Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-27T18:38:38Z No. of bitstreams: 1 luciajanuariodosanjos.pdf: 2619797 bytes, checksum: 9cd633cb6127c04853743312e85b9a1c (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-28T12:13:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 luciajanuariodosanjos.pdf: 2619797 bytes, checksum: 9cd633cb6127c04853743312e85b9a1c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T12:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 luciajanuariodosanjos.pdf: 2619797 bytes, checksum: 9cd633cb6127c04853743312e85b9a1c (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A artrite é uma desordem músculo esquelética, caracterizada por inflamação das articulações e que apresenta importante impacto socioeconômico, uma vez que é observada em diversas patologias reumáticas, como na artrite reumatóide (AR), doença autoimune crônica, associada à incapacidade motora e laboral dos pacientes. As estratégias atuais para o tratamento da AR objetivam o alívio dos sintomas e modificação do curso degenerativo da doença, mas podem apresentar sérios efeitos colaterais e nem sempre resultam em melhora clínica. Neste contexto, a utilização de laser de baixa potência surge como alternativa não invasiva para o tratamento da artrite, devido as suas propriedades anti-inflamatórias e de regeneração tecidual. Entretanto, os mecanismos anti-inflamatórios do laser nos tecidos biológicos ainda não estão completamente conhecidos. Assim, o presente estudo tem por objetivo avaliar os efeitos anti-inflamatórios de lasers terapêuticos de baixa potência num processo inflamatório induzido, o qual se assemelha a AR. Para isso, um processo inflamatório foi induzido nas articulações talocrural e subtalar dos dois membros posteriores de camundongos C57BL/6, utilizando uma injeção de zymosan na região periarticular. Os animais foram divididos em 8 grupos (n=6): (I) controle, (II) zymosan, (III) eutanasiado 5h após indução com zymosan, (IV) zymosan+dexametasona, (V) laser 3J/cm2, (VI) laser 30J/cm2, (VII) zymosan+laser 3J/cm2, (VIII) zymosan+laser 30J/cm2. As condições do laser de baixa potência foram: λ=830nm (infravermelho), potência 10mW e fluências de 3J/cm2 e 30J/cm2, no modo contínuo de emissão da luz. A irradiação foi realizada durante 4 dias consecutivos, iniciando 5 horas após a indução a inflamação pelo zymosan. Vinte quatro horas após a última aplicação do laser, os animais foram eutanasiados e suas articulações encaminhadas para as seguintes análises: (a) análise morfológica, (b) análise de fragmentação de DNA por TUNEL e (c) análise da expressão de genes que codificam proteínas relacionadas às vias apoptóticas por PCR em tempo real. As análises morfológicas revelaram à presença de infiltrado celular inflamatório no tecido conjuntivo adjacente a região periarticular, em todos os grupos que receberam zymosan. Esse infiltrado diminuiu consideravelmente após a irradiação do laser na fluência de 30J/cm2. Para os dois grupos irradiados com laser, observou-se a elevação na taxa de apoptose somente nas células do infiltrado inflamatório, resultado este corroborado pelo aumento da expressão de genes que codificam proteínas associadas tanto pela via extrínseca como pela via intrínseca da apoptose. A resolução do processo inflamatório para o grupo Zy+3J/cm2 foi mais lenta do que a observada no grupo Zy+30J/cm2, uma vez que, após o término do tratamento, foram observadas elevada densidade celular e taxa de fragmentação de DNA nas células inflamatórias. Com isso, o laser de baixa potência, em especial na fluência de 30J/cm2, foi capaz de reduzir o infiltrado inflamatório na região periarticular, acelerando o processo apoptótico dessas células. A utilização do laser infravermelho de baixa potência pode ser uma boa alternativa para o tratamento de desordens inflamatórias articulares, uma vez que é um método não invasivo. Adicionalmente, esse tipo de tratamento não demonstrou efeitos colaterais nos demais tecidos adjacentes sadios, atuando especialmente nas células inflamatórias. / Arthritis is a muscle skeletal disorder characterized by inflammation of the joints, which has a significant socioeconomic impact, as observed in various rheumatic disorders such as rheumatoid arthritis (RA), chronic autoimmune disease associated with patients motor incapacity. Current strategies for the treatment of RA aim to relieve symptoms and modifying the degenerative course of the disease, but may have serious side effects and not always result in clinical improvement. In this context, the use of low-power laser therapy appears as non-invasive alternative for the arthritis treatment due to their anti-inflammatory and tissue regeneration properties. However, the anti-inflammatory mechanisms of the laser in biological tissues are not completely understood. Thus, this study aims to evaluate the anti-inflammatory effects of therapeutic low-power lasers in an induced inflammatory process, which resembles RA. An inflammatory process was induced in the talocrural and subtalar joints of the two rear paws of C57BL/6 using a zymosan injection in the periarticular region. The animals were divided into 8 groups (n = 6): (I) control, (II) zymosan, (III) euthanized 5 hours after induction with zymosan (IV) zymosan + dexamesona, (V) laser 3J/cm2 (VI ) laser 30J/cm2 (VII) + zymosan