A criopreservação do sêmen resulta em danos à estrutura espermática, sendo nítida a importância da avaliação das partidas de sêmen antes de serem submetidas à inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Todavia, nem sempre as avaliações convencionais do sêmen são suficientes para identificar partidas que possam resultar em baixa taxa de prenhez no campo, sendo necessária uma investigação mais profunda e acurada. Neste sentido, este experimento foi realizado com o objetivo de identificar partidas de sêmen que apresentam falhas na fertilidade, mesmo sendo aprovadas pelas avaliações convencionais. Foram realizadas análises convencionais (motilidade, vigor, concentração e morfologia espermática) de 72 partidas de sêmen de 22 touros antes da estação de monta. Destas, 55 partidas de 18 touros foram aprovadas para o uso na IATF, mas somente 28 partidas de 10 touros foram utilizadas. As partidas de sêmen utilizadas na IATF foram submetidas a outras avaliações: análise computadorizada da motilidade espermática (CASA), integridade das membranas plasmática e acrossomal e potencial de membrana mitocondrial (por sondas fluorescentes em microscopia de epifluorescência). Os dados foram analisados pelo Proc Mixed do SAS usando o Test T. As taxas de prenhez das diferentes partidas de sêmen variaram de 71 a 37%, sendo a média e desvio padrão das partidas de 55,57±7,57%. Os dados de fertilidade a campo permitiram a separação das partidas de sêmen como de Alta (>50% de prenhez) e Baixa (50% de prenhez) fertilidade, sendo comparadas quatro partidas de Alta e quatro de Baixa fertilidade. Os dados das características seminais de todas as partidas de sêmen foram submetidos à análise por boxplot e separados em quartis superior e inferior. Quando se comparou as partidas de Alta e Baixa fertilidade notou-se diferença na taxa de prenhez (p<0,01), mas não foi notada diferença para motilidade (p=0,91), vigor (p=0,63), concentração (p=0,27), número de espermatozoides por palheta (NEP, p=0,27), número de espermatozoides móveis e normais por palheta (p=0,18), defeitos maiores (p=0,17), defeitos totais (p=0,43), integridade de membrana plasmática (MPI, p=0,07), alto potencial de membrana mitocondrial (AP, p=0,94), motilidade total (MT, p=0,10), VCL (p=0,80), VSL (p=0,75), VAP (p=0,88), LIN (p=0,78), STR (p=0,71) e BCF (p=0,13). No entanto, foram encontradas diferenças entre os grupos (Alta e Baixa) para defeitos menores (p=0,05), espermatozoides com integridade das membranas plasmática e acrossomal e função mitocondrial (PIAIA)/Palheta (p=0,01), integridade de acrossomo (AI, p=0,03), motilidade progressiva (MP, p<0.01) e rápidos (p<0,01). Quando comparados os quartis superior e inferior das características seminais foram encontradas diferenças para concentração espermática (p<0,01), NEP (p<0,01), número de espermatozoides móveis por palheta (p<0,01), espermatozoides móveis e normais (p<0,01), defeitos maiores (p<0,01), defeitos menores (p=0,01), defeitos totais (p=0,05), MPI (p<0,01), AI (p<0,01), AP (p=0,03), PIAIA (p<0,01), PIAIA/palheta (p<0,01), mas esta divisão de grupos por quartis superior e inferior não apresentaram diferença sobre a fertilidade (p>0,05); sendo que somente. Entretanto, para MT (p<0,01) e MP (p<0,01) além da diferença entre os quartis foi notado efeito da fertilidade (MT, p=0,05 e MP, p=0,01), sendo maior para os de baixa fertilidade. Pode-se concluir que os padrões de qualidade de partidas de sêmen que apresentam fertilidade distinta podem ser semelhantes, além disso, que pode haver diferença na qualidade espermática entre as partidas que não influenciam a fertilidade. Desta forma, são necessárias outras análises mais acuradas para investigar as causas de falha na fertilidade de algumas partidas de sêmen. / Semen cryopreservation results in damage to sperm structure, and it is clear the importance of evaluating the semen batches before submitted it to timed artificial insemination (TAI). However, conventional semen evaluations are not always sufficient to identify batch that may result in reduced pregnancy rate in the field, requiring a more thorough and accurate investigation. Thus, this experiment was conducted in order to identify semen batches that have gaps in fertility, even being adopted by conventional assessments. Conventional analysis (motility, vigor, concentration and morphology) were performed of 72 semen batches from 22 bulls before the breeding season. Of these, 55 batches from 18 bulls were approved for use in TAI, but only 28 batches from 10 bulls were used. Semen batches used in TAI were subjected to further assessment: computer-assisted sperm analysis (CASA), integrity of plasma and acrosomal membranes and mitochondrial membrane potential (by fluorescent probes under epifluorescence microscopy). Data were analyzed by Proc Mixed of the SAS using Test \"T\". Pregnancy rates of different semen batches ranged 71-37%, and the mean and standard deviation of the batches was 55.57 ± 7.57%. Field fertility data allowed the separation of the semen batches as \"High\" (>50% pregnancy rate) and \"Low\" (50% pregnancy rate) fertility. It was compared four batches of \"High\" and four batches of \"Low\" fertility. Data of the seminal characteristics of all the semen batches were analyzed by boxplot and separated into upper and lower quartiles. When comparing the batches of \"High\" and \"Low\" fertility was noticed a difference in the pregnancy rate (p<0.01), but was not noticeable difference in motility (p=0.91), vigour (p=0.63), concentration (p=0.27), number of spermatozoa per straw (NEP, p=0.27), number of motile and normal sperm per straw (p=0.18), major defects (p=0.17), total defects (p=0.43) plasma membrane integrity (MPI, p=0.07), high mitochondrial membrane potential (AP, p=0.94), total motility (TM, p=0.10), VCL (p=0.80), VSL (p=0.75), VAP (p=0.88), LIN (p=0.78), STR (p=0.71) and BCF (p=0.13). However, differences were found between the groups (\"High\" and \"Low\") for minor defects (p=0.05), sperm with plasma and acrosomal membranes integrity and high mitochondrial membrane potential (PIAIA)/straw (p=0.01), acrosomal integrity (Al, p=0.03) progressive motility (PM, p <0.01) and rapid (p<0.01). When comparing the upper and lower quartiles of the seminal characteristics differences were found for sperm concentration (p <0.01), NEP (p <0.01), number of motile sperm per straw (p<0.01), motile and normal sperm (p<0.01), major defects (p<0.01), minor defects (p=0.01), total defects (p=0.05), MPI (p<0.01), AI (p<0.01), AP (p=0.03), PIAIA (p<0.01), PIAIA/straw (p<0.01), but this division groups by upper and lower quartiles showed no difference in fertility rate (p>0.05). However, to MT (p<0.01) and MP (p<0.01) the difference between quartiles of fertility effect was noted (MT, p=0.05 and MP, p=0.01), been higher for low fertility. It can be concluded that patterns of semen quality of batches that have distinct fertility may be similar, furthermore, there may be differences in sperm quality among batches that do not affect fertility. Thus, it takes other more accurate analysis to investigate the causes of failure on fertility of some semen batches.

