Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-05-20T17:25:46Z No. of bitstreams: 1 Marco Antonio Gomes Mello. HTLV em gestantes...2014.pdf: 1266267 bytes, checksum: ee7f90250a9a2ced96b2aef6f6930b15 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-20T17:25:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marco Antonio Gomes Mello. HTLV em gestantes...2014.pdf: 1266267 bytes, checksum: ee7f90250a9a2ced96b2aef6f6930b15 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A prevalência de HTLV- 1 no Brasil é diversa, dependendo tanto da região geográfica quanto do grupo analisado. Um estudo populacional realizado em Salvador detectou prevalência de 1,76%, além de maior prevalência em mulheres e associação com menores níveis de escolaridade e renda. Como a via mais frequente de transmissão vertical do HTLV-1 é a amamentação e considerando a maior prevalência nas mulheres, é muito importante a realização de exames de triagem para HTLV-1 como parte do prénatal. Até o momento, não existem estudos publicados sobre a soroprevalência do HTLV-1 em gestantes na região sul da Bahia. No presente estudo, as gestantes foram selecionadas em dois centros de referência regionais de saúde do sul da Bahia. Um total de 2.766 gestantes atendidas na sala de pré-parto entre novembro de 2008 e maio de 2010 foram analisados. Um questionário foi aplicado, e todas as amostras de plasma reagentes foram testadas em duplicata e confirmadas por Western blot e PCR. Além disso, mulheres positivas foram contactadas e visitadas. Os membros da família que estavam presentes durante a visita foram convidados a serem testados para o HTLV. Um estudo prospectivo foi também realizado e os recém-nascidos foram acompanhados até dois anos para avaliação da transmissão vertical. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética da UESC. Foi detectada uma prevalência de HTLV foi de 1,05% (IC95%: 0.70-1.50). Não houve associação entre a infecção pelo HTLV-1 e idade, escolaridade, renda e etnia autodeclarada. A associação com o estado civil foi (OR=7,99, IC 95% 1,07-59,3, p=0,042). Além disso, 43 membros da família das mulheres HTLV-1 soropositivos foram analisados e reatividade específica foi observada em 32,56%, incluindo duas crianças de gravidez anterior. É muito importante ressaltar que a falta de HTLV-1 de triagem em mulheres grávidas pode promover a transmissão viral especialmente em áreas endêmicas. A triagem em populações vulneráveis e o uso de leite artificial para os filhos de mães soropositivas podem ser importantes métodos de baixo custo para limitar a transmissão vertical. Além disso, nossos dados reforçam a necessidade de estabelecer estratégias de busca ativa em familiares como importante ação de vigilância epidemiológica para a detecção precoce da infecção pelo vírus e para a prevenção da transmissão por contato sexual e/ou parenteral. / The prevalence of HTLV-1 in Brazil is diverse, depending on both the geographic region and the group analyzed. A study conducted on general population revealed that the prevalence in Salvador was 1.76%. Besides, it was also found that the prevalence was higher amongst women and that the virus was associated with lower education and lower income. As the most frequent pathway of vertical transmission of HTLV-1 is breast-feeding, and considering the higher prevalence in women, it is very important to perform screening examinations for anti-HTLV-1 antibodies as part of routine prenatal care. So far, no studies of HTLV-1 seroprevalence in pregnant women in the Southern region of Bahia, Brazil, have been described. In this study, pregnant women were selected at the two regional reference centers for health care from Southern Bahia. A total of 2766 pregnant women attending the antenatal unit between November 2008 and May 2010 have been analyzed. A standardized questionnaire was applied and all positive plasma