Orientador: Luzia Helena Queiroz / Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Cáris Maroni Nunes / Resumo: Considerando que a práxis docente na educação básica abrange educação em saúde, esta pesquisa teve como objetivo avaliar o resultado de ações de educação em saúde oferecidas por meio de um curso de formação continuada, com atividades a distância por meio do Ambiente Virtual de Aprendizagem TelEduc e encontros presenciais, para docentes da rede municipal de Ensino Fundamental I de Araçatuba-SP. O curso foi organizado em duas fases, sendo a Fase I subdivida em módulos de temas como ambientação tecnológica, doenças transmitidas por vetores, doenças transmitidas por cães e gatos, higiene de alimentos, posse responsável e educação em saúde na escola e a Fase II para elaboração e aplicação de projetos educativos. Conhecimentos específicos dos docentes sobre dengue, febre amarela e leishmaniose, foram comparados antes e após o curso, observando-se um crescimento estatisticamente significante no conhecimento sobre estas doenças (p<0,0001) com destaque para as questões relativas ao agente etiológico das doenças, sintomas no homem e medidas de prevenção. A prática de aplicação do projeto educativo teve como critério as ações de multiplicação feitas pelo público-alvo. A experiência de multiplicação dos professores envolveu escolares, que diagnosticaram os problemas por meio de mapa falante e promoveram ações educativas no bairro, destacando-se, dentre outras: peças teatrais, atividades artísticas, mutirão de limpeza e elaboração e distribuição de panfletos em passeata. Conclui-se que a formação continuada de docentes, por meio de cursos semipresenciais, proporciona conhecimentos, impulsiona-os a motivar os educandos a adotar medidas de controle de vetores, cuidar do meio ambiente e sensibilizar a comunidade, colaborando para o controle de doenças / Abstract: Considering that the educational praxis on basic education level also includes health education, our purpose was to evaluate the results of an online semi-present continued formation program, directed to teachers from Fundamental I Education level in Araçatuba-SP. The course was organized in two parts, with the Part I divided in themes as technological environment, vector borne diseases, diseases transmitted by dogs and cats, food hygiene, responsible ownership and health education in school and Part II reserved for elaboration and application of educative projects. The specific knowledge about dengue, yellow fever and leishmaniasis was compared before and after the attendance to a course with distance and present classes. Tests showed a statistically significant positive inversion in the knowledge about the studied diseases (p<0.0001) after the course, with emphasis to questions related to diseases etiological agents, symptoms in man and prevention measures. The application of practical educative projects was evaluated by multiplicative actions involving target public. The experience of knowledge multiplication included teachers and students which detected the problems by using talking maps and promoted education actions in their neighborhood, specially mimic plays artistic activities, group cleaning activities and elaboration and distribution of educational material in public demonstrations. We conclude that continuing education using semi-present courses, provides new knowledge to the teachers, impelling them to motivate their students to adopt vectors control measures and environmental cares and to sensitive the community, collaborating this way to control diseases / Mestre

A dengue é a mais importante arbovirose no mundo; aproximadamente 50 milhões de infecções ocorrem anualmente acarretando 500.000 casos de dengue hemorrágica e 22.000 mortes. A febre amarela é uma doença hemorrágica viral com elevada mortalidade que é transmitida por mosquitos. Vacinas eficazes contra a febre amarela já estão disponíveis há quase 70 anos e são responsáveis por uma redução significativa de ocorrências da doença no mundo, no entanto, cerca de 200.000 casos de febre amarela ainda ocorrem anualmente, principalmente na África. Dessa forma, o desenvolvimento de fármacos antivirais contra essas viroses é uma prioridade de saúde pública. Os produtos naturais sejam de origem vegetal ou animal, possuem uma extensa diversidade química, sendo uma fonte inesgotável de compostos com promissoras atividades biológicas. No Brasil, é grande a incidência de animais venenosos ou peçonhentos, tais como serpentes, sapos e escorpiões. Os venenos desses animais são fontes de diversas substâncias químicas que ainda não possuem a sua atividade biológica e farmacológica completamente estudada. Neste trabalho avaliamos a potencial ação antiviral de peçonhas de serpentes (Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararacussu, Bothrops jararaca, Bothrops pirajai, Bothrops moojeni, Bothrops brasili e Bothrops fonseca) e escorpião (Tityus serrulatus) contra os virus da febre amarela e dengue usando diferentes estratégias metodológicas (pré-tratamento, pós-tratamento, virucida, adsorção e internalização). Primeiramente realizamos um screening com as peçonhas brutas, observando que a peçonha de Crotalus durissus terrificus inibiu a replicação viral apresentando os maiores índices de seletividade (IS). Crotoxina, crotamina, crotapotina, convulxina, giroxina, PLA2-CB e PLA2-IC, isoladas de Crotalus durissus terrificus, foram então testadas nas diferentes estratégias metodológicas contra os vírus dengue e febre amarela. Foi possível verificar que crotoxina, PLA2-CB e PLA2-IC inibiram a replicação viral com altos índices de seletividade (IS). A ação verificada ocorreu na fase inicial do ciclo de replicação viral (pré-tratamento, virucida, adsorção). A ação antiviral verificada neste estudo foi atribuida a ação da PLA2, visto que a crotoxina é um complexo protéico composto pela crotapotina e pela PLA2-CB. Posteriormente avaliamos uma fosfolipase sem atividade catalítica isolada de Bothrops jararacussu, a BthTX-I. Essa fosfolipase apresentou baixa inibição da replicação viral, sugerindo que a atividade catalítica da fosfolipase é importante, mas possivelmente não a única responsável pela ação antiviral. Os