Um dos objetivos deste trabalho foi avaliar e comparar a taxa de prenhez de receptoras bovinas nulíparas, após transferência de embriões fecundados in vitro ou in vivo, associados ou não a um embrião partenogenético. Um total de 239 novilhas foram utilizadas, e as médias das taxas de prenhez aos 30 (TP30d) e 60 dias (TP 60d), foram comparadas em arranjo fatorial 8x2 entre G1 e G2 (fecundados in vitro), e em análise fatorial 3x2, entre G3 e G4 (fecundados in vivo). O delineamento utilizado foi: G1) transferência de 1 embrião fecundado in vitro (n=86); G2) transferência de 1 embrião partenogenético associado a 1 embrião fecundado in vitro (n=81); G3) transferência de 1 embrião fecundado in vivo (n=36) e G4) transferência de 1 embrião partenogenético associado a 1 embrião fecundado in vivo (n=36). A taxa de prenhez aos 30 dias para o G1 foi de 31,3% (27/86) e do G2 de 37,0% (30/81); P= 0,28. Para o G3, de 55,5% (20/36) e G4, de 75,0% (27/36); P=0,09. Não houve diferença (P=0,92) para taxa de prenhez aos 60 dias para o G1 em relação ao G2, com taxas de 24,6% (22/86) e 28,2% (23/81); respectivamente. Também não houve diferença (P=0,08) aos 60 dias para o grupo G3 em relação ao G4, com taxas de 44,4 % (16/36) e 61,1% (22/36), respectivamente. As perdas embrionárias no período foram de 14,81% para o G1, 33,34% para o G2, 25,00% para o G3 e 18,52% para o G4. As médias de peso ao nascimento dos animais pertencentes ao G1 e G2, foram de 26,3 Kg (±1,2; n=6) e 28,8 Kg (±2,1; n=7) respectivamente. As médias dos dias de gestação das receptoras dos grupos G1e G2 foram de 290 dias (±2,1) e 292,8 dias (±1,1) respectivamente. Para avaliar o embrião partenogenético em relação aos embriões fecundados in vitro após 9 dias de cultivo embrionário, foi determinado os resultados para as seguintes variáveis dependentes: taxa de clivagem, taxa de blastocisto, taxa de blastocisto eclodido, número de núcleos e freqüência do RNAm do IFN-&tau; em 6 sessões de produção embrionária. Os resultados foram analisados em fatorial 6x2. Foi observada diferença (P<0.05) nas taxas de clivagem, blastocisto e eclosão entre os tratamentos, houve diferença entre número de núcleos, 231 para os fecundados e 156 para os partenogenéticos (P=0.001), e para a expressão do gene do IFN-&tau;, os embriões partenogenéticos expressaram mais o gene do IFN em relação aos fecundados (P=0.001). Finalmente, Western blots foram realizados para identificar a proteína do IFN-&tau; bovino em embriões fecundados e partenogenéticos após 12 dias de cultivo. Bandas correspondente ao IFN-&tau; foram encontradas nos meios de cultivo onde permaneceram os embriões fecundados e partenogenéticos com peso molecular médio de 24 kDa. Não se detectou uma banda específica ao IFN-&tau; nos extratos embrionários. Tendo em vista o apresentado, conclui-se que apesar dos embriões partenogenéticos expressarem o gene e secretarem a proteína do IFN-&tau;, a transferência de um embrião partenogenético, associado a embriões fecundados in vitro ou in vivo, não favoreceu (P<0.05) ao aumento da taxa de prenhez, mas não prejudicou o desenvolvimento da gestação a termo em bovinos. / The aim of this work was to evaluate the bovine pregnancies rate of in vitro and in vivo produced embryos associated or not to a parthenogenetic embryo in heifers. Two hundred thirty nine recipients were used. The average of pregnancies rate were compared between G1 and G2 (in vitro) and between G3 and G4. (in vivo). The groups were: G1) 1 in vitro fertilized embryo (n=86); G2) 1 parthenogenetic embryo associated with 1 in vitro fertilized embryo (n=81); G3) 1 in vivo fertilized embryo (n=36) and G4) 1 parthenogenetic embryo associated with 1 in vivo fertilized embryo (n=36). Pregnancy rate at day 30 for G1 was 31.3% (27/86) similar to G2 37.0% (30/81); P=0.28. Group 3 rate was 55.5% (20/36) and also similar to G4, 75.0% (27/36); P=0.09. There was no difference (P=0.92) to pregnancy rate at day 60 for G1 compared with G2. The G1 and G2 rates were 26.74% (23/86) and G2 24.69% (20/81) respectively. Also, there were no difference (P=0.08) between G3 and G4. The G3 and G4 rates were 44.4 % (16/36) and 61.1% (22/36) respectively. The embryonic loss in this period was 14.81% for G1, 33.34% for G2, 25.00% for G3 and 18.52% for G4. The calf average weight of these animals from G1 and G2 were respectively 26.3Kg (±1.2; n=6) and 28.8 Kg (±2.1; n=7). The average pregnancy length of the recipients from G1 and G2 were respectively 290 days (±2.1) and 292.8 days (±1.1). To evaluate the parthenogenetic embryo quality, the cleavage rate, blastocyts rate, hatching rate, the number of nuclei, immunocitochemistry for IFN-, and the mRNA frequency of IFN-&tau; was determined in 9 days harvesting parthenogenetic and in vitro fertilized embryos. Difference (P<0.05) was observed in cleaveage, blastocysts and hatching rates, nuclei counting between fertilized embryo (n=231) compared to the parthenogenetic embryo (n=156) and the mRNA relative quantification of the IFN-&tau; gene showed that fertilized embryos have lower expression compared to parthenogenetic embryo (P<0.01). Finally, the western blots analysis for IFN-&tau; protein was performed in 12 days harvested embryos. Bands for IFN-&tau; were found in culture medium from fertilized and parthenogenetic embryos with average molecular weight of 24 kDa. The IFN-&tau; specific protein was not found in the embryonic extracts. In view of the presented results we conclude that despite the production and secretion of IFN-&tau; the association of the parthenogenetic embryo with the fertilized embryo do not favored the pregnancy establishment, however do not interfered in the development of bovine pregnancy to term.

