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Hematopoese em serpentes Oxyrhopus guibei (Hoge & Romano, 1978) (Ophidia: Dipsadidae): caracterização morfológica, citoquímica e ultraestrutural / Hematopoiesis in Oxyrhopus guibei (Hoge & Romano, 1978) (Ophidia: Dipsadidae) snakes: morphological, cytochemical and ultrastructural characterization

Priscila Aparecida Ozzetti 28 May 2013 (has links)
A hematopoese nas serpentes inicia-se durante a embriogênese e através dos processos de alterações da vida fetal. A primeira atividade eritropoética é extraembrionária, a partir de células mesodérmicas do saco vitelínico e durante o desenvolvimento embrionário torna-se intraembrionário. Em serpentes recém-nascidas e adultas, o principal foco hematopoético ocorre na medula óssea. O objetivo deste estudo foi caracterizar os diferentes estágios de maturação das células sanguíneas da serpente O. guibei, com base em estudos de microscopia, reações citoquímicas e aspectos ultraestruturais. Fragmentos de vértebras de serpentes recém-nascidas e adultas (n=11) foram coletados para obtenção da medula óssea que foi fixada em formol cálcio ou Bouin e processadas para histologia de rotina. Cortes histológicos, imprint de medula óssea e esfregaços sanguíneos foram corados com Rosenfeld, hematoxilina e eosina ou azul de metileno. As reações citoquímicas realizadas foram ácido periódico de Schiff (PAS), azul de toluidina (AT), Sudan Black B (SBB), benzidina peroxidase (PA) e fosfatase ácida (FA). Para a microscopia electrónica de transmissão (TEM), a medula óssea foi fixada em paraformaldeído a 4% + glutaraldeído 2%, em tampão Tyrode, pós fixados em tetróxido de ósmio a 1% e embebidos em resina Epon 812. A maior parte das células progenitoras de células sanguíneas foram identificadas em focos hematopoiéticos ativos na medula óssea de vértebras e costelas. As linhagens azurofílicas e linfoides foram morfologicamente similares aos de outros répteis. A linhagem granulocítica foi classificada como mieloblasto, promielócito, mielócito e granulócito maduro. Mielócitos podem ser diferenciados em basófilos com grânulos grandes, redondos e eletrondensidade homogênia ou heterófilos, com grânulos de tamanhos e formas variadas na análise MET. TB e PAS foram positivos nos grânulos imaturos e maduros basófilos. Por outro lado, heterófilos e azurófilos mostraram reação fortemente positiva para lípidos de SBB e BP. FA foi encontrado nos azurófilos em várias fases de maturação. As diferentes fases de eritrócitos foram classificadas como: proeritroblasto, eritroblasto basófilo, eritroblasto policromático, proeritrócitos e eritrócitos maduros. Os trombócitos apresentaram positivadade para PAS. As características dos trombócitos maduros e imaturos foram definidas através da TEM apresentando corpos densos, grânulos alfa, microtúbulos e sistema canalicular aberto. Concluindo, a medula óssea das costelas e vértebras é um importante foco hematopoético nas serpentes O. guibei recém-nascidas e adultas. Os aspectos morfológicos, citoquímicos e ultraestruturais são úteis para identificar e caracterizar os diferentes estágios de maturação das células sanguíneas / Hematopoiesis in snakes begins during embryogenesis and the process changes through fetal life. The first erytropoietic activity is extraembryonic from mesoderm cells of the yolk sac and during the embryonic development it becomes intraembryonic. In newborn and adult snakes, the main site of hematopoiesis occurs in the bone marrow. The aim of this study was to characterize different stages of blood cells maturation of O. guibei snakes, based on microscopic studies including cytochemical stains and ultrastructural features. Fragments of vertebrae of newborn and adult snakes (n= 11) were collected to obtain bone marrow that was fixed in Bouin or formol calcium and processed routinely for histology. Tissue sections, imprint of bone marrow and blood smears were stained with Rosenfeld, hematoxylin and eosin or methylene blue. The cytochemical reactions performed were periodic acid-Schiff (PAS), toluidine blue (AT), sudan black B (SBB), benzidine peroxidase (BP) and acid phosphatase (FA). For transmission electron microscopy (MET), bone marrow was fixed in paraformaldehyde 4% + glutaraldehyde 2% in Tyrode buffer, postfixed in 1% osmium tetroxide and embedded in Epon 812 resin. Most of progenitors of blood cells were identified in the active hematopoietic focus in bone marrow of vertebrae and ribs. The azurophilic and lymphocytic series were morphologically similar to those of other reptiles. Granulocytic lineage was classified as myeloblast, promyelocyte, myelocyte and mature granulocytes. Myelocyte can be differentiated into basophils, with large, round and electrondensity homogeneous granules or heterophils, with varied size and shapes granules in the TEM analysis. AT and PAS were positive in the immature and mature basophils granules. On the other hand, heterophils and azurophils showed strong positive reaction for lipids staining of SBB and BP. FA was found on azurophils in various stages of maturation. The different stages of erythrocytes were classified as: proerythroblast, basophilic erythroblast, polychromatic erythroblast, proerythrocyte and mature erythrocytes. Thrombocytics cells showed PAS positive. The characteristics of mature and immature thrombocytes were defined using TEM identifying the dense bodies, alpha granules, microtubules and open canalicular system. Concluding, the rib or vertebral bone marrow is an important hematopoietic site in the newborn and adult O. guibei snakes. The morphologic, cytochemical and ultrastructural characteristics are useful to identify and characterize different stages of maturation of blood cells
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Ciclo reprodutivo e análise ultraestrutural da espermatogênese de Cichla kelberi (TeLeostei: Perciformes: Cichlidae)

