HIPÓTESIS Y OBJETIVOS: La presencia de masas residuales postquimioterapia es una circunstancia relativamente frecuente (30-60%) en pacientes afectos de tumores germinales testiculares (TGT) metastásicos tras la finalización de la quimioterapia de inducción y en ausencia de elevación de marcadores tumorales. La resección quirúrgica constituye el tratamiento comúnmente aceptado en estos casos y en especial en los TGT no seminomatosos. La histología de dichas masas revelará hasta en un 40% la presencia de fibronecrosis, teratoma maduro en un 40% y tumor germinal viable en el 20% restante. La detección de tumor germinal viable en las masas resecadas es sumamente útil pues su presencia determinará la aplicación de nuevos ciclos de quimioterapia adyuvante. Así mismo la exéresis del teratoma, dado su carácter quimio-radio resistente y su potencial capacidad de crecimiento (síndrome del "Growing teratoma") determina que la cirugía sea la única alternativa en éstos casos. Por tanto y, a diferencia de las dos situaciones anteriores, la exéresis de masas residuales que contengan únicamente el componente histológico de fibronecrosis no va a tener valor terapéutico alguno y obliga a someter al paciente a una cirugía compleja con potenciales complicaciones y secuelas (disfunción eyaculatoria).Por tanto nuestro estudio se propone identificar predictores objetivos de la histología de fibronecrosis en las masas residuales postquimioterapia que nos permitan omitir, en casos seleccionados,la práctica de la cirugía retroperitoneal. Se analizan la asociación y el valor predictivo global de las variables histológicas del tumor primario, variables clínico-biológicas y variables radiológicas respecto a la presencia de fibrosis-necrosis en las masas residuales postquimioterapia. Así mismo se analiza la morbilidad global de la serie estudiada.MATERIAL Y MÉTODO: Se realiza un estudio descriptivo y retrospectivo de una cohorte de 49 pacientes afectos de tumores germinales (46 testiculares y 3 extragonadales de localización retroperitoneal) con masa residual retroperitoneal postquimioterapia.pacientes afectos de TGT con masa residual de localización retroperitoneal. Se valoran diferentes variables histológicas (composición histológica cuantitativa, volumen tumoral, permeación linfo-vascular e invasión de estructuras testiculares), clínico-biológicas (edad, lateralidad, antecedente de maldescenso testicular, niveles prequimioterapia de alfa-feto proteína, beta-coriogonadotropina y lactato deshidrogenasa) y radiológicas (variaciones dimensionales y densitométricas en las masa residuales durante la aplicación de la quimioterapia). Se realiza un estudio descriptivo completo y un análisis estadístico uni y multivariante de los resultados obtenidos.CONCLUSIONES:La ausencia de elementos teratomatosos en el tumor primario se asoció a una mayor probabilidad de encontrar fibronecrosis en las masas residuales postquimioterapia en nuestra serie. La presencia del componente de teratoma en el tumor primario se correlaciona con una elevada probabilidad de contener dicho componente en las masas residuales. Los niveles de alfa-feto proteína, beta-coriogonadotropina y lactato deshidrogenasa previos a la cirugía retroperitoneal así como el resto de variables clínicas evaluadas no han resultado predictores de la histología de fibronecrosis en las masas residuales postquimioterapia en nuestra serie. Las masas residuales que presentan reducciones de volumen superiores o iguales al 90 % durante la administración de la quimioterapia estándar se asocian a una mayor probabilidad de contener fibronecrosis. Los enfermos que presentan asociación de elementos de teratoma maduro más reducciones volumétricas superiores o iguales al 90 % tras la quimioterapia, tienen más probabilidad de tener fibronecrosis en las masas residuales, si bien la probabilidad no es lo suficientemente elevada como para evitar la cirugía. La tasa global de complicaciones y mortalidad han sido bajas y equiparables a las series publicadas. / OBJECTIVE: Up to 60% of patients with disseminated advanced germ cell tumors will have residual masses after completion of chemotherapy. Surgical resection is a generally accepted treatment for residual retroperitoneal masses after chemotherapy for metastatic germ cell tumors, particularly in testicular nonseminomatous germ cell tumors. After resection may reveal fibrosis/necrosis, diferenciated teratoma or viable cancer cells. The objective of surgery is to document the presence or absence of residual viable malignancy and to remove teratomatous components. Patients with complete necrotic or fibrosis residual tumor do not need surgical removal of the residual masses. Efforts have been made to identify these patients with a very high likelihood of fibrosis/necrosis to avoid retroperitoneal surgery.PATIENTS AND METHODS: The data set consisted of 49 patients with metastatic germ cell tumors (46 metastasic testicular cancer and 3 extragonadal retroperitoneal tumors) with postchemotherapy retroperitoneal residual masses. We evaluated histological primary tumor parameters, radiological characteristic of residual masses (changes in size and density during the course of chemotherapy) and clinical parameters like tumors markers (AFP, B-HCG and LDH) pre-chemotherapy, and all were correlated with the presence/absence of fibrosis/necrosis at retroperitoneal surgery.CONCLUSIONS: Patients with absence of teratomatous components in the primary tumor might be asociated with a very high likelihood of fibrosis/necrosis in postchemotherapy residual masses. Teratoma components in primary tumor was correlated with a high likelihood of teratoma in retroperitoneal surgical specimens. Prechemotherapy tumor marker levels (AFP, B-HCG and LDH) and other clinical parameters evaluated were not predictors of fibrosis/necrosis in postchemotherapy residual masses. A tumor shrinkage ≥ 90% during the course of medical treatment was correlated with a high likelihood of fibrosis/necrosis in postchemotherapy residual masses. Patients with asociation of tumor shrinkage ≥ 90% during the course of medical treatment and absence of teratomatous components in the primary tumor might be asociated with a very high likelihood of fibrosis/necrosis in postchemotherapy residual masses. Finally, morbidity was low and similar to other previous studies.