A depressão é descrita como uma das patologias que mais atinge pessoas, sendo as mulheres mais susceptíveis, segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS). O desenvolvimento da depressão durante a gestação pode acarretar prejuízos tanto para as mulheres quanto para seus descendentes, sendo necessário um tratamento medicamentoso para a gestante. Entretanto, pouco se sabe a respeito de uma gestação frente ao uso de fármacos antidepressivos. Portanto, esse trabalho teve como objetivo avaliar o uso da amitriptilina (AMT), durante a fase reprodutiva e todo o período de prenhez em camundongos, assim como a prática da substituição deste fármaco pela fluoxetina (FLX), no final do período embrionário e seus possíveis efeitos na gestação, no pós-natal e no desenvolvimento da prole. Com este intuito, fêmeas Swiss foram tratadas com AMT (20mg/Kg) 10 dias antes e durante o acasalamento, via gavagem orogástrica e divididas em dois grupos. No primeiro, a AMT foi mantida durante toda a prenhez e no segundo ocorreu a substituição pela FLX (10mg/Kg), no 14º dia de gestação (ddg). No Controle, as fêmeas foram tratadas com a solução de carboximetilcelulose a 1%. Durante a prenhez, foi acompanhado peso e ingestão materna e no 18º ddg algumas fêmeas foram eutanasiadas para análise gestacional e placentária. Em outro conjunto de fêmeas, a gestação foi à termo, a prole foi normalizada em 6 filhotes (3 machos/3 fêmeas) para avaliação do comportamento materno, análise do desenvolvimento da prole durante 30 dias de vida e testes análise de depressão e ansiedade na prole jovem. Os resultados apresentaram uma dificuldade de prenhez de 52,95% nas mães tratadas, além de um aumento significativo na taxa de natimortos e morte neonatal, no tratamento com a AMT. O peso das mães tratadas com AMT e AMT+FLX mostraram diferença significativa nos últimos dias de gestação, não alterando o peso e o de crescimento intrauterino. A placenta do grupo AMT apresentou alterações evidentes como: o aumento da área do espongiotrofoblasto, redução do labirinto, presença de edema e áreas em degeneração, no entanto essas alterações foram amenizadas no grupo AMT+FLX. Não foi constatado nenhuma anormalidade na prole, porém, na puberdade, os filhotes do grupo AMT apresentaram-se menores no peso e tamanho. No entanto, a distância anus/genital (DAG) das fêmeas aumentou. Houve um atraso na erupção dos incisivos em ambos tratamentos. O cuidado materno não apresentou diferenças frente a utilização dos fármacos, juntamente com os testes de ansiedade e depressão na prole. Em conclusão, os dados apontam que o tratamento com AMT reduz a chance de uma gestação, apresenta alterações placentárias, e aumenta o número de natimortos e morte neonatal, remetendo a um quadro semelhante a doenças hipertensivas. No entanto, a troca pela FLX ameniza estes problemas. A AMT ainda está associada a uma diminuição de peso e tamanho da prole e uma suspeita de masculinização dos filhotes fêmeas. Entretanto, nenhum dos tratamentos parece interferir no comportamento materno, ou nos padrões de depressão e ansiedade da prole. Dentro destes achados, pode-se constatar que a substituição da AMT pela FLX parece ser a melhor conduta. / The depression have been described as the most pathology that affects people, and the women are the main victims of the illness, according to the World Health Organization (WHO). The depression development during the pregnancy can cause harm to the women and their descendants, therefore in some cases the drug treatment is necessary. However, there are few studies about the pregnancy with use the antidepressant medicines. Because this, the goal of this study is evaluate the amitriptyline (AMT), during the reproductive stage and pregnancy period in mouse, just like the substitution practice by fluoxetine (FLX), in the end of germinal period and possible effects in pregnancy, in after birth and in offspring development. Swiss Female mouses were treated with AMT (20 mg/Kg) 10 days and during mating, via orogastric gavage and divided in two experimental groups. In first AMT was sustained during all pregnancy and second group was realized the substitution of AMT by FLX (10 mg/Kg) on the 14th pregnancy day (PD). In the control group, female were treated with medicine’s eluent solution, Carboxymethyl cellulose 1%. During the pregnancy, it were accompanied the weight and maternal ingestion and on 18th PD some females were euthanized for gestational and placental analysis. In other female group, the gestation was at term, the offspring were normalized in 6 puppies (3 males / 3 female) for maternal behavior evaluation, offspring development analysis on first 30 life days, when were realized depression and anxiety analysis tests. In the results, it occurred a reduction of 52,95% in the pregnancy rate for treated mothers, besides an increase in the stillbirth rate and newborn death, in the treatment with the AMT. The mothers treated weight with AMT and AMT+FLX, showed significant diference on last pregnancy days, the weight and Intrauterine growth restriction (IURG) weren’t changed. The AMT group placente showed evidente difereces: spongiotrophoblast increase, labyrinttrophoblast decrease, edema presence and degeneration areas. This efects were softened in AMT+FLX group. It wasn’t verified offspring teratogenic problem, but on the puberty the AMT group puppies, showed weigth and size smaller. However, female anus/genital distance (AGD) incresed. It was observed, rupture of the incisors delay in both treatments. The maternal care didn’t show significant diferences with medicines using, together with the young offspring anxiety and depression tests. In conclusion, data points out that treatment with drugs dicrease pregnancy chance. The AMT treatment causes importante placental changes, besides of increase stillbirth number and newborn death, that looks like the preeclampsia frame. However, the change by FLX looks like to soften this problems. AMT still is associated a weigth and offspring size decrease and female puppies masculinization. But, treatments aren’t sound of to intervene in maternal behavior, or young offspring depression and anxiety patterns. Within these findings, can be verified that clinical practice AMT by FLX substitution sounds of to be the best medicine management. / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

A gestação é um momento marcado por intensas alterações no organismo materno. Com o intuito de amenizar essas mudanças e diminuir o ganho de peso, algumas mulheres utilizam de dietas nutricionalmente desbalanceadas, sendo frequente a maior ingestão de determinadas substancias e a diminuição de outras. Porém, o uso desse artifício para controle de peso durante a gestação culmina em problemas não bem elucidados pela comunidade acadêmica, visto que o estado nutricional adequado da mãe é essencial para uma gestação saudável. Objetivando verificar uma possível influência da ingestão de uma dieta hiperproteica (HP) na prenhez de camundongos swiss e no desenvolvimento inicial da prole, o regime alimentar das fêmeas prenhes foi alterado para uma dieta contendo 42% de proteína, sem perda dos demais nutrientes. A dieta foi alterada por todo o período de prenhez, sendo a ingestão alimentar e o ganho de peso das fêmeas acompanhados diariamente. Os animais foram organizados em quatro grupos experimentais, sendo que em dois deles a prenhez foi interrompida no 19º. dia de gestação (ddg), para coleta de rim fetal e placentas (Controle-19 e HP-19). Nos demais grupos (controle e HP), a gestação chegou a termo e foi analisado o desenvolvimento físico e neurológico inicial dos filhotes durante o primeiro mês de vida, bem como seu crescimento e ganho de peso. No 32º dia pós-nascimento, os filhotes foram eutanasiados, via deslocamento cervical, juntamente com as mães, para avaliação morfológica e morfométrica do tecido adiposo marrom, tecido adiposo branco e rim. Análises de peroxidação lipídica renal e hepática foram realizadas em tecidos maternos, fetais e dos filhotes. Todos os dados foram analisados quanto à normalidade e seguidos para testes específicos, dentre eles Teste T, Mann Whitney e ANOVA Two-Way seguido de pós-teste Bonferroni. A ingestão e o ganho de peso materno durante a gestação foi menor/// em mães alimentadas com dieta HP, assim como a área média dos adipócitos brancos, número de glomérulos renais e quantidade de proteína nos rins. Filhotes fêmeas e machos de mães HP tiveram a abertura de olho tardia, o que ocorreu também com a abertura da vagina em filhotes fêmeas. A proporção rim/tíbia dos filhotes foi alterada de maneira contrária em filhotes machos e fêmeas. O ganho de peso em filhotes fêmeas e o crescimento naso-caudal de filhotes machos também sofreram alterações. A área média de adipócitos marrons apresentou-se menor em filhotes do sexo masculino, concomitantemente com um aumento da área em adipócitos brancos. A dieta não alterou a quantidade de proteína no tecido renal e hepático de fetos e neonatos, porém evidenciou uma diminuição da peroxidação lipídica renal e em placentas de 19o. ddg. O tratamento materno com a dieta HP não provocou alterações na placentação ou na morfologia deste órgão. Em conclusão, os dados apontam que a dieta HP pode afetar o organismo materno, a homeostase gestacional e o desenvolvimento inicial dos filhotes, podendo, possivelmente, acarretar maiores problemas a longo prazo na vida destes animais. / Pregnancy is a period of intense changes in the mother's body. In order to minimize these changes and decrease weight gain pregnant women can use nutritionally unbalanced diets. However, this kind of diet during pregnancy can generate several problems to the mother and fetus, as an appropriate nutritional status of the mother is essential to maintaining the homeostasis during pregnancy. Here we aim to evaluate the influence of the high-protein diet intake (HP) on Swiss mice pregnancy, as well in the initial development of the puppies. Thus we have used a diet containing 42% protein, without loss of other nutrients, throughout the gestational period, measuring the food intake and maternal weight gain. The animals were randomized in four experimental groups and in two of them the gestation was interrupted on the 19th. gestational day (gd) to fetus, kidney and placenta dissection (Control-19 and HP-19). On further goups (Control and HP) gestational period was concluded and during first month of life of the puppies, their physical and neurological development were analyzed, as well as, their growth rate and weight gain. At 32 days post-birth, the puppies and mothers were euthanized, through cervical dislocation, for morphological and morphometric evaluations of brown adipose tissue, white adipose tissue and kidney. Analyses of renal and hepatic lipid peroxidation were conducted on mothers, fetal and puppies tissues. All data were analyzed for normality and by specific tests, including t-test, Mann Whitney and ANOVA Two-Way followed by Bonferroni post-test. The intake and body weight gain during pregnancy was lower in mothers fed with HP diet, as well as the white adipocytes average size, number of glomeruli and protein amount in the kidneys. Females and males puppies of HP mothers had the eye opening later than the controls, which also occurred with the vagina opening on females. The kidney/tibia proportion was altered in an opposite way between male and female puppies. The weight gain on female puppies and the nose/tail growth in male puppies have also changed. Brown adipocytes average area was also lower in male puppies, differently to the area increased of white adipocytes. The diet did not alter the amount of protein in renal and hepatic tissues of pups and fetuses, but showed a decrease of the lipid peroxidation in female kidney and 19th. gd placenta. Maternal treatment with HP diet did not alter the placenta morphology. In conclusion, these data indicate that the HP diet has effect on mother's organism, gestational homeostasis and initial development of puppies can possibly leading to greater long-term problems in the lives of these animals. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG / Programa Institucional de Bolsas de Pós-Graduação - PIB-PÓS

O objetivo deste trabalho foi avaliar alguns aspectos reprodutivos de éguas Crioulas a fim de verificar a influência destes nos índices de prenhez: idade das éguas, status reprodutivo, uso do cio do potro, presença de líquido intra-uterino (LIU), eficiência dos tratamentos pós-cobertura, presença de cistos endometriais, realização de vulvoplastia, incidência de ovulações duplas e gestações gemelares. Foram utilizados 517 ciclos de 406 éguas Crioulas de um rebanho comercial, com idades entre dois e vinte e dois anos. O índice de prenhez por ciclo foi de 80,5% aos 12 dias, 76,5% aos 42 dias e a mortalidade embrionária foi de 3,9%. O índice de prenhez foi influenciado pela idade das éguas (P < 0,01). O índice de prenhez no cio do potro foi de 85,4%, melhor que o índice obtido pelas éguas em que não se utilizou este cio e que foram cobertas no subseqüente (P = 0,07). O método de cobertura influenciou a prenhez, sendo a inseminação superior à monta natural (P = 0,01). A idade influenciou a presença de LIU sendo a incidência em éguas com mais de 12 anos maior que nas mais jovens (P < 0,01). A presença de cistos endometriais influenciou negativamente a taxa de prenhez aos 12 e aos 42 dias (P = 0,00). A correção cirúrgica da região perineal melhorou os índices de prenhez aos 12 e aos 42 dias (P < 0,05). A taxa de ovulações duplas foi de 4,84% e não influenciou os índices de prenhez aos 12 e aos 42 dias (P > 0,5). Em 6 ciclos (1,16%) de 5 éguas solteiras foram observadas gestações gemelares. Concluímos que a fertilidade das éguas Crioulas é influenciada pela idade das éguas, pela conformação vulvar, pela presença de cistos endometriais e pelo status reprodutivo. O acúmulo de LIU é um fator importante na reprodução da égua Crioula e deve ser observado e devidamente tratado para a obtenção de melhores índices de prenhez. / The aim of this study was to evaluate the reproductive aspects of Crioulo mares to verify the influence of the following aspects on the pregnancy rates: mare’s age, reproductive status, use of foal heat, presence of intrauterine fluid (IUF), efficiency of post-breeding treatments, presence of endometrial cysts, incidence of double ovulations and twin pregnancies. There were used 517 cycles of 406 Crioulo mares of a commercial herd, with ages varying from 2 to 22 years old. Pregnancy rate per cycle was 80.5% at 12 days, 76.5% at 42 days and embryo mortality was 3.9%. The pregnancy rate was influenced by the age of the mares (P < 0.01). Pregnancy rate on foal heat was 85.4%, better than the rate obtained by the mares which foal heat was not used and the subsequent cycle was (P = 0.07). The breeding method influenced pregnancy, being artificial insemination superior to natural breeding (P = 0.01). Age influenced the presence of IUF, once the incidence was higher in mares with more than 12 years old than in younger mares (P < 0.01). The presence of endometrial cysts negatively influenced the pregnancy rate at 12 and 42 days (P = 0.00). Surgical repair of perineal region improved the pregnancy rates at 12 and 42 days (P < 0.05). The rate of double ovulations was of 4.84% and did not influence the pregnancy rates either at 12 and 42 days (P > 0.5). In 6 cycles (1.16%) of 5 single mares there were observed twin pregnancies. We concluded that the fertility of Crioulo mares is influenced by the age of the mares, vulvar conformation, presence of endometrial cysts and reproductive status. The accumulation of IUF is an important factor on the reproduction of Crioulo mares and must be observed and correctly treated in order to obtain better pregnancy rates.

O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos da aplicação de hCG no quarto dia após a inseminação a tempo fixo (IATF) sobre o tamanho do corpo lúteo (CL) existente, a indução de CL acessórios, a concentração de progesterona (P4) sérica e taxa de prenhez de vacas de corte em lactação. Nos três experimentos, vacas de corte multíparas (n=569), cruza Bos taurus, com período pós-parto entre 45 e 70 dias, foram sincronizadas com a administração de 2mg de benzoato de estradiol i.m. e a inserção de um dispositivo intravaginal contendo 0,750g de P4 (Dia -9). Sete dias após, administraram-se 150 μg de D-cloprostenol e 0,5 mg de cipionato de estradiol, i.m., no momento da retirada do dispositivo (Dia -2). Sessenta vacas de corte em lactação foram divididas aleatoriamente em dois grupos: hCG (n=30) tratadas com 1500UI i.m. de hCG e Controle (n=30) injetadas com 1,5 mL de solução salina i.m. no dia 4 depois do estro (Dia 0). Realizaram-se coletas sanguíneas dos animais para mensuração da concentração sérica de P4 nos Dias 4, 7, 10 e 14 do ciclo estral. Para acompanhamento da dinâmica ovariana, sessenta animais foram divididos aleatoriamente nos grupos hCG (n=30) ou Controle (n=30) e receberam o mesmo protocolo hormonal como citado anteriormente. No Dia 0, os ovários foram examinados por ultrassonografia transretal para determinar o diâmetro do folículo ovulatório; no Dia 4, o diâmetro do FD e presença do CL e no Dia 7 para mensurar a área luteal do CL e a presença de CL acessório. Quinhentas e sessenta e nove vacas (hCG, n= 269 e Controle, n= 300) foram inseminadas a tempo fixo 52-56 horas depois da retirada dos implantes de P4 e tratadas no Dia 4, conforme o protocolo descrito. O diagnóstico de prenhez foi realizado por ultrassonografia 30 dias após a IATF. Os resultados observados, mostraram que vacas tratadas com hCG no Dia 4 apresentaram maiores concentrações sérica de P4 no Dia 7, comparadas com as do grupo Controle (4,45 vs. 3,37ng/mL, respectivamente; p<0,05), mas níveis semelhantes de P4 nos Dias 