Resumo: Lesões na cartilagem articular representam um desafio para a Medicina Veterinária devido ao limitado potencial intrínseco de reparação. As células tronco mesenquimais (CTM) e o plasma rico em plaquetas (PRP) vêm sendo utilizados na reparação condral pela capacidade de imunomodulação, quimiotaxia, por diminuir a degradação da cartilagem articular e exercer efeito anti-inflamatório. Esse trabalho estudou a eficácia das CTM e do PRP no tratamento de lesões condrais articulares, experimentalmente induzidas em equinos, apresentando os benefícios e os principais obstáculos encontrados na aplicação clínica e cirúrgica de equinos. Para isso, foi induzida uma lesão condral, na tróclea medial femoral dos dois membros pélvicos de oito animais. Após 30 dias da indução dessa lesão os animais, divididos em quatro grupos, receberam os tratamentos propostos: com CTM (Grupo 1); PRP (Grupo 2); CTM e PRP (Grupo 3) e um controle sem tratamento (Grupo 4). As avaliações dos parâmetros clínico-laboratoriais foram realizadas antes da indução da lesão (T-0), quinzenalmente até 120 dias e aos 150 dias (T-150). Avaliações macroscópicas, histopatológicas e histoquímicas foram realizadas em T-0 e T- 150. Pôde-se observar discreta melhora clínico-laboratorial dos grupos tratados quando comparados ao grupo controle. Os exames macroscópicos, histopatológicos e histoquímicos revelaram um melhor tecido de reparação nos grupos tratados, principalmente nos grupos 2 e 3. Sendo assim, o implante autólogo de CTM e do PRP apresentou efeitos benéficos no tratamento de lesões condrais, experimentalmente induzidas em equinos / Abstract: Articular cartilage defects represent a challenge for Veterinary Medicine due to the limited intrinsic potential of repair. Mesenchymal Stem Cells (MSC) and Platelet-Rich Plasma (PRP) have been used in cartilage repair to promote immunomodulation, chemotaxis, to decrease the degradation of articular cartilage and to take antiinflammatory effect. This work aims to study the use of intralesional MSC and the PRP in the treatment of articular cartilage defects induced experimentally in horses, noting the benefits and challenges encountered in implementing clinical-surgical in horses. For this purpose, both patellofemoral joints of eight animals were approached by arthroscopic surgery to perform a cartilage defect, on the medial femoral trochlea. After 30 days of induction the animals, who were divided into four groups, received treatment with: MSC (Group 1), PRP (Group 2), MSC and PRP (Group 3) and a control without treatment (Group 4). The clinical and laboratory assessments were performed every 15 days in 120 days, with last analysis in day 150. The macroscopic and morphologic analyses were performed at 0 and 150 day. There were clinical and laboratory improvement in the treated groups compared with control group. The macroscopic and morphological analysis showed a better tissue repair in the treated groups, mainly in groups 2 and 3. Thus, the implantation of autologous MSC and PRP showed beneficial effects in the treatment of chondral lesions, experimentally induced in horses / Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Coorientador: Marcos Jun Watanabe / Banca: Ligia Souza Lima Silveira da Mota / Banca: Raquel Yvone Arantes Baccarin / Mestre

Orientador: Rosilene Fernandes da Rocha / Banca: Wilson Roberto Sendik / Banca: Mariane Spalding / Banca: Fernando Renó de Lima / Banca: Lafayette Nogueira Junior / Resumo: O propósito deste trabalho foi avaliar o efeito do plasma rico em plaquetas associados ou não ao enxerto ósseo autógeno no processo de reparação óssea em defeitos cirúrgicos confeccionados na tíbia de coelhos. Nesta pesquisa foram utilizados 25 coelhos adultos, nos quais foram realizados 2 defeitos em cada tíbia, divididos nos seguintes grupos de acordo com o tratamento: controle (C - defeito preenchido somente por coágulo sangüíneo), autógeno (A - defeito + enxerto), PRP (PRP = defeito + PRP) e autógeno + PRP (PRPA - defeito + enxerto + PRP). Todos os defeitos foram recobertos com uma barreira de PTFE e decorridos 15, 30 e 60 dias, 5 animais foram sacrificados por período, sendo as peças contendo os defeitos processadas para análises histológica e histomorfométrica. Outros 5 animais foram sacrificados aos 30 e 60 dias e submetidos à análise das propriedades biomecânicas e todos os espécimes foram submetidos ao exame radiográfico para análise da densidade óptica. Os resultados biomecânicos, radiográficos e histomorfométricos mostraram maior resistência, densidade óptica e maior formação óssea nos grupos A e PRPA quando comparados com os grupos C e PRP. Os resultados obtidos possibilitaram concluir que não houve uma melhora nos parâmetros radiográficos, mecânicos e na neoformação óssea quando o PRP foi usado isoladamente ou associado ao enxerto ósseo autógeno. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of platelet rich plasma associated or not to autogenous bone graft in bone repair process of tibia rabbits surgical defects. In this research 25 adult rabbits were used, 2 defects were accomplished in each tibia, divided into groups: control (C = bone defect only filled out by blood coagulum), autogenous (A = bone defect + autogenous graft), PRP (PRP = bone defect + PRP) and autogenous + PRP (PRPA = bone defect + autogenous graft + PRP). All of the defects were covered with a PTFE barrier and after 15, 30 and 60 days there were elapsed. Five animals were sacrificed by period, being the pieces containing the defects processed for histological and histomorphometric analysis. Other 5 animals were sacrificed to the 30 and 60 days and submitted to biomechanics analysis and all of the specimens were submitted to the radiographic examination of the optical density. The biomechanic, radiographic and histomorphometric results showed larger resistance, optical density and better bone formation in the groups A and PRPA when compared with the groups C and PRP. This study demonstrated that there was not an improvement in the radiographic, mechanics, and bone formation parameters when PRP was used separately or associated to the autogenous bone graft. / Doutor

Resumo: O propósito do presente estudo foi o de avaliar histomorfometricamente a neoformação óssea da região posterior de maxila após os procedimentos cirúrgicos de elevação de seio maxilar e enxerto ósseo autógeno inlay associado ou não ao Plasma Rico em Plaquetas, em dois períodos de tempo: 6 e 8 meses. Foram selecionados 20 pacientes, com idade média de 42 anos, em boas condições de saúde geral. Os pacientes foram divididos, aleatoriamente em três grupos sendo: Grupo 1: enxerto ósseo autógeno e biópsia da área 8 meses após a cirurgia, 4 pacientes (grupo controle). Grupo 2: enxerto ósseo autógeno associado ao plasma rico em plaquetas e biópsia da área 6 meses após a cirurgia, 8 pacientes. Grupo 3: enxerto ósseo autógeno associado ao plasma rico em plaquetas e biópsia da área 8 meses após a cirurgia, 8 pacientes. Encontrou-se diferenças significantes nos períodos (G2 vs G3) em relação ao tecido ósseo (p=0,05) e em relação aos tecidos não calcificados (p=0,045), e nos tratamento (G1 vs G3) em relação a presença de material de enxerto (p=0,041). Baseado nos resultados obtidos, pôde-se concluir que em relação à quantidade e qualidade do tecido ósseo formado o uso do Plasma Rico em Plaquetas não apresentou benefícios adicionais à utilização do osso autógeno nos procedimentos cirúrgicos de elevação de seio maxilar. / Abstract: The aim of the present study was to evaluated, histologic and histomorphometrically, bone formation after maxillary sinus floor augmentation by grafting with an association of PRP and autogenous bone from the symphyseal area. Out of 20 patients were used in this study, and they were distributed in three groups, G1: control - autogenous bone graft, 8 months healing period, G2 - autogenous bone graft and PRP, 6 months healing period, and G3: autogenous bone graft and PRP, 8 months healing period. Before surgery the blood was collected and proper stored, until PRP preparation. Subantral augmentation was performed and the graft was collected. The blood was centrifuged, the concentrate platelet-rich plasma layer was removed and associated to the autogenous graft. The mixture assumed a gel-like consistency, which was used to fill the sinus. After the period healing, implants were placed and core biopsies were taken from the area. Routine histological processing and staining were performed. There were no significant differences between the treatments (G1 vs G3). In regard to the healing period (G2 vs G3) we found significant differences due to bone (p=0,05) and non-calcified tissues (p=0,045), in regard to the type of treatment (G1 vs G3) we found significant differences due to the presence of grafted material (p=0,041). Within the limits of this study the association of PRP and autogenous bone did not bring any additional benefits in regard to bone formation. / Orientador: Ricardo Samih Georges Abi Rached / Coorientador: Elcio Marcantonio Junior / Banca: Luís Carlos Spolidorio / Banca: Joni Augusto Cirelli / Banca: Luís Antônio Violin Dias Pereira / Banca: Elton Gonçalves Zenóbio / Doutor