samples were tested repeatedly in duplicate and were confirmed by Western blot and PCR. Besides that, positive women were contacted and visited. The family members that were present during the visit were asked to be serologically screened to the virus. A prospective study was also carried out and newborns were followed up to two years for evaluation of vertical transmission. The project was approved by the Ethic Committee of UESC. HTLV-1 infection was assessed by ELISA. HTLV prevalence was 1.05% (CI95%:0.70-1.50). There was no association of HTLV- 1 infection with age, education, income and ethnic differences. The association with marital status was borderline (OR=7.99; 95%CI 1.07-59.3; p=0.042). In addition, 43 family members of the HTLV-1 seropositive women have been analyzed and specific reactivity was observed in 32.56%, including two children from previous pregnancy. It is very important to emphasize that the lack of HTLV-1 screening in pregnant women can promote HTLV transmission especially in endemic areas. HTLV screening in this vulnerable population and the promotion of bottle-feeding for children of seropositive mothers could be important cost-effective methods to limit the vertical transmission. Besides that, our data reinforce the need to establish strategies of active surveillance in household and family contacts as important epidemiological surveillance actions for the early detection of virus infection and the prevention of transmission by sexual or and parenteral contact.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-10-29T14:14:27Z No. of bitstreams: 1 Marcus Vinícius Alves Lima. Avaliação... 2014.pdf: 2528971 bytes, checksum: 51729fd9ac67351143ca0f2de5f23517 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-29T14:14:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcus Vinícius Alves Lima. Avaliação... 2014.pdf: 2528971 bytes, checksum: 51729fd9ac67351143ca0f2de5f23517 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / O Brasil representa uma das áreas endêmicas para o vírus linfotrópico de células T humanas do tipo 1 (HTLV-1) e a cidade de Salvador, Bahia, possui a maior prevalência nacional da infecção por este retrovírus (1,8%), com cerca de 50.000 pessoas infectadas. O HTLV-1 foi o primeiro retrovírus humano descrito e está classicamente associado à leucemia/linfoma de células T do adulto (ATLL) e à mielopatia associada ao HTLV-1/paraparesia espástica tropical (HAM/TSP). A HAM/TSP é uma doença inflamatória do sistema nervoso central, cujos mecanismos imunopatogênicos não estão completamente elucidados. O papel dos linfócitos T citotóxicos na patogênese desta doença ainda não está bem definido. Neste estudo, foram avaliados o fenótipo e a função de linfócitos T citotóxicos de pacientes infectados pelo HTLV-1 com HAM/TSP. Ensaios de imunofenotipagem por citometria de fluxo foram conduzidos para avaliar a proporção das subpopulações de memória dos linfócitos T citotóxicos e mensurar potencial citotóxico destas células. Foram analisados 13 indivíduos não infectados e 49 infectados pelo HTLV-1 (18 sem mielopatia - ASS, 6 diagnosticados como HAM/TSP provável - HAM-PB - e 25 como HAM/TSP definido - HAM-D). Os indivíduos infectados apresentaram aumento da proporção de linfócitos T citotóxicos e de suas subpopulações de memória efetora em detrimento das células naive e de memória central. Não foi observada diferença na distribuição das subpopulações de memória dos CTLs entre os indivíduos infectados pelo HTLV-1. A quantidade de CTLs com atividade de degranulação foi significativamente menor nos pacientes HAM-D em comparação aos indivíduos ASS. O grupo HAM-D também apresentou redução (50%) da produção de IFN-γ pelos CTLs em relação ao grupo ASS. O grupo HAM-PB apresentou resultados similares ao grupo ASS quanto à atividade de degranulação e produção de IFN-γ. Aumento da expressão de IL-15 em células