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Orientador: César Tadeu Spadella / Banca: Erika Veruska Paiva Ortolan / Banca: Walmar Kerche de Oliveira / Banca: Carlos Eduardo Brossi Pelissari / Resumo: Bases científicas: Em contraste à atenção dada à ocorrência de degeneração gordurosa do fígado de etiologia não-alcoólica (DGFNA) em pacientes com diabetes mellitus do tipo 2 (DM2), pouco se sabe sobre a evolução desta entidade anátomo-clínica em portadores de diabetes mellitus do tipo 1 (DM1). Objetivo: Avaliar se o DM1 é capaz de provocar alterações morfológicas e ultraestruturais no fígado de ratos diabéticos induzidos pela aloxana (ALX), de modo a permitir caracterizar os efeitos desta droga e do diabetes, durante um longo período de seguimento. Esperamos que os resultados possam reproduzir um adequado modelo experimental de hepatopatia diabética crônica. Método: Foram estudados 60 ratos machos, Wistar, com aproximadamente 250g, distribuídos por sorteio em 2 grupos experimentais, com 30 animais cada um: GN - Grupo Normal: constituído de 30 ratos controles, não-diabéticos; GD - Grupo Diabético: constituído de 30 ratos diabéticos, hiperglicêmicos, sem qualquer tratamento da doença. Cada um dos grupos experimentais foi posteriormente dividido em 3 subgrupos de ratos, com 10 animais cada um, para serem avaliados e sacrificados, respectivamente, em 4 momentos do experimento, a saber: M0 - animais dos 3 subgrupos, no momento inicial do experimento (2 semanas de seguimento normal ou de indução do diabetes), para obtenção apenas de parâmetros clínicos e laboratoriais; M1, M2, M3 - animais sacrificados, respectivamente com 6, 14 e 26 semanas de seguimento normal ou diabetes. Parâmetros clínicos e laboratoriais, incluindo: avaliação do peso corporal, ingestão hídrica, ingestão alimentar, diurese e dosagens da glicose sangüínea de jejum, glicose urinária, hemoglobina glicosilada, insulina plasmática, bilirrubinas, aspartato amino transferase (AST), aspartato alanina transferase (ALT), fosfatase alcalina, Υ - glutamil transferase (Υ-GT), colesterol total, lipoproteínas de alta ... / Abstract: Not available / Doutor

Orientador: Margarida Maria Barros / Coorientador: Luciana Francisco Fleuri / Banca: Igo Gomes Guimarães / Banca: José Roberto Sartori / Resumo: O mineral cobre é considerado essencial para peixes por ser componente de diversas enzimas e participar em importantes reações orgânicas. Entretanto, altos níveis deste mineral podem prejudicar a homeostase e causar sérios danos nos tecidos. Os efeitos de dietas contendo níveis crescentes de cobre no desempenho, respostas hematológicas, atividade da ceruloplasmina, histologia do fígado e resistência da tilápia-do-Nilo ao estresse térmico foram analisados, com o objetivo de avaliar as respostas fisiológicas sob condições de estresse e desempenho produtivo frente aos níveis de suplementação dietária de cobre. Duzentos e quarenta peixes (peso inicial 8,05 ± 0,45 g) foram, aleatoriamente, distribuídos em trinta aquários (250 L) e arraçoados com dietas práticas suplementadas com cinco níveis de Cu2SO4.5H2O (4,0; 6,0; 8,0; 1000,0 e 1500 mg Cu.kg-1) e uma dieta sem suplementação, pelo período experimental de cento e vinte dias. Ao fim do período experimental foi determinado o desempenho (ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar, taxa de crescimento específico, taxa de retenção proteica e sobrevivência), e foram feitas análises histológicas dos fígados. Os parâmetros hematológicos e bioquímico (eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio, concentração de hemoglobina corpuscular média, proteína plasmática total, albumina, globulina, relação albumina:globulina e atividade da ceruloplasmina) foram avaliados após o período experimental, e em seguida os peixes foram submetidos ao estresse térmico (32°C) por três dias e, posteriormente, determinados os mesmos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Os dados de desempenho foram submetidos à técnica de análise de variância (P<0,05), e os dados hematológicos foram submetidos ao teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis; e complementados com o teste de comparações de Mann-Whitne ... / Abstract: Copper is considered essential for fish for being component of several enzymes and to participate in important reactions of