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Caracterização molecular de isolados de Trypanosoma cruzi obtidos de mulheres durante a fase crônica da doença de ChagasAvelar, Juliana Boaventura 29 February 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-02-29 / Chagas disease is a zoonotic disease caused by a protozoan plagued
called Trypanosoma cruzi, it is a particular problem in Latin America, where it is
estimated that 12 to 14 million people are infected. The populations of
Trypanosoma cruzi can be divided into two major groups, the Trypanossoma
cruzi I (TCI) and Trypanossoma cruzi II (TCII), the last being more
heterogeneous and divided into five subgroups TCIIa, TCIIb, TCIIc, TCIId and
TCIIe However, little is known of epidemiological and clinical implications of
these ratings. The frequency of vertical transmission of Chagas disease can
vary from 1.6 to 18.5% in accordance with the region and the methodology used
in the studies. The aim of this study was to genetic characterization of 30
isolates of T. cruzi through the blood of patients with Chagas disease in the
chronic phase, pregnant and not pregnant. The genetic characterization was
performed with three different markers that amplified regions of the 18S and
24S α DNA ribosomal and mini-exon of the gene that allows classify the groups
and subgroups of the parasite and the analysis of genetic variability among
isolates of T. cruzi was performed the characterization of the variable region of
minicicles of kDNA through the technique of Low-Stringency Single Specific
Primer-PCR (LSSP-PCR). The 30 patients studied 75% (25/30) were women
and 25% (5 / 30) not pregnant. The patients are the four different Brazilian
regions being the States of Bahia 53.3% (16/30), Goiás 40.0% (12/30), Paraíba
3.3% (1 / 30) and the Federal District 3, 3% (1 / 30). The analysis of rDNA
allowed show the TCII in 100% of the isolated populations in the regions
studied, where the subgroup TCIIb/e has been detected in (96.66%) and TCIId
in (3.33%) the latter is a sample of the group Control of the State of Bahia. The
genetic variability between the 30 samples was 24.08 ± 14.4% share of bands
among pairs. There was no difference between the share of bands patients of
Bahia and Goiás, where the value of significance was less than 5%. There was
no difference between the percentages of bands showed in analyses by age of
the patients, gestational age and in the analysis of the groups of pregnant and
not pregnant. In reviewing more than one tube of blood per patient coming
evidenced profiles of signatures genomic complex and heterogeneous with
62.5% of bands shared less than 77% and only 37.5% had rates higher than
83% of bands sharing among samples. Suggesting so our isolates showed a
great genetic variability. / A doença de Chagas é uma zoonose causada por um protozoário
flagelado denominado Trypanosoma cruzi, trata-se de um problema específico
da América Latina, onde estima-se que 12 a 14 milhões de pessoas estejam
infectadas. As populações de Trypanosoma cruzi podem ser divididas em dois
grandes grupos, o Trypanossoma cruzi I (TCI) e o Trypanossoma cruzi II (TCII),
sendo o último mais heterogêneo e subdividido em cinco subgrupos TCIIa,
TCIIb, TCIIc, TCIId e TCIIe, porém, pouco se sabe das implicações clínicas e
epidemiológicas dessas classificações. A freqüência da transmissão vertical da
doença de Chagas pode variar de 1,6 a 18,5% de acordo com a região e a
metodologia usada nos estudos. O objetivo desse estudo foi a caracterização
genética de 30 isolados de T. cruzi por meio da hemocultura de pacientes com
doença de Chagas na fase crônica, gestantes e não gestantes. A
caracterização genética foi realizada com três diferentes marcadores que
amplificaram regiões 24Sα e 18S do DNA ribossômico e do gene mini-exon
que permite classificar os grupos e subgrupos do parasito e para a análise da
variabilidade genética entre os isolados do T. cruzi foi realizada a
caracterização da região variável dos minicírculos do kDNA por meio da técnica
de Low stringency specifc primer (LSSP-PCR), das 30 pacientes estudadas
75% (25/30) eram gestantes e 25% (5/30) não gestantes. As pacientes são de
quarto regiões brasileiras distintas sendo elas dos Estados da Bahia 53,3%
(16/30), Goiás 40,0% (12/30), Paraíba 3,3% (1/30) e Distrito Federal 3,3%
(1/30). A análise do rDNA permitiu evidenciar o TCII em 100% das populações
isoladas nas regiões estudadas, onde o subgrupo TCIIb/e foi detectado em
(96,66%) e o TCIId em (3,33%) este último corresponde a uma amostra do
grupo controle do Estado da Bahia. A variabilidade genética entre as 30
amostras analisadas foi de 24,08 ± 14,4% de compartilhamento de bandas
entre os pares. Houve diferença no compartilhamento de bandas entre as
pacientes da Bahia e Goiás, onde o valor de significância foi menor que 5%.
Não houve diferença entre as porcentagens de bandas compartilhadas nas
análises realizadas por faixa etária das pacientes, idade gestacional e na
análise dos grupos de gestantes e não gestantes. Ao analisar mais de um tubo
proveniente da hemocultura por paciente evidenciamos perfis de assinaturas
gênicas complexas e heterogêneas com 62,5% de bandas compartilhadas
menor que 77% e apenas 37,5% tiveram índices maiores que 83% de
compartilhamento de bandas entre as amostras. Sugerindo assim que nossos
isolados apresentaram uma grande variabilidade genética.
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