A galectina-1 (LGALS1) participa em diferentes etapas da neoplasia, mas sua função na leucemia mielóide crônica (LMC) é desconhecida. Neste trabalho, a expressão etópica de BCR-ABL selvagem, mas não de BCR-ABL quinase deficiente, em linhagens celulares hematopoéticas, resultou em aumento de LGALS1. O efeito foi revertido com a inibição da tirosina quinase pelo mesilato de imatinibe. Este resultado indicou que a galectina-1 é modulada pela atividade tirosina-quinase de BCR-ABL. Em pacientes com LMC, a maior expressão de LGALS1 foi correlacionada a altos níveis de BCR-ABL, progressão da doença e a um tempo de sobrevida menor. Adicionalmente, as células K562 com LGALS1 inibida por RNA de interferência exibiram crescimento mais lento do que as células K562 com LGALS1 intacta, em camundongos nude. Portanto, o pior prognóstico de pacientes com altos níveis de galectina-1 sugere um efeito cooperativo de galectina-1 na tumorigênese de BCR-ABL reforçando o conceito de que a galectina-1 é um forte candidato para intervenção terapêutica na LMC. / Galectin-1 (LGALS1) participates in different steps of neoplasia but its role in chronic myeloid leukemia (CML) is unknown. In this work, ectopic expression of wild-type but not kinase-deficient BCR-ABL in different hematopoietic cells resulted in LGALS1 upregulation. Tyrosine-kinase inhibition by imatinib mesylate reversed this effect. This result indicate that galectin-1 is modulated by tyrosine kinase activity. In CML patients, the elevated expression of LGALS1 was correlated with high BCR-ABL levels, disease progression and shorter survival time. Additionally, in nude mice, LGALS1-deficient K562 cells obtained by RNA interference were less efficient in tumor formation than control K562 cells. Therefore, the worst prognosis in patients bearing high LGALS1 levels suggests a cooperative role for galectin-1 in BCR-ABL-positive leukemia and support the concept that galectin-1 is a strong candidate for CML therapeutic intervention.

Bcr-Abl é a tirosina quinase (TK) responsável por causar a Leucemia Mielóide Crônica (LMC). Os últimos estudos de follow-up mostram que apenas 50% dos pacientes tratados com a segunda geração de inibidores de TK atinge a remissão completa, o que significa que metade desses pacientes necessita de um algo melhor do que está disponível. Wiskott Aldrich Syndrome Protein (WASP) é um gene essencial para o bom desenvolvimento e função das células hematopoiéticas. Ante esse contexto, decidimos investigar se WASP poderia ter algum papel ou relevância na LMC. Em conclusão, Bcr-Abl suprime a expressão WASP por um mecanismo epigenético. A re-expressão de WASP torna as células mais suscetíveis à apoptose em resposta ao Imatinib. Sugerimos que a recuperação da expressão WASP deve ser discutida como estratégia para a terapia da LMC. / Bcr-Abl is the tyrosine kinase (TK) responsible for causing Chronic Myeloid Leukemia (CML). This fusion protein up- and down-regulates several genes and pathways, producing a strong resistance to apoptosis and a blockage of cell maturation in the hematopoietic compartment. The last follow-up studies provided that only 50% of the patients treated with second generation achieve complete remission, what means that one-half of these patients needs something better. Wiskott Aldrich Syndrome Protein (WASP) is an essential gene for the proper development and function of the hematopoietic cells. In the light of this background, we decided to investigate if WASP could have some role or relevance in the CML context. In conclusion, Bcr-Abl suppresses WASP expression by an epigenetic mechanism. The re-expression of WASP makes the CML cells more susceptible to apoptosis and contribute to respond to Imatinib. We suggest that recovery of WASP expression should be discussed as a new and additional strategy for CML therapy.

Sabe-se que TRAIL é capaz de matar células tumorais de forma seletiva e que TRAIL tem sua expressão reduzida em diversos tumores, porém pouco se sabe sobre os mecanismos responsáveis pela sua inibição. Tendo em vista que a expressão de TRAIL pode ser regulada pelo Ácido Retinóico; que PRAME é capaz de inibir a via do ácido retinóico através da proteína EZH2 e que nós observamos anteriormente que a expressão de TRAIL esta diminuída em pacientes com LMC, nós decidimos investigar a associação entre PRAME, EZH2 e TRAIL na LMC. Nós demonstramos que PRAME, mas não EZH2, tem sua expressão aumentada em células BCR-ABL+ e sua expressão está associada com a progressão da LMC. Alem disto, existe uma correlação positiva entre PRAME e BCR-ABL e negativa entre PRAME e TRAIL nestes pacientes. A inibição da expressão de PRAME ou EZH2 por RNAi induziu um aumento da expressão de TRAIL. Estes dados revelam um novo mecanismo de regulação responsável por diminuir a expressão de TRAIL, e geram novos possíveis alvos para a terapia da LMC e, possivelmente, também para outros tumores. / TRAIL was shown to selectively kill tumor cells. Not surprisingly, TRAIL is down-regulated in a variety of tumor cells, but the mechanism responsible for TRAIL inhibition remains elusive. Because TRAIL can be regulate by retinoic acid; PRAME was shown to inhibit transcription of retinoic acid receptor target genes through the polycomb protein EZH2; and we have found that TRAIL is inversely correlated with BCR-ABL in CML patients, we decided to investigate the association of PRAME, EZH2 and TRAIL in BCR-ABL-positive leukemia. Here, we demonstrate that PRAME, but not EZH2, is up-regulated in BCR-ABL cells and is associated with the progression of disease in CML patients. In addition, PRAME expression is positively correlated with BCR-ABL and negatively with TRAIL in these patients. Importantly, knocking down of PRAME or EZH2 by RNA interference restores TRAIL expression. Our data reveal a novel regulatory mechanism responsible for lowering TRAIL expression and provide the basis of alternative targets for combined therapeutic strategies for CML.

Foram analisados os resultados retrospectivos do transplante de medula óssea alogênico em 100 pacientes portadores de leucemia mielóide crônica, divididos em dois grupos: Grupo I, de 49 pacientes que recebeu alta hospitalar após a pega medular, e grupo II, de 51 pacientes, que recebeu alta precocemente, antes da pega medular, para acompanhamento ambulatorial. Foram comparados os dias de ocupação de leitos hospitalares, a morbidade e a mortalidade entre os grupos de alta até o dia 100 pós transplante. Verificou-se que, no grupo de alta precoce, houve, significativamente, menos dias de ocupação de leitos hospitalares, sem aumento da morbidade e da mortalidade / We analyzed the results of a retrospective study of 100 patients with chronic myelogenous leukemia submitted to allogeneic stem cell transplantation in one of two settings: Group I, with 49 patients, transplanted in the traditional inpatient and group II, with 51 patients, in partial outpatient. We compared the median number of days spent in hospital, morbidity and mortality within 100 after bone marrow transplantation. We concluded that there was a significant reduction in the median of hospital length of stay in the partial outpatient group, without increasing morbidity and mortality

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-10-26T10:38:27Z No. of bitstreams: 2 Tese - Adriana do Prado Barbosa - 2015.pdf: 900945 bytes, checksum: c7a5ed7dcaeb54e2967829169a9de269 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-26T13:18:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Adriana do Prado Barbosa - 2015.pdf: 900945 bytes, checksum: c7a5ed7dcaeb54e2967829169a9de269 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-26T13:18:13Z (GMT). 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The concern was to optimize the adherence of CML patients, the hematology ambulatory at the Clinical Hospital of the Federal University of Goias (HC-UFG), led the authoress to create a film cartoon, as a pro-adhesion educational intervention model. To investigate the effectiveness of this new educational material, we used in 65 patients three adherence measures, two indirect (Morisky Test and Molecular Response [MR]) and direct (plasma dosage of IM), before and after the screening of film. In univariate analysis, from the Morisky Test, the film was striking, with increased adherent patients, which increased from 15 (23.1%) to 43 (66.1%). The results of MR showed an improvement trend after the movie, because the positive molecular response (major MR or complete MR) increased from 81.5% to 86.1%. Regarding the serum levels of IM, with daily doses of 400-800 mg IM, the premovie samples showed higher average than the post-movie (2473.16 ± 1049.55 ng/ml versus 1414.72 ± 715 73 ng/ml), with a variation coefficients interpatients of 43.4% and 50.6%, respectively. This high dispersion index found has been reported by other authors. By multivariate analysis, patients were divided into three groups. The first brought together compliant patients before and after the film with a good therapeutic response (major MR) after the intervention. It was: patients over 53 years old, females, with associated diseases before and after the treatment of CML that use more than two drugs in addition to imatinib. The second group was marked by the change of not adherence pre to adherence post-film. Its features were younger than or equal to 53, the absence of other disease before the CML, the use of less than two drugs and complete molecular response after the film. In the third group, we observed patients without molecular response before and after the educational intervention and no medication adherence after the film. They had in common their age (less than or equal to 53 years), and drug discontinuation due to adverse reactions. The last represents the set of patients resistant to the educational film, drawing attention to the fact that only one pro-adhesion method may be insufficient for all individuals. It is concluded that medication adherence was higher among patients older than 53 years, the educational film is an effective proadhesion assistance and continuing education, if combined with another method, it could help maintain or enhance the benefits achieved in this work. / O tratamento da leucemia mielóide crônica (LMC) mudou radicalmente com o advento do mesilato de imatinibe (MI). Além da comodidade do uso oral, outros benefícios foram alcançados com o novo fármaco, como respostas terapêuticas mais rápidas e aumento da sobrevida, dando `a LMC características semelhantes `as de doenças crônicas. Neste cenário, surgiu outro desafio, a adesão medicamentosa, pois uma proporção significativa de pacientes deixa de ingerir a dose prescrita de imatinibe. A preocupação em otimizar a adesão dos pacientes com LMC, do Ambulatório de Hematologia do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás (HC-UFG), motivou a autora a criar um filme em desenho animado, como modelo de intervenção educativa pró-adesão. Para investigar a eficácia deste novo material educativo, empregou-se, em 65 pacientes, três medidas de adesão, duas indiretas (Teste de Morisky e Resposta Molecular [RM]) e uma direta (dosagem plasmática do MI), antes e depois da exibição do filme. Em análise univariada, pelo teste de Morisky, o filme foi impactante, com aumento dos pacientes aderentes, que passaram de 15 (23,1%) para 43 (66,1%). Os resultados da RM indicaram uma tendência de melhora após o filme, pois a resposta molecular positiva (RM maior ou RM completa) passou de 81,5% para 86,1%. Em relação `a dosagem sérica do MI, com doses diárias entre 400-800 mg de MI, as amostras pré-filme apresentaram média superior `as do pósfilme (2.473,16 ± 1.049,55 ng/ml versus 1.414,72 ± 715,73 ng/ml), com coeficientes de variação interpaciente de 43,4% e 50,6%, respectivamente. Este elevado índice de dispersão encontrado tem sido relatado por outros autores. Pela análise multivariada, os pacientes foram separados em três grupos. O primeiro, reuniu os pacientes aderentes antes e após o filme e com boa resposta terapêutica (RM maior) após a intervenção. Foram eles: os doentes com mais de 53 anos, do gênero feminino, com doenças associadas antes e após o tratamento da LMC e que usam mais de dois medicamentos além do imatinibe. O segundo grupo foi marcado pela mudança de não adesão pré para adesão pós-filme. Suas características foram idade menor ou igual a 53, ausência de outra doença antes da LMC, uso de menos de dois medicamentos e resposta molecular completa pós-filme. No terceiro grupo, observou-se pacientes sem resposta molecular antes e depois da intervenção educativa, bem como não adesão medicamentosa após o filme. Eles tinham em comum a idade, menor ou igual a 53 anos, e suspensão do medicamento por reação adversa. Estes últimos representam o conjunto de pacientes resistentes ao filme educacional, chamando atenção para o fato de que somente um método pró-adesão pode ser insuficiente para todos os indivíduos. Conclui-se que a adesão medicamentosa foi maior entre os pacientes maiores de 53 anos, que o filme educativo é uma intervenção pró-adesão eficaz e que a educação continuada, aliada a outro método, poderia ajudar a manter ou ampliar os benefícios conquistados neste trabalho.

Sabe-se que TRAIL é capaz de matar células tumorais de forma seletiva e que TRAIL tem sua expressão reduzida em diversos tumores, porém pouco se sabe sobre os mecanismos responsáveis pela sua inibição. Tendo em vista que a expressão de TRAIL pode ser regulada pelo Ácido Retinóico; que PRAME é capaz de inibir a via do ácido retinóico através da proteína EZH2 e que nós observamos anteriormente que a expressão de TRAIL esta diminuída em pacientes com LMC, nós decidimos investigar a associação entre PRAME, EZH2 e TRAIL na LMC. Nós demonstramos que PRAME, mas não EZH2, tem sua expressão aumentada em células BCR-ABL+ e sua expressão está associada com a progressão da LMC. Alem disto, existe uma correlação positiva entre PRAME e BCR-ABL e negativa entre PRAME e TRAIL nestes pacientes. A inibição da expressão de PRAME ou EZH2 por RNAi induziu um aumento da expressão de TRAIL. Estes dados revelam um novo mecanismo de regulação responsável por diminuir a expressão de TRAIL, e geram novos possíveis alvos para a terapia da LMC e, possivelmente, também para outros tumores. / TRAIL was shown to selectively kill tumor cells. Not surprisingly, TRAIL is down-regulated in a variety of tumor cells, but the mechanism responsible for TRAIL inhibition remains elusive. Because TRAIL can be regulate by retinoic acid; PRAME was shown to inhibit transcription of retinoic acid receptor target genes through the polycomb protein EZH2; and we have found that TRAIL is inversely correlated with BCR-ABL in CML patients, we decided to investigate the association of PRAME, EZH2 and TRAIL in BCR-ABL-positive leukemia. Here, we demonstrate that PRAME, but not EZH2, is up-regulated in BCR-ABL cells and is associated with the progression of disease in CML patients. In addition, PRAME expression is positively correlated with BCR-ABL and negatively with TRAIL in these patients. Importantly, knocking down of PRAME or EZH2 by RNA interference restores TRAIL expression. Our data reveal a novel regulatory mechanism responsible for lowering TRAIL expression and provide the basis of alternative targets for combined therapeutic strategies for CML.

Foram analisados os resultados retrospectivos do transplante de medula óssea alogênico em 100 pacientes portadores de leucemia mielóide crônica, divididos em dois grupos: Grupo I, de 49 pacientes que recebeu alta hospitalar após a pega medular, e grupo II, de 51 pacientes, que recebeu alta precocemente, antes da pega medular, para acompanhamento ambulatorial. Foram comparados os dias de ocupação de leitos hospitalares, a morbidade e a mortalidade entre os grupos de alta até o dia 100 pós transplante. Verificou-se que, no grupo de alta precoce, houve, significativamente, menos dias de ocupação de leitos hospitalares, sem aumento da morbidade e da mortalidade / We analyzed the results of a retrospective study of 100 patients with chronic myelogenous leukemia submitted to allogeneic stem cell transplantation in one of two settings: Group I, with 49 patients, transplanted in the traditional inpatient and group II, with 51 patients, in partial outpatient. We compared the median number of days spent in hospital, morbidity and mortality within 100 after bone marrow transplantation. We concluded that there was a significant reduction in the median of hospital length of stay in the partial outpatient group, without increasing morbidity and mortality