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AnÃlise proteÃmica de raÃzes de feijÃo-de-corda (Vigna unguiculata), CV. CE-31, inoculadas com o nematÃide das galhas (Meloydogine incognita) / Proteomics analysis of cowpea roots (Vigna unguiculata), CV. CE-31, inoculated with root-knot nematode (Meloydogine incognita)

Josà HÃlio de AraÃjo Filho 15 September 2011 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O feijÃo-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] à uma importante leguminosa usada como alimento, sendo cultivada, primariamente, nas savanas secas do Continente Africano, na Ãsia e na AmÃrica do Sul, cobrindo mais de 12 milhÃes de hectares, com produÃÃo anual de cerca de 3 milhÃes de toneladas. O feijÃo-de-corda se constitui numa cultura de extrema importÃncia em zonas semi-Ãridas dos trÃpicos, caracterizadas por baixa precipitaÃÃo pluviomÃtrica, altas temperaturas, solos arenosos e de baixa fertilidade. Dentre os organismos que causam doenÃas nos vegetais, os nematÃides geram prejuÃzos anuais de, aproximadamente, vÃrios bilhÃes de dÃlares na agricultura mundial e as espÃcies Meloidogyne incognita e Meloidogyne javanica sÃo as mais danosas. Uma das principais culturas atacadas pelos nematÃides à o feijÃo-de-corda. Em funÃÃo disso, existe sempre demanda para se buscar melhorar a compreensÃo dessa relaÃÃo entre hospedeiros e patÃgenos objetivando criar novas estratÃgias para minimizar eventuais perdas. O presente trabalho teve como objetivo identificar as proteÃnas que tÃm sua expressÃo diferenciada em raÃzes de feijÃo-de-corda resistente ao Meloidogyne incognita (inoculadas e nÃo inoculadas) usando eletroforese bidimensional (2D) associada à espectrometria de massas de proteÃnas extraÃdas da raiz total e de mitocÃndrias de raiz do cv PitiÃba (CE-31), resistente ao nematÃide, inoculada com este patÃgeno, em comparaÃÃo com plantas nÃo-inoculadas (controle) em conjunto com anÃlise de expressÃo gÃnica semi-quantitativa (PCR semi-quantitativa). Os resultados aqui obtidos demonstraram que houve alteraÃÃo de pelo menos 22 proteÃnas nas amostras de raÃzes inoculadas e mais 22 proteÃnas de mitocÃndrias de raÃzes, quando comparados com seus respectivos controles e que o Ãpice das suas alteraÃÃes ocorriam por volta do 6 dia apÃs a inoculaÃÃo do patÃgeno. As proteÃnas de mitocÃndrias nÃo puderam ser identificadas com confiabilidade. Dentre as proteÃnas de raÃzes totais identificadas podemos destacar as PR-1, 2 e 3, que sÃo reconhecidamente proteÃnas de defesa, ascorbato peroxidase e superÃxido dismutase (enzimas anti-estresse oxidativo) e uma leghemoglobina, que pode ser o primeiro relato dessa proteÃna nesse patossistema. As anÃlises de expressÃo gÃnica concordaram perfeitamente com os achados proteÃmicos. / The cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is an important leguminous used as food, being cultivated, mostly in arid African savannas , Asia and south of America, covering more over 12 millions of hectares, with annual production about 3 millions of tons. The cowpea itâs a culture greatly important in tropics zones characterized by low pluviometric precipitation, high temperature , gravely soils and poor fertility. Among the pathogenic organism that cause plant disease, the nematode, mainly Meloydogine sp. generate annual losses about several billions of dollars all over the world and the Meloidogyne incognita and Meloidogyne javanica species be the most damagers. One of the main cultures attacked by nematodes is the cowpea. Regard it, there is always needs to improve the knowledge about the relationship between host and pathogens aimed develop novels strategies to diminish eventual losses. The present work aimed identify the differential expression of proteins in Meloidogyne incognita resistant cowpea total roots and mitochondria roots cv PitiÃba (CE-31), inoculated and mock inoculated, using 2D electrophoresis assay associated with MS identification and gene expression analyses by semi-quantitative PCR. The results obtained showed at least 22 altered proteins in inoculated total roots and more 22 proteins of mitochondria roots, when compared with their respective controls and the top of alterations occurred next to 6 day after inoculation with pathogen. Mitochondria proteins cannot be identified reliability. Among the total roots proteins we can emphasize PR-1, 2 and 3, recognized as defense proteins, ascorbate peroxidase and superoxide dismutase (anti-oxidative brush enzymes) and a leghemoglobin, which can be the first report about this protein in this pathosystem. The gene expression analyses coincided with proteomics finds.

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