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Farelo de crambe na alimenta??o de bovinos leiteiros / Bran Crambe to dairy cattleHerculano, Bruna Nogueira January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Foram analisados o consumo, a digestibilidade, os horm?nios tireoidianos e as enzimas hep?ticas, com o objetivo de avaliar os poss?veis efeitos da substitui??o do farelo de soja (FS) pelo farelo de crambe (FC) (Crambe Abyssinica), em dietas para bovinos leiteiros. Foram utilizados quatro bovinos Holand?s x Zebu castrados, com peso m?dio de 664 kg. A dieta foi formulada segundo o NRC (2001), atendendo a rela??o volumoso: concentrado 60:40 na mat?ria seca (MS), tendo a silagem de milho e o feno de tifton com o volumoso em todas as dietas, em propor??es m?dias fixas de 33% e 67% na MS, respectivamente. Os animais receberam quatro dietas contendo 0%, 2,8%, 6,4% e 11,0% de FC na MS da dieta, o qual representava substitui??o do FS em 0%, 33%, 66% e 99% por FC na MS da dieta. N?o foram observados efeitos (p>0,05) dos n?veis de substitui??o para os consumos de mat?ria seca,mat?ria org?nica, fibra em detergente neutro corrigido para cinzas e prote?na, fibra em detergente ?cido, carboidratos n?o fibrosos, prote?na bruta, extrato et?reo e nutrientes digest?veis totais quando expressos em %PV, observando-se m?dias de 2,50%, 2,22%, 1,14%, 0,52%, 0,66%, 0,34%, 0,07% e 1,21%, respectivamente.As digestibilidades aparentes totais da fibra em detergente neutro, fibra em detergente ?cido, carboidratos n?o fibrosos, prote?na bruta e extrato et?reo tamb?m n?o foram influenciadas pelos n?veis crescentes do FC, apresentando valores m?dios de 41,59%, 32,55%, 73,85%, 63,65%, respectivamente. Entretanto, a digestibilidade da mat?ria seca e mat?ria org?nica, reduziram-se, significativamente (p<0,05), com o aumento da inclus?o do FC nas dietas. N?o houve diferen?a (P>0,05) na avalia??o das atividades s?ricas enzim?ticas em nenhum dos tratamentos analisados, sendo os valores m?dios de GGT de 39,03UI/L., AST de 68,34UI/L., e ALT de 24.781UI/L.A inclus?o do FC tamb?m n?o ocasionou diferen?as significativas (P>0,05) para os n?veis de T4 livre 1,27 uUI/mL. Para os teores de TSH, houve maior frequ?ncia de resultados para valores inferiores a 0,008 uUI/mL. O FC n?o afeta o consumo e os par?metros sangu?neos dos bovinos, todavia exerce efeito negativo na digestibilidade da mat?ria seca e da mat?ria org?nica. / The digestibility, the thyroidal hormones and the hepatic enzymes were analyzed with the purpose of measure the possible effects of the substitution of the soy bran for the crambe bran, on the dairy cattle?s diet. It was used four Holstein x Zebu bovines, castrated, with average weight of 664 kg. The diet was formulated according to NRC (2001) serving the relation voluminous: concentrate 60:40 on dry matter (MS), with corn silage and hay as roughage in all diets, with average fixed proportions of 33% and 67% in MS, respectively. The animals received four diets containing 0%, 2.8%, 6.4%and 11.0% of bran in the diet DM crambe, which represented replacement of soybean meal at 0%, 33%, 66% and 99% by bran crambe of the diet DM. No effects were observed (p>0,05) in the levels of by-product for the consumption of dry matter, organic matter, neutral detergent fiber corrected for ash and protein, acid detergent fiber, non-fiber carbohydrates, crude protein, ether extract, total digestible nutrients, when expressed in %PV, observing averages of 2,50%, 2,22%, 1,14%, 0,52%, 0,66%, 0,34%, 0,07% and 1,21%, respectively. The total apparent digestibilities of neutral detergent fiber corrected for ash and protein, acid detergent fiber, non-fiber carbohydrates, crude protein and ether extract, also were not affected by increasing levels of FC presenting medium values of 59,34%, 41,59%, 32,55%, 73,85%, 63,65%, respectively. However, the digestibilities of dry matter and organic matter decreased significantly (p<0,05) with increased inclusion of FC on the diets. There was no difference (p>0,05) in the assessment of seric enzymatic activities in none of the analyzed treatments, with GGT medium values of 39,03UI/L., AST de 68,34UI/L., and ALT de 24.781UI/L. Also levels of by-product did not cause significant differences (p>0,05) in the levels of free T4 1,27 uUI/mL. For the levels of TSH, there was more tendency of resulted a range of results below 0,008 uUI/mL. The FC does not affect the consumption and the blood parameters of the bovines, although it exerts negative effect on the digestibility of dry matter and organic matter. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Zootecnia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2013