Silva, Diógenes Henrique de Siqueira [UNESP] 25 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:49:20Z : No. of bitstreams: 1 silva_dhs_me_sjrp.pdf: 1621876 bytes, checksum: e4bf3e0e11a59ba7cb6ff705065a880c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O Cichla kelberi, espécie recentemente classificada e popularmente conhecida como tucunaré amarelo, é endêmico dos rios Araguaia e baixo Tocantins, sendo, entretanto, encontrado em muitas outras bacias, onde apresenta grande importância para a pesca profissional por seu alto valor econômico, devido a qualidade e sabor de sua carne, e pela pesca esportiva, como pode ser observado pelos campeonatos anuais de pesca ao tucunaré nos rios em que se encontra. Para entender esse rápido processo de ocupação e adaptação a novos ambientes, 78 exemplares de Cichla kelberi foram mensalmente coletados entre os meses de março de 2009 a fevereiro de 2010, com o auxílio de vara de pesca e anzol na Lagoa do Pernilongo (20º 29’ 11,93”S, 51º 25’ 33,27”O) e Ilha da Ferradura (20º 28’ 27,11” S, 51º 25’ 54,53”O), no Reservatório de Jupiá, rio Paraná, Ilha Solteira, São Paulo, Brasil, onde foi introduzido. Foram definidas quatro classes de maturação gonadal para o ciclo reprodutivo anual do tucunaré amarelo C. kelberi. A definição das classes de Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e Regressão, tiveram como base as alterações do epitélio germinativo testicular associado aos estágios das células germinativas presentes. A Classe de Maturação Inicial é caracterizada pela presença de um epitélio germinativo totalmente contínuo, cistos com células germinativas em todos os estágios de desenvolvimento, intensa atividade espermatogênica por todo o testículo e raros “clusters” periféricos, formados por espermatogônias primárias. A Classe de Maturação Intermediária inicia com o surgimento de um epitélio germinativo descontínuo na região anastomosada, com diminuição da espermatogênese e estocagem de espermatozóides nesta região. Os agrupamentos periféricos de espermatogônias ou “clusters” estão ausentes... / The Cichla kelberi, a recently classified specie and popularly known as yellow peacock bass, is endemic from the Araguaia an low Tocantins river, being, however, found in many other basins, where has great importance for the professional fishing for its high economic value due to the quality and flavor of their meat and fishing, as can be observed by annual championships of peacock in the rivers where it is. To understand this fast process of occupation and adaptation to new environments, 78 specimens of C. kelberi were caught monthly between the months of March 2009 to February 2010 with the aid of fishing pole and hook, from the Lagoa do Pernilongo (20º 29’ 11,93”S, 51º 25’ 33,27”O) and Ilha da Ferradura (20º 28’ 27,11” S, 51º 25’ 54,53”O), in the Jupiá Reservoir, Parana River, Ilha Solteira, São Paulo, Brazil, where it was introduced. It was defined four gonadal maturation class to the annual reproductive cycle of the yellow peacock bass C. kelberi. The definition of the Early Maturation, Mid Maturation, Final Maturation and Regression Classes, were based on the changes of the testicular germinal epithelium associated with the germ cell stages present. The Class of Early Maturation is characterized by the presence of a fully continuous germinal epithelium, cysts with germ cells at all stages of development, intense spermatogenic activity throughout the testis and rare “clusters” peripherals, consisting of primary spermatogonia. The Mid maturation Class starts with the appearance of a discontinuous germinal epithelium in the anastomosed region with spermatogenesis decrease and sperm storage in this region. The peripheral groups of spermatogonia or clusters are missing at the end of this class of maturation. In the Final Maturation Class the germinal epithelium discontinuity reaches the periphery of lobules... (Complete abstract click electronic access below)
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O amadurecimento do bebê e a linguagem: uma leitura a partir de Winnicott e Benveniste / The maturational processes and language: a reading from Winnicott and Benveniste

Kruel, Cristina Saling 26 February 2015 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This thesis aimed to deepen the concept of mother-infant mutuality experience, demonstrating how it is expressed in semiotic systems, whether verbal or non-verbal, in order to favor the emergence of symbolism and sustain the process of language acquisition by the baby, based on the approximation of the Winnicott theory and semiotic principles found in enunciative theory of Benveniste. A secondary objective was to analyze the relationship between the semiotic principles found from qualitative and quantitative evidences in maternal and child behaviors between one and four months of development, and do the analysis of the transition of an interpersonal development for intersubjective in a baby from four to seven months. Another objective was also to analyze in qualitative and quantitative terms the kind of language addressed to the baby in the first months, especially in differentiating between presence and absence of manhês. Therefore, there were two key developments: the theoretical reading of selected texts of Winnicott and Benveniste, and a longitudinal empirical study of four babies and people who care them, in this study, the biological mothers of babies. It was, therefore, a collective case study that involved four phases of collection, occurring the first 20 to 30 days old babies, the second between 80 and 90 days of babies, the third between 110 and 120 days when infants completed four months of age. Just for one baby was possible to validate and analyze the collection for the fourth stage, when she was next at 7 months of age. The collections were at home, in a day and the most convenient time for the family. In the four steps a film breastfeeding scene was performed, starting at least five minutes before the start of breastfeeding, ending five minutes after. The recordings were transcribed and data analysis, were thought two studies. The first study consisted of qualitative analysis of the transcripts to identify aspects of the baby's maturity, in the light of Winnicott's theory, related, from the idea of a theoretical outer, the enunciation principles linked to the baby's body semiotic system related with maternal language, namely, the principles of interpretância, homology and no redundancy. The second study was conducted through three-minutes analysis of the recordings with the ELAN software for identification of declared categories and maternal and child behaviors based on a social cognition protocol. The analysis showed that the association of mother-infant experience proposed by Winnicott can be observed through benvenisteana idea of semiotic, verbal and nonverbal systems, by the mother and the baby, and in the way they are related. This experience is evident at times when the mother gives sense, interprets and translates the baby signs, filling