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Análises cromossômicas, clássica e molecular, de três espécies de Farlowella Eigenmann & Eigenmann, 1889 (Siluriformes, Loricariidae, Loricariinae)

Silva, Leandro Marajó da 12 May 2017 (has links)
Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-08-02T18:54:53Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de Mestrado Leandro Marajó.pdf: 2337063 bytes, checksum: 4c35dd6b08c59ddafaa3d702680d19a9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-02T18:54:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação de Mestrado Leandro Marajó.pdf: 2337063 bytes, checksum: 4c35dd6b08c59ddafaa3d702680d19a9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-05-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / The genus Farlowella is known as catfish or branchfish, of distribution restricted to the rivers of South America, having, in the Amazon basin, groups of endemic species. This genus is characterized by presenting: body covered by bony plates, long and depressed caudal peduncle; prominent snout and absence of adipose fin and because of their peculiar morphology are sold as ornamental fish. However, Farlowella's systematics remains confused and controversial, and has gone through different groupings throughout its history. Thus, the present study aimed to characterize, through classical and molecular cytogenetic analyzes, three Farlowella species that occur in Negro River basin, in order to find possible species-specific markers or population-based markers that allow inferring on the mechanisms of its chromosome evolution. We analyzed 28 individuals of three Farlowella species from different localities: F. cf. amazona from the vicinity of the city of Barcelos-AM, F. oxyrryncha of the Igarapé of Agenor Site and F. schreitmuelleri of Igarapé Jundiá, both located in the Municipality of Manaus-AM. The three species presented 2n = 58 chromosomes and fundamental number 110, 112 and 116 arms. As for constitutive heterochromatin, the three species exhibited blocks in centromeric region and adjacencies, as well as some bitelomeric markers and only F. oxyrryncha and F. schreitmuelleri showed interstitial markings. Furthermore, the C-band pattern observed in pair 27 of F. oxyrryncha appears to characterize a sex chromosome system of type XX/XY. The nucleolar chromosomal pair appears to be homeologous between species. The 5S rDNA probe was a species-specific marker. FISH with telomeric probe detected interstitial telomeric sequences (ITS) in F. oxyrryncha and F. schreitmuelleri and these were matched with heterochromatin. In F. oxyrryncha ITSs was polymorphic, with four variations observed. From the data obtained it was possible to suggest that the chromosomal rearrangements involved in the karyotype evolution of this genus and in the differentiation of sex chromosomes are non Robertsonian rearrangements, and that interspecific and population differences may suggest the presence of species complexes in this genus. / O gênero Farlowella é conhecido como bagre-vara ou peixe-galho, de distribuição restrita aos rios da América do Sul, tendo, na bacia amazônica, grupos de espécies endêmicas. Este gênero é caracterizado por apresentar: corpo coberto por placas ósseas, pedúnculo caudal longo e deprimido, focinho proeminente e ausência de nadadeira adiposa e por causa de sua morfologia peculiar são apreciados como peixes ornamentais. Entretanto, a sistemática de Farlowella permanece confusa e controversa, e tem passado por diferentes agrupamentos ao longo de sua história. Assim, o presente estudo objetivou analisar, por meio da citogenética clássica e molecular, três espécies de Farlowella que ocorrem na bacia do rio Negro, a fim de encontrar possíveis marcadores espécie-específicos ou populacionais, que permitam inferir sobre os mecanismos de sua evolução cromossômica. Foram analisados 28 indivíduos de três espécies de Farlowella de diferentes localidades: F. cf. amazona proveniente das adjacências da cidade de Barcelos-AM, F. oxyrryncha do Igarapé do Sítio Agenor e F. schreitmuelleri do Igarapé Jundiá, ambos localizados no Município de Manaus-AM. As três espécies apresentaram 2n=58 cromossomos e número fundamental 110, 112 e 116 braços, respectivamente. Quanto à heterocromatina constitutiva, as três espécies exibiram blocos na região centromérica, bem como algumas marcações biteloméricas e somente F. oxyrryncha e F. schreitmuelleri apresentaram marcações intersticiais. Ainda, o padrão de banda C observado no par 27 de F. oxyrryncha caracteriza um sistema de cromossomos sexuais do tipo XX/XY. O par cromossômico nucleolar parece ser homeólogo entre as espécies. A sonda de DNAr 5S foi um marcador espécie-específico. A FISH com sonda telomérica detectou sequências teloméricas intersticiais (ITS) em F. oxyrryncha e em F. schreitmuelleri e estas foram coincidentes com heterocromatina. Em F. oxyrryncha a ITS foi polimórfica, sendo observadas quatro variações. A partir dos dados obtidos foi possível sugerir que os rearranjos cromossômicos, envolvidos na evolução cariotípica desse gênero e na diferenciação de cromossomos sexuais são não Robertsonianos e que as diferenças interespecíficas e populacionais podem sugerir a presença de complexos de espécies nesse gênero.
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Resgate vegetativo e propagação in vitro de Persea willdenovii Kosterm.

