Orientador: Magali Monteiro da Silva / Banca: Adriana Zerlotti Mercadante / Banca: Álvaro José dos Santos Neto / Resumo: Objetivo: O objetivo deste trabalho foi reunir informações sobre compostos fenólicos em citros, visando compreender suas características e propriedades, a fim de dar suporte ao desenvolvimento de método analítico para avaliar o perfil de compostos fenólicos do suco de laranja Pêra-Rio orgânica e convencional durante a safra de 2016. Métodos: As informações sobre os compostos fenólicos foram reunidas considerando sua biossíntese, características químicas e bioatividade, a técnica analítica mais utilizada para a sua determinação em alimentos, e os níveis dos principais compostos presentes em citros. O método analítico foi desenvolvido empregando a cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Para a validação foram avaliados os parâmetros curva de calibração, linearidade, precisão, exatidão, limite de detecção, limite de quantificação e robustez. O método validado foi utilizado para avaliar o perfil de compostos fenólicos do suco de laranja Pêra-Rio orgânica e convencional do início, meio e fim da safra de 2016. Resultados: Os compostos fenólicos mais importantes em citros são os flavonoides, com destaque para as flavanonas. As principais flavanonas de citros são a hesperidina, narirutina, naringina e neohesperidina, presentes em quantidades variadas no suco, na fruta e na casca. A determinação de compostos fenólicos é realizada empregando CLAE em fase reversa e modo gradiente, com o uso de detectores de arranjo de diodos (DAD) e espectr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: The aim of this work was to gather information about phenolic compounds in citrus, in order to understand their characteristics and properties, and to support the development of an analytical method to evaluate the phenolic compounds profile of organic and conventional PêraRio orange juice from the 2016 harvest. Methods: Information on phenolic compounds was gathered considering their biosynthesis, chemical characteristics and bioactivity, the most used analytical technique for their determination in foods, and the levels of the main compounds present in citrus. The analytical method was developed using high performance liquid chromatography with a diode array detector (HPLC-DAD). For the validation, calibration curves, linearity, precision, accuracy, detection limit, quantification limit and ruggedness were evaluated. The validated method was used to evaluate the phenolic compounds profile of organic and conventional PêraRio orange juice at the beginning, middle and end of the 2016 harvest. Results: The most important phenolic compounds in citrus are flavonoids from the flavanone class. The major citrus flavanones are hesperidin, narirutin, naringin and neohesperidin, present in varying amounts in juice, pulp and peel. The determination of phenolic compounds is performed employing HPLC in reversed phase and gradient mode, using diode array detectors (DAD) and mass spectrometry (MS). The studies available in the literature only evaluate the most expressive flavanones without considering other phenolic compounds, which makes it necessary to carry out studies that evaluate the profile and levels of these compounds. The best separation condition was obtained using a reversed phase column, mobile phase composed of water:formic acid (99.9:0.1, v/v) and acetonitrile in gradient mode... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Introdução: O ácido rosmarínico (AR) é um composto fenólico que apresenta inúmeras atividades biológicas, dentre estas, destaca-se a atividade antioxidante. Entretanto, a biodisponibilidade do AR por via oral é de apenas 0,91 a 5,0%, fator que pode estar relacionado à sua solubilidade, estabilidade em meio gastrointestinal e mecanismo de absorção. Ciclodextrinas (CDs) são excipientes farmacêuticos utilizados com o objetivo de promover a absorção oral de fármacos por propiciarem aumento de solubilidade, estabilidade química e permeação pela membrana intestinal a partir da complexação com o fármaco. Tendo em vista o desenvolvimento de uma formulação farmacêutica, estudos de compatibilidade entre a substância e excipientes se fazem necessários. Objetivo: Obter complexo do AR com CDs derivadas, avaliar a atividade antioxidante dos complexos e compatibilidade entre excipientes. Materiais e métodos: Estudo de solubilidade de fase foi realizado para se determinar estequiometria e constante de estabilidade entre o AR e duas CDs: HPβCD e MβCD. Os complexos foram obtidos por liofilização e caracterizados por métodos espectroscópicos, calorimétrico e microscópico. A atividade antioxidante foi determinada pelo método DPPH e estudo de compatibilidade entre excipientes foi realizado por método espectroscópico, calorimétrico e cromatográfico. Resultados: O AR apresentou proporção estequiométrica 2:1 AR:CD e alta constante de estabilidade. Os métodos de caracterização permitiram inferir a presença de formação de complexo de inclusão e complexo de não-inclusão, nos quais uma molécula do AR estaria interagindo com prótons internos e outra estaria interagindo com prótons externos da CD. A atividade antioxidante dos complexos foi superior à apresentada pelo AR não complexado, demonstrando a ação das CDs sobre a doação de prótons do AR e o estudo de compatibilidade de excipientes não demonstrou incompatibilidades viabilizando a obtenção de formas farmacêuticas. Conclusão: Considerando todos os resultados, pode-se inferir que complexos AR:CD podem ser uma alternativa tecnológica para superar a baixa absorção pela via oral, sem ocasionar perda na atividade antioxidante, propiciando também o desenvolvimento de formulações sólidas orais. / Introduction: Rosmarinic acid (RA) is phenolic compound which present several biological activities, among these, antioxidant is remarkable. However, oral bioavailability of RA is only 0.91 to 5.0%, a factor that may be related to its solubility, stability in gastrointestinal environment and absorption mechanism. Cyclodextrins (CDs) are pharmaceutical excipients used in oral drug absorption by promoting increased solubility, chemical stability and permeation by the intestinal membrane through complexation with the drug. In view of the development of a pharmaceutical formulation, excipients compatibility studies are also expected. Objective: To obtain RA complex with derivative CDs (HPβCD and MβCD), to evaluate the antioxidant activity of complexes and compatibility between excipients. Materials and methods: Phase-solubility study was performed to determine stoichiometry and constant between RA and CD. The complexes were obtained by lyophilization and characterized by spectroscopic, calorimetric and microscopic techniques. The antioxidant activity was determined by the DPPH method and compatibility study among excipients was performed by spectroscopic, calorimetric and chromatographic methods.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-18T12:17:23Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 324092 bytes, checksum: 985515511859d2667ea0585a33475e4c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T12:17:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 324092 bytes, checksum: 985515511859d2667ea0585a33475e4c (MD5) Previous issue date: 2001-07-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Este trabalho foi dividido em duas etapas: na primeira, painéis OSB foram fabricados com cinco diferentes proporções de misturas entre as partículas de Eucalyptus grandis (Euc) e Pinus elliottii (Pin). Os tratamentos avaliados foram: A, 100% Euc; B, 75% Euc / 25% Pin; C, 50% Euc / 50% Pin; D, 25% Euc / 75% Pin; E, 100% Pin. Na segunda etapa, a proporção entre as espécies foi fixada em 50% e a estrutura do colchão foi alterada, sendo delineados três tratamentos: C, de camadas indistintas; F, formado exclusivamente por partículas de Eucalyptus grandis na face do colchão; e G, formado unicamente com madeira de Pinus elliottii na face. Outra variável avaliada foi a taxa de adesivo: os tratamentos foram aglutinados com 4%, 6% e 8% de sólidos resinosos sobre o peso seco das partículas de um adesivo fenólico com viscosidade de 350 cps, pH 12,15 e 47,63% de sólidos. Foi utilizada parafina em emulsão, na quantidade de 1% em relação ao peso seco das partículas. Para os sete tratamentos, foram feitas 3 repetições, totalizando 63 chapas. As chapas foram submetidas aos testes de flexão estática, ligação interna, arranque de parafuso, expansão linear, inchamento em espessura e absorção de água, obedecendo aos critérios da norma ASTM D 1037-91. Os melhores resultados foram obtidos para as chapas fabricadas com 6 e com 8% de adesivo; porém, a maioria dos resultados obtidos com painéis produzidos com 4% de adesivo foi superior ao mínimo exigido pela norma CSA O437-93. Os painéis fabricados com 50% de cada espécie alcançaram valores satisfatórios. Nenhum tratamento teve êxito ao ser avaliado para inchamento em espessura; entretanto, todos foram aprovados no teste de expansão linear. Não houve diferença estatística entre as estruturas de colchão avaliadas. / This work has been divided into two steps: in the first one, OSB was produced from five mixtures of Eucalyptus grandis (Euc) and Pinus elliottii (Pin). The treatments evaluated were: A: 100% Euc, B: 75% Euc / 25% Pin, C: 50% Euc / 50% Pin, D: 25% Euc / 75% Pin, E: 100% Pin. In the second step, the parcel of each specie was set in 50% and the mat structure was modified, so that three treatments were designed: C, with indistinct layers; F, with only Eucalyptus grandis in the mat faces; and G, with only Pinus elliottii in the mat faces. A phenolic resin containing 47,63% of total solids, pH of 12,15 and viscosity of 350 cps was used as an adhesive, with three levels of 4%, 6% and 8% of resin solids based on the oven-dry weight of particles. One per cent of wax emulsion was also added. Each treatment was replicated three times. Sixty-three boards were produced. The following properties were determined: static bending (MOR and MOE), internal board, screw withdrawal, thickness swelling, water absorption and linear expansion, following the ASTM D 1037-91 procedures. In general, the best results were observed on boards made with 6 and 8% of resin. But most treatments carried out with 4% of adhesive achieved the mechanic tests requirements of the CSA O437-93 standard. The best results were observed on boards fabricated with 50% of each species. No treatment was successful in thickness swelling. On the other hand, all treatments showed satisfactory results in linear expansion. No statistical difference has been found between the mat structures evaluated.

Introdução: O ácido rosmarínico (AR) é um composto fenólico que apresenta inúmeras atividades biológicas, dentre estas, destaca-se a atividade antioxidante. Entretanto, a biodisponibilidade do AR por via oral é de apenas 0,91 a 5,0%, fator que pode estar relacionado à sua solubilidade, estabilidade em meio gastrointestinal e mecanismo de absorção. Ciclodextrinas (CDs) são excipientes farmacêuticos utilizados com o objetivo de promover a absorção oral de fármacos por propiciarem aumento de solubilidade, estabilidade química e permeação pela membrana intestinal a partir da complexação com o fármaco. Tendo em vista o desenvolvimento de uma formulação farmacêutica, estudos de compatibilidade entre a substância e excipientes se fazem necessários. Objetivo: Obter complexo do AR com CDs derivadas, avaliar a atividade antioxidante dos complexos e compatibilidade entre excipientes. Materiais e métodos: Estudo de solubilidade de fase foi realizado para se determinar estequiometria e constante de estabilidade entre o AR e duas CDs: HPβCD e MβCD. Os complexos foram obtidos por liofilização e caracterizados por métodos espectroscópicos, calorimétrico e microscópico. A atividade antioxidante foi determinada pelo método DPPH e estudo de compatibilidade entre excipientes foi realizado por método espectroscópico, calorimétrico e cromatográfico. Resultados: O AR apresentou proporção estequiométrica 2:1 AR:CD e alta constante de estabilidade. Os métodos de caracterização permitiram inferir a presença de formação de complexo de inclusão e complexo de não-inclusão, nos quais uma molécula do AR estaria interagindo com prótons internos e outra estaria interagindo com prótons externos da CD. A atividade antioxidante dos complexos foi superior à apresentada pelo AR não complexado, demonstrando a ação das CDs sobre a doação de prótons do AR e o estudo de compatibilidade de excipientes não demonstrou incompatibilidades viabilizando a obtenção de formas farmacêuticas. Conclusão: Considerando todos os resultados, pode-se inferir que complexos AR:CD podem ser uma alternativa tecnológica para superar a baixa absorção pela via oral, sem ocasionar perda na atividade antioxidante, propiciando também o desenvolvimento de formulações sólidas orais. / Introduction: Rosmarinic acid (RA) is phenolic compound which present several biological activities, among these, antioxidant is remarkable. However, oral bioavailability of RA is only 0.91 to 5.0%, a factor that may be related to its solubility, stability in gastrointestinal environment and absorption mechanism. Cyclodextrins (CDs) are pharmaceutical excipients used in oral drug absorption by promoting increased solubility, chemical stability and permeation by the intestinal membrane through complexation with the drug. In view of the development of a pharmaceutical formulation, excipients compatibility studies are also expected. Objective: To obtain RA complex with derivative CDs (HPβCD and MβCD), to evaluate the antioxidant activity of complexes and compatibility between excipients. Materials and methods: Phase-solubility study was performed to determine stoichiometry and constant between RA and CD. The complexes were obtained by lyophilization and characterized by spectroscopic, calorimetric and microscopic techniques. The antioxidant activity was determined by the DPPH method and compatibility study among excipients was performed by spectroscopic, calorimetric and chromatographic methods.

Submitted by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-03-26T20:31:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Brunela Pitanga Ramos Madureira.pdf: 595292 bytes, checksum: 91d4c514416e14264549113d0ff5dea1 (MD5) / Approved for entry into archive by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-04-09T19:24:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Brunela Pitanga Ramos Madureira.pdf: 595292 bytes, checksum: 91d4c514416e14264549113d0ff5dea1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-09T19:24:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Brunela Pitanga Ramos Madureira.pdf: 595292 bytes, checksum: 91d4c514416e14264549113d0ff5dea1 (MD5) Previous issue date: 2015-02 / Esse estudo investiga a infecção subclínica de Mycobacterium leprae em pacientes infectados e não infectados pelo HIV, através da dosagem de anticorpos anti-PGL-I, e avalia se existe uma possível correlação dos resultados sorológicos encontrados com o estado de imunossupressão dos pacientes infectados pelo HIV. Foi realizado um estudo transversal analítico em 350 pacientes infectados pelo HIV e em 350 pacientes não infectados pelo HIV para detecção de anticorpos IgM anti-PGL-I em região endêmica para hanseníase. Avaliou-se uma possível correlação do estado de imunossupressão dos pacientes infectados pelo HIV (contagem de linfócitos CD4+, carga viral e uso ou não de terapia antirretroviral) com a soropositividade para PGLI. Dentre os pacientes infectados pelo HIV, 6% (21/350) apresentaram sorologia positiva para PGL-I e dos indivíduos não infectados pelo HIV, 29,1% (102/350) tinham PGL-I positivo. O grupo controle apresentou cerca de cinco vezes mais indivíduos com anticorpos anti-PGL-I do que o grupo infectado pelo HIV. Não houve diferença estatisticamente significativa na correlação do estado de imunossupressão do paciente com o resultado da sorologia anti-PGL-I. Houve uma menor produção de anticorpos anti-PGL-I em indivíduos infectados pelo HIV, o que pode indicar uma baixa taxa de infecção subclínica por M. leprae, ou uma baixa produtividade específica desses anticorpos, ou ambas as hipóteses. A desregulação de linfócitos B em indivíduos infectados pelo HIV pode ser a causa da baixa produção de anticorpos anti-PGL-I. Não houve correlação do estado de imunossupressão do paciente com o resultado da sorologia anti-PGL-I. / The present study investigated subclinical Mycobacterium leprae infection in human immunodeficiency virus (HIV) infected or uninfected individuals by measuring antibodies against M. leprae phenolic glycolipid I (PGL-I). It also sought to establish whether the serology results correlated with the HIV-infected participants’ state of immunosuppression. This was a cross-sectional study that analysed the anti-PGL-I immunoglobulin M antibody levels in 350 HIV-infected and 350 non-HIV-infected individuals residing in an area endemic for the two investigated conditions. The possible correlation between the state of immunosuppression of the HIV-infected participants (CD4+ cell count, viral load and the use or not of antiretroviral therapy) and anti-PGL-I seropositivity was assessed. Approximately 6% (21/350) of the HIVinfected and 29.1% (102/350) of the non-HIV-infected participants were anti-PGL-I antibody seropositive. The number of anti-PGL-I antibody seropositive individuals was approximately five-fold higher in the non-HIV-infected group, compared with the HIV-infected group. There was no significant correlation between the state of immunosuppression of the HIV-infected participants and the anti-PGL-I serology results. The HIV-infected individuals exhibited less anti-PGL-I antibody production relative to the control group, which may indicate a lower rate of subclinical M. leprae infection and/or lower specific production of this antibody. B cell dysregulation might cause the low anti-PGL-I antibody production in HIV-infected individuals. The patients’ state of immunosuppression did not correlate with the anti-PGL-I serology results.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-26Bitstream added on 2014-06-13T20:42:44Z : No. of bitstreams: 1 morais_mcc_dr_arafcf.pdf: 1408212 bytes, checksum: c1d67dd20ca622443f0331dff47792b5 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A quimioprevenção do câncer é definida como o uso de produtos naturais ou sintéticos para atrasar, bloquear ou reverter o processo de carcinogênese. Produtos naturais apresentam uma diversidade de estruturas químicas que servem de modelo para o desenvolvimento de novos princípios ativos antitumorais e quimiopreventivos. Alcaloides guanidínicos presentes nas folhas de Pterogyne nitens apresentam atividade antitumoral e foram selecionados para os ensaios. O ácido gálico foi escolhido como modelo e seus derivados tiveram atividade quimiopreventiva descrita por ser produto natural antioxidante presente nas folhas de Alchornea glandulosa. Uma coleção de 70 substâncias foi classificada em 6 grupos de acordo com sua estrutura. Derivados de ácidos fenólicos, alcaloides guanidínicos, fenamatos, carvonas, xantonas, flavonas