Orientador: Helio Langoni / Resumo: Mycoplasma spp., tem distribuição mundial e é um patógeno relevante em medicina veterinária. As mastites causadas por Mycoplasma spp. mais frequentes em grandes rebanhos leiteiros, porém este patógeno é subestimado no Brasil, onde se têm poucos relatos como agente causador de mastite, o que se deve possivelmente a quantidade reduzida de laboratórios que inclui a análise de M. bovis em sua rotina. Devido a necessidade de meios seletivos e de condições especiais para o seu isolamento. Diante disso um dos objetivos do presente estudo foi pesquisar a participação de Mycoplasma bovis na etiologia das mastites clínicas em amostras de leite de vacas de propriedades leiteiras de sete estados do Brasil, totalizando 561 amostras de leite, que foram cultivas em meio Hayflick adicionado de acetato de tálio a 0,01%, incubadas em ambiente de microaerofilia com 5% de CO2. Foram também submetidas a reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de Mycoplasma spp. e Mycoplasma bovis. Pesquisouse também a microbiota aeróbica envolvida nas mastites, cultivando-se as mesmas amostras de leite em meios de ágar sangue bovino 5% e ágar MacConkey resultando 225 amostras positivas. Obtiveram-se 11 (1,96%) amostras positivas para Mycoplasma spp., no exame microbiológico, enquanto na detecção molecular obteve-se um total de 17 (3,03%) amostras positivas para Mycoplasma bovis. Pode-se concluir com os resultados obtidos pela presença e dispersão do Mycoplasma bovis nos rebanhos leiteiros avaliados, ap... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Submitted by NATHÁLIA BRANCATO JUNQUEIRA null (nbjunqueira@gmail.com) on 2017-08-08T18:23:55Z No. of bitstreams: 1 Defesa - Nathália FINAL.pdf: 993046 bytes, checksum: 72c9ada79f938498b772638050887a58 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-08-10T20:32:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 junqueira_nb_me_bot.pdf: 993046 bytes, checksum: 72c9ada79f938498b772638050887a58 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-10T20:32:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 junqueira_nb_me_bot.pdf: 993046 bytes, checksum: 72c9ada79f938498b772638050887a58 (MD5) Previous issue date: 2017-08-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Mycoplasma spp., tem distribuição mundial e é um patógeno relevante em medicina veterinária. As mastites causadas por Mycoplasma spp. mais frequentes em grandes rebanhos leiteiros, porém este patógeno é subestimado no Brasil, onde se têm poucos relatos como agente causador de mastite, o que se deve possivelmente a quantidade reduzida de laboratórios que inclui a análise de M. bovis em sua rotina. Devido a necessidade de meios seletivos e de condições especiais para o seu isolamento. Diante disso um dos objetivos do presente estudo foi pesquisar a participação de Mycoplasma bovis na etiologia das mastites clínicas em amostras de leite de vacas de propriedades leiteiras de sete estados do Brasil, totalizando 561 amostras de leite, que foram cultivas em meio Hayflick adicionado de acetato de tálio a 0,01%, incubadas em ambiente de microaerofilia com 5% de CO2. Foram também submetidas a reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de Mycoplasma spp. e Mycoplasma bovis. Pesquisouse também a microbiota aeróbica envolvida nas mastites, cultivando-se as mesmas amostras de leite em meios de ágar sangue bovino 5% e ágar MacConkey resultando 225 amostras positivas. Obtiveram-se 11 (1,96%) amostras positivas para Mycoplasma spp., no exame microbiológico, enquanto na detecção molecular obteve-se um total de 17 (3,03%) amostras positivas para Mycoplasma bovis. Pode-se concluir com os resultados obtidos pela presença e dispersão do Mycoplasma bovis nos rebanhos leiteiros avaliados, apesar de sua prevalência ser menor quando se compara com outros países, e ainda pela participação de outros patógenos aeróbicos com a associação de Staphylococcus coagulase negativa (17,6%) e Streptococcus dysgalactiae (11,7%) em 29% das amostras positivas para M. bovis. / Mycoplasma spp., has a worldwide occurrence and can cause severe pneumonia in calves and mastitis in lactating cows. The mastitis caused by Mycoplasma spp. are relatively common in large dairy herds. This pathogen, however, is still underestimated, especially in Brazil, with few reports of its occurrence as causative agent of mastitis due to small number of laboratories that include the M. bovis analysis as part of their routine. Such lack of analysis is due to the fact that such analysis requires selective means and special conditions for its isolation. Therefore, the aim of this study was to research the participation of Mycoplasma bovis in the etiology of clinical mastitis of dairy properties of the seven diferent states from Brazil. A total of 561 milk samples from animals with clinical mastitis were evaluated. The samples