resultados obtidos permitem sugerir também que as fosfolipases apresentam ação tanto sobre a partícula viral quanto sobre receptores celulares, o que justifica os altos índices de seletividade observados. / Dengue is the most important arbovirus disease in the world; nearly 50 million infections occur annually resulting in 500,000 cases of DHF and 22,000 deaths. Yellow fever is a viral haemorrhagic fever with high mortality that is transmitted by mosquitoes. Effective vaccines against yellow fever have been available for almost 70 years and are responsible for a significant reduction of the disease worldwide. However, about 200,000 cases of yellow fever still occur annually, mainly in Africa. Thus, the development of antiviral drugs against these viruses is a public health priority. Natural products of plant or animal origin have an extensive chemical diversity, and an inexhaustible source of compounds with promising biological activities. In Brazil, there is a high incidence of poisonous or venomous animals such as snakes, frogs and scorpions occur. The venoms of these animals are a source of several chemicals that does not possess biological and pharmacological activity completely studied. In this study, we assess the potential antiviral action of snake venom (Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararacussu, Bothrops jararaca, Bothrops pirajai, Bothrops moojeni, Bothrops brasili and Bothrops fonseca) and Scorpion (Tityus serrulatus) against yellow fever and dengue viruses using different methodological strategies (pre-treatment, post-treatment, virucidal, adsorption and internalization). First, we performed a screening with the crude venoms, founding that the venom of Crotalus durissus terrificus inhibited viral replication showing the highest selectivity index (SI). Crotoxin crotamin, crotapotin, convulxin, gyroxin, PLA2-CB and PLA2-IC isolated from Crotalus durissus terrificus, were then tested in the different methodological strategies against dengue and yellow fever viruses. We found that crotoxin, PLA2-CB and PLA2-IC inhibited viral replication with high SI. The action of these compounds against the virus was at the first steps of the replication cycle (pre-treatment, virucidal, adsorption). The antiviral action observed in this study was attributed to the action of PLA2, since crotoxin is a protein complex composed of crotapotin and PLA2-CB. Afterwards, we evaluated a phospholipase without catalytic activity isolated from Bothrops jararacussu, the BthTX-I. This phospholipase showed low inhibition of viral replication, showing that the catalytic activity of phospholipase is important, but perhaps not the only one responsible for the antiviral action. Our results also suggest that phospholipases have action on the viral particle and on cell receptors, which explains the high levels of selectivity observed.

Estudos recentes demonstraram a existência de Rickettsia felis, riquétsia do Grupo da Febre Maculosa, em sangue de pacientes com quadro clínico compatível com a doença e em pulgas infectadas. Este projeto visa determinar a prevalência de R. felis em vetores (pulgas e carrapatos) e em potenciais reservatórios (gambás, cães, gatos, eqüinos e humanos), procedentes de áreas endêmicas (Mogi das Cruzes, Pedreira, Piracicaba e São Paulo), e não endêmicas (Pirassununga) para FM no Estado de São Paulo. Foram utilizados métodos moleculares (reação em cadeia pela polimerase e sequenciamento de DNA), diagnóstico sorológico e cultivo celular. Em gambás capturados (Didelphis aurita e Didelphis albiventris) foram colhidas 312 pulgas, pertencentes às Famílias Pulicidae (141), Rhopalopsyllidae (170) e Ctenophthalmidae (1) e 709 carrapatos (Amblyomma spp e Ixodes loricatus). Nos cães foram colhidos 212 pulgas (Ctenocephalides felis felis) e 115 carrapatos (Amblyomma cajennense, Amblyomma aureolatum e Rhipicephalus sanguineus). Nos gatos foram colhidos 66 pulgas (59 C. felis felis e 7 Rhopalopsyllus lutzi lutzi) e 10 carrapatos (R. sanguineus e Amblyomma spp). A colheita de sangue foi realizada em 94 gambás, 55 cães, 25 gatos, 85 eqüinos e 238 humanos. Rickettsia felis foi detectada em 42-45,8% das pulgas C. felis felis de gambás, cães e gatos; em 4% das pulgas Polygenis (N) atopus de gambás e em 1,8% e 0,7% de carrapatos I. loricatus e Amblyomma spp, respectivamente, colhidos de gambás. Rickettsia bellii foi detectada em carrapatos I. loricatus (59,1%), A. dubitatum (8,7%) e Amblyomma spp (0,9%) e em uma pulga P. (N.) atopus (1%). Não foi possível a detecção de infecção por Rickettsia spp em sangue dos animais e humanos. Contudo, constatou-se presença anticorpos frente aos antígenos de Rickettsia rickettsii, Rickttesia parkeri, R. felis e R. bellii nas áreas estudadas. A titulação obtida sugere infecção por R. rickettsii em gambás, cães, eqüinos e humanos e por R. parkeri em gambás, cães e eqüinos. R. felis e R. bellii foram isoladas e cultivadas com a utilização de células C6/36 e VERO, respectivamente. / Recent studies have showed the presence of Rickettsia felis, a spotted fever group Rickettsiae, in human blood with clinical signs compatible with spotted fever and in infected fleas. This work aims to determine the prevalence of R. felis in potential vectors (fleas and ticks) and reservoirs (opossums, dogs, cats, equines and humans) from endemic (Mogi das Cruzes, Pedreira, Piracicaba e São Paulo), and non-endemic (Pirassununga) areas for spotted fever in the State of São Paulo. Molecular probes (polimerase chain reaction and DNA sequencing), serologic diagnoses and cell culture were used. From trapped opossums (Didelphis aurita and Didelphis albiventris) a total of 312 fleas, belonging to Family Pulicidae (141), Rhopalopsyllidae (170) and Ctenophthalmidae (1) and 709 ticks (Amblyomma spp and Ixodes loricatus) were collected. On dogs a total of 212 fleas (Ctenocephalides felis felis) and 115 ticks (Amblyomma cajennense, Amblyomma aureolatum and Rhipicephalus sanguineus) were collected. On cats, 66 fleas (59 C. felis felis and 7 Rhopalopsyllus lutzi lutzi) and 10 ticks (R. sanguineus and Amblyomma spp) were collected. Blood samples were collected from 94 opossums, 55 dogs, 25 cats, 85 equines and 238 humans. Rickettsia felis was detected in 42-45,8% of the C. felis felis collected on opossums, dogs and cats. This same Rickettsia species was detected in 4% of Polygenis (N.) atopus fleas, and 1,8% and 0,7% of I. loricatus and Amblyomma spp ticks, respectively, collected from opossums. Rickettsia bellii was found in ticks I. loricatus (59,1%), A. dubitatum (8,7%) and Amblyomma spp (0,9%) and in a flea P. (N.) atopus (1%). No Rickettsia DNA was detected in animal or human blood samples. However antibodies against Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri, R. felis and R. bellii were detected in all locations. The titers suggest infection by R. rickettsii in opossums, dogs, equines and humans and by R. parkeri in opossums, dogs and equines. R. felis and R. bellii were isolated and cultivated with the C6/36 and VERO cells, respectively.