La cirrhose et le carcinome hépatocellulaire liés au virus de l’hépatite C (HCV) sont des indications majeures de transplantation hépatique. La réinfection du greffon par le HCV est systématique et sans moyen de prévention. Les mécanismes par lesquels le virus échappe au système immunitaire afin de réinfecter le greffon sont mal connus. Ce travail de thèse a permis d’identifier de nouveaux mécanismes et des déterminants clés impliqués dans la persistance virale. Nous avons identifié que l’utilisation des facteurs d’entrée cellulaires par le HCV évolue simultanément avec ses capacités d’échappement aux nAbs, et démontré qu’apo E est un composant clé des lipoparticules virales intervenant dans la persistance du HCV. L’identification de nouveaux facteurs viraux et cellulaires impliqués dans l’échappement viral, apporte de nouvelles perspectives dans le développement de nouvelles stratégies de prévention de la réinfection ainsi que dans le développement d’un vaccin prophylactique. / Hepatitis C virus (HCV)-cirrhosis and HCC are leading indications for liver transplantation. Reinfection of the liver graft is universal and no way of prevention exists. Mechanisms employed by HCV to evade the immune system and reinfect the liver graft are unknown. This thesis work identified new mechanisms and key determinants involved in viral persistence. Weidentified a novel clinically and therapeutically important mechanism of viral evasion, where coevolution simultaneously occurs between cellular entry factor use and escape from neutralization. We also discovered that virus-apoE interaction is unique mechanism of viral evasion from neutralizing antibodies. Identification of new viral and host factors involved in viral escape paves the way in the development of new prevention strategies and prophylactic vaccine.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-02T12:48:58Z No. of bitstreams: 1 Eduardo Francisco dos Santos.pdf: 2436012 bytes, checksum: 8784b2b8c5c7dd9377e3933416f27c87 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T12:48:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eduardo Francisco dos Santos.pdf: 2436012 bytes, checksum: 8784b2b8c5c7dd9377e3933416f27c87 (MD5) Previous issue date: 2012-03-23 / The biosurfactants are amphiphilic biomolecules produced by micro-organisms and are capable of reducing the surface tension between liquids, less toxic, biodegradable, exhibit antimicrobial activity and are used in pharmaceutical and cosmetic products. This study evaluated the ability to produce biosurfactant using low-cost organic substrate by Streptomyces spp. isolated from lichens in the Amazon region. The used mediums for selection were: peptone and glycerol (medium A) and peptone /yeast extract and Caryocar brasiliense oil (medium B). Four other medium were used to select the best agro-industrial residues: cornsteep liquor and soybean oil (medium I), cornsteep liquor, soybean waste frying oil (medium II), peptone and the waste oil motor (medium III), peptone and soybean frying waste oil (medium IV) were evaluated for the production of biosurfactant by microrganisms tests. The biosurfactant production was followed by measuring the surface tension and emulsification index. Two 24 full factorial design were carried out to verify the effects and interations of pH, temperature, relationship between medium volume and Erlenmeyer volume (RVME) and agitation, cornsteep liquor, waste frying soybean oil and inoculum concentration on maximum variation of ST, EI and yield. The biosurfactant was concentrated, isolated and characterized by Infrared Spectroscopy Fourier Transform (FT-IR) and gas chromatography (GC). Ten strains of Streptomyces spp. were selected and among the best biosurfactant producer was the Streptomyces sp. DPUA1566. The medium II, at 28 ° C, pH 7.0, 150 rpm, 4% inoculum concentration and RVME of 90% were designated as optimal conditions for the biosurfactant production. The biosurfactant showed stability when submitted at 90°C and thermal (4–120°C), pH (6–12) and tolerance under high salt concentrations (2–12%). The biosurfactant showed a yield of 3.11 g/L, critical micelar concentration (CMC) of 0.08%, and reducing the superficial tension of the water from 72 to 28.77 mN/m. Biosurfactant showed 85% protein and15% lipids. The fatty acid composition