Submitted by Marcelo Andrade Silva (marcelo.andradesilva@ufpe.br) on 2015-03-09T13:42:42Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DissertacaoThays Almeida.pdf: 1479816 bytes, checksum: 7f1cecad4d86341af2b9e3222a0f79be (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-09T13:42:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DissertacaoThays Almeida.pdf: 1479816 bytes, checksum: 7f1cecad4d86341af2b9e3222a0f79be (MD5) Previous issue date: 2013 / CAPES e CNPq / As leishmanioses são doenças infecto-parasitárias e, no Brasil, a Leishmania (V.) braziliensis é a espécie de maior incidência para Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA). Em todas as suas formas clínicas, a resposta imune é dependente de células T, por isso, torna-se importante compreender os mecanismos imunológicos responsáveis pela formação, progressão e cura da doença. O presente estudo teve como objetivo identificar, através da técnica PCR quantitativa em tempo real (qPCR), o perfil de expressão de mRNA para IFN-γ, TNF-α, TGF-β, IL-10 e IL-4 e da enzima iNOS em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com LTA após estimulação com os antígenos solúvel e insolúvel de L.(V.) braziliensis. Associou-se o perfil de expressão desses mediadores ao tamanho, tempo e número de lesões, além da resposta a intradermorreação de Montenegro (IDRM). Células de 27 pacientes e 6 controles foram incubadas por 24 horas na presença do mitógeno fitohemaglutinina (PHA) ou dos antígenos solúvel (AgSol) e insolúvel (AgIns) de L. (V.) braziliensis. A expressão de mRNA para as citocinas e para a iNOS foi avaliada por qPCR e as análises dos resultados foram feitas através do método Ct comparativo e pelos testes não-paramétricos Wilcoxon e Mann-Whitney. Em relação ao AgSol, foi verificada diferença significava da expressão de IFN-γ e TNF-α em pacientes quando comparados aos controles. Quanto ao AgIns, houve expressão significativa das citocinas IFN-γ, TNF-α e IL-4 em pacientes quando comparados aos controles. As citocinas IL-10 e TGF- β foram expressas frente a todos os estímulos utilizados, não apresentando diferença significativa entre e intra-grupos. Não houve expressão de iNOS com nenhum dos estímulos utilizados. Comparando os antígenos de L.(V.) braziliensis utilizados, foi observado maior expressão de IFN-γ e TNF-α frente ao antígeno insolúvel do parasita. A partir desses dados, podemos sugerir que ambas frações antigênicas do parasita são capazes de induzir uma resposta imune específica em pacientes com LTA ativa. Além disso, os dados obtidos nesse estudo sugerem a existência de um perfil de resposta imune Th1 para o antígeno solúvel e um perfil de resposta imune Th1 e Th2 considerando o antígeno insolúvel do parasita. A expressão gênica significativa para as citocinas TNF-α e IFN-γ, sugere que os pacientes tenham montado uma eficiente resposta imune contra o parasita e a presença da citocina IL-10 que eles estariam promovendo um mecanismo imunorregulatório sobre a forte resposta imune inflamatória exercida pelas citocinas Th1. Dentre os antígenos utilizados, pode-se sugerir que, devido a sua composição, o antígeno insolúvel seja mais imunogênico que o antígeno solúvel e que, por isso, essa molécula antigênica seja uma possível candidata a vacina e alvos para a imunoterapia. A ausência de expressão da iNOS pode ter sido devido a presença de TGF-β, que estaria regulando negativamente a produção de NO e consequentemente de iNOS. Além disso, pode estar havendo um mecanismo auto-regulatório para evitar produção em excesso de NO. A existência do perfil Th1 e Th2 pode ser explicado pelo estágio de desenvolvimento da doença. Assim, pelo fato de a LTA apresentar uma resposta Th1 multifacetada torna-se necessário estudos complementares para verificar o papel de outros tipos celulares e citocinas na progressão e cura da doença.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-04-08T13:17:51Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Diego de Hollanda Cavalcanti Tavares.pdf: 2494574 bytes, checksum: e8dc89834e1cb3194cbb61de8f169119 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T13:17:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Diego de Hollanda Cavalcanti Tavares.pdf: 2494574 bytes, checksum: e8dc89834e1cb3194cbb61de8f169119 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / FACEPE / No Nordeste brasileiro, a Leishmaniose Visceral (LV), provocada pela infecção com a Leishmania chagasi, é um sério problema de saúde pública cujo controle depende de um diagnóstico precoce dos reservatórios caninos e indivíduos afetados. Antígenos recombinantes são a melhor solução para o uso no diagnóstico sorológico e, em trabalhos prévios, novos antígenos de L. chagasi foram identificados com este propósito. Quando analisados por reações imunoenzimáticas os mesmos apresentaram uma sensibilidade variável e uma alta especificidade no diagnóstico da LV, e em misturas com dois ou mais antígenos houve um aumento da sensibilidade sem prejuízo da especificidade. A produção de um sistema de diagnóstico com mais de um antígeno, entretanto, aumenta os custos de fabricação e padronização. Neste trabalho, partimos de genes sintéticos (dof1, dof2 e dof3) desenhados com as melhores características (domínios repetitivos, regiões polares, epítopos para MHC) de antígenos selecionados e clonados em vetores plasmidiais. A partir de várias etapas de subclonagem estes genes foram utilizados na construção de genes quiméricos, codificando para as regiões repetitivas dos antígenos em diferentes combinações (3-2-1, 3-1-2 e 1-3-2). Os genes quiméricos, clonados em vetores plasmidiais de expressão, foram usados para a produção das respectivas proteínas em Escherichia coli, fusionadas a um motivo de poli-histidinas na sua extremidade N-terminal. Após purificação, via cromatografia de afinidade, estas proteínas foram avaliadas por ensaios de ELISA-indireto com soros humanos, onde se obteve alta sensibilidade e especificidade para as três proteínas, mesmo em diluições elevadas de soro. Estes resultados confirmam o potencial de uso das proteínas quiméricas como alternativa no diagnóstico da LV.