his place of enunciation, by translation of his/her words in demand, establishing a homology relationship between baby‟s semiotic non verbal system and his verbal semiotic system, through interpretância. In addition, the data shows that, in that the object moves from subjective to objectively perceived, over baby ripening process, communication with it becomes explicit, a fact that indicates the transition from a interpersonal for intersubjective development , which is evident in reducing the use of manhês, and presence of intersubjectivity as a category of social cognition in the second half of life. Finally, it is emphasized that the semiotic principles proposed in this Thesis appear numerically in the behavior of dyads analyzed and, therefore, can be proposed as operative principles in the process of extreme dependence of the maturation process, when the baby still does not speak. / Esta Tese teve como objetivo aprofundar o conceito de experiência mãe-bebê de mutualidade, demonstrando como ele se expressa em sistemas semióticos, sejam eles verbais ou não verbais, de modo a favorecer a emergência do simbolismo e sustentar o processo de apropriação linguística pelo bebê, partindo da aproximação entre a teoria de Amadurecimento Pessoal de Winnicott e princípios semióticos encontrados na teoria enunciativa de Benveniste. Como objetivos secundários teve-se a análise da relação entre os princípios semióticos encontrados, a partir de evidências qualitativas e numéricas descritivas nos comportamentos materno-infantil entre um e quatro meses de idade do bebê, análise de evidências da transição de um desenvolvimento interpessoal para intersubjetivo, em um bebê entre quatro e sete meses. Outro objetivo ainda foi analisar em termos qualitativos e numéricos descritivos o tipo de linguagem dirigido ao bebê nos primeiros meses, sobretudo, na diferenciação entre presença e ausência de manhês. Para tanto, foram realizados dois empreendimentos fundamentais: a leitura de textos selecionados de Winnicott e Benveniste, e um estudo empírico longitudinal com quatro bebês e as pessoas que realizam o cuidado de tipo materno neste estudo, as mães biológicas dos bebês, desde um mês até quatro meses de idade dos bebês. Tratou-se, portanto, de um estudo de caso coletivo que abrangeu quatro etapas de coleta, tendo ocorrido à primeira entre 20 e 30 dias de vida dos bebês, a segunda entre 80 e 90 dias dos bebês, a terceira entre 110 e 120 dias, quando os bebês completaram quatro meses de idade. Apenas para um bebê foi possível validar e analisar a coleta para a quarta etapa, quando estava próxima aos 7 meses de idade. As coletas foram domiciliares, em dia e horário mais conveniente para a família e, nas quatro etapas foi realizada uma filmagem da cena de amamentação, iniciando pelo menos cinco minutos antes do início da amamentação, finalizando cinco minutos depois. As filmagens foram transcritas e, para análise de dados, foram realizados dois estudos. O primeiro estudo consistiu na análise qualitativa das transcrições para a identificação de aspectos do amadurecimento do bebê, à luz da teoria winnicottiana, relacionando, a partir da ideia de um exterior teórico, aos princípios enunciativos atrelados ao sistema semiótico corporal do bebê a linguagem materna, a saber: os princípios da interpretância e homologia. Já o segundo estudo foi realizado por meio de dois procedimentos de análise de três minutos de filmagem com o software ELAN para identificação de categorias enunciativas e dos comportamentos materno-infantis com base em protocolo de cognição social. A análise demonstrou que a experiência mãe-bebê de mutualidade proposta por Winnicott pode ser observada por meio da ideia benvenisteana de sistemas semióticos, verbais e não verbais da mãe e do bebê e, pelo modo como se relacionam. Tal experiência torna-se evidente nos momentos em que a mãe atribui sentido, interpreta e traduz os sinais do bebê, preenchendo o lugar enunciativo dele, pela tradução da sua demanda em palavras, estabelecendo uma relação de homologia entre os sistemas semióticos não verbais do bebê e o seu sistema semiótico verbal, por meio da interpretância. Além disso, os dados demonstraram que, na medida em que o objeto passa de subjetivo para objetivamente percebido, ao longo do processo de amadurecimento do bebê, a comunicação com ele passa a ser explícita e, este fato, indica a transição de um desenvolvimento interpessoal para intersubjetivo, evidenciado pela redução do uso do manhês, e pela presença da intersubjetividade como categoria de cognição social, no segundo semestre de vida do bebê. Por fim, destaca-se que os princípios semióticos propostos nesta Tese são, numericamente, evidenciáveis nos comportamentos das díades analisadas e que, portanto, podem ser propostos como princípios operantes em fase de extrema dependência do processo de amadurecimento, em que o bebê ainda não fala.
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Parâmetros ecofisiológicos de Poincianella pyramidalis (Tul.) L. P. Queiroz e sua relação com a variabilidade temporal das chuvas em áreas do Semiárido paraibano / Ecophysiological parameters Poincianella pyramidalis (Tul.) L. P. Queiroz and its relation to the temporal variability of rainfall in semiarid areas of paraibano

Lima, Cosmo Rufino de 27 February 2014 (has links)
Submitted by Katiane Souza (katyane.souza@gmail.com) on 2016-03-21T23:36:03Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3163438 bytes, checksum: 803c5e3eb2d81f15990cd2e5022be67d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-21T23:36:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3163438 bytes, checksum: 803c5e3eb2d81f15990cd2e5022be67d (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The catingueira [Poincianella pyramidalis (Tul.) L. P. Queiroz] is a tree species endemic to the Caatinga, quite explored for their potential timber, forage and pharmacological. Given the relevance of its importance, the research aimed to: (i) characterize the phenophases of P. pyramidalis, and its relation to the distribution of rainfall pulses; (ii) evaluate the physiological quality of seeds among individuals of P. pyramidalis through physiologic tests; (iii) determine the physiological maturation of the seeds and (iv) evaluate the potential for dry matter yield due to leaf abscission and its relation to the temporal distribution of rainfall. First 32 individuals of P. pyramidalis were selected, at Açude Farm, the city of Soledade-PB, as