O objetivo deste trabalho é estudar a dinâmica do nitrogênio das fontes uréia e aquamônia no solo na cultura de cana-de-açúcar (Saccharum spp), por meio da técnica isotópica com 15N), visando a esclarecer quais os destinos do nitrogênio com relação à lixiviação, volatilização, extração pela cultura e resíduo nitrogenado dos adubos no solo. Experimento foi realizado em área pertencente à Usina São José, situada no município de Macatuba-SP. Utilizou-se a variedade de cana de açúcar SP 70-1143 de 3ª soca em solo Latossolo Vermelho-Amarelo (LVA), textura arenosa, característico de 45% da região. O delineamento experimental constou de 2 tratamentos com fertilizantes nitrogenados na forma de uréia e aquamônia e um terceiro tratamento testemunha sem nitrogênio. A área de cada tratamento constou de 15 sulcos de 10 metros de comprimento, com espaçamento entre sulcos de 1,40m. Nos tratamentos com fertilizantes foram demarcadas 3 parcelas para aplicação do adubo -15N, sendo cada parcela constituída de 3 linhas contíguas de 1,5 metros lineares. Nessas mesmas parcelas foram instalados tensiômetros, extratores de solução do solo e amostradores para coletar o nitrogênio volatilizado do solo. A adubação nitrogenada foi de 100kg de N/ha aplicados em sulcos com 20 cm de profundidade e localizados a 15 cm de cada lado da linha de soqueira. Como fertilizantes marcados com 15N foram utilizados uréia -15 (3,413 átornos% 15N) e aquamônia (3,181 átomos% 15N). Os resultados obtidos mostraram valores de eficiência de utilização do fertilizante (EUF) de 18,4 e 14,4% para aquamônia e uréia respectivamente, sendo que 25 e 21% do nitrogênio absorvido foram encontrados nos rizomas e raízes (parte subterrânea) e o restante na parte aérea. A quantidade média estimada de N-NH3 volatilizado do solo em 47 dias foi de 0,15kg de N/ha sendo apenas 2% proveniente dos fertilizantes uréia e aquamônia. A quantidade residual dos fertilizantes no solo, considerada a profundidade de 1,25m foi de 22,8 e 13,5kg de N/ha para o nitrogênio da aquamônia e uréia respectivamente. Considerando que o arraste do nitrogênio à profundidade de 1m representa perda do nutriente para fora do volume de solo explorado pelo |sistema radicular da cana-de-açúcar, as perdas por lixiviação foram de 28,2 e 7,5kg de N/ha para uréia e aquamônia respectivamente, ou seja, urna perda 4 vezes maior para o nitrogênio da uréia do que o nitrogênio da aquamônia nas condições experimentais. / The objective of this work is to study the dynamic of nitrogen from urea and aqua ammonia sources in soil cropped with sugarcane (Saccharum spp) by means of isotopic 15N techniques to determine the fate of the nitrogen in terms of leaching, volatilization, plant uptake and nitrogen residues in the soil. The field studies were conducted at a site in Usina São José, Macatuba-SP. The SP 70- 1143 sugarcane cultivar (3rd ratoon) was used in Latossolo Vermelho-Arnarelo (LVA - sandy soil), which is representative of 45% of the region. The experimental design consisted of two nitrogen fertilizer treatments: one with urea the other with aqua ammonia and a third without nitrogen fertilization. Each treatment consisted of a plot with 15 rows, ten meters long with spacing of 1.40 rneters. Three subplots in each of the two nitrogen fertilizer plots were delimitated for 15 N applications. Each of these subplots were represented by 3 lines 1.5m long. Tensiometers, soil solution extractors and soil air collectors were installed on these subplots. The nitrogen fertilizer was applied at a dose of 100kg of N/ha 20cm deep and 15cm from the plant row. The labelled 15N nitrogen fertilizer consisted of urea -15N (3.413 atoms % 15N) and aqua ammonia (3.181 atms % 15N). The results obtained showed the following values for the nitrogen utilization efficiency aqua ammonia: 18.4% and urea: 14.4%. It was also observed that 25% (aqua ammonia) and 21% (urea) of nitrogen taken up by plants was found in the buried rhizospheres and roots. The mean value of the amount of N-NH3 volatilization from the soil was 0.15kg of N/ha during a period of 47 days. Only 2% was from the urea and aqua ammonia fertilizers. The residual nitrogen in the soil, until the depth of 1.25m was 22.8kg N/ha for urea and 13.5kg for aqua ammonia. The nitrogen leaching bellow the depth of 1.0m for the urea treatment was for times greater than that of the ammonia one.