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Uso do farelo de crambe na alimenta??o de frangos de corteVieira, Dayane Josiane January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Funda??o de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar nutricionalmente o farelo de crambe em ra??es para frangos de corte. O primeiro experimento foi realizado para avaliar o coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) da mat?ria seca (MS), da prote?na bruta (PB), da mat?ria mineral (MM), o coeficiente de metaboliza??o aparente da energia bruta (CMAEB), a energia metaboliz?vel aparente (EMA) e a energia metaboliz?vel aparente corrigida para o balan?o de nitrog?nio (EMAn) do farelo de crambe para frangos de corte, empregando-se o m?todo de coleta total de excretas. Para o primeiro experimento foram utilizados 140 pintos de corte da linhagem Cobb 500 em crescimento de 14 a 24 dias de idade, alimentados com duas ra??es, sendo T1= refer?ncia (RR) e T2= uma ra??o teste (RT), que consiste em 80% (RR) + 20% (inclus?o do farelo de crambe), com sete repeti??es e 10 aves por unidade experimental. No segundo experimento foi avaliado o desempenho dos frangos nas fases inicial (8 a 21 dias) e final (22 a 42 dias), o rendimento de carca?a e cortes e a an?lise econ?mica da substitui??o de parte da prote?na bruta total da ra??o pela prote?na bruta do farelo de crambe. As aves foram distribu?das em delineamento inteiramente ao acaso, com cinco tratamentos, seis repeti??es de 21 aves por unidade experimental. Os n?veis de substitui??o de parte da prote?na bruta total da ra??o pela prote?na bruta do farelo de crambe avaliados foram: 0, 3, 6, 9 e 12%. Avaliou-se o consumo de ra??o, o ganho de peso, a convers?o alimentar, peso e rendimento de carca?a e de cortes nobres (peito, coxa e sobrecoxa). O farelo de crambe apresentou 2262,03 kcal/kg de EMA e 2262,19 kcal/kg de EMAn. Os valores de coeficientes de digestibilidade foram: CDAMS 69,14%, CDAPB 60,38%, CDAMM 58,86% e o CMAEB foi de 53,51% na MS do alimento. Observou-se que a prote?na bruta do farelo de crambe pode substituir em at? 12% de parte da prote?na bruta total da ra??o, em ambas as fases, por n?o acarretar em baixo desempenho e rendimento de carca?a e de cortes. Pela an?lise econ?mica ? vi?vel a substitui??o de parte da prote?na da ra??o em at? 6% pela prote?na do farelo de crambe. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Zootecnia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2015. / ABSTRACT
Two experiments were conducted to nutritionally evaluate crambe meal in diets for broilers. The first experiment was conducted to evaluate the apparent digestibility coefficient (ADC) of dry matter (DM), crude protein (CP) and mineral matter (MM), the apparent metabolizing coefficient of crude energy (AMCCE), the apparent metabolizable energy (AME), and the apparent metabolizable energy corrected for nitrogen balance (cAME) of the crambe meal for broilers, using the total excreta collection method. For the first experiment, 140, Cobb 500 strain, growing broilers of 14 to 24 days of age were utilized, fed two rations: T1 = reference (RR) and T2 = a test ration (TR), consisting of 80% RR + 20% (inclusion of crambe meal) with seven replicates and 10 broilers per experimental unit. In the second experiment, performance of broilers during the initial phase (8 to 21 days of age) and final phase (22 to 42 days of age), carcass and cuts yields, and economic analysis of partial substitution of the total crude protein from the ration for crude protein from crambe meal were evaluated. Broilers were distributed in a completely randomized design, with five treatments and six replicates of 21 broilers per experimental unit. The evaluated levels of partial substitution of crude protein from ration for crude protein from crambe meal were 0, 3, 6, 9 and 12%. Feed intake, body weight gain, feed conversion, carcass and prime cuts (breast, thigh and drumstick) weights and yields were evaluated. Crambe meal showed 2262.03 kcal / kg of AME and 2262.19 kcal/kg of cAME. Values of digestibility coefficients were: DCDM 69.14%, DCCP 60.38%, DCMM 58.86% and AMCCE 53.51%, DM of feed. It was observed that the crude protein from crambe meal can partially substitute up to 12% of the total dietary crude protein, in both phases, for not resulting in impaired performance and carcass and cuts yield. Thru the economic analysis, it is feasible the partial substitution of crude protein from the ration up to 6% by the protein from crambe meal.