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-15T14:03:55Z No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Aline Caroline da Silva.pdf: 3359231 bytes, checksum: 7470981050e12f219e445b217bcdf190 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T14:03:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Aline Caroline da Silva.pdf: 3359231 bytes, checksum: 7470981050e12f219e445b217bcdf190 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-07-30 / A leishmaniose é uma infecção causada por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania. Atualmente não existe vacina disponível para infecções por Leishmania e os tratamentos convencionais são tóxicos para os pacientes. Por esse motivo, o desenvolvimento de novas drogas leishmanicidas é uma necessidade urgente. No presente trabalho foi avaliada a citotoxicidade, atividade leishmanicida, a produção de óxido nítrico (NO), a secreção das citocinas IL-12, IL-10 e TNF e a indução da morte celular sob a influência de 22 novos compostos sintéticos derivados da estrutura das Ftalil-Hidrazona-Tiazóis e Tiossemicarbazonas. A citotoxicidade dos compostos foi avaliada em macrófagos peritoniais através do método do MTT e o índice de seletividade foi determinado. Foi avaliado o efeito dos compostos sobre o crescimento de formas promastigotas de L. amazonensis. Os compostos mais promissores foram avaliados sobre as formas amastigotas intracelulares. A produção de NO, bem como de citocinas por macrófagos infectados ou não e tratados ou não com os compostos foi avaliada pelo reagente de Griess e ELISA de captura, respectivamente. Foi avaliado o mecanismo de morte celular induzido pelos compostos em promastigotas tratadas e controle marcadas com anexina –FITC e iodeto de propídio, com posterior análise por citometria de fluxo. Os dados mostram que todos os compostos inibiram o crescimento de formas promastigotas e amastigotas além de apresentarem baixa citotoxidade em macrófagos. A presença de TS02, PM01, PM04 e PM10 na cultura de parasitas causou morte celular por apoptose. A TS02 também causou necrose. Quanto à produção de NO, esta foi detectada em macrófagos não infectados incubados com os compostos por 24 e 48h. Também foi dosada a produção de NO em macrófagos infectados, onde foi observada uma redução significativa dessa produção na presença do parasita. O tratamento com a TS11 das culturas infectadas restabeleceu a produção do NO pelos macrófagos. A presença da TS01 no tratamento das culturas infectadas causou aumento da produção de TNF. Na cultura não infectada, TS01, TS09, TS10, TS11 e PM01 causaram aumento significativo de TNF. Houve aumento significativo da produção de IL-12, nas culturas infectadas e tratadas com TS09, TS11, TS15 e PM01, e nas culturas não infectadas e tratadas com TS01, TS02, TS10, TS12, TS15, PM01 e PM04. O tratamento das culturas infectadas não interferiu com a produção de IL-10. Em culturas não infectadas houve aumento na produção de IL-10 após incubação com TS01, TS02, TS09, TS15 e PM01. A baixa toxicidade aos macrófagos, a atividade leishmanicida e a presença de citocinas de perfil Th1 apresentadas apontam para a utilização dos compostos TS01, TS11 e PM01 como agentes promissores para o tratamento da leishmaniose cutânea.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-15T14:58:09Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao Thays Almeida.pdf: 1586385 bytes, checksum: 532dc98dd16a7bf1c4fdc0f60eb9fb91 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T14:58:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao Thays Almeida.pdf: 1586385 bytes, checksum: 532dc98dd16a7bf1c4fdc0f60eb9fb91 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-08-28 / CAPES; CNPq / As leishmanioses são doenças infecto-parasitárias e, no Brasil, a Leishmania (V.) braziliensis é a espécie de maior incidência para Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA). Em todas as suas formas clínicas, a resposta imune é dependente de células T, por isso, torna-se importante compreender os mecanismos imunológicos responsáveis pela formação, progressão e cura da doença. O presente estudo teve como objetivo identificar, através da técnica PCR quantitativa em tempo real (qPCR), o perfil de expressão de mRNA para IFN- , TNF- , TGF- , IL-10 e IL-4 e da enzima iNOS em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com LTA após estimulação com os antígenos solúvel e insolúvel de L.(V.) braziliensis. Associou-se o perfil de expressão desses mediadores ao tamanho, tempo e número de lesões, além da resposta a intradermorreação de Montenegro (IDRM). Células de 27 pacientes e 6 controles foram incubadas por 24 horas na presença do mitógeno fitohemaglutinina (PHA) ou dos antígenos solúvel (AgSol) e insolúvel (AgIns) de L. (V.) braziliensis. A expressão de mRNA para as citocinas e para a iNOS foi avaliada por qPCR e as análises dos resultados foram feitas através do método Ct comparativo e pelos testes não-paramétricos Wilcoxon e Mann-Whitney. Em relação ao AgSol, foi verificada diferença significava da expressão de IFN- e TNF- em pacientes quando comparados aos controles. Quanto ao AgIns, houve expressão significativa das citocinas IFN- , TNF- e IL-4 em pacientes quando comparados aos controles. As citocinas IL-10 e TGF- foram expressas frente a todos os estímulos utilizados, não apresentando diferença significativa entre e intragrupos. Não houve expressão de iNOS com nenhum dos estímulos utilizados. Comparando os antígenos de L.