Estudou-se a recuperação do nitrogênio pelo capim colonião var. Tobiatã, através da adição de fertilizante - 15N em diferentes épocas. As análises foram determinadas em três cortes, efetuados 5 a 7 semanas após cada adição do fertilizante marcado. Nas condições de realização deste trabalho, pode-se chegar as seguintes conclusões: 1. a maior recuperação (%), total para os três cortes após adubação com fertilizante - 15N, foi observada em fevereiro, junho, agosto e setembro, sendo respectivamente, 59,71; 53,81; 59,74 e 62,69%; 2. o efeito residual do nitrogênio, observado no segundo e terceiro corte após adubação com fertilizante - 15N, foi maior em junho, agosto e setembro, sendo respectivamente, 21,10; 18,11 e 22,47%; 3. o crescimento da planta foi reduzido no período de pós-florescimento, sendo o rendimento de matéria seca um bom parâmetro para tal estimativa; 4. o teor de nitrogênio acumulado, relação entre matéria seca em função do nitrogênio acumulado após adubação com fertilizante - 15N e relação entre matéria seca acumulada em função do nitrogênio total aplicado, não fornecem evidências seguras para estimativa da recuperação do fertilizante nitrogenado aplicado; 5. na prática, em função das condições em que realizou-se este estudo, as adubações nitrogenadas são melhor aproveitadas quando feitas em fevereiro, junho, agosto e setembro; 6. a adubação nitrogenada feita após cada corte aumenta o nitrogênio acumulado e consequentemente o teor de proteína bruta. / The nitrogen recovery was studied through 15N absorption by guineagrass cv. Tobiatã in several growth fkushes. For each 15N application three cuttings were perfomed at approximatelly 5-7 week interval. Under the above experimental conditions it was withdrawn the following conclusions: 1. highest values of nitrogen recovery in the three cuttings was observed for applied 15N in februar, june, august and september which was of 59.71; 53.81; 59.74 and 62.69% respectively; 2. residual effects of nitrogen observed in the second and third cuttings after 15N applications was of 21.10; 18.11; and 22.47% as determined for application in june, august and september respectively; 3. plant growth was reduced by low temperatures which were predominant during may, june and july matched with flowering period of guineagrass; 4. nitrogen content, relation between dry matter as function of nitrogen content after 15N applications and dry matter accumulation as function of applied nitrogen was not well related to the efficiency of nitrogen utilization; 5. both dry matter yield and nitrogen recovery showed best results for fertilizer application in february, june, august and september; 6. the nitrogenous fertilizer application after each cuting, showed hight nitrogen accumulation and consequently more crude protein.