laser 3J/cm2 (VIII) laser zymosan + 30J/cm2. The low power laser conditions were: λ = 830 nm (infrared), 10mW power and fluences of 3 J/cm2 and 30J/cm2 at continuous mode of light emission. Irradiation was carried out for 4 consecutive days, starting 5 hours after inflammation-induced by zymosan. Twenty four hours after the last application of the laser, the animals were euthanized, their joints dissected and distributed: (a) morphological analysis, (b) DNA fragmentation analysis by TUNEL and (c) expression analysis of genes encoding proteins related to apoptotic pathways by real time PCR. Morphological analysis revealed the presence of inflammatory cell infiltrate in the adjacent connective tissue of periarticular region for all groups that received zymosan. This infiltration decreased significantly after laser irradiation using 30J/cm2 fluence. Both groups irradiated demonstrated DNA fragmentation rate incresed and only observed in inflammatory cells. DNA fragmentation is usually observed to cell death by apoptosis. This result is corroborated by expression increase of genes that encode proteins associated with both intrinsic and extrinsic pathways of apoptosis. The inflammatory process resolution for Zy+3J/cm2 group was slower than Zy+30J/cm2, since it was observed high cell density and DNA fragmentation rate in inflammatory cells. Thus, the low-power laser, particularly in 30J/cm2 fluence, could reduce the inflammatory infiltration in periarticular area, accelerating the inflammatory cells apoptosis. The use of low power infrared laser can be a good alternative for inflammatory joint disorders treatment, since it is a noninvasive method. Additionally, this type of treatment did not show side effects on other healthy surrounding tissues, acting especially in inflammatory cells.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2016-05-25T14:13:04Z No. of bitstreams: 1 Franciane Barbieri Fiorio.pdf: 1211751 bytes, checksum: 1c9c3d2ae4759d7517b8eb73fab2b12a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-25T14:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franciane Barbieri Fiorio.pdf: 1211751 bytes, checksum: 1c9c3d2ae4759d7517b8eb73fab2b12a (MD5) Previous issue date: 2014-12-18 / The optimization of time for the healing of a wound is very important, in view of the consequences it may cause, and this optimization becomes even more relevant in individuals with advanced age, where the repair is slower. The objective of this study was to evaluate the effect of low power laser on healing in an experimental model of skin wounds in aged rats. The skin wound was produced on the back using a "punch" 8mm diameter. 45 rats were males, of which 15 young people (± 30 days) and 30 elderly (± 500 days), divided into three groups, control young, control age and treated which underwent skin wound, and the group old treated received low-level laser treatment (30 mW, power density of 1.07 W / cm2), the area 0,028cm2 beam and wavelength λ660nm, active means of InGaAlP. Analyses were conducted to check the effects of laser on the expression of collagen type I and III, MMP-3, MMP-9, TIMP-2 and VEGF by immunohistochemical staining, IL-6 expression by RT-PCR and CINC-1 expression by ELISA. The results show that the laser decreased IL-6 and IL-8, MMP-3 and MMP-9, increased levels of TIMP-2 and VEGF, and favored collagen I and III deposition at the three time points (3, 7 and 14 days). We can conclude that laser therapy with the parameters used was effective in the treatment of skin wounds in aged animals at different stages of the process of tissue repair by modulating the expression of mediators of tissue repair and collagen deposition. / A otimização do tempo para a cicatrização de uma ferida é de suma importância, tendo em vista as sequelas que ela pode ocasionar e, esta otimização se torna ainda mais relevante no indivíduo com idade avançada, onde o reparo é mais lento. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do laser de baixa potência na cicatrização em um modelo experimental de feridas cutâneas em ratos idosos. A ferida cutânea foi produzida no dorso do animal utilizando um "punch" de 8mm de diâmetro. Foram utilizados 45 ratos, machos, dos quais 15 jovens (± 30 dias) e 30 idosos (±500 dias), distribuídos em três grupos experimentais, controle jovem, controle idoso e tratado idoso, que foram submetidos à ferida cutânea, e o grupo idoso tratado recebeu tratamento com laser de baixa potência (30 mW, densidade de potência de 1,07 W/cm2), área do feixe de 0,028cm2 e comprimento de onda de λ660nm, meio ativo de InGaAlP. Foram realizadas análises para verificar os efeitos do laser sobre a expressão de colágeno tipo I e III, MMP-3, MMP-9, TIMP-2 e VEGF através de imunoistoquímica, expressão de IL-6 através de RT-PCR e expressão de CINC-1 através de ELISA. Os resultados mostram que o laser diminuiu os níveis de IL-6 e IL-8, de MMP-3 e MMP-9, aumentou os níveis de TIMP-2 e VEGF e favoreceu a deposição de colágeno I e III nos três tempos experimentais (3, 7 e 14 dias). Podemos concluir que a laserterapia com os parâmetros utilizados foi eficaz no tratamento de feridas cutâneas em animais idosos, em diferentes fases do processo de reparação tecidual, modulando a expressão de mediadores do processo de reparo tecidual e deposição de colágeno.