evaluation method using the percentage of intensity Fournier and activity index. To evaluate the variability between individuals and determination of the maturity, individuals catingueira fruits were collected and referred to the Laboratory of Seed Analysis (CCA/UFPB), for seed extraction and evaluation of physical and physiological variables. For quantification of dry matter due to leaf abscission catingueira, the work was conducted at the Experimental Station of São João do Cariri-PB, whinch where distributed under the canopy of 15 plants four collectors in the north-south and east-west direction. Thus, it was found that the the intensity and duration of phenophases in Poincianella pyramidalis depend on the amplitude and frequency of pulses of rainfall during the rainy season; the accelerated aging test, used in the traditional method, the period of 24 hours and at a temperature of 41 ºC shows the test vigor to be more efficient in evaluate the physiological potential of the seeds of P. pyramidalis; that conditions Soledade city-PB, for P. pyramidalis the point of physiological maturity occurs at 125 days after anthesis, when seeds reach maximum dry mass accumulation, and the harvest is reached between 130-135 d.a.a.; the rapid senescence and leaf fall of P. pyramidalis are due to interpulse precipitation and strong reduction of water availability in the soil; during the period of abscission, the incrise of contribution of leaves is highly dependent on the quantity of rainfall between years. / A catingueira [Poincianella pyramidalis (Tul.) L. P. Queiroz] é uma espécie arbórea endêmica do Bioma Caatinga, bastante explorada devido ao seu potencial madeireiro, forrageiro e farmacológico. Face à relevância de sua importância, a pesquisa objetivou: (i) caracterizar as fenofases de P. pyramidalis, e sua relação com a distribuição dos pulsos de precipitação; (ii) avaliar a qualidade fisiológica das sementes entre indivíduos de P. pyramidalis através de testes fisiológicos; (iii) determinar a maturação fisiológica de suas sementes e (iv) avaliar o potencial de produção de matéria seca decorrente da abscisão foliar e sua relação com a distribuição temporal da precipitação pluvial. Primeiramente 32 indivíduos de P. pyramidalis, foram selecionados na Fazenda Açude, município de Soledade-PB, usando como método de avaliação o percentual de intensidade de Fournier e índice de atividade. Para avaliação da variabilidade entre os indivíduos e determinação da maturidade, foram coletados frutos de indivíduos de catingueira e encaminhados ao Laboratório de Análise de Sementes (CCA/UFPB), para extração das sementes e avaliação das variáveis físicas e fisiológicas. Para a quantificação de matéria seca decorrente da abscisão foliar da catingueira, o trabalho foi conduzido na Estação Experimental de São João do Cariri-PB, onde foram distribuídos sob a copa de 15 plantas quatro coletores no sentido norte-sul e leste-oeste. Dessa forma, constata-se que a intensidade e duração das fenofases em Poincianella pyramidalis dependem da amplitude e frequência dos pulsos de precipitação ao longo da estação chuvosa; o teste de envelhecimento acelerado, utilizado no método tradicional, no período de 24 horas e à temperatura de 41 ºC mostra ser o teste de vigor mais eficiente na avaliação do potencial fisiológico das sementes de P. pyramidalis; nas condições de Soledade-PB, para P. pyramidalis o ponto de maturidade fisiológica, ocorre aos 125 dias após a antese, quando as sementes atingem o acúmulo máximo de massa seca, sendo que o ponto de colheita é atingido entre 130-135 d.a.a.; a rápida senescência e queda das folhas da P. pyramidalis são decorrentes dos interpulsos de precipitação e da forte redução da disponibilidade de água no solo; durante o período de abscisão, o aporte de contribuição de folhas é altamente dependente da quantidade de chuva entre anos.
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Estudo da tolerância à dessecação e longevidade em sementes de soja (Glycine max (L.) MERR.) / Study of desication tolerance and longevity in soybean (Glycine max (L.) MERR.) seeds

Valário, Bárbara Panoff [UNESP] 12 August 2016 (has links)
Submitted by Bárbara Panoff Valário (barbarapanoff@yahoo.com.br) on 2016-10-07T21:14:48Z No. of bitstreams: 1 Tese correções definitivo setembro 2016.pdf: 3127741 bytes, checksum: d6857da82fb09539bd86f7e77346f4eb (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-10-11T14:05:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 valario_bp_dr_bot.pdf: 3127741 bytes, checksum: d6857da82fb09539bd86f7e77346f4eb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T14:05:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 valario_bp_dr_bot.pdf: 3127741 bytes, checksum: d6857da82fb09539bd86f7e77346f4eb (MD5) Previous issue date: 2016-08-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Não existe consenso sobre qual o estádio de desenvolvimento que a tolerância à dessecação e longevidade são adquiridos em sementes de soja e quais proteínas estão associadas com estes eventos. Portanto, o presente trabalho teve o objetivo caracterizar a aquisição da tolerância à dessecação e longevidade em sementes de soja e identificar proteínas associadas. O estudo foi realizado na Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Ciências Agronômicas-UNESP-Botucatu em parceria com o Centro Virtual de Toxicologia (CEVAP), Campus de Botucatu-SP e com o Laboratório de Sementes Florestais da Universidade Federal de Lavras (UFLA). As sementes foram produzidas na safra 2013/2014 seguida da coleta e caracterização morfofisiológica (caracterização visual, germinação e teor de água) das sementes nos estádios reprodutivos R5.1, R5.2, R5.3, R5.4, R5.5, R6, R7.1, R7.2, R7.3, R8.1, R8.2, R8.3 e R9. Posteriormente, realizou-se a determinação do teor de água, matéria seca e fresca das sementes. Em seguida, as sementes foram secas e armazenadas de 5 a 85 dias à 35°C e 75% umidade relativa (UR), para caracterizar a aquisição de longevidade. Para tolerância à dessecação, as sementes foram secas em gerbox contendo carbonato de potássio à 42% de umidade e 35°C até 0.10g água por grama de massa seca. Para se conhecer o perfil proteômico, foram extraídas proteínas de cada estádio de desenvolvimento, separadas em fitas de pI e géis de acrilamida e analisados no ImageMaster Platinum 7.0. Os spots significativos e exclusivos de cada estádio foram recortados e analisados por espectrometria de massas ESI-QToF. Foram