O objetivo deste trabalho é estudar a dinâmica do nitrogênio das fontes uréia e aquamônia no solo na cultura de cana-de-açúcar (Saccharum spp), por meio da técnica isotópica com 15N), visando a esclarecer quais os destinos do nitrogênio com relação à lixiviação, volatilização, extração pela cultura e resíduo nitrogenado dos adubos no solo. Experimento foi realizado em área pertencente à Usina São José, situada no município de Macatuba-SP. Utilizou-se a variedade de cana de açúcar SP 70-1143 de 3ª soca em solo Latossolo Vermelho-Amarelo (LVA), textura arenosa, característico de 45% da região. O delineamento experimental constou de 2 tratamentos com fertilizantes nitrogenados na forma de uréia e aquamônia e um terceiro tratamento testemunha sem nitrogênio. A área de cada tratamento constou de 15 sulcos de 10 metros de comprimento, com espaçamento entre sulcos de 1,40m. Nos tratamentos com fertilizantes foram demarcadas 3 parcelas para aplicação do adubo -15N, sendo cada parcela constituída de 3 linhas contíguas de 1,5 metros lineares. Nessas mesmas parcelas foram instalados tensiômetros, extratores de solução do solo e amostradores para coletar o nitrogênio volatilizado do solo. A adubação nitrogenada foi de 100kg de N/ha aplicados em sulcos com 20 cm de profundidade e localizados a 15 cm de cada lado da linha de soqueira. Como fertilizantes marcados com 15N foram utilizados uréia -15 (3,413 átornos% 15N) e aquamônia (3,181 átomos% 15N). Os resultados obtidos mostraram valores de eficiência de utilização do fertilizante (EUF) de 18,4 e 14,4% para aquamônia e uréia respectivamente, sendo que 25 e 21% do nitrogênio absorvido foram encontrados nos rizomas e raízes (parte subterrânea) e o restante na parte aérea. A quantidade média estimada de N-NH3 volatilizado do solo em 47 dias foi de 0,15kg de N/ha sendo apenas 2% proveniente dos fertilizantes uréia e aquamônia. A quantidade residual dos fertilizantes no solo, considerada a profundidade de 1,25m foi de 22,8 e 13,5kg de N/ha para o nitrogênio da aquamônia e uréia respectivamente. Considerando que o arraste do nitrogênio à profundidade de 1m representa perda do nutriente para fora do volume de solo explorado pelo |sistema radicular da cana-de-açúcar, as perdas por lixiviação foram de 28,2 e 7,5kg de N/ha para uréia e aquamônia respectivamente, ou seja, urna perda 4 vezes maior para o nitrogênio da uréia do que o nitrogênio da aquamônia nas condições experimentais. / The objective of this work is to study the dynamic of nitrogen from urea and aqua ammonia sources in soil cropped with sugarcane (Saccharum spp) by means of isotopic 15N techniques to determine the fate of the nitrogen in terms of leaching, volatilization, plant uptake and nitrogen residues in the soil. The field studies were conducted at a site in Usina São José, Macatuba-SP. The SP 70- 1143 sugarcane cultivar (3rd ratoon) was used in Latossolo Vermelho-Arnarelo (LVA - sandy soil), which is representative of 45% of the region. The experimental design consisted of two nitrogen fertilizer treatments: one with urea the other with aqua ammonia and a third without nitrogen fertilization. Each treatment consisted of a plot with 15 rows, ten meters long with spacing of 1.40 rneters. Three subplots in each of the two nitrogen fertilizer plots were delimitated for 15 N applications. Each of these subplots were represented by 3 lines 1.5m long. Tensiometers, soil solution extractors and soil air collectors were installed on these subplots. The nitrogen fertilizer was applied at a dose of 100kg of N/ha 20cm deep and 15cm from the plant row. The labelled 15N nitrogen fertilizer consisted of urea -15N (3.413 atoms % 15N) and aqua ammonia (3.181 atms % 15N). The results obtained showed the following values for the nitrogen utilization efficiency aqua ammonia: 18.4% and urea: 14.4%. It was also observed that 25% (aqua ammonia) and 21% (urea) of nitrogen taken up by plants was found in the buried rhizospheres and roots. The mean value of the amount of N-NH3 volatilization from the soil was 0.15kg of N/ha during a period of 47 days. Only 2% was from the urea and aqua ammonia fertilizers. The residual nitrogen in the soil, until the depth of 1.25m was 22.8kg N/ha for urea and 13.5kg for aqua ammonia. The nitrogen leaching bellow the depth of 1.0m for the urea treatment was for times greater than that of the ammonia one.