10 e 14. Os animais do grupo hCG apresentaram CL com maior (p<0,01) área luteal no Dia 7, em relação ao grupo Controle (3,52 cm² vs. 2,66 cm², respectivamente) e uma incidência de 29,6 % de indução da ovulação do FD presente no Dia 4. Observou-se uma taxa de prenhez maior (p=0,071) no grupo tratado com hCG (53,9%) comparando-se com as vacas não tratadas (46,3%). Conclui-se que a administração de hCG no quarto dia do ciclo estral promove o aumento da área do CL, melhora função luteal, pode induzir a formação de CL acessório e tende a aumentar a taxa de prenhez de vacas de corte em lactação. / The aim of this study was to determine the effects of injection of hCG on the fourth day after the TAI on the size of the existing corpus luteum (CL), the induction of CL accessories, the concentration of progesterone (P4) levels and the possibility of increasing the rate of pregnancy of lactating beef cows subjected to synchronization of estrus and ovulation. Multiparous beef cows (n= 569), Bos taurus crossbreed with postpartum between 45 and 70 days were synchronized by administration of 2mg of estradiol benzoate im and the insertion of an intravaginal device containing 0,750g of P4 (Day -9). Seven days later, were administered 150mg of D- cloprostenol 0.5 mg of estradiol cypionate, im, at the time of device removal (Day -2). Sixty lactating beef cows were randomly divided into two groups: hCG (n= 30) treated with im 1500UI hCG and Control (n= 30) injected with 1.5 ml of saline im on day 4 after estrus (Day 0). There were blood collections of animals for measurement by radioimmunoassay of serum P4 on Days 4, 7, 10 and 14 of the estrous cycle. To evaluate the ovarian dinamics, sixty animals (hCG, n= 30 and Control, n = 30) received the same hormonal protocol and were uniformly distributed into groups according to the diameter of the ovulatory follicles on day 0 (estrus). On Day 0, the ovaries were examined by transrectal ultrasonography to determine the diameter of the ovulatory follicle, on Day 4, the diameter of the dominant follicle (DF) and the presence of CL on Day 7 to measure the area of the luteal CL and the presence of accessory CL. Five hundred and sixty-nine cows (hCG, n= 269 and Control, n= 300) were inseminated at a fixed time 52 to 56 hours after removal of the P4 devices treated on Day 4, according to the protocol described previously. The diagnosis of pregnancy were performed by ultrasonography 30 days after TAI. The results demonstrate that cows treated with hCG on Day 4 showed higher serum concentrations of P4 on Day 7, compared with the control group (4.45 vs. 3.37ng/mL, respectively, (p<0.05), but similar levels of P4 on Days 10 and 14. The animals of hCG group had greater (p<0,01) luteal area on Day 7, compared to the Control group (3.52cm² vs. 2.66cm², respectively) and a 29.6% incidence of induction DF ovulation present on Day 4. We observed a higher rate of pregnancy (p= 0.071) in the group treated with hCG (53.9%) comparing with untreated cows (46.3%). We conclude that administration of hCG on the fourth day of the estrous cycle increase the CL area, improves luteal function, can induce the formation of accessory CL and tends to increase the pregnancy rate of lactating beef cows.

No período de março a maio de 2001, foram realizados os exames ultra-sonográficos em 88 ovelhas do Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia. Os animais foram examinados entre o 19°. e 33°. dia de gestação pela ultra-sonografia transretal com exames executados em dias alternados, e do 25°. ao 45°. dia pelo detector de prenhez para pequenos ruminantes (DPPR-80®). O diagnóstico foi considerado positivo pela ultra-sonografia transretal através da visualização do saco gestacional e embrião. Após o 25°. dia de gestação foi observado também o batimento cardíaco. Pelo detector de prenhez, a auscultação do batimento cardíaco embrionário, cuja freqüência é de 160 a 200 batimentos por minuto, foi dado como diagnóstico de gestação positivo. Dentre 88 fêmeas acasaladas, 3 abortaram durante o experimento e foram retiradas do grupo. Das 85 fêmeas restantes, 64 pariram. O diagnóstico de prenhez através da ultra-sonografia transretal apresentou 35,29% de acurácia no 19°.dia de gestação, culminando em 82,35% no 31°. dia de gestação. Pelo detector de prenhez, a acurácia foi de 24,71% no 25°.dia de gestação e 34,12% no 45°. dia. Foi possível visualizar os batimentos cardíacos do embrião pela ultra-sonografia transretal à partir do 21°. dia de gestação e os primeiros placentomas foram observados ao redor do 25°. dia de gestação. A ultra-sonografia transretal mostrou-se um método superior ao detector de prenhez para pequenos ruminantes, para diagnóstico precoce de gestação em ovelhas. / Ultrasonography was performed in 88 ewes from Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia, São Paulo state, from march to may, 2001. Animais were examined from 19°. to 33°. days of pregnancy by transrectal ultrasonography in alternate days examinations, and by pregnancy detector for small ruminants (DPPR-80®) from 25°. to 45°. day. Positive diagnostic by transrectal ultrasonography was obtained after yolk sac visualization. The embryo heartbeat was observed after 25 day of pregnancy. The positive diagnostic was obtained by pregnancy detector when embrionic heart rate was 160 to 200 beats/minute. Births confirmed the examinations. Three abortions occurred during the experiment and these females were excluded from the group. From 85 ewes examined, 64 lambed. The transrectal ultrasonography accuracy in 19°. day of pregnancy was 35,29%, with higher rate (82,53%) in 31°. day. The doppler accuracy in 25°. day was 24,71% and 34,12% in 45°. day. Embryo heartbeat was detected by transrectal ultrasonography after 21 days of pregnancy and the first placentoms were observed after 25 days of pregnancy. In conclusion, transrectal ultrasonography was better than doppler in early pregnancy diagnosis in sheep.

