Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Veridiana Maria Brianezi Dignani de Moura / Banca: Marcela Marcondes Pintos Rodrigues / Resumo: A próstata canina pode utilizada como modelo para estudo comparativo de afecções desta glândula no homem, constituindo as únicas espécies em que o carcinoma de próstata (CaP) se desenvolve espontaneamente. A próstata canina é sede de diversos processos patológicos que comumente acometem cães adultos e idosos. O papel do oncogene c-MYC e supressores tumorais NKX3.1 e E-caderina são bem estabelecidos no processo de carcinogênese da próstata humana, no entanto, não há pesquisas que relatem a expressão proteica dessas proteínas na progressão do CaP canino. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar a expressão proteica de c-MYC, NKX3.1 e Ecaderina na próstata normal, com Hiperplasia Prostática Benigna (HPB), Atrofia Inflamatória Proliferativa (PIA) e CaP e avaliar o papel dessas proteínas no processo de gênese tumoral. O presente estudo foi realizado em uma plataforma de Microarranjo de Tecido (TMA) contendo diferentes lesões prostáticas. Foi realizada Imuno-histoquímica com os anticorpos c-MYC, NKX3.1 e E-caderina pelo método da peroxidase e DAB. A análise estatística foi realizada pelo teste de Qui-quadrado ou teste de Fischer para determinar associação entre as variáveis. A proteína c-MYC apresentou maior expressão no CaP e na PIA quando comparada com a próstata normal e com HPB (p= 0,0068). Observou-se maior número de amostras com ausência da expressão do NKX3.1 no CaP (94.75% ) e PIA (100%) quando comparando com a próstata normal e HPB (p=0,0022). Em relação a E-caderina houve maior número de amostras positivas na HPB e próstata normal quando comparado CaP e a PIA, no entanto sem diferença estatística. O processo de gênese tumoral na próstata canina esta associado com o aumento de expressão proteica do c-MYC e a perda da expressão proteica do NKX3.1 / Abstract: The dog is the only species besides humans that develop spontaneous and naturally prostatic carcinoma (PCa) with high frequency. The canine model is primarily used for studies of molecular mechanisms of PCa and provides a natural animal model for studies of potential therapies. PCa in men presents CMYC oncogene mutation and reduced E-cadherin and NKX3.1 protein expression. In this context our objective was to evaluate NKX3.1, C-MYC and E-cadherin expression in benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammatory atrophy (PIA) and PCa in dogs and verify the role of these proteins in the progression to prostate cancer. A tissue microarray (TMA) slide was constructed and immunohistochemistry with antibodies C-MYC, NKX3.1 and E-cadherin was performed with peroxidase method and DAB. Chi-square or Fisher exact test was used to determine the association between the categorical variables. The evaluation of the C-MYC oncogene protein showed higher cytoplasmic positivity in canine PCa and PIA compared to BPH (p= 0.0068). We observed a decrease of NKX3.1 expression in 94.75% of PCa, 100% of PIA in comparison to BPH (p=0.0022). E-cadherin expression was higher in BPH and PIA in comparison to PCa, with no statistical difference. The carcinogenesis process of canine prostatic lesion may be related to gain of CMYC and loss of NKX3.1 / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-22Bitstream added on 2014-06-13T18:56:32Z : No. of bitstreams: 1 lima_br_me_jabo.pdf: 444365 bytes, checksum: 453943593f9cac7e3ee44b4d57d8f328 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Nas cadelas, os tumores de mama representam em média 40% de todos os tumores, e sua carcinogênese é atribuída a interação complexa de fatores individuais da paciente. A enzima ciclooxigenase-2 (COX-2) apresenta-se como um marcador potencial para o câncer de mama, uma vez que é expressa em resposta a processos inflamatórios, que frequentemente acompanham as neoplasias e alterando o seu prognóstico. A caspase-3 é foco de estudos relacionados ao mecanismo da apoptose, tornando-se peça-chave no entendimento dos mecanismos de morte celular. O VEGF está envolvido na angiogênese e linfangiogênese, apresentando papel importante na progressão do câncer. O objetivo deste trabalho foi investigar a imunorreatividade da ciclooxigenase-2, do VEGF e da Caspase-3 nas neoplasias mamárias de cadelas, e correlacionar a expressão da COX-2 com o VEGF e com a Caspase-3, nesses tumores. Para a