Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-07T14:28:24Z No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarolinaPauladeSouzaMoreira.pdf: 2546138 bytes, checksum: 434d23f2a06b0ab5b462d8c8c67dafe8 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-07T14:28:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarolinaPauladeSouzaMoreira.pdf: 2546138 bytes, checksum: 434d23f2a06b0ab5b462d8c8c67dafe8 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-07T18:25:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarolinaPauladeSouzaMoreira.pdf: 2546138 bytes, checksum: 434d23f2a06b0ab5b462d8c8c67dafe8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-07T18:25:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarolinaPauladeSouzaMoreira.pdf: 2546138 bytes, checksum: 434d23f2a06b0ab5b462d8c8c67dafe8 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / Existe uma necessidade urgente de drogas leishmanicidas mais eficazes e/ou menos tóxicas para contribuir com o arsenal terapêutico atualmente disponível. O grupo de pesquisa de Química de Produtos Naturais Bioativos do Laboratório de Química de Produtos Naturais bioativos do CPqRR tem realizado projetos de bioprospecção de flora brasileira buscando por novos hits que possam ser utilzados no tratamento das leishmanioses. A espécie Baccharis platypoda (Asteraceae) foi uma espécie que mostrou atividade leishmanicida e que foi pouco investigada do ponto de vista químico e biológico. O estudo químico biomonitorado do extrato etanólico das folhas dessa espécie levou à obtenção de cinco frações com elevada toxicidade para formas amastigotas intracelulares de L. (L.) amazonensis e o fracionamento de uma dessas frações resultou no isolamento de um novo diterpeno clerodano, de baixa atividade, que após análise de RMN e ESI-TOF-MS/MS foi denominado platypodiol ou 1R,3R,4R,8aR)-3-(hidroximetil)-4-[(3E)-5-hidroxi-3-metilpent-3-en-1-il]-4,8,8a-trimetil-1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahidronaftalen-1-ol. Em estágio sanduíche realizado na Universidade de Granada – Espanha os compostos fenólicos do extrato etanólico das folhasd de B. platypoda foram investigados por HPLC–ESI-Q-TOF-MS/MS no modo negativo e 19 ácidos fenólicos, 10 flavonas, 5 flavonóis e 6 flavanonas foram identificados. Além disso, o potencial antioxidante do extrato foi avaliado em quatro ensaios, mostrando o potencial antioxidante da espécie. Esses resultados aumentaram o conhecimento fitoquímico sobre a espécie brasileira B. platypoda, considerando que ela foi até o momento pouco investigada cientificamente / There is an urgent need for effective leishmanicida drugs to replace or supplement those in current use. Our group have been bioprospecting many Brazilian plants looking for potential new ‘hits’ to combat leishmaniasis. We found that Baccharis platypoda was one of the Asteraceae species that displayed leishmanicidal activity and it was few investigated. The bioassay-guided chemical study of the ethanolic extract of the leaves resulted in five fractions with high toxicity for intracellular amastigotes of L. (L.) amazonensis and the fractionation of one of these fractions led to a new diterpene clerodane with low activity that was named platypodiol or 1R,3R,4R,8aR)-3-(hidroxymethyl)-4-[(3E)-5-hydroxy-3-methylpent-3-en-1-yl]-4,8,8a-trimethyl-1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydronaftalen-1-ol upon NMR and ESI-TOF-MS/ MS analysis. We investigated in Granada University - Spain the phenolic components of the ethanolic leaf extract using HPLC–ESI-Q-TOF-MS/MS in negative mode and provided the identification of 19 phenolic acids, 10 flavones, 5 flavonols and 6 flavanones. We also determined the antioxidant capacity of the extract. Considering the few publications about this species, this result has increased the phytochemical knowledge about B. platypoda.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T17:29:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T17:29:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-08T17:30:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T17:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_JuliaAlvesMenezes.pdf: 8169141 bytes, checksum: e9d42a2ead6ef64ee95391cdf978633c (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / No Novo Mundo, as leishmanioses constituem um grupo de doenças negligenciadas, com alta prevalência mundial e que podem assumir formas graves. Elas são transmitidas ao homem pela picada de flebotomíneos, existindo uma gama de reservatórios, sendo o cão o principal hospedeiro urbano. Neste contexto, as leishmanioses, principalmente a forma visceral zoonótica, tem se urbanizado no Brasil e em várias partes do mundo. O objetivo do presente trabalho foi estudar alguns aspectos epidemiológicos das leishmanioses e o conhecimento da população sobre a doença no município de Formiga, MG. Estes aspectos se referem principalmente à fauna flebotomínica e à infecção canina. Para se conhecer a fauna flebotomínica, foram realizadas coletas sistemáticas mensais entre maio 2012 e abril 2013 utilizando armadilhas luminosas HP em 24 peridomicílios. Os exemplares foram identificados e sua densidade relacionada a fatores climáticos e ambientais. O estudo da frequência da leishmaniose canina foi realizado através da coleta de sangue de 570 cães e posterior análise sorológica (DPP® e ELISA) e molecular (LnPCR). As amostras positivas no LnPCR foram submetidas ao sequenciamento e PCR-RFLP a fim de determinar a espécie de Leishmania. Todos os locais de captura entomológica e os endereços dos cães positivos foram georreferenciados sobre a malha urbana do município e correlacionados aos casos humanos e a fatores ambientais locais. A população foi entrevistada a partir de um questionário quantitativo validado que abordou conceitos relevantes sobre a doença e sobre as condições do peridomicílio. Foram capturados 224 flebotomíneos de 10 espécies diferentes, sendo Lutzomyia longipalpis (35,3%), Lutzomyia cortelezzii (33,5%) e Lutzomyia whitmani (18,3%) as mais abundantes. Foi observada correlação estatisticamente significativa (p<0,05) entre a densidade total de flebotomíneos e a precipitação e temperatura. Em relação aos cães, a taxa de infecção encontrada, considerando os testes sorológicos e o molecular, foi de 19,1%. O sequenciamento e a PCR-RFLP permitiram identificar