Estudou-se a recuperação do nitrogênio pelo capim colonião var. Tobiatã, através da adição de fertilizante - 15N em diferentes épocas. As análises foram determinadas em três cortes, efetuados 5 a 7 semanas após cada adição do fertilizante marcado. Nas condições de realização deste trabalho, pode-se chegar as seguintes conclusões: 1. a maior recuperação (%), total para os três cortes após adubação com fertilizante - 15N, foi observada em fevereiro, junho, agosto e setembro, sendo respectivamente, 59,71; 53,81; 59,74 e 62,69%; 2. o efeito residual do nitrogênio, observado no segundo e terceiro corte após adubação com fertilizante - 15N, foi maior em junho, agosto e setembro, sendo respectivamente, 21,10; 18,11 e 22,47%; 3. o crescimento da planta foi reduzido no período de pós-florescimento, sendo o rendimento de matéria seca um bom parâmetro para tal estimativa; 4. o teor de nitrogênio acumulado, relação entre matéria seca em função do nitrogênio acumulado após adubação com fertilizante - 15N e relação entre matéria seca acumulada em função do nitrogênio total aplicado, não fornecem evidências seguras para estimativa da recuperação do fertilizante nitrogenado aplicado; 5. na prática, em função das condições em que realizou-se este estudo, as adubações nitrogenadas são melhor aproveitadas quando feitas em fevereiro, junho, agosto e setembro; 6. a adubação nitrogenada feita após cada corte aumenta o nitrogênio acumulado e consequentemente o teor de proteína bruta. / The nitrogen recovery was studied through 15N absorption by guineagrass cv. Tobiatã in several growth fkushes. For each 15N application three cuttings were perfomed at approximatelly 5-7 week interval. Under the above experimental conditions it was withdrawn the following conclusions: 1. highest values of nitrogen recovery in the three cuttings was observed for applied 15N in februar, june, august and september which was of 59.71; 53.81; 59.74 and 62.69% respectively; 2. residual effects of nitrogen observed in the second and third cuttings after 15N applications was of 21.10; 18.11; and 22.47% as determined for application in june, august and september respectively; 3. plant growth was reduced by low temperatures which were predominant during may, june and july matched with flowering period of guineagrass; 4. nitrogen content, relation between dry matter as function of nitrogen content after 15N applications and dry matter accumulation as function of applied nitrogen was not well related to the efficiency of nitrogen utilization; 5. both dry matter yield and nitrogen recovery showed best results for fertilizer application in february, june, august and september; 6. the nitrogenous fertilizer application after each cuting, showed hight nitrogen accumulation and consequently more crude protein.

O objetivo desta pesquisa de Mestrado é dissertar sobre o olhar judaico que, por suposição, permeia as obras de três fotógrafos contemporâneos e avaliar se há tendências que apontem para a judeidade das fotografias. Os artistas estudados são o israelense Adi Nes e as brasileiras de origem húngara Cláudia Andujar e Madalena Schwartz, que, respectivamente, produziram as séries Histórias Bíblicas (2003-2006), Marcados (1981-1983) e Crisálidas (1973-1976) publicadas em 2007, 2009 e 2012. Adi Nes (1966-), ao encenar em estúdio situações contemporâneas de miséria em Tel Aviv com atores representando personagens bíblicos (Noé, Abraão, Isaque, Jacó, Elias, José, Rute, Caim, Abel e Davi), reatualizou as histórias da Bíblia Hebraica, como faz o Midrash (livro ou trecho de comentários rabínicos), e, talmudicamente, conectou significantes aparentemente díspares que sugerem muitos significados. Cláudia Andujar (1931-) relacionou a situação indígena à história judaica, ao retratar os índios Yanomami com uma placa numerada no pescoço (para identificar qual fora vacinado), o que remete aos números tatuados na pele dos prisioneiros que ingressavam nos campos de extermínio durante a Shoá, o que, em contrapartida, reforça a ameaça à sobrevivência dos índios quando os brancos invadem as suas terras. Madalena Schwartz (1921-1993) fotografou travestis e transformistas do teatro underground realizado pelo Dzi Croquettes, grupo que, ao transitar entre os gêneros masculino e feminino, cultivavam identidades híbridas, fragmentadas e vivenciavam uma condição de exílio compartilhada pela artista, devido aos seus deslocamentos transculturais, ao fazer o percurso migratório Budapeste-Buenos Aires-São Paulo. / The aim of this research is to discourse about the Jewish eye that, by assumption, permeates the work of three contemporary photographers and evaluate if there are tendencies that point to the Jewishness of photographies. The studied artists are the Israeli Adi Nes