were grown on Hayflick broth added of thallium acetate 0.01%, incubated in microaerophilic atmosphere at 5% CO2. The samples were also subject to molecular evidence polymerase chain reaction (PCR) for the detection of Mycoplasma spp. and Mycoplasma bovis. The aerobic microbiota involved in the mastitis was also investigated, and the same milk samples were cultured in media of 5% bovine blood and MacConkey agar resulting in 225 positive samples. Colonies of Mycoplasma spp were isolated in 11 (1.96%) samples. The 561 milk samples included in this study were subjected to molecular detection for Mollicutes family, from which 17 (3.03%) samples were positive. All identified as positive were reassessed for the molecular diagnosis for Mycoplasma bovis. It can be concluded with the results of this research, the presence of Mycoplasma bovis in dairy herds evaluated, but with a lower incidence of this pathogen when compared to other countries, and 29% of the positive samples for M. bovis were also associated with other aerobic pathogens such as Staphylococcus coagulase negative (17.6%) and Streptococcus dysgalactiae (11.7%).

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-28T12:55:08Z No. of bitstreams: 1 Ana Claudia Campos.pdf: 1040308 bytes, checksum: b0653bfe634b8d58d0d6d1c3c04816e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T12:55:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Claudia Campos.pdf: 1040308 bytes, checksum: b0653bfe634b8d58d0d6d1c3c04816e9 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Mycoplasma agalactiae is the main causative organism of contagious agalactia (CA), a disease characterized by mastitis followed by agalactia, polyarthritis, and keratoconjunctivitis. In 2001, M. agalactiae was isolated and identified in Brazil, causing great economic losses. Considering the need for characterization of Brazilian strains of M. agalactiae and implementation of effective control, this work was performed in three steps. The first article describes the biochemical and protein profile of isolates of M. agalactiae in small ruminants through the culture in modified Hayflick medium, biochemical tests, polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and immunogenicity of these proteins by Western blot (WB). The samples had similar protein in the profile bands ranging from 30-135 kDa in SDS-PAGE, in addition the presence of a protein of 48 kDa immunodominant WB was shown. To continue identifying the agent involved in the AC in Brazil, the second article describes the analysis of ten sequences of M. agalactiae isolated from goats and sheeps. A DNA fragment of 360 bp of the 16S rRNA gene was amplified by PCR and sequenced. The analysis revealed a high degree of similarity among all the sequences. The study revealed greater than 99% similarity with the reference samples of M. agalactiae. In the third article, efficacy of three inactivated vaccines prepared with a local of M. agalactiae sample and adsorbed with three adjuvants was evaluated in goats and sheep. The antibody response in vaccinated animals was analyzed using an indirect ELISA. The three vaccines induced antibody production, and can be an alternative to reduce economic losses and prevent contagious agalactia. These results confirms the presence and spread of M. agalactiae in the country and enhances the possibility of controlling the disease through the adoption of livestock vaccination. / Mycoplasma agalactiae é o principal microrganismo causador da agalaxia contagiosa (AC), doença caracterizada por mastite seguida de agalaxia, poliartrite e ceratoconjuntivite. Em 2001, M. agalactiae foi isolado e identificado no Brasil, determinando grandes prejuízos econômicos. Considerando a necessidade de caracterização de amostras brasileiras de M. agalactiae e da implantação de medidas eficazes de controle, esse trabalho foi realizado em três etapas. O primeiro artigo descreve o perfil bioquímico e protéico de isolados de M. agalactiae de pequenos ruminantes através do cultivo em meio Hayflick modificado, testes bioquímicos e eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e a imunogenicidade destas proteínas por Western Blot (WB). As amostras apresentaram similaridade no perfil protéico com bandas variando de 30 a 135 kDa no SDS-PAGE, além da presença de uma proteína imunodominante de 48 kDa no WB. Para dar continuidade a identificação do agente envolvido na AC no Brasil, o segundo artigo descreve a análise de dez sequências de M. agalactiae isolados de caprinos e ovinos. Um fragmento de DNA de 360 bp do gene 16S rRNA amplificado por PCR foi sequenciado. A análise revelou alto grau de similaridade, entre as dez sequências e uma similaridade maior que 99% com amostras de referência de M. agalactiae. No terceiro artigo, a eficiência de três vacinas inativadas, preparadas com amostra local de M. agalactiae e adsorvidas com três