de induzir uma rápida resposta imune específica, com a formação de anticorpos neutralizantes que aparecem precocemente, são protetores e de longa duração. O teste de neutralização por redução de placas de lise (PRNT) é considerado o teste mais sensível e mais específico para a detecção e quantificação dos anticorpos neutralizantes, sendo o método de referência para a avaliação da resposta imune protetora após a vacinação. Este estudo avaliou a confiabilidade e a acurácia do micro PRNT50 (aplicado em placas de 96 poços) tomando como referência o PRNT 50 (aplicado em placas de 6 poços) e comparou o desempenho do micro PRNT50 com o micro PRNT90 (redução de 50% e 90% das placas de lise, respectivamente). Foram selecionados 200 soros de indivíduos brasileiros que participaram de um estudo clínico de dose-resposta da vacina 17DD produzida em Bio-Manguinhos. A repetibilidade foi aferida a partir de três repetições independentes do teste para cada um dos 200 soros por uma dupla operadora e o mesmo procedimento foi realizado pelas outras duas duplas operadoras, com a finalidade de determinar a reprodutibilidade do micro PRNT50 . Foram determinados o Coeficiente de Correlação Intraclasse (CCI) e o Coeficiente de Correlação de Pearson. As medidas de acurácia determinadas neste estudo foram sensibilidade, especificidade, acurácia global, prevalência e valores preditivos positivo (VPP) e negativo (VPN). A curva ROC também foi utilizada para determinar o melhor ponto de corte do micro PRNT50 . Na avaliação da repetibilidade, os CCIs das duplas operadoras variaram entre 0,62 e 0,76; e os coeficientes de correlação de Pearson apresentaram-se entre 0,62 e 0,78. Para a reprodutibilidade, o CCI obtido foi de 0,72 e os coeficientes de correlação de Pearson variaram entre 0,70 e 0,76. As melhores medidas de acurácia foram alcançadas considerando o ponto de corte para o micro PRNT50 de 2,9 Log 10 mUI/mL, o qual apresentou sensibilidade de 91,1%, especificidade de 72,9% e acurácia global de 78%. O melhor desempenho do micro PRNT50 com este ponto de corte foi ratificado pela análise da curva ROC. Considerando um cenário hipotético de surto de FA, a prevalência seria de 28%, com VPP de 56,7% e VPN de 95,5%. O micro PRNT50 apresentou níveis satisfatórios de confiabilidade e de acurácia, mas o micro PRNT90 mostrou desempenho superior com sensibilidade de 100%, especificidade de 94,7% e acurácia global de 95%. Modificações na metodologia do teste e alterações nos critérios de classificação nas leituras dos resultados obtidos serão importantes para melhorar a acurácia do micro PRNT. / Yellow fever is caused by the prototype virus of the genus Flavivirus and it is transmitted to humans through the bite of bloodsucking mosquitoes infected with the viral agent. The disease remains endemic in tropical forest regions from Africa and South America, despite the availability of effective vaccines against yellow fever virus - 17D-204 and 17DD - considered safe and highly immunogenic, capable of inducing a rapid specific immune response, with the formation of neutralizing antibodies that appear early, are protective and long lasting. The plaque reduction neutralization test (PRNT) is considered the most sensitive and most specific test for detection and quantification of neutralizing antibodies, and the reference method for assessing the protective immune response after vaccination. This study evaluated the reliability and accuracy of micro PRNT50 (applied in 96-well plates) with reference to the PRNT50 (applied in 6-well plates) and compared the performance of the micro PRNT50 with the micro PRNT90. Two-hundred serum samples from Brazilian individuals who participated in a clinical study of dose-response of 17DD vaccine produced in Bio-Manguinhos were selected. The repeatability was measured from three independent repetitions of the test for each of the 200 sera by a dual operator and the same procedure was performed by the other two dual operators, in order to determine the reproducibility of the micro PRNT50. The intraclass correlation coefficient (ICC) and Pearson