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:53:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ADRIANE FEITOSA VALADARES.pdf: 954155 bytes, checksum: a974324b3ec7a29cee64b580f03ab47f (MD5) Previous issue date: 2012-11-27 / Dengue is a growing public health issue worldwide. As a result of their environmental, climatic and social characteristics, tropical countries are those most affected. The objectives of the present study conducted in the state of Tocantins, Brazil, were: to identify the demographic characteristics of notified and confirmed cases of dengue; to calculate the incidence rate of confirmed cases of dengue; to investigate the correlation between confirmed cases and the number of hospitalizations for this disease; to correlate the number of hospitalizations and the number of severe cases; to describe the circulating serotypes identified; to investigate the correlation between the house infestation index and the incidence rate of dengue; and to investigate the correlation between environmental factors such as mean annual temperature and mean rainfall with the annual incidence rate of dengue. This was an ecological, longitudinal study conducted by evaluating secondary data for the 2000- 2010 period obtained from the Brazilian Ministry of Health s notifiable diseases database, the yellow fever and dengue database, the localities database, the hospital admissions database and from the dengue and yellow fever management unit of the Tocantins State Health Department. The mean temperatures in degrees Celsius and the mean rainfall in millimeters were supplied by the National Meteorology Institute. The data on viral isolation and serotyping were obtained from the Tocantins Central Public Health Laboratory. The inclusion criterion adopted in this study consisted of municipalities in the state of Tocantins with populations of more than 100,000 inhabitants in this case, Palmas and Araguaína. A total of 48,246 suspected cases of dengue were notified during the period and 23,614 (49%) were confirmed. Of these, 118 (0.5%) were classified as severe cases and 7 deaths occurred (5.9%). The highest prevalence of the disease occurred in females (52.9%), in individuals of 20-39 years of age (46.5%), in those living in urban areas (97.6%) and in brown-skinned individuals (51.5%). There was a statistically significant difference (p<0.05) between the variables evaluated. The highest incidence of dengue occurred in 2007; however, the greatest number of severe cases registered was in 2008, although no deaths were recorded. Of the hospitalized patients, 13% were classified as severe cases. There was a positive and significant correlation between the number of confirmed cases and the number of hospitalizations (r = 0.77; p < 0.05), as well as between hospitalizations and severe cases (r = 0.79; p < 0.05). The serotypes isolated were DENV 1, DENV 2 and DENV 3. There was a positive, albeit non-significant, correlation between the house infestation index and the incidence of the disease (r = 0.59; p > 0.05). With respect to the abiotic factors, no correlation was found between mean rainfall or mean annual temperature and the incidence rate. In conclusion, the highest incidence of dengue occurred in 2007 and the greatest number of severe cases occurred in 2008, albeit with no deaths. These findings indicate that dengue affects predominantly females, individuals of 20-39 years of age, brown-skinned individuals and those residing in urban areas. The correlation between confirmed cases and hospitalizations was significant, as was the correlation between hospitalizations and severe cases of dengue. The serotypes identified were DENV 1, DENV 2 and DENV 3. More than one serotype was circulating simultaneously. The correlations between mean rainfall and the incidence rate and between mean temperature and the incidence rate were not statistically significant. / A dengue é um problema crescente de saúde pública mundial. Os países tropicais são os mais atingidos em razão de suas características ambientais, climáticas e sociais. Os objetivos deste estudo foram: Identificar as características demográficas dos casos notificados e confirmados da dengue; Calcular o coeficiente de incidência dos casos confirmados da dengue; Investigar a associação entre os casos confirmados da dengue e o número de internações por este agravo, assim como correlacionar o número de internações por dengue e o número de casos graves; descrever os sorotipos circulantes identificados; investigar a associação entre o índice de infestação predial e o coeficiente de incidência da dengue; investigar a associação entre os fatores ambientais como temperatura anual média e precipitação pluviométrica média com o coeficiente de incidência anual da dengue. Tratase de um estudo ecológico e longitudinal com a utilização de dados secundários referentes ao período de 2000 a 2010, obtidos do Sistema de Informação de Agravos de Notificação; Sistema de Informação de Febre Amarela e Dengue, Sistema de Informação de Localidades. Sistema de Informação Hospitalar e da Gerência do Núcleo de Dengue e Febre Amarela da Secretaria de Estado da Saúde do Tocantins. As médias de temperatura em graus Celsius e de precipitação pluviométrica em milímetros foram fornecidas pelo Instituto Nacional de Meteorologia. Os dados referentes ao isolamento viral e sorotipagem foram obtidos no