sequenciadas e identificadas 167 proteínas, sendo que trinta e cinco tiveram a expressão diferencial ao longo da fase tardia da maturação. A tolerância à dessecação foi adquirida no estádio R7.2, porém a longevidade foi adquirida em estádios fenológicos posteriores. As proteínas LEAs MAT1, SBP65 e MP2 estão relacionadas com tolerância à dessecação e as pertencentes ao grupo 3 (51 kDa, SBP65 e MP2) juntamente com a MAT9 e algumas LEAs do grupo 5 (Small hydrophilic plant seed protein) estão relacionadas com aquisição de longevidade. / There is no consensus regarding when desiccation tolerance and longevity are acquired in soybean seeds. Therefore, this study aimed at to characterize the acquisition of desiccation tolerance and longevity in soybean seeds and identify proteins associated. The study was performed at the Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho (UNESP), Colegue of Agricultual Science-UNESP-Botucatu in collaboration with the Virtual Center for Toxicology (CEVAP), Botucatu-SP and with the Forest Seeds Laboratory at the Federal University of Lavras (UFLA). Seed production was carried out in the crop year 2013/2014 followed by the collection and characterization of seeds at the reproductive stages R5.1, R5.2, R5.3, R5.4, R5.5, R6, R7.1, R7.2, R7.3, R8.1, R8.2, R8.3 and R9. Subsequently, it was performed the determination of water content, dry and fresh weight of the seeds. Then, seeds were dried and stored at 35 °C and 75% relative humidity (RH), to characterize the acquisition of longevity. To know the proteomic profile, proteins were extracted from each stage of development, separated in acrylamide gels and analyzed by ImageMaster Platinum 7.0. The significant spot and unique to each stadium were cut and analyzed by mass spectrometry ESI-QTOF mass. They were sequenced and identified 167 proteins, and thirty-five had the differential expression along the late stage of maturation. The desiccation tolerance was acquired at the stage R7.2 but longevity was acquired at later during seed development. Proteins LEAs MAT1, SBP65 and MP2 are related to desiccation tolerance and those belonging to group 3 (51 kDa, SBP65 and MP2) together with MAT9 and some LEAs group 5 (Small hydrophilic plant seed protein) are related to acquisition of longevity. / FAPESP: 2014/14638-0
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Efeito do manejo do dossel vegetativo na qualidade da uva Merlot produzida na Serra Catarinense / Efects canopy management in quality or Merlot grapevines cultivated in catarinense plateau

Ficagna, Paulo Ricardo 04 March 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV08MA046.pdf: 571459 bytes, checksum: a864788b63299b034cb3d16d0246563c (MD5) Previous issue date: 2008-03-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The viticulture dedicated to the production of fine wines in the high lands is expanding in the State of Santa catarinam (South of Brazil). Investigation and fieldwork research demonstrate the viability of this activity which can also contribute to territorial development. There is a need for a continuous effort to develop production systems that may improve the quality of the grapes that are used to make wine. The purpose of this work s to evaluate the influence of diferente pruning intensities with the removal and non-removal of axillary shoots, and also to evaluate the physical and chemical characteristics of Merlot grapes and the chemical traits of its wine. The experimente was a conducted between the 2005/2006 and 2006/2007 harvest at the vineyards of Villa Francioni, in the city of São Joaquim (28°17 S, 49°56 W), 1.415 meters high, with Merlot grapes grafted on Couderc 3309, cultivated on rootstocks. The treatments were T₁ - without pruningthe main shootand with the removal of all axillary shoots (leaf área of 2,5m² per Kg¯¹ of grapes); T₂ - pruning of the top wire 1,25 m high from the main vine twig, without removal of the axillary shoots (leaf área of 2,6m² per Kg¯¹ of grapes); T₃ - control, withoutpruning and without removal of the axillary shoots (leaf área of 4,4m² per Kg¯¹ of grapes); T₄ - pruning of the top área 1,25m high from the main vine twig, with the removal of all the axillary shoots (leaf área of 1,5m² per Kg¯¹ of grapes). Both harvest took place in April, day 7 (2005/06) and day 4 (2006/07), which are considered to be late dates. As time went on, there was a reduction not only of the pH, but also of the weight of the grapes, with a tendency to na elevation of the acidity ando f a higher °Brix conpared tio the Southern region. The plants with alower leaf área neede days to reach the maximum weight of grapes. The plants with a leaf área of 2,5 m² per Kg¯¹ and 1,5 m² per Kg¯¹ submitted to sprout exhibited a better equilibrium between leaf área and grape production, independente of the axillary shoots maintenance or removal. The Merlot grape lineage, produced in high lands, exhibited a phenolic potential, in what relates to total polyphenols and anthocyanins, capable to create high quality wines / A viticultura para a produção de vinhos finos em regiões de altitude está em expansão no estado de Santa Catarina. A pesquisa e experiências de campo demonstram a viabilidade desta atividade a qual pode contribuir para o desenvolvimento destes territórios. Há a necessidade da pesquisa continuar contribuindo no desenvolvimento de sistemas de produção que melhorem a qualidade das uvas destinadas a produção de vinhos. O objetivo deste trabalho constitui em avaliar a influência de diferentes intensidades de poda verde, com a operação de retirar e não retirar as feminelas, na evolução das características físicas e químicas da uva Merlot e das características químicas do vinho produzido a partir destas uvas, sobre porta enxerto 3309 Couderc, cultivada em sistema espaldeira. A pesquisa foi desenvolvida na empresa Villa Francioni Ltda, município de São Joaquim-SC (28°17 S, 49°56W) uma altitude de 1.415 metros, nas safras 2005/06 e 2006/07. Os tratamentos foram: T1 sem poda e com eliminação das feminelas (2,5 m² de área foliar Kg¯¹ uva); T2 poda no arame superior 1,25 m de altura do sarmento principal, sem eliminação das feminelas (2,6 m² de área foliar Kg¯¹ uva); T3(testemunha) sem poda e sem eliminação das feminelas (4,4 m² de foliar Kg¯¹ uva); T4 poda no arame superior 1,25 m de altura do sarmento principal, com eliminação de todas feminelas (1,5 m² de área foliar Kg¯¹ uva). Verificou-se que as colheitas ocorreram no mês de abril para as duas safras, sendo realizadas no dia 07 para 2005/06 e no dia 04 para 2006/07, datas consideradas tardias para a cultura. A medida que se prolongou a data de colheita, ocorreu redução do pH, do peso de bagas com tendência a elevação da acidez e Brix superior a região sul. As plantas com menor área foliar, necessitaram maior número de dias para atingir o ponto máximo do peso de bagas. As plantas submetidas à desponta com área foliar de 2,5 m² Kg¯¹ e 1,5 m² Kg¯¹ de uva apresentaram melhor equilíbrio entre área foliar e produção de uva, independente da manutenção ou retirada das feminelas. A uva cv Merlot, produzida em região de altitude, apresentou potencial fenólico com relação aos polifenóis totais e antocianinas para elaboração de vinhos de alta qualidade