revealed the presence of C16:0 - 4.9% (palmitic), C16:1 - 1.1% (palmitoleic), C18:0 - 4.0% (estearic), C18:1 - 80.0% (oleic) and C18:2 - 10.0% (linoleic acid). The biosurfactant was characterized as a lipoprotein called Bioelan. The biosurfactant did not show toxicity against Artemia salina, Lactuca sativa L. and Brassica oleracea L.. The evaluation of the antimicrobial activity of these compounds showed MIC ranging from 15 mg/mL to 60 mg/mL and CBM of 30 mg/mL against multiresistant strains Staphylocossus aureus isolates of buffalo mastitis from Alagoas state. The biosurfactant produced by Streptomyces sp. DPUA1566 grown in culture medium of cost low represents a new stable surfactant, belonging to the lipoproteins group, with potential properties for use by pharmaceutical, cosmetic, food and veterinary productions. / Os biossurfactantes são biomoléculas anfifílicas produzidas por micro-organismos e são capazes de diminuir a tensão superficial entre líquidos, pouco tóxicos, biodegradáveis, apresentam atividade antimicrobiana e são aplicados em produtos farmacêuticos e cosméticos. Foi avaliada a capacidade de produção de biossurfactante por quarenta e um Streptomyces spp. da coleção DPUA isolados da região Amazônica utilizando substratos orgânicos agroindustriais de baixo custo. Os micro-organismos foram cultivados em diferentes meios para avaliação da produção de biossurfactante. Os meios utilizados na seleção foram: meio A (peptona e glicerol) e meio B (peptona/extrato de levedura e óleo de Caryocar brasiliense). Outros quatro meios foram utilizados para selecionar os melhores resíduos agroindústriais: meio I (milhocina e óleo de soja), meio II (milhocina e óleo de soja residual de frituras), meio III (peptona e óleo de motor residual), meio IV (peptona e óleo de soja residual de frituras). A produção do biossurfactante foi verificada pela redução da tensão superficial (TS) e os valores do índice de emulsificação (IE) do biossurfactante bruto. Dois planejamentos fatoriais 24 foram realizados para verificar os efeitos e interações do pH, temperatura, agitação, relação do volume do meio e do volume do Erlernmeyer (RVME) concentração de milhocina, óleo de soja residual de frituras e inóculo sobre as variáveis resposta da TS, IE e rendimento em biossurfactante. O biossurfactante foi concentrado, isolado e caracterizado por espectroscopia de infravermelho transformada de Fourier e cromatografia gasosa. Dos 41 isolados de Streptomyces spp. 24,39% (dez) foram selecionadas e entre elas a melhor produtora de biossurfactante foi o Streptomyces sp. DPUA1566. O meio de cultivo II, temperatura de 28°C, pH 7,0, agitação de 150 rpm, 4% de inóculo e RVME de 90% foram designadas como condições ótimas para a produção de biossurfactante. O biossurfactante apresentou estabilidade durante a exposição a altas temperaturas, salinidade de até 12% e diferentes valores de pH. O biossurfactante apresentou um rendimento de 3,11 g/L, uma concentração micelar crítica (CMC) de 0,08% e reduziu a tensão superficial da água de 72 para 28,77 mN/m. O biossurfactante apresentou 84% de proteínas, 15% de lipídeos e uma composição de ácidos graxos apresentando 4,1% de ácido palmítico (C:16-0), 1,4% de ácido palmitoléico (C:16-1), 4,1% ácido esteárico (C:18-0), 80% de ácido oleico (C:18-1) e 10% de ácido linoleico (C:18-2) e foi caracterizado como uma lipoproteína e denominada de Bioelan. Nos testes de atividade antimicrobiana o biossurfactante apresentou uma concentração inibitória mínima (CIM) variando de 15 mg/mL a 60 mg/mL e uma CBM de 30 mg/mL frente as estirpes de Staphylococcus aureus multirresistentes isolados de mastite bubalina do Estado de Alagoas e não apresentou toxicidade frente à Artemia salina, Lactuca sativa L. e Brassica oleracea L. Dessa forma, o Bioelan produzido por Streptomyces sp. DPUA1566, cultivada em meio de baixo custo representa um novo biossurfactante estável, pertencente ao grupo das lipoproteínas com propriedades potenciais para aplicação pelas indústrias farmacêuticas, cosméticos, alimentos e de produtos veterinários.