Orientador: José Eduardo Cezar Sampaio / Banca: Patrícia Helena Rodrigues de Souza / Banca: Marília Compagnoni Martins / Banca: Élcio Marcantonio Júnior / Banca: Wilson Sallum / Resumo: A remoção da smear layer e a exposição da matriz colágena da dentina de superfícies radiculares desprovidas de sua inserção conjuntiva tem o potencial de auxiliar o tratamento e/ou a regeneração periodontal. Diferentes substâncias têm sido empregadas para remover esta camada e expor fibras colágenas da superfície dental. A adesão de elementos sangüíneos a superfícies radiculares desmineralizadas e a estabilização do colágeno pelas fibras colágenas são de extrema importância no sucesso da cirurgia periodontal. O objetivo deste estudo foi avaliar os diferentes padrões de adsorção e adesão de plasma rico em plaquetas (PRP) e de PRP + células sangüíneas a superfícies radiculares quimicamente condicionadas. Oitenta dentes foram raspados, eqüitativamente divididos em 5 grupos: irrigação com soro fisiológico (controle), aplicação de solução de ácido cítrico a 25%, gel de EDTA a 24%, solução de cloridrato de tetraciclina a 50mg/mL e solução de citrato de sódio a 30%. Metade das superfícies condicionadas foi exposta ao PRP e a outra metade ao PRP e sangue fresco para avaliação com microscopia eletrônica de varredura. Não houve diferenças estatisticamente significantes entre os grupos quando aplicou-se o PRP seguido de sangue. O EDTA e o ácido cítrico mostraram-se mais efetivos na remoção de smear layer, porém o ácido cítrico foi o único agente que apresentou adesão de PRP nas superfícies radiculares. Dessa forma, o emprego do PRP sobre a superfície radicular pareceu favorecer a adsorção e adesão de células sangüíneas e a estabilização da rede de fibrina. / Abstract: Smear layer removal and collagen fibers exposure may improve periodontal treatment and regeneration. Different substances have been used to remove it and to expose collagen fibers from tooth surface. Blood elements adhesion to demineralized roots and clot stabilization by collagen fibers are extremely important for the success of periodontal surgery. The aim of this study was to evaluate the different patterns of platelet - rich plasma (PRP) and PRP + blood cells adsorption and adhesion to root surfaces chemically conditioned. Eighty teeth were planed and equitably divided into five groups: irrigation with saline solution (control), application of a 25% citric acid solution, 24% EDTA gel, 50mg/mL tetracycline hydrochloride and 30% sodium citrate solution. Half of the conditioned surface was exposed to PRP and another half to the PRP and fresh blood and prepared for scanning electron microscopy. Planed root surfaces and conditioned with EDTA and citric acid were more effective on smear layer removal, but citric acid was the only agent that showed blood cells adhesion to root surface. This way, PRP employments on root surface probably improve blood element adsorption and adhesion to root surface and fibrin network stabilization. / Doutor

Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Banca: Luís Carlos Spolidorio / Banca: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Banca: Maria Teresa Pepato / Banca: Maria Lúcia Rubo de Rezende / Resumo: O tratamento cirúrgico da fissura congênita do processo alveolar superior compreende o enxerto ósseo, um procedimento bem aceito e de grande importância na restauração da forma e da função perdidas. Associado ao enxerto ósseo tem-se utilizado um produto atóxico, não imunoreativo e de fácil obtenção, denominado plasma rico em plaquetas (PRP). Neste estudo foi analisado o comportamento dos marcadores fosfatase alcalina, fosfatase alcalina isoforma óssea, osteocalcina e fosfatase ácida tartarato resistente em 50 pacientes, com idade entre 10 e 20 anos e que foram submetidos à cirurgia de enxerto ósseo autógeno alveolar pelo serviço de Cirurgia Buco-maxilofacial do Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais da Universidade de São Paulo. O objetivo foi acompanhar de forma sistêmica e em curto período a formação ou reabsorção óssea após a realização do enxerto ósseo alveolar, bem como avaliar a eficácia do uso do plasma rico em plaquetas no processo de formação óssea. O estudo concluiu que as propriedades restauradoras do PRP não puderam ser demonstradas por nenhum dos marcadores bioquímicos do metabolismo ósseo nos primeiros 70 dias do ato cirúrgico; a análise temporal dos marcadores de formação óssea testados demonstrou uma tendência de queda com 35 dias e retorno próximo aos níveis basais com 70 dias do ato cirúrgico nos dois grupos estudados; não houve uma correlação significativa dos marcadores com o número de plaquetas e nem com a área da fissura e o resultado do exame ao raio X foi considerado inconclusivo para a presença ou não de trabeculado ósseo organizado em fase inicial de formação. / Abstract: The surgical treatment of the congenital cleft of the upper alveolar process understands the bone graft, a well accepted procedure of great importance in the restoration of the lost form and function. Together with the bone graft it is being used a non-toxic, non imunoreactive and easily obtained product, denominated platelet-rich plasma (PRP). In this study it was analysed the behavior of the alkaline phosphatase, bone alkaline phosphatase, osteocalcin and tartrate-resistant acid phosphatase markers in 50 patients, with age between 10 and 20 years and that were undergone to alveolar autogenous bone graft performed by the Bucomaxillofacial Service of the "Hospital for Rehabilitation of