e chalconas preniladas foram avaliadas em ensaios de citotoxicidade por SRB em células MCF-7 e MDA-MB-231, e a atividade quimiopreventiva por meio de indução da enzima quinona-redutase (NQO1) em células Hepa 1c1c7, inibição in vitro de aromatase (CYP19), inibição de NF-κB ativado por TNFα e inibição da produção de NO em células RAW 264.7 estimuladas por LPS. Além disso, alcaloides guanidínicos nitensidina A (NTA), nitensidina B (NTB) e nitensidina T (NTT) foram avaliados pelo ensaio de MTT e a indução de apoptose por coloração com Hoechst 33342 e iodeto de propídio, ambos em células HepG2. A genotoxicidade do ácido gálico (GA) e galato de metila (G1) foi avaliada em células HepG2 pelo ensaio do cometa. GA e G1 apresentaram inibição de NF-κB (CI50 = 19,8 μM e 12,1 μM, respectivamente), sendo que GA provocou quebras de DNA significantes (P < 0,05) nas concentrações de 12 μM e 40 μM verificados pelo ensaio do cometa. Galato de propila (G3) e galato de butila... / Cancer chemoprevention is defined as the use of natural or synthetic products to delay, block or reverse the carcinogenesis process. Natural products presents a diversity of chemical structures that serve as template for the development of new active antitumor and chemopreventive agents. Guanidine alkaloids from the leaves of Pterogyne nitens have antitumor activity and were selected for the assays. Gallic acid, an antioxidant natural product present in the leaves of Alchornea glandulosa, was selected as template and its derivatives chemopreventive activity is reported. A collection of 70 compounds were classified into six groups according to their structure. Phenolic acid derivatives, guanidine alkaloids, fenamates, carvones, xanthones, prenylated flavones and chalcones were evaluated in cytotoxicity assays through SRB in MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines, and chemopreventive activity by means of quinone-reductase (NQO1) induction in Hepa 1c1c7 cell line, in vitro aromatase (CYP19) inhibition, TNFα-activated NF-κB inhibition and NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Guanidine alkaloids nitensidine A (NTA), nitensidine B (NTB) and nitensidine T (NTT) were evaluated through MTT assay and apoptosis induction with Hoechst 33342 and propidium iodide stain, both in HepG2 cell line. Genotoxicity of gallic acid (GA) and methyl gallate (G1) was evaluated in HepG2 cells by the comet assay. GA and G1 presented NF-κB inhibition (IC50 = 19.8 μM and 12.1 μM, respectively), and it resulted in significant (P < 0.05) DNA strand breaks at 12 μM and 40 μM as verified by the comet assay. Propyl gallate (G3) and butyl gallate (G4) inhibited NO production (IC50 = 7.9 μM e 2.0 μM, respectively). Butyl gallate and pentyl gallate (G5) inhibited CYP19 in approximately 60% at 90 μM, allowing a structure-activity... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Denise Coutinho Endringer / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Massuo Jorge Kato / Resumo: A quimioprevenção do câncer é definida como o uso de produtos naturais ou sintéticos para atrasar, bloquear ou reverter o processo de carcinogênese. Produtos naturais apresentam uma diversidade de estruturas químicas que servem de modelo para o desenvolvimento de novos princípios ativos antitumorais e quimiopreventivos. Alcaloides guanidínicos presentes nas folhas de Pterogyne nitens apresentam atividade antitumoral e foram selecionados para os ensaios. O ácido gálico foi escolhido como modelo e seus derivados tiveram atividade quimiopreventiva descrita por ser produto natural antioxidante presente nas folhas de Alchornea glandulosa. Uma coleção de 70 substâncias foi classificada em 6 grupos de acordo com sua estrutura. Derivados de ácidos fenólicos, alcaloides guanidínicos, fenamatos, carvonas, xantonas, flavonas e chalconas preniladas foram avaliadas em ensaios de citotoxicidade por SRB em células MCF-7 e MDA-MB-231, e a atividade quimiopreventiva por meio de indução da enzima quinona-redutase (NQO1) em células Hepa 1c1c7, inibição in vitro de aromatase (CYP19), inibição de NF-κB ativado por TNFα e inibição da produção de NO em células RAW 264.7 estimuladas por LPS. Além disso, alcaloides guanidínicos nitensidina A (NTA), nitensidina B (NTB) e nitensidina T (NTT) foram avaliados pelo ensaio de MTT e a indução de apoptose por coloração com Hoechst 33342 e iodeto de propídio, ambos em células HepG2. A genotoxicidade do ácido gálico (GA) e galato de metila (G1) foi avaliada em células HepG2 pelo ensaio do cometa. GA e G1 apresentaram inibição de NF-κB (CI50 = 19,8 μM e 12,1 μM, respectivamente), sendo que GA provocou quebras de DNA significantes (P < 0,05) nas concentrações de 12 μM e 40 μM verificados pelo ensaio do cometa. Galato de propila (G3) e galato de butila... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cancer chemoprevention is defined as the use of natural or synthetic products to delay, block or reverse the carcinogenesis process. Natural products presents a diversity of chemical structures that serve as template for the development of new active antitumor and chemopreventive agents. Guanidine alkaloids from the leaves of Pterogyne nitens have antitumor activity and were selected for the assays. Gallic acid, an antioxidant natural product present in the leaves of Alchornea glandulosa, was selected as template and its derivatives chemopreventive activity is reported. A collection of 70 compounds were classified into six groups according to their structure. Phenolic acid derivatives, guanidine alkaloids, fenamates, carvones, xanthones, prenylated flavones and chalcones were evaluated in cytotoxicity assays through SRB in MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines, and chemopreventive activity by means of quinone-reductase (NQO1) induction in Hepa 1c1c7 cell line, in vitro aromatase (CYP19) inhibition, TNFα-activated NF-κB inhibition and NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Guanidine alkaloids nitensidine A (NTA), nitensidine B (NTB) and nitensidine T (NTT) were evaluated through MTT assay and apoptosis induction with Hoechst 33342 and propidium iodide stain, both in HepG2 cell line. Genotoxicity of gallic acid (GA) and methyl gallate (G1) was evaluated in HepG2 cells by the comet assay. GA and G1 presented NF-κB inhibition (IC50 = 19.8 μM and 12.1 μM, respectively), and it resulted in significant (P < 0.05) DNA strand breaks at 12 μM and 40 μM as verified by the comet assay. Propyl gallate (G3) and butyl gallate (G4) inhibited NO production (IC50 = 7.9 μM e 2.0 μM, respectively). Butyl gallate and pentyl gallate (G5) inhibited CYP19 in approximately 60% at 90 μM, allowing a structure-activity... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luiz Marcos da Fonseca / Banca: Cibeli Bonacorsi / Banca: Valdecir Farias Ximenes / Resumo: A ação patogênica do Helicobacter pylori envolve a colonização do trato gastrointestinal e a produção de EROs por neutrófilos atraídos e ativados pelo agente da infecção. A reação mediada pelos PMN é, todavia, ineficaz para eliminar o H. pylori e as EROs contribuem para a lesão tecidual e desenvolvimento de gastrites e úlcera péptica. O ácido cafeico é um dos mais importantes compostos fenólicos, e apresenta diferentes propriedades biológicas, entre elas antioxidante e antimicrobiana. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antioxidante e anti-H.pylori do ácido cafeico e seus ésteres. Foram avaliados os ésteres: cafelato de metila, cafelato de butila e cafelato de heptila e realizada uma comparação entre as propriedades antioxidantes do ácido cafeico e tais ésteres, por meio de ensaio de quimiluminescência dependente de luminol e lucigenina, ensaio de inibição da produção do ácido hipocloroso e também ensaios morfológicos com e sem a presença de NBT. Os resultados deste estudo mostraram que os ésteres do ácido cafeico apresentaram melhores resultados em comparação com o ácido cafeico para a capacidade antioxidante. O cafelato de heptila apresentou os melhores resultados para a quimiluminescência dependente de luminol e lucigenina induzida por H. pylori e/ou zymozan opsonizado na concentração de 10 µM e 1 µM . O efeito do ácido cafeico e seus ésteres, também foi estudado na inibição da produção de ácido hipocloroso por neutrófilos ativados com PMA. O cafelato de heptila novamente provou ser melhor em capacidade antioxidante, levando a crer que a lipofilicidade deste composto... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The pathogenic action of Helicobacter pylori involves the colonization of the gastrointestinal tract and ROS production by neutrophils attracted and activated by the agent of infection. However, the reaction mediated PMN is ineffective to remove the H. pylori and ROS contribute to tissue damage and development of gastritis and peptic ulcer. Caffeic acid is one of most important phenolic compounds, and has different biological properties including antioxidant and antimicrobial activities. The aim of this study was to evaluate the antioxidant and anti-Helicobacter pylori activity of caffeic acid and esters. Esters evaluated: methyl caffeic acid ester, butyl caffeic acid ester and heptyl caffeic acid ester and a comparison between the antioxidant properties of caffeic acid and these esters through luminol and lucigenin chemiluminescence assay dependent, inhibition of production of hypochlorous acid assay, morphological tests with and without the presence of NBT. The results of this study showed that the esters of caffeic acid had better results in comparison with caffeic acid to their antioxidant capacity. The heptyl caffeic acid ester showed the best results for the luminol and lucigenin dependent chemiluminescence induced by H. pylori and / or opsonized zymozan in the concentrations of 10 µM and 1 µM. The effect of caffeic acid and esters, was also studied in inhibiting of production of hypochlorous acid by neutrophils activated with PMA. The heptyl caffeic acid ester again proved to be better at antioxidant activity, implying that... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Ana Helena Januário / Banca: Luce Maria Brandão Torres / Resumo: O estudo de produtos naturais como fonte de novos agentes anticâncer torna-se de grande importância, pois mesmo devido à grande quantidade de drogas já existente para o tratamento de neoplasias, ainda não se chegou a um composto ideal que tenha maior seletividade, menos efeitos colaterais, maior potência terapêutica e menor índice de resistência. Das famílias vegetais com reconhecido potencial terapêutico destaca-se a família Fabaceae, cuja quimiossistemática atesta para uma riqueza de compostos flavonoídicos com amplo espectro de atividade biológica, inclusive antitumoral. Desta forma, o objetivo principal deste estudo foi isolar e caracterizar substâncias fenólicas a partir de frações oriundas de espécies do gênero Inga (I. laurina, I. edulis e I. marginata) selecionadas através do bioensaio com linhagens de celulas antitumorais e identificar metabólitos em mistura através de CLAE-DAD, HPLC-MS, LC-SPE-TT e Espectroscopia de RMN. A composição química destas espécies indicou uma grande variedade de ácidos aromáticos, flavonóides, taninos e triterpenos. Este trabalho permitiu a caracterização das substâncias: lupeol, éster graxo da -amirina, éster do olean-18-eno, fridelina, ácido vanílico, ácido 3,4,5-trimetoxi-benzóico, ácido gálico, galato de metila, ácido pcumárico, ácido benzóico, p-hidroxi-benzóico, ácido protocateuico, ácido tânico, ácido cafeico, ácido p-metoxicinâmico, ácido p-hidroxibenzóico, derivado metilado do ácido 4-hidroxibenzóico, ácido ferúlico, miricetina,miricetina-3-O-ramnosídeo, miricetina-3-O-(2"-Ogaloil)- -ramnopiranosídeo, apigenina, quercetrina, proantocianidina A-2, procianidina B, galato de 2-ramnopiranosil-4,6-diidroxifenila, galato de 2-ramnopiranosil-3,5-diidroxifenila e do glicosídeo do 4-vinil-fenol. Através das analises por CLAE-DAD detectamos a presença de uma antocianina altamente polar na fração aquosa... / Abstract: The study of natural products as a source of new anticancer agents is very important, because even due to the large amount of existing drugs for the treatment of cancer, has not yet reached an optimal compound that has greater selectivity, fewer side effects, higher potency therapeutic and index of least resistance.One of thefamilies with recognized therapeutic potential is the Fabaceae family, whose chemosystematics show an abundance of flavonoid with broad spectrum of biological activities, including antitumor. Thus, the aim of this study was to isolate and characterize phenolic compounds from fractions obtained of the genus Inga (I. laurina, I. edulis and I. marginata) selected by bioassay cytotoxic and identify metabolites in mixture by HPLC-PDA, HPLC-MS, LC-SPE-TT and NMR Spectroscopy. The chemical composition of these species indicated a wide variety of aromatic acids, flavonoids, tannins and triterpenes. This work describe the characterization of the compounds: lupeol, fatty ester of -amyrin, the olean-18-ene ester and friedelin, vanillic acid, 3,4,5-trimethoxy benzoic acid, gallic acid, gallate methyl, p-coumaric acid, benzoic acid, p-hydroxybenzoic, protocateuico acid, tannic acid, caffeic acid, p-methoxycinnamic acid, p-hydroxybenzoic acid derivative methylated of 4-hydroxybenzoic acid, ferulic acid, myricetin, myricetin-3-Orhamnoside, myricetin-3-O- (2 "-O-galoil) - -rhamnopyranoside, apigenin, quercetrin, proanthocyanidin A-2 and procyanidin B, 2-rhamnopyranosyl-3,5-dihydroxyphenyl gallate, 2-rhamnopyranosyl-4,6-dihydroxyphenyl gallateand 4-vinyl-phenol. Through the analysis by HPLC-PDA detected the presence of one anthocyanin from aqueous fraction in five other anthocyanins in the methanolic fraction from seeds of I. edulis. Through the bioassay-guided fractionation was possible to obtain a fraction with high antitumor potential (ED50 = 4.0 mg/mL) that was characterized such a mixture... / Doutor

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Early diagnosis of leprosy is an important contribution to reducing the incidence of the disease. For its early detection, the development of new platforms that include the mapping of antigens with potential to be used in immunodiagnostic is of great interest. Among these antigens, the PGL-1 and epitopes derived from specific bacillus proteins have received great attention. Alternatively, due to their versatility to perform the same functions as the protein and non-protein natural antigens, mimetic peptides are considered an important tool. Thus, our goal was to produce mimetic peptides of Mycobacterium leprae antigens that are promising as serological markers, which will be explored in new diagnostic platforms. To produce peptide mimetics, phage display technology was used. In the first case, we used a monoclonal anti-PGL-1 (CS-38) aiming to obtain peptides that mimics the PGL-1. In the second case, the peptides were obtained having purified IgGs from patients with leprosy as target. The sequences of the selected peptides expressed on the phage surface were chemically synthesized. The synthetic peptides were validated by ELISA (case 1 and 2) and by an immunosensor based on Surface Plasmon Resonance (case 1). Aiming to confirm and identify the targets of the mimetic peptides, scFv antibodies were produced by reverse engineering. The PGL-1-M3 peptide that mimics the native PGL-1 had a sensitivity of 89.11% and specificity of 100.00% in the IgM detection, with positivity of 100% in lepromatous (LL). The IgG detection had positivity of 60% for tuberculoid (TT) and 39% for household contacts (HC). This peptide was used in assembling one biophotonics platform, which allowed the differentiation of all forms of leprosy (p <0.05). The anti-scFv-M3 PGL-1 recognized native PGL-1 and accurately detected the M. leprae in immunohistochemistry tests. The MPML11, MPML14 and MPML12 peptides that mimics M. leprae antigens detect IgG and IgA in patients and HC. In IgG detection, MPML11 peptide showed positivity in 52.2% of TT and 35% of HC, and is also a promising marker of type 2 reaction. MPML12 and MPML14 peptides showed a very similar behavior to the PGL-1, with positivity of 100% and 92.85% in LL, respectively. The three peptides detected IgA in the serum of patients, especially multibacillary (MBs); and IgA in saliva of MBs and HC which index case was multibacillary. Mimetic peptides obtained in this work were confirmed as true mimetics of M. leprae antigens and can be applied in the diagnosis of leprosy in different platforms. / O diagnóstico precoce da hanseníase representa uma contribuição importante para diminuir a incidência da doença. Para isso é fundamental o desenvolvimento de novas plataformas, que incluam o mapeamento de antígenos com potencial para o imunodiagnóstico. Dentre estes destaca-se o PGL-1 e epítopos obtidos de proteínas específicas do bacilo. Alternativamente, peptídeos miméticos apresentam-se como uma importante ferramenta, pela versatilidade em desempenhar as mesmas funções que os antígenos naturais proteicos e não-proteicos. Dessa forma, nosso objetivo foi produzir peptídeos miméticos a antígenos do Mycobacterium leprae e que sejam promissores como marcadores sorológicos, os quais serão explorados em novas plataformas diagnósticas. Para produzir os peptídeos miméticos foi utilizada a tecnologia phage display. No primeiro processo utilizou-se um anticorpo monoclonal anti-PGL-1 (CS-38) para obter peptídeos miméticos ao PGL-1. No segundo processo, os peptídeos foram produzidos tendo como alvo IgGs purificadas de pacientes com hanseníase. As sequências dos peptídeos expressos nos fagos foram sintetizadas quimicamente. Os peptídeos sintéticos foram validados por ELISA (processo 1 e 2) e imunosensor baseado em Ressonância Plasmônica de Superfície (processo 1). Por meio de engenharia reversa, anticorpos scFv foram produzidos para confirmar e identificar alvos dos peptídeos miméticos. O peptídeo PGL-1-M3 mimético ao PGL-1 nativo apresentou sensibilidade de 89,11% e especificidade de 100,00% na detecção de IgM, com positividade de 100% em lepromatosos (LL), bem como títulos de IgG detectaram positividade de 60% para tuberculóides (TT) e 39% para contatos domiciliares (HC). Com este peptídeo foi montada uma plataforma biofotônica, que diferencia todas as formas clínicas de hanseníase (p<0,05). O scFv anti-PGL-1-M3 reconheceu PGL-1 nativo e detectou com precisão o M. leprae na imuno-histoquímica. Os peptídeos MPML11, MPML12 e MPML14 miméticos de antígenos do M.leprae detectam IgG e IgA em pacientes e HC. Na detecção de IgG, MPML11 apresentou positividade de 52,2% em TT e 35% em HC e também é um promissor marcador de reação tipo 2. MPML12 e MPML14 apresentaram um comportamento muito similar ao PGL-1, tendo 100% e 92,85% de positividade em LL, respectivamente. Os três peptídeos detectaram IgA nos soros de pacientes, especialmente multibacilares (MBs); bem como IgA na saliva de MBs e HC cujo caso índice era multibacilar. Os peptídeos miméticos obtidos nesse trabalho foram confirmados como miméticos verdadeiros de antígenos do M. leprae e podem ser aplicados no diagnóstico da hanseníase em diferentes plataformas. / Doutor em Genética e Bioquímica