correlation coefficient were determined. Accuracy measures determined in this study were sensitivity, specificity, overall accuracy, prevalence and positive predictive values (PPV) and negative (NPV). The ROC curve was also used to determine the best cut-off point of micro PRNT50 . In the assessment of repeatability, ICCs for dual operators ranged from 0.62 to 0.76, and Pearson correlation coefficients were between 0.62 and 0.78. For reproducibility, the ICC obtained was 0.72 and the Pearson correlation coefficients ranged between 0.70 and 0.76. The best measures of accuracy were achieved considering the cut-off point for the micro PRNT50 of 2.9 log10 mIU/mL, which had a sensitivity of 91.1%, specificity of 72.9% and overall accuracy of 78%. The best performance of micro PRNT50 with this cut-off point was ratified by the ROC curve analysis. Considering a hypothetical scenario of an outbreak of YF, the prevalence would be 28%, with PPV of 56.7% and NPV of 95.5%. The micro PRNT50 showed satisfactory levels of reliability and accuracy, however the micro PRNT90 showed higher performance with sensitivity of 100%, specificity of 94.7% and overall accuracy of 95%. Modifications in the test methodology and changes in the classification criteria in the readings of the results obtained will be important to improve the accuracy of micro PRNT.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2013-03-20T19:12:45Z No. of bitstreams: 1 Tiago_Póvoa.pdf: 6904413 bytes, checksum: 89b7d7a97e24eb2dfd28a1d63fbce130 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-20T19:12:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tiago_Póvoa.pdf: 6904413 bytes, checksum: 89b7d7a97e24eb2dfd28a1d63fbce130 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A dengue representa um sério problema de saúde pública mundial entre as doenças causadas por arbovírus. Seu agente etiológico, o vírus da dengue, compreende 4 sorotipos antigenicamente distintos (DENV1-4). Os sintomas da dengue variam desde a febre da dengue (FD) até a febre hemorrágica da dengue (FHD) e a síndrome do choque da dengue (SCD). No presente trabalho, iniciamos um estudo com o material obtido de diferentes órgãos (fígado, baço, pulmão, coração e rim) de quatro casos fatais de dengue. Análises histopatológicas revelaram, em todos os casos, áreas com edema e hemorragia; presença de esteatose (micro e macrovesicular) e necrose no fígado; degeneração de fibras cardíacas; necrose tubular aguda dos túbulos contorcidos proximais renais; destruição dos centros germinativos e atrofia de folículos linfóides do baço; espessamento dos septos alveolares e hipertrofia de macrófagos alveolares nos pulmões dos quatro pacientes e também a formação de membrana hialina nos casos 1 e 2. Detectamos antígenos virais em todos os órgãos e também um aumento de infiltrado inflamatório mononuclear, com aumento da população de macrófagos ativados e linfócitos B no rim; predomínio somente de linfócitos B no coração; aumento do número de macrófagos ativados e linfócitos T CD4+ no fígado e pulmão, e de linfócitos T CD8+ no pulmão. No baço, observamos uma diminuição das populações de linfócitos T CD4+, T CD8+ e B. A quantificação de células expressando citocinas mostrou: aumento da expressão de RANTES em todos os órgãos; um equilíbrio entre a produção das citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IFN-γ) e anti-inflamatórias (IL-10 e TGF-β) no fígado, rim e pulmão; aumento das citocinas pró-inflamatórias e diminuição das anti-inflamatórias no baço e o perfil oposto no tecido cardíaco, com predomínio da detecção de TGF-β. Além disso, avaliamos o efeito da infecção com DENV-2 em camundongos BALB/c inoculados pelas vias intraperitoneal (i.p.) e intravenosa (i.v.). A análise histopatológica do fígado e baço destes animais revelou alterações semelhantes às observadas nos casos de dengue (áreas de edema e hemorragia, esteatose, necrose e tumefação no fígado, e desorganização da arquitetura dos folículos no baço). De um modo geral, a inoculação pela via i.p. induziu danos em áreas focais, enquanto a via i.v. provocou lesões