(V.) braziliensis utilizados, foi observado maior expressão de IFN- e TNF- frente ao antígeno insolúvel do parasita. A partir desses dados, podemos sugerir que ambas frações antigênicas do parasita são capazes de induzir uma resposta imune específica em pacientes com LTA ativa. Além disso, os dados obtidos nesse estudo sugerem a existência de um perfil de resposta imune Th1 para o antígeno solúvel e um perfil de resposta imune Th1 e Th2 considerando o antígeno insolúvel do parasita. A expressão gênica significativa para as citocinas TNF- e IFN- , sugere que os pacientes tenham montado uma eficiente resposta imune contra o parasita e a presença da citocina IL-10 que eles estariam promovendo um mecanismo imunorregulatório sobre a forte resposta imune inflamatória exercida pelas citocinas Th1. Dentre os antígenos utilizados, pode-se sugerir que, devido a sua composição, o antígeno insolúvel seja mais imunogênico que o antígeno solúvel e que, por isso, essa molécula antigênica seja uma possível candidata a vacina e alvos para a imunoterapia. A ausência de expressão da iNOS pode ter sido devido a presença de TGF- , que estaria regulando negativamente a produção de NO e consequentemente de iNOS. Além disso, pode estar havendo um mecanismo auto-regulatório para evitar produção em excesso de NO. A existência do perfil Th1 e Th2 pode ser explicado pelo estágio de desenvolvimento da doença. Assim, pelo fato de a LTA apresentar uma resposta Th1 multifacetada torna-se necessário estudos complementares para verificar o papel de outros tipos celulares e citocinas na progressão e cura da doença.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2015-10-21T18:50:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Versu00E3o Biblioteca -CD.pdf: 1766620 bytes, checksum: 7e106e8cf3f587ef9230a50116a2b07f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-21T18:50:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Versu00E3o Biblioteca -CD.pdf: 1766620 bytes, checksum: 7e106e8cf3f587ef9230a50116a2b07f (MD5) Previous issue date: 2014-03-19 / CNPq / A leishmaniose é uma das doenças tropicais mais negligenciadas em termos de desenvolvimentos e descoberta de novos medicamentos. Neste sentido, a busca por novas moléculas, incorporação de fármacos em sistemas de liberação, o uso da terapia combinada e de tratamentos alternativos leishmanicidas é imprescindível. Esta pesquisa teve como objetivo desenvolver metodologias analíticas para a avaliação de qualidade de matérias-primas e formulações com atividade leishmanicida. Uma nova molécula de derivado naftoquinônico, análogo da beta-lapachona (HBL), com potente atividade antileishmania, foi caracterizada por termogravimetria (TG), calorimetria exploratória diferencial (DSC), dissolução intrínseca e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Óleos essenciais obtidos a partir das espécies Cymbopogon citratus e Cymbopogon nardus foram caracterizados e identificados utilizando a cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CG-EM). Microemulsões foram preparadas contendo os óleos essenciais de C. citratus (ME-citratus) e C. nardus (ME-nardus). Métodos analíticos de quantificação dos óleos essenciais e microemulsões, com base no teor dos marcadores citral e citronelal, foram desenvolvidos e validados utilizando a cromatografia gasosa com detector de chama (CG-DIC). Os óleos essenciais e as microemulsões obtidas foram avaliados quanto à atividade leishmanicida frente às formas promastigotas de Leishmania chagasi. O ensaio de citotoxicidade dos óleos livres e incorporados nas microemulsões foi realizado frente às células 3T3 (fibroblastos de murinos Swiss albinos). Os sistemas microemulsionados foram caracterizadas através da determinação do pH, tamanho de partícula, índice de polidispersão (IDP), potencial zeta, condutividade, doseamento e cinética de liberação. Na caracterização das moléculas sintéticas HBL, os dados TG e DSC mostraram diferenças de comportamento térmico entre as amostras, permitindo classificar lotes de HBL em três grupos com estabilidade física e térmica diferentes. Os dados cromatográficos e de dissolução intrínseca evidenciaram características distintas de pureza e solubilidade entre os lotes de HBL. A identificação e padronização dos óleos por CG-EM revelou como constituintes majoritários o citral (66,22%) para o C. citratus e o citronelal (37,98%) para o C. nardus. Os métodos analíticos desenvolvidos apresentaram linearidade na faixa de concentração 89,30 a 714,40 μg/mL para o citral e 85,50 a 342,00 μg/mL para o citronelal. As metodologias apresentaram precisão, exatidão, selerividade e robustez. As microemulsões (ME) apresentaram pH compatíveis com a administração tópica, tamanho de partícula em escala nanométrica, índice de polidispersão IDP < 0,3, potencial zeta negativo, condutividade condizente com sistemas O/A e cinética de liberação, utilizando as células de Franz, de ordem zero. Os dados DSC cooling caracterizaram as ME como O/A. O doseamento dos óleos essenciais nas ME foi de 29,58 mg/mL de citral para ME-citratus e de 19,73 mg/mL do citronelal para MEnardus. Os óleos C. citratus e C. nardus apresentaram importante atividade leishmanicida para a L. chagasi com CE50 de 26,12 μg/mL para o C. citratus e 16,92 μg/mL para o C. nardus. Sendo esta atividade potencializada para a ME-citratus e MEnardus. Os óleos e ME não apresentaram citotoxicidade para as células 3T3. O estudo da molécula HBL permitiu observar a dificuldade na síntese de uma molécula promissora tendo em vista ao desenvolvimento tecnológico da matéria-prima. As técnicas analíticas evidenciaram as ME-citratus e ME-nardus como sistemas de liberação promissores para o tratamento tópico da leishmaniose.