Laboratório Central de Saúde Pública do Tocantins. Foi adotado como critério de inclusão municípios com população acima de 100.000 habitantes, neste caso, Palmas e Araguaína. Foram notificadas 48.246 suspeitos de dengue, sendo confirmadas 23.614 (49%), destes 118 (0,5%) foram classificados como casos graves de dengue, e 07 óbitos (5,9%). A maior prevalência da doença ocorreu entre pessoas do sexo feminino (52,9%), na faixa etária de 20 a 39 anos (46,5%), que viviam na zona urbana (97,6%) e da raça parda (51,5%). Houve diferença significativa (p<0,05) entre as variáveis estudadas. A maior incidência da dengue ocorreu em 2007, porém, o maior registro de casos graves foi em 2008, sem registro de óbitos. Dos pacientes internados, 13% foram classificados como caso grave. Houve associação positiva e significativa entre os casos confirmados e número de internações (r=0,77 p<0,05), bem como entre as internações e casos graves (r=0,79 p<0,05). Os sorotipos isolados foram DENV 1, DENV 2 e DENV 3. Houve associação positiva, porém, não significativa entre o índice de infestação predial e a incidência da doença (r= 0,59 p>0,05). Em relação aos fatores abióticos não houve associação significativa entre a precipitação pluviométrica média e o coeficiente de incidência, assim como em entre a temperatura anual média e o coeficiente de incidência. Conclusão: A maior incidência de dengue ocorreu em 2007 e o maior número de casos graves em 2008, sem ocorrência de óbito. Conclui-se que a dengue acomete predominantemente pessoas do sexo feminino, com idade entre 20 39 anos, raça parda, e que residem na zona urbana. A associação foi significativa entre os casos confirmados e internações, assim como, entre internações e casos graves. Os sorotipos virais identificados foram DENV 1, DENV 2 e DENV 3. Ocorreu circulação simultânea de mais de um sorotipo. A associação não foi significativa entre a precipitação pluviométrica média e o coeficiente de incidência, assim como entre temperatura e o coeficiente de incidência

A dengue é uma arbovirose transmitida ao ser humano, através da picada de fêmeas do mosquito Aedes aegypti infectadas. A doença é endêmica em 112 países da África, das Américas, do Mediterrâneo, do Sudeste Asiático e do Pacífico Oeste. Conforme Estimativas da Organização Mundial de Saúde, 40% da população mundial vive em áreas de risco para dengue. A caracterização molecular contribui para compreender e acompanhar a diversidade genética do Dengue virus, assim como, a variabilidade da virulência dos isolados virais circulantes. Em Minas Gerais, circulam os quatro sorotipos do Dengue virus, porém poucos estudos vêm sendo realizados sobre sua dinâmica populacional. O isolado BR/Alfenas/2012, analisado neste estudo, foi obtido a partir da amostra de soro de um paciente com febre hemorrágica da dengue. A região codificadora da proteína E e NS5 foram amplificadas por RT-PCR e utilizadas nos estudos filogenéticos. As análises agruparam este isolado no genótipo V, linhagem L1, próxima a isolados provenientes do Rio de Janeiro, do Norte do Brasil e outros isolados da Venezuela e Colômbia. A análise filogeográfica forneceu evidências que o isolado BR/Alfenas/2012 é descendente direto de amostras do Rio de Janeiro de 2010 e 2011, tendo como ancestral comum o isolado DENV-1/VE/BID-V2468/2008, proveniente da Venezuela. A análise da região codificadora da proteína E, mostrou que o isolado BR/Alfenas/2012 apresenta uma diferença de 14 bases em relação aos outros isolados presentes no mesmo genótipo e linhagem, gerando desta forma, mutações sinônimas e não-sinônimas. Para caracterizar o potencial virulento desta amostra, camundongos Swiss foram infectados por via intraperitoneal com 1 x 104 unidades formadoras de placas. Sete dias pós-infecção os animais foram sacrificados e o fígado retirado para estudo histopatológico, onde os animais infectados apresentaram infiltrados inflamatórios, esteatose hepática, além de edema, hemorragia e pontos de necrose focais. Este é o primeiro relato do isolamento de DENV-1, no Sul do estado de Minas Gerais, o que possibilita iniciar uma inferência sobre a distribuição genética e diversidade desse vírus, nesta região. / Dengue virus is an arbovirus transmitted to humans through the bite of infected female Aedes aegypti mosquitoes. The disease is endemic in 112 countries in Africa, Americas, Mediterranean, South East Asia and Western Pacific. The World Health Organization estimates that 40% of the world population lives in areas at risk for dengue. Molecular characterization helps to understand and monitor the genetic diversity of DENV, as well as the variability in virulence of circulating viral isolated. The four serotypes of DENV circulate in Minas Gerais state, however few studies have been conducted about the population dynamics of DENV in this state. The isolate BR/Alfenas/2012 analyzed in this study was obtained from the serum sample from a patient with dengue hemorrhagic fever. The coding region of the E and NS5 protein were amplified by RT-PCR and used in phylogenetic studies. The analysis grouped this isolate in genotype V, line L1, getting very close to isolates from Rio de Janeiro, Brazil's North and other isolated from Venezuela and Colombia. The phylogeographic analysis provided evidence that the isolated BR/Alfenas/2012 is a direct descendant of samples from Rio de Janeiro in 2010 and 2011, and the common ancestor isolated DENV-1/VE/BID-V2468/2008, from Venezuela. Analysis of the coding region of the E protein showed that the isolated BR/Alfenas/2012 differ from 14 to other isolates from the same genotype and lineage, thereby generating mutations synonymous and non-synonymous. To characterize the virulent potential of this isolate, Swiss mice were infected with 1 x 104 plaque forming units. Seven days after infection, the animals were sacrified and the liver removed for histopathological analysis. The liver of infected animals showed a presence of inflammatory cells, steatosis and also focal points of edhema, hemorrhage and necrosis. This is the first report of the isolation of DENV-1, in the south of Minas Gerais, which allowed starting an inference about the distribution and genetic diversity of the virus.