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Farelo de crambe submetido a tratamentos físicos ou químicos para alimentação de ovinosMoura, Daiane Caroline de 26 February 2014 (has links)
Submitted by Simone Souza (simonecgsouza@hotmail.com) on 2017-08-22T13:47:22Z
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Previous issue date: 2014-02-26 / CAPES / O processo de extração de óleo de crambe gera produtos com elevado teor protéico e com grande potencial de uso na alimentação de ruminantes em substituições à fontes tradicionais, como farelo de soja e de algodão. Porém, a presença potencial de glicosinolatos (fator antinutricional) em níveis elevados representa a principal limitação para seu uso na alimentação animal. Assim, desenvolveu-se dois experimentos visando avaliar o efeito de diferentes métodos químicos (adição de CaO nas doses de 2; 4 e 6%) e físicos (lavagem com água) sobre os teores de glicosinolatos no farelo de crambe (experimento 1); e os efeitos da substituição do farelo de soja pelo farelo de crambe (in natura) não decorticado, ou submetidos aos processamentos químicos ou físicos, sobre a eficiência de utilização dos componentes dietéticos em ovinos (experimento 2). No experimento 1, 25 amostras de 300 gramas de farelo de crambe foram distribuídas em delineamento inteiramente casualisado, em cinco tratamentos: controle; CaO nas doses de 2; 4 e 6%; e lavagem do com água e filtragem. O tratamento do farelo de crambe com CaO ou por meio de lavagem com água reduziu (P = 0,045) os teores de glicosinolatos em média 42,5%. Não houve diferença (P = 0,236) entre tratamentos alcalinos e físico (lavagem). A dose de CaO (2; 4 ou 6%) não afetou (P = 0,471) a concentração do composto. A adição de 2% de CaO no farelo de crambe ou procedimento de lavagem promovem redução apenas parcial dos glicosinolatos. No experimento 2, oito ovinos machos inteiros com 25 ± 2,6 kg de peso corporal foram distribuídos em dois quadrados latino 4x4, com quatro período de 15 dias cada (10 dias de adaptação e cinco de coleta), e receberam quatro dietas isonitrogenadas (16% de PB, base da matéria seca; 60% forragem e 40% de concentrado): controle (farelo de soja como fonte de proteína); farelo de crambe como fonte de proteína (22% na dieta, base da matéria seca) nas formas in natura (39,7% de PB e 56 mg de glicosinolatos/kg de MS), submetido ao tratamento com 4% de CaO ou submetido à lavagem com água, conforme descrito no experimento 1. A substituição do farelo de soja pelo farelo de crambe não afetou (P>0,05) o consumo e digestibilidade dos componentes da dieta, e o balanço de nitrogênio (N). O tratamento do farelo de crambe por meio de adição de 4% CaO ix ou por lavagem com água, apesar de reduzirem parcialmente os teores de glicosinolatos, não afetaram o consumo e digestibilidade dos componentes da dieta, e o balanço de N. Além disso, não houve efeito do método de processamento (4% CaO versus lavagem) sobre as variáveis acimas citadas. Desta forma, o farelo de crambe com níveis de glicosinolatos abaixo de 450 mg/kg pode ser utilizado como fonte exclusiva de proteína na dieta de ruminantes, em substituição ao farelo de soja, sem a necessidade de procedimentos físicos ou químicos para redução do composto antinutricional. / The process of extraction of crambe oil generates products with high protein content and high potential use in ruminant feed in replacements for traditional sources such as soybeans and cotton. However, the potential presence of glucosinolates (anti-nutritional factor) at high levels is the main limitation to their use in animal feed. Thus, it has developed two experiments to evaluate the effect of different chemical methods (adding CaO at doses of 2, 4 and 6%) and physical (water wash) on the levels of glucosinolates in crambe meal (Experiment 1); and the effects of replacing soybean meal by meal crambe (in natura) not decorticated, or subjected to chemical or physical, on the efficiency of utilization of dietary components in sheep (experiment 2) processing. In experiment 1, 25 samples of 300 grams of bran crambe were distributed in a completely randomized design, with five treatments: control; CaO in doses of 2; 4 e 6%; and washing with water and filtering. The treatment of soybean meal with CaO or crambe by washing with reduced water (P = 0.045) in the levels of glucosinolates average 42.5%. There was no difference (P = 0.236) between alkaline and physical (wash) treatments. The dose of CaO (2, 4 or 6%) did not affect (P = 0.471) the concentration of the compound. The addition of 2% CaO in crambe meal or washing procedure promote only partial reduction of glucosinolates. In experiment 2, eight point 25 ± 2.6 kg body weight wethers were divided into