realização deste estudo foram selecionadas 60 amostras de tumores mamários de cadelas e 10 amostras de tecido mamário livre de malignidade que foram divididas em seis grupos compostos por 10 tumores de mesma classificação histológica cada grupo, e um grupo composto por 10 amostras de tecido mamário livre de malignidade. Os grupos foram denominados Adenomas, Carcinomas de prognóstico bom, Carcinomas de prognóstico ruim, Carcinomas primários metastáticos, Metástases pulmonares, Carcinomas inflamatórios e Controle. Os 7 grupos foram agrupados em micro-arranjo tecidual em lâmina de microscopia, e analisados através de imunoistoquímica pela técnica estreptavidina-biotina-peroxidase. A avaliação da intensidade de marcação foi obtida por densitometria com auxílio do programa ImageJ. A intensidade da marcação da Cox-2 foi maior nos casos de metástase pulmonar e fraca nos casos de... / In bitches, breast tumors represent an average of 40% from all tumors, and its carcinogenesis is attributed to a complex interaction of individual patient’s factors. The enzyme cyclooxygenase-2 (COX-2) is presented as a potential marker for breast cancer, since it is expressed in response to inflammation, which are often associated with neoplasms, changing its prognosis. Caspase-3 has been investigated as a key-protein associated with the mechanism of apoptosis, becoming a key part in understanding the mechanisms of cell death. VEGF is involved in angiogenesis and lymphangiogenesis, presenting important role in cancer progression. The objective of this study was to investigate the immunoreactivity of cyclooxygenase-2, VEGF and Caspase-3 in mammary neoplasms in bitches, and correlate the expression of COX-2 and VEGF and the Caspase-3 in these tumors. For this study we selected 60 samples of bitches´s mammary tumors and 10 samples of breast tissue malignancy´s free, which were divided into six groups of 10 tumors of the same histological grade of each group and one group of 10 breast tissue samples malignancy´s free. The groups were called adenomas, carcinomas good prognosis, carcinomas with poor prognosis, metastatic primary carcinomas, lung metastases, inflammatory carcinomas and Control. The seven groups were grouped into tissue micro-array on a microscope slide, and analyzed by immunohistochemistry technique streptavidin-biotin-peroxidase. The evaluation of the intensity of staining was obtained by densitometry using the program ImageJ. The intensity of COX-2 labeling was higher in cases of pulmonary metastasis and poor in cases of adenoma. In the assessment of marking of Caspase-3, there was a significant correlation between the control and carcinoma with poor prognosis (p <0.001) Furthermore, there was significant difference... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-24Bitstream added on 2014-06-13T20:36:38Z : No. of bitstreams: 1 castanheira_tll_me_jabo.pdf: 1011727 bytes, checksum: 6802e0d2b98dfe51ff07bd14ac18d497 (MD5) / O microambiente do tecido mamário é regido desde o seu desenvolvimento embrionário por uma complexa rede de citocinas, como o TNF-, o IFN-, a IL-4 e a IL-10, e de componentes celulares. O desequilíbrio entre a resposta destas citocinas e a presença de células inflamatórias como macrófagos e linfócitos T estão correlacionados com a malignidade dos tumores de mama em mulheres, auxiliando na progressão e metastatização dos carcinomas mamários. O objetivo deste estudo foi caracterizar a malignidade dos tumores de mama na espécie canina, por meio da expressão destas citocinas pela técnica quantitativa de RT-PCR em tempo real e da densidade de células inflamatórias pela técnica de imuno-histoquímica. A expressão das citocinas e a densidade do infiltrado inflamatório foram comparadas em cada um dos grupos experimentais, através de análise de variância, utilizando-se como teste de comparação de médias, contrastes ortogonais, com nível de significância de 5%. O coeficiente de correlação de Spearman foi empregado para a análise de correlação entre as variáveis das citocinas, leucócitos e outros dados secundários. As maiores expressões de TNF-, IL-4 e IL-10 e a presença de macrófagos e linfócitos T ocorreram nos carcinomas mamários, demonstrando que este conjunto de citocinas e células inflamatórias quando presentes no microambiente tumoral favorecem a progressão e malignização tumoral / The microenvironment of the breast tissue is governed since his embrionary