mononucleares do sangue periférico e em células CD14+ foi observado em todos os grupos de pacientes infectados em comparação com os indivíduos soronegativos para o HTLV-1. Estes resultados sugerem que os pacientes infectados pelo HTLV-1 com HAM/TSP apresentam prejuízo da resposta imune celular, caracterizado pela diminuição da quantidade de linfócitos T CD8+ com atividade de degranulação. / Brazil represents one of the largest endemic areas for human T-lymphotropic virus cells type 1 (HTLV-1) infection and associated diseases. Salvador, Bahia, is considered as the Brazilian city with the highest national HTLV-1prevalence (around 1.8% in the general population). HTLV -1 was the first human retrovirus described and is classically associated with adult Tcell leukemia/lymphoma (ATLL) and HTLV-1 associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). HAM/TSP is a chronic and progressive inflammatory disease of the central nervous system and your immunopathogenic mechanisms are not completely understood. The role of cytotoxic T-lymphocytes (CTLs) in the pathogenesis of this disease is still undefined. In this study we evaluated the phenotype and function of cytotoxic Tlymphocytes from HTLV-1-infected patients with HAM/TSP. Assays immunophenotyping by flow cytometry were conducted to assess the proportion of cytotoxic T-lymphocytes memory subsets and the cytotoxic potential of such cells. We analyzed 13 uninfected subjects (controls) and 49 HTLV-1-infected patients (18 without myelopathy (asymptomatic-ASS), 6 diagnosed as probable-HAM/TSP (HAM-PB) and 25 as defined-HAM/TSP (HAMD). Infected patients showed an increased proportion of cytotoxic T-lymphocytes and their subpopulations of effector memory cells at the expense of naive and central memory cells. The distribution of CTLs memory subsets resembled between HTLV-1-infected patients. The amount of CTLs with recent degranulation activity was significantly lower in HAM-D patients when compared to ASS group. The HAM-D group also showed IFN-γ production decrease (50%) by CTLs relative to the ASS group. The degranulation activity and IFN-γ production by cytotoxic T-lymphocytes were similar between the HAM-PB patients and ASS patients. Increased expression of IL-15 on peripheral blood mononuclear cells and CD14+cells was observed in all groups of infected patients when compared to not infected subjects. These results suggest that HTLV-1-infected individuals with HAM/TSP have cellular immune response impaired, characterized by decrease of CD8+ T-lymphocytes with degranulation activity.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T17:37:43Z No. of bitstreams: 2 TESE Erlon dos Santos.pdf: 1734297 bytes, checksum: 205753dd558082606a830dc4239e9826 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T17:37:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Erlon dos Santos.pdf: 1734297 bytes, checksum: 205753dd558082606a830dc4239e9826 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-06-13 / Os vírus linfotrópicos de células T humana tipos 1 e 2 (HTLV-1/2) são retrovírus associados a algumas doenças. O HTLV-1 está associado à paraparesia espástica tropical/mielopatia (PET/MAH), enquanto o HTLV-2 tem sido ocasionalmente associado às síndromes neurológicas semelhantes a PET/MAH sem associação de malignidade. Os mecanismos envolvidos no surgimento das doenças ainda não estão bem definidos. Entretanto, a carga proviral do HTLV, as mutações e a proteína tax podem está envovolvidas no desenvolvimento da doença. Os objetivos do presente estudo foram caracterizar o HTLV em pacientes com PET/MAH e portadores e determinar a soroprevlência desses vírus em gestantes durante o pré-natal. O DNA proviral foi extraído a partir de células periféricas mononuclares, utilizando o kit comercial (QIAamp® DNA Blood Mini Kit) e a identificação do tipo viral foi realizada através da Nested-PCR. Já