Meneguzzi, Aline 17 February 2017 (has links)
Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2017-12-13T13:00:43Z No. of bitstreams: 1 PGEF17MA075.pdf: 2618024 bytes, checksum: d2a8781e299067e8fc5f0691bd03b8a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T13:00:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGEF17MA075.pdf: 2618024 bytes, checksum: d2a8781e299067e8fc5f0691bd03b8a5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Capes / The objective of this study was to determine method to the rescue of vegetative material of adult plants of P. willdenovii and evaluate the spread of this material, via tissue culture. The work was conducted with 20 P. willdenovii matrices located in Urupema / SC (28°17'38 ''S, 49°55'54''W). In the vegetative rescue, the following techniques were tested: trunk annealing (100%), semianelation at 75% of the trunk circumference, semianelation at 50% trunk and the induction of shoots from pruned branches. The shoots were harvested at 90, 120, 150, 180, 210 and 240 days after application of the treatments. Sprouts were used in the in vitro culture technique. In the establishment of shoots, asepsis methods were tested: 15 and 20 minutes of contact with sodium hypochlorite (NaClO) (2% v v-1) and the presence / absence of the PPM® biocide (1,5mL L-1) In the culture medium. For in vitro multiplication, two culture media (MS and WPM) and BAP concentration (0, 2, 4 and 6 mg L-1) were tested. Also, the induction of calogenesis by foliar explant was tested in the treatments: position of contact of the foliar face with the culture medium (up and down) and the combination of the BAP and ANA phytoregulators in different concentrations (0 to 12 mg L-1). All vegetative material rescue techniques emitted new shoots, with emphasis on the pruned branches method, which presented the best results for sprouting percentage, number and length of shoots. In vitro culture, asepsis of explants with NaClO for 20 minutes and addition of PPM® in the medium resulted in lower rates of fungal (50%), bacterial (5%), oxidation (23%) and higher survival (76%) of the explants. In vitro multiplication, explants in MS medium had higher oxidation (48%) and lower survival (52%) when compared to WPM medium (26% and 74%, respectively). For the average number of shoots and leaves, the concentration of 3 mg L-1 BAP reached the highest technical efficiency (MET) (1.22 and 1.75 mg L-1, respectively). Foliar segments were not responsive in inducing calogenesis after 120 days of in vitro culture. In this way, it is indicated for the vegetative rescue of P. willdenovii the method of pruned branches. While for in vitro propagation, the use of NaClO (2% v v-1) for 20 minutes and the PPM® biocide (1.5 ml L-1) in the culture medium is recommended in the establishment phase and The use of WPM medium plus 3 mg L-1 of BAP in the multiplication phase. / O objetivo deste trabalho foi determinar método para o resgate de material vegetativo de plantas adultas de P. willdenovii e avaliar a propagação deste material, via cultura de tecidos. Foram utilizadas 20 árvores matrizes de P. willdenovii localizadas no município de Urupema/SC (28°17'38''S; 49°55'54''W). No resgate vegetativo, foram testadas as seguintes técnicas: anelamento do tronco, semianelamento em 75% da circunferência do tronco, semianelamento em 50% e galhos podados. As coletas das brotações foram realizadas aos 90, 120, 150, 180, 210 e 240 dias após a aplicação dos tratamentos. As brotações foram utilizadas na técnica de cultivo in vitro. No estabelecimento testaram-se métodos de assepsia: 15 e 20 minutos de contato com hipoclorito de sódio (NaClO) (2% v v-1) e a presença/ausência do biocida PPM® (1,5mL L-1) no meio de cultura. Para a multiplicação in vitro, foram testados meios de cultura (MS e WPM) e doses de BAP (0, 2, 4 e 6 mg L-1). Também, foi testada a indução de calogênese via explante foliar, nos tratamentos: posição de contato da face foliar com o meio de cultivo (abaxial e adaxial) e a combinação dos fitorreguladores BAP e ANA em diferentes concentrações (de 0 a 12 mg L-1). Todas as técnicas de resgate de material vegetativo emitiram novos brotos, com destaque para o método via galhos podados que apresentou os melhores resultados para porcentagem de brotação, número e comprimento de brotos. No cultivo in vitro, a assepsia dos explantes com NaClO por 20 minutos e a adição do PPM® no meio resultou em menores índices de contaminação fúngica (50%), bacteriana (5%), oxidação (23%) e maior sobrevivência (76%) dos explantes. Na multiplicação in vitro, os explantes em meio MS tiveram maior oxidação (48%) e menor sobrevivência (52%) quando comparado ao meio WPM (26% e 74%, respectivamente). Para o número médio de brotos e de folhas, a concentração de 3 mg L-1 BAP atingiu a máxima eficiência técnica (MET) (1,22 e 1,75 mg L-1, respectivamente). Os segmentos foliares não foram responsivos na indução de calogênese após 120 dias de cultivo in vitro. Desta forma, indica-se para o resgate vegetativo de P. willdenovii o método de galhos podados. Enquanto que, para a propagação in vitro, recomenda-se o uso de NaClO (2% v v-1) durante 20 minutos e do biocida PPM® (1,5 ml L-1) no meio de cultura na fase de estabelecimento e a utilização do meio WPM acrescido de 3 mg L-1 de BAP na fase de multiplicação

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