Esta pesquisa teve por objetivo estudar a influência do tipo de plantio ( crescimento a pleno sol e sombra) e etapas do processamento industrial (secagem, sapeco e torrefação) sobre duas classes de compostos (metilxantinas e compostos fenólicos) e potencial antioxidante da erva-mate provenientes da ervateira Barão. A extração dos compostos foi realizada pela técnica de ultrassom. A LC-DAD e LC/MSn foi utilizada para a caracterização e quantificação dos extratos e a atividade antioxidante foi medida utilizando-se do método ORAC (oxygen radical absorbance capacity). Foram identificados 11 compostos dentre os quais, 8 puderam ser quantificados. Os teores de teobromina obtidos ficaram na faixa entre 1,12 a 3,09 mg.g-1, para a cafeína entre 6,12 a 28,99 mg.g-1 , para rutina entre 1,07 a 5,54 mg.g-1 e para o ácido clorogênico entre 5,60 a 33,14 mg.g-1. Os derivados do ácido clorogênico também foram identificados e a quantificação dos mesmos foi realizada por equivalência ao ácido clorogênico, os resultados obtidos ficaram entre 4,08 e 43,16 mg.g-1 para o 3-CQA, 0,11 e 1,85 mg.g-1 para o 4-CQA, 0,96 e 8,92 mg.g-1 para o 3,4-DI-CQA, 3,46 e 57,81 mg.g-1 para o 3,5-DI-CQA e 1,09 e 24,75 mg.g-1 para o 4,5-DI-CQA. Os resultados obtidos foram analisados por componente principal resultando em três componentes principais correspondendo a aproximadamente 90% da variância total. Foi possível observar diferença entre as amostras verdes plantada (ao pleno sol) e nativa (à sombra), e entre as amostras de secador esteira sem fumaça e secador rotativo com fumaça tanto nas amostras que estavam passando pelo processo de industrialização quanto nas amostras prontas para consumo, salientando que o tipo de plantio e de secagem influencia na composição química das amostras. A amostra de chá tostado ficou isolada das demais, observando, portanto, que a etapa de tostagem da erva também pode modificar a composição em relação aos compostos bioativos. Os compostos marjoritários em todas as amostras analisadas foram os ácidos cafeoilquínicos. A amostra mais rica em metilxantina e ácidos cafeoilquínicos foi a erva-mate nativa sapecada, e a amostra mais rica no flavonoide rutina foi a amostra pronta para consumo de tererê natural. Neste estudo foi observado que quanto maior a concentração de ácidos cafeoilquínicos maior foi a atividade antioxidante, a erva-mate nativa sapecada apresentou a maior atividade antioxidante. / This research had the objective of study of influence about cultivation (sunshine growing and shadow growing) and industrial process steps (drying, zapeco and toasting) about two classes of compounds (methylxanthines and phenolic compounds) and antioxidant potential of yerba mate from Barão industry. Compound extraction was made by ultrasound technique. LC-DAD and LC/MSn was used to characterization and quantification, antioxidant capacity was measured by ORAC method (oxygen radical absorbance capacity). It was identified 11 compounds and 8 have been quantified. Theobromine contents was between 1.12 to 3.09 mg.g-1, caffeine was between 6.12 and 28.99 mg.g-1, rutine was between 1.07 and 5.54 mg.g-1, and chlorogenic acid was between 5.6 and 33.14 mg.g-1. Chlorogenic acid derivatives was identified and quantified by equivalence to chlorogenic acid, results were between 4.08 and 43.16 mg.g-1 to 3-CQA, 0.11 and 1.85 mg.g-1 to 4-CQA, 0.96 and 8.92 mg.g-1 to 3,4-DI-CQA, 3,46 and 57,81 mg.g-1 to 3,5-DI-CQA and 1.09 and 24.75 mg.g-1 to 4,5-DI-CQA. Results were analyzed by principal component and three principal components were able to explain almost 90% of total variance between samples. It was possible to observe differences between green samples that was planted (sun cultivation) or native (shadow cultivation). It was possible to observe differences between samples that were drying in rotative drier and normal drier, suggesting that kind of cultivation and way to dry have influence in bioactive composition. Toasted tea sample was isolated, suggesting that toasting step have influence in bioactive composition too. Major compounds in all samples were CQA’s. Sample richer in methyl xanthine and cafeoilquinic acid was native and zapecada, and sample richer in rutin was the sample ready to consumption nature tererê. In this study it was possible to observe that when more cafeoilquinic acids concentration, bigger is the antioxidant activity, native and zapecada sample presented the bigger antioxidant activity.