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Para que o Estado mantenha este status, faz-se necessário um sistema de vigilância eficaz capaz de integrar o Serviço Veterinário Oficial (SVO) e a cadeia produtiva (diferentes agentes envolvidos). O objetivo deste estudo foi avaliar a percepção de risco dos produtores, médicos veterinários e transportadores de bovinos da cadeia produtiva na Fronteira Oeste do Rio Grande do Sul. Todos os atores entrevistados reconhecem a importância da febre aftosa. No entanto, uma parcela dos produtores (15%), transportadores (17%) e veterinários (17%) acredita que a doença ocorra no Estado. Também uma quantia considerável de produtores e transportadores acredita que o risco de o vírus ser introduzido na região seja baixo, desprezível e alguns ainda não souberam responder. Observou-se que os entrevistados reconhecem os principais sinais clínicos, porém possuem pouco conhecimento quanto a ovinos, suínos, cervos e porcos selvagens serem suscetíveis a febre aftosa. Grande parte dos entrevistados acredita ser importante comunicar um caso suspeito, porém uma parcela tentaria resolver de outra maneira, caso suspeitasse da doença. Quase a totalidade dos produtores afirmou vacinar seus rebanhos, no entanto alguns possuem conhecimento de produtores que não realizam a vacinação. Além disso, alguns entrevistados não sabem a idade inicial para realizar a vacinação. Dessa forma, é de extrema importância o Serviço Veterinário Oficial atuar com mais intensidade em atividades de educação sanitária, no que diz respeito a idade correta para vacinação, as espécies afetadas e a notificação, tornando os atores mais sensíveis a qualquer suspeita da doença. / Foot-and-mouth disease (FMD) is the most important animal disease and the occurrence of an outbreak has national and international repercussions. Foot-and-mouth disease virus (FMDV), the causative agent, is extremely infectious and contagious. The infection mainly affects cattle, buffaloes, swine, sheep, goats among other domestic and wild species. Disease control is performed by a fast diagnosis, preventive vaccination and restriction of animal movement. Therefore, control measures are directed at prevention measures, which include active and passive surveillance. The last FMDV outbreak in Rio Grande do Sul occurred in 2001 and the State is recognized as a free zone with vaccination. In order for the State to maintain this status, an effective surveillance system capable of integrating the Official Veterinary Service and the production chain (producers and handlers) is necessary. The objective of this study was to evaluate the risk perception of producers, veterinarians and cattle transporters in the production chain in the West Frontier of Rio Grande do Sul, Brazil. All interviewed actors recognize the importance of foot-and-mouth disease. However, a proportion of the producers (15%), transporters (17%) and veterinarians (17%) believe that the disease occurs in the State. Also, a considerable number of producers and transporters believe that the risk of the virus being introduced in the region is low, negligible and some have not yet been able to respond. It was observed that the interviewees recognize the main clinical signs, but they have little knowledge about sheep, pigs, deer and wild pigs being susceptible to foot-and-mouth disease. Most interviewees believe it is important to report a suspected case, but a portion would try to solve it differently if they suspected the disease. Almost all producers claimed to vaccinate their herds, however some are aware of producers who do not carry out the vaccination. In addition, some interviewees do not know the starting age to carry out the vaccination. Therefore, it is extremely important for the Official Veterinary Service to work with more intensity in health education activities, regarding the correct age for vaccination, affected species and notification, making the actors more sensitive to any suspicion of the disease.