Com o objetivo de avaliar a influência da gestação, da parição e do puerpério sobre o quadro hemático de caprinos (Capra hircus) da raça Saanen foram colhidas amostras de sangue de animais criados em sistema intensivo, de acordo com o manejo tradicional empregado nas propriedades produtoras de leite do Estado de São Paulo. Nas amostras de sangue, colhidas em frascos contendo EDTA como anticoagulante, foram realizadas as seguintes provas: contagem do numero de hemácias, em câmara de Neubauer modificada, utilizando-se líquido de Gower como diluidor; determinação do volume globular, pelo método do microematócrito; dosagem de hemoglobina, pelo método da cianometaemoglobina; cálculo dos índices hematimétricos (VCM volume corpuscular médio; HCM hemoglobina corpuscular média; CHCM concentração de hemoglobina corpuscular média), contagem do número total de leucócitos, em câmara de Neubauer modificada, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor; e a contagem diferencial de leucócitos, efetuada em esfregaços sanguíneos, corados pelo método de Rosenfeld. No primeiro experimento, delineado para avaliar a influência da gestação e do puerpério foram colhidas amostras de sangue de 150 cabras, divididas em 5 grupos experimentais, conforme a seguir discriminado: G1 composto por 30 cabras não prenhes; G2 - composto por 30 cabras na fase inicial da gestação, (entre 30 e 60 dias de gestação); G3 composto por 30 cabras na fase média da gestação (entre 60 e 120 dias de gestação); G4 composto 30 cabras na fase final da gestação, (com mais de 120 dias de gestação) e G5 composto por 30 cabras recém-paridas (com até 30 dias pós-parto). No segundo experimento, delineado para avaliar a influência da parição e do puerpério sobre o quadro hemático foram colhidas 198 amostras de sangue de 11 cabras, sendo os resultados apresentados em 18 grupos experimentais, conforme a seguir discriminado: 32, 16, 8, 4, 3, 2, 1 e ½ dias antes do parto, imediatamente após o parto, e ½, 1, 2, 3, 4, 8, 16, 32 e 64 dias após o parto. No primeiro experimento, a avaliação dos resultados demonstrou que o eritrograma sofreu influência da gestação, sendo o quadro eritrocitário caracterizado, na fase final da gestação, por uma diminuição do número de hemácias e um aumento nos valores do VCM e do HCM. Também se observou a influência da gestação sobre o leucograma, pois o quadro leucocitário foi caracterizado por uma diminuição gradual do número de leucócitos com o avançar da gestação, atingindo seus menores valores no final da gestação e no puerpério. Essa diminuição ocorreu devido ao comportamento observado para o número absoluto de linfócitos que também diminuiu com a evolução da gestação. Dessa forma, o quadro leucocitário tornou-se, predominantemente, neutrofílico na fase final da gestação e no puerpério. No segundo experimento, a avaliação dos resultados obtidos demonstrou que somente o leucograma sofreu influência da parição e da evolução do puerpério. Nos últimos três dias de gestação observou-se um gradual aumento do número de leucócitos, em decorrência das variações observadas no número total de neutrófilos, sendo o quadro leucocitário, no momento do parto, caracterizado por uma leucocitose por neutrofilia sem desvio à esquerda. Nas primeiras 24 horas após o parto, ainda foi possível ser observado essa leucocitose por neutrofilia que desapareceu nos dias subseqüentes, passando o quadro leucocitário a assemelhar-se, até o final do puerpério, àquele observado na fase final da gestação. / With the intention of evaluating the influence of pregnancy, parturition and puerperium in the hemogram of Saanen goats (Capra hircus), blood samples were taken from goats bred in feedlots on the State of São Paulo. The blood samples were collected with EDTA and submitted to the following tests: erythrocyte counts (in the modified Neubauer hemocytometer, using Gowers liquid as a dilute); packed cell volume (using the microhematocrit method); hemoglobin concentration (using cyanmethemoglobin method); calculated blood indices: MCV mean corpuscular volume; MCH mean corpuscular hemoglobin; MCHC mean corpuscular hemoglobin concentration; total leukocyte counts (in the modified Neubauer hemocytometer, using Thomas liquid as a dilute); and differential leukocyte count (made up with blood smears and stained with Rosenfeld method). The first experiment was designed to evaluate the influence of pregnancy and puerperium. 150 blood samples were collected from five experimental groups of 30 goats each. These were the groups: G1 non-pregnant; G2 initial pregnancy (30 to 60 days of pregnancy); G3 middle pregnancy (60 to 120 days of pregnancy); G4 late pregnancy (more than 120 days of pregnancy); G5 kidding goats (until 30 days after parturition). In the second experiment, the influence of parturition and puerperium was evaluated in the hemogram. 198 blood samples were collected from 11 goats at different moments during pregnancy or puerperium and were allotted into 18 experimental groups as described: 32, 16, 8, 4, 3, 2, 1, ½ days before parturition, immediately after parturition and ½, 1, 2, 3, 4, 8, 16, 32, 64 days after parturition. In the 1st experiment, the evaluation of the results showed that the erythrogram was influenced by the pregnancy, characterizing the hemogram by a decrease on the number of erythrocytes and a raise on the values of the MVC and the MCH. The influence of pregnancy in the leukogram was also studied, showing a gradual decrease on the number of leukocytes further on in pregnancy reaching lower values at the end of pregnancy and puerperium. This happened due to changes observed on the absolute number of lymphocytes that lowered further on in pregnancy, becoming the leukogram mostly neutrophilic at the end of pregnancy and puerperium. In the 2nd experiment, an evaluation of the results concerning the influence of parturition and puerperium in the hemogram demonstrated that only the leukogram was under the influence of these factors. On the last three days of pregnancy, a gradual raise on the number of leukocytes was observed due to same changes on the total number of neutrophils. At the moment of parturition the leukogram was characterized by a leukocytosis due to neutrophilia with no shift to the left. On the first 24 hours after parturition, it was still possible to observe this leukocytosis due to neutrophilia that disappeared on the subsequent days making the leukogram look similar to that observed at the late pregnancy until the end of puerperium.