mais difusas em ambos os tecidos. Entretanto, essas diferenças entre as vias de inoculação não se refletiram em diferenças nas subpopulações de linfócitos. Verificamos que, em ambos os casos, as alterações das subpopulações linfocitárias ocorreram já no segundo dia de infecção. A quantificação dessas subpopulações revelou uma diminuição de linfócitos B totais e um aumento de linfócitos T CD4+ totais no fígado dos camundongos infectados, enquanto que no sangue, observamos um comportamento inverso dessas subpopulações. Já no baço, verificamos uma diminuição da subpopulação de linfócitos T CD8+ totais e um aumento de linfócitos T CD8+ ativados nos animais com 2 dias de infecção. De um modo geral, tais resultados poderão contribuir para um melhor entendimento da doença e para a validação do modelo experimental murino em novas abordagens vacinais ou terapêuticas. / Dengue is a serious worldwide public health problem among the diseases caused by arboviruses. Its etiologic agent, the dengue virus, comprises four antigenically distinct serotypes (DENV1-4). Dengue symptoms range from the dengue fever (DF) to the dengue hemorrhagic fever (DHF) and dengue shock syndrome (DSS). In the present work, we initiated a study with materials obtained from different organs (liver, spleen, lung, heart and kidney) of four dengue fatal cases. Histopathological analysis revealed, in all cases, areas with edema and hemorrhage; the presence of steatosis (micro and macrovesicular) and necrosis in the liver; degeneration of cardiac fibers; acute tubular necrosis of renal proximal convoluted tubules; destruction of the germinal centers and atrophy of lymphoid follicles in the spleen; thickened alveolar septa and hypertrophy of alveolar macrophages in the lungs of the four patients and also the presence of hyaline membrane in cases 1 and 2. Virus antigens were detected in all organs as well as an increase of mononuclear cell infiltration, with the increase of activated macrophages population and B lymphocytes in the kidney; predominance of only B lymphocytes in the heart; increased number of activated macrophages and CD4+ T cells in the liver and the lung, and of CD8+ T cells in the lung. In the spleen, we observed a decrease of CD4+ T, CD8+ T and B populations. The quantification of cells expressing cytokines showed: increase of RANTES expression in all organs, a balance between production of proinflammatory (TNF-α e IFN-γ) and anti-inflammatory (IL-10 and TGF-β) cytokines in the liver, kidney and lung; increase of proinflammatory and decrease of anti-inflammatory cytokines in the spleen, while the opposite profile was observed in the cardiac tissue, with the predominance of TGF-β. In addition, we evaluated the effect of DENV-2 infection in BALB/c mice inoculated by the intraperitoneal (i.p.) and intravenous (i.v.) routes. Histopathological analysis in the liver and the spleen of these animals showed alterations similar to those observed in the dengue cases (areas of edema and hemorrhage, steatosis, necrosis and swelling hepatocytes in the liver, as well as disorganization of splenic follicle architectures). In general, results indicated that the i.p. inoculation induced damages in focal areas, whereas the lesions caused by the i.v. route were more diffused in both tissues. However, these differences between the two inoculation routes were not reflected in differences in the lymphocyte subsets. We observed that changes in lymphocyte subpopulations occurred by the second day after infection in both cases. The quantification of these subpopulations revealed a decrease of total B lymphocytes and an increase of total CD4+ T cells in the liver of infected mice, whereas in the blood we were observed an inverse behavior of such subpopulations. In the spleen, we verified a decrease of the total CD8+ T lymphocyte subpopulation and an increased of activated CD8+ T cells, two days after infection. Overall, these results may contribute to a better understanding of the disease and to the validation of this murine experimental model for novel vaccine or therapeutic approaches.

Made available in DSpace on 2016-03-04T13:55:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 11.pdf: 2838569 bytes, checksum: ff9adb4c0a3745d7fcf024b9e53b8b37 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O gerenciamento de riscos à qualidade é um processo sistemático de avaliação, controle, comunicação e revisão dos riscos à qualidade, sendo um componente valioso de um sistema da qualidade efetivo e robusto. Visando uma abordagem pró-ativa do monitoramento dos controles existentes e das ações implementadas para o controle dos riscos dos processos produtivos de Bio-Manguinhos, realizou-se um estudo de caso do insumo farmacêutico ativo (IFA) da vacina febre amarela, cujo objetivo foi propor uma metodologia para o monitoramento deste processo produtivo através dos resultados obtidos no gerenciamento de riscos à qualidade. O IFA produzido no Laboratório de Febre Amarela (LAFAM) do Departamento de Vacinas Virais (DEVIR), é obtido a partir da cepa atenuada 17DD do vírus da febre amarela cultivada em ovos embrionados de galinha spf (ovos livres de agentes patogênicos específicos) e este é utilizado na produção da vacina febre amarela, que atualmente encontra-se com a tecnologia 100% brasileira. O LAFAM é uma unidade reconhecida internacionalmente como fabricante da vacina antiamarílica. Devido à sua importância para Bio-Manguinhos, somado à experiência e conhecimento dos especialistas do Instituto no processo, este foi o primeiro IFA a ter uma avaliação de riscos das etapas do processo produtivo através da ferramenta FMEA (Failure Mode and Effect Analysis). Para alcançar o objetivo proposto, utilizou-se a folha de verificação que é uma ferramenta da qualidade, tendo como critério para o monitoramento das atividades, os controles existentes e as ações implementadas para o controle dos riscos com as suas respectivas frequências, que foram definidas de acordo com o nível do modo de falha identificados na avaliação de riscos do processo produtivo. Como resultado do estudo, foram elaboradas 9 folhas de verificação, sendo uma para cada etapa do processo produtivo, além da metodologia para o monitoramento, foram sugeridas propostas de melhoria nos documentos internos (protocolos) usados para o registro do processo produtivo. A utilização da folha de verificação, mesmo na ausência de aplicação desta, demonstrou ser bastante útil na medida em que se tem a necessidade de saber com que frequência certos eventos acontecem? e para obter dados factíveis da efetividade dos controles existentes e das ações implementadas para controlar os riscos dos modos de falhas identificados neste processo. Devem ser realizados estudos futuros para a revisão das folhas de verificação com o objetivo de propor novos monitoramentos e/ou novas ferramentas, ampliando o escopo da metodologia, que venha a abranger efetivamente todas as etapas críticas do processo e que esta possa ser implementada em outros processos produtivos de Bio-Manguinhos que já tenham o seu mapeamento concluído. / The quality risk management is a systematic process of evaluation, control and review of risks that could be related to quality, it is an important component of an effective and robust quality system. Aiming a proactive approach of monitoring, existing controls and implemented actions to control the risks of Bio-Manguinhos’ manufacture processes, were conducted a case study of Active Pharmaceutical Ingredient (API) of yellow fever vaccine. The objective of this study was suggesting a methodology to monitor this process based on the quality risk management results. The API produced in Yellow Fever Lab of Viral Vaccines Department is obtained from 17DD, attenuated strain of yellow fever virus, grown in chicken embryonic SPF eggs (Specifics Pathogens Free) and this API is used on the yellow fever vaccine, that actually is produced by a 100% Brazilian technology. The Yellow Fever Lab is internationally recognized as the lab of vaccine against yellow fever. Due to its importance to Bio-Manguinhos and the experience and knowledge of its staff, this was the first API to have a risk evaluation of the manufacture process based on FMEA (Failure Mode and Effect Analysis) tool. To achieve the proposed objective, the check sheet was used which is a tool having as criteria for monitoring activities, the controls and the actions taken to control the risks with their respective frequencies, that were defined considering the identified fail mode level during the manufactured process risk evaluation. The results of this study allow the elaboration of 9 check sheets, one for each manufacture process step, besides of monitoring methodology, were suggest improvement proposals in the internal documents (forms) that are used to record the manufacture process. The check sheet utilization, even if in the absence of its application, demonstrated that is very useful when we have to know what is the frequency that certain events occurs? And to obtain real data of effectiveness of existent controls and implemented actions to control the risks of fail modes identified during this process. Future studies should be conducted to review the check sheets in order to propose new monitoring and / or new tools, expanding the scope of the methodology, which will effectively cover all critical process steps and that can be applied in other to manufacture processes of Bio-Manguinhos which have already your completed mapping.