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Expressão gênica diferencial, análise ultraestrutural e avaliação do perfil lipídico de blastocistos bovinos produzidos in vitro a partir de oócitos maturados convencionalmente ou pelo sistema SPOM / Differential gene expression, ultrastructural analysis and evaluation of the lipid profile of in vitro produced bovine blastocysts from oocytes matured conventionally or via SPOM system

Razza, Eduardo Montanari [UNESP] 20 February 2017 (has links)
Submitted by Eduardo Montanari Razza null (32896431829) on 2017-04-24T13:06:14Z No. of bitstreams: 1 Tese_E_M_Razza.compressed.pdf: 2567237 bytes, checksum: 79286963f030ebbfef3c6033007b2f31 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-25T20:37:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 razza_em_dr_bot.pdf: 2567237 bytes, checksum: 79286963f030ebbfef3c6033007b2f31 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-25T20:37:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 razza_em_dr_bot.pdf: 2567237 bytes, checksum: 79286963f030ebbfef3c6033007b2f31 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Além de permitir a produção em larga escala de embriões, a maturação in vitro (MIV) não utiliza hormônios superestimulatórios, evitando prejuízos econômicos e efeitos iatrogênicos da superestimulação. Entretanto, a MIV ainda está aquém das expectativas devido à incapacidade em simular eventos fisiológicos que ocorrem in vivo. Um artefato da MIV consiste na retomada espontânea da meiose após a remoção do oócito do ambiente folicular. Sem o aparato molecular que retém a meiose, a maturação nuclear ocorre sem o estímulo hormonal fisiológico, impedindo a reorganização adequada das organelas durante a maturação citoplasmática, o que pode comprometer a competência oocitária in vitro. A temática primordial desta tese foi testar um sistema de pré-maturação oocitária (Pré-MIV), no qual dois fármacos (forskolin e 3-isobutil- metilxantina) são utilizados antes da MIV para retardar a meiose. O desempenho da Pré-MIV foi comparado à MIV convencional, em contexto comercial e de pesquisa. Em um primeiro momento, comparamos os sistemas convencional e Pré-MIV de forma holística, ou seja, testamos os sistemas comerciais completos. Aqui, o critério avaliativo foi a análise ultraestrutural de oócitos e blastocistos, e a análise da expressão de 96 genes relacionados à qualidade embrionária. Na segunda abordagem, adaptamos os fármacos da Pré- MIV em nossa MIV rotineira. Por estes fármacos afetarem o metabolismo lipídico, e, frente a importância deste no metabolismo energético celular, a segunda investigação focou na quantificação lipídica de oócitos e blastocistos, além de avaliar o perfil lipídico de membrana dos blastocistos produzidos, dada sua relação com seu potencial de criopreservação. Coletamos amostras de células do cumulus e blastocistos e, respectivamente, verificamos a expressão de 96 genes associados à competência oocitária e 96 genes relacionados à qualidade embrionária. Resultados indicaram que a Pré-MIV afetou a ultraestrutura de oócitos e que o perfil de expressão gênica de blastocistos foi afetado pelo tratamento, mas com variações quanto ao sistema de produção utilizado. Além disso, a Pré-MIV aumentou o conteúdo lipídico de oócitos, mas diminuiu nos blastocistos, afetando positivamente o perfil lipídico de membranas do embrião. Finalmente, a Pré-MIV também afetou a expressão gênica de células do cumulus (positivamente) e de blastocistos (diferencialmente). / Besides allowing for the large-scale in vitro production of embryos, the in vitro maturation (IVM) dismiss the use of superstimulation hormones, preventing excessive financial expenses and avoiding iatrogenic effects of ovarian overstimulation. However, the outcome of IVM is still below expectations due to the inability in simulating the physiological events occurring in vivo. An artifact of IVM consists on the spontaneous resumption of meiosis after oocyte removal from the follicular environment. In this regard, without the molecular apparatus for arresting meiosis, the nuclear maturation is triggered irrespective of the physiological hormonal stimulation. As a result, the cytoplasmic maturation, i.e., the adequate reorganization of organelles in the oocyte is bypassed, compromising the oocyte competence. The general idea in this thesis was to test the pre-maturation system (Pre-IVM), in which two drugs (forskolin and 3- isobutyl-methylxanthine) are used prior to IVM to sustain meiotic arrest. The Pre-IVM performance was compared to the conventional IVM in the context of either commercial routines or research laboratories. At first, we aimed to compare the conventional IVM and the Pre-IVM in a holistic way, i.e., challenging each other using commercial systems. In this approach, we evaluated the ultrastructural aspects of oocytes and blastocysts, and associated with the expression of 96 genes related to embryo quality. In the second approach, we adapted the Pre-IVM drugs in our own IVM. Those drugs are known to affect the lipid metabolism, which is extremely relevant for the cellular energy metabolism in oocytes and embryo. Hence, we focus on the lipid quantification in oocytes and blastocysts, and, in addition, we assessed the membrane lipid profile of the blastocysts, since it is directly related to embryo cryopreservation potential. We collected cumulus cells and blastocysts and assessed the expression of 96 genes of oocyte competence and 96 genes of embryo quality. Results indicated that the Pre-IVM affected oocyte ultrastructure, the gene expression of blastocysts was differentially affected, but there was variation according to the systems used. Also the Pre- IVM increased the lipid content in oocytes and reduced in blastocysts. The membrane lipid profile of blastocysts was positively modulated by the Pre-IVM. Finally, the Pre-IVM affected the gene expression of cumulus (positively) and blastocysts (differentially). / FAPESP: 2012/23409-9 / FAPESP: 2015/02557-8