as espécies Leishmania infantum e Leishmania braziliensis infectando os cães. As análises espaciais demonstraram que L. whitmani (99,8%) se concentra nas proximidades de extensas áreas verdes e em distâncias de até 200m da vegetação. Lutzomyia longipalpis está mais associado à rede hidrográfica, se concentrando, principalmente, nas faixas distantes até 400m de um curso d’água. Para o município, flebotomíneos, cães positivos e casos humanos estão geograficamente relacionados, embora com pouca sobreposição de suas áreas de ocorrência. O estudo sobre o conhecimento da população revelou que os moradores de Formiga desconhecem completamente a doença (93%) e que 95% deles estão sob algum fator de risco. A existência de flebotomíneos comprovadamente vetores de leishmaniose visceral e tegumentar associado ao fato de existirem cães infectados com espécies, tanto dermotrópicas quanto viscerotrópicas do parasito, sugerem que no município está ocorrendo um ciclo de transmissão de leishmanioses visceral. Além disso, pode ocorrer um possível surgimento de casos humanos de leishmaniose tegumentar. Dessa forma, fica evidente que medidas de vigilância e controle precisam ser urgentemente estabelecidas na cidade para se evitar a dispersão e os óbitos por leishmaniose na região. / Leishmaniases in the New World are neglected diseases with high prevalence worldwide and may assume severe forms. They are transmitted to humans by the bite of sand flies and exhibit a range of wild and domestic reservoirs including the dog as the main urban host. In this context, especially zoonotic visceral leishmaniasis form has urbanized in Brazil and around the world. The aim of this work was to study some epidemiological aspects of leishmaniasis and the population’s knowledge about the disease in Formiga, Minas Gerais State. Those aspects are mainly related to the phlebotomine fauna and canine infection. To determine the sand fly fauna, monthly systematic collections were performed between May 2012 and April 2013 using HP light traps in 24 peridomicile. Specimens were identified and their density related to climatic and environmental conditions. The study of the frequency of canine leishmaniasis was performed by collecting blood samples from 570 dogs and subsequent serologic (DPP and ELISA) and molecular (LnPCR) analysis. The LnPCR positive samples were subjected to sequencing and PCR-RFLP to determine the Leishmania species. All the entomological capture sites and addresses of positive dogs were georeferenced on the urban grid of the city and correlated to human cases and local environmental factors. The population was interviewed using a validated quantitative questionnaire addressing relevant concepts about the disease and the conditions of the peridomicily. Two hundred twenty-four phlebotomines from 10 different species were captured, where Lutzomyia longipalpis (35.3%), Lutzomyia cortelezzii (33.5%) and Lutzomyia whitmani (18.3%) were the most abundant. Statistically significant correlation (p <0.05) was observed between total sandfly density and precipitation and temperature. Regarding the dogs, the rate of infection found by considering the serologic and molecular assays was 19.1%. Sequencing and PCR-RFLP allowed the identification of the species Leishmania infantum and Leishmania braziliensis infecting dogs. The spatial analysis showed that L. whitmani (99.8%) is concentrated close to green areas and up to a distance of 200m from vegetation. Lutzomyia longipalpis is most associated with the hydrographic network, concentrating mainly on the distances up to 400m alongside the water. For the Formiga city, phlebotomines, positive dogs and human cases are geographically related, although poor overlap of their occurrence areas has been observed. The study on the knowledge of the population revealed that the residents of Formiga are completely unaware of the disease (93%) and that 95% of them are under some risk factor. The existence of proven sandflies vectors of visceral and tegumentary leishmaniasis and the existence of infected dogs - with both dermotrophic as visceral species - suggest that the city is experiencing a cycle of transmission of visceral leishmaniasis. Besides, the city may be also iin risk of an outbreak of tegumentary human cases. It is clear that surveillance and control measures need to be urgently established in the town to avoid dispersion and deaths per leishmaniasis in the region.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-09T13:55:14Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_AnaClaraAraujoMachadoPires.pdf: 1845015 bytes, checksum: dc6ca4bda7d723d37ac4b578501e73c3 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-09T13:55:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_AnaClaraAraujoMachadoPires.pdf: 1845015 bytes, checksum: dc6ca4bda7d723d37ac4b578501e73c3 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-09T13:55:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_AnaClaraAraujoMachadoPires.pdf: 1845015 bytes, checksum: dc6ca4bda7d723d37ac4b578501e73c3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-09T13:55:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_AnaClaraAraujoMachadoPires.pdf: 1845015 bytes, checksum: dc6ca4bda7d723d37ac4b578501e73c3 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / Estudos da interação Leishmania-flebotomíneo constituem um importante campo de pesquisa, já que podem contribuir com o conhecimento dos processos envolvidos na transmissão do parasito e na epidemiologia das Leishmanioses. Diante da não existência de uma vacina efetiva contra a doença e de uma variedade limitada de drogas para o tratamento, detalhes de todos os aspectos da interação parasito-vetor são desejáveis para a formulação de novas estratégias de controle contra o protozoário e o vetor. Algumas espécies de flebotomíneos mostram notável especificidade para os parasitos de Leishmania transmitidos na natureza, enquanto outras espécies podem se infectar, experimentalmente, por mais de uma espécie de parasito. À essas últimas têm sido sugerido o termo "Vetores Permissivos”. Ainda não se sabe ao certo como funciona a interação Vetores Permissivos-Leishmania, mas acredita-se que o mecanismo de adesão do parasito ao intestino médio dos vetores permissivos seja diferente dos Vetores Naturais. O trabalho aqui apresentado descreve o