organism. However, high levels of this mineral can impair the homeostasis and cause serious damages on tissues. The effects of feeding diets containing graded levels of copper on growth performance, haematological response, activity of ceruloplasmin and histology of liver, and the resistance to a high temperature stress of Nile tilapia were analyzed, in order to evaluate the physiological responses under stress conditions and growth performance front the increasing levels of dietary supplementation of copper. Two hundred and forty juveniles of Nile tilapia (initial weight 8.05 g/fish) were randomly distribute in 30 250 L-aquaria and fed with five practical diets containing levels of Cu2SO4.5H2O (4.0; 6.0; 8.0; 1000 and 1500 mg Cu.kg-1 diet) and a diet without supplementation, for 120 days. At the end of experimental period growth performance (weigh gain, feed intake, feed conversion rate, specific growth rate, protein retention rate and survival) were calculated, and the liver of five fishes/treatment were collected to histological analyses. The haematological and biochemical parameters (red blood count, haematocrit, haemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular haemoglobin concentration, total plasmatic protein, albumin, globulin, albumin/globulin ratio and ceruloplasmin activity) were evaluated after the experimental period, and then the fishes were subjected to heat stress (32°C) for three days, after the same haematological parameters were evaluated. The data of growth performance were submitted to analysis of variance (P<0,05). Haematological parameters were submitted to non-parametric test of Kruskal-Wallis; and complemented with comparasion test of Mann-Whitney (P<0,05). The toxicity of dietary copper impaired significantly the growth performance of groups of fish ... / Mestre

Orientador: José Alexandre Curiacos de Almeida Leme / Banca: Eliete Luciano / Banca: José Rodrigo Pauli / Resumo: O exercício físico é bem conhecido por seus inúmeros benefícios à saúde, no entanto, apesar de bem estudado, os seus efeitos sobre o organismo diabético tipo 1 e sua relação com estresse oxidativo ainda necessitam serem melhor investigados. Portanto, o presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos do treinamento físico em biomarcadores de danos oxidativos aos lipídios de membrana no fígado e pâncreas e a proteção antioxidante (enzimas catalase e superóxido dismutase) em ratos diabéticos aloxânicos. Para isso, ratos linhagem Wistar foram distribuídos em 4 grupos: controle sedentário (CS), controle treinado (CT), diabético sedentário (DS) e diabético treinado (DT). O treinamento consistiu de uma sessão de natação de 1 hora por dia, durante 5 dias/semana, durante 8 semanas, com uma carga equivalente ao limiar anaeróbio de 5,8 % e da massa corporal para o grupo CT e 4,2% para o grupo DT. Foram analisadas as concentrações de glicose sanguínea, proteína C reativa, glicogênio hepático, as atividades das enzimas Catalase (Cat) e superóxido dismutase (SOD) no fígado e pâncreas e além disso foram analisados os biomarcadores de danos oxidativos aos lipídios de membrana (produtos que reagem ao ácido tiobarbitúrico - TBARs) no fígado. O treinamento físico reduziu sintomas diabéticos, amenizou a perda de massa corporal, e aumentou o conteúdo de glicogênio hepático, reduziu concentrações de proteína C reativa, no fígado a catalase não diferiu significativamente, a atividade da SOD foi baixa e os níveis de peroxidação foram altos. No pâncreas, o treinamento físico aumentou as concentrações de catalase em animais diabéticos, sem, contudo alterar a atividade da SOD, indicando melhorias na saúde dos ratos diabéticos. O treinamento físico contribuiu no controle do estresse oxidativo, amenizando prejuízos promovidos pela diabetes aloxanica. Palavras-chave: fígado, pâncreas, radicais... / Abstract: Exercise is well known for its numerous health benefits, however, although well studied, its effect on the diabetic body and its relationship with oxidative stress remains to be further investigated. Therefore, this study aimed to investigate the effects of exercise training in biomarkers of oxidative damage to membrane lipids in the liver and pancreas and antioxidant protection (superoxide dismutase and catalase enzymes) in diabetic rats aloxanics. For this, Wistar rats were