development by a complex cytokine network including TNF-, IFN-, IL-4 and IL-10, and cellular components. The imbalance between the response of these cytokines and inflammatory cells such as macrophages and lymphocytes had been correlated with the malignancy of breast tumors in women aiding in the progression and metastasis of breast carcinomas. The aim of this study was to characterize the malignancy of breast tumors in dogs through the expression of these cytokines by the technique of quantitative real time RT-PCR and the density of the inflammatory cells in canine mammary tissues by immunohistochemistry. The cytokine expression and density of inflammatory infiltrate were compared in each experimental groups, using analysis of variance, taking as tests of comparison of means, orthogonal contrasts, with a significance level of 5%. The Spearman rank correlation coefficient was used to analyze the correlation between the variables of cytokines, leukocyte, and others secondary data. The highest expression of TNF-, IL-4 and IL-10 and the presence of macrophages and T lymphocytes occurred in breast carcinomas, demonstrating that this set of cytokines and inflammatory cells present in the tumor microenvironment can promote tumor progression, and malignancy

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-19Bitstream added on 2014-06-13T20:57:19Z : No. of bitstreams: 1 cremasco_acm_me_botfmvz.pdf: 1408225 bytes, checksum: 22283fa61c7ebaf789ec7232efaf4d23 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho teve por objetivo avaliar o índice proliferativo das amostras de sarcoide equino pelo método histoquímico de AgNOR e por método imuno-histoquímico pela expressão do Ki-67 (MIB 1); a avaliar o índice apoptótico pela expressão de caspase- 3; e a expressão da p53 mutante e “wild type” no sarcoide equino por meio de método imuno-histoquímico. Além disso, procurou correlacionar esses dados com os tipos clínicos de sarcoide equino, sendo cada amostra classificada clinicamente, segundo Knottenbelt (2005), a partir das descrições recuperadas nos prontuários de registro dos animais e das fichas de diagnóstico dos casos utilizados neste projeto. As amostras utilizadas foram recuperadas do material de arquivo, sendo utilizadas também novas amostras encaminhadas durante o período de realização deste projeto. Desta forma, 41 amostras de sarcoide equino provenientes de 35 equinos. O presente estudo demonstrou que entre os animais portadores de sarcoide equino, excluindo-se os SRD, predominaram àqueles pertencentes às raças Quarto de Milha, Puro Sangue Inglês e Mangalarga, preponderando os machos em relação às fêmeas, sendo que 83% dos animais possuíam menos de dez anos de idade. A localização preferencial das neoplasias na nossa casuística foi na região da cabeça, seguida dos membros e da região peitoral, prevalecendo as lesões únicas e maiores do que quatro centímetros. Dos tipos clínicos de sarcoide equino, o mais frequente entre os animais incluídos neste estudo foi o fibroblástico, seguido dos tipos verrucoso, nodular e misto, sendo o tipo oculto pouco frequente. Os resultados não mostraram diferença significativa quanto a proliferação celular (AgNOR e Ki-67), e quanto ao tipo de marcação da p53 entre os tipos clínicos de sarcoide equino. A expressão da p53... / This study has been elaborated to evaluate the proliferative index of equine sarcoid samples by AgNOR methodology and Ki67 immunohistochemical expression; to also evaluate the apoptotic index by caspase-3 immunohistochemical expression, as well as the expression of p53 mutant and wild type protein. Moreover, we correlate these data with clinical types of equine sarcoid, according to Knottenbelt (2005), from descriptions recovered of animals data reports and diagnosis files of case studied in this project. Tissue samples were obtained from 35 horses who had their masses submitted to the Pathology Service at São Paulo State University, Botucatu, SP, Brazil, and new clinical cases during the study. Breeds most affected were Quarter Horse, Thoroughbred and Mangalarga. Males were more affected and 83% of the animals were less than ten years old. The preferential location of the tumors in our series was in the head, followed by members and chest area, prevailing single lesions larger than four centimeters. As for the clinical types of equine sarcoid, the most frequent included fibroblast, followed by verrucous, nodular and mixed. The results showed no significant differences in cell proliferation and the type of p53 expression between the clinical types of equine sarcoid. The expression of p53 has demonstrated to be predominantly perinuclear, regardless the clinical type of sarcoid. This location may indicate the functional inactivation of this protein. The expression of caspase- 3 showed that the apoptotic index was higher in fibroblastic and nodular clinical types, and lower in verrucous clinical type. This data can be... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-01Bitstream added on 2014-06-13T20:57:22Z : No. of bitstreams: 1 magalhaes_gm_me_jabo.pdf: 1621150 bytes, checksum: b5a01c9394af10e93a8a4a2595f1190d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As neoplasias mamárias caninas são as mais frequentes nessa espécie e também são comuns em mulheres. Um dos principais fatores prognósticos dessa enfermidade é a presença ou ausência de metástase em linfonodos. A metástase é um mecanismo complexo que envolve vários fatores. Em mulheres sabe-se que a molécula de adesão CD44 está relacionada com invasão e metástase. Este trabalho teve como objetivos: avaliar a imunomarcação de CD44 nas neoplasias mamárias malignas da cadela, com e sem metástase em linfonodos regionais; associá-la como fator prognóstico; na detecção precoce de metástase; relacioná-la com a imunomarcação de MMP-9, E-caderina e VEGF e associar com a sobrevida das cadelas. Compuseram os grupos experimentais, cadelas com tumor mamário, com (Grupo M) ou sem metástase (Grupo N) detectável em linfonodos e um grupo controle composto por tecido mamário normal. Não houve predileção por localização mamária, mas utilizou-se mais as mamas inguinais e linfonodos inguinais. As neoplasias mamárias foram classificadas de acordo com a Organização Mundial de Saúde. Para isso utilizou-se a técnica de imuno-histoquímica, em amostras incluídas em parafina. Para a determinação da porcentagem de imunomarcação considerou-se somente as células epiteliais neoplásicas. Para o anticorpo CD44 contou-se as marcações em linfócitos T nos linfonodos dos dois grupos Observou-se aumento significativo na marcação do CD44 do sítio primário do tumor para a metástase, assim como nas marcações de MMP-9 e E-caderina. As marcações em linfócitos T foram maiores no grupo N e menores no grupo M. O tipo histopatológico mais comum foi o carcinoma simples túbulo papilífero. A raça predominante no grupo das metástases foi Teckel, com idade média de 9,4 anos, e com tempo de sobrevida de sete meses. Concluiu-se... / Mammary neoplasia are the most frequently type of cancer in bitches and also in women. One of the main prognostic factors of this desease is the presence or absent of lymphonodes metastasis. Metastasis is a complex mechanism which involve multiple factors. At women, researchs have shown that the CD44, a adhesion molecule, is related with invasion and metastasis. This research looked for as objectives: Evaluation of CD44 in malignant mammary neoplasia at bitches with and without lymphonodes metastasis; link CD44 and prognosis; CD44 and early detection of metastasis; link CD44 with MMP-9; E-cadherin and VEGF; and associate with the survival of bitches. Experimental groups were arranged with bitches suffering from mammary neoplasia and divided into three groups: Group one(M) were compounded by bitches with visible metastasis in the lymphonodes; Group two(N) were compounded by bitches without visible metastasis in the lymphonodes;Group three or control compounded by bitches with normal mammary tissue. During the research did not have predilection about the mammary localization, despite inguinal breast and lymphonodes were more collected. Mammary neoplasias were classified according to the OMS norms. For this we used the technique of immunohistochemistry in paraffin sections and counted only epithelial cancer cells by method of percentage of labeled cells. Only antibody to CD44 told that the markings on T lymphocytes in lymph nodes of the two groups observed a significant increase in CD44 marking the site of the primary tumor to metastasis, as well as the markings of MMP-9 and E-cadherin. The markings on T lymphocytes were higher in group N and lower in group M. The most common pathological type was the simple tubular papillary carcinoma. The xiii predominant race in the group of metastasis was Daschshund, mean age 9,4 years, and survival... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:50:43Z : No. of bitstreams: 1 varallo_gr_me_jabo.pdf: 706691 bytes, checksum: 794ec257eb79d62a52eb6aa5fd7bb36d (MD5) / A glândula mamária é o sítio neoplásico primário mais frequente em cadelas. A apresentação clássica da doença é caracterizada por pacientes idosas não castradas ou castradas tardiamente e com múltiplas nodulações. O diagnóstico definitivo das lesões é dado pelo exame histopatológico. Nos dias atuais, especialmente em oncologia veterinária, a determinação precoce de um estado neoplásico pode alterar o curso da doença. Nesse âmbito, a citologia com agulha fina possui grande valia, pois permite a diferenciação entre processos inflamatórios, formações neoplásicas benignas e malignas de forma rápida, precisa e segura. Entretanto, a aplicação nos tumores mamários, em medicina veterinária, possui inúmeras controvérsias, em virtude da diversidade histológica. O presente estudo teve como objetivo comparar os exames citológicos e histopatológicos em cadelas e, assim, avaliar a acurácia da citologia por capilaridade com agulha de insulina nas lesões neoplásicas de mama. Para tanto, estudou-se 69 lesões mamárias obtidas de pacientes atendidas no Setor de Oncologia Veterinária da Unesp, Câmpus de Jaboticabal, e no Instituto Veterinário Dr. Daleck. A punção por capilaridade foi realizada em quatro áreas diferentes do tumor com agulhas de insulina. Os esfregaços citológicos foram corados com May Grünwald Giemsa. Já os fragmentos tumorais colhidos para o exame histopatológico foram fixados imediatamente em formol tamponado a 10% durante 48 horas e, após o processamento, foram corados com hematoxilina - eosina e classificados segundo Cassali et al., 2011. Os resultados obtidos revelaram 83,9% de sensibilidade, 100% de especificidade, 100% de valor preditivo positivo (VPP), 9,1 % de valor preditivo negativo (VPN) e 84,1% de acurácia da técnica citológica em detectar neoplasias mamárias malignas. A citologia por... / The mammary gland is the most common primary neoplasm site in female dogs. The classic presentation of the disease is characterized by elderly patients not spayed or later neutered with multiple nodules. Definitive diagnosis of lesions is given by histopathological examination. Nowadays, especially in veterinary oncology, the early detection of a neoplastic state can alter the course of disease. In this context, fine-needle cytology has great value because it allows differentiation between inflammatory processes, benign and malignant neoplastic formations quickly, accurately and safely. However, the application mammary tumors in veterinary medicine has several controversies, due to the diverse histology. The present study aimed to compare the cytological and histological bitches and thus evaluate the accuracy of cytology by capillarity with insulin needle in neoplastic lesions of the mammary glands. Therefore, we studied 69 breast lesions obtained from patients treated at the Service of Oncology Veterinary, Unesp Jaboticabal, and Veterinary Institute Dr. Daleck. The capillary puncture was performed in four different areas of the tumor with insulin needles. The cytology smears were stained with May Grünwald Giemsa. Already tumor fragments harvested for histologic examination were fixed immediately in 10% buffered formalin for 48 hours and, after processing, were stained with hematoxylin - eosin and classified according Cassali et al., 2011. The results showed 83.9% sensitivity, 100% specificity, 100% positive predictive value (PPV), 9.1% negative predictive value (NPV) of 84.1% and accuracy of cytological technique to detect cancers malignant breast. Cytology by capillarity with insulin needle, in this test, proved to be a superior technique to aspiration for diagnosis of malignant mammary gland tumors in female dogs because it allowed... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-17Bitstream added on 2014-06-13T19:50:48Z : No. of bitstreams: 1 rodigheri_sm_me_jabo.pdf: 609216 bytes, checksum: ff21325464104d3c0ab1346398c145ee (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A angiogênese tem importante participação na patogênese das neoplasias malignas em seres humanos e animais de companhia. Estudos envolvendo a influência dos fatores pró-angiogênicos no crescimento e disseminação dos tumores sólidos têm sido amplamente realizados, porém os relacionados às neoplasias hematopoiéticas são extremamente limitados. O presente estudo objetivou investigar o fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) nos linfomas caninos e sua relação com indicadores prognósticos da neoplasia. Foram avaliados 25 cães, sendo 10 sadios e 15 com linfoma. Os pacientes foram submetidos à coleta de sangue para mensuração da concentração sérica do VEGF, mediante ensaio imunoenzimático (ELISA), e biopsia de linfonodo ou de tecido neoplásico para avaliação da expressão do VEGF, pela técnica de imunoistoquímica. Embora a média das concentrações séricas do VEGF nos cães com linfoma (88,51±121,71) tenha sido superior à média dos cães sadios (17,93±23,34), estes valores não foram considerados significativos (p=0,10). A imunomarcação para VEGF foi maior (p<0,0001) em cães com linfoma (9,07±2,34) em comparação com os cães sadios (2,70±2,35). Não houve correlação significativa entre a concentração sérica e a marcação imunoistoquímica do VEGF com a localização anatômica, estádio e sub-estádio clínico, grau histológico, imunofenótipo e a sobrevida dos cães com linfoma. O sub-estádio clínico influenciou negativamente na sobrevida dos cães com linfoma. Os resultados obtidos permitem concluir que o VEGF possui grande importância no comportamento biológico dos linfomas caninos, seja mediante estímulo da angiogênese ou da linfangiogênese tumoral. São necessários estudos com maior número de animais para determinar o valor prognóstico do estímulo à angiogênese ou linfangiogênese nos linfomas caninos. / Angiogenesis has a major role in the pathogenesis of malignancies in human beings and companion animals. Studies involving the role of pro-angiogenic factors in growing and dissemination of solid tumors are commonly performed, but studies involving hematological malignancies are relatively limited. The present report aims to investigate the role of the vascular endothelial growth factor (VEGF) in canine lymphomas and its relation with prognostic factors. Twenty five dogs were evaluated: ten healthy dogs and fifteen dogs with lymphoma. Patients were submitted to blood sample collection to VEGF serum concentration measure, by means of sandwich enzyme immunoassay. Lymph node or neoplastic tissue biopsy was accomplished in order to evaluate VEGF expression, through immunohistochemical technique. Although VEGF serum concentrations mean in dogs with lymphoma (88,51±121,71) was found to be greater than VEGF serum concentrations in healthy dogs (17,93±23,34), this values were not statistically significant (p=0,10). VEGF expression was significantly higher (p=0,0001) in dogs with lymphoma (9,07±2,34) than VEGF expression in healthy dogs (2,70±2,35). No significant relationship was found between VEGF serum concentration or expression and anatomical localization, clinical stage, histological grade, immunophenotype or overall survival of lymphoma affected dogs. The clinical sub-stage was the only negative prognostic factor in overall survival of dogs with lymphoma. We conclude that VEGF has an important role in biological behavior of canine lymphomas, once is involved in tumoral angiogenesis or lymphangiogenesis stimuli. Larger series of animals are needed to determine the prognostic value of angiogenesis and lymphangiogenesis in canine lymphomas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:11:35Z : No. of bitstreams: 1 jark_pc_me_jabo.pdf: 485119 bytes, checksum: 92130707f3de0df30e2b62db8d3bbcfb (MD5) / O mastocitoma é a neoplasia cutânea de maior incidência nos cães e embora existam diversos fatores prognósticos, o comportamento clínico e biológico altamente variável desta neoplasia, faz como que a previsão da evolução e a escolha do melhor tratamento a ser utilizado sejam ainda um desafio. Desta forma, a utilização de técnicas moleculares que avaliam uma grande quantidade de genes envolvidos no processo neoplásico, pode ser uma ferramenta importante na determinação do prognóstico e até mesmo na eleição de genes candidatos a terapia alvo molecular. Uma das formas de se identificar os genes associados ao desenvolvimento ou a progressão tumoral é a investigação das alterações numéricas e estruturais em DNA isolado de células neoplásicas através da técnica de CGHarray (hibridação genômica comparativa baseada em arrays). Este estudo foi delineado com o objetivo de comparar as alterações do número de cópias gênômicas (ganhos/perdas) em mastocitomas cutâneos caninos