desenvolvimento de quatro espécies distintas de Leishmania (Leishmania (Leishmania) major, Leishmania (Leishmania) amazonensis, Leishmania (Viannia) braziliensis e Leishmania (Leishmania) chagasi) em Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis, considerado um vetor permissivo. Esse desenvolvimento foi acompanhado utilizando a técnica de infecção experimental com três diferentes doses de parasitos (4x107, 2x107, 1x107). Os intestinos médios dos flebotomíneos infectados foram analisados no 2º e 6º dias após a infecção experimental. O sangue ainda está presente no intestino do vetor no 2º dia após a infecção, mas se encontra totalmente digerido no 6º dia. Foi observado que após a digestão sanguínea, em todas as diferentes doses utilizadas, o inseto suporta a infecção por L. (L.) chagasi, L. (L.) major e L. (L.) amazonensis, mas não por L. (V.) braziliensis que foi capaz de se desenvolver no vetor apenas na dose mais alta (4x107), mas com uma média de infecção baixa. Leishmania (L.) amazonensis e L. (L.) major mostraram uma média de 7000 parasitos quando utilizamos a menor dose, porém não podemos afirmar que estas espécies são capazes de transmitir a doença. / Studies of Leishmania-vector interaction are an important field of research, since they can contribute to the understanding of the processes involved in the transmission of the parasite and the epidemiology of leishmaniasis. Faced with no effective vaccine against the disease and a limited range of drugs for the treatment, details of all aspects of vector-parasite interaction are desirable for the formulation of new control strategies against the parasite and vector. Some sandfly species show remarkable specificity for Leishmania parasites transmitted in nature while other species can be infected experimentally by more than one parasite species. In the past these have been suggested the term "Permissive Vectors." Are you not sure how to Vectors Permissive-Leishmania interaction works, but it is believed that the mechanism of adhesion of the parasite midgut of permissive vectors is different Natural Vectors .It is believed that the mechanism of adhesion to the midgut of Leishmania permissive vectors is different, is not dependent on LPG. The work presented here describes the development of four distinct species of Leishmania (Leishmania (L.) major, Leishmania (Leishmania) amazonensis, Leishmania (Viannia) braziliensis and Leishmania (Leishmania) chagasi) in Lutzomyia (L.) longipalpis, a vector considered permissive. This development was accomplished using the technique of experimental infection with three different doses of parasites (4x107, 2x107, 1x107). The blood is still present in the gut of the vector on day 2 after infection, but is completely digested in the 6 th day. It was observed that after digestion supports the insect blood infection by L. (L.) chagasi, L. (L.) major and L. (L.) amazonensis, but not for L. (V.) braziliensis. It was observed that after the blood digestion – in all doses tested - the insect was able to support the infection by L. (L.) chagasi, L. (L.) major and L. (L.) amazonensis, but not by L. (V.) braziliensis which was able to grow in vector only at the highest dose (4x107), but with a low average infection. Leishmania (L.) amazonensis and L. (L.) major showed an average of 7000 parasites when we use the lowest dose, but we can not assert that these species are capable of transmitting the disease.

Made available in DSpace on 2015-05-27T13:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 694.pdf: 3007603 bytes, checksum: 577a7771c716fd72e84b48d9e00f98f2 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A Leishmaniose Tegumentar Americana é endêmica em todos os estados do Brasil. De acordo com os registros da Secretaria de Saúde municipal, Ilhéus, localizado no sul da Bahia, é endêmico para a doença. Esse estudo objetivou caracterizar a transmissão da enfermidade nesse município. Foi realizado um estudo retrospectivo entre os anos 2000 e 2006, proporcionando a realização de busca ativa de casos humanos em áreas rural e urbana (Santo Antonio e Teotônio Vilela), com um inquérito populacional em 147 e 77 indivíduos, respectivamente. Foram capturados e identificados 6.439 flebotomíneos com armadilhas CDC, mil deles separados em pools de 20 insetos e submetidos à Reação em Cadeia da Polimerase. Ademais, 1.528 fêmeas capturadas com armadilhas de Castro foram dissecadas. Foram atendidos 131 pacientes suspeitos da doença no Centro de Atenção Especializada III, entre Agosto/2007 e Setembro/2009, e avaliados clínica, epidemiológica, parasitológica, molecular e imunologicamente. Dos residentes na área urbana 79,4 por cento visitaram, ao menos uma vez, a área rural. Foram identificadas 18 espécies de flebótomos, predominando Lutzomyia whitmani (52,49 por cento) e L. fischeri (29,98 por cento) na área rural, e L. cortelezzii (05 exemplares) na urbana. Não houve infecção natural à dissecção; e nenhum pool foi positivo à PCR. Mas, dos 84 hamsters inoculados com material humano, 03 amostras de esfregaços hepáticos apresentaram amastigotas; e 02 foram detectáveis por PCR para o subgênero Viannia. Não houve evidência de transmissão urbana, sugerindo uma origem rural dos casos, onde L. whitmani e L. fischeri possivelmente são vetores, tendo L. (V) braziliensis como agente etiológico nesse ciclo de transmissão. Recomenda-se intensificação na vigilância quanto à notificação de casos e atenção às características epidemiológicas locais