adjuvantes, foi avaliada em caprinos e ovinos. A resposta sorológica dos animais vacinados foi analisada através de um ELISA indireto. As três vacinas induziram produção de anticorpos, podendo ser utilizadas como uma alternativa para reduzir as perdas econômicas e prevenir a agalaxia contagiosa. Estes resultados confirmam a presença e disseminação do M. agalactiae no país e fortalece a possibilidade de controle da doença pela adoção da vacinação dos rebanhos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-19T14:41:27Z No. of bitstreams: 1 Melania Loureiro Marinho.pdf: 672807 bytes, checksum: 000062f3c512fab676ae388d8a3d3f00 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-19T14:41:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melania Loureiro Marinho.pdf: 672807 bytes, checksum: 000062f3c512fab676ae388d8a3d3f00 (MD5) Previous issue date: 2008-02-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The goal of this paper was to evaluate of biotherapy of Mycoplasma agalactiae in the treatment of goats with natural infection of Contagious Agalactia (CA) of sheep and goats from Cariri region of Paraiba state. Mastitis, agalactia, arthritis and keratoconjunctivitis were the principal clinical signs observed in animals with natural infection. The diagnosis of CA was made by bacterial isolation with modified Hayflick medium. All isolates produced not only the displayed fried-egg colony morphology but also films and spots. Fermentation of glucose, and arginine in liquid medium were not observed. The biotherapic was made from M. agalactiae isolated from milk of goat with natural infection. The animals received the biotherapic dinamized at 30D diluted in water by oral via three times a day during eight weeks. The results showed not only the absence of clinical signs in the treated animals, but also they get back the productivity, good performance status and the disappearance of outbreak in the study region. At the end of 12 months post treatment no clinical signs of the disease and bacteriological isolation were observed. These results indicate that Mycoplasma nosode showed high efficacy to control the contagious agalactia in goats from different epidemiological situations. / Este trabalho foi realizado em criações de caprinos de municípios do estado da Paraíba, com o objetivo de avaliar a ação terapêutica do bioterápico de Mycoplasma agalactiae em caprinos com Agalaxia Contagiosa dos Ovinos e Caprinos (ACOC). Os sinais clínicos mais frentes observados nos animais foram: mastite seguida de agalaxia, poliartrite e ceratoconjuntivite. O diagnostico etiológico foi realizado através do isolamento de Mycoplasma agalactiae por meio do cultivo de leite em meio Hayfick modificado que resultou em colônias com aspecto de ovo frito, com presença de manchas e filmes, não fermentadores de glicose e arginina. Estas características foram observadas em todas as colônias dos animais testados suspeitos de ACOC. O Mycoplasma agalactae foi utilizado no preparo do bioterápico na D30, administrado três vezes ao dia, via oral, durante oito semanas. A eficácia do tratamento com o bioterápico foi observada através do desaparecimento dos sinais clínicos em todos os animais. Observou-se concomitantemente retorno da capacidade produtiva e ausência de surtos na região. Doze meses após a administração do bioterápico todas as culturas foram negativadas. A utilização do bioterápico de M. agalactiae teve uma ação eficiente no tratamento da ACOC nos animais estudados, devendo ser avaliado em surtos com diferentes situações epidemiológicas.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T16:51:53Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaMicoplasmasHemotropicos.PDF: 1004565 bytes, checksum: 3c30858f52bad52050cef32a13457f12 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-19T12:48:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaMicoplasmasHemotropicos.PDF: 1004565 bytes, checksum: 3c30858f52bad52050cef32a13457f12 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-19T12:48:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaMicoplasmasHemotropicos.PDF: 1004565 bytes, checksum: 3c30858f52bad52050cef32a13457f12 (MD5) Previous issue date: 2014-02-07 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Micoplasmas hemotrópicos compreendem um grupo de bactérias que podem causar anemia hemolítica e diversas doenças crônicas em animais. Em felinos três espécies infectantes de hemoplasmas são relatadas: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus M. haemominutum’ e ‘Candidatus M. turicensis’, sendo o primeiro considerado mais patogênico, enquanto que os caninos são normalmente infectados por pelo menos duas espécies de micoplasmas: M. haemocanis e ‘Candidatus M. haematoparvum’. Com o objetivo de avaliar a ocorrência de micoplasmas hemotrópicos em população canina e felina da cidade de Belém, Estado do Pará, foi