de animais que sobreviveram um período menor que seis meses (SV<6), com aqueles com sobrevida superior a um ano (SV>12). Para isto foram selecionados 10 cães com mastocitoma cutâneo. A técnica de CGHarray foi utilizada em 4 mastocitomas do grupo SV>12 e em 6 do grupo SV<6. Os DNAs genômicos foram extraídos e os dados de alterações nos números de cópias de DNA foram gerados utilizando-se a plataforma Canine Genome CGH Microarray 4x180. A análise dos dados foi realizada utilizando o programa Nexusversion 5.0. Os resultados mostraram a média de 55,5 alterações no numero de cópias (CNA) nos casos avaliados. Os mastocitomas do grupo SV>12 apresentaram média de CNA de 11,25, enquanto que os tumores do grupo SV<6 apresentaram média de 85,0 CNA. No grupo SV<6 houve 75 genes caracterizados que... / Mast cell tumours are the most common cutaneous malignant tumours in the dogs. Although there are several prognostic factors, the clinical and biological behavior of this tumor is highly variable, making the choice of the best treatment to be used, a challenge. Thus, the use of molecular techniques to evaluate a large number of genes involved in the neoplastic process, as it can be a valuable tool in determining prognosis and the election of candidate genes to molecular targeted therapy in the future. One way to identify the genes associated with the development or tumor progression is the investigation of numerical and structural changes in DNA isolated from tumor cells using the technique of CGHarray (comparative genomic hybridization). This study was designed in order to compare changes in the number of gene copies (gains / losses) in canine cutaneous mast cell tumors of animals that survived a period less than six months (SV <6) to those with a higher survival, more than one year (SV> 12). For this, 10 animals were selected. The CGH array technique was used in 4 mast cell tumor from group SV> 12 and six animals from group SV <6. Genomic DNA was extracted and the data for changes in copy number of DNA were generated using the platform Canine Genome CGH Microarray 4x180 (ID-252 552 - Agilent). Data analysis was performed using the Nexus program version 5.0 (Biodiscovery). We were detected an mean of 55.5 changes in copy number (CNA) in the cases evaluated. The group SV> 12 present an average of 11.25 CNA while the SV<6 group present a mean of 85.0 CNA. In group SV <6 there were 75 genes that had characterized gain and 16 genes that showed copy number loss. The group SV> 12 show 24 genes with copy number gain and there were no loss in this group. The mast cell tumors with a worse... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-06Bitstream added on 2014-06-13T20:11:35Z : No. of bitstreams: 1 bicalho_sr_me_jabo.pdf: 151294 bytes, checksum: 550621907917717519898ec20c136186 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Tendo em vista a alta incidência das neoplasias mamárias e metástases em cadelas e objetivando contribuir com a oncologia veterinária na padronização de um teste simples, eficaz e acessível no diagnóstico precoce destas metástases, esse estudo teve como meta avaliar o marcador tumoral CA 15.3 no soro de cadelas saudáveis e investigar a viabilidade da quimioluminescência e do kit de reagentes desenvolvido para a espécie humana como ferramenta neste processo. Numa primeira etapa avaliou-se o soro de 100 cadelas saudáveis, de raças e idades variadas. Numa segunda etapa o soro de 10 cadelas saudáveis foi submetido ao processo de concentração de proteínas e posteriormente avaliado. Nas amostras não concentradas os níveis do marcador ficaram abaixo do limiar de detecção do kit. Nas amostras concentradas, o valor médio e respectivo desvio padrão observados foram 0,4140 ± 0,25 U/mL nas amostras com o dobro da concentração inicial e 0,5170 ± 0,25 U/mL nas amostras quatro vezes mais concentradas. Com base nos resultados obtidos neste estudo concluiu-se que o método empregado, ensaio imunoluminométrico por quimioluminescência e o kit de reagentes desenvolvido para a detecção do CA 15.3 na espécie humana mostram-se viáveis para utilização na espécie canina, necessitando entretanto de adequação da técnica / Given the high incidence of mammary tumors and metastases in female dogs and trying to contribute with the veterinary oncology in standardization of a simple, effective and affordable technique in the early diagnosis of these metastases, this study was aimed