Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Introdução: Quelóides e cicatrizes hipertróficas são distúrbios cicatriciais caracterizados pelo aumento na deposição de colágeno. As modalidades terapêuticas existentes são inespecíficas em razão do pouco conhecimento da patogênese da doença. A avaliação da qualidade de vida é necessária porque esses pacientes apresentam repercussões físicas, psicológicas e sociais. No Brasil, não há estudos sobre a qualidade de vida dos pacientes portadores de quelóide e cicatriz hipertrófica. Objetivo: Traduzir para o idioma português, adaptar culturalmente e verificar a confiabilidade do Questionnaire of Quality of Life for Patients with Keloid and Hypertrophic Scarring. Métodos: Foram realizadas 2 traduções iniciais e 2 retrotraduções, intercaladas por revisões do grupo multidisciplinar. Na fase de adaptação cultural, o questionário foi aplicado a 30 pacientes. Durante essa fase, as questões que apresentaram mais de 20% de não compreensão foram modificadas e novamente aplicadas a outros 15 pacientes. Para a avaliação da confiabilidade, outros 58 pacientes foram selecionados em 2 dias distintos. Resultados: Durante as etapas de tradução e adaptação cultural 6 itens foram modificados. Na fase de confiabilidade, o instrumento apresentou coeficiente de correlação intraclasse (CCI) de 0,783 e 0,917 para os domínios físico e psicológico, respectivamente. A consistência interna para os domínios físico e psicológico, respectivamente, na primeira avaliação foi de 0,767 e 0,866, e 0,845 e 0,850 na segunda avaliação. Conclusões: O Questionnaire of Quality of Life for Patients with Keloid and Hypertrophic Scarring foi traduzido para o português e adaptado à cultura brasileira com sucesso. O instrumento mostrou ser confiável. / Introduction: Keloids and Hypertrophic Scars are scarring disorders characterized by increase in collagen deposition. The present therapeutic modalities are unspecific because of the little knowledge on pathogenesis of the illness. The quality of life evaluation is necessary because these patients present physical, psychological and social repercussions. In Brazil, there are not studies on the quality of life of patients with keloids and hypertrophic scars. Objective: To translate into Brazilian Portuguese, to cross-culturally adapt and to verify the reliability of the Questionnaire of Quality of Life for Patients with Keloid and Hypertrophic Scarring. Methods: Initially, the questionnaire was translated into Portuguese and then back-translated into English. These translations were then discussed by health care workers in order to establish the final Brazilian version. To determine the cultural equivalence, 30 patients were interviewd. Any incomprehensible questions were modified an applied again to a new group of 15 patients. In the second stage, the reliability was assessed. For this, a new group of 58 patients was interviewed. Results: During the stages of translation and cross-cultural adaptation, 6 items were modified. In the reliability stage, the instrument presented intraclass coeficient correlation (ICC) of 0.783 and 0.917 for the physical and psychological domains, respectively. The internal consistency for the physical and psychological domains, respectively, in the first evaluation was of 0.767 and 0.866, and 0.845 and 0.850 in the second evaluation. Conclusions: The Questionnaire of Quality of Life for Patients with Keloid and Hypertrophic Scarring was successfully translated into Portuguese and adapted to the Brazilian culture. The instrument turned up to be reliable. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:06:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / Introdução: A patogênese do quelóide é desconhecida. Apesar da inervação cutânea participar da cicatrização, existe uma lacuna na literatura relativa ao sistema nervoso cutâneo no quelóide. Objetivo: Quantificar fibras nervosas e melanócitos no quelóide, bem como avaliar a atividade melanogênica. Métodos: Compararam-se amostras de quelóide e de pele adjacente da região torácica de 27 pacientes não-brancas. As fibras nervosas e os melanócitos foram corados por imuno-histoquímica, pela reação à proteína S-100. A quantificação das fibras nervosas dérmicas, e das células melanocíticas epiteliais, foi realizada por contagem direta em cada tecido. A profundidade da fibra nervosa mais superficial, em relação à camada granulosa, foi mensurada por régua histológica. Os dados obtidos também foram analisados em função do tempo de evolução das lesões. A atividade melanogênica foi quantificada mediante reação imunohistoquímica, por anticorpo anti-tirosinase. Resultados: As amostras de quelóide apresentaram quantidade maior de fibras nervosas (p < 0,001), em comparação com o tecido cutâneo adjacente à lesão. A fibra nervosa mais superficial no quelóide estava a uma profundidade maior que na pele (p < 0,001). A quantidade de melanócitos nas amostras de quelóide foi menor em relação às de pele (p < 0,001), da mesma forma quanto à tirosinase (p < 0,001). Com o tempo evolutivo das lesões, não houve associação estatística