two 4x4 Latin square design with four 15-day period each (10 days of adaptation and five collection), and received four isonitrogenous diets (16% crude protein, dry matter basis, 60% forage and 40% concentrate): control (soybean meal as a protein source); crambe meal as a protein source (22% in the diet, dry matter basis) in the forms in nature (39.7% CP and 56 mg of glucosinolates / kg DM) undergoing treatment with 4% CaO or subjected to washing with water, as described in experiment 1. The replacement of soybean meal by meal crambe did not Affect (p> 0.05) the intake and digestibility of diet components, and the balance of nitrogen (N). The treatment of the white crambe by addition of CaO 4% or by washing with water, though partially reduce the levels of glucosinolates, did not Affect the intake and digestibility of diet components, and the balance of N. Furthermore, the effect of processing method (4% CaO versus wash) on acimas variables mentioned. Thus, white with crambe glucosinolates levels of below 450 mg / kg can be used the the sole source of protein in the diet of ruminants, Replacing soybean meal without the need of physical or chemical procedures for Reducing the anti-nutritional compound.
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Efeito da redução de aporte hídrico e aplicação de radiação UV-C sobre compostos relacionados à qualidade e ao metabolismo de glicosinolatos em brócolis (Brassica oleracea L. var. italica) / Effect of reduction of water supply and application of UV-C radiation on compounds related to the quality and to the glucosinolates metabolism in broccoli.D’Avila, Roseane Farias 06 December 2017 (has links)
Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-08-14T18:38:42Z
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Previous issue date: 2017-12-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Características diversas das habituais durante o cultivo de vegetais e na pós-colheita podem ser reconhecidas como fatores de estresse pelo metabolismo e, dependendo da intensidade, levar ao acúmulo de compostos de defesa, relacionados ao aumento da vida de prateleira e a atividades antioxidantes e anticancerígenas in vivo. Deste modo, o efeito do cultivo de brócolis sob condições de estresse hídrico e da aplicação de radiação UV-C durante a pós-colheita sobre compostos relacionados a atributos sensoriais e funcionais foram analisados durante colheitas realizadas no verão e inverno. O cultivo sob estresse hídrico ocasionou a diminuição do teor de ácido L-ascórbico em todas as amostras, e os teores de glicosinolatos nos brócolis colhidos no verão, o que também ocorreu para clorofila a e carotenoides. No inverno, o estresse hídrico levou ao aumento de glicosinolatos somente após o armazenamento. Observaram-se diferenças significativas pela aplicação de UV-C após sete dias de armazenamento. No verão, a utilização da dose de 7 kJ.m-2 de UV-C resultou no aumento do conteúdo de clorofilas a e b e de carotenoides nos brócolis cultivados sob aporte hídrico regular. A mesma dose, quando aplicada a plantas cultivadas sob estresse hídrico, promoveu aumento significativo apenas de carotenoides e ácido L-ascórbico. O teor de glicosinolatos em brócolis cultivados no verão foi intensificado pelo cultivo sob condições de estresse hídrico combinado com aplicação de 10 kJ.m-2 de UV-C. No inverno, o aumento do teor de glicosinolatos foi observado aplicando a dose de 7 kJ.m-2, e foi acompanhado pela redução da atividade de mirosinases. Em ambos os cultivos conduzidos no inverno, houve um aumento de isotiocianatos quando brócolis cultivados sob estresse hídrico foram tratados com 10 kJ.m-2 de UV-C. Em vista dos resultados, conclui-se que as respostas metabólicas à redução do aporte hídrico e à aplicação de radiação UV-C são diferentes devido à época de cultivo da hortaliça, com exceção do teor do ácido L-ascórbico, que é reduzido pelo cultivo com estresse independentemente da estação. / Characteristics different from the usual ones during the growing and in the post-harvest of vegetables can be recognized as stress factors by the metabolism and, depending on the level, lead to the accumulation of defense compounds, related to the increase of the shelf life and to the antioxidant and anticancer activities in vivo. Thus, the effect of broccoli cultivation under water stress and of the application of UV-C radiation during post-harvest on compounds related to sensorial and functional attributes were analyzed during summer and winter harvests. The cultivation under water stress caused a decrease in the L-ascorbic acid content in all the samples, and the glycosinolate content in the broccoli harvested in the summer, which also occurred for chlorophyll