O câncer é um problema de saúde pública mundial. O Instituto Nacional do Câncer (INCA) estimou que no Brasil, no ano de 2015, 576 mil novos casos surgiram, representando a segunda maior causa de mortes por esta doença. Entre os tratamentos oferecidos para o câncer, podemos destacar a radioterapia, que utiliza fontes ionizantes para erradicar ou impedir a proliferação das células tumorais. Entretanto, o uso da radiação ionizante (R.I), pode acarretar danos às células não tumorais circunvizinhas ao tumor. Assim, tratamentos coadjuvantes que possam diminuir os efeitos deletérios da radiação são extremamente importantes. Neste contexto, o laser de baixa potência (LBP) surge como alternativa para modular a resposta das células frente à radiação ionizante. Sendo esse nosso objetivo, células de fibroblastos de gengiva humana (FMM1) e câncer de mama (MDA-MB-231) foram expostas as doses de 2,5 e 10 Gy e após 24 h receberam LBP (λ= 660 nm, 40 mW e 0,04 cm²) com as densidades de energia de 30, 60, 90, 120 e 150 J/cm². A viabilidade celular foi quantificada através do teste de exclusão com azul de tripan durante quatro dias. A influência do LBP nas fases do ciclo celular e a expressão do Antígeno Nuclear de Proliferação celular (PCNA) foram realizadas por citometria de fluxo. A expressão de β-Galactosidase foi considerada para quantificar a senescência celular. Considerando os parâmetros utilizados, observou-se aumento na viabilidade celular, da expressão de PCNA, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular, e a diminuição de células senescentes para as células não tumorais, enquanto que para as tumorais, nenhuma resposta foi observada na viabilidade celular, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular e na quantidade de células senescentes enquanto que a expressão de PCNA diminuiu. Diante disso, concluímos que o LBP exerceu efeitos em ambas as linhagens celulares. / Cancer is considered a public health problem worldwide. According to the Brazils National Cancer Institute (INCA), 576,000 new cases of cancer were estimated for 2015 in Brazil, representing the second leading cause of death. Radiotherapy may be a treatment to several of types of cancer, frequently using ionizing radiation to eradicate or prevent the proliferation of tumor cells. This treatment, however, can lead to death of non-tumor cells around in irradiated tissue. Given this, adjuvant therapies that can minimize the side effects of ionizing radiation are of extremely importance. In this context, low power laser (LPL) may be an alternative to modulate the response of healthy cells to ionizing radiation. In this study, cells of human gingival fibroblasts (FMM1) and breast cancer (MDAMB- 231) were exposed to gamma radiation at doses of 2.5 and 10 Gy. After twenty-four hours, cell were irradiated with LPL (λ= 660 nm, 40 mW and total area of 0.04 cm²) with energy densities of 30, 60, 90, 120 and 150 J/cm². The cell viability was measured during four days, using the trypan blue technique. The influence of LPL on the cell cycle and on expression of the nuclear antigen of cellular proliferation (PCNA) was evaluated by flow cytometry. The expression of β-Galactosidase was the chosen method to assess cell senescence. Considering our adopted parameters, and focusing on the non-tumor cells, we have observed an increase in: 1) cell viability; 2) cell population in phases S and G2/M cell cycle; 3) PCNA expression with decrease in senescence. No alterations were observed in the cell viability, with greater population in phases S and G2/M cell cycle, while the number of senescent cells and the expression of PCNA were decreased. Therefore, we have concluded that the LPL promoted effects on both cell lineages, with increased cell viability on FMM1 cells, whether cancer cells maintained a decreased proliferation.

Introdução: A terapia com laser de baixa potência (LBP) vem sendo utilizada em Odontologia com diversos objetivos, em especial o de diminuir o tempo de cicatrização de feridas cirúrgicas. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar qualitativamente e quantitativamente o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos jovens. Material e Método: Foram utilizados 60 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=30) animais com extração dentária sem aplicação do LBP, e Grupo Experimental (n=30) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP (Ext+LBP) nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia). Os animais foram sacrificados nos períodos de 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias após o procedimento de extração dentária. Neste estudo foram analisados os efeitos da aplicação do laser sobre o reparo alveolar através de microscopia de luz, luz polarizada e imunomarcação. Para isso foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo; 2) grau de processo inflamatório; 3) grau de amadurecimento do colágeno; 4) imunomarcação para TRAP e RUNX-2. Todos os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Experimental apresentaram processo de reparo mais evoluído quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela organização mais rápida do coágulo sanguíneo, proliferação de fibroblastos nos restos do ligamento periodontal mais pronunciada, organização do colágeno e formação óssea mais precoce e mais intensa. Conclusão: A utilização do laser de baixa potência acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação. / Introduction: Low Power Laser (LPL) therapy has been used in Dentistry to achieve many objectives, particularly to decrease the healing period on wound healing. Objectives: The purpose of this in vivo study was to evaluate qualitatively and quantitatively the irradiation effect with LPL in the bone remodeling process after tooth extraction in young rats. Material and Method: 60 Wistar rats were used, randomly distributed in the following groups: Control Group (n=30) animals with tooth extraction without LPL application, and Experimental Group (n=30) animals with tooth extraction (Ext) and LPL application (Ext+LPL) on the three fist days (54 J/cm2 per day). The animals were euthanized after the end periods of 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days after the tooth extraction. This study looked into the effects of laser application on the alveolar repair through light microscopy, polarized light and immunostaining. After that, the following parameters were evaluated: 1) percentage of bone formation inside the dental alveolus; 2) degree of inflammatory process; 3) degree of collagen maturation; 4) immunostaining for TRAP and RUNX-2. All the results obtained were submitted to statistical analysis over the ANOVA and Mann- Whitney (p<0.05) test. Results: It was observed that the alveolus from the Experimental Group presented an improved repair process when compared to the Control Group, characterized by faster blood clot organization, more apparent fibroblasts proliferation on the remnants of the periodontal ligament, earlier and more intense collagen organization and bone generation. Conclusion: The use of Low Power Laser accelerated the bone generation process during the experimental initial period, although there was no difference in the ossification process in the final periods.