a carga proviral do HTLV-1 pela PCR quantitativa - expressas em 106/PBMC. Para classificar a sequência tax, foi utilizada a enzima de restrição Bsh1236I (BstUI). Na pesquisa do anti-HTLV1/2 nas gestantes foi utilizado o KIT ELISA Ab capture ELISA Teste System (Ortho clinical Diagnostic In, Raritan, USA). Foi utilizado o Teste de Fisher, Mann-Whitney para avaliar a média da carga proviral. A Razão de prevalência, qui-quadrado (x2) e exato de Fischer foram utilizados para determinar as associações entre as gestantes. O poder do teste foi de 95%, com p<0,05 como limite para a significância. Fizeram parte do estudo 101 pacientes infectados pelo HTLV 1/2 - sintomáticos e assintomáticos e 209 gestantes. O HTLV-1 foi identificado em 68,3% (69/101) e o HTLV-2 em 31,7% (32/101). A média da carga proviral do HTLV-1 nos pacientes portadores foi de 3,62 log10; DP ± 0,960; IC95% 3,31-3,93 e naqueles com PET/MAH foi de 3,18 log10; DP 1,261; IC95% 2,68-3,68 (p = 0.0218). Em relação à sequência tax do HTLV, o subgrupo A foi identificado em 95,7% (66/69) e o B em 4,3% (3/69). A soroprevalência do HTLV1/2 nas gestantes foi de 8,1% (17/209). O DNA proviral do HTLV-1 foi identificado em 64,2% (9/14), com média da carga proviral de 3,17 ± 1,87 log10. As demais amostras foram negativas para o HTLV-1. Todas as gestantes encontravam-se assintomáticas e nenhuma variável pesquisada apresentou associação estatisticamente significativa. Em conclusão, não houve diferença entre a média da carga proviral do HTLV-1 entre os pacientes com PET/MAH e portadores. Houve uma maior frequência do subgrupo A da sequência tax nos pacientes com PET/MAH, sem associação com o desenvolvimento da doença. Foi elevada a prevalência da infecção pelo HTLV-2 nos portadores. A alta soroprevalência do HTLV-1/2 nas gestantes sugere a implantação da triagem deste vírus no pré-natal.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-06-22T13:38:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO FINAL - VERSÃO DIGITAL.pdf: 1043362 bytes, checksum: 3fd98b19c10f0a1b432a656183f47936 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-22T13:38:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO FINAL - VERSÃO DIGITAL.pdf: 1043362 bytes, checksum: 3fd98b19c10f0a1b432a656183f47936 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Estima-se que 33 milhões de pessoas vivam com HIV no mundo, enquanto 15 a 20 milhões sejam infectadas pelo HTLV-1/2, como ambos compartilham as mesmas vias de transmissão a coinfecção tem sido relatada; os pacientes coinfectados podem apresentar maior contagem de LTCD4, retardando o diagnóstico de aids, assim como progredir mais rapidamente para a imunossupressão, além de evoluírem com sintomas de TSP/HAM mais precoce e frequentemente.O objetivo deste estudo foi estimar a prevalência e os fatores de risco associados à coinfecção em pessoas vivendo com HIV/aids atendidos no Hospital Clementino Fraga, João Pessoa-PB, no período de fevereiro a julho de 2015. Trata-se de um estudo transversal analítico; os pacientes foram abordados no momento da coleta de sangue para exames de contagem de LTCD4 e carga viral do HIV de rotina, submetidos à entrevista para coleta de dados sócio-epidemiológicos após assinatura do temo de consentimento livre e esclarecido e então encaminhados para a coleta de sangue, que era então enviado ao Setor de Virologia do LIKA da UFPE para detecção de anti-HTLV por ELISA; as contagens de LTCD4 e carga viral, assim como data de diagnóstico foram obtidas dos prontuários. Foram analisados 401 indivíduos vivendo com HIV/aids, 271 eram do sexo masculino, 60,8% solteiros e 196 de raça branca; a média de idade foi 41,3 anos A prevalência da coinfecção HIV/HTLV foi de 1,5%, e no presente trabalho não houve associação de maior risco de coinfecção com cirurgia ou hemotransfusão prévias, piercings ou tatuagens, compartilhamento de seringas ou