a and carotenoids. In winter, water stthe pigments presented opposite patterns between the years analyzed, which also occurred with the isothiocyanates, compounds derived from glucosinolates. The stress led to the increase of glucosinolates only after storage. Significant differences were observed by application of UV-C after seven days of storage. In the summer, the use of the 7 kJ.m-2 UV-C dose resulted in increased content of chlorophyll a and b and carotenoids in broccoli grown under regular water intake. The same dose, when applied to the plants grown under water stress, promoted a significant increase only of carotenoids and L-ascorbic acid. The glucosinolates content in broccoli grown in summer was intensified by the cultivation under water stress conditions combined with the application of 10 kJ.m-2 of UV-C. In the winter, the glucosinolates content increase was observed by applying the 7 kJ.m-2 dose, and it was accompanied by a reduction in myrosinase activity. In both cultures conducted in winter, there was an increase in isothiocyanates when broccoli cultivated under water stress were treated with 10 kJ.m-2 of UV-C. In view of the results, it is concluded that the metabolic responses to the reduction of the water supply and to the application of UV-C radiation are different due to the season of cultivation of the vegetable, except for the L-ascorbic acid content, which is reduced by the cultivation with water stress regardless of the season.
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Produção de plantas e metabólitos de Cleome dendroides Schult. & Schult. f. (Cleomaceae) utilizando diferentes sistemas de cultivo in vitro / Plants and metabolites production of Cleome dendroides Schult. & Schult. f. (Cleomaceae) using different in vitro culture systemsTatiana Carvalho de Castro 16 July 2015 (has links)
Cleome dendroides é uma espécie endêmica da Mata Atlântica dos estados do Rio de Janeiro e Espírito Santo, bioma alterado por intensa atividade antrópica, o que constitui uma ameaça à preservação de suas populações. Não existem estudos dos pontos de vista fisiológico, biotecnológico, fitoquímico ou farmacológico sobre a espécie. Considerando-se o perfil fitoquímico e o potencial medicinal do gênero, torna-se relevante definirem-se protocolos para a produção de plantas e metabólitos de C. dendroides utilizando diferentes sistemas de cultivo in vitro. No presente trabalho, foram realizados estudos sobre a germinação in vivo da espécie, avaliando-se a influência do substrato, temperatura e luz. Não se observou qualquer tipo de dormência, sendo as temperaturas de 20, 25 e 20-30C, em areia ou vermiculita, apropriadas para a germinação in vivo. Definiu-se também uma metodologia eficiente de germinação sob condições in vitro, e as plântulas obtidas foram utilizadas como fonte de explantes para os estudos de propagação in vitro. A resposta morfogênica foi avaliada considerando-se a origem e tipo do explante, tipos e concentrações de reguladores de crescimento e número de subculturas. A metodologia empregada mostrou-se eficiente para a produção de brotos e manutenção de estoques de plantas in vitro que serviram como fonte de explantes. A melhor condição para a propagação in vitro foi definida em meio solidificado contendo BA, independentemente do tipo de explante e da origem. Os brotos obtidos foram alongados, enraizados e aclimatizados. Também foi estabelecida a cultura de raízes e a regeneração de brotos a partir destas culturas. Avaliou-se o efeito da origem do explante, assim como dos tipos e concentrações de fitorreguladores sobre a proliferação de raízes e a regeneração de brotos. O fitorregulador AIB propiciou maior multiplicação das raízes, enquanto BA mostrou-se eficiente na regeneração de brotos a partir das raízes recém-formadas. Foi estabelecido ainda um protocolo de cultura de calos e de suspensões celulares. Avaliou-se o efeito da origem e do tipo de explante, dos tipos e das concentrações de fitorreguladores sobre a calogênese. A combinação de PIC com KIN foi a mais eficiente para a indução de calos em explantes de plântulas obtidas a partir de germinação in vitro, produzindo calos que foram mantidos por pelo menos dois anos. As suspensões celulares também foram estabelecidas em meio contendo PIC + KIN, mantendo uma produção de biomassa de cerca de cinco vezes o peso fresco inicial por três sucessivas subculturas. Análises histoquímicas e fitoquímicas revelaram a presença de alcaloides nos calos e nas suspensões celulares. Foram realizadas análises fitoquímicas de plantas de campo, plantas aclimatizadas, plantas mantidas em estoque in vitro e culturas de raízes, as quais indicaram a presença de derivados de glicosinolatos. Os resultados