Introdução: A terapia com laser de baixa potência (LBP) vem sendo utilizada em Odontologia com diversos objetivos, em especial o de diminuir o tempo de cicatrização de feridas cirúrgicas. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar qualitativamente e quantitativamente o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos jovens. Material e Método: Foram utilizados 60 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=30) animais com extração dentária sem aplicação do LBP, e Grupo Experimental (n=30) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP (Ext+LBP) nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia). Os animais foram sacrificados nos períodos de 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias após o procedimento de extração dentária. Neste estudo foram analisados os efeitos da aplicação do laser sobre o reparo alveolar através de microscopia de luz, luz polarizada e imunomarcação. Para isso foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo; 2) grau de processo inflamatório; 3) grau de amadurecimento do colágeno; 4) imunomarcação para TRAP e RUNX-2. Todos os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Experimental apresentaram processo de reparo mais evoluído quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela organização mais rápida do coágulo sanguíneo, proliferação de fibroblastos nos restos do ligamento periodontal mais pronunciada, organização do colágeno e formação óssea mais precoce e mais intensa. Conclusão: A utilização do laser de baixa potência acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação. / Introduction: Low Power Laser (LPL) therapy has been used in Dentistry to achieve many objectives, particularly to decrease the healing period on wound healing. Objectives: The purpose of this in vivo study was to evaluate qualitatively and quantitatively the irradiation effect with LPL in the bone remodeling process after tooth extraction in young rats. Material and Method: 60 Wistar rats were used, randomly distributed in the following groups: Control Group (n=30) animals with tooth extraction without LPL application, and Experimental Group (n=30) animals with tooth extraction (Ext) and LPL application (Ext+LPL) on the three fist days (54 J/cm2 per day). The animals were euthanized after the end periods of 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days after the tooth extraction. This study looked into the effects of laser application on the alveolar repair through light microscopy, polarized light and immunostaining. After that, the following parameters were evaluated: 1) percentage of bone formation inside the dental alveolus; 2) degree of inflammatory process; 3) degree of collagen maturation; 4) immunostaining for TRAP and RUNX-2. All the results obtained were submitted to statistical analysis over the ANOVA and Mann- Whitney (p<0.05) test. Results: It was observed that the alveolus from the Experimental Group presented an improved repair process when compared to the Control Group, characterized by faster blood clot organization, more apparent fibroblasts proliferation on the remnants of the periodontal ligament, earlier and more intense collagen organization and bone generation. Conclusion: The use of Low Power Laser accelerated the bone generation process during the experimental initial period, although there was no difference in the ossification process in the final periods.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:18:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 THIAGO MACIEL CAVALCANTI.pdf: 1062270 bytes, checksum: 27c54a41e663f3e10d627bb93d161d7f (MD5) Previous issue date: 2011-07-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The increased resistance of bacteria to antibiotic drugs creats the need to develop new bacteriostatics ways and bactericidals to cooperate with the treatment of infected individuals. Among those tools are the complementary and alternative therapies involving laser therapy and photodynamic therapy. Lasers are being used isolated or associated with photosensitizing substances to work as helpers in the inactivation of bacterias, fungis and viruses. Photodynamic therapy (PDT) based on the activation of photosensitizers for visible light in low doses, with appropriate wavelength, has become an alternative to conventional treatments in the fight against oral micro-organisms, leading to death the organism by disorders in cell wall and DNA. IN VITRO study two therapies were used, Photodynamic therapy (PDT) and Low-Level Laser (LBP). For PDT we used the dye (methylene blue) to the bacteria in various concentrations, using the disk diffusion technique stimulated by laser light, wavelength 660nm, red light, InGaAlP active medium (Aluminum Indium Gallium Phosphorus). For use in the LBP isolated in micro-organisms several dosages were used with two parameters: medium active InGaAlP (Aluminum Indium Gallium Phosphorus), wavelength 660 nm, red laser and continuous emission and the active medium AsGaAl (Gallium Arsenide and Aluminum), 808 nm infrared laser and continuous emission. The bacteria used in this experiment were the standard strains American Type Culture Coletion - ATCC: Staphylococcus aureus ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 25923 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 covering the spectrum Gram-negative bacteria, Gram-positive, aerobic and facultative anaerobic. The antibacterial effect IN VITRO of PDT in different bacteria was quantified in millimeters by observing the diameter of inhibition halos measured with the aid of a halometer. Were considered present antibacterial activities of therapy with diameter of inhibition halos greater than or equal to 8mm. Observed antibacterial effects of PDT for Staphylococcus aureus and Escherichia coli with the presence of inhibition halos with an average of 12mm, as well as for the individual use of methylene blue dye. For Pseudomonas aeruginosa was not observed anyantibacterial effect as well as for the individual use of low power laser. / O aumento da resistência das bactérias às drogas antibióticas gera a necessidade de desenvolver novos meios bacteriostáticos e bactericidas que colaborem com a terapêutica de indivíduos infectados. Dentre esses meios estão as terapias complementares, envolvendo a laserterapia e a terapia fotodinâmica. Os laseres estão sendo utilizados isolados ou associados a substâncias fotossensibilizadoras para serem auxiliares na inativação de bactérias, fungos e vírus. A terapia fotodinâmica (TFD) baseada na ativação de fotossensibilizadores por luz visível em baixas doses, com comprimento de onda apropriado, tem se tornado uma alternativa aos tratamentos convencionais no combate aos micro-organimos bucais, levando à morte do micro-organismo através de desordens na sua parede celular e no seu DNA. Nesse estudo, IN VITRO, duas terapias foram empregadas, a terapia fotodinâmica (TFD) e o Laser de Baixa Potência (LBP). Para TFD empregou-se o corante azul de metileno frente às bactérias em várias concentrações, utilizando-se da técnica disco-difusão estimulado através da luz Laser, comprimento de onda 660nm, luz vermelha, 320J/cm 2 , meio ativo InGaAlP (Índio Gálio Alumínio Fósforo). Para o uso do LBP,isoladamente, sobre o crescimento bacteriano utilizou-se várias dosimetrias com dois parâmetros: meio ativo InGaAlP (Índio Gálio Alumínio Fósforo), comprimento de onda 660 nm, laser vermelho e emissão contínua e o meio ativo AsGaAl (Arseneto de Gálio e Alúminio) 808 nm, laser infravermelho e emissão contínua. As bactérias utilizadas nesse experimento foram as cepas padrão American Type Culture Coletion ATCC: Staphylococcus aureus ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 25923 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 abrangendo o espectro bacteriano Gram-negativo, Gram-positivo, aeróbias e anaeróbias facultativas. O efeito antibacteriano, IN VITRO, da TFD em diferentes bactérias foi quantificado em milímetros através da observação do diâmetro dos halos de inibição de crescimento medidos com o auxílio de um halômetro. Foram consideradas como presentes as atividades antibacterianas das terapias com resultados de diâmetro de halos de inibição de crescimento maiores ou iguais a 8mm. Observou-se efeitos antibacterianos da TFD para Staphylococcus aureus e Escherichia coli com a presença de halos de inibição com média de 12mm, assim como para o uso isolado do corante azul de metileno. Para Pseudomonas aeruginosa não foi observado qualquer efeito antibacteriano assim como para o uso isolado do laser de baixa potência.

O câncer é um problema de saúde pública mundial. O Instituto Nacional do Câncer (INCA) estimou que no Brasil, no ano de 2015, 576 mil novos casos surgiram, representando a segunda maior causa de mortes por esta doença. Entre os tratamentos oferecidos para o câncer, podemos destacar a radioterapia, que utiliza fontes ionizantes para erradicar ou impedir a proliferação das células tumorais. Entretanto, o uso da radiação ionizante (R.I), pode acarretar danos às células não tumorais circunvizinhas ao tumor. Assim, tratamentos coadjuvantes que possam diminuir os efeitos deletérios da radiação são extremamente importantes. Neste contexto, o laser de baixa potência (LBP) surge como alternativa para modular a resposta das células frente à radiação ionizante. Sendo esse nosso objetivo, células de fibroblastos de gengiva humana (FMM1) e câncer de mama (MDA-MB-231) foram expostas as doses de 2,5 e 10 Gy e após 24 h receberam LBP (&lambda;= 660 nm, 40 mW e 0,04 cm²) com as densidades de energia de 30, 60, 90, 120 e 150 J/cm². A viabilidade celular foi quantificada através do teste de exclusão com azul de tripan durante quatro dias. A influência do LBP nas fases do ciclo celular e a expressão do Antígeno Nuclear de Proliferação celular (PCNA) foram realizadas por citometria de fluxo. A expressão de &beta;-Galactosidase foi considerada para quantificar a senescência celular. Considerando os parâmetros utilizados, observou-se aumento na viabilidade celular, da expressão de PCNA, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular, e a diminuição de células senescentes para as células não tumorais, enquanto que para as tumorais, nenhuma resposta foi observada na viabilidade celular, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular e na quantidade de células senescentes enquanto que a expressão de PCNA diminuiu. Diante disso, concluímos que o LBP exerceu efeitos em ambas as linhagens celulares. / Cancer is considered a public health problem worldwide. According to the Brazils National Cancer Institute (INCA), 576,000 new cases of cancer were estimated for 2015 in Brazil, representing the second leading cause of death. Radiotherapy may be a treatment to several of types of cancer, frequently using ionizing radiation to eradicate or prevent the proliferation of tumor cells. This treatment, however, can lead to death of non-tumor cells around in irradiated tissue. Given this, adjuvant therapies that can minimize the side effects of ionizing radiation are of extremely importance. In this context, low power laser (LPL) may be an alternative to modulate the response of healthy cells to ionizing