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Maturação in vitro de oócitos de caninos (Canis familiaris) na presença de cisteína e α-TocoferolCavalcante, Liziane Ferraresi Holanda January 2009 (has links)
O desenvolvimento de meios de cultivo eficazes para a maturação in vitro de oócitos caninos tem sido um desafio para os pesquisadores em reprodução animal. O estresse oxidativo desempenha papel fundamental na maturação oocitária, uma vez que altas concentrações de espécies reativas ao oxigênio levam ao dano celular e apoptose. O objetivo desta pesquisa foi determinar as taxas de maturação nuclear de oócitos caninos na presença de cisteína e α-tocoferol, substâncias conhecidas por suas propriedades antioxidantes. No experimento 1, avaliou-se a taxa de maturação nuclear de oócitos caninos mantidos em meio TCM-199 modificado (A) (controle) ou acrescido de 0,57mM de cisteína (B). No experimento 2, determinou-se as taxas de maturação nuclear na presença de diferentes concentrações de α-tocoferol em duas etapas independentes: experimento 1 (0, 10, 50μM) e experimento 2 (0, 100 e 500μM). Os dados foram analisados pelo teste do Qui-quadrado (P < 0,05). No experimento 1, não foi observada diferença estatística entre as taxas de Metáfase I/Anáfase I (MI/AI) e Metáfase II (MII) entre os oócitos do grupo controle (A) (7,5%, 16/213; 1,9%, 4/213) e os oócitos do grupo acrescido de cisteína (B) (6,3%, 14/223; 0,9%, 2/223). No experimento 2, não houve diferença significativa nas taxas de MI e MII dos oócitos entre os tratamentos da primeira etapa: controle (26,8%, 29/108), 10μM (22,6%, 26/115) e 50μM (29,1%, 30/103). Na segunda parte do experimento, a percentagem de oócitos que retomaram a meiose (VGBD à MII) foi de 31,9% (31/97), 34,9% (39/112) e 51,5% (54/105) para os grupos controle,100 e 500μM de α-tocoferol respectivamente (P < 0,05). Entretanto, nenhum aumento nas taxas de MII foi observado quando foram utilizadas as concentrações de 100μM (0,9%, 1/112) ou 500μM (1,0%, 1/105) de α- tocoferol no meio. Concluiu-se que, o TCM-199 modificado suplementado com cisteína não foi eficaz em elevar os índices de maturação in vitro de oócitos caninos. Ainda, a suplementação de α-tocoferol não afetou as taxas de MII de oócitos caninos. / The development of effective culture media for in vitro maturation of canine oocytes has been a challenge for researchers in animal reproduction. Oxidative stress plays a critical role in oocyte maturation since high concentrations of reactive oxygen species lead to cell damage and apoptosis. This research aimed to determine the rates of nuclear maturation of canine oocytes in the presence of cysteine and α-tocopherol, substances known for its antioxidant properties. In experiment 1, the rates of oocytes nuclear maturation exposed to modified TCM-199 (A) (control) or added with 0.57mM cysteine (B) were evaluated. In experiment 2, the rates of oocytes nuclear maturation in the presence of different concentrations of α-tocopherol were determined in two independent essays: experiment 1 (0, 10 and 50μM) and experiment 2 (0, 100 and 500μM). Data were analyzed by the Chi-square test (P < 0.05). The data obtained in experiment 1 allowed no difference among the oocytes in Metaphase I/Anaphase (MI/AI) (7.5%, 16/213; 1.9%, 4/213) and Metaphase II (MII) (6.3%, 14/223; 0.9%, 2/223) rates observed in the medium without or supplemented with cysteine respectively. In experiment 2, there was no significant difference in the rates of MI and MII oocytes among treatments designed for the first essay: control (26.8%, 29/108), 10μM (22.6%, 26/115) and 50μM (29.1%, 30/103). In the second part of the experiment, the percentage of oocytes that resumed meiosis (GVBD to MII) was 31.9% (31/97), 34.9% (39/112) and 51.5% (54/105) for control, 100 and 500μM groups respectively (P < 0.05). However, no improvement on rates of MII was observed when either 100 or 500μM α-tocopherol was added in medium. It was concluded that, modified TCM-199 supplemented with cysteine, was not effective in raising the rates of in vitro maturation of bitch oocytes. Moreover, α-tocopherol supplement did not affect the rates of MII in canine oocytes.