analisado através de PCR o material genético oriundo de 299 amostras sanguíneas de animais domiciliados e errantes. Em 8,03% (24/299) das amostras foi amplificado o DNA de micoplasmas hemotrópicos, sendo 1,78% (3/169) de cães e 16,15% (21/130) de gatos infectados. Entre os felinos as maiores taxas de infecção foram encontradas nos animais domiciliados 22,86% (16/70) e em animais machos 29,51% (18/61), sendo a espécie ‘Candidatus M. haemominutum’ 8,46% (11/130) a de maior ocorrência quando comparada a espécie M. haemofelis 6,92% (9/130). A infecção em caninos foi observada somente no grupo de animais errantes, sendo o ‘Candidatus M. haematoparvum’ a única espécie identificada com taxa de 1,78% (3/169). Foi possível avaliar que micoplasmas hemotrópicos circulam nas duas espécies estudadas, felinos domiciliados e machos formaram o grupo com maior risco para a infecção e que o bioagente ‘Candidatus M. haematoparvum’ parece ser o único em circulação na população canina. / Hemotrophic mycoplasmas comprise a group of bacteria that can cause hemolytic anemia and several chronic diseases in animals. In cats three infecting species of hemoplasmas are reported: M. haemofelis, ‘Candidatus M. haemominutum’ and ‘Candidatus M. turicensis’, the first being considered the most pathogenic, whereas the dogs are normally infected by at least two mycoplasma species M. haemocanis and ‘Candidatus M. haematoparvum’. In order to assess the occurrence of hemotrophic mycoplasmas in feline and canine populations of Belém city were analyzed, by PCR, the genetic material from blood samples of 299 domiciled and stray animals. In 8.03% (24/299) of DNA samples of hemotrophic mycoplasmas was amplified, 1.78 % (3 /169) from infected dogs and 16.15% (21 /130) from infected cats. Among the cats the highest rates of infection were found in domiciled animals 22.86% (16/70) and in males 29.51% (18/61), the species ‘Candidatus M. haemominutum’ 8.46 % (11/130) get the higher incidence when compared to species Mycoplasma haemofelis 6.92 % (9/130). The infection in dogs was only identified among stray animals, with the ‘Candidatus M. haematoparvum’ being the only species identified with a rate of 1.78 % (3/169). It was possible to assess that hemotrophic mycoplasmas circulate in both species in the present report, domiciled felines and males formed the group at highest risk for infection and the agent ‘Candidatus M. haematoparvum’ seems to be the only one in circulation in the canine population.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-29T12:33:02Z No. of bitstreams: 1 Ana Claudia Campos.pdf: 321055 bytes, checksum: 88970805d9ffc7abbb04f6a510d226df (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-29T12:33:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Claudia Campos.pdf: 321055 bytes, checksum: 88970805d9ffc7abbb04f6a510d226df (MD5) Previous issue date: 2008-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The contagious agalactia of ovine and caprine (CAOC) is characterized by a decline and subsequent failure of milk production, arthritis and keratoconjunctivitis causing economic losses in dairy goats and sheep herds. Classic diagnostic is performed by culture and identification of mycoplasmas species. The utilization only of this method to diagnostic has contribute for dissemination of infection and reduced efficiency of the controls measures because your necessity of long time to the diagnostic conclusion. The objective this study was performed and standardized an indirect ELISA using conjugate with protein-G (ELISA-G) and two types of obtained by growth of M. agalactiae antigen. Whole bacterial and sonicated culture was used as antigen to sensibility on microtitre plates. A total of 46 serum sample were obtained in infected goat herd with clinical signs in forty-five period and 40 samples in free herds of disease to standardization and application of ELISA test. The infection status was confirmed by culture of M. agalactiae from milk. Do not had statistical difference between positive and negative controls serum (P/N) when whole or sonicated antigen wereused. The sensibility of ELISA-Gt and ELISA-Gs were of 77,27% and 88,63%, respectively. Specificity were 95,24% for both ELISA. In conclusions, the indirect ELISA-Gt or ELISA-Gs should be utilized as tools for diagnostic of contagious agalactia in goats. / A Agalaxia Contagiosa dos Ovinos e Caprinos (ACOC) é uma enfermidade caracterizada clinicamente por mastite, agalaxia, artrite e ceratoconjuntivite, determinando grandes perdas econômicas em rebanhos ovinos e caprinos leiteiros. O diagnóstico clássico é feito pelo cultivo e isolamento dos micoplasmas envolvidos. A utilização dessa técnica como único método diagnóstico, contribui para a disseminação da infecção e dificulta a implantação de medidas eficazes de controle por requerer longo tempo para conclusão diagnóstica. Por