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Estrutura populacional e aspectos reprodutivos do Octopus insularis Cephalopodas: Octopodidae: implica??es para o manejo da pesca de polvo no munic?pio de Rio de Fogo-RN

Lima, Fran?oise Dantas de 12 April 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:33:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FrancoisDL_DISSERT.pdf: 3556311 bytes, checksum: b2824c8c883f702ac921cf26dfeaf4d7 (MD5) Previous issue date: 2012-04-12 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / In northeastern Brazil, Octopus insularis is the most commercially important cephalopod species and its capture has been performed for several years by the lobster fishermen in the region. In order to obtain information about the reproductive biology, 1108 specimens were collected between November 2009 and September 2011 in the landings and fish markets of Rio do Fogo (RN). For each specimen the mantle length (CM) and total fresh weight (PT) were recorded. Gonads of 264 males and 295 females were examined macroscopically and histologically to assess sexual maturation and determine reproductive indices. Four reproductive stages were determined for males (immature, maturing, mature and post-mature) and females (immature, early maturing, late maturing and mature). The average of eggs recorded in the female s gonads was 93.820 and 39 was the average of spermatophores found in male Needham s complex. Spermathecae with sperm were found in females with 69 mm CM (immature). Males and females become sexually mature at 64.41 and 98.50 mm of CM, respectively. The weight at sexual maturity was 270 g for males and 630 g for females. The values of the size and weight at sexual maturity found in this study show that males mature at smaller sizes than females. For both sexes the maturation peaks occurred in February and November 2010 and also in September 2011. The periods of maximum reproductive activity lasted about 3 months and it seems to occur every 7 10 months. Only one spent female (stage V) was found and the number of mature females was low. Presumably, mature females migrate to deep waters with complex habitat to protect the offspring, indicating that fishery by snorkeling with maximum depth of 15 meters is not reaches this part of the stock. Finally, it is noticeable the importance of the establishment of management strategies for the exploitation of O. insularis different of the ones used for O. vulgaris, once the species have distinct biological features / No Nordeste do Brasil, Octopus insularis ? a esp?cie de polvo de maior import?ncia comercial e sua captura tem sido realizada durante muitos anos pelos mesmos pescadores de lagosta da regi?o. Visando obter informa??es a respeito da biologia reprodutiva dessa esp?cie, foram realizadas amostragens entre novembro de 2009 e setembro de 2011, nas quais foram registrados o comprimento do manto (CM) e o peso fresco total (PT) de 1.108 exemplares presentes nos desembarques e peixarias do munic?pio de Rio do Fogo (RN). Desse total foram coletadas aleatoriamente 264 g?nadas de machos e 295 de f?meas, as quais foram analisadas quanto ao grau de matura??o e pesadas para obten??o dos ?ndices reprodutivos. Foram determinados quatro est?gios reprodutivos macro e microsc?picos para machos (imaturo, maturando, maduro, p?s-maduro) e f?meas (imatura, in?cio da matura??o, final da matura??o, madura), al?m de determinada a fecundidade. O n?mero m?dio de ovos encontrados nos ov?rios das f?meas foi 93.820 e uma m?dia de 39 espermat?foros no saco de Needham nos machos. Foram encontradas f?meas com espermatozoa na espermateca a partir de 69 mm de CM, ainda imaturas. O CM da primeira matura??o (L50) foi 64,41 e 98.5 mm e o peso foi 270 e 630 g em machos e f?meas, respectivamente, evidenciando que os machos maturam em um tamanho e peso inferiores ?s f?meas. Os picos de matura??o foram registrados em fevereiro e novembro/2010 e setembro/2011. As ?pocas de maior atividade reprodutiva duraram cerca de 3 meses e ocorreram em intervalos de 7 a 10 meses. Apenas uma f?mea no est?gio V foi encontrada e o n?mero de f?meas no est?gio IV foi baixo. Provavelmente as f?meas maduras migram para ?guas mais profundas de habitats mais complexos com o intuito de realizar a desova, indicando que a pesca atrav?s do mergulho livre, realizada at? a profundidade m?xima de 15 m, n?o est? acessando essa parcela do estoque. Finalmente fica evidenciada a import?ncia de se estabelecerem estrat?gias de manejo para a explora??o de O. insularis, as quais devem diferir das normas atuais aplicadas ? pesca de O. vulgaris, pois as duas esp?cies possuem caracter?sticas biol?gicas distintas
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Estudo comparativo entre fontes de macromoléculas na produção in vitro de embriões bovinos e seus reflexos na criopreservação

Lima, Marina Ragagnin de [UNESP] 25 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:59:06Z : No. of bitstreams: 1 lima__mr_me_jabo.pdf: 1535432 bytes, checksum: 7fba3e3ae5e6792c02b0d8168157e36d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Dentre as biotecnologias aplicadas à reprodução animal, atualmente um dos maiores desafios é a criopreservação de embriões PIV. Esses embriões apresentam alta criosensibilidade, devido principalmente a excessiva deposição lipídica no citoplasma, e que por sua vez está relacionada com a utilização de SFB nos meios. Neste trabalho foram avaliados os efeitos da suplementação protéica com BSA, SFB e FE e suas associações na PIV de embriões bovinos durante as etapas de MIV e CIV, visando melhorar sua criotolerância. Na MIV foram utilizadas sete diferentes combinações (SFB, BSA, FE, BSA+SFB, BSA+FE, SFB+FE e BSA+SFB+FE), e no CIV quatro tratamentos (BSA, BSA+SFB, BSA+FE e BSA+SFB+FE). Os embriões em estádios de Bl e Bx foram vitrificados e após seu reaquecimento foram avaliadas as taxas de eclosão embrionária em 24 e 48 horas. Dos oócitos colocados em maturação, obteve-se um total de 85,4% de clivagem e 35,52% de produção embrionária. Ao analisar os efeitos da fonte protéica na MIV notou-se que o grupo tratado com BSA apresentou as piores taxas de clivagem (80,96%) (p<0,05) em