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edmeia de paula.pdf: 2653466 bytes, checksum: ad9e1a87d15b9af7be8e8cea4757bf4f (MD5) Previous issue date: 2010-04-15 / Brazilian Spotted Fever (BSF) is an acute, infectious, febrile disease of varying severity, its course ranging from asymptomatic cases to severe clinical forms with a high lethality rate. The absence of pathognomonic signs in this anthropozoonosis often results in late diagnosis, thereby serving as a stimulus for investigators to focus their attention on the weakest link of its epidemiological chain, the vector. In Brazil, the principal vector of Rickettsia rickettsii, the etiological agent of spotted fever in the New World, is the ixodid tick Amblyomma cajennense. In the present study, a systematic literature review was performed to search for publications on the epidemiology of BSF in the country. With the objective of improving control of the vector, its resistance to the principal acaricides applied against this tick was monitored. The systematic literature review was performed by searching for scientific papers dealing with BSF in the Cochrane Library, LILACS, MEDLINE and SciELO databases, using the keywords Amblyomma cajennense, Brazilian spotted fever and Rickettsia rickettsii. The search included articles published in English and Brazilian Portuguese that contained these keywords. To evaluate susceptibility and resistance to the synthetic acaricides, larvae had to be obtained from engorged female specimens of A. cajennense collected from naturally infested horses that had been free of acaricidal residue for at least 45 days, on farms belonging to five municipalities of the state of Goiás (Caldas Novas, Hidrolândia, Goiás, Terezópolis and Goiânia). The larvae were exposed to different concentrations of 12 commercially available acaricidal formulations using the larval packet test (LPT). The possible development of resistance of adult specimens of A. cajennense to the pyrethroid deltamethrin, the principal acaricide on the market in Goiás for the control of ticks in the region, was also evaluated. Unfed adult male and female specimens of A. Cajennense were collected on leaves of bushes along a nature trail in the municipality of Caldas Novas, Goiás, Brazil. They were immersed in different concentrations of deltamethrin and then placed in contact with filter paper impregnated with the substance. The control groups were exposed to distilled water alone. The bioassays were performed in quadruplicate at a temperature of 27oC, relative air humidity >80% and 12-hour light/dark cycles. From the systematic literature review, it was found that there are no records or even systematic studies of BSF in Brazil up to the present moment and the number of cases reported in the literature is lower than the figures published by the health surveillance authorities of the Ministry of Health. The data collected in this review should serve to stimulate investigators to design new studies and carry out further work, since the distribution of this disease may be more widespread than is currently supposed. Results from the bioassays showed a mean percentage of mortality ( ) of 72.6% of the adult specimens after 24 hours of exposure to the dose of deltamethrin prescribed by the manufacturer, characterizing a status of resistance to deltamethrin. The males were found to be more susceptible to this pyrethroid compared to the females. of 82%, 89%, 89.6% and 90% of the larvae were obtained, respectively, with deltamethrin, cypermethrin + piperonyl butoxide, amitraz and permethrin, characterizing a status of probable resistance of the larvae to these acaricides. The combination of cypermethrin with citronellal and with piperonyl butoxide did not significantly affect the lethal capacity of this pyrethroid against the larvae of this vector. Significant mortality was not found in the control groups (p = 0.05). These results encourage new studies to be conducted to develop alternative methods of integrated control of this vector that would be more effective and have less harm on the environment. / A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa febril aguda, de gravidade variável, podendo cursar desde formas assintomáticas até formas graves, com elevada taxa de letalidade. A ausência de sinais patognomônicos nesta antropozoonose, que muitas vezes leva ao seu diagnóstico tardio, suscita o ataque do elo mais fraco de sua cadeia epidemiológica seu vetor. No Brasil, o principal vetor da Rickettsia rickettsii, agente etiológico da Febre Maculosa da Região Neotropical é o ixodídeo Amblyomma cajennense. Neste trabalho foi feita uma revisão sistemática da literatura abordando a temática da epidemiologia da FMB no Brasil. Com finalidade de subsidiar o controle do vetor monitorou-se a resistência do mesmo aos principais produtos acaricidas utilizados em seu controle. A revisão sistemática