isso, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e padronizar um ELISA indireto utilizando a proteína G (ELISA-G) como conjugado e aplicação de dois tipos de antígenos produzidos a partir de M. agalactiae. Antígeno total e sonicado foram utilizados para sensibilizar as microplacas. A padronização da técnica foi realizada utilizando soros caprinos com e sem sinais clínicos de agalaxia contagiosa. Quarenta e seis soros caprinos coletados com intervalo de 45 dias, obtidos em rebanho infectado com sinais clínicos e 40 soros caprinos de rebanhos livres da infecção foram utilizados para avaliação da técnica. A presença de M. agalactiae no rebanho foi confirmada por cultivo de leite em meio Hayflick modificado. Não houve diferença significativa entre os valores da razão positivo/negativo (P/N) dos soros controles quando utilizado antígeno total ou sonicado. A sensibilidade relativa do ELISA-Gt e ELISA-Gs foi de 77,27% e 88,63%, respectivamente, enquanto que a especificidade foi de 95,24% para ambos. Pesquisa de anticorpos em rebanho com quadro clínico característico revelou aumento significativo dos percentuais de densidade óptica (DO) em soros caprinos, coletados com intervalo de 45 dias. Conclui-se que os ELISA podem ser úteis para identificação de rebanhos infectados por agalaxia contagiosa de pequenos ruminantes, com uma relativa vantagem para o ELISA-Gs.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-05T15:07:53Z No. of bitstreams: 1 Silvio Gomes de Sa.pdf: 1708875 bytes, checksum: a786d439ef8b4d1c09becfbe1f091fb2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T15:07:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvio Gomes de Sa.pdf: 1708875 bytes, checksum: a786d439ef8b4d1c09becfbe1f091fb2 (MD5) Previous issue date: 2014-06-30 / The aim of the present study was to assess the occurrence of antibodies anti-Mycoplasma gallisepticum and anti-Toxoplasma gondii among chickens and turkeys on rural family properties in the state of Pernambuco, Brazil, as well as to identify risk factors associated with these infections. In chickens, antibodies anti-Mycoplasma gallisepticum were sought using the Immunoenzymatic assay (ELISA) and antibodies anti-Toxoplasma gondii were sought using the Immunofluorescence assay (IFA). In turkeys, antibodies anti-Toxoplasma gondii were investigated using the Modified Agglutination Test (MAT). In turkeys, antibodies anti-Toxoplasma gondii were investigated based on 204 serum samples on 28 properties. In chickens, antibodies anti-Toxoplasma gondii were investigated based on 629 serum samples from 39 properties, of which 421 samples came from 29 properties that participated in the study of risk factors. Antibodies anti-Mycoplasma gallisepticum were analyzed based on 300 serum samples from 23 properties, all of which participated in the study of risk factors. In the present study, an investigative questionnaire was applied on the properties and risk factors were checked based on univariate analysis (chi-squared test or Fischer’s exact test), followed by multivariate analysis (Logistic regression). The relative frequency of turkeys that were positive for antibodies anti-T. gondii was 11% (21/204). Thirteen (13) properties contained at least one reactive turkey (46.5%). The general prevalence of chickens that were positive for antibodies anti-Toxoplasma gondii in the region was 28% (176/629). The following variables exhibited significant associations with chicken infections in the multivariate analysis (logistic regression): the slaughter of animals on the properties (OR=1,66; p=0,027); the presence of sheep (OR=1,96; p= 0,004); the occurrence of sheep births (OR=1,72; p= 0,014) and reproductive disorders among sheep (OR=2,29; p=0,003). The prevalence of chickens infected by Mycoplasma gallisepticum was 53.33% (157/300), while 100% of the properties exhibited foci. The following risk factors were confirmed in the multivariate analysis: the presence of poultry such as Numida meleagris (OR=2,22; p=0,005); different species of parrots (OR=1,72; p=0,027) and the presence of passerines (OR=1,88; p=0,007). The results of the present study indicate that Mycoplasma gallisepticum and Toxoplasma gondii infection are quite widespread in the region studied. Chickens and turkeys infected with Toxoplasma gondii could serve as a source of human infection if their meat and viscera are poorly cooked and then consumed. The large number of Mycoplasma gallisepticum foci is significant, considering the dangers associated with backyard animal reproduction and the risks for the surrounding industrial poultry plants. The chickens and turkeys assessed in the present study were good indicators of the presence of these pathogens in the environment, highlighting the need for greater care on behalf of sanitary authorities in relation to control and educating the population. / Objetivou-se estudar