distributed in 4 groups: sedentary control (SC), trained control (TC), sedentary diabetic (SD) and trained diabetic (TD). Training consisted of a swim session for 1 hour per day for 5 days / week for 8 weeks with a load equivalent to anaerobic threshold, and 5.8% of body weight for CT group and 4.2% the DT group. They were analyzed in blood glucose concentrations, cholesterol, triglycerides and activity of catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) in the liver and pancreas and analyzed biomarkers of oxidative damage to membrane lipids (products react thiobarbituric acid - TBARS) in the liver. Physical training reduced diabetic symptoms alleviated loss of body mass, and increased the hepatic glycogen content, reduced C-reactive protein concentrations in the liver catalase did not differ significantly, the SOD activity was low and peroxidation levels were high. In the pancreas, physical training increased catalase levels in diabetic animals without, however, changing the activity of SOD and suggest improvements in the health of diabetic rats. Physical training has helped in controlling oxidative stress, mitigating losses promoted by alloxan diabetes / Mestre

Orientador: Eliete Luciano / Banca: Maria Alice Rostom de Mello / Banca: Ricardo José Gomes / Apresenta no final 4 artigos científicos gerados a partir desta dissertação em inglês / Resumo: Para investigar os efeitos do treinamento físico aeróbio nas concentrações de IGF-I em ratos diabéticos, ratos wistar foram distribuídos em quatro grupos: controle sedentário, controle treinado, diabético sedentário e diabético treinado. O diabetes foi induzido por aloxana (32 mg/kg) e o protocolo de treinamento consistiu de natação 1 hora/dia, 5 dias/semana, durante 8 semanas e suportando 5% do peso corporal. Durante o período experimental foram registrados semanalmente o peso, ingestão de água e comida. Na 7ª semana foram determinadas a glicemia e insulinemia em jejum para cálculo do índice Homa. Ao final deste período, os ratos foram sacrificados e o sangue foi coletado para determinação da glicose, insulina, albumina, triglicerídeos séricos e hematócrito. Amostras dos músculos gastrocnêmio e sóleo foram coletadas para determinação do glicogênio. Amostras do miocárdio foram utilizadas para determinar glicogênio e triglicerídeos e do fígado para determinar as concentrações de glicogênio, triglicerídeos, proteína, DNA e IGF-I. O diabetes aumentou a glicemia em jejum e em estado alimentado, triglicerídemia, glicogênio e triglicerídeos cardíacos além do DNA hepático. A doença ainda reduziu insulinemia em jejum e em estado alimentado, razão proteína/DNA hepática e concentrações de IGF-I no sangue e fígado. O protocolo de treinamento físico reduziu nos animais diabéticos a glicemia em jejum e em estado alimentado, trigliceridemia, glicogênio e triglicerídeos cardíaco além do DNA hepático. O treinamento, por outro lado, aumentou glicogênio muscular e recuperou a razão proteína/DNA hepático e IGF-I hepático e sérico nos animais diabéticos. Em conclusão, treinamento físico moderado melhora as condições metabólicas e endócrinas, particularmente no eixo GH-IGF, em ratos diabéticos. / Abstract: To investigate the influence of aerobic physical training on IGF-I concentrations in diabetic rats, male wistar rats were allocated into four groups: sedentary control, trained control, sedentary diabetic and trained diabetic. Diabetes was induced by Alloxan (32 mg/kg b.w.) and training protocol consisted of swimming 1hour/day, 5 days/week, during 8 weeks, supporting 5% b.w. During the experimental period, rats weight, water and food ingestion were weekly colected. In the 7th week, blood was collected for glicose and insulin in fasting to Homa index determination. At the end of this period, rats were sacrificed and blood was collected for determinations of serum glucose, insulin, albumin, triglycerides, IGF-I and hematocrit. Gastrocnemius and soleus muscle samples were collected for glycogen determination. Samples of myocardium were used to determine glycogen and triglyceride contents and of liver to determine glycogen, triglyceride, protein, DNA and IGF-I concentrations. Diabetes increased fasting and fed state glycemia, triglyceridemia, cardiac glycogen and triglyceride younder hepatic DNA. The disease still reduced fasting and fed state insulinemia, hepatic ratio protein/DNA and IGF-I concentrations in blood and liver. Physical training protocol was able to reduce fasting and fed state serum glucose, triglyceridemia, cardiac glycogen and trygliceride and hepatic 92 DNA, to increase gastrocnemius muscle glycogen and to recover hepatic ratio protein/DNA and blood and hepatic IGF-I concentrations in diabetic animals. In conclusion, moderate physical training improved the metabolic and endocrine conditions, particulary in GH-IGF axis, in diabetic rats. / Mestre