história de drogas injetáveis, bem como com o comportamento sexual dos participantes. As médias das primeiras e últimas contagens de LTCD4 e carga viral do HIV foram semelhantes entre os dois grupos. Os resultados mostram que a Paraíba difere de outras regiões do país, com baixa prevalência de coinfecção, provavelmente por características epidemiológicas e culturais de sua população, o que mostra a importância de mais estudos de prevalência como este, visto que o Brasil apresenta marcantes diferenças inter-regionais no perfil de sua população. / t is estimated that 33 million people live with HIV worldwide, while 15-20 million are infected with HTLV-1/2, as both share the same transmission routes coinfection has been reported; the coinfected patients may have higher LTCD4 counts, delaying diagnosis of AIDS, progress more quickly to immunosuppression and present symptoms of TSP/HAM earlier and oftentimes. The aim of this study was to estimate the prevalence and risk factors associated to coinfection in people living with HIV/aids treated at the Hospital Clementino Fraga, João Pessoa, Paraíba, from february to July 2015. This is an analytical cross-sectional study; patients were approached at the time of blood collection for LTCD4 count and HIV viral load tests of routine, subjected to an interview for collect socio-demographic data after signing a informed consent and then forwarded to collect blood, which was sent to the Department of Virology of LIKA-UFPE to detect anti-HTLV by ELISA; LTCD4 counts and viral load, as well the date of diagnosis were obtained from medical records. Were analyzed 401 individuals living with HIV/aids, 271 were male, 60,8% single and 196 whites; the mean age was 41,3 years. The prevalence of coinfection HIV/HTLV was 1,5%, and in this study there was no association of increased risk of coinfection with previous surgery or blood transfusion, piercings or tattoos, needle sharing or story injecting drugs, as well as the sexual behavior of participants. The mean of the first and last LTCD4 counts and HIV viral load were similar between the two groups. The results show that the Paraíba differs from other regions of the country with low prevalence of coinfection, probably by epidemiological and cultural characteristics of its population, which shows the importance of more prevalence studies like this, since Brazil presents significant inter-regional differences in the population.

La protéine Tax du virus HTLV-1 a les propriétés d'un oncogène viral et joue un rôle important dans l'induction de la transformation cellulaire menant à l'ATL. L'activité oncogène de Tax résulte d'effets pléiotropes sur divers mécanismes cellulaires y compris l'activation de l'expression de gènes cellulaires spécifiques par la voie NF-B et la dérégulation de la progression du cycle cellulaire. Dans ce travail, nous avons mis en évidence que Tax est une protéine hautement modifiée dans diverses lignées cellulaires y compris dans les lymphocytes T transformés par HTLV-1. L'ensemble des modifications post-traductionnelles de Tax forment une suite hiérarchisée qui contrôlent la localisation intracellulaire de Tax, sa capacité d'activer les kinases IKK et la voie de signalisation des facteurs NF-B et sa capacité d'induire un arrêt dans la progression de la mitose. En effet, la phosphorylation de Tax contrôle son ubiquitination et son passage dans le noyau où elle est sumoylée et acétylée. L’ubiquitination et la sumoylation de Tax agissent de manière concertée pour permettre l’activation de l’expression des gènes par la voie NF-B tandis que son acétylation permet de lever le blocage induit en fin de mitose. Les effets exercés par les modifications post-traductionnelles sur les fonctions oncogènes de la protéine Tax suggèrent que ces modifications pourraient être des cibles thérapeutiques pour le développement de traitements contre l'ATL.