a ocorrência de anticorpos anti Mycoplasma gallisepticum e Toxoplasma gondii em galinhas e perus de propriedades familiares rurais no estado de Pernambuco, Brasil e identificar os fatores de risco associados a estas infecções. Em galinhas, pesquisaram-se anticorpos contra Mycoplasma gallisepticum por meio de ensaio de imunoadsorção enzimática indireto (ELISA) e contra Toxoplasma gondii por meio da Imunofluorescência Indireta (RIFI); para pesquisa de anticorpos contra Toxoplasma gondii em perus utilizou-se o teste de Aglutinação Modificado (MAT). Para pesquisa de anticorpos contra Toxoplasma gondii em perus foram analisadas 204 amostras de soro sanguíneo em 28 propriedades. Para pesquisa de anticorpos contra Toxoplasma gondii em galinhas foram analisadas 629 amostras de soro sanguíneo originadas de 39 propriedades, das quais 421 amostras de 29 propriedades participaram do estudo dos fatores de risco. Para pesquisa de anticorpos contra Mycoplasma gallisepticum foram analisadas 300 amostras de soro sanguíneo de 23 propriedades e todas as propriedades participaram do estudo dos fatores de risco. Para este estudo, um questionário investigativo foi aplicado nas propriedades e os fatores de risco foram verificados numa análise univariada (Qui-quadrado ou Exato de Fischer) seguida de análise multivariada (Regressão Logística). A frequência relativa de perus positivos para anticorpos anti-T. gondii foi de 11% (21/204) e treze (13) foram as propriedades com pelo menos um peru reagente (46,5%). A prevalência de galinhas positivas para anticorpos contra Toxoplasma gondii na região foi de 28% (176/629). A ocorrência de abate de animais nas propriedades (OR=1,66; p=0,027), a presença de ovinos (OR=1,96; p= 0,004), a ocorrência de partos de ovinos (OR=1,72; p= 0,014) e distúrbios reprodutivos em ovinos (OR=2,29; p=0,003) foram as variáveis que apresentaram associação significativa com a infecção das galinhas na análise multivariada (regressão logística). A prevalência de galinhas infectadas por Mycoplasma gallisepticum foi de 53,33% (157/300) com 100% de propriedades foco e os fatores de risco confirmados na análise multivariada foram a criação de outras espécies de aves nas propriedades como Numida meleagris (OR=2,22; p=0,005), espécies de psitacídeos (OR=1,72; p=0,027) e a criação de passeriformes (OR=1,88; p=0,007). Os resultados indicaram que a infecção por Mycoplasma gallisepticum e Toxoplasma gondii ocorre na região estudada de forma bastante disseminada. Tanto perus quanto as galinhas infectadas por Toxoplasma gondii podem servir de fonte de infecção para humanos se estes consumirem carnes e vísceras mal cozidas. O grande número de focos para Mycoplasma gallisepticum é de grande importância, tendo em vista os prejuízos causados à criação de fundo de quintal e os riscos para as criações industriais circunvizinhas. As galinhas e perus neste estudo foram bons indicadores da presença destes patógenos no ambiente suscitando maior atenção das autoridades sanitárias em relação à educação da população e ao seu controle.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-01-16T17:13:14Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Hilari Wanderley Hidasi - 2014.pdf: 1654829 bytes, checksum: b50671bb3feb0625688191733ad9b696 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-01-16T17:37:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Hilari Wanderley Hidasi - 2014.pdf: 1654829 bytes, checksum: b50671bb3feb0625688191733ad9b696 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-16T17:37:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Hilari Wanderley Hidasi - 2014.pdf: 1654829 bytes, checksum: b50671bb3feb0625688191733ad9b696 (MD5) Previous issue date: 2013-04-12 / Aves sinantrópicas aproximam-se de atividades humanas em busca de abrigo, água e alimento, podendo percorrer grandes distâncias para tanto. Em busca de informações acerca da importância dessas aves na transmissão de agentes patogênicos de importância na avicultura comercial, foi realizado estudo com 260 aves de comportamento sinantrópico, sendo 200 pombos comuns (Columba livia) e 60 urubus de cabeça preta (Coragyps atratus), na região metropolitana de Goiânia - Goiás. Foram colhidas amostras de fezes, soro e suabes traqueais que foram submetidos a testes para detecção de Salmonella sp. por bacteriologia convencional e Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (rPCR), Mycoplasma galisepticum e M. synoviae pela Soroaglutinação Rápida em Placa (SAR) e rPCR, além de isolamento de Escherichia coli pela bacteriologia convencional com detecção de genes de virulência de E. coli patogênica para aves (APEC) pela PCR e perfil de suscetibilidade a antimicrobianos dos isolados. Os resultados observados, na pesquisa de Salmonella sp. das amostras de pombos, 13% (26/200) foram positivas no exame bacteriológico e 27% (54/200) das amostras positivas