Orientador: Roberto Carlos Burini / Coorientador: Carlos Antonio Caramoni / Resumo: A Doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) se refere ao acúmulo de gordura hepática e pode evoluir para esteatohepatite, fibrose, cirrose e hepatocarcinoma. O principal fator que leva ao acúmulo de gordura hepática é a obesidade, principalmente visceral. Para o controle da doença deve-se focar na mudança do estilo de vida com associação entre prática de exercício físico e intervenção nutricional. Esse estudo teve como objetivo avaliar o consumo adequado de fibras associado a programa superviosionado para modificação do estilo de vida em relação aos parâmetros relacionados à DHGNA, comparado a indivíduos praticantes de exercício físico sem adequação alimentar em 20 semanas. Foram randomizados dois grupos (intervenção e controle) sendo ambos participantes de protocolo de exercício físico. O grupo intervenção teve seu consumo de fibras adequado para 25g/dia. Foram realizadas avaliações antropométricas com peso, estatura, índice de massa corporal (IMC), circunferência abdominal (CA), circunferência do quadril (CQ), diâmetro abdominal sagital (DAS), percentual de gordura corporal e percentual de massa muscular. Para avaliação do consumo alimentar foram aplicados três recordatórios de 24 horas. Foram coletados e avaliados dados demográficos e através de coleta sanguínea foram avaliados os parâmetros: glicemia de jejum, colesterol total, apolipoproteína de baixa densidade (LDL), apolipoproteína de alta densidade (HDL), triglicerídios, enzimas hepáticas (gama glutamiltransfer... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Mestre

Orientador: Fábio Ermínio Mingatto / Banca:Karina Sayuri Utsunomiya / Banca: Gisele Fabrino Machado / Resumo: O fipronil é um inseticida utilizado para o controle de infestações parasitárias em animais e plantas. O seu mecanismo de ação ocorre por meio da inibição dos receptores do ácido γ-aminobutírico e dos canais de Cl-. Em mamíferos, além do sistema nervoso central, outros órgãos podem ser afetados pelo tratamento com fipronil, dentre eles o fígado. O presente estudo objetivou caracterizar os efeitos do fipronil sobre o metabolismo hepático, por meio da técnica de perfusão isolada de fígado de rato. Foram avaliados parâmetros associados ao metabolismo de carboidratos no período pós-prandial e no jejum e também o metabolismo de aminoácidos no jejum. O fipronil foi infundido no fígado na faixa de concentrações de 10 a 50 μM. O consumo de oxigênio foi monitorado por polarografia e nas amostras do perfusado efluente foram quantificadas as produções de glicose, lactato, piruvato, ureia e amônia. Em animais alimentados, o fipronil inibiu o consumo de oxigênio. Houve aumento da liberação de glicose e lactato provenientes do catabolismo do glicogênio, indicando estímulo da glicogenólise e glicólise. No fígado de animais em jejum, o fipronil inibiu a produção de glicose e de ureia a partir da L-alanina, enquanto a produção de amônia e de lactato foi aumentada. Esses resultados revelam que o fipronil inibe os processos biossintéticos e estimula os processos compensatórios de geração de ATP (glicogenólise e glicólise). A inibição do consumo de oxigênio corrobora que uma ação inibitória sobre a atividade respiratória mitocondrial e, portanto, uma interferência sobre o metabolismo energético seja o mecanismo de ação citotóxica do fipronil / Abstract: Fipronil is an insecticide used to control parasitic infestations in animals and plants. Its mechanism of action is through inhibition of receptor γ-aminobutyric acid and the Cl- channel. In mammals, besides the central nervous system, other organs may be affected by treatment with fipronil, including the liver. The present study aimed to characterize the effects