Paralelamente ao aumento da criação intensiva de ovinos há o aumento da ocorrência de doenças metabólicas, dentre elas a Toxemia da Prenhez. Embora existam estudos envolvendo esta enfermidade, ainda pouco se sabe sobre a etiologia da mesma. O presente estudo tem por objetivo analisar o perfil metabólico e hormonal de ovelhas vazias, gestando um, dois e três fetos, alimentadas com dieta de alta densidade energética durante toda a gestação. 42 ovelhas foram divididas em três grupos experimentais, G3 (prenhes de 3 fetos), G2 (prenhes de 2 fetos), G1 (prenhes de 1 feto) e G0 (não gestantes) As avaliações iniciaram ao 60º dia pós-cobertura e a cada 14 dias até o primeiro mês pós-parto. Pretende-se encontrar, dentre as variáveis analisadas, colesterol, triglicérides, uréia, creatinina, albumina, proteínas totais, globulina, glicose, AGLs, BHB, AST, GGT, glucagon, insulina, cortisol, T3 e T4 e pesquisa de corpos cetônicos qual a indicadora mais precoce de distúrbio metabólico durante a gestação.Foi encontrada diminuição das concentrações de glicose, de uréia, creatinina, proteína total, globulina e albumina nos momentos referentes ao terço médio de gestação (M2 e M3) e aumento das concentrações de AGLs, T3 e T4 séricos no terço final de gestação (M6) nos grupos de ovelhas gestantes G3, G2 e G1 feto em relação ao grupo de ovelhas não gestantes. As ovelhas que apresentaram comprometimento com sua prole ao final da gestação e que apresentaram sinais clássicos da TP apresentaram aumento dos índices protéicos no M3, aumento dos teores de AGLs, BHB, creatinina e T4 no M6. AGLs e BHB mostraram-se melhores e mais precoces indicadores que a glicose, no que se refere a alteração do metabolismo energético de ovelhas prenhes no terço final de gestação. As variáveis protéicas mostraram-se indicadores importantes no perfil comparativo entre ovelhas gestantes e não gestantes e quanto a alteração do metabolismo que se instala em fêmeas que apresentaram comprometimento. Nestas, foi constatado diminuição do metabolismo refletidas pelas baixas concentrações dos hormônios T3 e T4. As demais variáveis hormonais não apresentaram diferenças notáveis no estudo comparativo entre os perfis. O presente estudo permitiu a comparação do perfil metabólico e perfil hormonal entre ovelhas prenhes de um, dois, três fetos e ovelhas vazias. Permitiu a identificação de algumas alterações destes perfis entre ovelhas que não apresentaram comprometimento com as que apresentaram comprometimento ao final da gestação, no entanto, numero maior de animais comprometidos são necessários na pesquisa das variáveis preditoras do distúrbio metabólico e nutricional relacionado à TP. / Pregnancy Toxemia (PT) is a metabolic disease that commonly affects pregnant ewes and does during late gestation. The intensive management conditions provided to ewes herds in the last decades, cause impairment on the occurrence of this disease. The mainly cause that starts the metabolic disturbance involved in PT is not already established. The aim of this study is to evaluate the metabolic and hormonal profile of pregnant ewes with one, two, three and non gestating ewes fed a high density energetic diet during the period of gestation. 42 Santa Ines sheep breeding were divided in four experimental groups, G3 (pregnant of 3 lambs); G2 (pregnant of 2 lambs); G1 (pregnant of 1 lamb); G0 (non gestating). The study started on 60º day of pregnancy and repeated after fourteen days until the first month after parity. We collected and analyzed blood serum and plasma samples and urine samples. We determined the concentrations of cholesterol, triglycerides, urea, creatinin, albumin, globulin, total protein, glucose, nonsterified fatty acids (NEFA), &beta; hidroxibutyrate (BHB), AST, GGT, glucagon, insulin, cortisol, T3, T4 and BHB urines. The aim is to find, which one of these will be the earliest marked sign to predict the occurrence of PT. According to the results of this experiment, we conclude that plasma NEFA and plasma BHB, showed be the mainly energetic indicators related to energetic status in late gestating ewes and non gestating ones. The protein variables showed be very useful in prediction protein status of breed and prediction any metabolism change in affected ewes. The hormonal analyses didnt show much usefulness in the prediction of metabolic or hormonal change between the four groups or in relation of affected gestating ewes.The present study allowed the comparison of metabolic and hormonal profile of pregnant ewes of three, two, one and non gestating ewes. Allowed the identification of some changes of these profiles between them and related to affected ones, however a bigger number of animals should be necessarily in the search on predicted variables in the disturbance related to PT.

Resumo:Influências ambientais, como a nutrição, durante a fase inicial da gestação de fêmeas bovinas podem ter impacto no desenvolvimento fetal e consequentemente na vida adulta. O desenvolvimento dos ovários dos fetos é estabelecido durante o início da gestação. Testamos a hipótese de que a restrição e/ou excesso de nutrientes ingeridos por vacas durante os primeiros 60 dias da gestação interfere no desenvolvimento corporal e transcriptoma ovariano dos fetos. Vinte e uma vacas Nelore uníparas foram submetidas a inseminação artificial com sêmen sexado (fêmea) de um único touro e alocadas individualmente em diferentes dietas. A dieta do grupo controle atendeu as exigências de mantença para a categoria animal (100%), e a dos grupos de alta e baixa ingestão a 180% e 60% dos requerimentos de mantença, respectivamente. Amostras de sangue venoso foram colhidas para quantificação de progesterona, LH, insulina e leptina. Aos 60 dias de gestação oito fetos foram removidos por colpotomia (acesso via vaginal), pesados, os ovários dissecados e pesados. Os ovários (um de cada par) foram submetidos ao RNA-Seq. Observou-se que o status nutricional materno durante os primeiros 60 dias de gestação influenciou: o perfil hormonal de progesterona, insulina e leptina, que foi menor nos animais do grupo de baixa ingestão; a relação peso ovariano/peso corporal dos fetos do grupo de alta ingestão que foi maior comparada aos demais; o padrão de expressão gênica nos ovários entre os fetos dos grupos controle, alta e baixa ingestão. Concluímos que mudanças na nutrição materna durante os primeiros 60 dias de gestação podem alterar o desenvolvimento fetal e o perfil transcriptômico dos ovários fetais / Abstract:Environmental influences such as nutritional restriction during early gestation may impair fetal development and compromise functions in adulthood. Ovarian development occurs during early gestation. We hypothesized that restriction or excess of nutrients ingested by cows during the first 60 days of pregnancy affects fetal body weight and ovarian development. Fifty uniparous Nelore cows were subjected to Timed Artificial Insemination with sexed semen (female) of a single bull and individually allocated on different diets. The diet used for the control group met the maintenance requirements and the groups with high and low either 180% or 60% of maintenance, respectively. Venous blood samples were collected for plasma progesterone, LH, insulin and leptin quantification. At 60 days of gestation, eight fetuses were removed by colpotomy (accessed through the vagina), weighed, ovaries were dissected and weighed. One fetal ovary (of each pair) was used for transcriptional analysis by RNA-seq. It was observed that maternal nutritional status during the first 60 days of gestation: 1) progesterone, insulin and leptin levels which were lower in the group with low; 2) the relative ovarian weight / body weight of fetuses in the high intake group was higher compared to the others groups; 3) ovarian gene expression patterns differedbetween control, high and low groups. Thus, we conclude that changing maternal nutrition during the first 60 days of gestation affects the development and transcriptomic profile of fetal ovaries / Orientador:Guilherme De Paula Nogueira / Banca:Daniel de Jesus Cardoso de Oliveira / Banca:Flávia Lombardi Lopes / Banca:Alexandre Mendonça Pedroso / Banca:Juliana Regina Peiró / Doutor