and the Brazilians of Hungarian origin Cláudia Andujar e Madalena Schwartz, that, respectively, produced the series Biblical Stories (2003-2006), Marcados [Marked] (1981-1983) and Crisálidas [Chrysalides] (1973-1976) published in 2007, 2009 and 2012. Adi Nes (1966-), by staging in studio contemporary situations of misery in Tel Aviv with actors representing biblical characters (Noah, Abraham, Isaac, Jacob, Elijah, Joseph, Ruth, Cain, Abel and David), re-updated the stories of Hebrew Bible, as does Midrash (book or excerpt of rabbinic commentaries) and, talmudically, connected signifiers apparently different that suggest a lot of meanings. Cláudia Andujar (1931-) correlated the indigenous situation to Jewish history, by depicting the Indians Yanomami with a numbered plaque in neck (to identify who was vaccinated), what links to the numbers tattooed in the skin of prisoners that enter in death camps during Shoah, what, in return, reinforces the threat to survival of Indians when white people invade their lands. Madalena Schwartz (1921-1993) photographed travestites and crossdressers of underground theatre done by Dzi Croquettes, group that, by transiting between masculine and feminine genders, cultivated hibrid, fragmented identities and experienced an exilic condition shared by the artist, due to her transcultural moves, by doing the migratory route Budapest-Buenos Aires-São Paulo.

O objetivo desta pesquisa de Mestrado é dissertar sobre o olhar judaico que, por suposição, permeia as obras de três fotógrafos contemporâneos e avaliar se há tendências que apontem para a judeidade das fotografias. Os artistas estudados são o israelense Adi Nes e as brasileiras de origem húngara Cláudia Andujar e Madalena Schwartz, que, respectivamente, produziram as séries Histórias Bíblicas (2003-2006), Marcados (1981-1983) e Crisálidas (1973-1976) publicadas em 2007, 2009 e 2012. Adi Nes (1966-), ao encenar em estúdio situações contemporâneas de miséria em Tel Aviv com atores representando personagens bíblicos (Noé, Abraão, Isaque, Jacó, Elias, José, Rute, Caim, Abel e Davi), reatualizou as histórias da Bíblia Hebraica, como faz o Midrash (livro ou trecho de comentários rabínicos), e, talmudicamente, conectou significantes aparentemente díspares que sugerem muitos significados. Cláudia Andujar (1931-) relacionou a situação indígena à história judaica, ao retratar os índios Yanomami com uma placa numerada no pescoço (para identificar qual fora vacinado), o que remete aos números tatuados na pele dos prisioneiros que ingressavam nos campos de extermínio durante a Shoá, o que, em contrapartida, reforça a ameaça à sobrevivência dos índios quando os brancos invadem as suas terras. Madalena Schwartz (1921-1993) fotografou travestis e transformistas do teatro underground realizado pelo Dzi Croquettes, grupo que, ao transitar entre os gêneros masculino e feminino, cultivavam identidades híbridas, fragmentadas e vivenciavam uma condição de exílio compartilhada pela artista, devido aos seus deslocamentos transculturais, ao fazer o percurso migratório Budapeste-Buenos Aires-São Paulo. / The aim of this research is to discourse about the Jewish eye that, by assumption, permeates the work of three contemporary photographers and evaluate if there are tendencies that point to the Jewishness of photographies. The studied artists are the Israeli Adi Nes and the Brazilians of Hungarian origin Cláudia Andujar e Madalena Schwartz, that, respectively, produced the series Biblical Stories (2003-2006), Marcados [Marked] (1981-1983) and Crisálidas [Chrysalides] (1973-1976) published in 2007, 2009 and 2012. Adi Nes (1966-), by staging in studio contemporary situations of misery in Tel Aviv with actors representing biblical characters (Noah, Abraham, Isaac, Jacob, Elijah, Joseph, Ruth, Cain, Abel and David), re-updated the stories of Hebrew Bible, as does Midrash (book or excerpt of rabbinic commentaries) and, talmudically, connected signifiers apparently different that suggest a lot of meanings. Cláudia Andujar (1931-) correlated the indigenous situation to Jewish history, by depicting the Indians Yanomami with a numbered plaque in neck (to identify who was vaccinated), what links to the numbers tattooed in the skin of prisoners that enter in death camps during Shoah, what, in return, reinforces the threat to survival of Indians when white people invade their lands. Madalena Schwartz (1921-1993) photographed travestites and crossdressers of underground theatre done by Dzi Croquettes, group that, by transiting between masculine and feminine genders, cultivated hibrid, fragmented identities and experienced an exilic condition shared by the artist, due to her transcultural moves, by doing the migratory route Budapest-Buenos Aires-São Paulo.