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:20:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Astrid Camelo Palmeira.pdf: 967093 bytes, checksum: 14cb5ee586695a1aff494ac46397cd57 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Objective: Investigate the relation between serum levels of lipoprotein (a) [Lp (a)] with cardiovascular risk factors in overweight or obese children and adolescents. Material and Methods: Article 1 - A systematic review was performed, researching studies from 2001 to 2011 in the databases Science Direct, PubMed / Medline, LILACS and Cochrane Library. Article 2 - Was directed a cross-sectional study from July 2011 to May 2012, with 165 overweight or obese children and adolescents, attended at the Childhood Obesity Center in Campina Grande-PB. The association and comparison between Lp (a) and the study variables was performed using the chi-square test and analysis of variance. Statistical analysis was performed with SPSS version 17.0, considering a confidence interval of 95%. Results: In the review was observed a positive correlation between: Lp (a) and LDL cholesterol, total cholesterol and apolipoprotein B. In the second article, Lp (a) was altered in 40.0% of patients and its mean in the sample was 29.7 (± 28.1) mg / dL, and being associated with insulin (p = 0.026) and low HDL cholesterol (p = 0.049). The Lp (a) mean in relation to the risk factors analyzed was higher in children. Conclusion: The Lp (a) was associated with some cardiovascular risk factors, emphasizing the importance of analyze this serum levels in this population in order to contribute to the prevention of cardiovascular disease, as well as public health by reducing unnecessary government spending in this segment. / Objetivos: Investigar a relação dos níveis séricos de lipoproteína (a) [Lp(a)] com os fatores de risco cardiovascular, em crianças e adolescentes com sobrepeso ou obesidade. Material e Métodos: Artigo 1 - Foi realizada uma revisão sistemática, sendo rastreados estudos de 2001 a 2011, nas bases de dados Science Direct, PubMed/Medline, LILACS e Biblioteca Cochrane. Artigo 2 - Foi realizado um estudo transversal, de julho de 2011 a maio de 2012, com 165 crianças e adolescentes com sobrepeso ou obesidade, atendidos no Centro de Obesidade Infantil (COI), no município de Campina Grande-PB. A associação e comparação entre a Lp(a) e as variáveis do estudo foi realizada por meio do teste de qui-quadrado e análise de variância. A análise estatística foi realizada no SPSS versão 17.0, considerando um intervalo de confiança de 95%. Resultados: Na revisão foi observada correlação positiva entre: Lp(a) e colesterol LDL, colesterol total e apolipoproteína B. No segundo artigo, a Lp(a) esteve alterada em 40,0% dos pacientes, sendo o seu valor médio na amostra de 29,7 (± 28,1) mg/dL, estando associada a insulina (p=0,026) e ao colesterol HDL baixo (p=0,049). A média da Lp(a), em relação aos fatores de risco analisados, esteve maior nas crianças. Conclusão: A Lp(a) esteve associada a alguns fatores de risco cardiovascular, destacando-se a importância da análise dos seus níveis séricos na população em quepstão, a fim de contribuir para a prevenção das doenças cardiovasculares, bem como com a saúde pública ao reduzir gastos desnecessários do governo nesse segmento.

O presente trabalho tem como objetivo avaliar se o complexo Európio- Clorotetraciclina (EuCTc) ou o corante Tioflavina T (ThT) podem atuar como biossensores precisos e eficientes de colesterol numa fração específica, através de procedimentos simples. Para isso estudaram-se as propriedades ópticas do complexo EuCTc e ThT na presença da Lipoproteína de Baixa Densidade (LDL) em seu estado nativo e em seu estado oxidado. O primeiro estudo realizado verificou a melhor razão molar entre o Európio e a Clorotetraciclina, em seguida verificou-se a influência da diálise da LDL na emissão do complexo EuCTc, para obtenção de um protocolo para quantificação da concentração da LDL. Foram traçadas as curvas de calibração da emissão do complexo EuCTc com várias concentrações da LDL nativa, LDL oxidada com íons de Cobre e LDL oxidada com íons de Ferro. Em seguida obteve-se o tempo de vida do íon Európio no complexo EuCTc na presença de diferentes concentrações de LDL nativa e LDL oxidada por íons de Cobre. Na segunda parte do trabalho estudou-se a emissão do corante Tioflavina T na presença da LDL nativa e LDL oxidada. Na terceira etapa as propriedades ópticas dos biossensores EuCTc e ThT foram investigadas na presença do plasma sanguíneo e foram comparadas