no rPCR. Do total de 60 amostras obtidas dos urubus, nenhuma amostra foi positiva no bacteriológico convencional e 8,3% (5/60) foram positivas no rPCR. Para a pesquisa de Mycoplasma, das amostras colhidas dos pombos, 7,5% (15/200) amostras foram reativas no teste sorológico, sendo 4,5% (9/200) positivas para M. galliisepticum e 3% (6/200) para M. synoviae. Já no rPCR, 2,5% (5/200) foram positivas para M. gallisepticum. Das amostras colhidas dos urubus, nenhuma foi positiva nos dois testes aos quais foram submetidas. Foi isolado E. coli das excretas e detectado pela PCR os genes de virulência papC, tsh, iuc e iss, com resultado para amostras de pombos de 11,23%(20/178) para iuc, 2,24% (4/178) papC, 11,79% (21/179) tsh e 6, 17% (11/178). Para urubus 8,16% (4/49) iuc, 14,28% (7/49) tsh, 6,12% (3/49) iss, e nenhuma positiva para papC. Adicionalmente, os isolados de E. coli foram submetidos a teste de perfil de resistência à antibióticos em que se obteve: sulfametazina122/178 (68,53%), ampicilina 130/178 (73,03%), ciprofloxacina 40/178 (22,47%), apramicina 57/178 (32,02%), sulfametropin 110/178 (61,79%), enrofloxacina 71/178 (39,88%), tetraciclina 119/178 (66,85%), sulfonamida 123/172 (69,10%), neomicina 59/178 (33,14%), doxaciclina 67/178 (37,64%), oxitetraciclina 51/178(28,65%), gentamicina 42/178 (23,59%), ceftiofur 79/178 (44,38%), amoxicilina + ac. clavulânico 92/178 (51,68%) de resistência nas amostras isoladas de pombos, e em amostras isoladas de urubus: sulfametazina 36/49 (73,46%), ampicilina 39/49 (79,59%), ciprofloxacina 12/49 (24,48%), apramicina 9/49(18,36%), sulfametropin 30/49 (61,22%), enrofloxacina 7/49 (14,28%), tetraciclina 27/49 (55,10%), sulfonamida 32/49 (65,30%), neomicina 12/49 (24,48%), doxaciclina 11/49 (22,44%), neomicina 9/49 (18,36%), oxitetraciclina 11/49 (22,44%), gentamicina 10/49 (20,40%), ceftiofur 12/49 (24,48%), associação de amoxicilina e ácido clavulânico 31/49 (63,26%) de resistência. Os resultados sugerem que essas aves de comportamento sinantrópico, são potenciais veiculadores de agentes causadores de perdas na produção avícola e preocupantes para a saúde pública. Além disso, podem constituir em suporte de transferência de fenótipos de E.coli resistentes. / Aves sinantrópicas aproximam-se de atividades humanas em busca de abrigo, água e alimento, podendo percorrer grandes distâncias para tanto. Em busca de informações acerca da importância dessas aves na transmissão de agentes patogênicos de importância na avicultura comercial, foi realizado estudo com 260 aves de comportamento sinantrópico, sendo 200 pombos comuns (Columba livia) e 60 urubus de cabeça preta (Coragyps atratus), na região metropolitana de Goiânia - Goiás. Foram colhidas amostras de fezes, soro e suabes traqueais que foram submetidos a testes para detecção de Salmonella sp. por bacteriologia convencional e Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (rPCR), Mycoplasma galisepticum e M. synoviae pela Soroaglutinação Rápida em Placa (SAR) e rPCR, além de isolamento de Escherichia coli pela bacteriologia convencional com detecção de genes de virulência de E. coli patogênica para aves (APEC) pela PCR e perfil de suscetibilidade a antimicrobianos dos isolados. Os resultados observados, na pesquisa de Salmonella sp. das amostras de pombos, 13% (26/200) foram positivas no exame bacteriológico e 27% (54/200) das amostras positivas no rPCR. Do total de 60 amostras obtidas dos urubus, nenhuma amostra foi positiva no bacteriológico convencional e 8,3% (5/60) foram positivas no rPCR. Para a pesquisa de Mycoplasma, das amostras colhidas dos pombos, 7,5% (15/200) amostras foram reativas no teste sorológico, sendo 4,5% (9/200) positivas para M. galliisepticum e 3% (6/200) para M. synoviae. Já no rPCR, 2,5% (5/200) foram positivas para M. gallisepticum. Das amostras colhidas dos urubus, nenhuma foi positiva nos dois testes aos quais foram submetidas. Foi isolado E. coli das excretas e detectado pela PCR os genes de virulência papC, tsh, iuc e iss, com resultado para amostras de pombos de 11,23%(20/178) para iuc, 2,24% (4/178) papC, 11,79% (21/179) tsh e 6, 17% (11/178). Para urubus 8,16% (4/49) iuc, 14,28% (7/49) tsh, 6,12% (3/49) iss, e nenhuma positiva para papC. Adicionalmente, os isolados de E. coli foram submetidos a teste de perfil de resistência à antibióticos em que se obteve: sulfametazina122/178 (68,53%), ampicilina 130/178 (73,03%), ciprofloxacina 40/178 (22,47%), apramicina 57/178 (32,02%), sulfametropin 110/178 (61,79%), enrofloxacina 71/178 (39,88%), tetraciclina 119/178 (66,85%), sulfonamida 123/172 (69,10%), neomicina 59/178 (33,14%), doxaciclina 67/178 (37,64%), oxitetraciclina 51/178(28,65%), gentamicina 42/178 (23,59%), ceftiofur 79/178 (44,38%), amoxicilina + ac. clavulânico 92/178 (51,68%) de resistência nas amostras isoladas de pombos, e em amostras isoladas de urubus: sulfametazina 36/49 (73,46%), ampicilina 39/49 (79,59%), ciprofloxacina 12/49 (24,48%), apramicina 9/49(18,36%), sulfametropin 30/49 (61,22%), enrofloxacina 7/49 (14,28%), tetraciclina 27/49 (55,10%), sulfonamida 32/49 (65,30%), neomicina 12/49 (24,48%), doxaciclina 11/49 (22,44%), neomicina 9/49 (18,36%), oxitetraciclina 11/49 (22,44%), gentamicina 10/49 (20,40%), ceftiofur 12/49 (24,48%), associação de amoxicilina e ácido clavulânico 31/49 (63,26%) de resistência. Os resultados sugerem que essas aves de comportamento sinantrópico, são potenciais veiculadores de agentes causadores de perdas na produção avícola e preocupantes para a saúde pública. Além disso, podem constituir em suporte de transferência de fenótipos de E.coli resistentes.