O presente trabalho teve por objetivo realizar experimentos de incorporação de precursores isotopicamente marcados em produtos naturais isolados do meio de cultura de duas espécies de fungos do gênero Penicillium, de maneira a se verificar a rota de biossíntese dos compostos produzidos pelas linhagens P. citrinum F53 e P. oxalicum F30. Para tanto, os meios de cultura utilizados na fermentação das linhagens foram enriquecidos com os seguintes precursores: [1-13C1]acetato de sódio, [1,2-13C2]acetato de sódio, [2,3-13C2]propionato de sódio, [metil-13C1]metionina, [1-13C1]glicose, [U-13C5]ornitina, [U-13C6]lisina, [U-13C5]prolina, [U-13C6]histidina, [2-indol-13C1]triptofano e [U-13C6]ácido antranílico, separadamente. Ao final do período de fermentação, as culturas foram separadamente submetidas à extração em fase sólida e analisadas por CLAE/UV/EM/IES. Os experimentos de incorporação que apresentaram resultados positivos tiveram seus produtos purificados por CLAE/UV e analisados por RMN de 13C. Os resultados obtidos mostraram que dois dihidropirrois produzidos por P. citrinum F53 são formados por uma rota biossintética mista, oriunda de um resíduo de ornitina, um grupo metila derivado da metionina e uma cadeia policetídica derivada do acetato. Os alcaloides citrinalina B e 17-hidroxicitrinalina B, também produzidos por P. citrinum F53, são ambos derivados de dois resíduos de aminoácidos, ornitina e triptofano (via ácido antranílico), e dois grupos isopreno derivados da glicose (via mevalonato). Os alcaloides oxalina e meleagrina, produzidos por P. oxalicum F30, são formados a partir de uma via biossintética mista derivada de dois resíduos de aminoácidos, histidina e triptofano (via ácido antranílico), e grupos metila derivados da metionina. / The present investigation aimed to carry out feeding experiments for the incorporation of isotopic labeled precursors on natural products isolated from the culture media of two fungal species belonging to the Penicillium genus, in order to verify the biosynthetic pathway of the compounds produced by the P. citrinum F53 and P. oxalicum F30 fungal strains. Culture media used in the fermentation of the fungal strains were enriched with the following isotopic labeled precursors: [1-13C1]sodium acetate, [1,2-13C2]sodium acetate, [2,3-13C2]sodium propionate, [methyl-13C1]methionine, [1-13C1]glucose, [U-13C5]ornithine, [U-13C6]lysine, [U-13C5]proline, [U-13C6]histidine, [2-indol-13C1]tryptophan, and [U-13C6]anthranilic acid, separately. At the end of the fermentation period, culture media were separately subjected to solid phase extraction and analyzed by LC/UV/ESI/MS. The incorporation experiments that showed positive results were purified by HPLC/UV, and the pure compounds labeled in different positions were then analyzed by 13C-NMR. The results demonstrated that two dihydropyrroles produced by P. citrinum F53 were formed via a mixed biosynthetic route, derived from ornithine, a methyl group derived from methionine, and a polyketide chain derived from acetate. The alkaloids citrinalin B and 17-hydroxycitrinalin B, also produced by P. citrinum F53, are both derived from two amino acid residues, ornithine and tryptophan (via anthranilic acid), and two isoprene units derived from glucose via the mevalonate pathway. The alkaloids oxaline and meleagrine, produced by P. oxalicum F30, are formed via a mixed biosynthetic pathway by two amino acid residues, histidine and tryptophan (via anthranilic acid), and methyl groups derived from methionine.