às emissões do complexo EuCTc e o corante ThT com a LDL ultracentrifugada, para verificar a possibilidade de quantificar a LDL diretamente no plasma sanguíneo. Na última etapa do trabalho desenvolveu-se uma nova metodologia para oxidar a partícula de LDL a partir da irradiação com laser de pulsos ultracurtos, a fim de produzir uma oxidação branda da partícula de LDL e controlada. / The present study aims at assessing the complex Europium-Clorotetracycline (EuCTc) or the dye Thioflavin T (ThT) can act as biosensors accurate and efficient in a specific fraction of cholesterol through simple procedures.For this purpose, it was studied the optical properties of Europium- Chlortetracycline (EuCTc) complex and the thioflavin T (ThT) dye in the presence of low-density lipoprotein (LDL) in native state and in oxidized state in vitro. First study realized it was verified the influence of dialysis in the emission of complex EuCTc in the presence of LDL, thereby producing a protocol for use of the complex to obtain the concentration of LDL. It was obtained the calibration curves of the complex with various concentrations of native LDL, the oxidized LDL with copper ions and oxidized LDL with iron ions. It was also obtained from the calibration curve of the emission of the complex in the presence of calcium interferent ion with the concentration found in blood plasma with the oxidized LDL with copper ions. It was obtained the lifetime of the europium ion in the complex in the presence of different concentrations of Native LDL and oxidized LDL by copper ions. In the second part of the work it was studied the emission of the dye thioflavin T in the presence of native LDL and oxidized LDL. In the third part the optical properties of biosensors EuCTc and ThT were investigated in the presence of blood plasma and compared to the emission of the complex EuCTc and the dye ThT with LDL ultracentrifugated to verify the possibility of quantifying directly LDL in blood plasma.In the final part of this work it has developed a new methodology for the LDL particles oxidation from the irradiation of ultrashort laser pulses in order to produce mild and controlled oxidation of the LDL particle.

Quatro potros, filhos do mesmo pai, com idade média de 18 meses e peso aproximado de 270 kg, receberam dieta composta de feno de Coast-Cross (Cynodon dactylon L. Pers.) e concentrado experimental, ao qual foram adicionados diferentes tipos de óleo vegetal (soja, canola, palma ou linhaça), para analisar o efeito sobre a aceitabilidade, digestibilidade aparente da Matéria Seca (MS), Matéria Orgânica (MO), Proteína Bruta (PB), Extrato Etéreo (EE), Fibra Solúvel em Detergente Neutro (FDN), Fibra Solúvel em Detergente Ácido (FDA), valores plasmáticos de Colesterol, VLDL, LDL, HDL e Triglicérides. Foi utilizada metodologia de coleta total de fezes e coleta de sangue na veia jugular às 7 horas, em jejum. O delineamento experimental foi em Quadrado Latino (4 animais, 4 tratamentos, 4 repetições). A inclusão dos óleos não afetou significativamente (p<0,05) a aceitabilidade e a digestibilidade da MS, MO, PB, EE, FDN e FDA. Também não foram alterados (p<0,05) os valores plasmáticos de colesterol, LDL, VLDL, HDL e triglicérides, indicando que os óleos de soja, canola, palma e linhaça podem ser igualmente utilizados na dieta de eqüinos. / Four foals, same father sons, aged 18 months and average weight 320 kg, were fed a diet composed of Coast-cross hay (Cynodon dactylon L. Pers.) and concentrate, to analyze the effect of adding different types of vegetable oil (soybean, canola, palm and linseed) on acceptability, apparent digestibility of Dry Matter (DM), Crude Original Matter (CM), Crude Protein (CP), Ethereal Extract (EE), Neutral Detergent Soluble Fiber (NDF), Acid Detergent Soluble Fiber (ADF) and on cholesterol, VLDL, LDL, HDL and triglycerides plasma levels. Total fecal output collect methodology was used. Blood samples were collected at 7:00 a.m. during ingestion and cooled until sending to the laboratory. Experimental delineation was Latin Square (4 animals, 4 repetitions, 4 treatments). The inclusion of different vegetable oils in diet did not affect (p<0,05) acceptability nor DM, CM, CP, G, NDF and ADF digestibility. Cholesterol, VLDL, LDL, HDL and triglycerides plasma levels were not affected (p<0,05).