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-06-18T19:01:01Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AgnesAntoniaSampaioPereira (2).pdf: 3979166 bytes, checksum: 17d10f25aaa6a7bb5ceb08f07a44820c (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-06-18T19:01:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AgnesAntoniaSampaioPereira (2).pdf: 3979166 bytes, checksum: 17d10f25aaa6a7bb5ceb08f07a44820c (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-06-18T19:01:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AgnesAntoniaSampaioPereira (2).pdf: 3979166 bytes, checksum: 17d10f25aaa6a7bb5ceb08f07a44820c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-18T19:01:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AgnesAntoniaSampaioPereira (2).pdf: 3979166 bytes, checksum: 17d10f25aaa6a7bb5ceb08f07a44820c (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou / O conhecimento dos reservatórios de Leishmania spp. é crucial para o estabelecimento de medidas eficientes de controle das leishmanioses. A detecção, identificação da espécie de Leishmania bem como a quantificação da carga parasitária em diferentes amostras de animais podem ser ferramentas úteis na indicação da participação de um determinado hospedeiro como fonte de infecção para os vetores. Neste trabalho foi realizado um estudo sobre a infecção por Leishmania spp. em roedores e marsupiais em áreas endêmicas para as leishmanioses de Minas Gerais. As amostras utilizadas foram provenientes de pequenos mamíferos capturados em cinco localidades: Regional Nordeste de Belo Horizonte, Município de Divinópolis, Terra Indígena Xakriabá no Município de São João das Missões, Barra do Guaicuí em Várzea da Palma e Casa Branca, localidade pertencente ao Município de Brumadinho. A detecção e quantificação do DNA de Leishmania foram realizadas através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR) direcionadas ao alvo kDNA e a identificação da espécie através da PCR-RFLP direcionada ao hsp70. Foram capturados animais pertencentes a 14 diferentes espécies, das ordens Rodentia e Didelphimorfia. Os resultados mostraram que, em geral, a maioria dos animais foi capturada em áreas não urbanizadas e a maioria dos espécimes pertencem a ordem Rodentia. Dos 346 animais examinados, 78 (22%) foram positivos em pelo menos um tecido. A maior positividade foi observada na Terra Indígena Xakriabá (35%), seguido pela Regional Nordeste de Belo Horizonte (27%), Casa Branca (24%), Divinópolis (9%) e Barra do Guaicuí (8%). Quanto às espécies de animais, Thrichomys apereoides e Didelphis albiventris tiveram um número expressivo de exemplares capturados (76 e 113 respectivamente) e uma positividade considerada alta (28% e 19%). Com relação aos tecidos, o fígado apresentou maior positividade (14%), seguido por medula (9%), baço (6%), pele de orelha (5%) e pele de cauda (4%). Nas amostras dos animais foram identificadas as espécies L. (V.) braziliensis, L. (L). infantum e L. (V.) guyanensis, sendo que a primeira foi encontrada infectando um maior número e uma maior diversidade de espécies de animais. Os animais capturados na Terra Indígena Xakriabá apresentaram a carga parasitária mais elevada, e, com relação às espécies dos hospedeiros, T. apereoides foi o que apresentou a maior carga parasitária. Quanto aos tecidos, houve uma alta positividade em amostras de fígado enquanto as amostras de baço apresentaram uma alta carga parasitária, o que aponta para a importância desses órgãos na infecção dos pequenos mamíferos por Leishmania spp.. A pele de orelha se mostrou eficiente na detecção das três espécies de Leishmania encontradas. Os resultados obtidos, aliados ao conhecimento epidemiológico da área, mostraram a importância da participação deste animais no ciclo de transmissão de Leishmania nas áreas endêmicas estudadas. Esses dados ressaltam a necessidade de mais estudos a respeito destas diferentes espécies de mamíferos, possíveis reservatórios de Leishmania spp., visando a implementação de novas estratégias de vigilância epidemiológica e aplicação de medidas de controle específicas, tanto para leishmaniose tegumentar como para leishmaniose visceral. / The knowledge about the reservoir of Leishmania spp. is crucial to establish the efficient leishmaniasis control measures. The detection, identification of the Leishmania species and the parasite burden quantification in different clinical animal samples can be useful tools to indicate the participation of a certain host as a source of infection to the vectors. In this work it was done a study about the infection by Leishmania spp. in rodents and marsupials in leishmaniasis endemic areas in Minas Gerais. The used samples were from small mammals captured in five localities: the Northeast Region of Belo Horizonte, the municipality of Divinópolis, the Xakriabá Indian Reservation in the municipality of São João das Missões, Barra do Guaicuí in the municipality of Várzea da Palma and Casa Branca, placed in the municipality of Brumadinho. The detection and quantification of the Leishmania DNA was done through the Polimerase Chain Reaction (PCR) targeted to the kDNA and the identification of the species through the PCR-RFLP targeted to the hsp70. Animals from 14 different species of the orders Rodentia and Didelphimorfia were captured. The results showed that, in general, most of the animals were captured in non urbanized areas and most of the specimens belong to the Rodentia order. From the 346 tested animals, 78 (22%) were positive in at least one tissue. The higher positivity was observed in the Xakriabá Indian Reservation (35%), followed by the Northeast Region of Belo Horizonte (27%), Casa Branca (24%), Divinópolis (9%) and Barra do Guaicuí (8%). Related to the animal species, Thrichomys apereoides and Didelphis albiventris had an expressive number of captured specimens (76 and 113 respectively) and a high positivity (28% and 19%). About the tissues, the liver had the higher positivity (14%), followed by bone marrow (9%), spleen (6%), ear skin (5%) and tail skin (4%). In the animals samples were identified the species L. (V.) braziliensis, L. (L). infantum and L.(V.) guyanensis, wherein the first was found infecting a higher number and a higher diversity of animals species. The captured animals in the Xakriabá Indian Reservation showed a more elevated parasite burden and, related to the host species, T. apereoides showed the higher parasite burden. About the tissues, there was a high positivity in liver samples as the spleen samples showed a high parasite burden, which points to the importance of these organs for the infection of small mammals by Leishmania spp. The ear skin was efficient in the detection of the three Leishmania species found. The obtained results, allied to the area epidemiologic knownledge, showed important participation of these animals in the Leishmania cicle transmission in the studied endemic areas. These data show the need of more researches about these different mammals species, possible Leishmania reservoirs, seeking the implementation of new epidemiological surveillance srtatetegies and the aplliance of specific control measures to the cutaneous leishmaniasis as well to the visceral leishmaniasis.