Submitted by Sandro Camargo (sandro.camargo@unipampa.edu.br) on 2015-03-09T02:24:14Z No. of bitstreams: 1 116110001.pdf: 1574524 bytes, checksum: 48077bd97e3cbf3cc22e4347e94b7abf (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-09T02:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 116110001.pdf: 1574524 bytes, checksum: 48077bd97e3cbf3cc22e4347e94b7abf (MD5) Previous issue date: 2012-11-16 / A erva-mate, cientificamente denominada, Ilex paraguariensis St. Hil. Var. paraguariensis (Aquifoliaceae), trata-se de uma árvore que cresce naturalmente em florestas da América do Sul (na Argentina, sul do Brasil, Uruguai e Paraguai). Bebidas a base de ervas-mate denominadas “mate”, “chimarrão” ou “tererê” fazem parte dos hábitos e costumes da população local. Nos últimos anos, através da ampliação do conhecimento científico a respeito de seus efeitos na saúde, os usos da planta têm se expandido para outras partes do mundo e são descritas diversas possibilidades de aplicação. Suas ações incluem atividades antioxidante, antiinflamatória, antimutagênica, antiglicação entre outras, sendo estas diretamente relacionadas aos compostos bioativos presentes, especialmente na folha da árvore (principal parte utilizada para produção da erva-mate). Entre as substâncias conhecidas estão os polifenóis, saponinas, xantinas, minerais e vitaminas. Muitos fatores influenciam o teor desses compostos no produto final que é comercializado e por conseqüência no que é ingerido pelo consumidor. O presente estudo avaliou a composição fitoquímica e os potencias antioxidantes de extratos de ervas comercializados no Brasil, Argentina e Uruguai. Objetivando a obtenção de extratos com composição similar aos ingeridos pela população, preparou-se a bebida da forma tradicional e empregou-se uma forma de extração que mimetiza seu consumo. A partir desses extratos (mates) foram quantificados o conteúdo total de polifenóis, as concentrações das substâncias: ácido clorogênico, ácido cafeico, cafeína e teobromina e analisados os potenciais antioxidantes dos extratos. Para este fim foram utilizadas análises cromatográficas, espectrofotométricas e desenvolvidos ensaios, in vitro, que testaram a capacidade dos extratos seqüestrarem óxido nítrico e quelarem ferro. Foi possível verificar que a seqüência de extrações é um fator que influência no conteúdo extraído, visto que houveram diferenças significativas entre os primeiros e os últimos extratos. Além disso, verificou-se que a capacidade antioxidante dos extratos é expressiva e se mantêm mesmo em extratos onde a concentração de compostos apresenta decaimento significativo. No entanto, foram notadas variações relacionadas principalmente às nacionalidades das ervas. Este estudo sintetiza uma contribuição importante para futuras pesquisas, pois elucida o que é ingerido quando a bebida é consumida da forma que a população o faz, colocando a forma de extração como um importante fator, relacionado ao desfecho de seu consumo na saúde. / The yerba-mate, scientifically named, Ilex paraguariensis St. Hil. Var. paraguariensis (Aquifoliaceae), it is a tree that grows naturally in forests of South America (in Argentina, southern Brazil, Uruguay and Paraguay). Yerba mate based drinks are part of the customs and habits of the population and are called "mate", "chimarrão" or "tererê". In recent years, through the expansion of scientific knowledge about their effects in health, the plant uses has been expanded to other parts of the world and are described various possibilities of the application. Their actions include antioxidant capacity, anti-inflammatory, antimutagenic, anti-glycation and others, which are directly related to the bioactive compounds presents, especially in the leaves of the tree (the main part used for the production of yerba mate). Among the substances known are polyphenols, saponins, xanthines, vitamins and minerals. Many factors influence the content of these compounds in the end product that is marketed, and consequently in what is ingested by the consumer. The present study evaluated the phytochemical composition and