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Andrea de M Carvalho.pdf: 1444862 bytes, checksum: 3bf8e2770c660abde140e4d1818cf624 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / The investigation of pathogens in wild animals can be considered an important tool for conservation of species and ecosystem. Chlamydiosis was first identified and is a common disease in psittacines. It is considered the most important zoonosis spread by these birds. Due to its infectious nature, this disease is studied all around the world. The mycoplasmosis is a common respiratory disease in pigeons, chickens and birds. However, parrots can be affected if they get in contact with the agent, and they can become a source of infection for the environment and for other birds. This study aimed to identify, through the polymerase chain reaction PCR technique, bacteria Chlamydophila spp., Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae in captivity parrots in three different facilities in Goiás state: CETAS Centro de Triagem de AnimaisSilvestres, a conservation and a comercial captivity. The results were compared in order to determine wich facility is more perserved or contaminated by pathogens. For Chlamydophilaspp, CETAS facility showed 25.6% of positive samples, while the commercial captivity showed 26.4%, and the conservation captivity had no positive samples (0%). For the presence of Mycoplasma gallisepticum, CETAS presented 21.62% of positive samples, while the commercial and conservation captivity showed 15.7% and 14% of positive samples, respectively. M. synoviae was almost absent in CETAS (2.7%) and in conservation captivity (1.3%), and absent in commercial captivity (0%). The results found were compared using Fischer s exact test, where CETAS and commercial captivity were more infected than conservation captivity. The bacteria studied were present in different species of parrots, especially on the genera Ara, Aratinga and Amazonas. The presence of Chlamydophila and Mycoplasma sp. should be investigated in captive birds, since it reveals the presence of the agents in the population, allowing its control. / A investigação de agentes patológicos em animais silvestres é uma importante ferramenta na conservação das espécies e do ecossistema. A clamidiose é uma doença frequente em psitacídeos, onde foi isolada pela primeira vez, considerada a zoonose de maior importância transmitida por essas aves. Devido a seu caráter infeccioso essa enfermidade é estudada em todo o mundo. A micoplasmose é uma doença respiratória frequente em pombos, galinhas e pássaros. No entanto, psitacídeos podem ser acometidos caso entrem em contato com o agente, podendo se tornar fonte de infecção para o ambiente e para outras aves. Esse trabalho teve como objetivo a identificação, pela técnica da reação em cadeia da polimerase PCR, dos agentes bacterianosChlamydophila spp.,Mycoplasma gallisepticum e M. Synoviae, em psitacídeos de cativeiro em três estabelecimentos diferentes no estado de Goiás: o CETAS Centro de Triagem de Animais Silvestres, um criadouro comercial e outro conservacionista. Para a presença de Chlamydophila as amostras do CETAS foram reagentes em 25,6% das amostras enquanto o criadouro comercial 26,4%, o conservacionista (0,0%) não teve amostras positivas. Para a presença de Mycoplasma gallisepticum as aves do CETAS reagiram em 21,62% das amostras, enquanto aves do criadouro comercial e do conservacionista reagiram em 15,7% e 14%, respectivamente. A presença deM. synoviae foi baixa nos cativeiros estudados, sendo essa de 2,7% para o CETAS, 1,3% para o criadouro conservacionista e 0,0% para o comercial. A diferença entre os resultados encontrados por propriedade foi comparada utilizando o Teste Exato de Fisher, sendo que o CETAS e o criadouro comercial apresentaram mais animais infectados do que o criadouro conservacionista. As bactérias estudadas estiveram presentes em diferentes espécies de psitacídeos com destaque para os gêneros Ara,Amazonase Aratinga. A presença de Chlamydophilae Mycoplasmasp. deve ser investigada em aves em cativeiro, uma vez que revela a ocorrência dos agentes na população, permitindo o seu controle.