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Expressão gênica das células do cumulus oophorus de bovinos após a vitrificaçãoArend, Felipe Lohmann January 2009 (has links)
Apesar da obtenção de animais nascidos vivos a partir de oócitos imaturos bovinos congelados ou vitrificados, um dos grandes desafios continua sendo o desenvolvimento de um método que proporcione melhores resultados de viabilidade pós-criopreservação. Assim como a ação dos crioprotetores empregados, a eficiência no processo de maturação in vitro (MIV) influi diretamente na taxa de desenvolvimento embrionário. Durante a maturação oocitária in vitro observa-se expansão e mucificação das células da granulosa que formam o complexo cumulus oophorus-oócito (CCO), em função da intensa síntese de componentes da matriz extracelular. Essas modificações no aspecto do cumulus são utilizadas como indicativo da ocorrência de maturação oocitária e contribuem para que ocorra a fecundação. A expressão gênica de proteínas associadas à matriz extracelular das células do cumulus pode estar sob influência de fatores de origem oocitária e de composição do meio de MIV. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão gênica das proteínas ácido hialurônico sintase 2 (HAS2), link protein (HAPLN1), conexina 43 (GJA1) e HSP70-1 (proteína de choque térmico) em células do cumulus oophorus de oócitos imaturos bovinos submetidos a exposição e/ou vitrificação em duas soluções crioprotetoras e, posteriormente, maturados in vitro. Foram comparadas duas soluções de vitrificação (SV): SV1 = 20% de etileno glicol (EG) + 20% de 1,2 propanediol (PRO), e SV2 = 20% de EG + 20% DMSO + 0,5M de sacarose. Os CCOs foram obtidos a partir de ovários coletados de fêmeas bovinas logo após o abate, selecionados morfologicamente e distribuídos em 6 grupos experimentais: G1 (AOC), CCOs não maturados; G2 (AMC), CCOs submetidos à MIV; G3 (B1EC), CCOs expostos à SV1 e submetidos à MIV; G4 (B2EC), CCOs expostos à SV2 e submetidos à MIV; G5 (A1VC), CCOs vitrificados com a SV1 e submetidos à MIV; G6 (A2VC), CCOs vitrificados com a SV2 e submetidos à MIV. A MIV foi realizada em TCM 199 suplementado com soro de égua em estro, à 39oC, 5% de CO2 e máxima umidade relativa, por 22 a 24 horas. Após a MIV, 5 CCOs de cada grupo (G2 a G6), foram coletados, submetidos ao desnudamento mecânico e as células do cumulus foram concentradas por centrifugação e acondicionadas em tubos cônicos de 0,5 ml em nitrogênio líquido. O restante dos CCOs destes grupos foi submetido a fecundação e cultivo in vitro sob condições semelhantes a MIV. Para a extração do RNA total das amostras de células do cumulus foi utilizado o reagente TRIzol®. O RNA total foi re-suspenso e as amostras foram submetidas à captação específica do mRNA utilizando-se um “kit” comercial de separação magnética. Os mRNAs foram transcritos reversamente em cDNA utilizando-se a técnica de RT-PCR, para avaliar os padrões de expressão dos quatro transcritos de bovinos (link protein, HAS2, conexina 43 e HSP70-1). O grupo de oócitos imaturos exposto a SV1 apresentou uma taxa de blastocistos (30,1%) semelhante ao grupo controle (38,1%) e significativamente superior ao grupo exposto a SV2, (16,9%; p=0,0013). Houve diferença significativa (p<0,0001) entre o grupo controle e os grupos vitrificados nas soluções SV1 e SV2, tanto na taxa de clivagem (respectivamente, 79,2%; 22,1% e 43,3%) quanto no desenvolvimento até o estádio de blastocisto (respectivamente, 35,6%; 0% e 4,1%). A análise dos resultados de abundância relativa obtida a partir das células do cumulus oophorus de 5 CCOs bovinos em cada um dos seis grupos experimentais, após três repetições, não mostrou diferença significativa entre os diferentes grupos testados para os transcritos de link protein (p=0,738), HAS2 (p=0,772), conexina 43 (p=0,130) e HSP70-1 (p=0,333). / The major challenge in the cryopreservation of bovine immature oocytes is still developing a method that provides adequate results of survival and viability after vitrification. As the action of cryoprotectants employed, the efficiency of in vitro maturation (IVM) process directly influences the embryonic development. The mucification and expansion of the granulosa cells from the cumulus oophorus-oocyte complex (COC), caused by copious synthesis and deposition of extracellular matrix components, is observed during oocyte maturation in vitro. Such changes in the cumulus appearance are used as indicative of the oocyte maturation occurrence and contribute to fertilization. The gene expression of proteins associated with the extracellular matrix of the cumulus cells could be on the oocyte and/or IVM medium composition influences. The aim of this study was to evaluate, through the RT-PCR technique, the gene expression of hyaluronic acid synthase protein 2 (HAS2), link protein (HAPLN1), connexin 43 (GJA1) and heat shock protein 70 (HSP70-1) in the cumulus oophorus cells of bovine immature oocytes exposed and/or vitrified in cryoprotectant solutions and then matured in vitro. We compared two vitrification solutions (VS): VS1 = 20% ethylene glycol (EG) + 20% 1,2 propanediol (PRO), and VS2 = 20% EG + 20% DMSO + 0.5 M sucrose. The COCs were obtained from cow ovaries, collected right after slaughter. After the morphological selection, the COCs were allocated into six experimental groups: G1- imature COCs; G2- COCs subjected to IVM; G3- COCs exposed to VS1 and subjected to IVM; G4- imature COCs exposed to VS2 and submitted to IVM; G5- COCs vitrified with VS1 and subjected to IVM; and G6- COCs vitrified with VS2 and submitted to IVM. The IVM was performed in TCM 199 supplemented with oestrus mare serum, at 39°C, under 5% of CO2 and maximum relative humidity, for 22 to 24 hours. After IVM, five COCs in each group (G2 to G6) were collected, the oocytes were stripped of cumulus cells by vortexing and the cells were concentrated by centrifugation and placed in conical tubes of 0.5 ml in liquid nitrogen. In each group COCs were subjected to in vitro fertilization and culture under similar conditions from used in MIV. The RNA extraction from samples containing the cumulus cells was performed by using TRIzol® reagent protocol. Total RNA was re-suspended and the samples were subjected to the specific capture of mRNA using a commercial kit for magnetic separation. The mRNAs were reverse transcribed into cDNA using the RT-PCR technique to evaluate patterns of expression of the four bovine transcripts (link protein, HAS2, connexin 43 and HSP70-1). The immature oocytes group exposed to VS1 showed a blastocyst rate (30.1%) similar to the control group (38.1%) and significantly higher than the group exposed to VS2, (16.9%, p = 0.0013). Significant difference (p <0.0001) was observed between the control group and groups vitrified in the VS1 and VS2, both in the rate of cleavage (respectively, 79.2%, 22.1% and 43.3%) and the development to the blastocyst stage (respectively, 35.6%, 0% and 4.1%). The results of relative abundance obtained from the cumulus cells of the five bovine COCs in each experimental group, after three repetitions, showed no significant difference between the groups tested for the transcripts of link protein (p = 0.738 ), HAS2 (p = 0.772), connexin 43 (p = 0.130) and HSP70-1 (p = 0.333).