A LDL contitui-se de uma fase lipídica, uma esfera composta principalmente de um núcleo de colesterol esterificado envolto por uma camada de fosfolipídeos. A fase lipídica junta-se uma única molécula protéica, a polipoproteina B (apo B). A LDL é removida da circulação por mediação de receptores específicos, os receptores B. E, que reconhecem não só a apo B da LDL mas também a apo E, que está presente em outras lipoproteínas. Estudou-se neste trabalho a influencia da apo B no metabolismo da LDL, através de um modelo de emulsões semelhantes à fase lipídica da LDL, constituídas de oleato de colesterol (29%), fosfatidilcolina (69%) e trioleina (2%), preparadas por sonicação, seguida de ultracentrifugação. As emulsões, com seus componentes lipídicos marcados isotopicamente, foram associadas à apo B e injetadas no rato, determinando-se sua remoção plasmática e captação pelos diversos órgãos do animal. Os resultados foram comparados com o metabolismo da emulsão sem associação da apo B a sua estrutura e com o da LDL natural. Verificou-se que a presença de apo B retardou a remoção plasmática das partículas da emulsão. Por outro lado, o oleato de colesterol da emulsão com apo B foi removido do compartimento plasmático numa taxa semelhante à da LDL natural, o que demonstra a adequação do modelo utilizado à situação fisiológica. Tanto as emulsões quanto a LDL natural foram captadas principalmente pelo fígado. Entretanto, a captação hepática da emulsão sem apo B foi maior a da emulsão com apo B e a da LDL. A incubação das emulsões com HDL do plasma de rato mostrou que a emulsão sem apo B adquiriu mais apo E que a emulsão com apo B. Portanto, essas diferenças de comportamento metabólico provavelmente se devem à maior afinidade dos receptores B, E hepáticos por partículas que contem mais apo E, em comparação às que contêm a apo B. O aumento da atividade dos receptores B, E, induzido pelo tratamento com 17 &#945;-etinil estradiol, resultou no aumento da cinética plasmática das duas emulsões. Porém, à taxa de remoção plasmática da emulsão sem apo B também foi maior no grupo tratado com o estrógeno. Esses dados indicam que as emulsões com apo B associada a sua estrutura apresentam comportamento metabólico muito semelhante ao da LDL. Portanto, o modelo das emulsões análogas à LDL parece ser um instrumento eficiente no estudo do metabolismo daquela lipoproteína. / The effects of apolipoprotein B (apo B) on the metabolism of emulsions constituted of cholesteryl oleate (29%), phosphatidycholine (69%) and triolein (2%) were studied in rats. After intra-arterial injection of the radiolabelled emulsions, plasma removal of the emulsions was reduced in presence of apo B. On the other hand, the cholesteryl ester moiety of the apob B emulsion was removed at the same rate as native LDL. Emulsions and LDL were taken up mainly by the liver 24 h after the injection. However, the hepatic uptake of the apo B emulsion was similar to LDL and lower than that of the apo B-free emulsion. These differences in metabolic behaviour were probably due to the lower hepatic B, E, receptor affinity to apo B contained in the emulsions associated to apo B and in LDL, compared to the apo B-free emulsions. The latter, as confirmed in the in vitro experiments, is capable of adsorbing more apo E, and this apolipoprotein has higher affinity for the receptor. Enhanced receptor activity induced by pre-treatment of the rats with 17 &#945;-ehymylestradiol resulted in augmented plasma removal of both emulsions but nonetheless the cholesteryl ester plasma removal of the apo B-containing particles was still lower, compared to that of the apo B-free emulsion. These data indicate that apo B-containing emulsion exhibits metabolic behaviour similar to that of LDL, and this emulsion can be an adequate tool to test LDL metabolism.