Rickettsia rickettsii é uma bactéria Gram-negativa, intra-celular obrigatória, causadora de uma grave riquetsiose em humanos, chamada no Brasil de Febre Maculosa Brasileira (FMB). Os carrapatos vetores de R. rickettsii para humanos, conhecidos até o momento no Brasil são Amblyomma cajennense e Amblyomma aureolatum. O presente estudo avaliou o tempo mínimo de parasitismo de A. aureolatum (ninfas não-alimentadas, machos adultos em jejum e pré-alimentados), infectadas por R. rickettsii, para que ocorra a transmissão da bactéria para o hospedeiro vertebrado. Para a produção de ninfas infectadas, foi mantida uma colônia de carrapatos em laboratório, infectados por R. rickettsii através de infestação em cobaias (Cavia porcellus) inoculadas por essa bactéria (Cepa Taiaçu). Para os experimentos com as ninfas de A. aureolatum, dividiram-se as cobaias em dez grupos de duas, sendo essas infestadas com dez ninfas cada uma. Após 2 horas da infestação (fixação da primeira ninfa), o primeiro grupo (G1) teve todas suas ninfas removidas. Após 4 horas de infestação, um segundo grupo (G2) de cobaias teve todas suas ninfas removidas de forma semelhante. Este procedimento foi repetido com os demais grupos, cada um em um determinado número de horas após a infestação: após 6 (G3), 8 (G4), 12 (G5), 18 (G6), 24 (G7), 36 (G8) e 48 (G9) horas. Para um último grupo (G10), as ninfas foram deixadas em parasitismo até seu desprendimento natural (cerca de 10 dias). Os experimentos realizados com carrapatos machos adultos em jejum seguiram os mesmos períodos utilizados para as ninfas, para fixação e retirada de carrapatos, assim como o número de cobaias. Nos experimentos com carrapatos machos adultos previamente alimentados - 48 horas em coelhos (Oryctolagus cuniculus), utilizaram-se os períodos de fixação e retirada de carrapatos idênticos aos experimentos anteriores, e além desses foi necessária a utilização de períodos menores de fixação de A. aureolatum, variando entre um minuto e uma hora. As cobaias foram avaliadas clinicamente todos os dias, e sacrificadas 21 dias após a infestação. Amostras de sangue foram colhidas e testadas para presença de anticorpos anti-R. rickettsii. Carrapatos retirados das cobaias de todos os grupos foram testados por PCR, a fim de se certificar que estavam infectados por R. rickettsii. De acordo com os resultados obtidos, ninfas não alimentadas de carrapatos A. aureolatum, infectados por R. rickettsii, necessitam realizar o repasto sanguíneo por um período mínimo de 12 horas, para que ocorra a transmissão da bactéria ao hospedeiro vertebrado; carrapatos adultos não alimentados, infectados por R. rickettsii, necessitam realizar o repasto sanguíneo por um período mínimo de 10 horas, para que ocorra a transmissão da bactéria ao hospedeiro vertebrado; e carrapatos adultos infectados por R. rickettsii e pré-alimentados em coelhos por 48 horas, necessitam realizar o repasto sanguíneo por um período mínimo de 10 minutos, para que ocorra a transmissão da bactéria ao hospedeiro vertebrado, utilizando-se cobaias como modelo experimental. / Rickettsia rickettsii is the causative agent of the most severe rickettsiosis, known in Brazil as Brazilian Spotted Fever (BSF). Tick vectors of R. rickettsii to humans in Brazil are Amblyomma cajennense and Amblyomma aureolatum. The present study determined the minimum feeding period required for A. aureolatum-infected unfed nymphs, unfed adults, and fed adults to transmit infective forms of R. rickettsii to naïve guinea pigs. For this purpose, we used nymphs and adults of a laboratory colony of A. aureolatum, previously shown to be 100% infected by R. rickettsii strain Taiaçu. Infected nymphs were allowed to infest 10 groups of hosts, each containing 2 guinea pigs, with each individual guinea pig receiving 10 infected. After two hours of parasitism (counting from the moment when the first infected nymph attached to the skin), this group had all infected nymphs manually removed and saved for further molecular analysis. After 4 hours of infection, guinea pigs of a second group had all their nymphs similarly removed. This procedure was repeated with the other groups, each at a given number of hours after infestation: 6, 8, 12, 18, 24, 36, and 48h. For an additional group, nymphs were allowed to complete feeding period (96-120h). In another experiment, this whole procedure was performed with adult ticks, being one infected male tick per naïve guinea pig. In a third experiment, adult male ticks were pre-fed on rabbits for 48h before allowing to feed on naive guinea pigs for 1, 3, 5, 10, 20, 40 or 60 minutes, and then for 2 to >48h. Clinical signs and rectal temperature were evaluated daily in each guinea. Blood samples were collected at 21 days after infestation, and tested for presence of anti-R. rickettsii antibodies. All removed ticks in all groups showed to contain rickettsial DNA by PCR. According to the results, unfed nymphs of R. rickettsii-infected A. aureolatum ticks must feed for a minimum of 12 hours to transmit the bacterium to the vertebrate host; unfed R. rickettsii-infected adult ticks must feed for a minimum of 10 hours for transmission to occur, while previously fed adult ticks must feed for a minimum of 10 minutes to transmit R. rickettsii to vertebrate hosts, using guinea pigs as experimental model.