to evaluate the tumor marker CA 15.3 in serum of healthy dogs and to investigate the feasibility and the chemiluminescence reagent kit designed for the human species as a tool in this process. In a first step we evaluated the serum of 100 healthy female dogs of different breeds and ages. In a second step, the serum of 10 healthy female dogs was subjected to the process of proteins concentration and subsequently evaluated. In samples not concentrated, the levels were below the detection of the kit. In concentrated samples, the average value and its standard deviation observed were 0.4140 ± 0.25 U/mL in the samples with at double the initial concentration, and 0.5170 ± 0.25 U/mL in samples four times more concentrated. Based on the results of this study it is concluded that the method employed, chemiluminescent immunoluminometric assay, and the reagents kit designed for detection of the CA 15.3 in humans appear to be viable for use in dogs, however requiring adjustment of the technique

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-17Bitstream added on 2014-06-13T19:30:18Z : No. of bitstreams: 1 elston_f_me_botfmvz.pdf: 761718 bytes, checksum: 81122c35918693a19a60e5d812a92dba (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Tumores mamários expressam a enzima cicloxigenase (Cox-2), que caracteriza um processo inflamatório intenso e pode também demonstrar a presença de alterações paraneoplásicas. Este trabalho teve por objetivo estudar a expressão de Cox-2 em tumores mamários de cadelas e avaliar o efeito do anti-inflamatório firocoxibe sobre a mesma. Os animais selecionados foram divididos em dois grupos: controle (9 animais) e tratado (10 animais). As cadelas foram avaliadas por exame clínico, bioquímica sérica, tamanho, volume, localização e avaliação TNM dos tumores e avaliação da qualidade de vida. O grupo tratado recebeu o firocoxibe na dosagem de 5mg/kg ao dia por sete dias e após este período todos os animais foram novamente avaliados e submetidos à mastectomia. As amostras obtidas nos dois momentos foram avaliadas por exame histológico e imunoistoquímica para expressão de Cox-2. Os resultados mostraram que, embora não tenha havido diferença no tamanho do maior nódulo ou na expressão de COX -2 entre os grupos após o tratamento, o aumento na expressão de COX-2 observado no grupo controle não foi verificado no grupo tratado e que os animais que receberam o tratamento por 7 dias apresentaram diminuição dos níveis de proteínas séricas totais (p=0.00588) e aumento dos níveis séricos de uréia (p=0.01388). Estes resultados sugerem que o uso do firocoxibe como coadjuvante no tratamento de cadelas com neoplasia mamária submetidas à mastectomia pode ser benéfico para deter a evolução da doença, embora seja indicado o acompanhamento dos animais para garantir que não haja sangramento gastrintestinal e que a saúde seja preservada / Breast tumors express the enzyme cycloxygenase (COX-2), characterizing an inflammatory process and also demonstrate the presence of paraneoplastic alterations. This experiment aimed to study the expression of Cox-2 in mammary tumors of dogs and to evaluate the effect of anti-inflammatory firocoxib on it. The selected animals were divided into two groups: control (9 animals) and treated (10 animals). The animals were evaluated by clinical examination, serum biochemistry, size, volume, location and TNM evaluation of tumors and assessment of quality of life. The treatment group received firocoxib at dosage of 5mg/kg daily for seven days and after this period all animals were re-evaluated and submitted to mastectomy. The samples obtained at both moments were evaluated by histology and immunohistochemistry for the expression of Cox-2. The results showed that, although there was no difference in size of the largest tumor or in the expression of COX-2 between the groups after treatment, increased expression of COX-2 seen in the control group was not observed in the treated group and that those animals that received firocoxib for 7 days showed decreased levels of total serum protein (p = 0.00588) and increased serum levels of urea (p = 0.01388). These results suggest that the use of firocoxib as adjuvant therapy for dogs with breast cancer submitted to mastectomy can be beneficial to halt the progression of the disease, although monitoring of animals is indicated to ensure there is no gastrointestinal bleeding and health is preserved