Emulsões artificiais sem proteína simulando quilomicrons e remanescentes de quilomícron foram preparadas por sonicalcação de trioleína, lecitina, colesteril oleato e colesterol em solução aquosa. A seguir foram ultracentrifugadas em gradiente descontínuo de densidade. As emulsões, marcadas com 3H-trioleína e 14C-colesteril oleato foram injetadas via intra-arterial em ratos controle e em ratos tratados com Triton WR1339, sulfato de protamina e heparina, medindo-se a seguir a remoção plasmática do colesteril-ester e dos triglicérides, durante dez minutos. O Triton WR 1339 e a protamina inibiram a lipólise dos quilomícrons artificiais, diminuindo a remoção destas partículas do plasma. O Triton WR 1339 mostrou ser mais efetivo que a protamina nestes efeitos. Por outro lado, a heparina promoveu uma lipólise rápida e brusca nos quilomícrons artificiais, assim como uma aceleração na remoção destas partículas do plasma. Em contraste flagrante com esses resultados, o metabolismo dos remanescentes de quilomícron não foi consideravelmente afetado pelo tratamento com Triton e heparina. Estas experiências indicam que as emulsões artificiais reproduzem o comportamento metabólico dos quilomícrons e remanescentes de quilomícron naturais, em condições em que a atividade da lipase lipoproteica esteja alterada. / Protein-free emulsions models of chylomicrons and chylomicron remnants were prepared by sonicating triolein, lecithin., cholesteryl oleate and cholesterol in aqueous saline media, followed by ultracentrifugation in density gradient solution. The 3H-triolein and 14C-cholesteryl oleate labeled emulsions were injected into the carotid artery of control rats and rats treated with Triton WR 1339, protamine sulphate and heparin. Plasma removal of both labels was measured during ten minutes in two minutes intervals. Triton WR 1339 and protamine sulphate strongly inhibited lipolysis of chylomicron-like emulsions leading to delayed removal of the particles from blood. Triton WR 1339 de appeared to be more effective than protamine to elicit these effects. On the other hand, heparin produced instantaneous lipolysis of the chylomicron-like particles markedly enhancing its removal from plasma. Contrarily, chylomicron remnant-like emulsions were not considerably affected either by Triton WR 1339 or by heparin treatment. The above described results obtained with artificial emulsions support current concepts on the metabolic behavior of natural chylomicron and remnant submitted to changes in lipoprotein lipase action.

Introdução A Síndrome Metabólica (SM) representa um conjunto de fatores que determinam maior risco para Doença Cardiovascular (DCV), devido principalmente à Resistência à Insulina (RI) e ao estado inflamatório promovido pelo tecido adiposo branco hipertrofiado. Nesse contexto, a condição de dislipidemia favorece o desenvolvimento da aterosclerose, devido a que maiores concentrações de lipoproteína de baixa densidade (LDL) no plasma podem propiciar modificações nessas partículas. Essas modificações podem ter origem oxidativa ou não oxidativa e impactar nas características aterogênicas da LDL. O ômega três tem mostrado efeitos hipolipemiantes e anti-inflamatórios, que podem reduzir o risco cardiovascular de indivíduos com SM. Objetivo:: avaliar o efeito da suplementação de 3g de &#969;-3 por um período de oito semanas sobre a concentração plasmática das partículas de LDL eletronegativas [LDL(-)] e seus anticorpos, assim como monitorar possíveis mudanças nas concentrações das subfrações das LDL. Metodologia: Foram incluídos 115 participantes de ambos os sexos, entre 30 e 74 anos, com SM, separados nos grupos de intervenção com &#969;-3 (n=58) e controle com &#969;-9 (n=57). Foram realizadas análises de perfil lipídico e por meio de ELISA foram avaliadas a concentração de LDL(-) e de antiLDL(-) no plasma dos participantes. O tamanho das subfrações de LDL foi realizado no sistema Lipoprint. O efeito do tempo e das intervenções foi testado por meio do programa SPSS versão 20.0, adotando-se o concentração de significância de p<0,05. Resultados: A suplementação de &#969;-3 teve efeito significativo na redução do % de massa grassa (%MG) e na pressão arterial sistólica (4%) e diastólica (5%). Em relação ao perfil lipídico, ambas intervenções tiveram efeitos significativos de redução de colesterol total (CT), LDL-c, não HDL (nHDL) e triacilglicerois (TG). As concentrações plasmáticas de LDL(-) dos participantes que tomaram ômega 3 apresentaram redução de 21%, enquanto que os que tomaram ômega 9 tiveram redução de 1%. Tal redução foi significativa em relação ao tempo de intervenção (p<0,05), mas não quando o efeito da internveção foi avaliado. Perfil semelhante foi observado para a razão LDL(-)/antiLDL(-), observou-se redução de 22% no grupo ômega 3 e redução de somente 3% no grupo ômega 9. Conclusão: A intervenção com ômega 3 promoveu redução na concentração plasmática de LDL(-), porém não