Les rétrovirus appartiennent à une famille de virus où les protéines virales sont codées par un transcrit sens pleine longueur suite à un épissage alternatif. Récemment, notre équipe a contribué à démontrer pour la première fois la présence d'une transcription antisens chez le rétrovirus HTLV-1 (Human T-cell Leukemia Virus). Ce transcrit antisens épissé a été caractérisé et semble être initié dans le LTR 3' (Long Terminal Repeat), permettant ainsi la production d'une nouvelle protéine virale, nommée HBZ (HTLV-1 bZIP factor). Cette dernière est une protéine nucléaire et a été décrite comme étant capable de réguler négativement la transcription virale dépendante de Tax en dimérisant avec des facteurs de transcription cellulaires tels que CREB-2 et certains membres de la famille Jun. Aussi, nous avons découvert et caractérisé des transcrits antisens chez HTLV-2, HTLV-3, HTLV-4 et VIH-l (Virus d'Immunodéficience Humaine). Ce projet de maîtrise avait pour objectif de caractériser les nouvelles protéines APH-3 et APH-4 codées par les transcrits antisens de HTLV-3 et HTLV-4 respectivement. Il s'agissait donc d'étudier leur localisation ainsi que leurs fonctions dans la réplication rétrovirale. D'abord, une comparaison de séquence avec HBZ a permis d'identifier deux régions basiques ainsi qu'un motif « bZIP-like ». Des études de localisation cellulaire de ces protéines ont ensuite été réalisées par microscopie confocale. Ainsi, nous avons démontré que APH-3 et APH4 apparaissent nucléaires, sous la forme de granules et, dans le cas d'APH-3 partiellement cytoplasmique. Ces granules co-localisent en partie avec HBZ et la nucléoline. Par la suite, des mutants de délétion dépourvus des motifs BR2, BR1 et DBD ont permis de conclure que APH-3 et APH-4 contrairement à HBZ délété se rendent au noyau. Aussi, des études faisant appel au gène rapporteur luciférase précédé d'un promoteur de collagénase (site AP-l), ont démontré que ces deux protéines contrairement à HBZ, activent la transcription dépendante de tous les membres des facteurs de transcription de la famille Jun. De plus, les mutants de délétions ont démontré que le motif « leucine zipper » atypique de ces protéines est impliqué dans cette régulation. Toutefois, une étude utilisant ces mutants de délétions et un gène rapporteur contenant le LTR 5' de HTLV-1 ont suggéré que le motif « leucine zipper » atypique ne semble pas être impliqué dans l'inhibition de la trans-activation par Tax. Finalement, ces travaux ont clairement mis en évidence que les transcrit antisens de HTLV-3 et HTLV-4 sont traduits tout comme chez d'autres rétrovirus. Ces protéines jouent d'importants rôles dans la réplication rétrovirale mais semblent avoir des fonctions différentes de celles de HBZ. Ces études ont permis d'approfondir la biologie moléculaire concernant la famille des rétrovirus et ainsi ouvrir de nouvelles perspectives dans ce domaine. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : APH, rétrovirus, HTLV, transcription antisens, HBZ, Jun, Tax.

Human T-cell leukemia virus type 1 (HTLV-1) is the causative agent of adult T-cell leukemia (ATL) and HTLV-1-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). HTLV-1 Tax is the major viral transactivator and transforming protein centrally involved in the proviral transcription, transformation and proliferation of infected T-cells as well as progression of diseases caused by HTLV-1 infection. Salt-inducible kinases (SIKs) are serine/threonine protein kinases belonging to the AMPK-related kinase (AMPK-RK) family. SIK subfamily consists of three isoforms named SIK1, SIK2 and SIK3 respectively. We have previously demonstrated the negative regulatory role of SIK1 in Tax-mediated activation of proviral transcription from long terminal repeats (LTR). In this study, we reported that both SIK2 and SIK3 exhibited a kinase-dependent suppressive effect on Tax-activated LTR transcription. We also found that SIK1, SIK2 and SIK3 act additively to suppress Tax activation of LTR. We further demonstrated that the SIK2- and SIK3-mediated suppression on LTR transcription was achieved through phosphorylation of TORC1, an essential transcriptional coactivator of CREB required for Tax-mediated transcriptional activation of LTR. Our findings revealed a new function of SIK2 and SIK3 in host restriction to HTLV-1 transcription. Pharmaceutical activation of SIKs or upstream kinase such as LKB1 may provide a new strategy for anti-HTLV-1 therapy. / published_or_final_version / Biochemistry / Master / Master of Medical Sciences

No description available.

Thesis (Ph. D.)--Colorado State University, 2004. / Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--Ohio State University, 2005. / Title from first page of PDF file. Document formatted into pages; contains xvii, 230 p.; also includes graphics. Includes bibliographical references (p. 200-230). Available online via OhioLINK's ETD Center