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-01T16:12:57Z No. of bitstreams: 1 Carina Scanoni Maia.pdf: 2928529 bytes, checksum: 940235c1bf289e2eec6eed79934063e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-01T16:12:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carina Scanoni Maia.pdf: 2928529 bytes, checksum: 940235c1bf289e2eec6eed79934063e1 (MD5) Previous issue date: 2012-12-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Brazil faces the expansion and urbanization of American Visceral Leishmaniasis (AVL), and the Northeast Region has the highest series of the disease and the dog considered the main reservoir in the urban environment. Among the states of the Northeast Region, Pernambuco registered a total of 1,465 cases of AVL in the period from 2000 to 2010 and of the municipalities, Petrolina has been highlighted by the expansion of the disease. Thus, was conducted a retrospective cross-sectional study of reported cases of the disease between 2001 and 2010 in Petrolina. Of the total of 117, have been located and obtained interviews with 42 patients. 59.52% (25/42) were male and 40.47% (17/42) were female. Children between 0 and 12 years represented 45.60% (19/42). 100% (42/42) reported that the first symptoms appeared within six months. 4.7% reported having up to two family members affected and 13% (2/42) reported the euthanasia of dogs. Only 33.3% (14/42) reported having dogs at home and 14.2% (6/42) said they raising pigs and chickens. 95.3% (40/42) reported that the activity of phlebotomine was greater at night, but only 26.1% (11/42) reported the use of mosquito nets and 2% (1/42) repellents. The collection of solid waste was reported by 90.48% (38/42) and only 4% of homes had sewage system. Only 38.09% (16/42) said they understand the role of the accumulation of organic matter in the disease cycle, but 95.23% (40/42) had some knowledge about the role of dogs and vector. The county has several epidemiologic factors that favor the spread of the disease, but knowledge about the relationship of organic matter accumulated is superficial proved by patients interviewed, referring the need for health education campaigns. The use of tools such as Geographic Information System allows you to map and identify areas at high risk for the occurrence of new cases of the disease. Therefore, was conducted a cross-sectional study of human cases and was found 117 patients registered with AVL. Of these, 35.89% (42/117) were located and geocoded. The serological survey showed that of the 600 dogs evaluated, 19.16% (115/600) were positive for the disease, and 73.04% (84/115) belonged to urban area. After spatial analysis of human and canine cases, we observed the presence of clusters in both rural and urban area. However, in both cases, the concentration was higher in urban areas, mainly in the southwestern region of the map of the city of Petrolina. A large number of cases were observed in places where there was a decrease in vegetation cover and poor housing conditions. However, when it was carried out the overlap of maps, no close association between canine and human cases of the disease have been found. In conclusion, spatial analysis of LVA in Petrolina concluded that the disease is not urbanized, though the association between canine and human disease. The Canine Visceral Leishmaniasis is considered an immune-mediated disease and viscerotropic despite the nature of the parasite, the skin is the main organ involved in the disease progression. Between the most dermatological alterations reported are: exfoliative dermatitis, hyperkeratosis, ulcers and alopecia, however, hyperpigmentation of the skin can also be present. The aim of this study was to evaluate the structural and ultrastructural morphological changes and pigmentary skin of dogs Leishmania infantum. Fragments of intact skin, and hyperpigmented lesions in the abdominal region were removed with the aid of a punch, each of the 11 dogs evaluated and tested positive for Enzyme linked immunosorbent and parasitological examination by bone marrow biopsy. Subsequently, the tissues collected were subjected to routine histological techniques for analysis in light microscopy and transmission electron microscopy. After analysis by light microscopy, was found mononuclear cell infiltrate in the dermis lesions and amastigostas forms of Leishmania infantum within macrophages of 81.8% (9/11) dogs. Parakeratosis and hyperkeratosis was observed in lesional skin of 54.5% (6/11) dogs. Excess melanin granules was noted both in the epidermis and in dermis of the skin hyperpigmented 36.3% (4/11) dogs. In the electron micrographs, it was possible to display a large amount of melanin granules around the nucleus of keratinocytes of the stratum spinosum. The results of this study suggest a possible relationship between inflammatory mediators produced in Canine Visceral Leishmaniasis and stimulation of melanogenesis. / O Brasil enfrenta a expansão e urbanização da Leishmaniose Visceral Americana (LVA), sendo a Região Nordeste detentora da maior casuística da enfermidade e o cão considerado o principal reservatório no ambiente urbano. Dentre os Estados da Região Nordeste, Pernambuco registrou um total de 1.465 casos de LVA no período de 2000 a 2010 e dos municípios, Petrolina vem se destacando pela expansão da enfermidade. Sendo assim, foi realizado um estudo transversal retrospectivo dos casos registrados da doença entre 2001 a 2010 em Petrolina. Do total de 117, foram localizadas e obtidas entrevistas com 42 pacientes. 