da literatura foi feita utilizando artigos científicos que abordam a temática da FMB no Brasil, pesquisando nas bases de dados Biblioteca Cochrane, LILACS, MEDLINE e SciELO. Utilizando como descritores Amblyomma cajennense; Febre Maculosa; Rickettsia rickettsii. Participaram da revisão artigos publicados na língua inglesa e portuguesa do Brasil que apresentaram os descritores. Na parte experimental para avaliar a suscetibilidade e resistência dos acaricidas químicos sintéticos, fo ram obtidas larvas de teleóginas de A. cajennense. Estas foram coletadas de cavalos naturalmente infestados e livres de resíduos acaricidas há pelo menos 45 dias, em fazendas pertencentes a cinco municípios do Estado (Caldas Novas, Hidrolândia, Goiás, Terezópolis e Goiânia). As larvas foram expostas a diferentes concentrações das 12 formulações acaricidas comerciais, pelo método de Larval Packet Test (LPT). Para verificar o possível desenvolvimento de resistência de adultos de A. cajennense ao piretroide deltametrina, principal base carrapaticida comercializada em Goiás para o controle de carrapatos na região. Machos e fêmeas, adultos, de A. cajennense em jejum foram coletados em folhas de arbustos em uma trilha ecológica, no município de Caldas Novas, Goiás, Brasil. Estes foram submetidos a diferentes concentrações de deltametrina, através de imersão e posterior contato com papel filtro impregnado. Os grupos controles foram submetidos apenas à água destilada. Os bioensaios foram realizados em quadruplicata, a 27ºC, UR > 80% e 12h de luz. Através da Revisão Sistemática da Literatura verificou-se que não há registros ou mesmo estudos sistemáticos da Febre Maculosa no Brasil; até o momento o número de casos relatados na literatura são inferiores aos que a Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde tem divulgado. Os dados levantados pela revisão sugerem que novas investigações e estudos sejam feitos, pois a distribuição desta doença pode ser mais ampla do que se supõe. Foi observado, nos bioensaios, que a mortalidade média percentual ( ) de 72,6% dos adultos após 24 h de exposição à dosagem de deltametrina prescrita pelo fabricante, caracterizando o status de resistência à deltametrina. Os machos mostraram-se mais suscetíveis que as fêmeas ao piretroide. de 82%, 89%, 89.6% e 90% das larvas foram obtidas, respectivamente, por deltametrina; cipermetrina + butóxido de piperolina; amitraz e permetrina, caracterizando o status de provável resistência larval a estes acaricidas. As associações de cipermetrina com citronelal e com butóxico de piperolina não interferiram significativamente na capacidade letal desse piretroide para larvas do vetor. Mortalidade significativa não foi evidenciada nos grupos controles (p = 0,05). Os resultados suscitam a realização de estudos para o desenvolvimento de medidas alternativas de controle integradas, mais eficientes e de menor impacto ambiental, para o controle deste vetor.

Orientador: Cristina de Campos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Geociências / Made available in DSpace on 2018-08-22T20:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HernandezTasco_Aleidys_M.pdf: 2499047 bytes, checksum: 236f6901a7068d237ee969ad03880acc (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Em 1927 a luta contra a febre amarela parecia finalizada no continente americano. A Fundação Rockefeller, instituição filantrópica estadunidense que tinha como principal objetivo o combate da febre amarela na primeira metade do século XX, assegurava que a doença estava quase erradicada. No entanto, a ocorrência das epidemias de febre amarela no Rio de Janeiro em 1928 (Brasil) e em Socorro em 1929 (Colômbia), colocou em dúvida as medidas profiláticas recomendadas e aplicadas tanto pelos órgãos nacionais de Saúde Pública como os da Fundação Rockefeller que participou da luta contra essa doença em ambos os países. Ao mesmo tempo em que ocorriam as epidemias, uma controvérsia instalou-se em torno à descoberta de Stokes, Bauer e Hudson na África, em 1927, que demonstrou que a febre amarela era facilmente inoculável no Macacus Rhesus. Tal descoberta acabou por rejeitar a concepção etiológica estabelecida em 1919 por Noguchi. A nova descoberta dos pesquisadores, as epidemias e a rejeição da teoria de Noguchi geraram uma enorme desconfiança na época, dando a sensação de que nada era seguro em assuntos relacionados à febre amarela, despertando uma crise nos estudos da doença. Esta pesquisa assume a responsabilidade de fazer um estudo comparativo a partir da ciência, da política e da técnica que ambos os países usaram no combate à doença, com intuito de conhecer as experiências desenvolvidas com o fenômeno da febre amarela. Assim, a dissertação tem dois objetivos principais. Primeiro, analisar o processo histórico da febre amarela, a fim de entender a crise que predominou nos estudos da doença entre os anos de 1927 e 1930. Para isso iremos analisar os múltiplos atores locais, nacionais e internacionais no domínio teórico e técnico da doença, durante a epidemia de febre amarela no Rio de Janeiro, em 1928-29, e em Socorro, em 1929. O segundo objetivo é analisar as manifestações