O presente trabalho teve por objetivo realizar experimentos de incorporação de precursores isotopicamente marcados em produtos naturais isolados do meio de cultura de duas espécies de fungos do gênero Penicillium, de maneira a se verificar a rota de biossíntese dos compostos produzidos pelas linhagens P. citrinum F53 e P. oxalicum F30. Para tanto, os meios de cultura utilizados na fermentação das linhagens foram enriquecidos com os seguintes precursores: [1-13C1]acetato de sódio, [1,2-13C2]acetato de sódio, [2,3-13C2]propionato de sódio, [metil-13C1]metionina, [1-13C1]glicose, [U-13C5]ornitina, [U-13C6]lisina, [U-13C5]prolina, [U-13C6]histidina, [2-indol-13C1]triptofano e [U-13C6]ácido antranílico, separadamente. Ao final do período de fermentação, as culturas foram separadamente submetidas à extração em fase sólida e analisadas por CLAE/UV/EM/IES. Os experimentos de incorporação que apresentaram resultados positivos tiveram seus produtos purificados por CLAE/UV e analisados por RMN de 13C. Os resultados obtidos mostraram que dois dihidropirrois produzidos por P. citrinum F53 são formados por uma rota biossintética mista, oriunda de um resíduo de ornitina, um grupo metila derivado da metionina e uma cadeia policetídica derivada do acetato. Os alcaloides citrinalina B e 17-hidroxicitrinalina B, também produzidos por P. citrinum F53, são ambos derivados de dois resíduos de aminoácidos, ornitina e triptofano (via ácido antranílico), e dois grupos isopreno derivados da glicose (via mevalonato). Os alcaloides oxalina e meleagrina, produzidos por P. oxalicum F30, são formados a partir de uma via biossintética mista derivada de dois resíduos de aminoácidos, histidina e triptofano (via ácido antranílico), e grupos metila derivados da metionina. / The present investigation aimed to carry out feeding experiments for the incorporation of isotopic labeled precursors on natural products isolated from the culture media of two fungal species belonging to the Penicillium genus, in order to verify the biosynthetic pathway of the compounds produced by the P. citrinum F53 and P. oxalicum F30 fungal strains. Culture media used in the fermentation of the fungal strains were enriched with the following isotopic labeled precursors: [1-13C1]sodium acetate, [1,2-13C2]sodium acetate, [2,3-13C2]sodium propionate, [methyl-13C1]methionine, [1-13C1]glucose, [U-13C5]ornithine, [U-13C6]lysine, [U-13C5]proline, [U-13C6]histidine, [2-indol-13C1]tryptophan, and [U-13C6]anthranilic acid, separately. At the end of the fermentation period, culture media were separately subjected to solid phase extraction and analyzed by LC/UV/ESI/MS. The incorporation experiments that showed positive results were purified by HPLC/UV, and the pure compounds labeled in different positions were then analyzed by 13C-NMR. The results demonstrated that two dihydropyrroles produced by P. citrinum F53 were formed via a mixed biosynthetic route, derived from ornithine, a methyl group derived from methionine, and a polyketide chain derived from acetate. The alkaloids citrinalin B and 17-hydroxycitrinalin B, also produced by P. citrinum F53, are both derived from two amino acid residues, ornithine and tryptophan (via anthranilic acid), and two isoprene units derived from glucose via the mevalonate pathway. The alkaloids oxaline and meleagrine, produced by P. oxalicum F30, are formed via a mixed biosynthetic pathway by two amino acid residues, histidine and tryptophan (via anthranilic acid), and methyl groups derived from methionine.