59,52% (25/42) eram do sexo masculino e 40,47% (17/42) do sexo feminino. Crianças entre 0 e 12 anos representaram 45,60% (19/42). 100% (42/42) relataram que os primeiros sintomas surgiram em até seis meses. 4,7% afirmaram ter até dois integrantes da família acometidos e 13% (2/42) relataram a eutanásia de cães. Apenas 33,3% (14/42) relataram ter cães no domicílio e 14,2% (6 /42) disseram criar porcos e frangos. 95,3% (40/42) afirmaram que a atividade dos flebotomíneos era maior à noite, porém, apenas 26,1% (11/42) relataram o uso de mosquiteiros e 2% (1/42) repelentes. A coleta de resíduos sólidos foi relatada por 90,48% (38/42) e somente 4% das casas tinham rede de esgoto. Apenas 38,09% (16/42) afirmaram compreender o papel do acúmulo da matéria orgânica no ciclo da doença, porém 95,23% (40/42) apresentava algum conhecimento sobre o papel do cão e do vetor. O município apresenta diversos fatores epidemiológicos que favorecem a expansão da doença, porém o conhecimento sobre a relação da matéria orgânica acumulada se mostrou superficial por parte dos pacientes entrevistados, remetendo a necessidade de campanhas educativas em saúde. A utilização de ferramentas, como o Sistema de Informações Geográficas permite mapear e identificar as áreas com alto risco para ocorrência de novos casos da doença. Sendo assim, foi realizado um estudo transversal dos casos humanos e constatou-se 117 pacientes registrados com LVA. Destes, 35,89% (42/117) foram localizados e georreferenciados. O inquérito sorológico mostrou que dos 600 cães avaliados, 19,16% (115/600) foram positivos para a doença, sendo que 73,04% (84/115) pertenciam à zona urbana. Após análise espacial dos casos humanos e caninos, observou-se a presença de Clusters, tanto na zona rural como urbana. No entanto, em ambos os casos, a concentração foi maior na área urbana, principalmente na região sudoeste do mapa da cidade de Petrolina. Um grande número de casos foi observado em locais onde houve a diminuição da cobertura vegetal e condições precárias de moradia. No entanto, quando foi realizada a sobreposição dos mapas, nenhuma associação estreita entre casos caninos e humanos da doença foram encontrados. Em conclusão, análise espacial da LVA em Petrolina permitiu concluir que a doença encontra-se urbanizada sem, entretanto associação entre a doença humana e canina. A Leishmaniose Visceral Canina é considerada uma doença imunomediada e apesar da natureza viscerotrópica do parasito, a pele representa o principal órgão envolvido na progressão da doença. Entre as alterações dermatológicas mais relatadas são: dermatite esfoliativa, hiperqueratose, úlceras e alopecia, no entanto, a hiperpigmentação da pele também pode estar presente. O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações estruturais e ultraestruturais das alterações morfológicas e pigmentares da pele de cães Leishmania infantum. Fragmentos de pele íntegra, lesionada e hiperpigmentada da região abdominal foram retirados com auxílio de um punch, de cada um dos 11 cães avaliados e com testes positivos para Imunoadsorção Enzimática e exame parasitológico por biópsia de medula óssea. Posteriormente, os tecidos coletados foram submetidos a técnicas de rotina histológica para análise em microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Após análise por microscopia de luz, foi constatado infiltrado de células mononucleares na derme lesionada e formas amastigostas de Leishmania infantum no interior dos macrófagos de 81,8% (9/11) dos cães. Paraceratose e Hiperqueratose foram observadas na pele lesionada de 54,5% (6/11) dos cães. Excesso de grânulos de melanina foi constatado tanto na epiderme como na derme da pele hiperpigmentada de 36,3% (4/11) dos cães. Na eletromicrografia, foi possível visualizar uma grande quantidade de grânulos de melanina ao redor do núcleo dos queratinócitos da camada espinhosa. Os resultados deste estudo sugerem uma possível relação entre mediadores inflamatórios produzidos na Leishmaniose Visceral Canina e o estímulo da melanogênese.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T14:17:38Z No. of bitstreams: 1 Rafael Antonio do Nascimento Ramos.pdf: 1790474 bytes, checksum: a8a6814fe45ec6d65aa56a07427d3969 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T14:17:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rafael Antonio do Nascimento Ramos.pdf: 1790474 bytes, checksum: a8a6814fe45ec6d65aa56a07427d3969 (MD5) Previous issue date: 2012-03-23 / Canine visceral leishmaniasis (CVL) is an important parasitic zoonosis endemic in Brazil, caused by the protozoa known as Leishmania infantum. In the urban area, the dogs are considered the main reservoir of this parasite. Thus, the importance of dogs in the urban environment has stimulated numerous studies for the assessment of diagnostic techniques. Among these studies, several have proposed the molecular tools (e.g. Polimerase Chain Reaction (PCR) and Real time PCR (qPCR)) as important methods for diagnosis of infection by L. infantum in dogs. However, little is known about the better biological samples used in these techniques, considering that several samples may be utilized (e.g. bone marrow, lymph node, spleen, skin). Hence, the aims of this study were i) to determine the performance of polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR (qPCR) in the diagnosis of CVL using different biological samples; ii) to quantify the parasite load in the skin, bone marrow, lymph node and spleen of dogs and relate the findings to clinical status. For such, infected dogs by L. infantum from an endemic area were utilized. Samples of bone marrow, lymph node, spleen and skin were collected by assessment of PCR and