científicas contra o avanço da febre amarela no Brasil e na Colômbia, a partir das duas últimas grandes epidemias registradas no Rio de Janeiro (1928-1929) e em Socorro (1929), através das tensões entre o ideal de uma ciência médica universal, representada pela Fundação Rockefeller e pelas Conferências Pan-Americanas, e as práticas de saúde pública, representadas por médicos e pesquisadores, elaboradas localmente para minimizar o alcance da febre amarela no período de 1930 a 1948 / Abstract: In 1927 the fight against yellow fever seemed to have concluded in American continent. In the first half of the twentieth century, a philanthropic American organization had as primary goal the fight against that outbreak (The Rockefeller Foundation) and, they ensured that epidemic was almost completely eradicated in that time. Nonetheless, two yellow fever outbreaks recorded in Rio de Janeiro in 1928 (Brazil) and Socorro in 1929 (Colombia) put in doubt the prophylactic measures recommended and implemented by the National Agencies of Public Health and the Rockefeller Foundation. This later institution took part in the fight against the disease in both countries. A controversy was established, while those epidemics took place in both countries, due to the discovery made by Stokes, Bauer e Hudson in Africa in 1927, which demonstrated Macacus Rhesus could be easily inoculated with the virus of yellow fever. That discovery eventually rejected the etiological agent theory established by Noguchi in 1919. In this fashion, with the new discovery, the epidemics and the rejecting of Noguchi's theory, a huge distrust grew up in those days, giving the impression that nothing was safe in issues related to yellow fever, and generating a crisis in studies of disease. Therefore, a comparative study from science, policy and technical that both Colombia and Brazil used in fighting against disease is carried out in this research in order to know the experiences developed with the yellow fever. In this manner, this dissertation has two mains objectives. First, the historical process of yellow fever will be analyzed by this research to understand the crisis that prevailed in studies of that disease between 1927 and 1930. For this reason, the multiple local actors, national and international in theoretical and technical field of the disease were analyzed during yellow fever outbreak in 1928-29 in Rio de Janeiro and in 1929 in Socorro. Second, several scientific manifestations against the progress of yellow fever in Brazil and Colombia were also studied from the last two major epidemics recorded in Rio de Janeiro (1928-1929) and Socorro (1929). Thus, controversies between an ideal of universal medical science represented by Rockefeller Foundation and Pan-American Conference, and the local public health practices developed to minimize the propagation of yellow fever in the period between 1930 and 1948 / Mestrado / Politica Cientifica e Tecnologica / Mestra em Política Científica e Tecnológica

O risco de transmissão placentária para o feto, associados à susceptibilidade de neuroinvasão pelo vírus 17D levaram à recomendação de que a vacina contra febre amarela (FA) não fosse administrada durante a gravidez. Pretendeu-se avaliar o efeito desta no desempenho gestacional de camundongos prenhes. Os resultados mostraram decréscimo na viabilidade fetal causado pela vacinação. Reatividade ao antígeno da FA foi observada nos tecidos hepáticos maternos e de fetos vivos. Na placenta, o antígeno viral não foi observado na barreira materno-fetal. Nos fetos natimortos e em reabsorção, esta passagem pareceu mais acentuada; reatividade foi observada em diversos órgãos. O antígeno viral foi detectado em todas as regiões placentárias. A detecção de RNA viral nas amostras indica que há atividade viral nos tecidos fetais. Nossos achados indicam que há fases gestacionais mais susceptíveis à infecção viral vacinal e que podem determinar perdas fetais. A presença do antígeno e de atividade viral no fígado fetal sugere que o vírus vacinal é transmitido da mãe para o feto. / The risk of placental transmission to the fetus, associated with susceptibility to neuroinvasion of the 17D virus led to the recommendation that the vaccine against yellow fever (YF) was not administered during pregnancy. Intended to evaluate the effect of the vaccine in gestational performance of pregnant mice. The results showed a decrease in fetal viability caused by vaccination. Antigen reactivity of YF was observed in maternal and live fetuses liver tissue. In the placenta, the viral antigen was not observed in maternal-fetal barrier. In the stillborn fetuses and resorption, this passage seemed more pronounced; reactivity was observed in several organs. The viral antigen was detected in all placental regions. The detection of viral RNA in the samples indicates that there is viral activity in fetal tissues. Our findings indicate that there are stages of pregnancy more susceptible to viral vaccine infection that could determine fetal loss. The presence of the antigen and viral activity in fetal liver suggests that the vaccine virus is transmitted from mother to fetus.