of fipronil on hepatic metabolism, through the technique of isolated perfused rat liver. Parameters related to carbohydrate metabolism in the postprandial and fasting period and also the aminoacids metabolism during fasting were evaluated. Fipronil was infused in the perfused livers in the concentration range of 10-50 μM. Oxygen consumption was monitored by polarography and in samples of effluent perfusate the production of glucose, lactate, pyruvate, urea and ammonia was quantified. In fed animals, fipronil inhibited the oxygen consumption significantly. There was increased release of glucose and lactate from the catabolism of glycogen, indicating stimulation of glycogenolysis and glycolysis. In the liver of fasted animals, fipronil inhibited the production of glucose and urea from exogenous L-alanine, whereas the production of ammonia and lactate was increased. These results indicate that the fipronil inhibits biosynthetic processes (gluconeogenesis and ureagenesis) and stimulates compensatory processes of ATP formation (glycolysis and glycogenolysis). Inhibition of oxygen consumption corroborates the suggestion that an inhibitory effect on mitochondrial respiratory activity and therefore an interference with energy metabolism is the possible mechanism of cytotoxic action of fipronil / Mestre

Orientador: José Corrêa de Lacerda Neto / Banca: Julio Carlos Canola / Banca: Gesiane Ribeiro Leão Ferraz / Resumo: As doenças hepáticas são bastante comuns nos animais pecuários e responsáveis por inúmeras perdas econômicas, associadas não apenas à morte como também à diminuição da produção e do rendimento e aos gastos com exames diagnósticos e tratamentos. Em equinos as afecções hepáticas são bastante frequentes, acometendo animais de todas as idades e raças, tanto machos quanto fêmeas. O diagnóstico das afecções hepáticas em animais domésticos é feito por análises bioquímicas, exame radiográfico e ultrassonográfico e exame histopatológico de fragmento do orgão colhido por meio de biópsia hepática. O objetivo com o presente estudo é avaliar as possíveis alterações clínicas e laboratoriais induzidas pela realização da técnica de biópsia hepática percutânea guiada por ultrassom em equinos. Para tanto foram utilizados oito equinos sem raça definida (SRD) adultos, machos ou fêmeas, entre 5 e 10 anos de idade, alocados aleatoriamente em dois grupos experimentais, cada grupo sendo composto por quatro animais. O modelo experimental utilizado foi o "crossing over", assim os grupos experimentais foram invertidos após um período de descanso de seis meses. Os animais do primeiro grupo, denominado G1, foram submetidos à biópsia hepática, enquanto os animais do grupo denominado G2 serviram como grupo controle, sendo submetidos a todos os procedimentos, exceto à biópsia hepática. Foram realizadas colheitas de sangue e de fluido peritoneal para análise hematimétrica, leucométrica e bioquímica, além de exames físicos diários. As variáveis analisadas não apresentaram diferença estatística entre os grupos Controle e Biópsia, com excessão da coloração do fluido peritoneal que se tornou avermelhado após a biópsia. Conclui-se que a técnica de biópsia ... / Abstract: Liver diseases are very common in livestock animals and are responsible for numerous economic losses, associated not only with death but also with low production rates and expenses with diagnostic exams and treatments. Hepatic diseases in horses are relatively frequent and it can harm animals of all ages, sex and breeds. The diagnosis of liver affections in domestic animals is made with biochemical analyses, x-ray and ultrasound exams, and histopathological exam of liver fragment obtained by a liver biopsy. The aim of this study was to evaluate the possible clinical and laboratorial changes induced by the percutaneous liver biopsy technique guided by ultrasound in horses. Eight adult horses, male or female, ages ranged from 5 to 10 years, were used in this study. The animals were divided into two experimental groups: control group and biopsy group. Peritoneal fluid and blood samples were collected for hematimetric, leucometric and biochemicanalysis, besides the daily physical exams. The analyzed variables did not differ statistically in between the two groups, regardless the peritoneal fluid color witch became reddish after the biopsy was done. In conclusion, the Tru-cut liver biopsy technique is safe and efficient; its use for diagnoses purposes of hospital routine of liver diseases in horses ... / Mestre