radiation. In this study, cells of human gingival fibroblasts (FMM1) and breast cancer (MDAMB- 231) were exposed to gamma radiation at doses of 2.5 and 10 Gy. After twenty-four hours, cell were irradiated with LPL (&lambda;= 660 nm, 40 mW and total area of 0.04 cm²) with energy densities of 30, 60, 90, 120 and 150 J/cm². The cell viability was measured during four days, using the trypan blue technique. The influence of LPL on the cell cycle and on expression of the nuclear antigen of cellular proliferation (PCNA) was evaluated by flow cytometry. The expression of &beta;-Galactosidase was the chosen method to assess cell senescence. Considering our adopted parameters, and focusing on the non-tumor cells, we have observed an increase in: 1) cell viability; 2) cell population in phases S and G2/M cell cycle; 3) PCNA expression with decrease in senescence. No alterations were observed in the cell viability, with greater population in phases S and G2/M cell cycle, while the number of senescent cells and the expression of PCNA were decreased. Therefore, we have concluded that the LPL promoted effects on both cell lineages, with increased cell viability on FMM1 cells, whether cancer cells maintained a decreased proliferation.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_Rodrigo_Varella_de_Carvalho.pdf: 598355 bytes, checksum: 322409e41faaa4fcdb65cd8f7b7e200d (MD5) Previous issue date: 2006-05-29 / The aim of the present study was to evaluate the gelatinase activity (MMP-2 and 9), and proliferation of human pulp fibroblasts in vitro, after irradiation with a low level diode laser (780nm). The activity was evaluated with zymography and the proliferation rate was obtained through growth curves made in SigmaPlot (8.0), after the counting in Neubauer chamber.in light microscope. Cells used to zimography were cultived in DMEM, 10% fetal bovine serum and incubated at 37ºC in atmosphere of 5% CO2 and 95% air, in 100% humidity. Cells used to proliferation rate were cultivated in nutritional deficit (5% SFB). Groups to zymography and cell proliferation were determined: zymography - Z1 = not irradiated, Z2 = 3J/cm2 e Z3 = 6J/cm2, cell proliferation: L1 = not irradiated, L2 = 3J/cm2 e L3 = 6J/cm2. The counting was made after 2, 4 and 6 days. Assays were performed in triplicate. The zymography showed that the MMP-2 activity was major with MMP-9, and, Z2 e Z3 produced a higher activity than MMP-2, when compared to Z1. Results of the zymography and proliferation test were compared by either ANOVA complemented by Tukey´s test. The level of significance was 5% (p<0,05). Statistical analysis demonstrate difference between the groups in different days. The L3 obtained higher proliferation in the finish of the six days. L2 demonstrated higher growth than L1. Irradiated fibroblasts with the low power laser expressed a higher amount of MMP-2 activity and 6J/cm2 produced a higher proliferation rate in the initial days / O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade das gelatinases (MMP-2 e MMP-9), e a proliferação de fibroblastos pulpares humanos in vitro, após a irradiação com um diodo laser de baixa de baixa potência (780nm). A atividade foi avaliada com zimografia e as taxas de proliferação e contagem celular foram obtidas através de curvas de crescimento feitas com o software SigmaPlot (8.0), após a contagem em câmara de Neubauer ao microscópio óptico. As células usadas para a zimografia foram cultivvadas em DMEM, com SFB a 10% e incubadas a 37ºC em atmosfera de 5% CO2 e 95% de ar, em 100% de umidade. Já, as células usadas para a taxa de proliferação e contagem celular foram cultivadas em déficit nutricional (5% SFB). Os grupos para zimmografia e para a contagem e taxa de proliferação foram determinados: a) zimografia - Z1 = sem irradiação, Z2 = 3J/cm2 e Z3 = 6J/cm2 e b) proliferação e contagem celular - L1 = sem irradiação, L2 = 3J/cm2 e L3 = 6J/cm2. A contagem celular foi realizada em após 2, 4 e 6 dias. Os ensaios foram realizados em triplicata. A zimografia mostrou que a ativiidade da MMP-2 foi maior que a MMP-9, e Z2 e Z3 produziram uma grande atividade, quando comparados ao rupo Z1. Os resultados da zimografia e dos testes de contagem e proliferação celular foram comparados por análise de variância (ANOVA) e complementado pelo teste Tukey. O nível de significância utilizado foi de % (p<0,05). A análise estatística demonstrou diferença entre os grupos nos diferentes dias para a proliferação e contagem celular. O grupo L3 obteve a maior contagem celular ao final dos seis dias avaliados. O grupo L2 demonstrou maior proliferação que o grupo L1. Os fibroblastos irradiados com o laser de baixa potência expressaram uma alta atividade de MMP-2 e a dose 6J/cm2 produziu uma alta taxa de proliferação nos primeiros dias

