Introduction: This thesis deals with the calcium-phosphate metabolism and its role in the development of chronic diabetic complications. It examines calcium sensitive receptor, which can be crucial in affecting calcium metabolism. Calcium-sensitive receptor may play a role in intracellular signaling and metabolic pathways that lead to cell proliferation and extracellular matrix early diabetic nephropathy. We investigated two polymorphisms of the gene for calcium-sensitive receptor (intron 4 and codon 990). Material and Methods: The study included 313 diabetic patients, 41 patients with type 1 diabetes, 106 patients with type 2 diabetes, 110 diabetic patients with type 2 diabetes who had diabetic nephropathy and 56 patients with renal failure non-diabetic (NDRD). It was also examined 72 non-diabetic patients with chronic renal failure (CKD) and 96 healthy blood donors (ZK). Classification of diagnoses is listed in the theory. DNA was isolated by QIAamp DNA Blood Mini Kit and salting method. The specific fragments of gene for the CaSR were amplified by PCR. For detection, restriction fragment length polymorphism and TaqMan probes were used. The expression levels of mRNA were determined by real-time PCR. Results: For the codon 990 polymorphism, we found statistical significance of the genotype frequencies (AA,...

Mūsų tyrymų tikslas – ištirti baltymų kinazės A, baltymų kinazės C, Src šeimos nereceptorinės baltymų tirozino kinazės ir jų signaliniuose keliuose dalyvaujančių molekulių įtaką L tipo kalcio srovei (ICa,L) fermentiniu būdu izoliuotuose iširdies miocituose. Šis tikslas buvo įgyvendintas sprendžiant keturias užduotis: 1) ištiriant varlės ir žiurkės skilvelių bei žmogaus prieširdžių miocitų β-adrenerginių receptorių signalinės grandinės elementų: β-adrenerginių receptorių, adenilatciklazės, fosfodiesterazių, baltymų kinazės A, baltymų fosfatazių (baltymų fosfatazės 1 ir baltymų fosfatazės 2A) bei įtampos valdomų L tipo kalcio kanalų bazinį aktyvumą; 2) ištiriant β3-adrenerginių receptorių įtaką žmogaus prieširdžių ICa,L ir susitraukimo jėgai; 3) nustatant Src šeimos nereceptorinės baltymų tirozino kinazės įtaką žmogaus prieširdžių ICa,L, taip pat jos aktyvinimo būdą ir veikimo vietą β-adrenerginių receptorių signalinėje grandinėje; 4) ištiriant baltymų kinazės C įtaka žmogaus prieširdžių ICa,L. / The objective of study was to investigate the role of protein kinase A, protein kinase C, Src family nonreceptor protein tyrosine kinases and other signaling molecules involved in pathways regulating the L-type calcium current (ICa,L) in enzymatically isolated cardiac myocytes. This objective was realized by resolving four tasks: 1) Examination of the basal activity of β-adrenergic receptor (β-AR) signaling cascade involving β-ARs, adenylyl cyclases, phosphodiesterases, protein kinase A, protein phosphatases (protein phosphatase 1 and protein phosphatase 2A) and L-type voltage-dependent calcium channels in frog and rat ventricular myocytes and human atrial myocytes; 2) Investigation of the role of β3-ARs in regulation of ICa,L and force of contraction in human atrium; 3) Exploration of the role of Src family nonreceptor tyrosine kinases in regulation of ICa,L, determining the route of their activation and site of action in β-AR signaling cascade of human atriual myocytes; 4) Probing of the impact of protein kinase C on basal and β-AR stimulated ICa,L in human atrial myocytes. The experiments were performed using whole-cell configuration of the pach-clamp technique.