modificou a concentração do anticorpo antiLDL(-) nem o tamanho das subfrações da LDL. / Introduction: The Metabolic Syndrome (MetS) is a combination of factors that determine increased risk for Cardiovascular Diseases (CVD), mainly because of Insulin Resistance (IR) and the inflammatory state promoted by the hypertrophied white adipose tissue. Under this background, the dyslipidemic condition goes together with the developing of atherosclerosis, meaning that higher concentrations of low density lipoprotein (LDL) in plasma promote modifications from different sources in these particles and may have an impact over LDL subfractions, turning them more atherogenic. Omega three has proved hypolipidemic and anti-inflammatory effects, which may reduce cardiovascular risk in MetS individuals. Objetive: evaluate the effect of 3g of fish oil supplementation, 60% EPA and DHA during an eight week period over plasma concentrations of electronegative LDL particles [LDL(-)] and its antibodies, as well as monitoring possible changes in LDL subfractions. Methods: A total number of 115 participants, both sexes, between 30 and 74 years of age, with MetS, were included and separated in the intervention group receiving omega 3 (n=58) and the placebo group with omega 9 (n=57). Biochemical analyses were carried out using ELISA for LDL(-) and antiLDL(-) in plasma. Particle sizes were measured using the Lipoprint system. The effects of time and intervention were analyzed using the statistical program SPSS 20.0, assuming p<0.05 as significant. Results: Omega 3 supplementation had a significant effect in the reduction of fat mass percentage (FM%) and blood pressure, showing a 4% decrease for systolic and 5% decrease for diastolic pressures respectively. Considering the lipid profile, both interventions had significant effects reducing total cholesterol (TC), LDL-c, not HDL (nHDL) and tryacylglycerides (TG). LDL(-) plasma concentrations from the omega 3 group showed 21% reduction while the omega 9 group had only 1% reduction. Such difference was significant considering time (p<0,05), but not while comparing the intervention effect. There was also a change in the antiLDL(-) antibodies; reducing 2% in the omega 3 group and increasing 1% in the omega 9 group. However, those differences were not significant. Similar effects were observed in LDL(-)/antiLDL(-) ratio, showing 22% decrease in the omega 3 group and only 3% in the omega 9 group. Conclusion: Omega 3 intervention promoted a significant reduction in plasmatic LDL(-), however, it didn\'t modify LDL subfraction distribution.

A dieta cetogênica (DC) é um tratamento não farmacológico prescrito especialmente para crianças e adolescentes com epilepsia refratária. A composição da dieta cetogênica é baseada no alto teor de gorduras, baixo teor de carboidratos e teor proteico moderado, sendo a produção de corpos cetônicos o mecanismo provável envolvido no controle das crises epilépticas. Apesar dos benefícios clínicos, a relação entre DC e o risco cardiometabólico não está bem estabelecida, especialmente sob os fatores de risco não clássicos. Objetivo: comparar os efeitos da dieta cetogênica clássica com a dieta cetogênica modificada nas subfrações de LDL e HDL, nos marcadores oxidativos, no perfil de apolipoproteinas e no perfil lipídico de crianças e adolescentes com epilepsia refratária, além do efeito clínico no controle da epilepsia. Métodos: Estudo de intervenção com recrutamento de crianças e adolescentes com epilepsia refratária de 1 a 19 anos de ambos os sexos do Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da FMUSP. O grupo controle recebeu DC clássica e o grupo caso recebeu a DC modificada com redução em pelo menos 20% de ácidos graxos saturados (AGS) e redução da relação w6/w3 em pelo menos 50% em comparação a DC clássica. Para ambos os grupos foram analisados os seguintes parâmetros bioquímicos no período basal, após 3 meses e 6 meses de DC: perfil lipídico clássico, concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNEs), substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs), subfrações de lipoproteina de baixa densidade (LDL) e lipoproteína de alta densidade (HDL), e perfil de apolipoproteínas (APOA-I e APOB). Além da avaliação clínica, antropométrica e de consumo alimentar. Resultados: A redução de crises e dos fármacos antiepilépticos foi semelhante entre os grupos. O aumento na concentração de colesterol total (CT) e LDL foi inferior no grupo caso, a Não-HDL manteve-se significativamente menor no grupo caso em comparação ao grupo controle e a relação LDL/APOB foi superior no grupo controle após 6 meses de DC. O percentual de partículas pequenas de LDL apresentou aumento superior em 208% no grupo controle comparado ao grupo caso, e consequentemente o tamanho de LDL apresentou maior redução no grupo controle. A incidência de dislipidemia foi significativamente inferior no grupo caso considerando os pontos de corte para LDL (>=130 mg/dL) e não-HDL (>=145 mg/dL). Não houve diferença entre os grupos na concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNES) e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs). Conclusão: A mudança do perfil de gorduras 10 contribuiu para melhora das concentrações de marcadores de risco cardiometabólico (CT, LDL e LDL pequenas) e consequentemente, perfil mais cardioprotetor nos pacientes do grupo caso. / The ketogenic diet (KD) is a non-pharmacological treatment especially prescribed to children and adolescentes with refractory epilepsy. The composition of the ketogenic diet is based on the high fat, low carbohydrate and moderate protein. The production of ketone bodies is the probable mechanism involved in the control of epileptic seizures. Despite the clinical benefits, the relationship between KD and cardiometabolic risk is not well established, especially under non-classical risk factors. Objective: to compare the effects of the classical KD with the modified KD on the LDL and HDL subfractions, in oxidative biomarkers, in apolipoprotein profile and lipid profile of children and adolescentes with refractory epilepsy, as well as the clinical effect on control of seizure. Methods: Dietary intervention study with recruitment of children and adolescentes with refractory epilepsy aged 1 to 19 years of both sexes from the Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP. The control group received classical KD and the case group received modified KD with a reduction of at least 20% saturated fatty acids (SFA) and a reduction of the w6/w3 ratio by at least 50% compared to classic KD. For both groups, the following biochemical parameters were analyzed at baseline and after 3 and 6 months of the KD: classical lipid profile, concentration of non-esterified fatty acids (NEFAs), thiobarbituric acid reactive substances (TBARs), low density lipoprotein (LDL) and high density lipoprotein (HDL) subfractions, size LDL, and apolipoprotein profile (APOA-I and APOB). In addition to clinical, anthropometric and food consumption assessment. Results: The reduction of seizures and antiepileptic drugs was similar between the groups. The increase in total cholesterol (TC) and LDL levels was lower in the case group, non-HDL remained significantly lower in the case group compared to the control group and the LDL/APOB ratio was higher in the control group after 6 months of KD. The percentage of small LDL particles showed a 208% higher in the control group than case group. Consequently, the LDL size showed a greater reduction in the control group. The incidence of dyslipidemia was significantly lower in the case group considering cut-off points for LDL (>=130 mg/dL) and non-HDL (>=145 mg/dL). There was no difference between the groups in the NEFAs and TBARs levels. Conclusion: The change in the fatty acids profile contributed to improvement the concentrations of cardiometabolic risk markers (TC, 12 LDL and small LDL), and consequently, a more cardioprotective profile in the patients of case group.

Abstract Phosphatidylethanol (PEth) is an abnormal phospholipid formed only in the presence of ethanol. Ethanol causes changes in the concentration and composition of plasma lipoproteins and it also influences the enzymes and transfer proteins that modify lipoproteins in plasma. PEth might be one of these changes brought on by ethanol in the circulation. The present study was designed to investigate whether qualitative changes in high density lipoprotein (HDL) phospholipids caused by ethanol can mediate the beneficial effects of alcohol on atherosclerosis, and to investigate the transfer of PEth between lipoproteins and the effects of PEth on the charge of lipoprotein particles. PEth was shown to be transferred from low density lipoproteins (LDL) to HDL particles mainly by transfer proteins other than cholesteryl ester transfer protein (CETP). The transfer of PEth between lipoproteins enables the redistribution of PEth between lipoproteins in plasma. The results of this study provide evidence that PEth in HDL particles stimulates the vascular endothelial growth factor (VEGF) secretion from vascular wall cells. The increase in the secretion was mediated through protein kinase C (PKC) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signalling pathways. PEth-containing HDL particles were able to increase the VEGF secretion in rats in vivo. Similar effects were also observed when rats were given HDL particles isolated from the plasma of alcoholics. The PEth-induced change in the electrical charge of lipoproteins may affect the binding of lipoproteins to their receptors and binding proteins. The effects of PEth on the secretion of VEGF from the endothelial cells were shown to be mediated through HDL receptor. The changes in HDL particles caused by phosphatidylethanol may modify the metabolism of lipoproteins and lipid-mediated signalling pathways regulating VEGF in vascular wall cells.