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-15T13:45:40Z No. of bitstreams: 1 Mariana Moreira da Silva.pdf: 2627073 bytes, checksum: 8b556a25b3da990d9fcef2fc095004ad (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T13:45:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Moreira da Silva.pdf: 2627073 bytes, checksum: 8b556a25b3da990d9fcef2fc095004ad (MD5) Previous issue date: 2015-06-29 / Introduction: Fibromyalgia (FM) is a syndrome characterized by chronic widespread pain, with prevalence in women. An important issue is that many patients with FM also have the diagnosis of temporomandibular disorders (TMD) and the coexistence of these conditions generates a clinical result of high complexity. Exercise and phototherapy (low level laser therapy / LED) are two areas used for the treatment of chronic pain and may be promising in the rehabilitation of these comorbidities. In a protocol (1) the objective was to verify if the phototherapy and exercise program in a single application can increase or decrease the sensitivity of pain in patients with FM associated with TMD. Objective of the protocol two (2) was to evaluate the potential of physical exercise program and phototherapy on condition of chronic pain in women with FM associated with TMD. Methods / Study Design: Randomized clinical trial, double-blind and controlled. Protocol 1 was conducted involving 80 women aged ≥ 35 years old with a diagnosis of FM TMD. Patients were randomly allocated to one of four groups: CON (have not undergone any operation); PHO group (intervention with phototherapy); EXT group (intervention with exercise); PHO + EXT group (more intervention exercise phototherapy). One session of the treatments and the revaluation was carried out was after thirty (30) minutes of application, with analysis of algometry. In Protocol 2 used the same methodology to protocol 1, but the revaluation was after ten (10) weeks of treatment, with addition of other evaluative tools algometry. Statistical analysis was performed using Student's t-test, one-tailed and paired and was held Gaussian distribution: Shapiro-Wilk and Kruskal Wallis test (Dunnes post-test), and even the use of the Wilcoxon test and the significance of statistical analysis 0.05 for all tests. The study protocol is registered with the World Health Organization under protocol number NCT02279225. Results: Groups with active intervention, had a good response on the group without intervention and even the combination of therapeutic resources was more effective in the two periods evaluated, there was a significant improvement from the point corresponding to DTM in the intervention groups. Discussion: This is the first randomized controlled trial to evaluate the role of phototherapy, a physical exercise program and the combination of these interventions for pain in fibromyalgia patients with TMD in assessment baseline and after longitudinal treatment. The results provide valuable clinical evidence for objective assessment of the potential benefits and risks of the procedures. Conclusion: The therapy associated with specific exercise program improves the painful condition FM patient with TMD. Perspectives: Check the role of phototherapy, the exercise program and these therapies in combination in the hormone changes that may be related to quality of life of patients. / Introdução: A Fibromialgia (FM) é uma síndrome caracterizada pela dor crônica generalizada, com prevalência em mulheres. Uma questão importante é que vários pacientes com FM também apresentam o diagnóstico de disfunção temporomandibular (DTM) e a coexistência dessas patologias gera um resultado clínico de alta complexidade. O exercício físico e a fototerapia (laserterapia de baixa potência/ diodo emissor de luz) são duas áreas utilizadas para o tratamento da dor crônica, podendo ser promissores na reabilitação dessas comorbidades. No protocolo um (1) o objetivo foi verificar se a fototerapia e o programa de exercício físico em uma única aplicação pode aumentar ou diminuir a sensibilidade da dor no paciente com FM associado a DTM. Objetivo do protocolo dois (2) foi avaliar o potencial do programa de exercício físico e da fototerapia na condição de dor crônica em mulheres com FM associado a DTM. Métodos / Desenho do estudo: Ensaio clínico randomizado, duplo-cego e controlado. O protocolo 1 foi realizado envolvendo 80 mulheres com ≥ 35 anos de idade com diagnóstico de FM com DTM. Os pacientes foram alocados aleatoriamente para um dos quatro grupos: Grupo CON (não foram submetidas a qualquer intervenção); Grupo PHO (intervenção com a fototerapia); Grupo EXT (intervenção com exercícios físicos); Grupo PHO + EXT (fototerapia mais intervenção do exercício). Foi realizado uma única sessão dos tratamentos e a reavaliação foi após trinta (30) minutos da aplicação, com analise da algometria. No Protocolo 2 usou a mesma metodologia que o protocolo 1, mas as reavaliações foram após dez (10) semanas de tratamento, com outras ferramentas avaliativas além da algometria. Para análise estatística foi utilizado o teste t-Student, unicaudal e pareado e foi realizada a distribuição Gaussiana: Shapiro-Wilk e teste Kruskall Wallis (pós-teste de Dunnes), e ainda a utilização do teste Wilcoxon, sendo a analise estatística de significância 0,05 para todos os testes. O protocolo deste estudo está registrado com a Organização Mundial de Saúde sob protocolo número NCT02279225. Resultados: Os grupos com intervenção ativa, tiveram uma boa resposta sobre o grupo sem intervenção e ainda a combinação de recursos terapêuticos mostrou ser mais eficaz nos dois momentos avaliados, houve uma melhora significante quanto ao ponto correspondente a DTM nos grupos de intervenção. Discussão: Este é o primeiro estudo controlado randomizado avaliando o papel da fototerapia, de um programa de exercício físico e a combinação dessas intervenções para a dor em pacientes fibromiálgicos com DTM, em avaliação em linha de base e após tratamento longitudinal. Os resultados oferecem evidências clínicas valiosas para avaliação objetiva dos potenciais benefícios e riscos dos procedimentos. Conclusão: A fototerapia associada ao programa de exercício físico específico melhora a condição dolorosa do paciente de FM com DTM. Perspectivas: Verificar o papel da fototerapia, do programa de exercícios e essas terapias de forma combinada na alteração de hormônios que podem estar relacionados a qualidade de vida destes pacientes.