dos resultados das fibras nervosas e melanócitos. Conclusão: O quelóide apresenta maior quantidade de fibras nervosas dérmicas e numa profundidade maior em relação à pele. A quantidade de melanócitos e de tirosinase é menor no quelóide que na pele. / Background: Keloid pathogenesis is still unknown. In spite of the cutaneous innervation taking part of scarring, there is a gap in the literature on cutaneous nervous system in keloid. Purpose: To quantify both nerve fibers and melanocytes in keloid, as well as to evaluate the melanogenic activity. Methods: Both keloid and adjacent skin specimens from the chest region of 27 non-white subjects were compared. Nerve fibers and melanocytes underwent immunohistochemical dyeing by S-100 protein reaction. The quantification of dermal nerve fibers and epithelial melanocytic cells was carried out by direct counting of each tissue. Depth of the most superficial nervous fiber, when compared to the granular layer was measured through a histological meter. Data obtained were also analyzed as a function of the lesions development time. Melanogenic activity was quantified through immunohistochemical reaction by anti-tyrosinase antibody. Results: Keloid specimens showed a higher quantity of nerve fibers (p<0.001) when compared to lesion-adjacent cutaneous tissues. Keloid most superficial nervous fiber was deeper than the ones of the skin (p<0.001). The amount of melanocytes in the keloid specimens was lower than the amount in the skin (p<0.001), as well as tyrosinase (p<0.001). Statistically significant association with lesions development time of nerve fibers and melanocytes results was not found. Conclusion: Keloid presents a higher quantity of dermal nerve fibers which are most deeply located than they occur in the skin. Melanocytes and tyrosinase amounts are lower in keloid than in the skin. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Orientador: Konradin Metze / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:44:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferro_DanielaPeixoto_D.pdf: 2964245 bytes, checksum: 202d309cf65f632d47c7811d4958535d (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A aplicação integrada de técnicas modernas, como a Geração do Segundo Harmônico (SHG) e os tempos de vida da fluorescência (FLIM), com análise de imagens matemáticas nos permitem visualizar detalhes não vistos por microscopia de luz convencional. O objetivo deste estudo foi investigar se isto também pode ser aplicado para a investigação de tecido cicatricial. Foram estudados 28 casos de preparações histológicas de rotina, de quelóides, cicatrizes hipertróficas e normais. A Fluorescência de dois fótons e SHG foram obtidas por um microscópio multifóton (LSM 780 NLO-Zeiss), em objetiva de 40X e excitados por um laser Mai Tai de Ti: Safira (comprimento de onda de 940 nm). Foram adquiridas imagens em 3D e foram criadas imagens justapostas a fim de comparar diferentes cicatrizes ou várias regiões no interior da mesma cicatriz com análise de imagens informatizadas. Variáveis de Textura derivadas a partir da matriz de coocorrência das imagens de fluorescência mostraram diferenças significativas entre as cicatrizes normais, cicatrizes hipertróficas e quelóides. Para a análise do FLIM, foi utilizado um sistema composto por um microscópio confocal (LSM780-NLO- Zeiss), com objetiva de 40x e um sistema FLIM acoplado. As amostras foram excitadas por um laser de diodo a 405nm. Estudamos secções não coradas de 32 casos processados rotineiramente de tecido cicatricial incluídos em parafina. As áreas das regiões centrais e periféricas foram selecionadas aleatoriamente e comparadas. Os tempos de vida de fluorescência das hemácias serviram como padrão interno. Os tempos de vida do colágeno em áreas centrais em todos os tipos de cicatrizes foram significativamente mais longo do que em áreas periféricas. Houve correlação positiva entre os tempos de vida de fluorescência das hemácias e as fibras de colágeno entre os casos. Em resumo, o SHG e a técnica Flim revelam em cicatrizes rotineiramente processadas, características morfológicas dos tecidos, que não podem ser detectadas por microscopia de luz convencional / Abstract: The integrated application of modern techniques such as Second Harmonic Generation (SHG) and fluorescence lifetime imaging (FLIM) with mathematical image analysis enable us to visualize details not seen by conventional light microscopy. The aim of this study was to investigate whether this could also be true for the investigation of scar tissue. 28 routine histological preparations of keloids, hypertrophic and normal scars were studied. Two-photon fluorescence and SHG was obtained by a multiphoton microscope (LSM 780 NLO-Zeiss (at 40X objective magnification) and a Mai Tai Ti: Sapphire laser with excitation at 940 nm wavelength. 3D reconstructed patchwork images were created in order to compare different scars or various regions inside the same scar with computerized image analysis. Texture variables derived from the co- occurrence matrix of the fluorescence images showed significant differences between normal scars, hypertrophic scars and keloids. For FLIM analysis we used a system composed of a confocal microscope Zeiss LSM780 Upright-NLO with the 40x objective and a FLIM detection system. The samples were excited by a laser diode at 405nm. We studied unstained sections of 32 routinely processed and paraffin-embedded cases of scar tissue. Randomly selected areas of the central and peripheral regions were compared. The fluorescence lifetimes of red blood cells served as internal standard. Lifetimes of collagen in central areas of all scar types were significantly longer than in the periphery. There was a significant positive correlation between the fluorescence lifetimes of red blood cells and collagen fibers among the cases. In summary, SHG and FLIM techniques reveal in routinely processed scar tissue morphological characteristics, which cannot be detected by conventional light microscopy / Doutorado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Doutora em Fisiopatologia Médica

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: Sabendo-se que o estímulo neurogênico de origem nociceptiva é considerado o deflagrador primário do processo de cicatrização da pele, que o CGRP e SP aumentam a proliferação de fibroblastos in vitro, e diante da falta de estudos correlacionando CGRP, SP e p53 e apoptose em queloide torna-se importante investigar se os neuropeptídeos da pele podem influenciar a expressão de p53 e a apoptose no queloide. Uma possível associação entre neuropeptídeos e o gene p53 poderia representar um novo caminho para um melhor entendimento fisiopatogênico das cicatrizes patológicas fibroproliferativas e, por conseguinte, o advento de tratamentos mais específicos. Objetivo: Investigar a expressão do gene p53 e o índice apoptótico em culturas de fibroblastos de queloide, submetidos à ação dos neuropeptídeos CGRP e SP. Métodos: Foram cultivados fibroblastos de queloide em meio de cultura com adição de CGRP e SP, e controle. O índice apoptótico, e o ciclo celular foram determinados por citometria de fluxo e a marcação de proteínas-chave da apoptose por espectrofotometria. A atividade celular foi avaliada ao longo do tempo e em períodos determinados, por MTT. A morfologia celular foi avaliada por microscopia confocal. Resultados: Foi padronizado um modelo de explante baseado nas diferenças biológicas das regiões específicas do queloide. A atividade celular em fibroblastos de queloide variou ao longo do tempo, sendo diferente entre os subgrupos celulares mas similar dentro de um mesmo subgrupo, mas não foi afetada pela adição de CGRP, SP ou CGRP+SP. Fibroblastos de queloide das regiões periférica e central apresentaram maior expressão de p53 do que fibroblastos da pele adjacente ao queloide, de cicatriz normotrófica ou de pele normal, adjacente à cicatriz normotrófica. CGRP, SP e CGRP+SP provocaram uma diminuição na expressão de p53 em fibroblastos de queloide das regiões periférica e central em relação aos outros subgrupos estudados. Conclusão: CGRP, SP e CGRP+SP provocaram uma diminuição na expressão de p53 em fibroblastos de queloide. / Introduction: Given that nociceptive neurogenic stimulation is considered the primary trigger of the healing process in the skin, that CGRP and SP increase fibroblast proliferation in vitro, and given the lack of studies correlating CGRP, SP p53 and apoptosis in keloid, it becomes important to investigate whether skin neuropeptides can influence the expression of p53 and apoptosis in keloid. A possible association between neuropeptides and p53 gene could represent a new path to a better physiopathogenic understanding of pathological fibroproliferative scars and, therefore, the advent of more specific treatments. Objective: To investigate the expression of p53 gene and the apoptotic index in keloid fibroblast cultures exposed to the action of the neuropeptides CGRP and SP. Methods: Keloid fibroblasts were grown in culture medium with or without the addition of CGRP and SP. The apoptotic index and cell cycle were determined by flow cytometry and the labeling of apoptosis key proteins was done by spectrophotometry. Cell activity was evaluated over time by MTT. Cell morphology was analyzed by confocal microscopy. Results: An explant model for keloid fibroblast isolation and culture based on the biological differences of its specific regions was standardized. Cellular activity in keloid fibroblasts varied over time and was different among the fibroblasts subgroups but similar within the same subgroup, however was not affected by the addition of CGRP, SP or SP + CGRP. Keloid fibroblasts derived from peripheral and central regions had higher p53 expression than fibroblasts derived from the skin adjacent to the keloid scar, fibroblasts derived from normotrophic scar or from normal skin adjacent to the normotrophic scar. CGRP, SP and SP + CGRP caused a decrease in p53 expression in keloid fibroblasts of peripheral and central regions compared to all other subgroups studied. Conclusion: CGRP, SP and SP + CGRP caused a decrease in p53 expression in keloid fibroblasts. / BV UNIFESP: Teses e dissertações