qPCR, and quantification of parasite load. In the present study, qPCR was able to detect a greater number of positive animals in comparison to PCR. No significant differences between biological samples were found in the detection of L. infantum DNA using PCR or qPCR. Considering the parasite load on different biological sample, it was not observed significative difference, on the other hand, among the clinical group was detected significative difference. The findings of the present study suggests that the parasite load on bone marrow, lymph node, spleen and skin is greater among those dogs with more clinical signs (parasite load on polysymptomatic animals > parasite load on oligosymptomatic animals > parasite load on asymptomatic animals). In addition, considering the easy of acquiring lymph node samples further demonstrates the greater viability of this biological material in the routine diagnosis of infection by L. infantum in dogs. / Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma importante zoonose parasitária endêmica no Brasil, causada pelo protozoário denominado Leishmania infantum. Em áreas urbanas, os cães são considerados os principais reservatórios deste parasito. Sendo assim, a importância destes animais no ambiente urbano tem estimulado a realização de numerosos estudos para avaliação de técnicas de diagnóstico. Entre os estudos, vários têm proposto ferramentas moleculares (ex. Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR)) como importantes métodos para o diagnóstico da infecção por L. infantum em cães. No entanto, pouco se sabe sobre qual amostra biológica é mais viável, considerando que várias podem ser utilizadas (ex. medula óssea, linfonodo, baço, pele). Assim, os objetivos deste estudo foram: i) determinar o desempenho da PCR e qPCR no diagnóstico da LVC utilizando diferentes amostras biológicas; ii) quantificar a carga parasitária na medula óssea, linfonodo, baço e pele de cães relacionando-a com os sinais clínicos apresentados pelos animais. Para tanto, foram utilizados cães naturalmente infectados por L. infantum provenientes de uma área endêmica. Amostras de medula óssea, linfonodo, baço e pele foram coletadas para avaliação da PCR e qPCR, e quantificação da carga parasitária. No presente estudo, qPCR foi capaz de detectar um grande número de animais positivos em comparação da PCR. Não se observou diferença significativa entre as amostras biológicas na comparação da PCR e qPCR. Considerando a carga parasitária em diferentes amostras biológicas, não foi observada diferença significativa, por outro lado, de acordo com os diferentes grupos clínicos foi detectada diferença significativa. Os achados do presente estudo sugerem que a carga parasitária na medula óssea, linfonodo, baço e pele é maior nos animais que apresentam um maior número de sinais clínicos (carga parasitária nos animais polissintomáticos > carga parasitária nos animais oligossintomáticos > carga parasitária nos animais assintomáticos). Além disso, considerando a facilidade de obtenção, sugere-se o linfonodo como a amostra mais viável para a detecção molecular de L. infantum em cães.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-11T16:39:45Z No. of bitstreams: 1 Carlos Alberto Celestino dos Santos.pdf: 146530 bytes, checksum: 3593028f5380a47cb172c0baff5c3804 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T16:39:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carlos Alberto Celestino dos Santos.pdf: 146530 bytes, checksum: 3593028f5380a47cb172c0baff5c3804 (MD5) Previous issue date: 2006-02-13 / During the last two decades Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), has become endemic in several regions of Brazil in the face of social and ecological features which results in its expansion including no endemic areas. Because of that, the urbanization of CVL has been associated to environmental and social features.The goal of this work is to study the perception by the owners , and the epidemiological, clinical aspects of the Canine Visceral Leishmaniasis. During the sorological survey to leishmaniasis in dogs from Itamaracá island in 2005, a total of 165 people from different sex and ages were interviewed. According to the survey, 74% reported that there was not a periodic garbage collection, and 52% of these people, threw away the garbage on street, and 97% of interviewed people, mentioned that they don´t have a local sanitation systems. With the objective of re-evaluate the situation of CVL in that county, 199 blood samples of domicilated dogs from diferent sex, breed and ages were collected in the Itamaracá county, and analysed by the enzimatic immunoassay test (ELISA). Among the examined dogs, 4.5% (09/199) presented anti-Leishmania major-like antibodies. The results showed the decrease of infection in that county. In spite of the clinical signs 88.94%(177/199) of these dogs did not present clinical signs of the disease. For the evaluation of platelet count in dogs with natural infection of Leishmania (Leishmania) chagasi in the metropolitan region of Recife (MRC), 35 animals from diferent sex, breed and ages were analyzed. The individual analysis revealed a normal platelet count in 51,43 % (18/35), thrombocytosis in 28.57% (10/35) and thrombocytopenia in 20% (07/35) of dogs. According to interviwees, the results showed a clear perception of the problems that residential solid waste, basic sanitation system, changes of natural landscape and the existence of sandflies may contribute in the transmission of CVL. On the other hand, besides the reduction of CVL on Itamaracá Island some control measures for canine kalazar may be continue in the city of this study. The platelet count, is not a importat tool