Este trabalho objetivou o estudo de rotas de formação de metabólitos secundários utilizando precursores isotopicamente marcados com 13C. Os experimentos de crescimento com adição de [1-13C]acetato, [1,2-13C2]acetato e [U-13C315N1]-L-cisteína para o fungo do ambiente marinho Penicillium sp. DRF2 mostrou que as ciclotiocurvularinas são provenientes da rota de formação de policetídeos e pela incorporação de L-cisteína, depois da transformação desta em 3-mercaptopiruvato. Os resultados sugerem que a formação das ciclotiocurvularinas provém de um processo de detoxificação da α,β-desidrocurvularina. O estudo do metabolismo secundário de Aspergillus sp. DLM3-8, também do ambiente marinho, mostrou que o seu perfil metabólico produzido em experimentos de crescimento sob diferentes condições é constante. Os experimentos de incorporação de precursores isotopicamente marcados com 13C na naftoquinonaimina, produzida por Aspergillus sp. DLM3-8 foram inconclusivos, indicando que outras abordagens experimentais devem ser realizadas para se investigar a biossíntese deste metabólito. / This investigation aimed investigated the formation routes of secondary metabolites using 13C-labelled precursors. Feeding experiments with [1-13C]acetate, [1,2-13C2]acetate and [U-13C315N1]-L-cysteine within the growth medium of the marine-derived fungi Penicillium sp. DRF2 showed that cyclothiocurvularins are derived from polyketides and from the incorporation of a L-cysteine residue, after its transformation into 3-mercaptopyruvate. The results suggest that the formation of cyclothiocurvularins is derived from a detoxification process ofα,β-dehydrocurvularin. Investigation of the secondary metabolism of a marine-derived Aspergillus sp. DLM3-8 indicated a stable metabolic profile under a variety of growth conditions. Feeding experiments with 13C-labelled precursors for the biosynthesis investigation of naphthoquinoneimine were inconclusive, indicating that other methodologies should be envisaged in order to investigate the biosynthesis of this metabolite.

Este trabalho objetivou o estudo de rotas de formação de metabólitos secundários utilizando precursores isotopicamente marcados com 13C. Os experimentos de crescimento com adição de [1-13C]acetato, [1,2-13C2]acetato e [U-13C315N1]-L-cisteína para o fungo do ambiente marinho Penicillium sp. DRF2 mostrou que as ciclotiocurvularinas são provenientes da rota de formação de policetídeos e pela incorporação de L-cisteína, depois da transformação desta em 3-mercaptopiruvato. Os resultados sugerem que a formação das ciclotiocurvularinas provém de um processo de detoxificação da α,β-desidrocurvularina. O estudo do metabolismo secundário de Aspergillus sp. DLM3-8, também do ambiente marinho, mostrou que o seu perfil metabólico produzido em experimentos de crescimento sob diferentes condições é constante. Os experimentos de incorporação de precursores isotopicamente marcados com 13C na naftoquinonaimina, produzida por Aspergillus sp. DLM3-8 foram inconclusivos, indicando que outras abordagens experimentais devem ser realizadas para se investigar a biossíntese deste metabólito. / This investigation aimed investigated the formation routes of secondary metabolites using 13C-labelled precursors. Feeding experiments with [1-13C]acetate, [1,2-13C2]acetate and [U-13C315N1]-L-cysteine within the growth medium of the marine-derived fungi Penicillium sp. DRF2 showed that cyclothiocurvularins are derived from polyketides and from the incorporation of a L-cysteine residue, after its transformation into 3-mercaptopyruvate. The results suggest that the formation of cyclothiocurvularins is derived from a detoxification process ofα,β-dehydrocurvularin. Investigation of the secondary metabolism of a marine-derived Aspergillus sp. DLM3-8 indicated a stable metabolic profile under a variety of growth conditions. Feeding experiments with 13C-labelled precursors for the biosynthesis investigation of naphthoquinoneimine were inconclusive, indicating that other methodologies should be envisaged in order to investigate the biosynthesis of this metabolite.