the antioxidant potential of yerba-mate extracts sold in Brazil, Argentina and Uruguay. Aiming to get extracts with composition similar to the population consumes, the beverage was prepared in the traditional way and to extraction was used a method that mimics its consumption. From these extracts (mates) were quantified the total polyphenol content, the concentrations of the substances: chlorogenic acid, caffeic acid, caffeine and theobromine, and analyzed the antioxidant potential of the extracts. To this end were developed chromatographic, spectrophotometric analysis and, in vitro, carried out trials that tested the ability of the extracts to scavenger oxide nitric and to chelate iron. Was observed that the sequence of extraction is a factor that influences the extracted content, since there were significant differences between the first few and the last ones extracts. It was found that the antioxidant activity of the extracts is quite significant and remains in extracts where the concentration of compounds presents significant decline. However variations were noted, it’s related primarily to the nationalities of herbs. This study summarizes an important contribution to other research, because it clarifies what is ingested when it is drunk the way that people do it, putting the extraction as an important factor related to the outcome of their consumption on health.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-16T19:24:09Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T14:43:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T14:45:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T14:49:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-17T14:49:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) Previous issue date: 2013-12-18 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Theobroma grandiflorum is a species native of the Amazon with high economic potential, which belongs to the same genus as cocoa (Theobroma cacao). Its fruit, known as cupuaçu, is the largest in the genus Theobroma, reaching up to 4 kg in weight. The economic base of this species is concentrated in the mesocarp (pulp), widely known and commercialized for the production of juices, nectars, ice cream and others. In the process of obtaining the the cupuaçu pulp byproducts are generated which correspond to 65% by weight of each fruit, that although they are sources of phenolic substances and antioxidants are not used. This study aimed to describe the chemical composition of phenolic extracts and alcaloídicos of the epicarp and endocarp cupuaçu using chromatographic and spectrometric techniques. Different methods combined with ethanol and ethanol / water (7:3) was used for the extraction of phenolic substances and for extraction of purine alkaloids four specific methodologies for methylxanthines were used, in order to obtain the best conditions for extractions. The total phenolic content ranged between 8.62% (113.30 mgGAEs/g) and 12.96% (157.8 mgGAEs/g) for the epicarp extracts and between 3.17% (64.5 mgGAEs/g) and 12.86% (182.6 mgGAEs/g) for cupuaçu endocarp. The optimum conditions that provided the highest levels of phenolics and flavonoids were the extraction by maceration of the epicarp hot ethanol and the extraction of the endocarp by soxhlet ethanol / water (7:3). The profile of extractions obtained by mass spectrometry indicates the íons of the m/z 339, 325 e 311 characteristic of phenolic acids, as a major component both epicarp as the endocarp cupuaçu. The epicarp extracts showed better capacity scavenging free radicals (CI50=69,5 μg/mL) in relation to the endocarp (CI50=223,6 μg/mL). The presence of methylxanthines caffeine and teacrina were confirmed by mass spectrometry (MS) and high performance liquid chromatography (HPLC-UV) by comparison of the retention time of their respective standards. The confirmation of the teacrina molecule was performed by nuclear magnetic resonance (1 H NMR) and carbon (13 C NMR). The study of the utilization of these residues indicates the endocarp cupuaçu as excellent raw material source teacrina methylxanthine, addition to the unprecedented presence of caffeine and valuing both epicarp and the endocarp since they are considered byproducts of industrial pulps Amazon. / Theobroma grandiflorum é uma espécie nativa da Amazônia com elevado potencial econômico, que pertence ao mesmo gênero que o cacau (Theobroma cacao). Seu fruto, conhecido como cupuaçu, é o maior no gênero Theobroma, chegando a atingir até 4 kg em massa. A base econômica dessa espécie concentra-se no mesocarpo (polpa), bastante conhecido e comercializado para a produção de sucos, néctares, sorvetes entre outros. No processo de obtenção da polpa do cupuaçu são gerados subprodutos que correspondem a 65% em peso de cada fruto, que apesar de serem fontes de substâncias fenólicas e antioxidantes não são aproveitados. Este estudo teve como objetivo descrever a composição química dos extratos fenólicos e alcaloídicos do epicarpo e endocarpo do cupuaçu utilizando técnicas espectrométricas e cromatográficas. Foram utilizados diferentes métodos combinados com etanol e etanol/água (7:3) para a extração das substâncias fenólicas e para a extração dos alcaloides purínicos quatro metodologias específicas para metilxantinas foram usadas, afim de obter as melhores condições para as extrações. O teor de fenólicos totais variou entre 8,62% (113,30 mgGAEs/g) e 12,96% (157,8 mgGAEs/g) para os extratos do epicarpo e entre 3,17% (64,5 mgGAEs/g) e 12,86% (182,6 mgGAEs/g) para o endocarpo do cupuaçu. As condições ótimas que proporcionaram maiores teores de fenólicos e flavonoides foram a extração por maceração do epicarpo à quente em etanol e a extração do endocarpo por soxhlet em etanol/água (7:3). O perfil das extrações obtido por Espectrometria de Massas indica os íons de m/z 339, 325 e 311 característicos de ácidos fenólicos, como componente majoritário tanto no epicarpo quanto no endocarpo do cupuaçu. Os extratos do epicarpo apresentaram melhores capacidades de sequestro de radicais livres (CI50=69,5 μg/mL) em relação ao endocarpo (CI50=223,6 μg/mL). A presença das metilxantinas cafeína e teacrina foram confirmadas por espectrometria de massas (EM) e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV) por comparação do tempo de retenção de seus respectivos padrões. A confirmação da molécula da teacrina foi realizada por ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN1H) e carbono (RMN13C). O estudo do aproveitamento desses resíduos indica o endocarpo do cupuaçu como excelente matéria-prima fonte da metilxantina teacrina, além da inédita presença da cafeína valorizando tanto e epicarpo quanto o endocarpo uma vez que são considerados subprodutos das indústrias de polpas da Amazônia.

Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2014-09-17T17:07:47Z No. of bitstreams: 1 TESE COMPLETA.pdf: 4364010 bytes, checksum: db848addf66479f547ccb64d058e01e0 (MD5) / Approved for entry into archive by Fatima Cleômenis Botelho Maria (botelho@ufba.br) on 2014-09-19T12:34:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE COMPLETA.pdf: 4364010 bytes, checksum: db848addf66479f547ccb64d058e01e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-19T12:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE COMPLETA.pdf: 4364010 bytes, checksum: db848addf66479f547ccb64d058e01e0 (MD5) / CNPq e CAPES / Os extratos MeOH de Poincinella pyramidalis (caatingueira), obtidas da casca da raiz (PPCR) e das flores (PPF), bem como, as frações orgânicas obtidas por partição, foram submetidas a testes de atividade citotóxica, antioxidante e anticolinesterásica. O teste citotóxico contra Artemia salina revelou atividade moderada para fase AcOEt em PPCR. Assim como, a fase AcOEt de PPCR apresentou 75% de inibição no teste anticolinesterásico. Para a atividade antioxidante, as fase AcOEt e BuOH de PPF foi a mais ativa, sendo atribuída a presença de galato de metila (PPF3). Por meio de processos cromatográficos foi possível isolar da fase DCM de PPF as substâncias PPF1 (alcoóis graxos), PPF2a-b (β–sitosterol/estigmasterol), PPF3 (galato de metila) e PPF4 (α e β–amirina). Além dessas, foram isoladas da fase hexano de PPCR ésteres metílicos (PPCR1) e o biflavonoide 5,7-dihidroxi-4´-metoxiflavona-6α-2´´´,4´´´-dihidroxi-4´´- metoxidihidrochalcona (PPCR3). Da fase hidroMeOH de PPCR foram isoladas as substâncias PPCR2 (ácido 3,3´-dimetoxi-4-hidroxielagico-4´-β-D-xilopiranosideo) e outro biflavonoide PPCR4 (5-hidroxi-7,4´-dimetoxiflavona-3α-2´´´-hidroxi-4´´´,4´´- dimetoxidihidrochalcona). Sendo PPCR3 e PPCR4 inéditas na literatura. O extrato hexano de Theobroma cacao (cacau) obtido das sementes (STC) foi analisado por RMN e revelou presença de triacilglicerideos. A otimização e fracionamento do extrato MeOH de T. cacao utilizando CCC levou ao isolamento simultâneo de teobromina (2), teofilina (3) e cafeína (4), fase móvel hexano:AcOEt (2:3) e estacionária MeOH:H2O (1:1). Um método analítico foi desenvolvido empregando HPLC/DAD com coluna fase reversa C-18 para a quantificação de 2, 3 e 4 nos extrativos em fase ácida/básica e nas frações STC6-22 e STC23-67 obtidas por CCC. Assim, os teores de 2 e 4 para no extrato MeOH de T. cacao e frações obtidas por CCC foram determinados. A teofilina (3) detectada e quantificada na fração STC6-22 em baixa concentração (0,78 mg/g) em relação a 2 e 4. A apigenina (6) foi sintetizada utilizando dois métodos distintos (“A” e “B”). O metodo “B” apresentou rendimento de 74% em uma única etapa. A síntese de derivados O-metilados forneceu bons rendimentos (> 90%). As substâncias isoladas/sintetizadas foram submetidas à atividade anticolinesterasica do qual, são inativas. As mesmas foram elucidadas a partir de dados de IV, UV, EM, α[D], RMN de 1H e 13C (BB e APT), RMN de correlação (HMQC, HSQC e HMBC). / The MeOH extracts from Poincinella pyramidalis (caatingueira), obtained of bark root (PPCR) and flowers (PPF), as well the organic fractions obtained by partition, have been tested for cytotoxicity, antioxidant and anticholinesterasic activity. The cytotoxic test against Artemia salina showed moderate activity for AcOEt phase in PPCR. Well the EtOAc phase of PPCR showed 75% inhibition on anticholinesterasic test. For the antioxidant activity, the EtOAc and BuOH phase of PPF was the most active, being attributed to the presence of methyl gallate (PPF3). For chromatographic process was possible to isolate the DCM phase of PPF the substances PPF1 (fatty alcohols), PPF2a- b (β–sitosterol/stigmasterol), PPF3 (methyl galate) and PPF4 (α- and β–amirin). Besides these, were isolated from the hexane phase PPCR methyl esters (PPCR1) and the biflavonoid 5,7-dihidroxy-4´-methoxyflavone-6α-2´´´,4´´´-dihidroxy-4´´-methoxy dihidrochalcone (PPCR3). The HidroMeOH phase of PPCR were the isolated substances PPCR2 (3,3´-dimethoxi-4-hidroxyellagicacid-4´-β-D-xylopiranoside) and other biflavonoid PPCR4 (5-hidroxy-7,4´-dimethoxyflavone-3α-2´´´-hidroxy-4´´´,4´´- dimethoxydihidrochalcone). Being PPCR3 and PPCR4 unpublished in literature. Hexane extract of Theobroma cacao (cacau) obtained from the seeds (STC) was analyzed by NMR and revealed the presence of triacylglycerides. The optimization and fractionation of MeOH extract of T. cacao using CCC led to the simultaneous isolation of theobromine (2) Theophylline (3) and caffeine (4), mobile phase hexane:EtOAc (2:3) and stationary MeOH:H2O (1:1). An analytical method was developed employing HPLC/DAD with reverse phase column C-18 for the measurement of 2, 3 and 4 in the extractives acid/base phase and the STC6-22 and STC23-67 fractions obtained by CCC. So, the levels of 2 and 4 for the MeOH extract of T. cacao and fractions obtained by CCC were determined. Theophylline (3) detected and quantified in the fraction STC6-22 low concentration (0.78 mg/g) in relation the 2 and 4. Apigenin (6) was synthesized using two different methods ("A" and "B"). The method "B" had a yield of 74% in one step. The synthesis of O-methylated derivatives provided good yields (> 90%). The isolated/synthesized substances were submitted to anticholinesterasic activity which are inactive. The same were elucidated from data of IR, UV, MS, α[D], 1H NMR and 13C NMR (BB and APT) NMR correlation (HMQC, HSQC and HMBC).