Orientador: Hélio José Montassier / Banca: Aramis Augusto Pinto / Banca: José Antonio Jerez / Resumo: A pesquisa sorológica usando Imunodifusão em Gel de Ágar (IOGA) e ELISA Bloqueio de Fase Líquida (BFL-EUSA) foram aplicadas nesse estudo no período de 1996 a 1998, para detectar ou titular, respectivamente, anticorpos contra o antígeno VIA (Virus Infection Associated) e as estirpes de referência 01 Campos, A24 Cruzeiro e C3 Indaial, em algumas espécies silvestres e domésticas susceptíveis e não vacinadas. Do total de 383 amostras sanguíneas colhidas, 78 amostras eram de bovinos de vida livre; 39 de búfalos indianos; 139 de ovinos; 63 de suínos domésticos; 49 de porcos do mato e 15 de cervídeos. Todas as espécies investigadas, exceto os cervídeos, apresentaram anticorpos contra o Vírus da Febre Aftosa (VFA). O teste de IDGA detectou 47 (12,3%) amostras positivas ao antígeno VIA, principalmente em bovinos baguás e búfalos. O BFL-ELISA identificou 175 (45,7%) soros com presença de anticorpos a uma das três estirpes virais; Foi encontrado um maior número de amostras positivas contra a estirpe C3 Indaial bem como maiores títulos, em bovinos baguás. Os bubalinos e ovinos apresentaram uma maior reatividade contra as estirpes A24 Cruzeiro e 01 Campos, respectivamente, demonstrando maior número de soros reagentes. No entanto, ambas as espécies revelaram maiores títulos para a estirpe C3 Indaial. Nos suínos domésticos e silvestres, predominou a reatividade a estirpe A24 Cruzeiro. Em bovinos, a maior ocorrência de soros positivos ao teste de IOGA foi encontrada em animais entre 12 a 36 meses de idade, e na prova BFL-ELISA, em animais acima de 36 meses. Nas demais espécies, ambos os testes laboratoriais utilizados demonstraram um maior número de soros reativos em indivíduos adultos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A serologic survey, using Agar Gel Immunodifusion (AGID) and liquid Phase Blocking-ELISA (LPB-ELISA) were assessed in this study, in the period from to 1996 to 1998, to detect or titer, respectively, antibodies to Virus Infection Associated Antigen (VIAA) and the foot-and-mouth disease virus (FMDV) 01 Campos, A24 Cruzeiro e C3 Indaial reference strains, in non-vaccinated domestic and wild susceptible animal species. A total of 383 blood serum samples were collected from free-ranging cattle (78 samples), water buffalo (39 samples), sheep (139 samples), domestic (63 samples) and wild pigs (49 samples) and deers (15 samples), living in the Pantanal (Nhecolândia region) of Mato Grosso do Sul State, Brazil. All the investigated species, excepting deer, showed positive animais to FMDV antigens. The AGID detected a total of 47 (12,3%) positive animais for VIA antigen, mostly of them were free-living cattle and buffalo. The LPD-EUSA identified 175 (45,7%) serum samples as reactive to FMDV antigens, specially among cattle, buffalo and sheep. The predominant reactivity to FMDV antigens, characterized by the higher number of positives and the higher antibodies titers, were detected to C3 Indaial strain, particularly among the free-Iiving cattle. Buffaloes and pigs showed, in turn, a prominent reactivity to A24 Cruzeiro strain, while sheep reacted more to 01 Campos strain, though buffalo and sheep serum samples had higher antibody titers to C3 Indaial strain. The highest frequency of positive animais to VIA antigen were found in free-ranging cattle, whose age ranged from 12 to 36 months, contrasting to the results of LPB-EUSA that detected the highest rate of positives in the older bovines (~36 months). The older animais from other species demonstrated, in both serological tests, the highest frequency of positivity... (Complete abstract, access undermentioned eletronic address) / Mestre

Em trabalho recente, foi encontrada a infecção de 9,7% da população de Amblyomma triste por Rickettsia parkeri, agente etiológico de riquetsiose humana, na várzea do Rio Paraná, no município de Paulicéia. Desta forma o presente trabalho busco a soroprevelência de anticorpos anti-R. parkeri em humanos, cavalos, cães e gambás; e a prevalência de infecção por R. parkeri em ectoparasitas e diferentes áreas do local. Os carrapatos adultos e ninfas coletados foram identificados com chaves específicas e as larvas por técnicas moleculares (PCR para gene 16S rRNA mitocondrial, seguido de sequenciamento). Também foi feito o teste de presença de DNA de Rickettsia. Amostras de soro sanguineo de cães, cavalos e humanos foram analisadas pela técnica de reação de imunoflurescência indireta, para a pesquisa de anticorpos anti-R. rickettsii, R. parkeri, R. bellii, R. amblyommii, R. riphicephalii e R. felis. De 1699 carrapatos coletados, a maioria (1511) foi Amblyomma. Cajennense. Os demais pertenciam às espécies A. coelebs (6), A. triste (2), A. dubitatum (114), Rhipicephalus (Boophilus) microplus (55), Dermacentor nitens (10) e Amblyomma rotundatum (1). Somente 2 ninfas da espécie A. coelebs estavam infectadas com Rickettsia, com sequências 99% de identidade para o gene ompA R. amblyommii. Dos soros de humanos coletados 25 foram negativos e somente um apresentou títulos &le;64 para R. parkeri e R. rickettsii. De 140 soros dos equinos, 24% apresentou anticorpos anti-Rickettsia, com títulos variando de 64 a 1024, sendo que nove amostras tinham títulos anti-R. parkeri pelo menos quatro vezes maior que os para demais espécies de Rickettsia, indicando a R. parkeri como provável antígeno homólogo. Em 55 amostras de cães 7,7% apresentaram anticorpos anti-Rickettsia, com títulos variando de 64 a 256. Para duas amostras a R. parkeri foi o provável antígeno homólogo. Analisando os questionários epidemiológicos dos eqüinos, juntamente com os resultados sorológicos, a regressão logística