for the diagnosis of CVL. / Durante as últimas duas décadas a Leishmaniose Visceral Canina (LVC), vem se tornando endêmica em diversas regiões do Brasil, tendo em vista os diversos fatores ecológicos e sociais, o que resulta em sua expansão inclusive em áreas consideradas indenes. Sendo assim, a urbanização da LVC tem sido associada a fatores ambientais e sociais. O objetivo deste trabalho foi estudar a percepção dos proprietários, epidemiologia e clínica da leishmaniose visceral canina. Por ocasião do inquérito sorológico canino para o calazar no município da Ilha de Itamaracá no ano de 2005, foram entrevistadas 165 pessoas de ambos os sexos e idades variadas. Segundo a pesquisa, 74% dos entrevistados, informaram não haver o recolhimento de lixo em suas residências, sendo que 52% dos moradores pesquisados colocavam o lixo nas próprias ruas, e 97% dos entrevistados, informaram não existir saneamento básico no local estudado. Com a finalidade de re-avaliar a situação da LVC no referido município, foram coletadas amostras de sangue de 199 cães domiciliados, de raça, sexo e idades variadas procedentes do município de Itamaracá e analisadas pelo teste de imunoadsorção enzimática (ELISA). Dos animais examinados, 4,5% (09/199) apresentaram anticorpos anti-Leishmania major-like. Os resultados evidenciaram uma redução da freqüência da infecção no referido município. Com relação aos sinais clínicos 88,94% (177/199) dos animais não apresentaram sinais característicos da doença. Para avaliação da plaquetometria em cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) chagasi na Região Metropolitana do Recife, foram utilizados 35 animais de ambos os sexos de raças e idades variadas. Analisando-se individualmente os animais, observou-se contagem normal do número de plaquetas em 51,43% (18/35), trombocitose em 28,57% (10/35) e trombocitopenia em 20% (07/35). Os resultados gerais obtidos, demonstraram que os entrevistados apresentaram uma percepção clara, sobre os problemas que os resíduos sólidos domiciliares urbanos, do saneamento básico, da modificação da paisagem natural e a presença de mosquitos podem contribuir na transmissão da LVC. Por outro lado, apesar da redução da freqüência da LVC na Ilha de Itamaracá., as medidas de controle do calazar devem continuar no município em estudo. Com relação a plaquetometria, a sua contagem não se constitui uma ferramenta importante no diagnóstico da LVC.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-11T11:48:36Z No. of bitstreams: 1 Jamile Prado dos Santos.pdf: 3388776 bytes, checksum: 21c7a12a0e2577c73388b1a7ed8382da (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T11:48:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jamile Prado dos Santos.pdf: 3388776 bytes, checksum: 21c7a12a0e2577c73388b1a7ed8382da (MD5) Previous issue date: 2011-02-11 / Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) in Brazil is caused by Leishmania infantum, which is reported in several regions. The objective of this research was to investigate the epidemiological, clinical and laboratory features of visceral leishmaniasis in dogs (Canis familiaris) (Linnaeus, 1758) from the urban area of Bom Jesus, Piaui State and Jaboatão dos Guararapes, Pernambuco State, Brazil. Dogs from Bom Jesus, Piauí, and Muribeca neighborhood, Jaboatão dos Guararapes, Pernambuco, Brazil, were submitted to blood collection and investigated for Canine Visceral Leishmaniasis clinical signs. Serum samples were analyzed by ELISA for anti-Leishmania infantum to determine the frequency of positive animals in the two localities mentioned above. According to serology, positive dogs were assigned coordinates by using a portable GPS in Muribeca neighborhood. The points were recorded in the district and analyzed in ArcGIS using the "Spatial Correlation of Moran's," to distinguish grouping based on the variables of vegetation and hydrology. Samples of the urinary bladder of adult dogs naturally infected by L. infantum in the metropolitan area of Recife were performed by immunohistochemical and histopataologic analysis. On the serological survey of Bom Jesus, PI, 42.23% were positive by ELISA from 206 serum samples examined. There was no significant difference between symptomatic and asymptomatic dogs. In Muribeca, Jaboatão dos Guararapes, 159 dog blood samples were used, which 50.3% were positive by ELISA. No significant difference in relation to race and gender was found, but a significantly higher frequency was observed in asymptomatic animals. The skin diseases predominated among the positive animals. Moreover, the correlations between all points and environmental factors, vegetation type and hydrology, which were pooled showed no relationship. Samples of urinary bladder and kidneys from 25 Leishmania infantum natural infected dogs provenient of metropolitan region of Recife were analysed by immunohistochemical and histopathology. In assessing the immunohistochemical staining 32% of samples of bladder and 8% of samples of kidneys demonstrated immunostaining of amastigotes of L. infantum. Cystitis was present in 36% of samples analyzed bladder. Membranoproliferative glomerulonephritis and interstitial nephritis were the more found renal histopathological changes. We conclude that the frequency of seropositive animals at both locations of study is high. Immunohistochemistry was superior in comparison with histopathology for the detection of amastigotes in different samples of kidneys and urinary bladder of Leishmania infantum naturally infected dogs. This is the first report in urinary bladder. / A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) no Brasil é causada por Leishmania infantum a qual é relatada em várias regiões. O