Made available in DSpace on 2015-11-11T12:07:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ricardo_goncalves_ioc_dout_2014.pdf: 26077314 bytes, checksum: 4463421952d02877c917a24858e54d4d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-06-10 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O tratamento para leishmaniose cutânea (LC) utilizando antimoniais foi iniciado em 1912, no Brasil. O u so da forma pentavalente (Sb 5+ ) se iniciou na década de 1940, e apesar de ainda ser eficaz para curar a LC efeitos adversos graves podem acontecer. Outras opções de tratamento, como pentamidina e anfotericina B também são de administração parenteral. Na te ntativa de reduzir os efeitos adversos dos Sb 5 + , esquemas terapêuticos em doses baixas já evidenciaram ser seguros no tratamento da LC no Rio de Janeiro, sejam doses de apenas 5mg Sb 5+ /kg/dia por 30 dias (DB ), aplicação intralesional (IL) ou em esquema de uso de uma ampola três vezes por semana (2ª/4ª/6ª) até a cura clínica. Apesar das evi dências de que doses reduzidas de Sb 5+ levam à cura após o tratamento, sua eficácia a longo prazo (mais de cinco anos) não é bem estabelecida. Nosso objetivo foi verif icar se terapias que utilizaram doses reduzidas de antimonial (5mg Sb 5+ /kg/dia por 30 dias, IL ou 2ª/4ª/6 ª ) foram tão eficazes quanto o uso de doses regulares (15mg Sb 5+ /kg/dia) (DR ) na manutenção de cura da LC mesmo longo prazo após o tratamento. Setenta paci entes curados e tratados para leishmaniose foram analisados e comparados: 37 pacientes (52,8%) no grupo que utilizou DB e 33 (47,2%) no grupo DR . Os dois grupos eram clinicamente similares durante a fase ativa da LC. Todos os pacientes do grupo DB mantiver am - se cura dos, assim como os do grupo DR , mesmo em períodos tão longos quanto 25 anos após o tratamento Outros 20 pacientes de tratamento IL e dez de terapia 2ª/4ª/6ª também foram avaliados e permaneceram curados em um período de até 27 anos. Durante o ex ame dermatológico atual, não foram detectadas recidivas ou evolução para forma de leishmaniose mucosa (LM) em nenhum dos grupos. Após um período mínimo de seis anos após o término do tratamento, a detecção de anticorpos IgG1 e IgG3 anti - Leishmania demonstr ou níveis similares entre os grupos DB e DR. No grupo DB os níveis foram negativos em 74,2 % e 83 ,8 % para IgG1 e IgG3, respectivamente, e em 80% n os IL e 85 % nos 2ª/4ª/6ª. A produção de citocinas foi similar entre os grupos DB e DR . Nossos resultados sug ere m que o tratamento com doses baixas de antimonial foi tã o eficiente quanto o uso de DR na manutenção de cura da LC, mesmo longo tempo após o tratamento / Antimony therapy was first used to treat cutaneous leishmaniasis (CL) in 1912. Pentavalent antimonial (Sb5+) compounds were introduced as leishmaniasis therapy in the 1940s and are still efficient in curing CL, but they may cause serious adverse effects. Although there are other options for CL treatment, such as pentamidine and amphotericin B, similar to Sb5+, these drugs are also administered parenterally. To reduce the adverse effects of antimony, low-dose therapies were attempted and were proven safe in curing CL in patients in the state of Rio de Janeiro. Different schedules as 5mgSb5+/day/30 days (LowD), intralesional therapy (IL), or use of one ampoule three-times-a-week until clinical cure were proven to be efficient to cure CL. Despite evidence that low Sb5+ doses lead to a clinical cure soon after therapy, the long-term effectiveness (more than five years) of these low dosages is not wellknown. Our goal was to determine whether low-dose therapies (LowD, IL or regimen three-times-a-week) are as effective as regular doses (RegD; 15 mg/kg/day) for the long-term curative maintenance of CL. The medical records of seventy patients who were successfully treated for CL were retrieved and compared: 37 patients (52.8%) were allocated to the LowD group, and 33 patients (47.2%) to the RegD group. Patients in both LowD and RegD groups were clinically similar during active CL disease and all patients remained free of CL for periods as long as 25 years after therapy. Other 20 IL patients and 10 three-times-a-week ones were retrieved, and also remained free of CL even as long as 27 years. During the follow-up clinical examination, neither active lesions nor evolution to mucosal disease was detected. The levels of anti-Leishmania IgG1 and IgG3 antibodies, detected after a minimum average time of six years following clinical cure, were similar in LowD and RegD patients. IgG1 and IgG3 titres were negative in 74.2% and 83.8% of patients in the LowD group, respectively. In IL and three-times-a-week groups the levels of IgG1 and IgG3 were also negatives in 80% and 85%, respectively. Cytokine production was similar in both LowD and RegD groups. Our results shown that, the low dose therapies were as efficient as regular dose in the long-term curative maintenance of CL.