Craniofacial Anomalies, University of São Paulo". The aim was follow in a sistemic and early way the bone formation or reabsorption after the accomplishment of the alveolar bone graft, as well as to evaluate the effectiveness of the use of the platelet-rich plasma in the process of bone formation. The study concluded that the restorative properties of the PRP could not be demonstrated by of the biochemistry markers of the bone metabolism in the first 70 days of the surgery; the temporal analisys of the bone formation markers tested demonstrated a fall tendency in 35 days with return near to basal levels in 70 days in the two studied groups; there was not a significant correlation between markers and the number of platelets and neither with the area of the cleft and the result of the x-ray examination was not considered conclusive for the presence or not of organized bone trabeculae in the initial phase of formation. / Doutor

Orientador: Elcio Marcantonio Junior / Banca: Joni Augusto Cirelli / Banca: Enilson Antonio Sallum / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Banca: Paulo Tambasco de Oliveira / Resumo: Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito de biomateriais associados ao PRP na formação óssea em defeitos padronizados de rádio e avaliar o efeito de PRP+RTG+enxerto ósseo autógeno para tratamento de lesões de furca grau II em cães. Para tal, em um primeiro estudo, foram confeccionados 5 defeitos de 5mm em cada rádio (direito e esquerdo) em 05 cães, constituindo assim espaços para preenchimento com os enxertos ou substitutos ósseos avaliados, totalizando 50 cavidades. Os materiais testados foram DFDBA, vidro bioativo, osso autógeno e osso mineral bovino, associados ou não ao PRP. Estes grupos foram avaliados e comparados com os grupos representados por coágulo sangüíneo e PRP. Ao final de 60 dias, foi realizada biópsia e preparo laboratorial para avaliação histológica e histomorfométrica. Os grupos que apresentaram melhores resultados foram coágulo, PRP e osso autógeno associado ou não a PRP; e a utilização do PRP não promoveu maior formação óssea em relação aos demais grupos, com exceção do vidro bioativo+PRP que apresentou os melhores resultados. No segundo estudo, foram criados cirurgicamente defeitos periodontais de furca nos quartos pré-molares mandibulares, bilateralmente em 5 cães, cronificados por um período de três meses e tratados por PRP/RTG/enxerto ósseo autógeno (grupo experimental) ou RTG/enxerto ósseo autógeno (grupo controle). Quatro meses após o tratamento, os cães foram sacrificados. Na área de furca, houve maior preenchimento ósseo e extensão linear de novo cemento, nova adaptação conjuntiva e regeneração periodontal no grupo experimental (p<0.005) e maior extensão linear de epitélio no grupo controle (p<0.005). A associação do PRP a RTG e enxerto ósseo autógeno proporcionou maior regeneração dos tecidos periodontais. Portanto, o PRP promoveu melhores resultados na formação óssea somente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The aims of this study were to evaluate the effect of biomaterials in association to PRP on bone formation, in padronized defects of radius, and evaluate the effect of PRP/GTR/autogenous bone graft in the treatment of Class II furcation lesions in dogs. For that, in a first study, five defects of 5mm each were produced in each radius (left and right) in 5 dogs, so creating spaces to be filled with grafts or the bone substitutes under study, totalling 50 cavities. The biomaterials tested were DFDBA, bioglass, autogenous bone and bovine mineral bone grafts, associated, or not, with PRP. These biomaterials were compared with coagulum and PRP. At the end of 60 days biopsy was done and histological laminas were prepared. Under the experimental condictions, coagulum, PRP and autogenous bone associated or not to PRP presented the best results, with more new bone formation; and no difference was observed between the groups with biomaterials, associated or not with PRP, excepting bioactive glass/PRP which showded the best results. In the second study, periodontal furcation defects were surgically produced bilaterally in the fourth mandibular premolars in 5 dogs, cronified for 3 months and treated with PRP/GTR/autogenous bone graft (experimental group) or GTR/autogenous bone graft (control group). Four months after the treatment, the dogs were sacrified. In the furcation area, more bone filling and linear extension of new cement, new conjunctive adaptation and periodontal regeneration were observed to occur in the experimental group (p<0.005) and more linear extension of epitelium in the control group (p<0.005). The association PRP/GTR/autogenous bone graft was observed to produce more regeneration of periodontal tissues. Therefore, the PRP association showed the best results in bone formation only at bioactive glass group; and... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor