Les composés amphiphiles, N-[Iodures de 3-(diméthylamino) propyl]-perfluoroalcanes amides (Fn-AH3-AmI) et Na,Nb-Bis [Iodures de 3-(diméthylamino) propyl]- perfluoroalcanes diamides (Fn(AH3-AmI)2) ont étéobtenus à partir des (di)esters et de la N,N’-diméthyl-3-propylamine puis parquaternisation par l’iodure de méthyle.Le comportement des composés à une tête cationique Fn-AH3-AmI (n = 8,10, 12, 14) en milieu aqueux a été examiné en étudiant l’effet de latempérature T, d’électrolyte KI et d’éthanol, ainsi que l’effet de la longueur etde la nature chimique de la chaîne hydrophobe (perfluorée ouhydrocarbonée) sur les propriétés de surface et d’agrégation. Les composéshydrocarbonés forment des micelles. Micelles et vésicules coexistent dans lecas des homologues fluorés.Les propriétés tensioactives et agrégatives des bolaformes Fn(AH3-AmI)2 (n =6, 8, 10) ont été examinées en fonction de T, KI et de la structure de lachaîne hydrophobe. La formation des agrégats est supposée être associée àla capacité de repliement des bolaformes.Les composés Fn-AH3-AmI et Fn(AH3-AmI)2 sont impliqués dans laformulation de vésicules dont la taille est examinée en fonction de la teneuren co-lipide 1,2-dioléoyl-sn-glycéro-3-phosphatidyléthanolamine (DOPE). / Amphiphilic compounds N,N,N-trimethyl-(3-N-perfluoroalkylamidopropyl)ammonium iodide (Fn-AH3-AmI) and N1,N12-Bis [3-(trimethylammonium)propyl iodide]- perfluoroalcane diamide (Fn(AH3-AmI)2) are obtained byreaction between (di)esters and 3-N,N-dimethyl-1-propylamine and thenquaternization by methyl iodide.The aqueous solution behaviour of one head compounds Fn-AH3-AmI interms of surface and aggregative properties is examined as a function oftemperature T, KI amount and ethanol, and also by varying their tail length(n = 8, 10, 12, 14) and their hydrocarbon or perfluorocarbon type.Hydrocarbon compounds associate into micelles. Micelles and vesicles cancoexist in the case of the perfluorocarbon homologues.The surface and aggregatives properties of the bolaforms Fn(AH3-AmI)2 (n =6, 8, 10) are also examinated as a function of T, KI and the hydrophobic tailstructure. The aggregate formation is thought to be attributed to the bendingability of the bolaforms.Fn-AH3-AmI and Fn(AH3-AmI)2 compounds are involved in the formulationof vesicles whose size is examinated as a function of the co-lipid 1,2-dioleoylsn-glycero-3-phosphatidylethanolamine (DOPE) amount.

Le développent des biothérapies a connu un essor sans précédent ces dernières années, permettant l'émergence de nombreuses solutions thérapeutiques répondant à de multiples défis en santé humaine et animale afin de lutter contre des maladies héréditaires ou acquises. Parmi ces stratégies, le transfert de gênes revêt un intérêttout particulier, permettant à la fois de réparer des cellules défectueuses en leur apportant une copie saine du gène, ou bien d'activer efficacement le système immunitaire par l'expression d'un antigène d'intérêt thérapeutique. Néanmoins, malgré le développement de nombreux outils de thérapie génique ou d'immunothérapie, de nombreuses limitations persistent à ce jour. Au cours de cette thèse, les résultats obtenus ont permis le développement et l'optimisation d'outils afin d'outrepasser ces limites. Tout d'abord, nous avons pu élucider les mécanismes d'actions du copolymère à blocs 704, une nouvelle classe de vecteurs qui permet d'induire une réponse vaccinale optimale en délivrant de manière directe des acides nucléiques au sein des cellules musculaires et en stimulant des récepteurs à ADN intracellulaires. De plus, ces travaux ont permis de démontrer qu'une nouvelle classe de molécules adjuvantes, les Iipoaminoglycosides, permet de stimuler efficacement le système immunitaire en plus de conduire à la régression de la croissance de tumeurs mammaires murines. Enfin, ces résultats ont pu montrer l'importance de l'assemblage supramoléculaire des lipoplexes sur l'efficacité de transfection afin de développer un vecteur universel pour la délivrance de différentes classes d'acides nucléiques. Dès lors, l'optimisation de la délivrance de macromolécules au sein de cellules et la compréhension de l'interaction entre le système immunitaire! le vecteur I les acides nucléiques nous ont permis d'établir des stratégies afin de développer des formulations spécifiques à chaque application biothérapeutique. / The development 01 biotherapies experienced an unprecedented growth in recent years, allowing the emergence al many therapeutic solutions to many challenges in human and animal health in arder to fight against hereditary or acquired diseases. Among these strategies, gene transfer is of particular interest, making it possible either to repair defective cells by providing them a healthy copy 01 the gene, ar to effectively activate the immune system by expressing an antigen of therapeutic interest. Nevertheless, despite the development of numerous tools for gene therapy or immunotherapy, many limitations persist. During this thesis, the results obtained allowed the development and optimization of tools in order to go beyond these limits. First, we have been able to elucidate the mechanism of action 01 the block copolymer 704, a new class 01 vectors which allows to induce an optimal vaccine response by directly delivering nucleic acids into muscle cells and by stimulating intracellular DNA sensors. Moreover, this work has demonstrated that a new class of adjuvant molecules, lipoaminoglycosides, can stimulate efficiently the immune system in addition to lead to the regression of murine mammary tumors growth. Finally, these results showed the importance of the supramolecular assembly of lipoplexes on the \ransfection efficiency in order to develop a universal vector for the delivery of different classes of nucleic acids. Therefore, the optimization of macromolecules delivery within cells and the understanding of the interaction between the immune system i vector I nucleic acids allowed us to establish strategies in order to develop specific formulations tor each biotherapeutic applications.

Mémoire de DES : Biologie médicale : Université de Nantes : 2005. Thèse d'exercice : Pharmacie : Université de Nantes : 2005. / Bibliogr. f. 102-106 [ 72 réf.].

Thèse d'exercice : Médecine. Biologie médicale : Université de Nantes : 2005. / Bibliogr. [9] f. [54 réf.].

Thèse de doctorat : Sciences agronomiques : INPL : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse de doctorat : Chimie : Evry-Val d'Essonne : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre.

Introduction: Le MEHP est un métabolite de phtalate impliqué dans le développement de l'obésité. Les acyl-CoA synthétases longues chaînes (ACSL) jouent un rôle essentiel dans la régulation du métabolisme des acides gras. Notre étude s'est intéressée à l'effet du MEHP sur les ACSL4 dans les cellules musculaires squelettiques. Objectifs: Déterminer dans les myoblastes C2C12, l'effet du MEHP sur les variations d'expression des ACSL4 (ARNm et protéines) et l'accumulation des lipides. Méthodes: Dans les myoblastes C2C12 exposés au MEHP, l'expression des ACSL4 a été déterminée par RT-qPCR et Western blots. La quantification des lipides a été évaluée par fluorimétrie après extraction organique. Résultats: Le MEHP entraîne une tendance à l'augmentation dose dépendante des niveaux des ARNm ACSL4, une tendance à la diminution des niveaux des protéines ACSL4 mais n'entraîne pas d'augmentation des concentrations de lipides dans les C2C12. Conclusion / Importance: Nos résultats pourraient être utiles dans la recherche de solutions à l'obésité liée à l'exposition au MEHP.

Le rétrécissement aortique calcifié (RAC), pathologie valvulaire la plus fréquente, est une maladie caractérisée par une minéralisation progressive de la valve. À l’heure actuelle, il n’existe aucun traitement médical efficace pouvant empêcher ou ralentir sa progression. Le remplacement valvulaire aortique (RVA) est le seul traitement disponible du RAC. Par conséquent, l'identification des principaux facteurs de risque ainsi que les processus moléculaires impliqués dans la pathogenèse du RAC représentent une nécessité primordiale pour développer des approches pharmacologiques. Le RAC est une maladie progressive caractérisée par une calcification ectopique des feuillets valvulaires. Pendant plusieurs années, elle était considérée comme une atteinte dégénérative liée au vieillissement. Néanmoins, de nombreuses études récentes ont révélé qu’il s’agit d’une maladie active. En effet, les premiers stades de cette maladie, nommée sclérose aortique, partagent plusieurs similitudes avec l’athérosclérose en termes de facteurs de risque associés. Il s’agit donc d’une pathologie complexe mettant en jeu plusieurs processus pathologiques, notamment la rétention des lipides et leur oxydation, l’inflammation chronique, le remodelage fibrotique et la calcification de la VA. À cet égard, l'identification des principaux facteurs de risque ainsi que les processus moléculaires par lesquelles les lipides favorisent la minéralisation de la valve aortique (VA) représentent une nécessité primordiale pour comprendre le mécanisme physiopathologique du RAC. Cela pourrait également aider à identifier de nouvelles cibles thérapeutiques et ouvre d’autres perspectives de recherche afin de développer de nouvelles thérapies médicales. Les objectifs généraux de mon projet de doctorat sont : (1) Étudier le rôle des lipides, en particulier l’axe lipoprotéine Lp (a)-autotaxine (ATX), dans la progression et le développement du RAC; (2) Élucider le mécanisme d’action par lequel l’acide lysophosphatidique (LPA), le produit final de l’enzyme ATX, favorise l’inflammation et la réponse ostéogénique des cellules interstitielles de la valve aortique (CIVs); (3) Déterminer le rôle de l’axe ATX-LPA dans un modèle murin du RAC. / Calcific aortic valve disease (CAVD) is the most common valvular disease, which is characterized by a progressive mineralization of aortic valve. So far, there is no effective medical therapy able to stop or slow the natural course of this disease. Surgical aortic valve replacement is the only available treatments of severe symptomatic aortic stenosis. Therefore, identify the key factors as well as molecular processes involved in the pathogenesis of CAVD is crucial to develop efficient pharmaceutical approaches able to prevent or to slow the progression of aortic stenosis. CAVD is a progressive disease characterized by ectopic calcification of the aortic valve leaflets. It has long been considered as a degenerative process of the aortic valve linked to aging. However, a growing number of studies have revealed that this disease is an active process likely related to atherosclerosis. Therefore, CAVD seems to be a complex pathology involving several pathological processes, including lipid retention, oxidation, chronic inflammation, fibrotic remodeling and calcification. In this regard, assessment of the molecular process whereby lipids promote the mineralization of aortic valve is required to understand the pathophysiological mechanisms leading to CAVD. Furthermore, investigations are needed to identify therapeutic targets and to open novel therapeutic avenues for the treatment of CAVD. The general objectives of my PhD project are: (1) To determine the role of ATX in mediating lipid-induced mineralization of valve interstitial cells (VICs); (2) To understand the mechanisms and signaling pathways by which lysophosphatidic acid (LPA) promotes inflammation and the mineralization of the aortic valve; (3) To determine the role of ATX-LPA in a mouse model of CAVD.

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2012-2013. / Le récepteur activé par les proliférateurs de peroxysomes de type y (PPARy) est un puissant régulateur des gènes impliqués dans le métabolisme du tissu adipeux et l'adipogenèse. Son activation pharmacologique, par des ligands de type thiazolidinedione (TZD), diminue la résistance à l'insuline et est utilisée en clinique dans le traitement du diabète de Type 2. Les agonistes de PPARy exercent leurs effets bénéfiques en favorisant la séquestration des lipides et leur entreposage dans les tissus adipeux périphériques métaboliquement plus sûrs, en stimulant la production adipocytaire d'adipokines telles l'adiponectine et en réduisant l'infiltration de macrophages dans les réserves de graisses. En détournant les lipides des organes tels que le muscle squelettique et le foie, les TZD préviennent la lipotoxicité. Bien que l'élucidation des mécanismes par lesquels PPARy contrôle l'entreposage des lipides dans le tissu adipeux progresse, les connaissances en ce domaine demeurent imcomplètes. Les travaux décrits dans cette thèse montrent que les agonistes de PPARy favorisent l'entreposage des graisses en périphérie en modulant de façon dépôt-spécifique et coordonnée la lipase lipoprotéique et les protéines impliquées dans sa maturation, les transporteurs d'acides gras et les enzymes lipogènes. Les résultats présentés dans cette thèse mettent également en évidence le rôle de la cible de la rapamycine chez les mammifères (mTOR, mammalian target of rapamycin) dans le contrôle de la lipogenèse exercé par PPARy in vivo. Lorsque cette protéine au coeur d'un réseau de signalisation contrôlant le métabolisme cellulaire est inactivée, l'activité transcriptionnelle de PPARy est significativement réduite et les TZD perdent leur capacité à stimuler l'entreposage des lipides circulants. Finalement, les études décrites dans cet ouvrage montrent que l'activation de PPARy peut à son tour influencer le sentier métabolique de mTOR en stimulant le catabolisme des acides aminés à chaîne ramifiée, l'un de ses principaux activateurs, dans les tissus adipeux blanc et brun. L'étude des interactions complexes entre ces deux systèmes a le potentiel de contribuer au développement de nouvelles avenues thérapeutiques pour prévenir et guérir l'obésité et le diabète.

L‘objectif général du présent travail est la conception et le développement d‘un procédé original de culture de microalgues pour la production à grande échelle d‘huiles végétales à faible coût pour le marché du biodiesel. Une procédure multicritères de sélection de souches a d‘abord été mise au point afin d‘identifier la souche la plus susceptible de répondre favorablement aux paramètres du procédé préalablement déterminés. Cette procédure permet d‘inclure un grand nombre de critères et de considérer l‘importance relative de chacun de ces critères dans le pointage final accordé aux souches présélectionnées. Elle peut aussi être transposée à d‘autres contextes techniques et géographiques pour la sélection de souches destinées à diverses applications commerciales. Par la suite, l‘évaluation de la croissance et de la productivité lipidique de la souche sélectionnée a été effectuée au laboratoire, en mode nutritionnel mixotrophe, en présence d‘un important coproduit de l‘industrie laitière : le perméat de lactosérum. Le profil lipidique de la souche privilégiée, ainsi que sa capacité à hydrolyser le lactose, mise au jour pour la première fois, ont permis de démontrer le potentiel du procédé. Une méthode de suivi de consommation et d‘hydrolyse du lactose contenu dans le perméat de lactosérum a été développée par l‘intermédiaire de la technologie « spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier » couplée à une sonde externe avec « prisme à réflectance totale atténuée » (FT-IR/ATR) ainsi que la conception de modèles univariés et multivariés de type « régression des moindres carrés partiels (PLS) ». Ce type de modèle est plus précis que ceux déjà existants pour le suivi des sucres dissous par la méthode infrarouge car l'utilisation de régressions PLS permet de tenir compte du phénomène d‘additivité des spectres lorsque différents analytes pouvant absorber dans une même région du spectre sont présents dans la solution. De plus la méthode développée permet d‘envisager un suivi in situ de la consommation des sucres dans une culture de microorganismes à l‘échelle industrielle. La méthode des surfaces de réponse (RSM) a ensuite été utilisée afin d‘optimiser les conditions de pH et de densité de biomasse permettant de provoquer une accumulation de lipides à l‘intérieur de cultures de microalgues carencées en azote. Des modèles prédictifs ont été construits pour trois souches différentes et ce en modes nutritifs photoautotrophe et hétérotrophe. Ces travaux ont permis de démontrer l‘existence d‘une interaction entre ces deux facteurs. De plus, certaines différences spécifiques ont pu être mises en évidence en comparant les réponses entre les souches. À la lumière des résultats obtenus, certains paramètres d‘optimisation devront être considérés dans le cadre d‘un procédé de production de biomasse microalgale oléagineuse en deux phases; la première phase permettant d‘obtenir une productivité en biomasse maximale par une stratégie d‘augmentation du taux d‘hydrolyse du lactose; la seconde phase permettant une accumulation de lipides grâce à l‘imposition de conditions environnementales spécifiques. L‘augmentation des connaissances disponibles sur les microalgues ainsi que l‘amélioration et la standardisation des techniques de génie génétique nous permettront d‘aborder ces problématiques d‘un point de vue différent dans le futur.