relação aos demais grupos, o melhor resultado de produção embrionária foi obtido com BSA+SFB (46,69%) e os melhores índices de eclosão embrionária pós reaquecimento foram nos tratamentos BSA+FE (44,35%), SFB+FE (44,90%) e BSA+SFB+FE (42,48%). Quando se avaliou os efeitos de fonte protéica na CIV, não houve diferença significativa entre os tratamentos quanto a clivagem, o BSA apresentou o pior desempenho na produção de embriões (31,88%) (p<0,05) em relação aos demais grupos que não diferiram entre si, e os melhores índices de eclosão embrionária 24 e 48h pós reaquecimento foram obtidos com o tratamento BSA+FE (37,64% e 51,34%, respectivamente) / Among the biotechnology applied to animal reproduction, nowadays one of the biggest challenges is the cryopreservation of embryos produced in vitro. These embryos have a high cryosensitivity, mainly due to excessive fat deposition in the cytoplasm, which in turn is related with the FCS used in the mediums for embryo production in vitro. The aim of this study was to evaluate the effects of protein supplementation with BSA, FBS and FE, and their associations in IVP bovine embryos during the stages of IVM and IVC, to improve their cryotolerance. For IVM were used seven different combinations (FCS, BSA, FE, BSA + FCS, BSA + FE, FE and FBS + BSA + FCS + FS), and four treatments during IVC (BSA, BSA + FCS, BSA + FE, BSA+ FE+ FCS). Embryos in stage of Bl and Bx were vitrified and after their reheating the rates of hatched blastocysts at 24 and 48 hours were evaluated. Of the oocytes placed into maturation, we obtained 85.4% of cleavage and 35.52% of embryo produced. When were evaluated the effects of protein source in IVM was noted that the BSA-treated group showed the worst rates of cleavage (80.96%) (p <0.05) compared to other groups, the best result of embryo production was obtained with FCS + BSA (46.69%) and the highest rates of hatched blastocysts after rewarming were obtained with FE + BSA (44.90%), FE + FCS (44.35%) and FS + FCS + BSA ( 42.48%). When we assessed the effects of protein source in the IVC, there was no significant difference between treatments for the cleavage, the BSA group had the worst performance in the production of embryos (31.88%) (p <0.05) compared to other groups that not differ, and the highest hatched blastocysts in 24 and 48 hours after rewarming were obtained by treating BSA + FE (37.64% and 51.34%, respectively)
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Inibição da maturação nuclear pela butirolactona I durante o transporte de oócitos bovinos destinados à produção in vitro de embrões (PIV)

Gottardi, Fernanda Patrícia [UNESP] 19 February 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-19Bitstream added on 2014-06-13T18:58:54Z : No. of bitstreams: 1 gottardi_fp_me_jabo.pdf: 551122 bytes, checksum: 296df34d2ff79346b4bafb7a4da03dc9 (MD5) / Facta / Butirolactona I (Bl-I) pode ser utilizada em sistemas PIV de embriões para bloquear a meiose durante o transporte de oócitos obtidos de OPU. O objetivo deste estudo foi verificar a concentração de BL-I eficaz durante o transporte de oócito bovinos. Oócitos (n=4581) foram pré-maturados em criotubos contendo meio com 10 ou 100μM de Bl-I, acrescido ou não de HEPES (20mM), no período de 5 horas em estufa portátil Minitub e transferidos para incubadora com atmosfera e temperatura controlada, permanecendo por mais 19 horas. Em seguida foram maturados a 38,5ºC em atmosfera de 5% de CO2 durante 20 horas, fecundados e os zigotos cultivados. Foram avaliadas a maturação nuclear e a maturação citoplasmática após pré-MIV e MIV (24h.-controles e 20h.-tratados). A fertilização foi avaliada após 18 h. da inseminação. Os embriões foram analisados quanto ao seu desenvolvimento e qualidade. Os dados foram avaliados por ANOVA (p<o,o5). A maioria dos oócitos tratados permaneceu em GV e após MIV houve a reversão do bloqueio, mas a eficiência foi menor com 10 μM de Bl-I. A maturação citoplasmática foi beneficiada de acordo a distribuição das mitocôndrias, no entanto, quanto à distribuição dos grânulos corticais apenas o bloqueio realizado com 100 μM Bl-I permitiu uma maturação. A taxa de fecundação foi prejudicada pelo tempo de transporte, mesmo nos oócitos tratados. A ocorrência de polispermia foi correlacionada à porcentagem de oócitos com grânulos corticais imaturos. O desenvolvimento embrionário sofreu um atraso pela utilização de 100μM de Bl-I, porém boa porcentagem de blastocistos de qualidade foi atingida. Assim, o bloqueio com 100μM de Bl-I possui efeitos benéficos na PIV de embriões de oócitos transportados por longo tempo. / Butirolactone-I (Bl-I), can be used in systems for in vitro production (IVP) of embryos to block meiosis during the transport of oocytes from OPU. The objective of this study is to assess the concentration of BL-I more efficient during the transport of bovine oocytes. Oocytes (n = 4581) were prematured in criotubes containing medium with 10 or 100 μM of Bl-I with or without HEPES (20mM) in a portable incubator at 38,5°C without CO2 equilibration in the first 5 h, being later transferred to a incubator at 38.5°C and 5% CO2 in humidified air during the 19 hours remaining. Following were matured, fertilized and the zygotes cultured at 38.5°C and 5% CO2. Were evaluated the nuclear maturation and the cytoplasmic maturation after pre-IVM and after IVM (24h. controls and 20 h. treatments). Fertilization was assessed 18 hours after insemination. The embryos development and quality were analyzed. The data were evaluated by ANOVA (P< 0, 05). Most remained in GV oocytes treated and after IVM was the reversal of the blockage, but the efficiency was lower with 10 μM of Bl-I. The cytoplasmic maturation during the time of meiosis blockage was benefited from the distribution agreement and potential of mitochondria, however, about the distribution of cortical granules only blocking conducted with 100μM Bl-I had a complete maturation. The rate of fertilization was damage by the time of transport, and the meiosis blockage with Bl-I did not improve the percentage of fertilized oocytes. The occurrence of polispermia was correlated with the percentage of oocytes with immature cortical granules. The embryo developmentb was delayed by the use of 100μM of Bl-I, but a good percentage of blastocysts of good quality reached. So, the use of 100μM of Bl-I has beneficial effects on the IPV of embryos from oocytes transported at a long time.

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