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Maturação in vitro de oócitos de caninos domésticos (Canis familiaris)Silva, Artur Emílio Freitas e January 2010 (has links)
Este estudo foi realizado com o objetivo de: 1) determinar a influência da tensão de oxigênio na viabilidade das células do cumulus oriundas de oócitos caninos maturados em meio com alta concentração de glicose (11,0 mM); 2) determinar a taxa de maturação in vitro de oócitos caninos mantidos em meio contendo altas concentrações de glicose (11,0 mM), bem como avaliar o efeito da tensão de oxigênio sobre a taxa de maturação in vitro de oócitos caninos; 3) determinar a influência da adição de água de coco em pó (ACP-318®) ao meio de maturação com alta concentração de glicose (11,0 mM) na taxa de maturação in vitro de oócitos caninos. O meio de maturação usado nos experimentos foi TCM 199 suplementado com 26,19 mM de bicarbonato de sódio, 50 μg/ml de gentamicina, 0,20 mM de ácido pirúvico, 20 μg/ml de estradiol, 0,5 μg/ml de FSH e 0,03 UI/ml hCG. O meio de maturação era modificado de acordo com a proposta experimental apresentada. Os resultados do primeiro experimento mostraram diferença estatística nas taxas de apoptose nas células do cumulus entre os três grupos avaliados. Foi concluído que células do cumulus oriundas de COCs caninos cultivados em meio contendo altas concentrações de glicose apresentaram significativamente menos apoptose do que as cultivadas em meio com soro fetal bovino, e que a baixa tensão de oxigênio foi eficiente em reduzir a ocorrência de apoptose nas células do cumulus. No segundo experimento deste estudo, os índices mais elevados (p < 0,001) de oócitos degenerados foram obtidos, quando TCM 199 era suplementado com 10 % de FCS. Uma influência positiva sobre a retomada de meiose e aquisição de metáfase I (MI) foi observada quando os oócitos caninos foram maturados em meio livre de soro e com altas concentrações de glicose. Foi concluído que a adição de FCS ao meio de maturação de oócitos caninos resulta em altas taxas de degeneração dos oócitos e que a redução da tensão de oxigênio não resultou em melhora da taxa de maturação nuclear dos oócitos caninos. Os resultados obtidos no terceiro experimento mostraram que nos grupos experimentais cujo meio foi suplementado com ACP-318®, houve melhora significativa (p < 0,05) na taxa de maturação nuclear dos oócitos caninos. Oócitos maturados em meio suplementado com 5% de ACP-318® mostraram-se menos susceptíveis a alterações na configuração típica da cromatina que os maturados com 10% de ACP-318® no meio de maturação. Os resultados sugerem que tanto a integridade da morfologia nuclear, como a progressão da meiose dos oócitos caninos são positivamente influenciadas quando estes são expostos ao TCM 199 com alta concentração de glicose e suplementado com 5% de ACP-318®. / This study was designed: 1) determine the influence of oxygen tension on cumulus cell (CC) viability from canine oocytes in vitro matured in high glucose medium (11.0 mM); 2) determine the influence of two oxygen tensions on the nuclear maturation of canine oocytes in vitro matured in high glucose medium (11.0 mM); 3) determine the influence of powdered coconut water (ACP-318®) diluted in high glucose (11.0 mM) TCM199 in the achievement of nuclear in vitro maturation (IVM) of canine oocytes. Basic medium used in the experiments was TCM 199 suplemented with 26.19 mM sodium bicarbonate, 50 μg/ml gentamicin, 0.20 mM piruvic acid, 20 μg/ml oestradiol, 0.5 μg/ml FSH and 0.03 IU/ml hCG. Maturation medium was modified following the beyond described experimental proposals. The results of the first experiment showed that there was statistical difference in the rate of CCs apoptosis among the three groups. It was concluded that CCs of canine COCs cultured in high-glucose medium showed significantly less apoptosis than those cultured in medium with FCS. Low O2 tension was efficient in reducing apoptosis in canine CCs. In the second experiment of this study, the highest rates (p < 0.001) of degenerated oocytes were achieved when TCM 199 was added with 10% FCS. A positive influence on the meiosis resumption and on the MI acquisition rate was observed when canine oocytes were matured in defined high-glucose medium. It was concluded that the addition of FCS in the maturation medium of canine oocytes result in a high level of degenerated oocytes, and that the low level of oxygen tension did not improve the nuclear maturation of canine oocytes. The results achieved on the third experiment showed that in the experimental groups with the medium supplemented with ACP-318® (groups 2 and 3) enhanced the rates of oocytes’ nuclear maturation (p < 0.05). Ooocytes matured in medium added with 5% powdered coconut water (ACP-318®) were less prone to deviation of typical chromatin configuration than those matured in medium added with 10% ACP-318®. The results suggest that oocytes’ nuclear morphology integrity and meiosis achievement were positively influenced when exposed to high glucose TCM199 supplemented with 5% powdered coconut water.