indicou associação estatisticamente significante entre a presença de anticorpos anti-Rickettsia com as varáveis independentes (i) acesso à várzea (ii) e tempo de residência na região, os quais podem ser considerados fatores de risco para rickettsiose na região estudada. Foram capturados quatro gambás (Didelphis albiventris) e todos tinham anticorpos para R. parkeri, R. rickettsii, R. amblyommii e R. rhipicephalii, porém sem variação de pelo menos quatro vezes entre os títulos. Os gambás estavam infestados com ninfas A. cajennense e A. coelebs, todas negativas para o PCR para Rickettsia. Em vista destes resultados pode-se dizer que os animais domésticos e os gambás estiveram em contato com bactérias do gênero Rickettsia na região estudada, onde a várzea parece ser a principal foco de carrapatos infectados. / In recent work, 9.7% of the Amblyomma triste of the marsh by the Paraná River in Paulicéia, State of São Paulo, was found infected with Rickettsia parkeri, the etiological agent of spotted fever rickettsiosis in humans. Based on this report, the present study aimed to determine soroprevelence of anti-R. parkeri antibodies in humans, horses, dogs and opossuns, and the prevalence of rickettsial infection in ectoparasites, in different areas of Paulicéia. While ticks were identified by using current morphological Keys for adults and nymphs, larva were identified to species by molecular methods (PCR targeting the mitochondrial 16S rRNA gene followed by DNA sequencing). Ticks were tested by PCR for the presence of Rickettsia DNA. Animal and human sera samples were tested by immunofluorescence assay (IFA) for the presence of antibodies reactive to R. rickettsii, R. parkeri, R. belli, R. amblyommii, R. riphicephalii and R. felis. From 1699 collected ticks, a vast marjority (1511) was Amblyomma. cajennense. The remaining were the especies A. coelebs (6), A. triste (2), A. dubitatum (114), Rhipicephalus (Boophilus) microplus (55), Dermacentor nitens (10) and Amblyomma rotundatum (1). Only two nymphs of A. coelebs were found infected by Rickettsia, yielding DNA sequences 99% identical to the gene ompA of R. amblyommii. 25 of human sera collected were negative, except for one for one that showed endpoint titer &le;64 to both R. parkeriand R. rickettsii. Among horses, 24% sera contained anti Rickettsia antibodies, with titles ranging from 64 to 1024, nine samples showed anti-R. parkeri titles at least four times higher than the remaining Rickettsia species, indicating that these animals had been infected by R. parkeri. For 55 dogs, 7.7% anti Rickettsia antibodies, with endpoint titles ranging from 64 to 256. For two canine serum R. parkeri was considered the possible agent responsible for the infection. Through statistical analyses of the serological results with independent variables, the presence of seropositive horses was significantly associated with (i) grazing in the marsh (ii) and being for more than 8.5 years in the region; these two independent variables were considered to be risk factors for rickettsiosis in the study region. A total of four opossums (Didelphis albiventris) were captured. All four had antibodies reactive to R. parkeri, R. rickettsia, R. amblyommii and R. rhipicephalii, however, with less than 4-fold differences between endpont titers to different Rickettsia species. Opossums were found infested by nymphs of A. cajennense and A. coelebs, all negative to Rickettsia by PCR. Based in these results, it is concluded that domestic animals and opossums had been in contact with Rickettsia of the spotted fever group in the study region, where the marsh area seems to be the main focus of Rickettsia-infected ticks

A sepse é sempre acompanhada de mudanças na temperatura corporal, seja esta febre ou hipotermia. O presente trabalho tem como objetivos principais (1) caracterizar o curso temporal de hipotermia em um grupo raro de pacientes sépticos; (2) desenvolver um modelo experimental bem controlado de sepse grave monobacteriana e; (3) estudar mecanicamente como o pulmão é preservado na sepse frente à virada de febre para hipotermia. Nossos resultados mostraram, pela primeira vez, que a hipotermia em pacientes sépticos é um fenômeno transitório, não terminal. Ainda desenvolvemos um modelo experimental de sepse grave, no qual observamos que a hipotermia provoca a reprogramação das principais células envolvidas na resposta inflamatória. Essas mudanças favorecem o hospedeiro, pois induzem diminuição do infiltrado inflamatório e manteve a infecção controlada. Logo, podemos concluir que a hipotermia é um fenômeno transitório, auto-limitante e não terminal, diferente da resposta desregulada e progressiva que se acreditava existir. / Sepsis is always accompanied by changes in body temperature, whether it is fever or hypothermia. The present study has as main objectives (1) to characterize the temporal course of hypothermia in a rare group of septic patients; (2) to develop a well-controlled experimental model of severe monobacterial sepsis and; (3) to mechanically study how the lung is preserved in the sepsis in the face of the onset of fever for hypothermia. Our results showed, for the first time, that hypothermia in septic patients is a transitory, non-terminal phenomenon. We have also developed an experimental model of severe sepsis, in which we observed that hypothermia causes reprogramming of the main cells involved in the inflammatory response. These changes favor the host, as they induce a decrease in the inflammatory infiltrate and kept the infection under control. Therefore, we can conclude that hypothermia is a transitory phenomenon, self-limiting and not terminal, different from the deregulated and progressive response that was believed to exist.