Orientador: Helena Teixeira Godoy / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-15T07:26:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bizzotto_CarolinaSchaper_D.pdf: 1638844 bytes, checksum: 02d02a3b31cb8fd2bf5d15d5464fe34c (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A otimização simultânea de múltiplas respostas foi utilizada no desenvolvimento de um método por eletroforese capilar (EC) para a determinação de cafeína em café descafeinado. O método foi desenvolvido utilizando o planejamento composto central para otimizar a concentração de dodecilsulfato de sódio (SDS), a concentração de carbonato de sódio e a voltagem. Os experimentos foram conduzidos com uma amostra de café descafeínado, onde o resíduo de cafeína foi extraído com clorofórmio, ressuspenso em água e filtrado. As condições otimizadas foram encontradas pela avaliação dos efeitos de seis respostas: separação de interferentes, área, ruído, variação na linha de base, corrente e tempo de análise. Modelos de regressão lineares e quadráticos foram gerados para cada conjunto de respostas. Os modelos de regressão, coeficientes de correlação e a análise de componentes principais (PCA) foram usados na determinação das condições experimentais ótimas. Os melhores resultados foram obtidos usando-se um capilar de 50 mm x 48 cm, tampão contendo 10 mmol. L-1 de carbonato de sódio e 50 mmol. L-1 de SDS (pH 11,0), 15 kV, 25,0 ºC e detecção a 206 nm. Sob as condições otimizadas, a cafeína foi separada dos interferentes. O tempo de análise foi de 5,5 min. O método desenvolvido foi validado e comparado a um método por CLAE quanto à eficiência de separação, tempo de análise, custo por análise e volume de resíduos gerados. O método por EC foi então aplicado a amostras de café descafeinado torrado moído e instantâneo e amostras de bebida enérgética. A quantidade total de xantinas presentes nas bebidas chimarrão e tererê, a base de erva-mate (Ilex paraguariensis), também foi avaliada. Estas bebidas foram preparadas como são tradicionalmente consumidas. Os valores de cafeína das amostras analisadas tanto por EC quanto por CLAE não foram estatisticamente diferentes a 95% de confiança. A sensibilidade do método por CLAE foi 42 vezes maior que a do método por EC, porém este apresentou um tempo total de análise 30,4% menor. O volume de resíduos gerados foi 33 vezes maior no método por CLAE, e o custo em reagentes foi 76,5 vezes menor por EC. A vantagem mais importante do método por EC foi o uso de tampão aquoso econômico e ecológico no processo de separação. Com relação às amostras analisadas, sete amostras de café de quatro diferentes marcas apresentaram teor de cafeína acima do permitido pela legislação brasileira, e 76% das bebidas energéticas possuíam menos cafeína do que o valor informado no rótulo do produto. O teor de cafeína e teobromina variou nos diferentes tipos comerciais de erva-mate empregados no preparo das bebidas. Além disso, o tererê apresentou níveis de xantinas 2,5 vezes maior que o chimarrão / Abstract: Multiple response simultaneous optimization was used to develop a micellar electrokinetic chromatography (MECK) method for caffeine determination in decaffeinated coffee samples. The method was developed using a central composite design to optimize the concentration of sodium dodecylsulfate (SDS), sodium carbonate and voltage (V). The experiments were carried out using a sample of Brazilian decaffeinated coffee extracted with chloroform, which was subsequently recovered with water and then filtered. Optimized conditions were found by evaluating the effects of six responses: interferent separation, area, noise, baseline variation, current e analysis time. Each set of response values was regressed on the factor levels of the experimental design using linear and quadratic models. The regression models, correlation coefficients involving both factor levels and response values, and a principal component analysis (PCA) were used to determine the optimum experimental conditions. Successful results were obtained using a fused-silica capillary of 50 mm x 48 cm total length, buffer containing 10 mmol. L-1 of sodium carbonate and 50 mmol. L-1 of SDS (pH 11.0), voltage of 15 kV, temperature of 25.0 ºC, with detection at 206 nm. Under optimized conditions, caffeine was separated from the interferents. The analysis time was of 5.5 min. After validation, the capillary electrophoresis (CE) method was compared to a HPLC method regarding separation performance, quantification of caffeine in twenty samples, analysis time, costs per analysis and volume of generated residue. CE method was applied to decaffeinated instant and groundroasted coffee, and energy drinks. The total amount of xanthines in mate (Ilex paraguariensis) beverages, ¿chimarrao¿ and ¿terere¿ obtained in the same way