objetivo desta pesquisafoi verificar aspectos epidemiológicos, clínicos e laboratoriais da leishmaniose visceral em cães (Canis familiaris) (Linnaeus, 1758) provenientes da zona urbana do município de Bom Jesus – PI e Região Metropolitana de Recife - PE, Brasil. Cães do município de Bom Jesus, Piauí, e do bairro de Muribeca, município de Jaboatão dos Guararapes, Pernambuco, Brasil, foram submetidos à coleta de sangue e investigados quanto aos sinais clínicos relacionados à Leishmaniose Visceral Canina. Os soros foram analisados pelo teste ELISA para anticorpos anti-Leishmania infantum, para determinar a frequência de animais sororreagentes nas duas localidades acimas citadas. No bairro de Muribeca de acordo com a sorologia, para os cães positivos foram atribuídas coordenadas através da utilização de um GPS portátil. Os pontos foram registrados no município e analisados no ArcGIS, utilizando-se a “Correlação Espacial de Moran’s", para distinguir agrupamento com base nas variáveis da vegetação e hidrologia. Foi realizada a avaliação imuno-histoquímica e histopatológica de fragmentos de bexiga urinária de cães adultos naturalmente infectados por L. infantum da região metropolitana de Recife. No inquérito sorológico de Bom Jesus – PI, de 206 amostras de soro examinadas, 42,23% foram positivas ao ELISA. Não houve diferença significativa entre cães sintomáticos e assintomáticos. Em Muribeca, no município de Jaboatão dos Guararapes, de 159 cães, 50,3% foram positivos ao ELISA, não havendo diferença significativa em relação à raça e sexo, porém com frequência significativamente mais elevada nos animais assintomáticos. Predominaram dentre os animais positivos as dermatopatias. Por outro lado, as correlações entre todos os pontos e fatores ambientais, tipo de vegetação e hidrologia, que foram agrupados não apresentaram relação. Na avaliação imuno-histoquímica e histopatológica de amostras de bexiga urinária e de rins de 25 cães da região metropolitana de Recife, positivos para L.infantum, 32% das amostras de bexiga e 8% das amostras de rins demonstraram a imunomarcação de formas amastigotas de L. infantum. A cistite esteve presente em 36% das amostras e as alterações histopatológicas renais mais encontradas foram glomerulonefrite membranoproliferativa e nefrite intersticial. Conclui-se que a frequência de animais sorologicamente positivos em ambas as localidades de estudo é alta e que o método de imuno-histoquímica é superior ao exame histopatológico para a detecção de formas amastigotas em diferentes amostras de rins e bexiga urinária de cães com infecção natural por L. infantum, sendo este o primeiro relato em bexiga urinária.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-11T16:51:47Z No. of bitstreams: 1 Ivana Fernandes Vidal.pdf: 630098 bytes, checksum: ae2f00d32d5614646ff26cbe9edf39a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T16:51:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ivana Fernandes Vidal.pdf: 630098 bytes, checksum: ae2f00d32d5614646ff26cbe9edf39a2 (MD5) Previous issue date: 2008-02-08 / Considering an endemic area of Visceral Leishmaniasis (VL), the northeast of Brazil, showed the majority reported cases, where the dog is the principal reservoir host. Canine Visceral leishmaniasis (CVL) is a serious and potentially fatal condition disease which sometimes no clinical signs are presented in dog’s infected by Leishmania (Leishmania) chagasi. The purpose of this study was not only to estimate the prevalence and the distribution of CVL but also verify the clinical signs in dogs with visceral leishmaniasis from Campina Grande County, Paraiba State, Brazil. A total of 500 sample of serum of dogs domiciled were collected and analyzed by ELISA test. The results showed 3% (15/500) seroreagents dogs. On the other hand 86.6% (13/15) of seropositive dogs showed no clinical signs of infection. It have not found differences statically (p>0.05) on the analysis of positive results at serological test in relation to sex and age of the positive animals. The dog positivity was observed in most of the studied areas, particularly in west side of the city. These results indicate that measures of control must be adopted in order to prevent the infection in human population in this city and future, studies must be implemented, especially in dog’s population, because the asymptomatic form of the disease / Considerado área endêmica para Leishmaniose visceral (LV), o nordeste do Brasil detém a maioria dos casos relatados, onde o cão é considerado principal reservatório. A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença séria, potencialmente fatal, onde algumas vezes os cães infectados pela Leishmania (Leishmania) chagasi não apresentam sinais clínicos da infecção. O propósito deste estudo foi não só estimar a prevalência e distribuição da LVC, mas também, verificar os sinais clínicos em cães com leishmaniose visceral no Município de Campina Grande, Estado da Paraíba, Brasil.Um total de 500 amostras de soro de cães domiciliados foram coletadas e analisadas pelo Teste ELISA. Os resultados mostraram 3% (15/500) dos cães soro-reagentes. Por outro lado, 86,6% (13/15) dos cães soro-positivos não apresentavam sinais clínicos da infecção. Não foi encontrada diferença estatística (p>0,05) na análise dos resultados positivos ao teste sorológico em relação ao sexo e a idade. Os cães positivos foram observados na maioria das áreas estudadas, particularmente na zona oeste da cidade. Os resultados indicaram que medidas de controle devem ser adotadas como método de prevenção da infecção da população humana nesta cidade e futuros estudos devem ser implementados, especialmente na população canina por causa da forma assintomática da doença