La divison cellulaire asymétrique est un processus essentiel qui permet aux cellules souches de s’auto-renouveller et de produire une cellule fille destinée à la différenciation. La lignée germinale de C. elegans, totipotente et immortelle, est une lignée de cellules souches qui contient des organites ribonucléoprotéiques appelés granules P. Au cours du développement ces derniers sont toujours localisés spécifiquement dans les cellules précurseurs de la lignée germinals, suggérant qu’ils sont des déterminants de la lignée germinale. De façon intéressante, des granules ribonucléoprotéiques, comme les P bodies impliqués dans le contrôle post-transcriptionnel, ont été observés chez tous les organismes. Néanmoins, la fonction précise des granules P de C. elegans est inconnue. Récemment, notre laboratoire a montré que NHL-2, un homologue de Mei-P26 de Drosophile, colocalise avec les granules P dans des embryons précoces et joue un rôle dans la division cellulaire asymétrique et dans la polarité cellulaire. Tous les granules P contiennent NHL- 2, ce qui nous a mené à poser l’hypothèse que NHL-2 régule la biogenèse et la fonction des granules P. Nous avons testé cette hypothèse par imagerie et quantification de l'intensité de PGL-1, un composant essentiel des granules P, dans des embryons fixés. Nos résultats montrent que dans des embryons mutants pour nhl-2 il y a une réduction du nombre de granules P, de l'intensité de fluorescence moyenne (IFM) et de l'intensité de fluorescence total (IFT) de PGL-1. Une analyse plus poussée a montré qu'il existe deux populations distinctes d’embryons mutants pour nhl-2 : l’une présente une intensité de PGL-1 comparable à celle d’une population sauvage alors que le second groupe présente une forte réduction des quantités de PGL-1 et est comparable à des mutants pour pgl-1. Cette variabilité est aussi observée dans le phénotype de stérilité de nhl-2 mutant à des températures élevées. Globalement, nos résultats suggèrent que la perte de fonction de NHL-2 perturbe la prolifération des cellules germinales ainsi que la formation et/ou la stabilité des granules P au cours des étapes précoces du développement des précurseurs de la lignée germinals. D’autre part, ils suggèrent que la fonction de NHL-2 pourrait être partiellement redondants avec les autres régulateurs de la stabilité des granules P. Mots-clés : Granules P, NHL-2, Cellules germinals. / Asymmetric cell division is a process that enables stem cells to simultaneously self-renew and generate progeny committed to differentiation. For instance the totipotent and immortal germ lineage in C. elegans is a stem cell lineage that contains ribonucleoprotein organelles called P granules. P granules are present specifically in germ cells and have been proposed to function as germ line determinants. Interestingly, various RNP granules, such as P bodies that regulate post-transcriptional control have been also observed in all organisms. Nevertheless, the precise function of C. elegans P granules remains elusive. Recently our lab showed that NHL-2, a C. elegans homologue of Drosophila Mei-P26, localizes to P granules in early embryos and plays a role in asymmetric cell division and cell polarity. All P granules contain NHL-2, raising the possibility that NHL-2 plays a role in regulating P granule biogenesis and function. We investigated this possibility by imaging and quantifying the intensity of PGL-1, a core component of P granules, in fixed embryos. This analysis revealed that there is a reduction in: 1) the number of P granules and 2) the mean fluorescence intensity (MFI) and total fluorescence intensity (TFI) of PGL-1 staining in nhl-2 null mutant embryos compared to wild type. Our further analysis of nhl-2 loss of function demonstrates that NHL-2, similar to P granule core components such as DEPS-1, GLH-1 and PGL-1, is required for proper germ cell proliferation and fertility at elevated temperature. One aspect of the nhl-2 loss of function phenotype is that nhl-2 mutants are distributed in different groups based on both their P granules number and PGL-1 intensity: one population has wild type PGL-1 intensity while the second group has severely reduced amounts of PGL-1. Strikingly, such variability is observed even in the sterility phenotype of nhl-2 mutants at elevated temperatures. Taken together, our results suggests that NHL-2 loss of function disrupts germ cell proliferation as well as P granule formation or stability during early stages of germ cell precursor development and that NHL-2 function may be partially redundant with other regulators of P granule stability. Keywords : P granules, NHL-2, Germline.