Orientador: Maria Jaqueline Mamprim / Banca: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Luciana Del Rio Pinoti Ciarlini / Banca: Tilde Rodrigues Froes / Banca: Fabiano Séllos Costa / Resumo: O objetivo do estudo foi avaliar as alterações parenquimatosas difusas hepáticas pela ultrassonografia em modo B e, quantitativamente, através do histograma, assim como as alterações vasculares, através da ferramenta Doppler, a fim de correlacionar os resultados obtidos às afecções hepáticas diagnosticadas pelo exame histopatológico. Foram submetidos à biopsia percutânea 41 cães com alterações hepáticas difusas detectadas pela ultrassonografia. O trabalho foi divido em três etapas. No primeiro estudo 25 cães com hepatite crônica, agrupados segundo o grau de fibrose, foram avaliados pela ultrassonografia em modo B. Quatro padrões de ecotextura foram descritos, concomitante ao aumento difuso da ecogenicidade hepática, sendo possível associar três destes padrões ao grau da fibrose hepática. Em um segundo estudo 25 cães com hepatite crônica e 11 cães com neoplasia hepática foram avaliados através da ultrassonografia Doppler. Mapeamento vascular do parênquima hepático foi realizado através do Doppler colorido e mensurações quantitativas pelo Doppler espectral. As alterações hemodinâmicas observadas na doença hepática crônica como portalização do fluxo da veia hepática, dilatação da artéria hepática, circulação portal colateral adquirida e fluxo portal hepatofugal, tornaram-se mais evidentes à medida que o grau de fibrose se agravou, permitindo a associação de alterações hemodinâmicas significativas com o estágio avançado da doença, conferindo, assim, um valor prognóstico à avaliação Doppler na doença hepática crônica dos cães. O estudo Doppler também auxiliou a diferenciar as hepatites crônicas das neoplasias hepáticas difusas, através da detecção de alterações vasculares sugestivas de malignidade, como hipervascularização caótica do parênquima hepático. No terceiro estudo uma... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to assess diffuse hepatic parenchymal changes, subjectively, by B mode ultrasonography and, quantitatively, by histogram, as well as the vascular changes, by Doppler ultrasound, in order to correlate the results to hepatic disorders, diagnosed by histopathology. A total of 41 dogs with diffuse liver disorders detected by ultrasonography underwent percutaneous hepatic biopsy. In the first study 25 dogs with chronic hepatitis, grouped based on the severity of fibrosis, were evaluated by B mode ultrasonography. Diffuse increase in hepatic echogenicity and four different echotexture patterns were described, and in 3 cases, associated with the degree of fibrosis. In the second study 25 dogs with chronic hepatic disease, grouped based on the severity of fibrosis, and 11 dogs with diffuse neoplasia, were assessed by Doppler ultrasonography. Vascular mapping of the hepatic parenchyma was performed using color Doppler, and quantitative measurements by spectral Doppler. Hemodynamic changes detected in chronic liver disease such as hepatic vein flow portalization, hepatic artery dilatation, acquired portal collateral circulation and hepatofugal flow in the portal vein were more evident as the degree of fibrosis became worse, thus significant hemodynamic changes were associated with the advanced stage of disease in dogs. Doppler studies also aided to differentiated chronic hepatitis and diffuse hepatic neoplasia, detecting vascular changes suggestive of malignance, such as chaotic hypervascularity of liver parenchyma. In the third study quantitative assessment of liver echogenicity and echotexture by histogram was performed in 10 healthy dogs, 5 dogs with hepatic fatty degeneration and 25 dogs with chronic hepatitis. It was observed quantitatively increased echogenicity in dogs with hepatic fatty... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Coorientador: Rejane Maria Tommasini Grotto / Banca: Giovanni Faria Silva / Banca: Alexandre Neime Barbosa / Banca: Liliana Moura Massis / Banca: Paulo Inácio da Costa / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Doutor