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Capital de risco, financiamento e tempo de maturação : um estudo da evolução da indústria de Venture Capital e Private Equity, com ênfase em um estudo de caso brasileiroPacheco, Jean Carlos January 2016 (has links)
O presente trabalho estuda as alternativas de financiamento do processo de criação de valor de uma empresa, com ênfase na opção de capital de risco (venture capital). O estudo está dividido em três capítulos. O primeiro apresenta, com base nas teorias de finanças, o processo de tomada de decisão de financiamento, podendo este ser via capital próprio ou dívida, sendo apresentadas as principais opções destas duas modalidades gerais. O segundo capítulo aborda a evolução histórica, a forma de funcionamento e os principais mercados da indústria de capital de risco no mundo. O terceiro capítulo efetua análise de dados para um período de 15 anos de uma gestora privada, onde se avaliou, para uma amostra de 24 empresas de diversos setores, qual é a curva de maturação dos investimentos da gestora. Verificou-se que, principalmente para as pequenas e médias empresas, o processo de financiamento é um elemento de grande dificuldade na construção e crescimento das suas operações, com prazos mais longos de maturação. Ou seja, como principal resultado, o estudo dos dados dos investimentos realizados pela empresa gestora privada no Brasil sugere que o processo de criação de valor destas empresas demanda um tempo adicional ao que tradicionalmente se espera. Diante do crescimento da indústria de capital de risco no mundo, esta modalidade de financiamento pode apresentar maior disseminação e escolha por esta alternativa pelas pequenas e médias empresas, tendo em consideração a questão da curva de maturação mais dilatada. / The present research studies the financing alternatives of the process of creating value to a company, with emphasis on the option of venture capital. The study is divided into three chapters. The first presents, based on the theories of finance, the process of financing decision making, and it may be via equity or debt, presenting the main options of these two general procedures. The second chapter discusses the historical evolution, the form of operation and the main markets of the risk capital industry in the world. The third chapter performs data analysis for a period of 15 years of a private holding company, which evaluated, for a sample of 24 companies in various sectors, what is the maturation curve of the investments of the managing body. It was found that, especially for small and medium sized enterprises, the funding process is a key element of great difficulty in construction and growth of its operations, with longer deadlines of maturation. In other words, as main results, the study of the data of the investments made by the private company in Brazil suggests that the process of creation of value of these companies demand an additional time to which is traditionally expected. Before the growth of the venture capital industry in the world, this modality of financing may present greater dissemination and choice for this alternative by small and medium enterprises, taking into account the issue of maturation curve more dilated.
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Estratégias para indução de competência de oócitos bovinos com atividade da enzima glicose 6-fosfato desidrogenaseSalviano, Mauricio Barbosa January 2014 (has links)
O objetivo deste trabalho foi modificar os procedimentos da maturação in vitro (MIV) para induzir a competência de oócitos bovinos com intensa atividade da enzima glicose 6-fosfato desidrogenase (G6PDH), determinada pelo emprego do corante vital Azul de Cresil Brilhante (BCB). Foram realizados dois experimentos; no primeiro trabalho foi realizada a MIV de oócitos após a identificação da atividade da G6PDH, empregando-se a seguinte proporção: competentes (sem atividade enzimática)/não competentes - 10:01, respectivamente. Os resultados revelaram um efeito negativo dos oócitos não competentes sobre a capacidade dos competentes em realizarem a MIV, a FIV e a CIV. Os resultados sugerem que para aumentar a produção de embriões deve-se realizar a MIV de oócitos competentes e não competentes, separadamente. O objetivo do segundo experimento foi verificar se a prolongação do tempo de MIV (30h) afetaria as taxas de MIV, FIV e CIV obtidas a partir de oócitos não competentes. Os oócitos não competentes não foram afetados, positiva ou negativamente, pelo prolongamento do tempo de MIV, no entanto, os oócitos competentes sofreram decréscimo na capacidade de serem fecundados e desenvolverem-se até o estágio de blastocistos. Podemos concluir que as modificações realizadas no procedimento da MIV não foram capazes de induzir competência em oócitos com intensa atividade da enzima G6PDH. / The present work aimed modify the in vitro maturation (IVM) procedure to induce competence of bovine oocytes with high glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) activity. Two experiments were carried out; the first non-competent oocytes (with high enzymatic activity) were matured with competent oocyte (lower G6PDH activity) on proportion of 1:10, respectively. The second experiment aimed observe the effect of prolonged IVM (from 24 to 30h) on the cleavage and development rates in oocytes with higher enzymatic activity. Our data showed that oocytes with lower enzymatic activity did not induce competence of higher G6PDH activity oocyte. However, we observed a negatively effect on the cleavage and development rates on oocytes competent, then, to increase the number of embryos in vitro produced we need to mature oocytes competent and non-competent separately. In the second experiment, the non-competent gametes submitted to prolonged IVM were not affected, however, competent oocytes were negatively affect by prolonged IVM. We can concluded that the IVM modifications did not able to induce the competence in the oocytes with high G6PDH activity.
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Avaliação da idade e maturação óssea em crianças cardiopatas / Evaluation of bone age and skeletal maturation in children with heart diseaseMariana Martins e Martins 13 June 2012 (has links)
O estudo do crescimento e desenvolvimento é essencial para a Ortodontia, pois cada criança possui um padrão único. Na presença de doenças sistêmicas como as cardiopatias, um exame mais detalhado deve ser feito, uma vez que estas podem alterar o crescimento e desenvolvimento. Um dos métodos mais utilizados nesta avaliação é a análise da calcificação dos ossos da mão e punho. Porém, as modificações no tamanho e forma das vértebras cervicais vêm sendo muito utilizadas nas últimas décadas pelo fato de ser realizada em radiografias cefalométricas laterais, rotineiramente utilizadas no diagnóstico ortodôntico. Inicialmente, os objetivos deste trabalho foram verificar a correlação entre os métodos de obtenção da idade óssea e dos estágios de maturação óssea que utilizam os indicadores presentes na região de mão e punho e os presentes nas vértebras cervicais em um grupo de crianças cardiopatas e não cardiopatas. A partir da correlação positiva e significativa, utilizou-se o método das vértebras cervicais para comparar a idade óssea, a diferença entre idade óssea e cronológica e os estágios de maturação óssea entre crianças cardiopatas e não cardiopatas. A amostra foi formada por 120 crianças com idades entre 4,83 a 14,66 anos, atendidas no Ambulatório de Pediatria do Hospital Universitário Pedro Ernesto. Entre estas, 73 eram cardiopatas, todas portadoras de cardiopatias congênitas cianóticas e 47 não cardiopatas, que faziam apenas acompanhamento de rotina, com idades médias de 9,3 e 8,9 anos respectivamente. A idade e maturação óssea foram verificadas através de radiografias cefalométricas laterais e carpais. A determinação da idade óssea foi realizada pelo método de Mito et al. nas radiografias cefalométricas laterais e pelo método de Greulich e Pyle nas radiografias carpais. E, os estágios de maturação óssea foram obtidos pelo método de Hassel e Farman nas radiografias cefalométricas laterais e pelo método de Singer nas radiografias carpais. A correlação entre os métodos de obtenção da idade óssea e dos estágios de maturação óssea apresentou valores positivos e significativos; tanto para o grupo cardiopata, com r = 0,478 (p<0,001) para idade óssea e r = 0,616 (p<0,001) para os estágios de maturação óssea, quanto para o grupo não cardiopata, com r = 0,366 (p=0,024) para idade óssea e r = 0,613 (p<0,001) para os estágios de maturação óssea. As idades ósseas não apresentaram diferença significativa entre os grupos (p=0,394). As diferenças entre as idades cronológicas e ósseas não apresentaram diferença significativa tanto no grupo cardiopata (p=0,418), quanto para o grupo não cardiopata (p=0,143). Também não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos quando avaliada a quantidade de crianças que apresentavam idade óssea atrasada em relação à idade cronológica (p=0,395). O mesmo ocorreu quando avaliados os gêneros masculino (p = 0,060) e feminino (p = 0,313). A distribuição da amostra pelos estágios de maturação óssea não apresentou diferenças significativas entre os grupos (p=0,447). Os resultados do presente trabalho sugerem que a cardiopatia congênita, nesta faixa etária avaliada, não altera o padrão de maturação óssea analisado pelas vértebras cervicais. / The study of growth and development is essential for orthodontics, because each child has a unique pattern. In the presence of systemic diseases such as congenital heart disease, a more detailed examination must be made, since they may alter their growth and development. One of the methods used for this evaluation is bone ossification analysis of the hand and wrist region. However, changes in size and shape of the cervical vertebrae have been widely used in recent decades because it is performed in lateral cephalometric radiographs, routinely used in orthodontic diagnosis. Initially, our objectives were to assess the correlation between the methods for obtaining bone age and skeletal maturation stages using the indicators present in the hand and wrist region and in the cervical vertebrae in a group of children with and without heart disease. Based on the positive and significant correlation, the cervical vertebrae method was chosen to compare bone age, the difference between bone age and chronological and skeletal maturation stages between children with and without heart disease. The sample comprised 120 children aged 4.83 to 14.66 years, that attended the Pediatric Clinic of Pedro Ernesto University Hospital. Among these, 73 presented cyanotic congenital heart disease and 47 had no heart disease and were only on follow-up, with a mean age of 9.3 and 8.9 years respectively. The bone age and skeletal maturation were verified by lateral cephalometric radiographs and hand-wrist radiographs. The bone age determination was performed by the Mito et al. method on lateral cephalometric radiographs and by the Greulich and Pyle method on hand-wrist radiographs. The skeletal maturation stages were obtained by the Hassel and Farman method on lateral cephalometric radiographs and by the Singer method on hand-wrist radiographs. The correlation between the methods for obtaining bone age and skeletal maturation stages showed a positive and significant results, both for the heart disease group with r = 0.478 (p <0.001) for bone age and r = 0.616 (p <0.001) for skeletal maturation stages, and for non-heart disease group with r = 0.366 (p = 0.024) for bone age and r = 0.613 (p <0.001) for the skeletal maturation stages. The bone age did not differ significantly between groups (p = 0.394). The difference between chronological age and bone age showed no significant difference in both heart disease group (p = 0.418) and for non-heart disease group (p = 0.143). No significant differences were found between groups when the amount of children who had delayed bone age relative to chronological age (p = 0.395) were assessed. The same was found when males (p = 0.060) and females (p = 0.313) were evaluated. The sample distribution through skeletal maturation stages showed no significant differences between groups (p = 0.447). The results of this study suggest that congenital heart disease, in the evaluated age, does not alter skeletal maturation pattern examined by the cervical vertebrae method.
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Características qualitativas de oócitos obtidos por Laparoscopic Ovum Pick-up (LOPU) e da maturação nuclear em ovinos / Qualitative and nuclear maturation of oocytes obtained form folliculae aspration by sequential LOPU (Laparoscopic Ovum Pic-up) in sheepDenadai, Renan [UNESP] 27 September 2013 (has links) (PDF)
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000847150.pdf: 860477 bytes, checksum: 76e841df35fa2f2e934e0f4bedb91cbc (MD5) / O presente estudo visou avaliar a resposta ovariana a superestimulação utilizando 80UI de FSH e 300UI de eCG após ablação por laparoscopic ovum pic-up (LOPU1) de todos os folículos visíveis presentes em ambos os ovários. Determinar o melhor momento para realização de uma nova LOPU (LOPU2), mediante a avaliação ultrassonográfica dos ovários a cada 12 horas após LOPU1. E comparar a respostas ovariana do tratamento Duplo LOPU (DLOPU) com o tratamento One Shot adaptado de Baldassarre (1996), quanto a quantidades dos Complexos Cumulos-Oócito (COCs), e qualidade das estruturas obtidas e após processo de maturação in vitro (MIV) por 24 horas. Foi determinado o momento para realização da LOPU2 em 36 horas após a superestimulação. A média de folículos presentes na avaliação ultrassonográfica imediatamente antes a LOPU em ambos os tratamentos foi cerca de 9 estruturas, não diferindo da media de folículos aspirados, a taxa de recuperação comum aos dois tratamentos foi de 62,5%. A avaliação imediata das estruturas obtidas bem como a após 24 de MIV demonstrou que não houve diferença qualitativa COCs entre os tratamentos / The present study aimed to evaluate the ovarian response to superstimulation using 80UI FSH and eCG 300UI after ablation LOPU (LOPU1) of all follicles present in both ovaries. Determine mlehor time to make a new LOPU (LOPU2) by ultrasound evaluation of the ovaries every 12 hours LOPU1. And comparing the responses ovarian DLOPU treatment with the treatment Ono Shot adapted Baldassarre (1996) with the DLOPU described here, the amounts of COC and quality of the structures obtained after process and IVM for 24 hours. It was determined the time for completion of LOPU2 in 36 hours after the overstimulation. The mean number of follicles present in the ultrasonographic evaluation immediately before the LOPU in both treatments was about 9 structures did not differ from follicles aspirated media, the recovery rate common to the two treatments was 62.5%. Immediate assessment of the structures obtained as well as after 24 IVM demonstrated that COCs do not hear qualitative difference between treatments
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BIOLOGIA POPULACIONAL DE UMA NOVA ESPÉCIE DE AEGLIDAE (CRUSTACEA, ANOMURA) NA SUB-BACIA DO RIO JAGUARI - RS / POPULATION BIOLOGY OF A NEW SPECIES OF AEGLIDAE (CRUSTACEA, ANOMURA) FROM SUB-BASIN OF JAGUARI RIVER - RSLegramanti, Rosemari Parisi 22 February 2011 (has links)
This study aims to evaluate some aspects of the biology of a new species of aeglid at Jaguari River basin (in process of description), such as the population structure, the morphological sexual maturity and somatic growth in natural environment. These investigations were conducted from November/2007 to October/2008, in a section of stream Perau in Jaguari county-RS. Monthly collections were made and individuals were captured in two ways, with the help of 25 traps trap, and these were arranged in the late afternoon of one day and removed in the following morning. The second method of sampling was a surber placed in the opposite direction to the stream flow so that with the revolving stones vegetation and all kinds of substrate and the animals were dragged into the capture equipment. The Surber sampling was made with a sampling effort of 30 minutes. The organisms collected were sexed based on the presence of pleopods in females and absence of those in males and / or position of the genital openings. Individuals had the following body dimensions measured with a digital caliper with 0.01 mm of precision: cephalothoracic length (CL), cephalothoracic width (CW), width of the second abdominal somite (AW), length of propodus chela left (LLC), length of propodus right chela (LRC) and height of the larger chelae (HC). After sexing and measurements the animals were returned to the same location that where collected. During working hours we sampled 1774 individuals (1259 males, 512 females and 03 individuals not sexed). Males and females were grouped into size classes of CL, where was observed a bimodal distribution. Males has significantly larger sizes than females, according to the Mann-Whitney (p<0,05). The sex ratio was significantly different from 1:1 in most sampling periods (p <0.05) when considering the general data (surber + trap), but followed the expected in most months sampled with Surber (p<0,05). The highest incidence of ovigerous females occurred in autumn (65.11%), followed by winter (5.81%) and spring (1.75%). Although the juveniles had been found in all seasons, the highest frequencies of these in relation to adults were observed in autumn (20.43%) and winter (17.29%). The smallest ovigerous female sampled in the field measured 10.45 mm of CL. The size of individuals at the beginning of morphological sexual maturity was estimated, using the program REGRANS, in 12.78 and 10.78 mm CL for males and females respectively. Males Aegla sp. n exhibit heterochely, with a preponderance of left chela laterality, while females have isoquelia. After the pubertal changes, an additional change in the level of allometry in relation to the dimensions of the chelae was detected in adult males. As a result, two groups of morphotypes in adult males, here designated as morphotype I and II were recognized according to the state of development of the chelipeds. The growth curves of the cephalothorax, estimated for males and females, are described by the following equations: Ct = 26,57[1 e -0,0064(t+18,14) e Ct = 21,71[1 e-0,008(t+30,25), respectively. Males reached larger sizes than females and showed higher growth rates than those. The estimated longevity for males was 670 days while that for females was 736 days. This study seeks to contribute to the knowledge of the biology of a new species of aeglid, it is expected that it can provide inputs for further research on these crustaceans and also direct efforts to preserve the species of the family Aeglidae and therefore all headwater areas where these animals live. / O presente trabalho visa avaliar alguns aspectos da biologia de uma nova espécie de eglídeo da bacia do Rio Jaguari (em processo de descrição), como a estrutura populacional, a maturidade sexual morfológica e o crescimento somático em ambiente natural. As amostragens foram realizadas de novembro/2007 à outubro/2008, em um trecho do Córrego Perau, no município de Jaguari-RS. Foram realizadas coletas mensais e os indivíduos foram capturados de duas maneiras, com o auxílio de 25 armadilhas tipo covo, sendo que estas foram dispostas no final da tarde de um dia e retiradas pela manhã do dia seguinte. O segundo método de amostragem foi com auxílio de um surber disposto em sentido contrário à correnteza de modo que, com o revolvimento das pedras, vegetação e todo tipo de substrato, os organismos fossem arrastados para dentro do equipamento de captura. Na coleta com surber adotou-se um esforço amostral de 30 minutos. Os organismos coletados foram sexados com base na presença de pleópodos nas fêmeas e ausência destes nos machos e/ou posição das aberturas genitais. Os indivíduos tiveram as seguintes dimensões corporais mensuradas com um paquímetro digital com precisão de 0,01mm: comprimento do cefalotórax (CC), largura do cefalotórax (LC), largura do segundo somito abdominal (LA), comprimento do própodo quelar esquerdo (CPE), comprimento do própodo quelar direito (CPD) e altura do maior própodo quelar (ALT). Após registradas as medidas e a sexagem, os organismos foram devolvidos no mesmo local de onde coletados. Durante o tempo de trabalho foram amostrados 1774 indivíduos (1259 machos, 512 fêmeas e 03 indivíduos não-sexados). Machos e fêmeas foram agrupados em classes de CC, onde foi observada uma distribuição bimodal. Os machos apresentam tamanhos significativamente maiores que fêmeas, de acordo com o teste de Mann-Whitney (p<0,05). A proporção sexual foi significativamente diferente de 1:1 na maioria dos meses de amostragem (p<0,05) quando considerados os dados gerais (armadilha + surber), porém seguiu a esperada na maioria dos meses quando considerados indivíduos amostrados somente com surber (p>0,05). A maior incidência de fêmeas ovígeras ocorreu no outono (65,11%), seguido do inverno (5,81%) e primavera (1,75%). Embora os juvenis tenham ocorrido em todas as estações do ano, as maiores freqüências destes, em relação aos adultos, foram observadas no outono (20,43%) e no inverno (17,29%). A menor fêmea ovígera amostrada em campo mediu 10,45 mm. O tamanho dos indivíduos no início da maturidade sexual morfológica foi estimado,
utilizando o programa REGRANS, em 12,78 e 10,78mm de comprimento cefalotoráxico para machos e fêmeas respectivamente. Machos de Aegla sp. n. exibem heteroquelia, com preponderância de lateralidade da quela esquerda, enquanto fêmeas apresentam isoquelia. Após a muda puberal, uma mudança adicional no nível de alometria em relação as dimensões das quelas foi detectada em machos adultos. Como resultado, dois grupos de morfotipos em machos adultos, aqui designados como morfotipo I e II foram reconhecidos de acordo com o estado de desenvolvimento dos quelípodos. As curvas de crescimento do cefalotórax, estimadas para machos e fêmeas, são descritas pelas seguintes equações Ct = 26,57[1 e -0,0064(t+18,14) e Ct = 21,71[1 e-0,008(t+30,25) , respectivamente. Os machos atingiram tamanhos maiores que as fêmeas e apresentaram taxas de crescimento maiores que essas. A longevidade estimada para os machos foi de 670 dias e enquanto que para as fêmeas foi de 736 dias. O presente estudo busca contribuir com o conhecimento da biologia de uma nova espécie de eglídeo, espera-se que este possa servir de subsídios para novas investigações sobre estes crustáceos e também possa direcionar esforços para a preservação das espécies da família Aeglidae e, por consequência, de todas as áreas de nascentes onde vivem estes animais.
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Metodologias para avaliação da qualidade fisiológica e identificação do ponto de colheita de sementes de cultivares crioulas de milho / Methodologies for quality evaluation and identification of physiological point of seeds of harvest corn land varietiesNoal, Gisele 18 February 2013 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cultivars of maize landraces provide the farmer seed production with high genetic variability, resistance and wide adaptation, beyond the advantage that the farmer can select them and store them for use next season, without the purchase of inputs. However, due to the high genetic variability, standardized tests to determine the physiological quality of the seeds need to be adapted so that they can be applied to the Land varieties. Therefore, this study aims at evaluating different methodologies for evaluation of physiological and sanitary quality for growing maize landraces. We used seeds produced by farmers Seed Guardians of Creole Ibarama - RS. We evaluated the effect of these seeds (using various tests) and sanitary quality (for both methods of detection). Moreover, there was monitoring the process of seed maturation in different harvest periods. The germination test showed variations between the evaluation periods and different temperatures tested, and that the temperature of 25 º C and 6 º day of evaluation, we obtained the highest percentage of germination, for most cultivars. In cold test response variability occurred when the cultivars analyzed at different temperatures and exposure times. The pH of the exudate tests showed no significant difference between the variations tested methodologies. Land varieties for the tetrazolium test can be performed with less concentration of tetrazolium salt (0.07%). The point of harvest, as the physiological quality showed better results in the period was 20 to 30% moisture (held last harvest) and fungal incidence ranged between periods of maturation evaluated. / As cultivares crioulas de milho proporcionam ao agricultor a produção de sementes com alta variabilidade genética, ampla resistência e adaptação, além da vantagem de que próprio agricultor pode selecioná-las e armazená-las para utilização na próxima safra, sem necessidade da compra do insumo. Porém, devido a essa grande variabilidade genética, os testes padronizados para determinação da qualidade fisiológica das sementes necessitam ser adaptados para que possam ser aplicados as cultivares crioulas. Diante disso, esse trabalho tem como objetivo geral avaliar diferentes metodologias de análise da qualidade fisiológica e sanitária e estabelecer o ponto ideal de colheita; para cultivares crioulas de milho. Foram utilizadas sementes produzidas pelos agricultores Guardiões de Sementes Crioulas de Ibarama RS. Avaliou-se o vigor destas sementes (por meio de diferentes testes) e a qualidade sanitária (por dois métodos de detecção). Além disso, realizou-se o acompanhamento do processo de maturação das sementes em diferentes períodos de colheita. O teste de germinação apresentou variações entre os períodos de avaliação e as diferentes temperaturas testadas, sendo que, na temperatura de 25ºC e ao 6º dia de avaliação, obteve-se o maior porcentual de germinação, para maioria das cultivares. No teste de frio ocorreu variabilidade de resposta das cultivares quando analisadas em diferentes temperaturas e períodos de exposição. O testes de pH do exsudato não apresentou diferença significativa entre as variações de metodologias testadas. Para as cultivares crioulas o teste de tetrazólio pode ser realizado com menor concentração de sal de tetrazólio (0,07%). Os métodos de avaliação da qualidade sanitária não apresentaram diferenças significativas entre si, porém a metodologia através do papel filtro é mais adequada pela facilidade e rapidez de execução. O ponto de colheita, quanto a qualidade fisiológica apresentou melhores resultados, foi no período com 20% a 30% de umidade (última colheita realizada) e a incidência fúngica variou entre os períodos de maturação avaliados.
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Qualidade de compostos orgânicos produzidos com resíduos do processamento de plantas medicinaisSilva, Francisca Alcivania de Melo [UNESP] 14 December 2005 (has links) (PDF)
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silva_fam_dr_botfca.pdf: 1972009 bytes, checksum: 0dcccdfed704fff416f6b751d389c3ff (MD5) / A compostagem é uma alternativa reconhecidamente viável para o aproveitamento racional de resíduos. Todavia, ainda são necessárias pesquisas mais aprofundadas para a melhoria da eficiência deste processo, o que levaria à produção de compostos de maior qualidade, assim como o fornecimento de nutrientes como condicionadores de solo. Sendo assim, este trabalho teve como objetivos avaliar a qualidade de compostos produzidos a partir de combinações de resíduos do processamento de plantas medicinais com esterco bovino e verificar o potencial agronômico dos materiais resultantes na produção da alface. Em uma primeira etapa foram utilizados quatro resíduos do processamento de plantas medicinais: 1) Unha-de-gato (Uncaria tomentosa); 2) Cascara Sagrada (Rhamnus Purshianus); 3) Ipê roxo (Tabebuia impetiginosa) e 4) Boldo (Phaemus boldus), a partir dos quais produziram-se quatro compostos de composição distinta. A amostragem para determinação de parâmetros de maturação (pH, condutividade elétrica, teores de amônio e nitrato, fracionamento da matéria orgânica, macronutrientes, carbono total. relação C/N e testes de germinação) foi feita aos 0, 30, 60, 90 e 120 dias de compostagem. A temperatura, entretanto, foi medida diariamente apenas até aos 90 dias. Na segunda etapa, buscando avaliar o potencial agronômico dos compostos sobre a produção da alface (Lactuca sativa), cultivar crespa Verônica, bem como o efeito residual dos materiais compostados instalaram-se experimentos em vasos com dois cultivos consecutivos. Nestes experimentos, constaram os seguintes tratamentos: composto 1 (C1) (Unha-de-gato), composto 2 (C2) (Cascara Sagrada), composto 3 (C3) (Ipê roxo), composto (4) (C4) mistura dos materiais nas doses 30, 60, 90 e 120t/ha. O delineamento experimental utilizado foi o DIC em esquema fatorial (4 compostos x 4 doses) com 4 repetições e um tratamento testemunha... / Composting is a recognized viable alternative to make good use of residues. However, more accurate studies are required to improve the efficiency of the composting process, producing composts with better quality, supplying nutrients to soil and acting as a soil conditioning. This work aimed to evaluate composts quality produced by combination of residues obtained from medicinal plants industrial processing and bovine manure, verifying the agronomic potential of these obtained composts in lettuce production. In a first step, it was used four residues from medicinal plants industrial processing: 1) Unha-de-gato (Uncaria tomentosa); 2) Cascara Sagrada (Rhamnus Purshianus); 3) Ipê roxo (Tabebuia impetiginosa) e 4) Boldo (Phaemus boldus), which produced four organic composts with distinct composition. The sampling to determine maturation parameters (pH, electric conductivity, ammonium and nitrate, organic matter fractionation, macronutrients, total carbon, C/N relation and germination tests) was made at zero, 30, 60, 90 and 120 days after composting beggining. Temperature was daily verified until 90 days. In a second step, aiming to evaluate the agronomic potential of the composts in lettuce (Lactuca sativa) production,as well the residual effect of these composts in soil. In these cultivation, it was followed the treatments: compost 1 (C1) (Unha-de-gato), compost 2 (C2) (Cascara Sagrada), compost 3 (C3) (Ipê roxo), compost (4) (Boldo) and compost 5 (C5) (mix of residues) in doses of 30, 60, 90 e 120 t ha-1. The experiment was laid out in a complete randomized design, ordered in factorial arrangement (4 composts x 4 doses) with 4 replication and a without N mineral...(Complete abstract click electronic access below)
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