Introdução: Os efeitos nocivos da fumaça de cigarro (FC) não se limitam apenas ao organismo do indivíduo fumante. A nicotina, devido aos seus efeitos tóxicos, provoca alterações graves no metabolismo ósseo, podendo prejudicar a reparação óssea alveolar. A terapia com laser de baixa potência (LBP) apresenta efeitos anti-inflamatórios e analgésicos além de modular a reparação tecidual, acelerando a cicatrização e melhorando o processo de reparo ósseo. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos submetidos à fumaça de cigarro. Material e Métodos: Um total de 144 ratos Wistar foram distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=36) animais com extração dentária (Ext); Grupo Experimental I (n=36) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia); Grupo Experimental II (n=36) animais com extração dentária (Ext) e expostos à fumaça de cigarro (FC). Grupo Experimental III (n=36) animais com Ext + LBP+ FC. Os animais foram sacrificados nos períodos de 3, 7 e 14 dias após o procedimento de extração dentária, sendo que em cada grupo 18 animais foram destinados para análise da expressão gênica (RT-PCR) e 18 animais para exames histológicos. Foram avaliadas: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo, 2) mudanças na expressão gênica de Rank, Rank-l, Opg, Onc; Occ, Opn, Bmp-2 e Bsp. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e o pós-teste de Bonferroni (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Exp I apresentaram processo de reparo mais avançado quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela formação óssea mais precoce e mais intensa e pela maior expressão dos genes relacionados à remodelação óssea. O Grupo Exp II foi o que teve o pior resultado, mostrando que a fumaça de cigarro interfere negativamente no processo de reparo ósseo. No Grupo Exp III, houve uma melhora na ossificação e na expressão gênica, mostrando que o LBP pode influenciar positivamente a formação óssea. Conclusão: A utilização do LBP acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação, e a FC interferiu negativamente no processo de remodelação óssea durante todo o período experimental / Introduction:The harmful effects of cigarette smoke (CS) are not limited only to the body of the smoker. Nicotine, due to its toxic effects, causes serious alterations in the bone metabolism, which may impair alveolar bone repair. Low level laser therapy (LLLT) has anti-inflammatory and analgesic effects beyond modulating tissue repair, accelerating the healing and improving the bone healing process. Objective: The objective of the present in vivo study was to evaluate the effect of LLLT irradiation in the process of bone remodeling after dental extraction in rats submitted to cigarette smoke. Material and Methods: A total of one hundred and forty-four Wistar rats were randomly divided into four groups: Control Group (n = 36) animals with dental extraction (Ext), Experimental Group I (n = 36) animals that had dental extraction (Ext) and application of LLLT in the first three days (54 J / cm2 per day); Experimental Group II (n = 36) animals with dental extraction (Ext) and exposed to cigarette smoke (CS). Experimental Group III (n = 36) animals with Ext + LLLT + CS. The animals were sacrificed at 3, 7 and 14 days after the dental extraction procedure. In each group, 18 animals were used for analysis of gene expression (RT-PCR) and 18 animals for histological examination. We evaluated: 1) percentage of bone formation inside the alveolus, 2) changes in the gene expression of Rank, Rank-l, Opg, Onc; Occ, Opn, Bmp-2 and Bsp. The results were submitted to statistical analysis using the ANOVA test and the Bonferroni post-test (p <0.05). Results: It was observed that the sockets of the Exp Group I presented a more advanced repair process when compared to the Control Group, characterized by the earlier and more intense bone formation and the greater expression of the genes related to the bone remodeling. The Exp Group II was the one that had the worst result, showing that cigarette smoke interferes negatively in the process of bone repair. In the Exp Group III, there was an improvement in ossification and gene expression, showing that LLLT can positively influence bone formation. Conclusion: The use of LLLT accelerated the bone formation process during the initial phases of the experiment, although in the final periods there was no difference in the ossification process, and the CS interfered negatively in the process of bone remodeling throughout all the experimental period