La divison cellulaire asymétrique est un processus essentiel qui permet aux cellules souches de s’auto-renouveller et de produire une cellule fille destinée à la différenciation. La lignée germinale de C. elegans, totipotente et immortelle, est une lignée de cellules souches qui contient des organites ribonucléoprotéiques appelés granules P. Au cours du développement ces derniers sont toujours localisés spécifiquement dans les cellules précurseurs de la lignée germinals, suggérant qu’ils sont des déterminants de la lignée germinale. De façon intéressante, des granules ribonucléoprotéiques, comme les P bodies impliqués dans le contrôle post-transcriptionnel, ont été observés chez tous les organismes. Néanmoins, la fonction précise des granules P de C. elegans est inconnue. Récemment, notre laboratoire a montré que NHL-2, un homologue de Mei-P26 de Drosophile, colocalise avec les granules P dans des embryons précoces et joue un rôle dans la division cellulaire asymétrique et dans la polarité cellulaire. Tous les granules P contiennent NHL- 2, ce qui nous a mené à poser l’hypothèse que NHL-2 régule la biogenèse et la fonction des granules P. Nous avons testé cette hypothèse par imagerie et quantification de l'intensité de PGL-1, un composant essentiel des granules P, dans des embryons fixés. Nos résultats montrent que dans des embryons mutants pour nhl-2 il y a une réduction du nombre de granules P, de l'intensité de fluorescence moyenne (IFM) et de l'intensité de fluorescence total (IFT) de PGL-1. Une analyse plus poussée a montré qu'il existe deux populations distinctes d’embryons mutants pour nhl-2 : l’une présente une intensité de PGL-1 comparable à celle d’une population sauvage alors que le second groupe présente une forte réduction des quantités de PGL-1 et est comparable à des mutants pour pgl-1. Cette variabilité est aussi observée dans le phénotype de stérilité de nhl-2 mutant à des températures élevées. Globalement, nos résultats suggèrent que la perte de fonction de NHL-2 perturbe la prolifération des cellules germinales ainsi que la formation et/ou la stabilité des granules P au cours des étapes précoces du développement des précurseurs de la lignée germinals. D’autre part, ils suggèrent que la fonction de NHL-2 pourrait être partiellement redondants avec les autres régulateurs de la stabilité des granules P. Mots-clés : Granules P, NHL-2, Cellules germinals. / Asymmetric cell division is a process that enables stem cells to simultaneously self-renew and generate progeny committed to differentiation. For instance the totipotent and immortal germ lineage in C. elegans is a stem cell lineage that contains ribonucleoprotein organelles called P granules. P granules are present specifically in germ cells and have been proposed to function as germ line determinants. Interestingly, various RNP granules, such as P bodies that regulate post-transcriptional control have been also observed in all organisms. Nevertheless, the precise function of C. elegans P granules remains elusive. Recently our lab showed that NHL-2, a C. elegans homologue of Drosophila Mei-P26, localizes to P granules in early embryos and plays a role in asymmetric cell division and cell polarity. All P granules contain NHL-2, raising the possibility that NHL-2 plays a role in regulating P granule biogenesis and function. We investigated this possibility by imaging and quantifying the intensity of PGL-1, a core component of P granules, in fixed embryos. This analysis revealed that there is a reduction in: 1) the number of P granules and 2) the mean fluorescence intensity (MFI) and total fluorescence intensity (TFI) of PGL-1 staining in nhl-2 null mutant embryos compared to wild type. Our further analysis of nhl-2 loss of function demonstrates that NHL-2, similar to P granule core components such as DEPS-1, GLH-1 and PGL-1, is required for proper germ cell proliferation and fertility at elevated temperature. One aspect of the nhl-2 loss of function phenotype is that nhl-2 mutants are distributed in different groups based on both their P granules number and PGL-1 intensity: one population has wild type PGL-1 intensity while the second group has severely reduced amounts of PGL-1. Strikingly, such variability is observed even in the sterility phenotype of nhl-2 mutants at elevated temperatures. Taken together, our results suggests that NHL-2 loss of function disrupts germ cell proliferation as well as P granule formation or stability during early stages of germ cell precursor development and that NHL-2 function may be partially redundant with other regulators of P granule stability. Keywords : P granules, NHL-2, Germline.