as they are traditionally consumed, was also estimated using the CE method. Caffeine content of the samples analyzed with both CE and HPLC methods did not differ statistically at 95% confidence level. HPLC method sensitivity was 42 times greater than by CE method. In another hand, CE presents total analysis time 30.4% lower than HPLC. The volume of generated residues was 33 times greater in HPLC and the cost in reagents for CE was 76.5 times lower than for HPLC. The most important advantage of CE is the use of economical and ecological aqueous buffer in the separation process. Regarding samples analyzed, seven decaffeinated coffee samples of four different brands showed higher levels than the limit specified by Brazilian legislation and 76% of the energy drinks samples had caffeine content lower than the value informed to the consumer. Caffeine and theobromine levels varied in different commercial types of mate employed for the beverages preparation. Besides, ¿terere¿ presented quantities 2.5 times higher than the ¿chimarrao¿ beverage / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Laila Pereira da Silva Dissertacao.pdf: 2576409 bytes, checksum: d8ddb33c748f481b6487512d8f098802 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Fundacao de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The in vitro production (IVP) of bovine embryos despite already used on a commercial scale, presents high variability in the results, that can often be attributed to the fertilization step. Therefore, it is important to research factors related to semen, such as sperm capacitation process. The aim of the study was to evaluate theophylline or its combination with heparin as possible replacement capacitation agent in the development of in vitro produced embryos and in acrosome reaction of sperm cells. The experiment was carried out with 4 bulls and 3 treatments, with 12 experimental groups. Each bull was evaluated in all treatments as described below: Treatment 1 (T1): Heparin - 10mg / ml; Treatment 2 (T2): Theophylline - 5 mM; Treatment 3 (T3): Heparin (10 mg / ml) + theophylline (5mM). The bulls semen was thawed and exposed to incubation in three treatments for 0, 6, 12 and 18h, subsequently stained with Trypan blue / Giemsa and analyzed by electron microscopy for assessment of the acrosome reaction. For IVP of embryos capacitation agents added to fertilization medium were evaluated utilizing the same bulls. In sperm analysis, real acrosome reaction rate was higher (p<0,05) at 0h time while the higher dead spermatozoa rate (p<0,05) was observed at 12 h (84,46 ± 5,82 ) and 18h (86,75 ± 4,19). The IVP embryos rate (37,97 ± 13) and the hatching rate (33,50 ± 14) were higher (p<0,05) in heparin treatment. There was no influence of bull or treatments (p> 0.05) in the acrosome reaction analysis. The use of theophylline as a capacitation agent decreased embryo production rates in IVF, however was as efficient as heparin in acrosome reaction induction. / A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos, apesar de já utilizada em escala comercial, apresenta elevada variabilidade em seus resultados, que pode frequentemente ser atribuída à etapa de fertilização. Sendo assim, torna-se importante o estudo dos fatores relacionados ao sêmen, como o processo de capacitação espermática. O objetivo do estudo foi avaliar a teofilina como agente de capacitação substituto ou associado à heparina no desenvolvimento de embriões produzidos in vitro e sobre a reação acrossômica das células espermáticas. O experimento foi realizado com 4 touros e 3 tratamentos, totalizando 12 grupos experimentais. Cada touro foi avaliado em cada tratamento descrito a seguir: Tratamento 1 (T1): Heparina - 10µg/mL; Tratamento 2 (T2): Teofilina 5 mM; Tratamento 3 (T3): Heparina (10µg/mL) + Teofilina (5mM). O sêmen dos touros foi descongelado e submetido à incubação com os três tratamentos por 0, 6, 12 e 18h, posteriormente corados com Trypan blue/ Giemsa e analisados em microscopia eletrônica para avaliação da reação acrossômica. Para a PIVE os agentes de capacitação adicionados aos meios de fertilização foram testados utilizando os mesmos touros. Na análise espermática a taxa de reação acrossômica verdadeira foi maior (p<0,05) no tempo 0h enquanto para os espermatozoides mortos foi observada maior taxa (p<0,05) nos tempos de 12h (84,46 ± 5,82) e 18h (86,75 ± 4,19). A taxa de embriões produzidos na PIVE (37,97 ± 13) e a taxa de eclosão (33,50 ± 14) foram maiores (p<0,05) para o tratamento heparina. Não houve influência de touro ou de tratamentos (p>0,05) na análise de reação acrossômica. A utilização da teofilina como agente de capacitação reduziu as taxas de produção embrionária na fertilização in vitro, no entanto foi tão eficiente quanto à heparina na indução da reação do acrossoma.