demonstraram a viabilidade de produção de material vegetal de C. dendroides por meio de métodos biotecnológicos e a produção in vitro de metabólitos de importância medicinal / Cleome dendroides is an endemic species of the Atlantic Forest of Rio de Janeiro and Espírito Santo states, biome changed by intense human activities that threaten its populations. There are no physiological, biotechnological, phytochemical or pharmacological studies of this specie. Considering the phytochemical profile and the medical potential of the genus, it becomes relevant to establish protocols for the production of plants and metabolites of C. dendroides using different in vitro culture systems. In this work, studies were performed on the in vivo germination of the species evaluating the influence of the substrate, temperature and light. There was no dormancy, and germination was achieved at 20, 25 and 20-30C, on sand or vermiculite substrates. An efficient methodology of germination under in vitro conditions was defined by comparing the different stages of post-seminal development with seedlings from germination under in vivo conditions. The plantlets obtained from the in vitro germination were used as a source of explants for in vitro propagation system. The morphogenic response was evaluated considering the source and type of explant, types and concentrations of growth regulators and number of subcultures. The methodology was efficient for the production of shoots and maintenance of in vitro plants. The best condition for in vitro propagation was using solidified medium supplemented with BA, regardless of the tested explants. The shoots were efficiently elongated, rooted and acclimatized. It was also established an efficient protocol for root culture and shoots regeneration from these cultures. The effect of source of explant, the types and growth regulator concentrations on the proliferation of roots and shoot regeneration was evaluated. IBA provided higher multiplication rates of the roots, whereas BA was effective in the regeneration of shoots from the newly formed roots. A protocol of callus culture and cell suspension culture was established. The effect of the origin and type of explant, the types and concentrations of growth regulators on callus formation was evaluated. PIC + KIN was the most efficient combination for callus induction from explants derived from in vitro germinated seedlings. Callus cultures were maitained for at least two years. Cell suspension cultures were established with the same combination of growth regulators (PIC + KIN), maintaining a biomass of about five times the initial fresh weight of three successive subcultures. Histochemical and phytochemical analysis revealed the presence of alkaloids in callus and suspension cell cultures. Phytochemical analyses of field plants, acclimatization in vitro plant and culture roots were performed, which indicated the presence of glucosinolate derivatives. The results demonstrated the possibility of producing medicinal important metabolites from C. dendroides by biotechnological methods
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Produção de plantas e metabólitos de Cleome dendroides Schult. & Schult. f. (Cleomaceae) utilizando diferentes sistemas de cultivo in vitro / Plants and metabolites production of Cleome dendroides Schult. & Schult. f. (Cleomaceae) using different in vitro culture systemsTatiana Carvalho de Castro 16 July 2015 (has links)
Cleome dendroides é uma espécie endêmica da Mata Atlântica dos estados do Rio de Janeiro e Espírito Santo, bioma alterado por intensa atividade antrópica, o que constitui uma ameaça à preservação de suas populações. Não existem estudos dos pontos de vista fisiológico, biotecnológico, fitoquímico ou farmacológico sobre a espécie. Considerando-se o perfil fitoquímico e o potencial medicinal do gênero, torna-se relevante definirem-se protocolos para a produção de plantas e metabólitos de C. dendroides utilizando diferentes sistemas de cultivo in vitro. No presente trabalho, foram realizados estudos sobre a germinação in vivo da espécie, avaliando-se a influência do substrato, temperatura e luz. Não se observou qualquer tipo de dormência, sendo as temperaturas de 20, 25 e 20-30C, em areia ou vermiculita, apropriadas para a germinação in vivo. Definiu-se também uma metodologia eficiente de germinação sob condições in vitro, e as plântulas obtidas foram utilizadas como fonte de explantes para os estudos de propagação in vitro. A resposta morfogênica foi avaliada considerando-se a origem e tipo do explante, tipos e concentrações de reguladores de crescimento e número de subculturas. A metodologia empregada mostrou-se eficiente para a produção de brotos e manutenção de estoques