Made available in DSpace on 2015-11-18T13:13:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 18.pdf: 1870075 bytes, checksum: d5ea98b7af7284f04b5ff0aa3d2c7c71 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / A leishmaniose visceral canina (LVC) e uma doença parasitária causada por protozoários do gênero Leishmania, principalmente por Leishmania infantum. A epidemiologia da doença varia de região para região e o entendimento dos fatores associados à infecção em cães pode ajudar na elaboração de medidas de controle mais específicas. O diagnóstico sorológico da infecção sofreu mudanças importantes nos últimos anos com a introdução do TR-DPP® e do estabelecimento de novos critérios de diagnóstico (TR-DPP® + EIE-LVC) pelo Ministério da Saúde. Dentro desse contexto, no presente estudo objetivou-se estudar a epidemiologia da LVC no município de Goiana, estado de Pernambuco, nordeste do Brasil. Para tal, realizaram-se testes sorológicos (TR-DPP® e EIE-LVC) e análise clínico-epidemiológica em 360 cães semi e domiciliados, de ambos os sexos, raças e idades variadas, nos distritos de Atapuz, Tejucupapo e Pontas de Pedra no referido município. No TR-DPP®47 (13,1 por cento) animais foram reagentes, onde se observou associação significativa dos resultados com os seguintes sinais clínicos: alopecia, lesões na pele paresia e linfonodomegalia. Já no EIE-LVC 21 (5,8 por cento) animais foram reagentes, havendo associação significativa entre a classificação clínica dos animais, condição corporal, alopecia, lesões na pele, secreção ocular, paresia e linfonodomegalia. Já de acordo com o critério do Ministério da Saúde do Brasil, apenas 15 (4,2 por cento) animais foram classificados como positivos. De fato, verificou-se uma fraca concordância (Kappa = 0,39) entre os dois testes sorológicos. Conclui-se que a LVC encontra-se estabelecida em Goiana e que o uso do TR-DPP® como teste de triagem e do EIE-LVC como teste confirmatório pode levar a perda de cães infectados, uma vez que cães positivos do TR-DPP® são negativos no EIE-LVC e vice-versa

Made available in DSpace on 2016-02-16T12:33:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 andreia_alves_ipec_mest_2012.pdf: 385542 bytes, checksum: ce8d36278d30a403b5de05ef719424ae (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-05-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os testes sorológicos constituem um importante instrumento para o diagnóstico da leishmaniose visceral (LV), sendo os inquéritos sorológicos caninos uma das medidas recomendadas pelo Ministério da Saúde brasileiro, para o controle da doença humana. Trypanosoma caninum é um parasita recentemente descrito em cães domésticos em diferentes áreas de LV. Considerando a importância do cão no ciclo de transmissão de L. chagasi e a possibilidade desse novo parasita confundir o diagnóstico para leishmaniose, este estudo objetivou investigar o status sorológico de animais infectados por T. caninum e avaliar a reatividade cruzada com os testes sorológicos empregados na rotina de controle da LV no Brasil. Foram analisadas 117 amostras de soro de cães classificadas em 3 grupos: grupo Tc (animais infectados por T. caninum), grupo Lc (infectados por L. chagasi) e grupo Co (controles saudáveis) - com os kits disponibilizados para a rede pública - imunofluorescência indireta (IFI-LVC), ELISA (EIE-LVC) e teste imunocromatográfico (DPP) - e com testes in house empregando antígenos de T. caninum (IFI-Tc e ELISA-Tc) e de L. chagasi (IFILc e ELISA-Lc) Os cães infectados por T. caninum reagiram ao IFI-Tc e ELISA-Tc com sensibilidade de 64.1% e 94.9% e especificidade de 23.1% e 35.9%, respectivamente. Para os testes comerciais IFI-LVC, EIE-LVC e DPP, a sensibilidade foi de 100% e especificidade de 70.5%, 68% e 97.5% respectivamente. A especificidade destes testes tornou-se mais elevada quando o grupo Tc foi excluído das análises, com diferença significativa para IFI-LVC (x2=4.36, p=0.036) e não significativa para os demais testes (EIE-LVC - x2=2,87, p=0,089; DPP - x2=0,05, p=0,818). Concluímos que ferramentas sorológicas possam ter um valor limitado para o diagnóstico da infecção por T. caninum e que a presença de animais infectados por esse parasito em áreas endêmicas de LV possa ser um fator de confusão para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Serologic tests constitute an important tool for the diagnosis of visceral leishmaniasis (VL), being canine serol ogic inquiries one of the measures recommended by the Brazilian Health Minist ry, to control the human disease. Trypanosoma caninum is a parasite recently de scribed in domestic dogs in different endemic areas of LV. Consider ing the importance of the dog to the cycle of transmission of L. chagasi and the possibility of this new parasite to confuse the diagnosis for leishmaniasis, this study aimed to investigate the serological status of animals infected by T. caninum and to evaluate the cross- reactivity in serologic tests employed to t he routine control of the LV in Brazil. A set of 117 serum samples of dogs divi ded into 3 groups had been analyzed - Tc group (animals infected by T. caninum ), Lc group (animals infected by L. chagasi ) and Co group (healthy controls) - wit h kits available for the health public services - indirect imunofluoresc ence test (IFI-LVC), ELISA (EIE-LVC) and immunocromatographic test (DPP) - and with in house tests using T. caninum (IIF-Tc and ELISA-Tc) and L. chagasi (IIF-Lc and ELISA-Lc) antigens. Dogs infected by T. caninum had reacted to IIF-Tc and EL ISA-Tc with sensitivity of 64.1% and 94.9%, and s pecificity of 23.1% and 35.9%, respectively. For commercial tests IFI-LVC, EIE-LVC and DPP, sensitivity were of 100% and specificity of 70.5%, 68% and 97,5% respectively. The specificity of these tests had become higher when the Tc group was excluded from the analysis, with significant difference for IFI-LVC (x 2 =4.36, p=0.036) and not significant for the others tests (EIE-LVC - x 2 =2,87, p=0,089; DPP - x 2 =0,05, p=0,818). We conclude that serologic tools can have a limited value for the diagnosis of the infection for T. caninum and that the presence of animals infected by this parasite in endemic areas of LV visceral canine can be a factor of confusion for the diagnosis of leishmaniasis.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:15:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 370.pdf: 1919081 bytes, checksum: 9ff4a610675eba6aaa0e4a1f6c66b714 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / No presente estudo foi realizado um inquérito soroepidemiológico multimétodo e censitário para leishmaniose visceral na população canina da Ilha da Marambaia, município de Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brasil. Embora a região seja considerada indene e silenciosa para a doença é endêmica para leishmaniose tegumentar americana.Neste contexto, a possibilidade de co-infecção de cães L. brasiliensis e L. infantum e a recente dispersão da leishmaniose visceral canina para áreas do Estado sem relato de casos humanos, reforça a necessidade de avaliar fatores de risco de transmissão que nortearão futuras medidas de controle à doença. No censo foram identificados 125 cães dos quais 121 realizaram exame sorológico pelos métodos de TR DPP Leishmaniose Visceral Canina Bio-Manguinhos, IFI Leishmaniose Visceral Canina Bio-Manguinhos e EIE Leishmaniose Visceral Canina Bio-Manguinhos. (...) Dos 22 cães positivos no ELISA, sete apresentaram cultivo positivo com isolamento de Leishmania infantum e em uma amostra evidenciou-se Trypanossoma spp. destacando a possibilidade de reações cruzadas na sorologia. Dos sete animais infectados porL.infantum cinco concentravam-se na Praia Suja e todos apresentavam manifestação clinica compatível com leishmaniose visceral, cinco eram criados de forma livre(considerados andarilhos) e dois presos a coleira junto a casa. Em todos os casos os proprietários residiam próximo a mata residual. O inquérito entomológico realizado mostrou várias espécies de flebotomíneos dentre as quais L. longipalpis em baixa densidade, L.intermédia e M. migonei, em elevada densidade sugerindo sobreposição dos ciclos de transmissão de LTA e LVA na Ilha de Marambaia. A evidência epidemiológica da circulação da L. infantum na Ilha de Marambaia indica a necessidade de execução de ações de controle preconizadas pelo Ministério da Saúde e a continuidade de estudos epidemiológicos que possam aferir as medidas empreendidas sobre a população canina da Ilha da Marambaia. / In this study, a multimethod and census seroepidemiological survey for visceral leishmaniasis in the canine population of Marambaia Island , the city of Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brazil was performed. Although the region is considered harmless and silent for the disease is endemic for american cutaneous leishmaniasis . In this context the possibility of co-infection of dogs L. brasiliensis and L. infantum and the recentspread of canine visceral leishmaniasis in areas of the state reported no human cases reinforces the need to assess transmission risk factors that will guide future measures control the disease. In the census 125 dogs of which 121 underwent serological examination by DPP TR methods of Canine Visceral Leishmaniasis Bio - Manguinhos were identified , IFI Canine Visceral Leishmaniasis Bio - Manguinhos and EIE Canine Visceral Leishmaniasis Bio - Manguinhos. (...) Of the 22 ELISA positive dogs, seven had positive culture with isolation of Leishmania infantum and one sample revealed a Trypanosoma spp. highlighting the possibility of cross-reactions in serology. Of the seven animals infected with L.infantum five massed on the beach dirty and all had clinical manifestations compatible with visceral leishmaniasis, five were set free form (considered wanderers) and two prisoners on the leash by the house. In all cases the owners lived near residual forest .The entomological survey showed several sandfly species among which L. longipalpis atlow density , and L. intermedia, M. migonei in high density, suggesting overlap of the transmission cycles of ACL and AVL in Marambaia Island . Epidemiological evidenceof movement of L. infantum on the island of Marambaia indicates the need for enforcement of control measures recommended by the Ministry of Health and the continuity of epidemiological studies to assess the measures taken on the canine population of Marambaia Island. (AU)^ien

Made available in DSpace on 2016-03-28T12:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 nadia_bello_ioc_mest_2014.pdf: 2601818 bytes, checksum: 133b9a781ea207c7d3a928901d70b72e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma dermatozoonose de notificação compulsória considerada endêmica em grande parte da Bolívia. Este estudo teve como objetivos descrever aspectos clínicos e epidemiológicos da doença em uma região da fronteira Bolívia-Brasil e propor hipóteses sobre a existência de determinantes socioeconômicos e ambientais que contribuam para a endemicidade da LTA no Departamento de Pando, Bolívia entre os anos de 2008 a 2012. Para tanto, foram aplicados dois desenhos de estudo: i) um estudo de série de casos para o qual foi feita a coleta de informação dos registros médicos de pacientes com LTA entre os anos 2008 a 2012 (n=525) dos centros de saúde dos municípios de Cobija e Filadelfia; estas informações foram adicionadas à base de dados existentes sobre os casos positivos de LTA em todos os municípios do departamento de Pando (n=1.560) segundo dados do SEDES (Serviço Departamental de Saúde) Pando e ii) um estudo transversal realizado em três locais: na comunidade Empresiña do município de Filadelfia, no centro de Cobija e no bairro Villa Busch, pertencente ao município de Cobija. No estudo de série de casos com os dados do SEDES, observou-se que dos 1.560 casos de LTA registrados entre 2008 e 2012, a maior parte era do sexo masculino (73,8%), 16,2% ocorreram em crianças com idade até 12 anos, 74% em jovens de 13 a 43 anos e 26% em pessoas com mais de 30 anos, sendo a média de idade 24,2 ± 13,4 anos A lesão única cutânea ulcerada foi a forma clínica mais comum, localizada principalmente em áreas expostas. A proporção de pacientes com a forma mucosa da doença foi 5,6%. A média de idade dos pacientes acometidos da forma mucosa (26,9± 14,4 anos) foi ligeiramente superior àquela observada nos pacientes com a forma cutânea (24 ± 13,4 anos) (p=0,047). As profissões mais frequentemente identificadas entre os pacientes foram agricultor (13%) e estudante (30%). De 100% dos casos (n=1.560), observou-se que 45% (n=706) pacientes atingiram a cura completa da lesão e 3% dos pacientes (n=49) abandonaram o tratamento. No estudo transversal, comparando-se os três locais de estudo, foi possível observar que a comunidade Empresiña possuía habitações mais precárias do que no centro de Cobija e na Villa Busch, estas moradias por serem mais próximas à mata e pelo material utilizado na estrutura da vivenda (madeira em 78%) tinham maior facilidade de ingresso do vetor, 50% das famílias desta comunidade ia para a mata diariamente e, destes moradores, somente o 44% tinham conhecimento básico da doença Em conclusão, a LTA continua sendo uma doença endêmica e negligenciada na região, relacionada às atividades profissionais, com ênfase para a agricultura, sendo alta a proporção de pacientes que não conclui o tratamento, possivelmente por dificuldade de acesso ao serviço de saúde. A proporção de casos com comprometimento mucoso é alta e relacionada às dificuldades na chegada do fármaco para realizar o tratamento / American C utaneous L eishmaniasis (ACL) is a notifiable dermatozoonosis considered endemic in a great part of Bolivia. This study aimed to describe the clinical and epidemiological aspects of the d isease in a Bolivia - Brazil border region and propose hypotheses about socioeconomic and environmental determinants contributing to the endemicity of ACL in the Department of Pando, Bolivia, from 2008 to 2012. To do so, t wo study designs were performed: i) a case series through information from medical records of patients with ACL from 2008 to 2012 (n = 525) obtained in health centers of Cobija and Philadelphia municipalities; this information was added to the existing database of the positive cases of ACL in all municipalities of the Department of Pando (n = 1 . 560) according to the SEDES (Serviço Departamental de Saúde) of Pando and ii) a cross - sectional survey in three localities: Empresiña community of Philadelphia municipality, the center of Cobija and Villa Busch neighborhood of Cobija municipality . In the case series, it was observed that, from the 1.560 ACL cases registered from 2008 to 2012, most of them were male (73,8%), 16, 2% occurred in c hildren aged 12 years, 74 % in young people of 13 to 43 year s old and 26.2% in people over 30 years old, with an average age of 24,2 ± 13,4 years. The unique ulcerated cutaneous lesion was the most common clinical form, located mainly in exposed areas. The proportion of patients with a mucosal form of the disease w as 5.6%, the average age of the patients with mucosal lesions (26,9 ± 14, 4 years) was slightly higher than observed in patients with the cutaneous form (24 ± 13 , 4 years) (p = 0, 047). The most frequently occupations identified a mong patients were farmers (13%) and students (30 %). Among 100% of the cases (n= 1.560 ) , it was observed that 45% of patients (n= 706 ) achieved complete healing of lesions and 3% of the patients (n= 49 ) abandoned the treatment. In the cross - sectional study it was observed that Empresiñ a community was poorer than the center of Cobija and Villa Busch. Empresiña was closer to the forest and the material used in the structure of the houses (wood in 78%) made then more vulnerable to vectors, 50% of families in this community went to the fore st every day, and, among them, only 44% had basic knowledge of the disease. In conclusion, ACL remains an endemic, neglected and poverty related disease in the region, associated to professional activities, with emphasis on agriculture, with a high proport ion of patients that do not complete treatment, possibly due to poor access to health services. The proportion of cases with mucosal involvement is high and is possibly related to difficulties in access to the treatment.