de plantas in vitro que serviram como fonte de explantes. A melhor condição para a propagação in vitro foi definida em meio solidificado contendo BA, independentemente do tipo de explante e da origem. Os brotos obtidos foram alongados, enraizados e aclimatizados. Também foi estabelecida a cultura de raízes e a regeneração de brotos a partir destas culturas. Avaliou-se o efeito da origem do explante, assim como dos tipos e concentrações de fitorreguladores sobre a proliferação de raízes e a regeneração de brotos. O fitorregulador AIB propiciou maior multiplicação das raízes, enquanto BA mostrou-se eficiente na regeneração de brotos a partir das raízes recém-formadas. Foi estabelecido ainda um protocolo de cultura de calos e de suspensões celulares. Avaliou-se o efeito da origem e do tipo de explante, dos tipos e das concentrações de fitorreguladores sobre a calogênese. A combinação de PIC com KIN foi a mais eficiente para a indução de calos em explantes de plântulas obtidas a partir de germinação in vitro, produzindo calos que foram mantidos por pelo menos dois anos. As suspensões celulares também foram estabelecidas em meio contendo PIC + KIN, mantendo uma produção de biomassa de cerca de cinco vezes o peso fresco inicial por três sucessivas subculturas. Análises histoquímicas e fitoquímicas revelaram a presença de alcaloides nos calos e nas suspensões celulares. Foram realizadas análises fitoquímicas de plantas de campo, plantas aclimatizadas, plantas mantidas em estoque in vitro e culturas de raízes, as quais indicaram a presença de derivados de glicosinolatos. Os resultados demonstraram a viabilidade de produção de material vegetal de C. dendroides por meio de métodos biotecnológicos e a produção in vitro de metabólitos de importância medicinal / Cleome dendroides is an endemic species of the Atlantic Forest of Rio de Janeiro and Espírito Santo states, biome changed by intense human activities that threaten its populations. There are no physiological, biotechnological, phytochemical or pharmacological studies of this specie. Considering the phytochemical profile and the medical potential of the genus, it becomes relevant to establish protocols for the production of plants and metabolites of C. dendroides using different in vitro culture systems. In this work, studies were performed on the in vivo germination of the species evaluating the influence of the substrate, temperature and light. There was no dormancy, and germination was achieved at 20, 25 and 20-30C, on sand or vermiculite substrates. An efficient methodology of germination under in vitro conditions was defined by comparing the different stages of post-seminal development with seedlings from germination under in vivo conditions. The plantlets obtained from the in vitro germination were used as a source of explants for in vitro propagation system. The morphogenic response was evaluated considering the source and type of explant, types and concentrations of growth regulators and number of subcultures. The methodology was efficient for the production of shoots and maintenance of in vitro plants. The best condition for in vitro propagation was using solidified medium supplemented with BA, regardless of the tested explants. The shoots were efficiently elongated, rooted and acclimatized. It was also established an efficient protocol for root culture and shoots regeneration from these cultures. The effect of source of explant, the types and growth regulator concentrations on the proliferation of roots and shoot regeneration was evaluated. IBA provided higher multiplication rates of the roots, whereas BA was effective in the regeneration of shoots from the newly formed roots. A protocol of callus culture and cell suspension culture was established. The effect of the origin and type of explant, the types and concentrations of growth regulators on callus formation was evaluated. PIC + KIN was the most efficient combination for callus induction from explants derived from in vitro germinated seedlings. Callus cultures were maitained for at least two years. Cell suspension cultures were established with the same combination of growth regulators (PIC + KIN), maintaining a biomass of about five times the initial fresh weight of three successive subcultures. Histochemical and phytochemical analysis revealed the presence of alkaloids in callus and suspension cell cultures. Phytochemical analyses of field plants, acclimatization in vitro plant and culture roots were performed, which indicated the presence of glucosinolate derivatives. The results demonstrated the possibility of producing medicinal important metabolites from C. dendroides by biotechnological methods
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